坐骨神经-腓肠肌标本制备
坐骨神经-腓肠肌标本制备(医学相关)
坐骨神经-腓肠肌标本制备一、实验目的要求1、学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。
2、学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本及腓肠肌标本的制备方法。
3、了解电刺激的极性法则。
二、实验原理1、蛙或蟾蜍等两栖类动物的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似，而其离体组织生活条件易于掌握，在任氏液的浸润下，神经肌肉标本可较长时间保持生理活性。
因此，在生理学实验中常用蛙或蟾蜍坐骨神经腓肠肌离体标本来观察神经肌肉的兴奋性、兴奋过程以及骨骼肌收缩特点等。
2、细胞的静息膜电位为外正内负，电刺激可改变可兴奋细胞的膜电位差。
膜电位减小时，细胞去极化，细胞兴奋；膜电位增大时，细胞超极化，细胞兴奋性被抑制。
蘸有任氏液的锌铜弓接触活组织时，可产生沿锌片—活组织—铜片流向的电流对细胞产生刺激效应。
三、实验材料和仪器1、实验材料：牛蛙2、实验器材：手术剪、手术镊、手术刀、眼科剪、眼科镊、毁髓针、蛙板、固定针、滴管、培养皿、玻璃分针锌铜弓、污物缸、粗棉线、任氏液四、实验步骤1、洗净实验动物→毁髓→剥制后肢→分离坐骨神经→游离腓肠肌→游离股骨头→标本检验→电刺激极性法则的验证2、双毁髓一只手握住牛蛙，使其背部向上。
用拇指压住牛蛙背部，食指按压其头部前端，另一只手持毁髓针，由两眼之间沿中线向下触划，触及凹陷处即为枕骨大孔。
将毁髓针垂直刺入枕骨大孔。
将针尖向前刺入颅腔内搅动，此时为单毁髓；将毁髓针退回枕骨大孔，针尖转向后方，与脊椎平行刺入椎管内捣毁脊髓，完成双毁髓。
3、坐骨神经-腓肠肌标本制备（1）剥制后肢标本:轻提双毁髓蛙，自背面耻骨联合上方约1公分处横向剪断脊柱。
轻轻托起后肢，看清坐骨神经位置，沿脊柱两侧横向切口剪断体壁，去除断口以上肢体和内脏放入污物缸。
剥去后肢皮肤后放入任氏液中备用。
（2）分离两后肢：用粗剪刀纵向剪开脊柱，并剪断两后肢相连的肌肉，一只用于剥制标本，一只放入任氏液中保存。
（3）分离坐骨神经：将后肢标本脊柱端腹面向上，趾端向外侧用蛙钉将标本固定在蛙板上。
实验02 坐骨神经-腓肠肌标本的制备.
实验二 坐骨神经-腓肠肌标本的制备
[实验目的与要求]
1.学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。 2.学习并掌握蛙类坐骨神经-腓肠肌标本以及腓
肠肌的制备方法。 3.了解电刺激的极性法则。
[实验动物与器材]
蟾蜍，常用的手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、 金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针和玻璃分针） ， 解剖盘，蛙板，铜锌弓，培养皿，污物缸步骤]
1.将蟾蜍单毁髓和双毁髓 2.制备坐骨神经-腓肠肌标本 ①先制备后肢标本 ②分离两后肢 ③分离坐骨神经 ④游离腓肠肌 ⑤分离股骨头或胫腓骨头 ⑥检验标本
[实验结果]
你制备的坐骨神经-腓肠肌标本机能正常吗？如 何检验标本的机能？
[分析讨论] 如何保持坐骨神经-腓肠肌标本的正常机能？ [结论]
[实验注意事项]
1.毁随要彻底；毁髓时不要将蟾蜍对着其他同学，
防止刺破的耳后腺毒液射入其他同学眼中。 2.操作过程中不可将剥皮后的标本同皮肤、内脏等
弃物放在一起。 3.制作标本的过程中要经常用任氏液湿润标本。 4.分离神经时，不能过度牵拉或用手术器械夹持神
经。
[思考题]
剥去皮肤的后肢能用自来水冲洗么,为什么？
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
生物实验报告-坐骨神经腓肠肌标本制备
本实验旨在通过制备坐骨神经腓肠肌标本的过程，掌握基础的组织学实验技能，同时加深对神经肌肉解剖结构的理解。
材料与方法：
材料：成年大鼠标本、无水乙醇、石蜡、光学显微镜、麻醉手套、组织取样器、组织取样盒、理化试管架等。
1.准备标本
用麻醉手套将成年大鼠净化神经集中于坐骨神经下1-2厘米范围内，然后将腓肠肌标本从骨骼中取出。
2.固定标本
将取出的腓肠肌标本置于10%的无水乙醇中固定24小时；
3.去水
从10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%到80%的无水乙醇渐次去除，每步时间为1小时；
4.透明
将固定去水的腓肠肌标本分别置于50%敌敌畏-乙醇溶液、70% 敌敌畏-乙醇溶液和100% 敌敌畏透明液溶液中，每步时间为2小时，至标本彻底透明。
5.包埋
取出已透明的腓肠肌标本，置于石蜡组织取样盒中，根据实验需求，选择合适的包埋方向。
6.取薄片
将石蜡包埋的腓肠肌标本取出，用微型切片机切制厚度为5微米的切片，将切片拉直后在干净的水晶片上展开。
7.染色与制成玻片
用哈里斯血液染色将切片染色，脱色后洗净水片后，在水晶片上滴几滴覆盖剂，然后用平凡玻片将组织接口反过来盖住薄片，压紧即可。
实验成果：
经过制备和染色后，我们取得了成年大鼠坐骨神经腓肠肌的标本，通过光学显微镜的观察与检测，我们发现该标本包含完整的腓肠肌结构及肌纤维分离范围。
切片上清晰可见腓肠肌内有明显的核团和细胞质呈透明状，同时染色后肌纤维呈现出红色，血管呈现出蓝色，系统性地展示了腓肠肌肌纤维和血管位置的分布情况。
