免疫学测定技术的应用与研究进展

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免疫学检测原理及临床应用

免疫学检测原理及临床应用

免疫学检测原理及临床应用免疫学检测是一种通过检测体内免疫系统的反应来确定疾病状态或病原体存在的诊断技术。

其基本原理是利用体内自身的免疫系统对外来物质(如细菌、病毒或人工合成物质)做出特异性反应,产生特异性抗体或细胞免疫反应,并将其检测出来。

免疫学检测可分为血清学检测和细胞免疫学检测两种。

血清学检测是指通过检测血清中特异性抗体的存在来确定疾病状态或病原体存在的诊断方法。

主要有ELISA、免疫荧光、免疫印迹等方法。

其基本原理是将目标抗原或建立细胞突变株制备成特异性抗原,与患者血清中的特异性抗体结合,用酶、荧光或其他标记物检测出来。

例如,ELISA是一种广泛应用的免疫学检测技术,用于检测抗体和抗原的相互作用。

它的原理是将抗原吸附到多孔板上,在体外将待测样本加入其中,样品中如有特异性抗体,则与抗原结合,未结合的抗体被洗掉,再加入标记抗体,标记物与抗原相互结合形成复合物,可以根据标记物的性质来检测复合物的形成。

细胞免疫学检测是指通过检测免疫细胞的反应来确定疾病状态或病原体存在的诊断方法。

主要有淋巴细胞转化试验(LTT)、流式细胞术等方法。

其基本原理是将血液或其他体液样本中的免疫细胞与特异性抗原共同孵育,在体外激活免疫细胞产生抗体或细胞反应,使用流式细胞术分离、检测不同类型的免疫细胞。

例如,LTT可用于检测细菌或病毒等病原体感染及免疫功能异常等疾病。

其原理是将血液或其他体液样本加入培养基中,与特定抗原刺激后,在体外培养一段时间,测定培养物中的淋巴细胞增殖情况,反映细胞免疫应答功能的多样性和复杂性。

免疫学检测在临床实践中的应用非常广泛。

它被用来诊断多种感染性疾病,例如乙型肝炎、艾滋病、结核病等。

通过检测患者体内是否存在相应的抗体或细胞反应,可以确定疾病病原体是否存在以及疾病的严重程度。

此外,免疫学检测还被用于诊断自身免疫性疾病,例如狼疮、风湿性关节炎等。

通过检测患者体内是否存在特定的自身抗体,可以确定患者的疾病类型和严重程度。

免疫学的研究进展

免疫学的研究进展

免疫学的研究进展免疫学是一门研究人体免疫系统的科学,它涉及到人体如何识别和对抗疾病的过程。

随着科学技术的不断发展,免疫学的研究也在不断深入,本文将就免疫学的研究进展进行探讨。

一、免疫系统的组成和功能免疫系统由免疫细胞、免疫分子和免疫组织组成,其主要功能是识别和对抗外来入侵的病原体,保护人体健康。

免疫系统通过识别病原体,产生免疫应答,从而消灭病原体,保护人体健康。

二、免疫学研究进展1.细胞因子研究进展细胞因子是免疫系统中一类重要的调节分子,它们在免疫应答和免疫调节中发挥着重要作用。

近年来,科学家们对细胞因子的研究取得了很大的进展。

研究发现,细胞因子在多种疾病中具有治疗作用,如肿瘤、病毒感染等。

因此,细胞因子已经成为免疫学研究的一个重要方向。

2.免疫治疗研究进展免疫治疗是一种利用免疫系统来治疗疾病的方法。

近年来,免疫治疗在肿瘤、自身免疫性疾病等领域取得了很大的进展。

例如,利用免疫检查点抑制剂可以激活患者的免疫系统,从而消灭肿瘤细胞。

此外,通过基因工程技术构建治疗性疫苗也是一种有效的免疫治疗方法。

3.免疫细胞研究进展免疫细胞是免疫系统的重要组成部分,它们在免疫应答中发挥着重要作用。

近年来,科学家们对免疫细胞的研究也取得了很大的进展。

例如,研究发现某些类型的免疫细胞在病毒感染中具有重要作用,通过对这些细胞的深入研究,可以为抗病毒治疗提供新的思路。

三、未来研究方向1.免疫系统的数字化研究随着信息技术的发展,免疫系统的数字化研究已经成为一个重要的方向。

通过建立数字化模型和算法,可以更深入地了解免疫系统的结构和功能,为免疫学研究提供新的手段和方法。

2.精准免疫治疗精准免疫治疗是一种根据患者的个体差异进行治疗的方法。

通过对患者的免疫系统进行详细的检测和评估,可以制定出更加精准的治疗方案,提高治疗效果和减少副作用。

未来,精准免疫治疗将成为免疫学研究的一个重要方向。

3.新型疫苗研发疫苗是预防传染病的重要手段之一。

随着免疫学研究的深入,新型疫苗的研发也成为了免疫学研究的一个重要方向。

免疫学检验技术与应用

免疫学检验技术与应用

免疫学检验技术与应用近年来,免疫学检验技术在医学领域中的应用越来越广泛。

这种技术通过检测机体免疫系统产生的抗体或免疫细胞来判断疾病的发生和发展,从而为临床诊断和治疗提供了重要的帮助。

本文将介绍免疫学检验技术的原理、方法以及在各个领域中的应用。

一、免疫学检验技术的原理免疫学检验技术主要基于机体免疫系统的反应原理。

当机体受到外界的入侵,如细菌、病毒、寄生虫等病原微生物的侵袭时,免疫系统会产生抗体来对抗这些病原微生物。

免疫学检验技术利用这种抗体的特异性来识别和检测特定的抗原,从而确定疾病的存在和发展。

免疫学检验技术可以分为两大类:免疫测定和免疫分析。

免疫测定主要通过检测抗体与抗原的特异性结合来确定疾病的存在和程度。

常见的免疫测定技术包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、荧光免疫测定(FIA)等。

免疫分析则通过测定免疫反应的变化,如特定细胞的增殖、分泌物的变化等,来判断疾病的发生和发展。

二、免疫学检验技术的方法1. 酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA是一种常用的免疫测定技术,它可以通过特定抗体与抗原的结合来检测样本中的特定物质。

