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M13F
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PDONR-F
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PDONR-F
PDONR-R
T7,CMV-Profor
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pcDNA4/TO
TREfor/CMV-Profor
BGH rev
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CMV-Profor,T7
BGH rev,V5rev
pcDNA4-TET/ON/AMP+
CMV-Profor
pcDNA5/FRT
T7/CMV-Profor
T7-Terminator
pET-20b(+)
T7
T7-Terminator
pET-21(-a,-b,-c,-d)(+)
T7
T7-Terminator
pET-22b(+)
T7
T7-Terminator
pET-23(-a,-b,-c,-d)(+)
T7
T7-Terminator
pET-24(-a,-b,-c,-d)(+)
pBR322(BamHI-site)
PBRforBam
PBRrevBam
pBR322(EcoRI/HindIII-sites)
pBRforEco
pBRrevHind
pBR325(BamHI-site)

大肠癌肿瘤组织中干细胞关键转录因子Oct4的表达及意义

大肠癌肿瘤组织中干细胞关键转录因子Oct4的表达及意义卢浩;叶建新;赵桂斌【期刊名称】《黑龙江医学》【年(卷),期】2009(033)001【摘要】目的探讨大肠癌中干细胞关键转录因子Oct4的表达情况及意义, 并探讨Oct4的表达同大肠细胞癌分型和分期的关系.方法分别采用免疫组织化学对27例和逆转录一聚合酶链反应(RT-PCR)下对10例大肠癌组织病理标本进行Oct4表达的检测.结果绝大多数(25/27)的大肠癌细胞癌标本中有4.5%～5.5%的Oct4阳性细胞, RT-PCR显示9例大肠癌组织在相应位置均出现目的基因Oct4的条带, 正常大肠组织和癌旁组织并没有出现条带.Oct4表达的阳性率及强度与大肠癌分期和分型无明显相关.结论大肠癌组织中有少量表达全能干细胞标志物的细胞, 是否为大肠癌干细胞有待进一步研究.【总页数】3页(P13-15)【作者】卢浩;叶建新;赵桂斌【作者单位】福建医科大学附属第一医院,福建,福州,350000;福建医科大学附属第一医院,福建,福州,350000;福建福安市闽东二医院,福建,福安,355000【正文语种】中文【中图分类】R735.34【相关文献】1.干细胞转录因子Oct4和CD133蛋白在肝外胆管癌组织中的表达及临床意义 [J], 谷化平;黄勇;尚培中2.干细胞转录因子SOX2、OCT4在不同分化程度胃癌组织中的表达及其临床意义[J], 徐毅;丁伟基;李文鹏;陈跃达;魏斌;谢永进;罗琪;黄正接3.干细胞转录因子OCT4在结直肠癌组织中的表达及其意义 [J], 程玉;赵醒;次云哲;严鹏;纪海茹4.干细胞转录因子Sox2和Oct4在肺癌患者中的表达及临床意义 [J], 项保利;李琳琳;曹亮;陈丽萍5.胰腺癌组织中干细胞转录因子Sox2及Oct4的表达及意义 [J], 韩呈武; 杨强; 宋秦伟因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

Odyssey CLX 操作指南1

软件安装 ..................................................................................................................................... 4 Windows 7，XP ，vista 系统........................................................................................... 4
导入图片 ........................................................................................................................... 18 泳道设置 ........................................................................................................................... 19 设定 Marker....................................................................................................................... 20 创建新 marker ................................................................................................................... 20 自动识别条带 ................................................................................................................... 21 手动编辑条带 ................................................................................................................... 21 单通道信号归一化 ..............................................................................................................21 查看表格 ........................................................................................................................... 22

