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妇血康胶囊中原儿茶酸的含量测定

妇血康胶囊中原儿茶酸的含量测定

妇血康胶囊中原儿茶酸的含量测定【摘要】本研究旨在测定妇血康胶囊中原儿茶酸的含量,探讨其在中药中的含量特征。

通过样品制备,使用特定仪器与试剂,建立测定方法,对原儿茶酸进行浓度分析。

结果显示,妇血康胶囊中原儿茶酸的含量为X mg/g,为保证分析准确性,数据得到统计处理。

影响因素分析表明样品制备过程中的关键步骤对测定结果有重要影响。

综合结果,妇血康胶囊中原儿茶酸的含量测定具有一定研究意义,可为产品质量控制提供科学依据。

未来研究可进一步探讨不同产地、储存条件等因素对原儿茶酸含量的影响,完善测定方法,提高准确性和稳定性。

【关键词】妇血康胶囊、儿茶酸、含量测定、样品制备、仪器与试剂、测定方法、结果分析、数据统计、影响因素分析、砠究展望。

1. 引言1.1 研究背景妇血康胶囊是一种常用的中药制剂,广泛用于妇科疾病的治疗。

其中原儿茶酸作为其中的一种主要有效成分,在药效中起着重要作用。

目前对于妇血康胶囊中原儿茶酸含量的测定方法尚不够完善,存在着一定的不确定性。

本研究旨在对妇血康胶囊中原儿茶酸的含量进行准确测定,为其质量控制提供科学依据。

原儿茶酸是妇血康胶囊的重要药效成分之一,具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种药理活性。

准确测定妇血康胶囊中原儿茶酸的含量,不仅有助于确保药效的稳定性和有效性,也有助于加强对其药理作用机制的研究。

当前市面上针对原儿茶酸的测定方法主要是基于色谱分析技术,如高效液相色谱、气相色谱等。

但是由于原儿茶酸在化学性质上的特殊性,存在一定的分析方法上的挑战。

有必要对妇血康胶囊中原儿茶酸含量的测定方法进行深入研究和改进。

1.2 研究目的研究目的是为了准确测定妇血康胶囊中原儿茶酸的含量,以确保产品的质量和安全性。

原儿茶酸是一种重要的生物活性成分,具有抗氧化、抗炎、抗肿瘤等多种功效。

了解妇血康胶囊中原儿茶酸的含量对于评价产品的药效和安全性非常重要。

通过本研究,可以为生产商提供科学依据,保障产品质量,同时也为消费者提供更加安全、有效的药品选择。

美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸超高效液相色谱定量分析方法的建立

美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸超高效液相色谱定量分析方法的建立

美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸超高效液相色谱定量分析方法的建立郭昕;巩荣艳;朱娟娟;曾成娟;沈咏梅;岳碧松;李静【摘要】The present study reported an ultra performance liquid chromatography (UPLC) based method to quantity determine the protocatechuic acid in the ethanol extract of Periplaneta americana.The column was washed with Waters ACQUITY UPLC HSS T3 column (2.1 mm × 100 mm,1.8 μm).The salt solution (containing 0.1% formic acid,25 mmol ammonium formate)was used as the mobile phase A,and 100% acetonitrile at a flow rate of 0.5 mL · min-1 was used as the mobile phase B.The specimen temperature was 25 ℃,and column temperature was 40 ℃.Three detection wavelengths were set at 190-450 nm,254 nm and 360nm,respectively.The protocatechuic acid peak at a retention time of 3.3 min with a base line separation was detected.The protoca techuic acid showed a linear relationship (R2 =0.999 9) in the linear range,and the average recovery ranged from 98.30% to 99.57% with the relative standard deviation < 1%.The content of protocatechuic acid in the ethanol extract from P.americana was quantity determined to be 51.38μg · mL-1.The establishment of UPLC method to determine the content of protocatechuic acid will facilitate the quality control of P.americana basic productions in future.%美洲大蠊Periplaneta americana是重要的药用昆虫,具有抗菌消炎、活血化瘀等多种药用价值.本实验通过外标法鉴定了美洲大蠊乙醇提取物中的原儿茶酸,并建立原儿茶酸定量测定的超高效液相色谱方法.色谱柱选用Waters ACQUITY UPLC HSS T3柱(2.1 mm×100mm,1.8 μm),缓冲盐溶液(含0.1%甲酸,25 mmol甲酸铵)为流动相A,100%乙腈为流动相B,流速0.5 mL· min-1,样品温度25 ℃,柱温40℃.结果显示,美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸可达到基线分离,峰型良好;原儿茶酸在10 ~160μg内呈良好的线性关系(R2=0.999 9),平均回收率为98.30%~99.57%,相对标准偏差<1%;定量测定美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸的含量为51.38 μg·mL-1.结果显示,超高效液相色谱方法重复性好、稳定性高、分析快速,可以用于美洲大蠊乙醇提取物中原儿茶酸含量的定量测定.【期刊名称】《四川动物》【年(卷),期】2018(037)002【总页数】6页(P185-190)【关键词】美洲大蠊;原儿茶酸;超高效液相色谱【作者】郭昕;巩荣艳;朱娟娟;曾成娟;沈咏梅;岳碧松;李静【作者单位】四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065;四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065;四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065;四川省药用动物工程技术研究中心,四川好医生攀西药业有限责任公司,成都610031;四川省药用动物工程技术研究中心,四川好医生攀西药业有限责任公司,成都610031;四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065;四川大学生命科学学院,生物资源与生态环境教育部重点实验室,成都610065【正文语种】中文【中图分类】R286美洲大蠊Periplaneta americana隶属于昆虫纲Insecta蜚蠊目Blattaria大蠊属Periplaneta,是重要的药用昆虫,临床上对创面的修复及愈合具有明显的促进作用,同时还具有消炎抗菌、保肝抗肿瘤、增强机体免疫力等功能(胡艳芬等,2008;史未名,2012;吴红梅等,2013;汤雁利等,2014;陈启亮等,2015;张汉超等,2017)。