ELISA方法简单、灵敏度高、特异性强,广泛应用于疾病的诊断和治疗监测。

它可以用于检测感染性疾病、自身免疫疾病和肿瘤等多种疾病。

2. 放射免疫测定(RIA)RIA是一种利用放射性同位素标记的反应物与抗原或抗体结合来检测特定物质的免疫测定技术。

由于放射性同位素的高灵敏度和特异性,RIA可以用于测定非常低浓度的物质,如激素、维生素等。

然而,由于放射性同位素的辐射危害,RIA的应用受到了一定的限制。

3. 荧光免疫测定(FIA)FIA利用特定的荧光标记物与抗原或抗体结合来检测特定物质。

荧光标记物的高灵敏度和快速反应使得FIA成为一种快速、高通量的免疫测定技术。

FIA常用于病毒检测、细胞检测等领域。

三、免疫学检验技术的应用1. 临床诊断免疫学检验技术在临床诊断中起着重要的作用。

免疫诊断技术及其在临床医学中的应用

免疫诊断技术及其在临床医学中的应用

免疫诊断技术及其在临床医学中的应用随着科技的发展,免疫诊断技术在诊治疾病中扮演着越来越重要的角色。

本文将从免疫诊断技术的基础知识、技术特点、应用场景以及未来发展等方面进行讨论,旨在让读者更全面地了解免疫诊断技术及其在临床医学中的应用。

1. 免疫诊断技术的基础知识免疫诊断技术是指利用免疫学原理和技术手段进行疾病的诊断、监测和治疗的方法。

其基础原理在于人体受到病原菌感染时,会产生特异性抗体,通过检测血液、尿液、唾液等样本中的抗体、抗原等免疫成分来判断疾病的存在与否。

目前常见的免疫诊断技术包括酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定(RIA)、荧光免疫分析法(FIA)、免疫印迹法(Western Blot)等。

这些技术在临床应用中具有不同的优缺点,选择合适的方法对于准确诊断和治疗具有至关重要的作用。

2. 免疫诊断技术的技术特点免疫诊断技术具有多种特点,包括高灵敏度、高特异性、非侵入性、快速准确、重复性好等。

由于其基于免疫学原理,可以检测病原体的抗原和抗体等免疫成分,因此在早期病情的诊断和监测上具有重要的作用,可以大大提高疾病诊断的准确性。

另外,免疫诊断技术具有可靠性强、样本来源广泛、操作简便等特点,使得其不仅在临床医学中广泛应用,同时也成为科研领域中的重要工具。

3. 免疫诊断技术的应用场景免疫诊断技术在临床医学中应用广泛,主要应用于以下几个方面:(1)传染病的诊断和监测。

例如:肝炎、结核病、艾滋病、流感、丙型肝炎等传染病的检测及其疫苗的监测等。

(2)肿瘤标志物的检测。

利用免疫诊断技术可以检测肿瘤标志物如CEA、AFP、PSA等,有助于早期发现恶性肿瘤,对治疗和预后有重要的指导意义。

(3)免疫性疾病的诊断。

免疫诊断技术可以检测自身抗体等免疫成分,用于诊断自身免疫性疾病如风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。

(4)药物浓度测定。

免疫诊断技术可以测定药物浓度如抗生素、激素等,对于调整用药剂量和监测药物的疗效有重要的作用。

免疫学检测技术及应用

免疫学检测技术及应用

划痕法
细胞因子的检测技术
一、 生物学检测技术 二、 免疫学检测技术 三、分子生物学检测技术
依赖细胞株测定法 ELISA法
分子杂交、PCR 等检测mRNA
细胞因子检测的特点
• 样品含量低 •样品具有时效性 •生物效应特异性差
Figure 14-12
细胞因子的功能
Cell activation
/immunogold staining)
(一)免疫荧光技术(又称荧光抗体技术) 原理:用荧光素(如异硫氰酸荧光素、罗
丹明B200等) 标记抗体(荧光抗体),用荧光 抗体浸染细胞或组织切片,抗原与荧光抗体 结合,于荧光显微镜下观察荧光,确定被检 抗原的存在。
免疫荧光技术包括:
直接法
间接法
间接补体增强法
ELISA法: 直接法 间接法 双抗体夹心法(双位点法) 竞争法
ELISA
(三) 同位素标记技术(isotope-labelling technique) 放射免疫分析(radioimmunoassay,
RIA) 是一种用放射性同位素分析抗原抗体反应 相结合方法。 优点:灵敏度高, 可检测0.001pg/mL
Direct and indirect immunofluorescence staining of membrane antigen (mAg).
(二)免疫酶技术(immunoenzymatic techniques)
是将抗原抗体反应与酶催化底物的作用 相结合的一种方法。
主要有两种类型: 1.免疫酶染色 2.酶免疫测定(enzyme immunoassay, EIA)
•3H-胸腺嘧啶核苷参入法(3H-TdR): 间接观察DNA 合成含量。灵敏度高,具有放射性。 •四甲基偶氮唑盐法(MTT): MTT商品名为噻唑蓝。 原理:活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶可将外源性 MTT还原成蓝紫色结晶-甲瓒(formazan), DMSO使 其溶解,酶标分析仪检测。简便,灵敏度高,稳定性 差。

免疫学检验技术的研究进展

免疫学检验技术的研究进展

细胞 ,产生 C K或 I。细胞下方 的固相单克隆抗体就会捕获 C g K
1 研 究进展
11 荧光 素 标 记 抗体 技 术 .
或I g物质。 细胞被清洗后 , 加入生物素化 的第二抗体 , 抗体 和 C K
或 I 物质结合后 , g 再加以酶做标记的生物素或亲和素反应 , 以酶 流式荧光免 疫微 球分析技 底物显色 , 阳性细胞就可形成直径约 5 ~2 0 T大小不等的圆 0 0 I I
现 代 免 疫 学 检 验 技术 源 于标 记 技 术 在 免 疫 学 中 的应 用 。科
1 . 酶 联 免疫 斑 点 技 术 .2 2
酶 联 免 疫 斑 点 技 术 是 一 种用 于测 定
技 的进步推动免疫检 验技术 的迅速发展 ,正从单一 的免疫诊断
B细 胞 分 泌 免 疫 球 蛋 白 、 T细胞 分 泌 细 胞 因 子功 能 的分 析 技 术 ,
定 阳性 T B细胞族群 的产生则可以通过斑点直径 的大小 可以直 、 接反映。酶联免疫斑点技术既可用于分泌抗体的 B细胞 , 也可用
于分 泌各 类 C K的 T细胞 。 联 免疫 斑 点 技 术 也是 T细胞 功 能检 酶 测 的标 准 技 术 , 有 较 高 的检 测 灵 敏度 日 具 。
技术 向单细胞 、 多基 因、 微量化等方面发展 。而哮喘 、 器官和骨髓
移植 、 自身免疫性疾病 、 变态反应 、 淋巴细胞和浆细胞 的恶性肿 瘤 以及 继发性 和原 发性免疫 缺陷 的临床诊 断都客 观要求 免疫
学 检 验 技术 更 加 精确 , 且能 够 定 量 评 价 临床 治 疗 的 有 效性 。 并
1 . 元素标记免疫检 验技术 .1 3
元素标记 免疫 检验技术 中的标