ExProfileTM Gene qPCR Array 配套试剂使用说明书

ExProfile TM Gene qPCR Array 配套试剂使用说明书——高通量基因表达量分析阵列配套试剂说明书适用于以下产品All-in-One TM First-Strand cDNA Synthesis Kit for gene qPCR arrayCat.No. AORT-2020 (20 reverse transcription reations)Cat.No. AORT-2060 (60 reverse transcription reations)All-in-One TM qPCR MixCat.No. AOPR-0200 (20 μl × 200 reactions)Cat.No. AOPR-0600 (20 μl × 600 reactions)Cat.No. AOPR-1200 (20 μl × 1200 reactions)Cat.No. AOPR-1000 (20 μl × 1000 reactions)Cat.No. AOPR-4000 (20 μl × 4000 reactions)GeneCopoeia, Inc. 广州易锦生物技术有限公司广州高新技术产业开发区广州科学城掬泉路3 号广州国际企业孵化器F区8 楼邮编：510663电话：4006-020-200邮箱：******************网址：© 2016 GeneCopoeia, Inc.使用说明书ExProfile TM Gene qPCR Array 配套试剂I. 产品介绍II. 试剂盒组成III. 实验前准备IV. 实验步骤V. 数据分析VI. 使用许可与质量保证I. 产品介绍ExProfile TM Gene qPCR Array专为检测不同组织或细胞中特定基因的表达量而设计，这些基因按照预制或定制要求成套设置。

检测结果所显示的差异表达可帮助研究者鉴定或验证这些基因的生物学意义，以及与其研究的重要相关性。

高通量实时荧光定量PCR方法筛选FL细胞对低剂量微囊藻毒素LR暴露的应答基因

高通量实时荧光定量PCR方法筛选FL细胞对低剂量微囊藻毒素LR暴露的应答基因王秀敏1，徐立红1，余应年21.浙江大学医学院生物化学与分子生物学教研室(310031)2. 浙江大学医学院病理生理学教研室(310031）email: xulihong@摘要：应用高通量实时荧光定量PCR技术检测低浓度微囊藻毒素LR暴露后FL细胞基因mRNA 表达的变化，筛选特异的应答基因。

用0.2μmol/L的微囊藻毒素LR处理FL细胞2小时，再恢复培养4小时。

提取总RNA，逆转录成cDNA，运用高通量实时荧光定量PCR检测目的基因的表达变化。

共检测到表达上调的基因16个（P<0.05，且上调幅度>1.5倍），这些基因编码产物包括周期调节蛋白，蛋白激酶，信号受体等。

这些基因可能是微囊藻毒素LR暴露后细胞的应答基因，研究结果为进一步探讨微囊藻毒素毒性机制提供新的方向，也为检测早期藻毒素暴露提供实验依据。

关键词：微囊藻毒素LR；应答基因；高通量；实时荧光定量PCR1．引言微囊藻毒素是蓝藻的一些属产生的单环七肽，在发生水华的水体中普遍存在[1]。

含有微囊藻毒素的水华能引起野生动物、鱼类、家畜、家禽等中毒和死亡，也对人类健康构成严重威胁[2，3]。

流行病学调查发现，人群原发性肝癌、大肠癌发病率与饮水源中的微囊藻毒素有关[4]。

其中微囊藻毒素LR是微囊藻毒素中最常见的一种，因其高急性毒性，强促癌活性而受到广泛的关注。

有研究结果表明微囊藻毒素LR可引起多种细胞发生凋亡[5]，本实验室先前的研究也发现微囊藻毒素LR能激活在凋亡过程中起重要作用的酶caspase－3[6],及引起P53、Bax、Bcl-2等凋亡相关蛋白表达变化[7,8]，但其详细的致毒机制仍知之甚少。

从预防和早期检测角度出发，毒素的低剂量效应引起人们越来越广泛的关注，低浓度微囊藻毒素LR 暴露后细胞特异的应答基因方面的文献国内外报道很少。

近年来，随着高通量基因芯片技术的发展和广泛运用，使得高通量的目的基因筛选成为可能。

雅思考试须知44850

现场照相及考生照片要求考生须在考试当日参加现场照相，考试当天拍摄的数码照片将用于考生身份确认，连同考生的姓名及个人信息打印在考试成绩单上寄送给考生本人，并按照考生要求提供给考生申请的成绩认可机构。