结论与意义：。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
坐骨神经-腓肠肌标本制备骨骼肌单收缩及其总和以及Powerlab实验系统的使用二、实验目的：1. 学习蛙类动物单毁髓与双毁髓方法，并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
2. 了解电刺激的极性法则和方法，学习肌肉收缩的记录方法。
3. 观察刺激强度与肌肉收缩反应的关系、骨骼肌的单收缩过程和肌肉收缩的总和以及强直收缩现象, 了解肌肉收缩过程的时相变化以及刺激频率对骨骼肌收缩形式的影响。
三、实验原理：腓肠肌由许多肌纤维组成，刺激腓肠肌时，不同的刺激强度会引起肌肉的不同反应。
当刺激强度过小时，不引起肌肉发生收缩反应，此时的刺激为阈下刺激。
而能引起肌肉发生收缩反应的最小刺激强度，为阈刺激。
当全部肌纤维同时收缩时，则出现最大的收缩反应。
这时，即使再增大刺激强度，肌肉收缩的力量也不再随之加大，该刺激强度为最适刺激强度。
肌肉组织对于一个阈上强度的刺激，发生一次迅速的收缩反应，称为单收缩。
单收缩一般要经历潜伏期、收缩期和舒张期三个过程。
当同等强度的连续阈上刺激作用于标本时，则出现多个收缩反应的叠加，叫做强直收缩。
当后一收缩发生在前一收缩的舒张期，即发生不完全强直收缩；当后一收缩发生在前一收缩的收缩期，各自的收缩则完全融合，肌肉出现持续的收缩状态，即产生完全强直收缩。
四、实验材料：青蛙五、实验步骤：1. 制备坐骨神经-腓肠肌标本：1) 洗干净实验动物2) 双毁髓，剥制后肢，分离两后肢3) 分离坐骨神经4) 游离腓肠肌5) 分离股骨头6) 标本检验7) 电刺激极性法则的验证2. 连接实验装置：将换能器的输出线接至RM6240生理记录装置的2通道，电刺激信号接至肌槽的电极上。
然后把制备好的坐骨神经-腓肠肌标本股骨固定在肌槽上。
将固定肌肉的棉线另一端接在张力换能器上，保持适度松紧，将坐骨神经搭在肌槽的电极上。
3. 设置通道放大器和刺激器：1) 打开PowerLab电源，检查USB线连接2) 打开Chart5中文版3) 设置通道数为24) 设置通道2-桥式放大器：量程5mV,低通10Hz，调零5) 设置刺激器：刺激方式选脉冲，脉冲数1，手动方式，量程10V,振幅100mV,标记通道1，频率1Hz,持续时间1mS,4. 开始测试：1) 打开刺激器面板和点右下角”开始“按钮2) 点右上角调节采样速度（“走纸速度”）3) 菜单打开设置刺激器的脉冲数2个或5个，重新打开刺激器面板4) 调节走纸速度为400六、实验结果：图1. 蛙坐骨神经—腓肠肌标本图（二）坐骨神经-腓肠肌标本在Powerlab实验系统中所记录下的数据1.通过不断调整刺激强度，使肌肉收缩的幅度适中，记录单收缩的曲线（图2-1 ）。
生理学实验报告-《坐骨神经-腓肠肌标本的制备》
实验二-坐骨神经标本—腓肠肌标本的制备一、实验目的：1.学习蛙类动物单毁髓与双毁髓的方法。
2.学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本及腓肠肌的制备方法。
3.了解电刺激的极性法则。
二、实验原理：1、牛蛙作为实验动物的优势：离体实验是动物生理学主要的实验方法之一。
两栖动物是冷血动物，其基本生理机能与温血动物近似，而其离体组织器官维持活性所需要的条件比较简单，因此它常被选为生理学实验提供离体组织或器官的实验动物。
蟾蜍或青蛙坐骨神经—腓肠肌在任氏液中可维持生理活性数小时，在其基础上还可进一步制作神经干标本、腓肠肌标本，可用于研究肌肉收缩的特性，神经和肌肉的兴奋性、传导性，刺激与反应的关系，神经肌肉接头活动等生理活动及相关机制，甚至还可以用于药物筛选如抗疲劳药物的模型。
其中牛蛙人工养殖成本低产出率高，相对蟾蜍要更安全。
因此，本次实验选择牛蛙作为实验对象。
2、锌铜弓刺激检测标本活性的原理：锌铜弓在溶液中沾湿以后，锌的表面电离出正离子，里面形成负离子；而铜的表面电离出负离子,里面形成正离子。
当用锌铜弓接触活组织时，电流便沿着锌一活组织→铜的方向流动而产生刺激效应。
所以锌相当于正极,面铜相当于负极发挥刺激作用；当断开时，则发生相反的效应。
锌的金属电势比铜低，形成一定的电势差（就相当于有电压），锌铜弓是把一根锌棒和一根铜棒一端焊在一起，另一段分开，则接触样本（例如神经干）时，会引起样本局部去极化，引发动作电位。
三、实验器材：牛蛙，常用手术器械（手术剪、手术镊、手术刀、金冠剪、眼科剪、眼科镊、毁髓针、玻璃分针)，蜡盘，蛙板（木质或硬泡沫塑料），玻璃板，固定针，锌铜弓，培养皿或不锈钢盘，污物缸，滴管，纱布，粗棉线，任氏液。
四、实验流程和步骤：1.牛蛙的双毁髓一手握住牛蛙，背部向上。
用拇指压住牛蛙的背部，食指按压其头部前端，使头端向下低垂；另一手持毁髓针，由两眼之间沿中线向后触划，当触及两耳中间的凹陷处（此处与两眼的连线成等边三角形）时，持针手即感觉针尖下陷，此处即是枕骨大孔的位置。
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备
实验1 蛙坐骨神经––––腓肠肌标本制备、分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响【课程名称】【实验名称】【实验性质】【器材】蟾蜍或蛙；任氏液；二道生理记录仪、双脉冲刺激器、肌槽、常规手术器械、玻璃分针、毁髓针、锌铜弓、解剖盘、烧杯、滴灌、任氏液等。