免疫学研究进展及应用前景

免疫学研究进展及应用前景

免疫学研究进展及应用前景免疫学研究近年来一直火热,其不断推陈出新的进展和应用前景,也成为了医学研究中备受关注的领域。

本文将从免疫系统的基本原理、免疫学研究的进展以及其应用前景三个方面来进行探讨。

一、免疫系统的基本原理免疫系统是人体体内的一套复杂的防御系统,其主要作用是对抗病毒、细菌、真菌等病原体以及异常细胞的入侵。

免疫系统主要由两类细胞组成,即B细胞和T细胞。

B细胞能够分泌抗体,对外来病原体进行识别并清除;而T细胞则能够直接攻击病原体和异常细胞。

免疫系统的正常功能对人体健康至关重要,而当免疫系统出现异常时,就会引起一系列的疾病。

二、免疫学研究的进展随着科技的不断进步,免疫学研究的进展也越来越快。

其中,以下几个方面的研究成果备受瞩目:1. 免疫细胞的稳定化研究由于免疫细胞的生命短暂和易于受到环境变化的影响,使得免疫细胞治疗的应用效果受到限制。

而随着免疫学研究的深入,科学家们已经成功地研发出了可以稳定免疫细胞的方法,这为免疫细胞治疗的应用提供了新的思路。

2. 免疫检查点治疗的发展免疫检查点治疗被认为是一种创新的治疗方法,其可以激活免疫细胞来攻击恶性肿瘤细胞。

近年来,免疫检查点治疗在癌症治疗领域中的应用获得了越来越多的成功,这也为该领域的研究提供了新的思路。

3. 免疫遗传学研究免疫遗传学是近年来兴起的一门新的研究领域,其主要研究免疫系统与个体基因之间的关系。

通过研究人类的免疫基因组,科学家们可以进一步了解不同人群对疾病入侵的防范能力差异,为疾病预防和治疗提供有力的理论基础。

三、免疫学研究的应用前景免疫学研究的不断进展为医学领域的应用提供了新的思路和机遇。

1. 肿瘤免疫治疗肿瘤免疫治疗因其治疗效果显著而备受瞩目。

通过激活免疫系统,肿瘤免疫治疗可以使肿瘤细胞受到攻击,从而达到治疗效果。

2. 自身免疫性疾病治疗自身免疫性疾病是一类免疫系统失控所致的疾病,其治疗难度较大。

而近年来免疫学研究的发展使得科学家们有可能开发出更有效的治疗方法。

免疫学在医学中的应用与研究进展

免疫学在医学中的应用与研究进展

免疫学在医学中的应用与研究进展免疫学是研究机体抵抗外来病原体、维持内环境稳定的科学,它在医学领域中扮演着重要角色。

近年来,随着科技的不断进步,免疫学在医学领域的应用不断拓展,同时也推动了免疫学的研究进展。

本文将从免疫治疗、疫苗研发和免疫检测等方面探讨免疫学在医学中的应用和研究进展。

一、免疫治疗免疫治疗是利用免疫学理论和技术,通过调节或增强机体免疫功能来治疗疾病的方法。

免疫治疗在癌症的治疗中取得了显著的进展。

免疫检查点抑制剂通过抑制癌细胞对免疫系统的阻抗作用,使免疫系统能够主动攻击并清除癌细胞。

这种治疗方法已被广泛用于黑色素瘤、非小细胞肺癌等多种肿瘤的治疗中。

二、疫苗研发疫苗是一种通过激发机体免疫系统产生特异性免疫防御能力,从而预防和控制传染病的方法。

免疫学在疫苗研发方面起到了至关重要的作用。

传统的疫苗制备基于病原体的灭活或减毒,但这种方法在生产和使用过程中存在一定的难度和风险。

近年来,基因工程和细胞工程技术的发展使得疫苗的研发更为精细和高效。

例如,蛋白亚单位疫苗通过基因工程技术将病原体表面的抗原基因表达于真核细胞中,产生纯净、高效的疫苗。

三、免疫检测免疫检测是利用免疫学原理和技术检测体内抗原或抗体的水平,以达到诊断疾病、监测疫情和评估治疗效果的目的。

近年来,免疫检测技术的不断创新推动了医学诊断的发展。

例如,流式细胞术可以实现对单个细胞的快速、准确分析,有助于研究和诊断免疫相关疾病。

同时,免疫组化技术的广泛应用也为癌症诊断提供了重要手段。

总之,免疫学在医学中的应用与研究进展取得了丰硕的成果。

免疫治疗在癌症治疗中的重要性日益凸显,疫苗研发和免疫检测技术的革新也为医学领域带来了福音。

未来,随着科技的不断进步和学科的不断发展,我们有理由相信免疫学在医学中的应用和研究将会取得更加辉煌的成就。

免疫学检验技术与应用

免疫学检验技术与应用

免疫学检验技术与应用免疫学检验技术作为现代医学领域中的重要组成部分,发挥着至关重要的作用。

通过检测和分析人体免疫系统的相关指标,免疫学检验技术能够帮助医生准确判断患者的疾病类型、病情严重程度,指导临床治疗方案的制定和调整,为患者的康复和治疗提供重要参考依据。

本文将就免疫学检验技术的原理、常见方法和应用进行介绍。

一、免疫学检验技术的原理免疫学检验技术是通过检测人体免疫系统中的特定抗体、抗原或其他免疫分子来判断患者免疫系统功能的一种检验方法。

该技术主要基于人体的免疫应答机制,通过检测免疫系统中特定抗体的产生情况,判断患者是否感染某种疾病或接种过某种疫苗,还可以帮助医生评估患者对某种药物的耐受性和疗效。

免疫学检验技术主要包括免疫荧光法、酶联免疫吸附试验(ELISA)、放射免疫测定法等多种方法。

这些方法可以根据检测的具体目的和样本类型选择合适的技术手段,以达到最佳的检测效果。

二、常见免疫学检验方法及其应用1. 免疫荧光法免疫荧光法是通过标记荧光物质的抗体与待测抗体或抗原结合,再利用荧光显微镜观察标记物质的位置和数量,从而判断待测物质的含量和分布情况。

该方法在临床诊断中常用于自身免疫性疾病、感染性疾病和肿瘤等方面的检测,具有高灵敏度和特异性的优势。

2. 酶联免疫吸附试验(ELISA)ELISA是利用酶标记的抗体与待测物质结合,再加入底物使酶发生化学反应产生发光或颜色反应,从而测定待测物质的含量。

ELISA方法简单、灵敏,适用于大规模的检测和筛查工作,广泛应用于感染病原体、药物浓度、激素水平等多个领域。

3. 放射免疫测定法放射免疫测定法是利用放射性同位素标记抗体与待测物质结合后,通过测定同位素辐射的放射性进行定量检测的一种方法。

该方法具有极高的灵敏度和准确性,广泛应用于体液激素、肿瘤标志物、免疫球蛋白等物质的检测。

除了以上介绍的几种常见方法,还有流式细胞术、凝集试验、凝血酶法等多种免疫学检验技术,它们在不同的领域和疾病诊断中发挥着重要作用,为医学诊断与治疗提供了有力的支持。