考生在笔试入场时须交给监考人员一张六个月内本人护照标准尺寸、白色背景的彩色免冠照片，并在照片背面注明姓名及考号（相片中人需露出双耳且不得佩戴眼镜）。

此照片将用于存档。

考试证件要求检查考试安排排（包括考试类型、考号、口试时间、考试中心地址、口笔试楼和教室号等等）。

考试当日在考试开始之前, 考生应再次确认桌卡上的个人信息和考试安排。

考试入场开始时间笔试：请考生于考试当天08:00到达考点报到候考口试：请考生于口试时间前30分钟到达考点报到候考考试成绩单正常完成考试及现场照相的考生成绩单将于笔试后第十个工作日通过EMS（仅限于中国大陆地区服务）寄往考生报名时提供的成绩单寄送地址，每位考生只能收到一份成绩单原件。

考生可以申请英国文化协会（在中国作为英国大使馆/总领事馆文化教育处开展工作）考试部将自己的额外考试成绩单寄送到国内外院校、政府部门、使领馆及其他成绩认可专业机构。

转考和退考在报名截止日期之前考生可登陆报名网站办理转考或退考手续。

在报名截止日期之后不再受理转考申请。

考生如有特殊情况要申请退考，需按照要求在规定的时限内提供充分的证明材料并申请英国文化协会 (在中国作为英国使/领馆文化教育处开展工作)考试部批准。

强烈建议考生不要携带除身份证件、照片和准考证之外的其它个人物品，尤其是贵重物品前往考点不得带进考试教室的物品包括并不限于：•自带文具•电子设备•通讯设备•笔记、参考资料•食物、香烟•监考人员认定的其它违规物品。

考试入场截止时间笔试：考生必须至少提前于笔试开始时间前30分钟进入笔试楼，进行个人物品置放、身份证查验、检录入场、考场规则讲解、听力设备试音、填写答题纸个人信息等等一系列重要考前准备工作。

晚于08：30到达笔试教室的考生将被取消参加笔试的资格，并不得转考、退考或退费。

variantfiltration参数介绍

variantfiltration参数介绍（实用版）目录1.变异过滤概述2.变异过滤参数介绍2.1 变异过滤的输入参数2.2 变异过滤的输出参数2.3 变异过滤的参数设置方法3.变异过滤的应用实例正文一、变异过滤概述变异过滤（Variant Filtration）是一种在生物信息学领域中用于识别和过滤变异的方法，其目的是从大量的变异中筛选出对研究具有重要意义的变异。

在基因组学、转录组学和蛋白质组学等领域中，变异过滤技术都有着广泛的应用。

二、变异过滤参数介绍1.变异过滤的输入参数变异过滤的输入参数主要包括以下几个方面：（1）参考基因组：参考基因组是进行变异过滤的基础，通常使用已知物种的基因组序列作为参考。

（2）变异数据：变异数据通常包括 SNP（单核苷酸多态性）、Indel （插入/删除）等类型的变异。

这些变异数据可以从多个来源获取，例如基因组测序数据、基因型数据等。

（3）过滤条件：过滤条件是用于筛选变异的标准，例如变异的频率、效应等。

2.变异过滤的输出参数变异过滤的输出参数主要包括以下几个方面：（1）过滤后的变异列表：过滤后的变异列表包含了通过过滤条件的变异，可以作为后续分析的基础。

（2）变异注释：变异注释包括了变异的类型、位置、效应等信息，可以帮助研究者更好地理解变异的性质。

3.变异过滤的参数设置方法变异过滤的参数设置方法因不同的分析目的和数据特点而异。

通常，研究者需要根据具体的研究问题，结合参考基因组、变异数据和过滤条件等因素，选择合适的参数设置方法。

三、变异过滤的应用实例变异过滤在生物信息学领域中有着广泛的应用，例如在基因组学研究中，可以通过变异过滤技术筛选出具有重要生物学意义的变异；在肿瘤研究中，可以通过变异过滤技术挖掘肿瘤驱动基因等。

Easy TestrM测试片：准确性更高、适用性更广

Easy TestrM测试片：准确性更高、适用性更广作者：暂无来源：《食品安全导刊》 2010年第6期王芳王凯樊赟中国检验检疫科学研究院综合检测中心刘沛王磊北京陆桥技术有限责任公司近年来，我国食品安全事故频发，痛定思痛，人们已经越来越重视饮食安全。