【实验目的】1.学习坐骨神经–腓肠肌标本的制备方法。
2.分析探讨刺激频率对肌肉收缩的影响。
【实验原理】刺激坐骨神经能引起腓肠肌产生收缩。
在其他条件不变情况下，不断增大刺激频率可引起肌肉收缩形式发生改变。
若刺激频率较小，两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩和舒张所持续的时间（即单收缩）时，肌肉收缩表现为一连串的单收缩；若增大刺激频率，使两次刺激间隔时间大于一次肌肉收缩的收缩期时间，而小于单收缩时，肌肉呈现不完全强直收缩；若继续增加刺激频率，使两次刺激间隔时间小于一次肌肉收缩的收缩期时间，肌肉则表现出完全强直收缩。
【实验步骤】1、双毁髓：左手握蟾蜍，背部向上。
用食指按压其头部前端，拇指压住躯干的背部，使头向前俯；右手持毁髓针，由两眼之间中线向后方划触，触及两耳后腺之间的凹陷处即是枕骨大孔的位置。
将毁髓针由凹陷处垂直刺入枕骨大孔，然后针尖向前刺入颅腔，在颅腔内搅动，以毁脑组织。
再将毁髓针退至枕骨大孔，针尖转向后方，与脊柱平行刺入椎管，以捣毁脊髓。
脊髓彻底捣毁时，可看到蟾蜍后肢突然蹬直，然后瘫软，此时的动物为双毁髓动物。
2、剥制后肢标本：左手持手术镊提起两前肢之间背部的皮肤，右手持手术剪横向剪断皮肤，然后往后肢方向撕剥皮肤。
剪开腹壁肌肉，用手术镊提起内脏，翻向头部，在看清支配后肢的脊神经发出部位后，于其前方剪断脊柱。
3、分离两后肢：将去皮的后肢腹面向上置于解剖盘上，右手持金冠剪纵向剪开脊柱，再剪开耻骨联合，使两后肢完全分离。
4、分离坐骨神经：将一侧后肢的脊柱端腹面向上，用玻璃分针沿脊神经向后分离坐骨神经，股部沿腓肠肌正前方的股二头肌和半膜肌之间的裂缝，找出坐骨神经，剪断盖在上方的梨状肌，完全暴露坐骨神经，剪去支配腓肠肌之外的分支，再剪去脊柱及肌肉，只保留坐骨神经发出部位的一小块脊柱骨。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
使用轮转式切片机将组织切成薄片，调整切片厚度以满足实验要求。
染色
染色液选择
根据实验需要选择适当的染色液，如苏木素-伊红染色液 （H&E）、Masson三色染色液等。
染色过程
将切片放入染色液中，按照染色液的要求进行染色处理，以 便更好地观察组织结构和细胞形态。
03 结果观察
显微镜观察
观察神经纤维的排列和结构
结果对比
结果解释
02
03
Байду номын сангаас
结果应用
将实验结果与预期结果进行了对 比，分析了实验误差产生的原因。
对实验结果进行了详细的解释， 阐明了实验现象背后的原理和机 制。
探讨了实验结果在现实生活和生 产中的应用前景，为后续研究和 应用提供了参考。
实验改进与优化
实验方法优化
针对实验过程中存在的问题和不足，提出了 改进措施和方法，以提高实验效率和准确性 。
实验设备升级
针对实验设备的局限性和不足，提出了设备升级和 改进的建议，以提高设备的性能和稳定性。
实验流程完善
针对实验流程的缺陷和不足，提出了完善和 优化的建议，以使实验流程更加合理和高效 。
THANKS FOR WATCHING
感谢您的观看
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02 实验步骤
取材
取材前准备
01
确保实验环境清洁，准备好所需器材和试剂，如手术刀、镊子、
固定液、脱水剂、包埋剂等。
选取适宜的坐骨神经-腓肠肌标本
02
选择健康、新鲜的动物，如小白鼠或大白鼠，并确保所选标本
无病变或损伤。
剥离组织
03
使用手术刀和镊子仔细剥离坐骨神经和腓肠肌周围的脂肪和结
生理学实验 坐骨神神经腓肠肌标本制备
实验一 坐骨神经腓肠肌标本制备【实验目的】掌握坐骨神经腓肠肌标本的制备技术，为以后有关实验打下基础。
【实验原理】两栖类的一些基本生命活动和生理功能与温血动物相似， 而其离体组织所需的生活条件 比较简单，易于建立、控制和掌握。
因此在实验中常用蟾蜍或蛙的坐骨神经腓肠肌标本来观 察兴奋与兴奋性的一些规律以及骨骼肌的收缩特点等。
所以坐骨神经腓肠肌标本的制备是生 理实验的一项基本操作技术。
【实验对象】蟾蜍或蛙。
【实验材料】两栖类手术器械 1套(粗剪刀、组织剪、眼科剪、组织镊、眼科镊、金属探针、玻璃 分针、蛙板)、手术线、蛙尸缸、滴管、平皿、锌铜弓、任氏液。
【实验步骤】1． 破坏脑和脊髓取蟾蜍 1 只，用自来水冲洗干净。
左手握住蟾蜍，用拇指按压背部，食指按压头部 前端使其头部前俯，右手持金属探针在头前缘沿正中线向尾端触划，所触划到的头部后 端的凹陷处，即为枕骨大孔所在部位。
在此处将金属探针垂直刺入皮肤，有突破感后再 将金属探针折向前经枕骨大孔刺入颅腔，左右搅动捣毁脑组织；然后将金属探针回抽至 枕骨大孔处，转向后刺入脊椎管，反复提插捣毁脊髓。
此时如蟾蜍的四肢松软，呼吸运 动消失，表示脑和脊髓已完全破坏，否则应按上法再行捣毁。
2． 剪除躯干上部及内脏如图 1－1 所示，在骶髂关节位置用左手将蟾蜍提起，在骶髂关节水平以上 0.5～l 厘米处用粗剪刀剪断脊柱，然后将粗剪刀尖向下深入体腔沿躯干两侧剪开皮肤，使蟾蜍 头、上肢与内脏自然下垂，将其一并剪除弃去，仅留后肢、骶骨、脊柱及紧贴于脊柱两 侧的坐骨神经。
在整个剪除过程中注意勿损伤神经。
3． 剥皮左手用组织镊夹紧或用手直接捏住脊柱断端(注意：不要夹住或接触神经)，右手捏，将标本放在盛有任氏液 住其上的皮肤边缘，用力向下剥掉全部后肢皮肤（见图 1－2）的平皿中。