免疫学的最新研究进展

免疫学的最新研究进展

免疫学的最新研究进展免疫学是研究机体免疫系统、免疫反应和免疫调节的科学领域。

近年来,免疫学领域取得了许多重要的研究进展,为人类的健康和疾病治疗提供了新的方向和可能性。

本文将介绍免疫学的最新研究进展,并分析其在临床应用中的前景。

一、免疫细胞治疗免疫细胞治疗是一种通过调节或改变机体免疫系统来治疗疾病的新型疗法。

其中最著名的就是CAR-T细胞治疗,即通过改造患者自身的T细胞,使其在体外表达特定受体,然后再重新注入患者体内,以增强患者免疫系统对抗癌症的能力。

这一疗法已经在多种恶性肿瘤治疗中取得了显著的疗效,为晚期癌症患者带来了希望。

二、肠道微生物和免疫系统的相互作用肠道微生物组是指人体消化道中居住的各种微生物群落。

它们与人体的免疫系统存在着复杂的相互作用关系。

最新研究表明,肠道微生物组的失调可能会导致免疫系统异常激活,从而引起一系列炎症性疾病,如炎症性肠病和自身免疫性疾病。

因此,通过调节肠道微生物组的平衡,可能可以预防和治疗这些疾病,并提高免疫系统的整体功能。

三、单细胞免疫组学传统的免疫学研究通常是基于大量细胞的平均表达水平进行分析,忽略了不同细胞在免疫反应中的异质性。

而单细胞免疫组学的发展,使得研究人员能够对单个免疫细胞进行深入的分析。

这一技术的出现不仅提供了免疫系统的全景图,还发现了许多以前未知的细胞亚群和新的免疫细胞类型,这对于研究免疫反应的调控机制、发现新的免疫疗法具有重要意义。

四、免疫检查点抑制剂免疫检查点抑制剂是一类能够抑制肿瘤对免疫系统的抑制信号的药物。

这类药物在近年来的临床应用中取得了显著的突破,被认为是肿瘤治疗的一大进展。

免疫检查点抑制剂可以激活患者自身的免疫系统,增加对肿瘤细胞的攻击力,从而达到治疗肿瘤的效果。

它不仅被应用于多种恶性肿瘤的治疗,还显示出在肿瘤预防、治疗其他疾病(如感染性疾病和自身免疫性疾病)方面的潜力。

五、疫苗设计与新型疫苗的开发免疫学的另一个重要进展是疫苗设计与新型疫苗的开发。

临床医学中的免疫学研究进展

临床医学中的免疫学研究进展

临床医学中的免疫学研究进展近年来,免疫学在临床医学领域中的研究进展取得了显著成果。

免疫系统是人体自身抵御疾病入侵的关键,对于疾病的预防和治疗具有重要意义。

本文将重点介绍临床医学中免疫学研究的一些新进展。

1. 免疫治疗在肿瘤领域的应用肿瘤免疫疗法是近年来免疫学研究的热点之一。

通过激活或调节患者自身的免疫系统来对抗癌细胞,已经成为肿瘤治疗的一个重要手段。

免疫检查点抑制剂是其中的代表性成果,这类药物通过阻断免疫检查点分子的作用,提高患者免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤作用。

该疗法在多种恶性肿瘤治疗中取得了显著疗效,如肺癌、黑色素瘤等。

2. 免疫治疗在自身免疫性疾病中的应用自身免疫性疾病是免疫系统异常攻击人体自身组织的疾病,如类风湿关节炎、多发性硬化症等。

传统的治疗方法主要是抑制免疫系统活性,但副作用较大。

免疫治疗作为一种新兴治疗手段,通过调节免疫系统的平衡,既可以减少对自身组织的攻击,又不会完全削弱免疫力。

例如,通过使用抗体来调节炎症因子的作用,已经在临床上取得了一定的疗效。

3. 免疫诊断在感染病的应用免疫学在感染性疾病的诊断中有着广泛的应用。

传统的诊断方法主要依赖于致病微生物的培养和特异性抗体反应的检测。

然而,这些方法存在时间长、操作繁琐和准确性不高的问题。

免疫诊断技术的发展弥补了这些不足,例如,利用PCR技术检测病原体的核酸,可以快速准确地确定感染病原体的种类和数量。

此外,还有许多新兴技术如蛋白质芯片和免疫传感器等,为感染病的快速检测提供更多选择。

4. 免疫工程药物的研发免疫工程药物是指通过基因工程技术改造蛋白质分子结构,使其具有特定的免疫活性。

这种药物可以模拟天然免疫物质的作用,扩展其治疗范围和效果。

免疫工程药物的研发涵盖了多个领域,如抗体药物、细胞治疗和疫苗等。

例如,单克隆抗体药物已经成为多种疾病的有效治疗药物,如风湿性关节炎和白血病等。

同时,基因编辑技术的发展也为免疫工程药物的研发提供了新的思路和方法。

免疫学检验技术的研究与应用

免疫学检验技术的研究与应用

免疫学检验技术的研究与应用免疫学检验技术是一种用于识别和量化人体内某些物质的分析方法。

这些物质可能是病原体、细胞表面标志物、蛋白质、激素等。

免疫学检验技术广泛应用于临床诊断、药物开发、基础研究等领域。

本文将介绍免疫学检验技术的基本原理、分类、优势以及未来研究方向和应用前景。

一、免疫学检验技术的基本原理免疫学检验技术的基本原理是利用免疫反应中特异性结合的原理,即抗原和抗体之间的结合。

免疫学检验技术主要分为两种类型:直接免疫法和间接免疫法。

直接免疫法是直接检测抗原,利用标记的抗体来检测待测物。

间接免疫法利用待测物作为抗原,检测与待测物特异性相对应的抗体。

常用的标记技术包括放射性同位素标记、酶标记、荧光标记等。

二、免疫学检验技术的分类免疫学检验技术主要可以分为下面几种类型:1. 免疫荧光技术免疫荧光技术是一种基于黏附于细胞表面的抗原和配对的荧光色素标记抗体之间的相互作用而建立的免疫试验法。