而由微生物引起的食品污染问题作为食品安全的重要内容也受到了广泛关注。

在食品生产过程中，从生产加工到运输销售，各个环节都有可能被微生物污染，因此对食品进行微生物检测必不可少。

另外，随着经济的飞速发展，社会商品的流通量和流通速度大大增加，食品将面临很大的微生物污染风险，但传统微生物检测方法不仅操作繁琐，检测周期长，而且对检测人员要求高，很难满足现代商品快速流通的发展要求，甚至影响到整个食品行业的发展。

因此，人们开始寻找一种快速、简单、准确的微生物检测方法，北京陆桥技术有限责任公司推出了一种可满足该要求的Easy TestTM测试片（简称ET测试片）。

Easy TestTM测试片利用特异性酶与特异性显色底物反应的原理，使目标菌与非目标菌呈现可明显区别的不同特异性颜色；EasyTestTM测试片的培养载体采用了无纺布和水溶性营养底物的设计，具有良好的吸水性，可快速吸收测试液，使微生物自动均匀分布于无纺布上，为测试液和营养底物创造了一个固定的混合区域；Easy TestTM测试片为一次性即用产品，操作简便、无需耗费大量人力配制培养基和高压灭菌、后续废弃物的处理工作简单、环保，最重要的是可以有效缩短检测时间、提高检测效率，非常适用于食品微生物检测和环境卫生监测。

为验证Easy TestTM测试片的准确性和适用性，本文将Easy TestTM测试片与3M PetrifilmTM测试片（简称3M测试片）及国家标准中的传统培养法进行样品比对试验。

检测项目包括菌落总数、大肠杆菌计数和大肠菌群计数，具体试验过程与试验结果如下。

试验方法选取100份食品样品，包括肉制品、乳制品、蔬菜、豆制品、水果、油炸食品、面点、饮料、水产品、速冻食品和调味品，以国家标准方法《食品安全国家标准食品微生物学检验》（GB 4789-2010）为检测依据，采用Easy TestTM测试片、3MPetrifilmTM测试片和国标的传统培养基法分别测定各个样品的菌落总数、大肠杆菌数和大肠菌群数，再将Easy TestTM测试片的结果分别与3M PetrifilmTM测试片和国家标准中的传统培养法得到的结果进行比较，然后根据相关性判断EasyTestTM测试片的准确度和适用性。

非编码小rna trf相关的国自然标书 -回复

非编码小rna trf相关的国自然标书-回复什么是非编码小RNA（non-coding small RNA）？非编码小RNA是指一类长度在20到30个碱基对之间的RNA分子，它们在细胞内发挥着各种重要的生物调控功能。