将手及用过的粗剪刀、组织镊等全部手术器械洗净，再进行下述步骤。
4． 分离两腿用镊子从背位夹住脊柱将标本提起，剪去向上突出的骶骨(注意勿损伤坐骨神经)，然后沿正中线用粗剪刀将脊柱分为两半，并从耻骨联合中央剪开两侧大腿，然后将分离的两条腿浸于盛有任氏液的平皿中备用。
神经肌肉标本制备
生理学实验介绍／神经肌肉标本制备
一、实验结果
坐骨神经－腓肠肌标本制备：
1.双毁髓处死牛蛙后，可见牛蛙四肢肌肉完全松弛。
2.剪断脊柱，除去前肢和内脏等后，可见牛蛙背侧明显的白色坐骨神经丛。
3.用玻璃分针把大腿背侧股二头肌和半膜肌分开，见一条粗大的坐骨神经。
4.标本制作完成后，用锌铜弓轻触坐骨神经，肌肉收缩。
触碰坐骨神经的不同部位，发现越靠近腓肠肌，肌肉收缩越迅速、灵敏。
二、分析与讨论
1.锌铜弓轻触坐骨神经引起肌肉收缩的原理
任氏液是电解质溶液，当锌铜弓刺激坐骨神经表面，形成原电池，引起接触点的动作电位。
该动作电位沿着坐骨神经传播到神经-肌肉节点，突触前膜释放递质。
该递质与突触后膜上的受体结合，使腓肠肌肌肉细胞膜去极化，最终引起肌肉收缩。
2.标本检查后的反思
用锌铜弓检查标本的兴奋性时，并不是每次都成功。
刺激越靠近腓肠肌，成功率越高。
可能有两个原因：①标本制备过程中，远离肌肉端的神经剥离较早，受到损伤。
②标本制作完成后，浸泡在任氏液的时间不够长，肌肉兴奋性不稳定。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
第九章实验内容实验1 坐骨神经-腓肠肌标本的制备【实验目的】掌握制备坐骨神经-腓肠肌标本的操作技术，为此后有关的神经肌肉实验打下基础。
【实验原理】蛙或两栖类动物的一些基本生命活动及生理功能与温血动物近似，而且其离体组织需要的生活条件非常简单，易于控制和掌握。
因此在生理学实验中，坐骨神经-腓肠肌标本是研究神经肌肉生理最常用的对象，经常用来研究神经肌肉的兴奋性、刺激与反应的规律、肌肉收缩的特点、兴奋性的周期性变化等。
【实验器材和药品】蛙类手术器械一套（金属探针1根，粗剪刀、眼科剪刀各1把，圆头镊子、眼科镊子各1把，玻璃分针2根），蛙板和玻璃板各1块，培养皿，滴管，废物缸、锌铜弓，丝线，棉花；任氏液。
【实验对象】蟾蜍或蛙。
【实验方法和步骤】1．破坏脑和脊髓（常用的有三种方法）(1) 俯式捣毁法：是最常用的方法。
以左手持蟾蜍，将其腹面朝向手心，前肢夹在食指和中指之间固定，后肢夹在无名指和小指之间固定，并用拇指按压蟾蜍头部使之下俯30~40度角；然后右手持金属探针沿蟾蜍头部的中线下划，可触及一凹陷处即为枕骨大孔（图9-lA）。
将探针从枕骨大孔垂直刺入1~1.5mm，再向前刺入颅腔，左右搅动（可感觉到探针与颅骨壁的碰击），破坏脑组织；再将探针退回至进针处，但不拔出而是转向后方刺入椎管，破坏脊髓。
(2) 仰式捣毁法：将蟾蜍仰卧于蛙板上，拉开下颌，右手持探针在颅底两眼之间向前下刺入颅腔，用探针在颅腔内向四周捣毁脑组织，然后将探针退至粘膜下，针尖向后平行刺入椎管内以破坏脊髓。
(3) 横断脊柱后捣毁法：左手持蟾蜍，右手持粗剪刀，在两腋窝稍下横断脊柱，然后在脊柱呈白色的脊髓断面处，向上插入探针破坏脑，再向下插入探针破坏脊髓。
以上方法破坏脑和脊髓成功后，蟾蜍出现四肢（尤其是后肢）瘫软，并常有尿失禁现象。
2．剪去躯干上部及内脏用粗剪刀在两侧腋部稍下（或在骶髂关节以上1.5 ~ 2cm处）剪断脊柱（图9- 1B），用左手握住蟾蜍后肢，拇指按压骶骨，使蟾蜍头部及内脏自然下垂；避开腰骶神经丛后，右手用粗剪刀沿脊柱两侧剪开腹壁，在耻骨联合处将躯干上部及内脏剪掉，弃入废物缸内。
坐骨神经-腓肠肌标本制备
坐骨神经-腓肠肌标本制备
• 8）极性验证：A）干棉线结扎神经干。
•
B) 锌铜弓在结扎验过程中均用任氏液沾湿接触动物组织的手 指，冲洗也用任氏液。
•
2）锌铜弓刺激时神经干要悬空。
•
3）用玻璃分针而不是镊子分离神经干。
实验结束，清理本组使用台面。 第一组留下打扫卫生。 下次实验课前交实验报告。 下次实验：骨骼肌收缩分析
2）剪开体壁肌肉（勿伤脊神经），剥离去除内脏。从胸部剪断脊柱。捏住断 开的脊柱，剥去皮肤。
3）于耻骨中间分离两后肢，一后肢放于任氏液中备用，一后肢继续剥制标本。 4）脊柱腹面朝上，趾端外侧翻转，足底向上，固定后肢。用玻璃分针沿脊神 经向后分离坐骨神经。
5）用手术镊在腓肠肌下穿线扎紧，游离腓肠肌。 6）分离股骨头，捏住股骨，剪去周围肌肉，保留1cm股骨头。并剪断胫腓骨， 也保留1 cm骨头。 7）用锌铜弓刺激神经，提起脊髓片，锌铜弓两极接触神经，观察腓肠肌是否 收缩。
生理学实验
解景田、刘燕强、崔庚寅 编 高等教育出版社 / 2016-08
坐骨神经-腓肠肌标本制备
实验目的：1）学习蛙类单毁髓和双毁髓方法。 2）学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本制备方法。
实验材料：蛙、毁髓针、手术剪、手术镊、金冠剪、玻璃分针、滴管、干棉线、 任氏液、固定针\锌铜弓。 实验步骤：
1）用手指固定蛙体，两耳中间凹陷处下针，向前刺入颅腔，捣毁脑组织，针 尖向后刺入椎管毁脊髓。
坐骨神经腓肠肌标本制备
分离腓肠肌(图3) ：先分离腓肠肌的跟腱， 用线结扎，自跟腱的附着点剪断。此时， 提起结扎线便可将腓肠肌剥离出来。剪断 小腿骨，保留小段股骨。
标本的检查：用锌铜弓轻轻地与坐骨神经 接触，如果标本制作完好，肌肉立即收缩， 表明标本的兴奋性良好。