它可用于人类血液和组织的分子诊断,例如流感病毒、人类免疫缺陷病毒等。

2. 酶联免疫吸附测定法 (ELISA)ELISA是一种广泛应用的酶标记技术,其原理是将已知抗原或抗体附加在一种固体的基质上,使之便于识别。

它不仅能鉴定多种抗原和抗体,还可测定某些化学物质如激素、酶、细胞因子等,是目前临床和科研领域最常用的免疫学检验技术之一。

3. 免疫电泳技术免疫电泳技术是指先将蛋白质电泳分离,然后用识别特定蛋白质的抗体进行检测的方法。

它可用于检测肝病、血液疾病等多种疾病。

达成良好的信号和灵敏度的结果的基础在于平衡电场、硅胶不对称性、像淬火等过程的优化。

三、免疫学检验技术的优势1、高度特异性:免疫学检验技术基于抗原和抗体的特异性结合,能够高度准确地检测某种分子。

与其他检测技术相比如酶促荧光测定,免疫学检验技术具有更高的特异性。

2、高度灵敏性:免疫学检验技术可用于检查非常少量的生物分子。

例如,在HIV感染者的血液中检测HIV抗体,其灵敏度可达到非常关键的20 cd4 / mm3或更少。

免疫学检测技术及应用概述

免疫学检测技术及应用概述

免疫学检测技术及应用概述免疫学检测技术的原理是利用机体产生的特异性抗体与抗原之间的特异性结合反应。

当机体感染病原体或注射外源性抗原后,免疫系统将识别并生成相应的抗体。

免疫学检测技术通过将已知的抗原与待测物进行结合,利用特异性抗体识别和测定待测物的存在与含量。

常见的免疫学检测技术包括免疫荧光、酶联免疫吸附法(ELISA)、放射免疫分析法(RIA)、免疫电泳、免疫印迹等。

其中,免疫荧光是一种通过将荧光标记的抗体与待检测物结合后,利用荧光显微镜观察来检测抗原或抗体的存在。

ELISA是一种通过将待检测物与酶标记的抗体结合,再利用底物与酶反应来产生颜色变化,通过光密度计读取颜色变化程度来测定待检测物的含量。

RIA则是通过将放射性同位素标记的抗体与待检测物结合,再通过放射性测定来确定待测物的含量。

免疫学检测技术在临床诊断中被广泛应用。

例如,通过检测病毒或细菌感染所产生的特异性抗体,可以确定患者是否感染此病原体。

免疫学检测还广泛用于肿瘤标志物的检测,根据肿瘤细胞产生的特异性抗原来判断肿瘤的存在与发展程度。

此外,免疫学检测还可用于血型鉴定、妊娠检测、自身免疫性疾病等多个方面的诊断。

免疫学检测技术在生物学研究中也发挥着重要作用。

例如,在分子生物学研究中,通过检测特定的抗体可以确定蛋白质的表达和定位,从而理解其功能。

免疫学检测还可以用于研究免疫系统的功能和异常情况,为疾病的治疗和预防提供参考。

在药物研发中,免疫学检测技术可以用于药物的安全性和有效性评估。

例如,通过检测特定抗体的产生,可以评估疫苗的免疫效果。

免疫学检测技术还可以用于药物代谢和药物动力学研究,为药物的合理应用提供依据。

总之,免疫学检测技术是一项重要的分析和检测技术,广泛应用于临床诊断、生物学研究和药物研发等领域。

随着技术的不断发展,免疫学检测技术将继续发挥其在疾病诊断、药物研发和生物学研究中的重要作用。

论免疫学诊断技术的发展现状及趋势

论免疫学诊断技术的发展现状及趋势

论免疫学诊断技术的发展现状及趋势免疫学是研究宿主免疫系统识别并消除有害生物及其成分的应答过程及机制的科学。

近几十年来,随着生物医学的研究进展,免疫学以其独特的优势有力的推动了医学和生物学中各个领域的发展。

人们对免疫的本质有了更加全面的认识。

目前,免疫学已经成为医学和生物学领域的带头学科之一。

它主要包括以下内容:免疫系统的组织结构,免疫系统对抗原的识别及应答,免疫系统对抗原的排异效应及其机制,免疫耐受的诱导、维持、破坏及其机制等。

医学免疫学既是一门生物科学,又是一门医学应用科学,是医学工作者必修的基础课程。

除学习和掌握基础免疫学知识外,还要学习与临床相关的免疫学问题,为学习其它基础医学、临床医学及预防医学奠定坚实的基础。

应用免疫学的理论、技术和方法诊断各种疾病和测定免疫状态。

在医学上,它是确定疾病的病因和病变部位,或是确定机体免疫状态是否正常的重要方法。

此外,还应用于法医学的血迹鉴定、生物化学的血清成分鉴定和物种进化关系的研究等。

可在体内和体外进行。

从免疫学的角度免疫诊断可应用于①检查免疫器官和功能发生改变的疾病:如免疫缺陷病、自身免疫病;②由免疫机制引起的疾病:如输血反应、移植排斥反应;③一些内分泌性的疾病:从临床学的角度来说,免疫诊断可应用于检查传染性疾病、免疫性疾病、肿瘤和其他临床各科疾病。

就所检测的反应物免疫诊断大致可以分为两类,即①免疫血清学诊断:检测病人血清或组织内有无特异性抗体或特异性抗原;②免疫细胞学诊断:测定病人细胞免疫力的有无和强弱。

免疫诊断须体现3项要求:①特异性强,尽量不出现交叉反应,不出现假阳性,以保证诊断的准确性;②灵敏度高,能测出微量反应物质和轻微的异常变化,有利于早期诊断和排除可疑病例;③简便、快速、安全。

过敏性哮喘的基本病理学改变是气道炎症,属于变应性炎症的性质,因此,过敏性哮喘的免疫学诊断可从“过敏”和“炎症”着手,围绕过敏性哮喘的本质,做病因诊断和气道炎症及其严重程度的判断。

免疫学的基本研究内容及研究进展-免疫学论文-基础医学论文-医学论文

免疫学的基本研究内容及研究进展-免疫学论文-基础医学论文-医学论文

免疫学的基本研究内容及研究进展-免疫学论文-基础医学论文-医学论文——文章均为WORD文档,下载后可直接编辑使用亦可打印——免疫学是研究人体免疫系统结构和功能的科学,主要探讨免疫系统识别抗原后发生免疫应答及清除抗原的规律,并致力于阐明免疫功能异常所致疾病的病理过程及其机制。

免疫学的基本理论和技术是诊断、预防和治疗某些免疫相关疾病的基础。

免疫学在生命科学和医学中有着重要的地位。

由于细胞生物学、分子生物学和遗传学等学科与免疫学的交叉和渗透,免疫学已成为当今生命科学的前沿学科和现代医学的支撑学科之一。

机体通过完善的免疫系统来执行免疫功能。

免疫系统包括免疫器官、免疫细胞和免疫分子。

免疫系统除了能够识别和清除外来入侵的抗原(如病原生物)外,还可识别和清除体内发生突变的肿瘤细胞、衰老的细胞或其他有害的成分。

机体的免疫功能可以概括为免疫防御、免疫监视和自身稳定三个部分。

(1)免疫防御免疫防御是指机体防止外界病原体的入侵,清除已入侵的病原体和其他有害物质的功能。

免疫防御功能过低或缺乏,可发生免疫缺陷病。

但若应答过强或持续时间过长,则在清除病原体的同时,也可导致机体的组织损伤或功能异常,发生超敏反应。

(2)免疫监视免疫监视是指随时发现和清除体内出现的非己成分的功能,如清除由基因突变而发生的肿瘤细胞以及衰老、凋亡细胞等。

免疫监视功能低下,可能导致肿瘤发生和持续性病毒感染。

(3)自身稳定自身稳定是指通过自身免疫耐受和免疫调节两种主要的机制来达到免疫系统内环境稳定的功能。

一般情况下,免疫系统对自身组织细胞不产生免疫应答,称为免疫耐受。

这赋予了免疫系统区别自身和非己的能力。

一旦免疫耐受被打破,免疫调节功能紊乱,就会导致自身免疫病和过敏性疾病的发生。

免疫学的基本研究内容可概括为以下几个方面。

(1)基础免疫学基础免疫学研究免疫应答的基本过程、特性和分子与细胞机制。

免疫应答分为三个阶段,即识别阶段、活化增殖阶段和效应阶段。

大量已知和未知的免疫细胞亚群和免疫分子参与到免疫应答的各个阶段,并形成立体调控网络。

免疫学检测新技术在临床检验中的应用与进展

免疫学检测新技术在临床检验中的应用与进展

免疫学检测新技术在临床检验中的应用与进展免疫学检验是依据免疫学原理,尤其是抗原与抗体反应原理,利用各种敏感的标记、示踪技术,超微量地、特异地分析检测各种生理的和病理的免疫学指标,包括体液的(抗体、细胞因子等)和细胞的(各种效应细胞),进行疾病的诊断、疗效的评估和预后判断的一组医学检验项目[1]。