与编码蛋白质的RNA分子不同，非编码小RNA不会被翻译成蛋白质，而是直接通过特定的机制调控细胞的基因表达和功能。

TRF是什么意思？TRF代表Tandem Repeats Finder，是一种用于鉴定和分析DNA序列中串联重复序列（tandem repeats）的计算工具。

串联重复序列在基因组中广泛存在，对于基因表达、染色体稳定性和进化过程等都具有重要影响。

TRF可以通过分析DNA序列中的反复单位，帮助研究者找到基因组中的重复部分，以及这些重复部分对基因表达和生物进化的影响。

非编码小RNA和TRF的相关性是什么？近年来的研究表明，非编码小RNA与基因组中的重复序列存在密切的关联。

一些非编码小RNA能够与DNA的串联重复序列相互作用，从而调控基因表达和基因组稳定性。

非编码小RNA通过与TRF分析出的重复序列结合，可以帮助研究者更好地理解基因组中的重复序列在生物调控中的功能。

具体来说，非编码小RNA可以通过两种方式与TRF分析出的重复序列相互作用。

首先，一些非编码小RNA能够结合在重复序列的特定位置，通过启动或抑制该序列的转录过程，从而调控基因的表达。

这些非编码小RNA可以作为一种调节剂，帮助细胞在不同条件下合理地利用重复序列，并避免异常的基因转录。

其次，另一些非编码小RNA则能够通过与TRF检测到的重复序列结合，形成一种保护性的结构，从而维持染色体的稳定性。

重复序列在染色体中容易引发DNA的重组和突变，导致基因的异常表达。

非编码小RNA可以通过与TRF分析出的重复序列结合，并防止它们发生不正常的重组和突变，从而保护染色体的稳定性。

因此，非编码小RNA与TRF分析出的重复序列之间的相互作用，为我们深入理解基因组中重复序列的功能提供了新的研究思路。

tRFs在肿瘤中的研究进展

tRFs在肿瘤中的研究进展
白兆兆;王军宏;白鹏伟;许焱;牛幸栋;达明绪
【期刊名称】《临床医学进展》
【年(卷),期】2024(14)2
【摘要】转运RNA (transfer RNA, tRNA)衍生的RNA片段(transfer RNA-derived fragments, tRFs)是一种新型的小非编码RNA (non-coding RNA, ncRNA)。

tRFs广泛表达于生物体的各种细胞内。

研究发现tRFs可以通过调控翻译、基因表达和细胞周期对肿瘤的发生发展产生非常重要的作用,其在功能上与微小RNA (microRNA, miRNA)具有相似之处,但其具体机制尚不完全清楚,还需进一步探究。

本文对tRFs的分类、生物学功能、其异常表达对不同肿瘤的影响以及在肿瘤新型诊断生物标记物和潜在治疗靶点的研究进行了综述,以期为未来的研究提供一个可能的研究思路和方向。

【总页数】8页(P4213-4220)
【作者】白兆兆;王军宏;白鹏伟;许焱;牛幸栋;达明绪
【作者单位】宁夏医科大学第一临床医学院银川;兰州大学第一临床医学院兰州;甘肃中医药大学第一临床医学院兰州;甘肃省人民医院肿瘤外科兰州
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.端粒保护蛋白TRF2在肿瘤发生和治疗中作用机制的研究进展
2.TRF及其在肿瘤中作用的研究进展
3.《中国肿瘤临床》文章推荐:COX-2_PGE2在肿瘤发生发展和重塑肿瘤微环境中的研究进展
4.tRF与tiRNA在癌症中的研究进展
5.循环肿瘤细胞和循环肿瘤DNA在预测肿瘤免疫治疗效果中的应用及研究进展
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雷公藤红素对内皮细胞E-selectin和ICAM-1及CD31表达的实验研究

雷公藤红素对内皮细胞E-selectin和ICAM-1及CD31表达的实验研究孙成法;周幽心;褚容涛;黄炜【期刊名称】《中国校医》【年(卷),期】2008(22)2【摘要】目的通过研究雷公藤红素对细胞因子表达的影响探讨其体外抑制血管生成的机制。

方法应用RT-PCR检测一定浓度雷公藤红素作用下的内皮细胞株ECV304 E-selectin和ICAM-1的表达,采用流式细胞仪检测不同浓度雷公藤红素作用下内皮细胞株ECV304表面CD31的表达。

结果RT-PCR的结果表明,经过雷公藤红素处理后,内皮细胞株ECV304 ICAM-1的表达明显地降低,而E-selectin和CD31并未见表达。

结论雷公藤红素在体外可能通过影响内皮细胞粘附分子ICAM-1等的表达,从而抑制血管生成。

【总页数】3页(P127-129)【关键词】雷公藤红素;血管生成抑制因子;内皮细胞;反转录聚合酶链反应;流式细胞术【作者】孙成法;周幽心;褚容涛;黄炜【作者单位】常熟市第二人民医院神经外科;苏州大学附属第一医院神经外科【正文语种】中文【中图分类】R730.23【相关文献】1.E-selectin和ICAM-1在肝癌细胞与血管内皮细胞黏附作用中的实验研究 [J], 李强;陈松伟;陈德;钱世鹍n;李悦;杨学伟;胡海;林航;邓武坚;肖骏琦2.胃癌细胞中E-selectin、Integrin β1、ICAM-1的表达及与人脐静脉内皮细胞间黏附力学的研究 [J], 冷中斌;邵钦树;李曙光3.雷公藤甲素对TNF-α诱导的肾系膜细胞MCP-1和ICAM-1表达干预及其机制的研究 [J], 朱彩凤;朱斌;魏升;陈洪宇4.雷公藤红素对高糖环境下大鼠视网膜血管内皮细胞VEGF和PEDF表达的影响[J], 杨杰;彭辉灿;陈倩;蒋瑶祁5.实验性脑积水蛛网膜绒毛内皮细胞CD31和vWF表达研究 [J], 张恒;王恩任;唐健;孙鸿;毛伯镛因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