去皮(图2) ：首先去除前肢和内脏，沿颈椎 一直将坐骨神经分离至膝关节为止。
5、兴奋性检测
剥离神经(图3) ：用玻璃分针将坐骨神经丛分离清楚，再从大腿背面股二头肌和半膜肌的夹缝中分离出坐骨神经。
的断口至耻骨处，将两侧腹壁的皮肤及肌 注意勿伤及神经 ，剪刀不要碰到神经。
此时，提起结扎线便可将腓肠肌剥离出来。 注意：做好的肌肉神经标本要浸在任氏液中以保持其活性，剪刀等金属不可接触标本。
注意勿伤及神经 ，剪刀不要碰到神经。 标本的检查：用锌铜弓轻轻地与坐骨神经接触，如果标本制作完好，肌肉立即收缩，表明标本的兴奋性良好。 断颈：断颈处死的蟾蜍进行双毁髓，破坏神经系统 。 去皮(图2) ：首先去除前肢和内脏，沿颈椎的断口至耻骨处，将两侧腹壁的皮肤及肌肉剪开，剔除前肢及内脏。
分离左右后肢：用粗剪沿标本的脊柱中线 将标本分为左右两半。注意勿伤及神经 ， 剪刀不要碰到神经。
断颈：断颈处死的蟾蜍进行双毁髓，破坏 注意勿伤两侧下行的坐骨神经丛。
实验动物：蟾蜍（ 1 只/组）
标本的检查：用锌铜弓轻轻地与坐骨神经接触，如果标本制作完好，肌肉立即收缩，表明标本的兴奋性良好。
神经系统 。 1、断颈处死蟾蜍
注意勿伤两侧下行的坐骨神经丛。 4、坐骨神经-腓肠肌标本的制备 一直将坐骨神经分离至膝关节为止。 剥离神经(图3) ：用玻璃分针将坐骨神经丛分离清楚，再从大腿背面股二头肌和半膜肌的夹缝中分离出坐骨神经。 1、断颈处死蟾蜍
坐骨神经-腓肠肌标本的制备
2.不要挤 压蟾蜍耳 后腺。
3.避免强力
4.标本先放
牵拉神经或 在任氏液中 用金属器械 浸泡一段时 夹捏神经。 间。
彻底。
探索性实验
The exploring experiment 温度对坐骨神经—腓 肠肌收缩的影响
坐骨神经—腓肠肌标 本制作方法的改进
给细胞外Ca2+浓度 对坐骨神经—腓肠肌 收缩的影响
Experimental methods and steps
8.制作坐骨神经-腓肠肌标本
跟腱处穿线、结扎、剪断
分离腓肠肌
膝关节下剪断胫腓骨
实验方法与步骤
Experimental methods and steps
9.任氏液湿润标本
10.锌铜弓检查兴奋性
实验方法与步骤
Experimental methods and steps
茶对离体坐的捉拿 枕骨大孔的位置 破坏的标志
（1）枕骨大孔的位置
位置：两线交汇的凹陷处
实验方法与步骤
Experimental methods and steps
（2）破坏的标志：
呼吸消失 四肢松软
（3）方法二
粗剪将蟾蜍上颌从两耳连线 平面离断
暴露椎管
直接破坏脊髓
实验方法与步骤
Experimental methods and steps
2.剪除躯干上部和内脏
骶髂关节上1-2cm 剪去的部分 留下的部分
实验方法与步骤
Experimental methods and steps
2.剪除躯干上部和内脏
手持蟾蜍下肢，腹部向下
仅保留后肢和下段脊柱 脊柱两旁即坐骨神经
实验方法与步骤
Experimental methods and steps
坐骨神经-腓肠肌标本的制备
坐骨神经-腓肠肌标本的制备XXX,YYY,ZZZ（版权所有，仅限个人）一、实验目的：1.学习蛙类动物双毁髓的实验方法。
2.学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本的制备方法。
二、实验原理：1.蟾蜍处死：将蟾蜍的脑和脊髓用毁髓针捣毁后，蟾蜍即死亡。
捣毁脑是为了将蟾蜍的感觉和运动中枢破坏，同时也使蟾蜍的意识消失，既避免解剖过程中蟾蜍感到痛苦，也避免蟾蜍有意识的反应；捣毁脊髓是为了破坏蟾蜍的周围神经系统，避免蟾蜍自然的非意识的反应（乱动）。
总之，双毁髓就是为了是蟾蜍在之后的解剖过程中无任何干扰实验的反应。
2.坐骨神经-腓肠肌标本的制备：坐骨神经直接支配着腓肠肌的反应，刺激坐骨神经的神经干，腓肠肌会产生收缩反应。
一次阈上刺激，腓肠肌会产生一个周期的收缩舒张过程，从而可以被信号采集系统采集，并通过计算机和相关软件转化成可视的收缩舒张曲线。
便于研究神经和肌肉的信号、反应关系和规律。
三、实验器材与试剂：（一）实验动物及器材：蟾蜍、常用蛙类手术器械（如：毁髓针、剪刀、解剖刀等）、蛙板、玻璃划针、固定针、培养皿、滴管、棉花、粗棉线等。
（二）实验试剂：任氏液（近似两栖动物内环境液，配制因子很多，不同于生理盐水）四、实验方法与步骤：1、蟾蜍处死，损毁脑和脊髓：a.学会持拿蟾蜍的方法：一般用左手持拿蟾蜍，用小指和无名指夹住蟾蜍两后腿，中指自然搭在蟾蜍腹部，食指和拇指可自由活动。
处死时，一般用拇指按住蟾蜍背部，食指将蟾蜍头鼻下压，以便使下针处清晰易找。
b.处死：按上述方法持拿，用毁髓针沿头部中线从鼻尖轻轻向后滑过，约在双眼连线中点后方某点，可感到有一下陷小窝，用针轻按，蟾蜍一般会有明显反应。
在此处下针。
将毁髓针垂直插入，会感觉到颅骨破碎的声音，立即将毁髓针向后放倒，将针尖从破碎处，并旋转捣毁脑部；然后将毁髓针拔出少许，向前放倒，向后插入同样旋转捣毁脊髓。
蟾蜍即被处死。
2、去除躯干上部及内脏：将蟾蜍腹部朝上放在蛙板上，将四肢用固定针固定。
生物实验报告坐骨神经腓肠肌标本制备
坐骨神经腓肠肌标本得制备与神经干动作电位得观察与传导速度得测定一、实验目得:1.学习蛙类动物双毁髓得实验方法、2。
学习并掌握坐骨神经—腓肠肌标本得制备方法。
3.观察蛙坐骨神经干复合动作电位得基本波形,并了解其产生得原理。