因此,免疫学检验是构筑基础免疫学与临床免疫学之间的桥梁,是临床医生借以研究疾病的技术手段。

但是由于免疫反应的特殊性及复杂性使许多试验技术操作繁杂、耗时,难以适应临床诊断、治疗的需要。

近年来随着生物和生命科学的迅猛发展,操作的自动化以及新技术新材料的应用,为免疫学快速检验技术的发展带来了新的契机,极大地促进了免疫技术的发展与更新。

现就免疫学检验中的快速检测技术应用与进展作一简要综述。

1 传统的免疫学快速检验技术传统的免疫学检验即血清学试验,主要是通过观察沉淀物的形成、扩散、凝集及溶血现象的发生以及测定来分析待测样品中抗原或抗体的有无及含量,如沉淀反应、凝集反应、溶血反应、中和反应及补体结合反应等。

这些检测方法均为手工操作,大都操作步骤烦琐,需时较长。

而其中的快速检验技术有代表性的当属传统的梅毒快速诊断试验。

1.1 快速血浆反应素环状卡片试验(RPR) RPR是20世纪80年代问世的非特异性梅毒血清学试验。

RPR法检测血清中非特异性抗体即反应素。

所用抗原为标准的牛心肌脂抗原,抗原中加有活性炭颗粒,检测时直接将试剂与血浆(或血清)在卡片上混匀,摇动8分钟观察结果。

该方法操作简便、迅速、结果容易判定。

RPR滴度变化是观察治疗效果、复发、或再感染的重要指标[2]。

但其特异性较差,孕妇、疟疾、乙肝、系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎等疾病时可出现生物学假阳性反应,因此阳性结果常需要做确证试验后最后诊断。

1.2 甲胺苯红不加热血清反应素实验(TRUSR) 其原理与RPR相同,以甲胺苯红染料颗粒代替活性炭颗粒作为指示物,实验结果清晰易读,简便快速,稳定性好。

免疫学检验技术应用的研究进展

免疫学检验技术应用的研究进展

免疫学检验技术应用的研究进展【摘要】现代免疫学技术广泛运用于医疗机构的检验中,文中从荧光素标记的免疫测定,酶标记免疫测定等方面,探索了免疫学检验技术应用的研究进展情况,旨在为免疫学检验技术的应用提供技术参考。

【主题词】医学检验;免疫学;技术应用;研究;进展现代免疫学起源于标签技术的开发。

1941年Coons等人创建了荧光素标记抗体技术之后,Yalaw等人在1950年代后期到1960年代初期确立了放射免疫分析技术[1]。

1966年,法国和美国学者同时又报告了酶免疫测定法。

另一种传统的标记技术是胶体金标免疫,发展于20世纪80年代,除了免疫电子显微镜检查的应用外,免疫过滤和免疫层析试验也被广泛使用。

此外,科学家还发现了一些新的标记免疫技术,如元素标记、核酸标记、量子点标记免疫测定技术等。

从这些技术中衍生出来的实验方法,有些已被广泛应用于临床免疫学检查,而有些仍处于研究和探索阶段[2]。

本文主要对免疫学检验技术的应用以及研究进展做综述,报告过程与结果如下:1荧光素标记的免疫测定技术1.1 间接免疫荧光技术(IFA)。

此技术作为细胞内抗原定位和对应抗体检测的“金标准”,从很早以前就开始使用,适用于筛选实验,主要使用抗核抗体(ANA)、抗ds-DNA抗体、抗平滑肌抗体。

(AS-MA)和抗平滑肌抗体(AS-MA)。

检测自身抗体(如中性粒细胞细胞质抗体)和特定病原体(EB病毒、SARS病毒、军团菌、其他呼吸道病原体)的抗体。

完全自动的操作系统已经商品化了。

其技术特点是减少手动操作可能引起的偶发错误,改善免疫测试的标准化和自动化,减少实验所需要的时间。

1.2 流式细胞免疫荧光分析(FCM)技术。

该技术借鉴荧光抗体和血细胞分析装置的原理,并利用相对细胞数从绝对数量从膜组成,细胞组成,细胞内单色荧光到多色荧光的开发经验,并免疫分子表达型过程和统合分析型表达的组合,是为细胞分析和筛选的最重要的工具。