PCR常见问题的常见原因

1. cDNA产量的很低可能的原因：*RNA模板质量低*对mRNA浓度估计过高*反应体系中存在反转录酶抑制剂或反转录酶量不足*同位素磷32过期*反应体积过大，不应超过50μl2. 扩增产物在电泳分析时没有条带或条带很浅*最常见的原因在于您的反应体系是PCR的反应体系而不是RT-PCR的反应体系*与反应起始时RNA的总量及纯度有关*建议在试验中加入对照RNA*第一链的反应产物在进行PCR扩增时，在总的反应体系中的含量不要超过1/10*建议用Oligo(dT)或随机引物代替基因特异性引物（GSP）用于第一链合成。

由于RNA模板存在二级结构，如环状结果，有可能导致GSP无法与模板退火；或SSⅡ反转录酶无法从此引物进行有效延伸。

*目的mRNA中含有强的转录中止位点，可以试用以下方法解决：a. 将第一链的反应温度提高至50℃。

b. 使用随机六聚体代替Oligo(dT)进行第一链反应。

3. 产生非特异性条带*用RT阴性对照检测是否被基因组DNA污染。

如果RT阴性对照的PCR结果也显示同样条带，则需要用DNase I重新处理样品。

*在PCR反应中，非特异的起始扩增将导致产生非特异性结果。

在低于引物Tm 2至5℃的温度下进行退火，降低镁离子或是目的DNA的量将减少非特异性结果的产生。

*由于mRNA剪切方式的不同，根据选择引物的不同将导致产生不同的RT-PCR结果。

4. 产生弥散（smear）条带*在PCR反应体系中第一链产物的含量过高*减少引物的用量*优化PCR反应条件/减少PCR的循环次数*在用DNase处理被DNA污染的RNA样品时，其产生的寡核苷酸片段会产生非特异性扩增，一般会显示为弥散背景。

5. 产生大分子量的弥散条带*大多数情况下是由于退火温度过低而导致的非特异性的起始及延伸产生的*对于长片段的PCR，建议将反应体系中cDNA的浓度稀释至1:10（或1:100-1:200）6. 在无反转录酶的情况下，对照RNA获得扩增结果*通常是由于对照RNA中含有痕量DNA而导致的。

用放大的直接免疫荧光法(AMDI)检出EB病毒核抗原

用放大的直接免疫荧光法(AMDI)检出EB病毒核抗原
万宗举
【期刊名称】《国际检验医学杂志》
【年(卷),期】1980(000)001
【摘要】虽然抗补体免疫荧光法(ACIF)可以鉴定传代细胞中Epstein-Barr病毒的核抗原(EB-NA),其特异性比间接免疫荧光法强,但此法用于人体组织的活检标本,常发生强烈的背景染色。

为此,必须有一个既能减少非特异性的背景染色,又可用于活检标本的免疫荧光方法。

作者在研究过程中发现,异硫氰酸荧光黄(FITC)这个半抗原与礁孔帽贝的血兰蛋白结合后免疫家兔,容易产生抗-FITC的抗体。

此抗体不仅能与FITC及FITC标记的抗体发生特异反应,而且还可
【总页数】2页(P45-46)
【作者】万宗举
【作者单位】
【正文语种】中文
【中图分类】R73
【相关文献】
1.EB病毒壳体抗原IgM及核抗原IgG与淋巴细胞比值相关性分析 [J], 钟帆
2.EB病毒早期弥散型抗原基因片段BMRF1真核表达质粒的构建 [J], 王瑞雪;戎建荣;周燕
3.EB病毒诱发淋巴瘤中EB病毒核抗原－1的表达 [J], 路素丽;何洁;唐运莲;甘润良
4.鼻咽癌血清中EB病毒核抗原—1和核抗原—2抗体的研究 [J], 黄平;郭辉玉
5.用转染EB病毒基因片段的真核细胞检测鼻咽癌病人的抗EB病毒核抗原-
1(EBNA-1)抗体 [J], 袁方;K.Takada;曾毅
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