4.学习蛙与蟾蜍离体神经干上神经冲动传导速度得方法与原理、二、实验材料:1.实验对象:蟾蜍2、实验器材:常规手术器械(粗剪刀、手术剪、眼科剪、手术镊、眼科镊)蛙板、蛙钉、探针、锌铜弓、玻璃分针、培养皿、任氏液、滴管、手术线、PC机、信号采集处理系统、神经屏蔽盒等。
三、实验原理:神经干在受到有效刺激以后可以产生复合动作电位,标志着神经发生兴奋。
如果在离体神经干得一段施加刺激,从另一端引导传来得神兴奋冲动,可以记录出双相电位,加入在引导得两个电极之间将神经干麻醉或损伤,阻断其兴奋传导能力,这时候记录出得动作电位就成为单相电位、神经细胞得动作电位就是以全或无得方式产生得。
但就是,复合动作电位得幅值在一定刺激强度下就是随刺激强度得增加而增大得。
如果在远离刺激点得不同距离处分别引导离体神经干动作电位,两引导点之间得距离为m,在两引导点分别引导出得动作电位得时相差为ｓ。
即可按照公式ｖ=m/s来计算出兴奋得传导速度、蛙类得坐骨神经干属于混合性神经,其中包含有粗细不等得各种纤维,其直径一般为3-29um,其中直径最粗得有髓纤维为A类纤维,传导速度在正常室温下为35－4０ m/ｓ。
神经每兴奋一次极其在兴奋以后得回复过程中,其兴奋性都要经历一次周期性得变化,其全过程依次包括绝对不应期、相对不应期、超常期与低常期４个时期。
为了测定坐骨神经在发生一次兴奋以后兴奋性所发生得周期性变化,首先要给神经施加一个条件性刺激引起神经兴奋,然后在前一兴奋及其恢复过程不同时相再施加一个测试性刺激,用于检查神经得兴奋阈值与所引起得动作电位得幅度,以判定神经兴奋性得变化。
四、实验方法及步骤:1、坐骨神经干标本制备(1) 破坏脑与脊髓:取蛙一只,用自来水冲洗干净,左手持蛙,用食指下压其吻部,拇指按压在其骶髂关节下方,使其头尽量前俯,右手持探针沿两眼之间中线向后方轻划,至触及头颈部正中得凹陷处,即为枕骨大孔得位置。
坐骨神经--腓肠肌标本的制备
3、剥离后肢标本
• 动物腹面向上放置于蜡盘，手术镊轻轻 提起耻骨联合上方，剪开皮肤，再剪开 体壁肌肉，然后轻轻提起内脏，自耻骨 部剪断（勿伤脊神经），把内脏拨向头 端，剪断脊柱。然后一手捏住脊柱后端， 另一手向后撕剥皮肤，并除去头端肢体 和内脏
4、分离两后肢
• 把去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上， 于耻骨联合处按压刀刃，切开耻骨联合。 然后用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉， 并纵向剪开脊柱。
神经，观察腓肠肌是否收缩！ 完整的神经肌肉标本应包括以下几个部分
把去皮的后肢腹面向上置于玻璃板上，于耻骨联合处按压刀刃，切开耻骨联合。 1、保护标本——神经和肌肉：不用赃的皮肤碰标本，不用自来水冲洗标本，不用金属接触神经以及损伤肌肉。 一手捏住趾端，另一手用手术镊（尖头镊）在腓肠肌跟腱下面穿线，并用结线扎紧。 1、首先准备手术所需的用品 动物腹面向上放置于蜡盘，手术镊轻轻提起耻骨联合上方，剪开皮肤，再剪开体壁肌肉，然后轻轻提起内脏，自耻骨部剪断（勿伤脊
毁髓后，动物瘫软如泥。
5、分离坐骨神经 此标本用于神经干兴奋传导、神经-肌肉接点的传递以及骨骼肌收缩等实验研究
然后用金冠剪剪开两后肢相连的肌肉，并纵向剪开脊柱。 坐骨神经——腓肠肌标本的制备 动物腹面向上放置于蜡盘，手术镊轻轻提起耻骨联合上方，剪开皮肤，再剪开体壁肌肉，然后轻轻提起内脏，自耻骨部剪断（勿伤脊 神经），把内脏拨向头端，剪断脊柱。
6、分离股骨头或胫腓骨头
• 动物小，留股骨头1cm • 动物大，留胫腓骨头1cm
7、游离腓肠肌
• 一手捏住趾端，另一手用手术镊（尖头 镊）在腓肠肌跟腱下面穿线，并用结线 扎紧。提起结线，游离腓肠肌。注意避 免损伤肌膜。
一手握住蟾蜍或蛙，用纱布包裹蟾蜍或蛙，背部向上。
坐骨神经腓肠肌标本制备顺序
坐骨神经腓肠肌标本制备顺序坐骨神经腓肠肌标本制备顺序是进行解剖学研究和医学诊断的重要步骤。
它涉及到将坐骨神经和腓肠肌样本准备成适合观察和分析的形式。
以下是标本制备的一般顺序：1. 选择适当的动物模型或人体样本：坐骨神经和腓肠肌标本可以从动物模型或人体中获取。
在选择样本时，需要考虑到研究的目的和特定的实验要求。
2. 获取标本：在动物模型中，可以通过解剖手术或动物牺牲来获得坐骨神经和腓肠肌标本。
在人体样本中，可以通过手术获取标本，或者在尸检过程中收集。
3. 固定标本：为了保持样本的形态结构和细胞组织的完整性，需要将标本进行固定。
常用的固定剂包括福尔马林、乙醛和缓冲盐水。
固定时间的长短会因样本的大小和类型而有所不同。
4. 切割标本：在固定完成后，需要将标本进行切割。
这可以使用显微切片机或手动刀具来完成。
切割的厚度和方向应根据研究的需要进行调整。
5. 石蜡包埋：切割完成后，需要将标本进行石蜡包埋。
这个过程包括将标本浸泡在不同浓度的石蜡溶液中，使其逐渐渗透和固化。
6. 制作组织切片：石蜡包埋完成后，可以使用组织切片机将标本切割成所需的厚度。
切片的厚度通常为5-10微米。
7. 制作染色切片：为了更好地观察组织的细胞结构和组织学特征，可以对切片进行染色，如常见的血液和组织染色方法。
8. 镜检和分析：制作好的染色切片可以用显微镜观察，并进行相关的分析和测量。
这些分析可以涉及到细胞数量、组织结构和病理变化等方面。
总而言之，坐骨神经腓肠肌标本制备的顺序包括获得标本、固定、切割、石蜡包埋、制作组织切片、染色以及镜检和分析。
这些步骤的正确执行有助于获得高质量的标本，进而促进相关研究和诊断的进展。
操作流程-坐骨神经-腓肠肌标本制备.