在细胞表型分析、DNA含量和细胞周期分析、细胞内和核膜组成分析和细胞分选等领域中有着非常广泛的用途。

临床分析中的免疫学检测技术研究进展

临床分析中的免疫学检测技术研究进展

临床分析中的免疫学检测技术研究进展免疫学检测技术在临床分析中的应用广泛,为疾病诊断、预后评估和治疗策略制定提供了重要依据。

随着科技的不断进步,免疫学检测技术也在不断发展和完善。

本文将对近年来临床分析中的免疫学检测技术研究进展进行探讨。

一、流式细胞术流式细胞术是一种常见的免疫学检测技术,它通过对细胞表面分子的荧光标记,结合激光扫描和计算机分析,可以对细胞进行准确快速的分析。

近年来,流式细胞术在临床分析中的应用得到了广泛关注。

例如,流式细胞术可以用于研究免疫细胞亚群的分布和功能,对某些免疫相关疾病的诊断和治疗具有重要意义。

二、ELISA技术ELISA(酶联免疫吸附实验)是一种高度敏感、特异性强的免疫学检测技术。

它通过将待测物抗原或抗体与酶标记的试剂结合,然后通过底物的酶法反应来检测目标分子的含量。

ELISA技术广泛应用于临床分析领域,如肿瘤标志物检测、感染性疾病的诊断和药物浓度的监测等。

三、免疫组化技术免疫组化技术通过对组织标本中的特定蛋白进行染色和检测,来评估组织中相应蛋白的表达情况。

免疫组化技术在癌症诊断和分子病理学研究中广泛应用。

它不仅可以区分不同类型的肿瘤,还可以评估肿瘤的分级和预后。

随着免疫组化技术的发展,越来越多的免疫标记物被用于临床分析中,为疾病的早期筛查和治疗提供了重要参考。

四、免疫荧光技术免疫荧光技术是通过标记抗体或抗原的荧光物质来进行免疫学检测的一种方法。

它具有高度特异性和灵敏性,是疾病诊断和免疫细胞识别的重要工具。

免疫荧光技术在自身免疫性疾病、感染性疾病和器官移植等方面的应用得到了广泛研究和推广。

五、蛋白质芯片技术蛋白质芯片技术是一种高通量的免疫学检测技术,可以在一个小的芯片上同时检测成百上千个蛋白质的表达水平。

蛋白质芯片技术在研究蛋白质组学、蛋白质互作和生物标志物鉴定方面具有重要的应用。

在临床分析中,蛋白质芯片技术可以用于疾病早期诊断、个体化治疗和预后评估等方面。

六、单细胞技术传统的免疫学检测技术主要依赖于大量的细胞样本,而单细胞技术可以对单个细胞进行分析,为细胞免疫学研究提供了新思路。

免疫学研究方法和技术进展

免疫学研究方法和技术进展

免疫学研究方法和技术进展免疫学作为生物学的重要分支之一,研究生物体对抗病原体的免疫防御机制。

在当前疫情形势下,免疫学的研究变得更加重要。

本文将介绍免疫学研究中的一些方法和技术进展。

一、流式细胞术流式细胞术是一种常用的免疫学研究方法,可以用于细胞表面标记物的定量和检测。

它基于细胞表面的抗原与特异性抗体结合的原理,通过荧光染料或荧光标记的抗体识别细胞特定标记物,然后在流式细胞仪中通过光学系统进行分析和测量。

流式细胞术可以对单个细胞进行高通量检测和分析,对于研究免疫细胞亚群的功能和免疫反应的动态变化非常有价值。

二、ELISA技术酶联免疫吸附试验(ELISA)是一种常用的免疫学研究技术,用于检测和定量测量特定抗原或抗体的存在。

ELISA技术基于特异性抗原与抗体之间的结合反应,通过酶标记的二抗使抗原-抗体复合物与底物发生反应,产生比色或荧光信号。

ELISA技术广泛应用于疾病诊断、疫苗研发和药物筛选等领域。

三、多肽芯片技术多肽芯片技术是一种高通量的免疫学研究方法,用于筛选和识别免疫相关的抗原。

它基于小分子多肽片段与抗体的特异性结合,通过将多肽片段固定在芯片上,与待测血清或抗体相互作用,然后通过荧光或质谱等方法进行检测和分析。

多肽芯片技术在疫苗研发、免疫应答的全面分析等方面具有广阔的应用前景。

四、CRISPR-Cas9基因编辑技术CRISPR-Cas9是一种革命性的基因编辑技术,在免疫学研究中得到了广泛应用。

它基于CRISPR(Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats)序列和Cas9(CRISPR associated protein 9)酶的特异性识别和切割DNA的能力,可以用于精确编辑特定基因。

在免疫学研究中,CRISPR-Cas9技术被用来研究免疫细胞的功能和基因调控机制,为理解免疫应答提供了有力的工具。

五、单细胞RNA测序技术单细胞RNA测序技术是一种新兴的高通量分析技术,被广泛应用于免疫学研究领域。

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素的同时检测。尽管∞作为荧光标记物在免疫测定中的研究才刚刚起步。但结果己显示了在多种项目
同时测定的优势。因此,该技术在诸如生物多组分同时测定、免疫示踪定位、细胞成像及疾病早期诊 断中将有广泛的应用前景。 4.其他新型分析技术平台 4.1微阵列免疫芯片技术:以微阵列为基础的免疫芯片技术是一种高通量、微型化和自动化的蛋 自质分析方法,有别于一般的DNA芯片技术,其原理类似于ELISA的实验模式.主要是基于抗原与抗体特 异性结合反应来设计的,所测目的分子仅有结构上的专一性,而无序列特异性””。该技术预先将基因 重组蛋白或从组织细胞中分离纯化的抗原(如蛋白质、DNA或磷脂分子等)或单克隆抗体分子有序排列
(radioimunoassay,RIA)技术,1986年由美国和法国学者又同时报道建立了酶免疫测定技术(enzyme
imunoassay,EIA),包括:酶免疫组化技术,固相酶免疫测定(如ELIsA,western blotting)和均相酶免
疫测定(又称酶放大免疫分析技术,EMIT)。另一传统标记技术为胶体金标记免疫分析始于上个世纪80 年代.除应用于免疫电镜外,广泛用于免疫渗滤和免疫层析试验”’。除此之外,目前又相继报道建立了 一些新型标记免疫测定技术,如元素标记免疫测定,核酸标记免疫测定和量子点标记免疫测定技术。这 些技术及由此衍生的实验方法有些已在临床免疫学检验中得到了广泛的应用,有些尚处于研究和探索 阶段。本文主要就相关技术的应用及进展综述如下。 1.荧光素标记的免疫测定技术 1.1同接免疫荧光技术(IFA)长期以来用作细胞内抗原定位或相应抗体检测的“金标准”,适合用
于激光共聚焦显微镜或荧光显微镜观察结果。其技术特点是减少手工操作可能造成的偶然误差,提高
了免疫试验的标准化和自动化程度,缩短了实验所需的时间。 1.2流式细胞免疫荧光分析(Fcjl)该技术借鉴了荧光抗体与血细胞分析仪原理,经历了从相对细 胞计数到绝对细胞计数.从细胞膜成份到细胞内成份,从单色荧光到多色荧光的发展历程,并将分子 表型与免疫表型分析相结合,因而成为细胞分析和分选的重要工具”1。其工作流程包括标本处理与荧
疫分析(TrFIA)和钉元素(Ru)作为标记物的电化学发光免疫分析(EcLIA)。TrFIA除有测定范围宽,试剂
稳定,测定速度快.灵敏度和特异性高外.还可通过双标记进行两种指标的同时测定…。由
Roche—Boehringer
Mannheim开发的EcLIA技术,其特点是元素钌可以在电场作用下反复被激发而使信
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免疫学测定技术的应用与研究进展
虞伟(南京军区南京总医院解放军临床检验医学研究所,南京210002) 现代免疫学测定技术源于标记技术的发展。继1941年coons等创立荧光素标记抗体技术
(fluorescent antibody technique)以来,上个世纪50年代末60年代初,Yalo-等创立了放射免疫分析
作筛查实验,主要用于抗核抗体(ANA)、抗ds—DNA抗体、抗平滑肌抗体(_^s姒)、抗中性粒细胞胞浆抗体
(ANCA)等自身抗体,及某些病原体如EB病毒、SARS病毒、军团菌及其他呼吸道病原体抗体的检测等”’…。 目前已有商品化的全自动操作系统,可以自动完成对样品的稀释、加样、温Βιβλιοθήκη 、洗涤等过程。最后借助assa
y,ELISA)理论上只要能获得某一抗
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原纯品或相应的抗体制剂,即可对其相应的抗体或抗原进行ELISA测定。因此,几乎所有的可溶性抗原、 抗体系统均可用该技术进行检测,其特点是实验结果具有较高的敏感性和特异性,最小可测值达ng甚 至pg承平,但易受诸多测定因素(如包被抗原、抗体的质量,徽孔板表面的吸附性能等)的干扰。与 放射免疫分析相比.ELISA技术优点是标记试剂相对比较稳定,且无放射性危害。因而在血源病原体(抗 原平¨抗体),体液中各种微量蛋白(肿瘤标志物,细胞因子,小分子激素,自身抗体和某些毒品、药物 等)方面均有着广泛的应用…。除手工操作外.目前已有自动化的酶免疫分析系统(有开放和封闭式 两种类型),可根据需要选择合适的或与仪器配套的试剂使用。 2.2以酶标记为基础的免疫印迹和免疫斑点技术免疫印迹(imunoblotting,IB)和免疫斑点 (immunodot,ID)测定是两种密切相关而又有所不同的分析技术,前者是将组织、细胞或细菌裂解物的
结合的HLA分子,使之形成HLA一肽复合物,进一步生物素化后再与特定荧光素(如PE)标记的链霉亲合素 按照一定比例混合,如此构建的四聚体即可通过其本身删C分子提呈的表位肽与T细胞表面的TcR进行
精确识别和高亲和力结合而达到检测抗原特异性T细胞的目的”1。由其衍生的主要技术类型包
括:(1)-田C一肽四聚体流式细胞术.特点是快速、敏感、特异,可计数所有抗原特异性T细胞,不管这些 细胞是原始的或效应的,有功能的或无功能的:(2)原位删c一肽四聚体染色法(IsT),又可分为直接法和 问接法两种,用于组织切片染色,检测抗原特异性T细胞在空间和时间上的分布:(3)删c一肽四聚体磁 分离技术,分离的抗原特异性T细胞可用于进一步分析其生物学功能:(4)瑚c_肽四聚体ELIsA