ห้องสมุดไป่ตู้操作流程
刺激与肌肉收缩的关系
制备坐骨神经—腓肠肌标本。
↓ 将仪器与标本连结 将腓肠肌上连线连于张力换能器上，将神经与电
极接触，使肌肉处于自然拉长状态
↓ 使用单脉冲刺激方式刺激，强度从零开始逐渐增大，首先找到能引起 肌肉收缩的最小强度，该强度即是阈强度。继续增大刺激强度，当肌 肉收缩曲线的幅度不再随刺激增高，此时即为最大收缩，刺激强度即
为最适刺激强度。
↓ 将刺激强度固定在最适刺激强度，用单刺激作用于坐骨神经，记录肌肉
的单收缩曲线。
↓ 其余参数固定不变，用不同频率的连续刺激作用于坐骨神经，可记录到
单收缩、不完全强直收缩和完全强直收缩曲线
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坐骨神经-腓肠肌标本制备
一、实验目得要求
1、学习蛙类动物单毁髓与双毁髓得方法。
2、学习并掌握坐骨神经-腓肠肌标本及腓肠肌标本得制备方法。
3、了解电刺激得极性法则。
二、实验原理
1、蛙或蟾蜍等两栖类动物得一些基本生命活动与生理功能与温血动物相似,而其离体组织生活条件易于掌握,在任氏液得浸润下,神经肌肉标本可较长时间保持生理活性。
因此,在生理学实验中常用蛙或蟾蜍坐骨神经腓肠肌离体标本来观察神经肌肉得兴奋性、兴奋过程以及骨骼肌收缩特点等。
2、细胞得静息膜电位为外正内负,电刺激可改变可兴奋细胞得膜电位差。
膜电位减小时,细胞去极化,细胞兴奋;膜电位增大时,细胞超极化,细胞兴奋性被抑制。
蘸有任氏液得锌铜弓接触活组织时,可产生沿锌片—活组织—铜片流向得电流对细胞产生刺激效应。
三、实验材料与仪器
1、实验材料:牛蛙
2、实验器材:手术剪、手术镊、手术刀、眼科剪、眼科镊、毁髓针、蛙板、固定针、滴管、培养皿、玻璃分针锌铜弓、污物缸、粗棉线、任氏液
四、实验步骤
1、洗净实验动物→毁髓→剥制后肢→分离坐骨神经→游离腓肠肌→游离股骨头→标本检验→电刺激极性法则得验证
2、双毁髓
一只手握住牛蛙,使其背部向上。
用拇指压住牛蛙背部,食指按压其头部前端,另一只手持毁髓针,由两眼之间沿中线向下触划,触及凹陷处即为枕骨大孔。
将毁髓针垂直刺入枕骨大孔。
将针尖向前刺入颅腔内搅动,此时为单毁髓;将毁髓针退回枕骨大孔,针尖转向后方,与脊椎平行刺入椎管内捣毁脊髓,完成双毁髓。
3、坐骨神经-腓肠肌标本制备
（1）剥制后肢标本:轻提双毁髓蛙,自背面耻骨联合上方约1公分处横向剪断脊柱。
轻轻托起后肢,瞧清坐骨神经位置,沿脊柱两侧横向切口剪断体壁,去除断口以上肢体与内脏放入污物缸。
剥去后肢皮肤后放入任氏液中备用。
（2）分离两后肢:用粗剪刀纵向剪开脊柱,并剪断两后肢相连得肌肉,一只用于剥制标本,一只放入任氏液中保存。
（3）分离坐骨神经:将后肢标本脊柱端腹面向上,趾端向外侧用蛙钉将标本固定在蛙板上。
先在腹腔面用玻璃分针沿脊柱游离坐骨神经,然后在标本得背侧于股二头肌与半膜肌得肌肉缝内将坐骨神经与周边得结缔组织分离直到腘窝,但不要伤及神经,其分支待以后用手术剪剪断肌肉。
（4）游离腓肠肌:同样用玻璃分针将腓肠肌与其下得结缔组织分离并在其跟腱处穿线、结扎;
（5）分离股骨头:捏住股骨,剪去并刮净周围肌肉, 保留股骨得后2/3,剪断股骨;
（6）检验标本:用手术镊轻提标本得脊椎片,再用经任氏液蘸湿得锌铜弓接触坐骨神经,如腓肠肌发生收缩,则表示标本机能正常。
轻提腓肠肌上得结扎线,将标本放入任氏液中保存15-20分钟后进行实验。
（7）电刺激得极性法则验证:用棉线在神经干中间部位进行结扎,以阻断神经传导兴奋得能力。
用锌铜弓跨越结扎线刺激坐骨神经干。
使锌极在腓肠肌一端刺激,观察腓肠肌收缩发生在通电(接触神经干)时还就是断电(离开神经干)时;调转锌铜弓得极性,使铜极在腓肠肌一端
刺激,观察腓肠肌收缩实在通电时还就是断电时。
比较不同极性电极刺激时腓肠肌得收缩强度就是否一样,那个收缩强度比较大？
五、注意事项
1、避免血液污染标本,压挤、损伤与用力牵拉标本,不可用金属器械触碰神经干。
2、在操作过程中,应给神经与肌肉滴加任氏液,防止表面干燥,以免影响标本得兴奋性。
3、标本制成后须放在任氏液中浸泡数分钟,使标本兴奋性稳定,再开始实验效果会较好。
六、实验结果
通过任氏液浸泡,刺激后,瞧到肌肉有收缩得反应,调换电极进行刺激后也同样有收缩反应。
通过铜—锌与锌—铜得两种刺激比较后,铜—锌更强。
七、总结
通过本次试验更加深刻得认识了肌细胞收缩得机制,熟悉了单毁髓与双毁髓得方法与操作,掌握l坐骨神经-腓肠肌标本及腓肠肌标本得制备方法得基本操作。
由于实验过程中提取腓肠肌时候,肌肉过度兴奋,进行电极刺激时现象不就是非常明显。
综上所述实验时需小心操作,尽量避免肌肉失活。
八、思考题
1、剥去皮肤得后肢,能用自来水冲洗吗？为什么？
答:不能。
因为自来水中还有例如氯离子、钙离子等许多离子,它们会影响细胞膜得点位分布,最终就会影响到刺激反应现象得观察;另外自来水里有许多微生物如果它们附着与誓言材料上,也会影响实验效果得。
2、金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌,可能引起哪些不良后果？
答:金属器械碰压、触及或损伤神经及腓肠肌会损伤腓肠肌细胞膜,使肌肉中得神经收到过度刺激,而过度兴奋最终失活,刺激时候就没有现象。
3、如何保持标本得机能正常？
答:首先在制备腓肠肌得过程时,金属器械不要碰及、损伤神经或腓肠肌,以及实验者不要触碰到肌肉;其次,过程中要保持腓肠肌得湿润,常加任氏液,最好先泡一会;另外,在第一次电刺激后,需要让肌肉休息一段时间,在进行下一次刺激。
实验一蟾蜍坐骨神经腓肠肌标本制备
一、实验目得
掌握制备具有正常兴奋收缩功能得蛙类坐骨神经腓肠肌标本基本操作技术,掌握蛙类手术器械得使用方法。
二、材料与方法
1、材料
蟾蜍;任氏液;探针、剪刀、培养皿、瓷盆、玻璃分针、蛙板、玻璃板、大头针、镊子、线、锌铜弓。
2、实验方法
2、1 毁脑脊髓取蟾蜍一只,用左手握住,以食指压其头部前端使其尽量前俯,右手持探针自枕骨大孔处垂直刺入,到达椎管,即将探针改变方向刺入颅腔,向各侧不断搅动,彻底捣毁脑组织;再将探针原路退出,刺向尾侧,捻动探针使逐渐刺入整个椎管内,捣毁脊髓。
此时蟾蜍下颌呼吸运动应消失,四肢松软,即成为一毁脑脊髓得蟾蜍。
否则须按上法再行捣毁。
2、2剪除躯干上部及内脏用粗剪刀在颅骨后方剪断脊柱。
左手握住蟾蜍脊柱,右手将粗剪刀沿两侧(避开坐骨神经)剪开腹壁。
此时躯干上部及内脏即全部下垂。
剪除全部躯干上部及内脏组织,弃于瓷盆内。
2、3剥皮避开神经,用右手拇指与食指夹住脊柱,左手捏住皮肤边缘,逐步向下牵拉剥离皮肤。
拉至大腿时,如阻力较大,可先剥下一侧,再剥另一侧。
将全部皮肤剥除后,将标本置于
盛有任氏液得培养皿中。
2、4洗净双手与用过得全部手术器械,再进行下列步骤。
2、5分离双腿避开坐骨神经,用粗剪刀从背侧剪去骶骨,然后沿中线将脊柱剪成左右两半,再从耻骨联合中央剪开(为保证两侧坐骨神经完整,应避免剪时偏向一侧)。
将已分离得标本浸入盛有任氏液得培养皿中。
2、6游离坐骨神经取腿一条,先用剥离分针沿脊柱侧游离坐骨神经腹腔部,然后用大头针将标本背位固定于干净蛙板上。
用玻璃分针循股二头肌与半膜肌之间得坐骨神经沟,纵向分离暴露坐骨神经之大腿部分,直至分离至腘窝颈神经分叉处。
然后剪断股二头肌腱、半膜肌与半膜肌肌腱,并绕至前方剪断股四头肌腱。
自上向下剪断所以坐骨神经分支。
将连着3-4节椎骨得坐骨神经分离出来。
2、7完成坐骨神经小腿标本将已游离得坐骨神经搭在腓肠肌上。
用粗剪刀自膝关节周围向上剪除并刮净所以大腿肌肉,在距膝关节约1cm处剪断股骨。
弃去上段股骨,保留部分即为坐骨神经小腿标本。
2、8完成坐骨神经腓肠肌标本用尖子镊子在上述坐骨神经腓肠肌标本得跟腱下方穿孔,穿线结扎之。
提起结扎线,在结扎线下方剪断跟腱,并逐步游离腓肠肌至膝关节处,左手握住标本得股骨部分,使已游离得坐骨神经与腓肠肌下垂,右手持粗剪刀水平方向伸进腓肠肌与小腿之间,在膝关节处剪断,与小腿其余部分分离。
左手保留部分即为附着于股骨之上得、具有坐骨神经支配得腓肠肌标本。
将标本浸入盛有新鲜任氏液得培养皿中待用。
2、9实验观察
2、9、1蟾蜍毁脑脊髓前后四肢肌张力得变化。
2、9、2用锌铜弓分别刺激坐骨神经与腓肠肌,观察肌肉得反应。
三、实验结果
用锌铜弓刺激坐骨神经时腓肠肌发生收缩。
四、分析
锌铜弓用金属锌与铜铆接而成,锌铜弓在极性溶液中形成回路时,锌与铜两极产生约0、5-0、7V得直流电压,电流得刺激作用于神经肌肉标本,由于产生生物电流,因而引起肌肉得收缩。
制备标本得过程中,要不断滴加任氏液,以防标本干燥,丧失正常生理活性;操作过程中应避免强力牵拉与手捏神经或夹伤神经肌肉;毁脑脊髓时防止蟾蜍皮肤分泌得蟾蜍毒液射入操作者眼内或污染实验标本。
五、结论
蛙类得某些基本生命活动与生理功能与哺乳类动物有相似之处,而且其离体组织得生活条件比较简单,易于控制与掌握,来源也较丰富,由此在生理学实验,尤其就是细胞生理学得某些实验中,常用蛙或蟾蜍得坐骨神经腓肠肌标本来观察神经肌肉得兴奋性、刺激与反应得规律及肌肉收缩得特点等。
制备具有正常兴奋收缩功能得蛙类坐骨神经腓肠肌标本就是生理学实验得基本操作技术之一。