m大小不等的圆形斑点”’。每一个斑点对应分泌Ig或cK的一个细胞,斑
点直径的大小直接反映特定阳性B、T细胞簇群的产能。
该技术除最初用于检测分泌抗体的B细胞外,更多的则是用于检测T细胞各类cI【的分泌状况.因此・ ELIsDot已成为当今免疫学研究中T细胞功能测定的标准技术。其优点在于提供了一个接近于体内的实 验环境,在几乎自然生理条件下。观察单个细胞分泌免疫活性物质的进程。能检出频率为百万分之一
光染色,激光聚焦检测,流动控制,信号的处理与放大,以及计算机分析和结果打印。在细胞表型
(celluar phenotype)分析、DNA含量与细胞周期分析、细胞内及核膜成分分析及细胞分选等领域有着 广泛的应用。 1.3以荧光标记为基础的四聚体分析技术该技术主要是基于删C/抗原肽复合物与T细胞表面受体 (TcR)相互作用的原理而设计的。首先选择某一抗原特异性T细胞所识别的抗原表位肽以及与该表位肚
特异性变应原(IgE作用的靶抗原)等项目的检查”1。除定性检查外,实验中还可对其显色条带或斑点
进行扫描,以报告其定量测定结果。 2.3酶联免疫斑点技术(enzyⅢe一1jnked i∞unospot。ELIspot) ELIspot是在ELISA方法的基础上
发展起来的一种用于测定B细胞分泌免疫球蛋白(i咖unoglobulin,Ig)、T细胞分泌细胞因子 (cytokine,CK)功能的分析技术,为定量ELISA技术的延伸和发展。其原理和实验设计是在微孔培养 板底部包被特异性抗某种Ig或cK的单克隆抗体。待检测的外周血单个核细胞(PB毗)加入到微孔板内
种目的分子(包括自身抗体或其他微量蛋白)实施高通量的平行检测与分析。由我国自行开发研制的 多肿瘤标志物蛋白芯片检测系统,采用固相单克隆抗体制作的微阵列可对12种不同的肿瘤标志物进行
同时检测,其优点是可同时检测多种肿瘤标志物.提供相对全面和客观的临床信息,作为其他肿瘤诊 断技术的补充““。用于病原体感染诊断的结核杆菌蛋白芯片则是将3种结核分枝杆菌(TB)特异性抗原
培养。在特异性抗原或有丝分裂原的作用下,数小时内记忆型B细胞或T细胞即活化并分泌Ig或cK,当
即就被位于细胞下方的固相单克隆抗体所捕获。洗去细胞后。被捕获的Ig或细胞因子与随后加入的生 物素化第二抗体结合,再加入酶标记的亲合素与生物素反应,以酶底物显色.阳性细胞即可在固相板 底的局部形成直径约50~200
置日1性、阴性和空白对照。为实现不同实验者或实验室检测结果的可比性,还需有一种定量的质控系
统。目前,国际上多采用核心参比实验室的质控方法。即以核心参比实验室的质控细胞为质控品,对 本实验室的结果进行质量控制。 3.以新型标记物为基础的免疫测定技术
3.1元素标记免疫测定技术主要有以镧系元素(如EuITb”或Sm”等)作为标记物的时间分辨荧光免
法:(5)删c-肽四聚体分子微阵列技术。上述以荧光标记为基础的四聚体分析技术均已应用于病毒(如
HBV、HcV和HIV等)抗原、肿瘤抗原特异性T细胞和自身免疫病相关的自身反应性T细胞(ART)的测定和
研究中。 2.酶标记免疫测定技术(EIA) EIA目前仍为临床免疫学实验室最广泛应用的实验技术之一,由此衍生出的常用技术和新方法主要 有如F几种. 2.1酶联免疫吸附试验(enzyⅢe—linked imunosorbant
并同定在芯片表面制成微阵列.对背景封闭后即可与血清样本反应,捕获样品中对应的目的分子,再
加入荧光素标记的第二抗体进行反应(若采用酶标记的二抗反应,则需用特异性底物/色原溶液呈色)。 最后用ccD(charge-coupled device)照相技术与激光扫描系统获取阵列图像,利用专门的计算机软
件进行图像处理和结果分析。该法突出的优点在于减少了被检样本和试剂的用量,可对血清样本中多
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灵敏度””。而转录翻译则是将编码酶(如荧火虫荧光酶和B一半乳糖苷酶a肽)的DNA片段标记抗体, 抗原抗体固相反应后再对DNA进行细胞外转录翻译成相应的酶进行测定…。由于1个DNA分子经转录可得 到多个mRNA分子,同时1个RNA分子经翻译又可生成数个蛋白质分子,因此也具有很高的测定敏感性。 但这类技术目前尚处于探索和研究阶段.也无现成的商品试剂盒供应。 2.3量子点标记免疫测定技术量子点(quantm dots.QD)又称半导体纳米微晶粒(semiconductor nanocrystal),通常是由IIB和ⅥA族元素组成,目前研究较多的主要是CdX(X=S、Se、Te).粒径范 同为2~20 m。1998年美国加州伯克利大学的A1ivisatos“”和印地安纳大学的Nie等““所在的研究小 组同时在science上发表相应的研究成果,最早提出了量子点作为生物标记物的设想。因量子点为多电 子体系,发光效力远高于单个分子,稳定性能亦高出荧光染料分子的100倍,且不同粒径量子点受同一 求光激发可产生不同颜色的荧光。因此,QD具有良好的光电性能、尺寸效应和高通量应用的潜能,并 将有可能取代传统染料成为新一代荧光标记物。最近,Goldman等“”分别用不同颜色的量子点标记抗 蓖麻毒素、霍乱毒素、志贺菌毒素l和葡萄球菌肠毒素B的抗体,在同一块微孔板上实现了对上述4种毒
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