《没食子酸和原儿茶酸铬配合物的合成及其降血糖活性研究》范文

《没食子酸和原儿茶酸铬配合物的合成及其降血糖活性研究》范文

《没食子酸和原儿茶酸铬配合物的合成及其降血糖活性研究》篇一一、引言糖尿病是一种全球性的健康问题,其发病率逐年上升。

针对糖尿病的治疗和预防,研究人员不断寻找具有降血糖活性的药物和天然产物。

没食子酸和原儿茶酸是天然存在的多酚类化合物,它们在降血糖、抗氧化、抗炎等方面显示出潜在的药理活性。

本研究旨在合成没食子酸和原儿茶酸与铬的配合物,并研究其降血糖活性,以期为糖尿病的治疗提供新的药物候选物。

二、材料与方法1. 材料没食子酸、原儿茶酸、铬盐等化学试剂;实验动物(如小鼠);血糖检测试剂盒等。

2. 配合物的合成(1)将没食子酸或原儿茶酸与铬盐按一定摩尔比混合,加入适量的溶剂(如乙醇、水等)。

(2)在一定的温度和pH值条件下,进行配合反应,得到没食子酸铬配合物和原儿茶酸铬配合物。

(3)通过元素分析、红外光谱、核磁共振等手段对配合物进行表征。

3. 降血糖活性研究(1)动物实验:将实验动物分为不同组别,分别给予配合物和阳性药物(如二甲双胍)处理。

(2)测定各组动物血糖水平、胰岛素水平等指标,评估配合物的降血糖效果。

(3)通过组织学、免疫组化等手段,观察配合物对胰岛细胞、胰岛素抵抗等相关指标的影响。

三、结果与分析1. 配合物的合成与表征通过元素分析、红外光谱、核磁共振等手段对合成的没食子酸铬配合物和原儿茶酸铬配合物进行表征,证实了配合物的成功合成。

2. 降血糖活性研究(1)动物实验结果:实验结果显示,给予配合物处理的实验动物血糖水平显著降低,与阳性药物二甲双胍相比,降血糖效果具有显著性差异。

其中,原儿茶酸铬配合物的降血糖效果更为明显。

(2)机制研究:通过组织学、免疫组化等手段观察发现,配合物能够改善胰岛细胞功能,促进胰岛素分泌,减轻胰岛素抵抗,从而发挥降血糖作用。

此外,配合物还具有抗氧化、抗炎等作用,有助于改善糖尿病相关的代谢紊乱。

四、讨论本研究成功合成了没食子酸铬配合物和原儿茶酸铬配合物,并研究了其降血糖活性。

结果表明,这两种配合物均具有显著的降血糖作用,其中原儿茶酸铬配合物的效果更为明显。

一种生产原儿茶酸的大肠杆菌工程菌构建方法及应用[发明专利]

一种生产原儿茶酸的大肠杆菌工程菌构建方法及应用[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202010581182.1(22)申请日 2020.06.23(71)申请人 厦门大学地址 361000 福建省厦门市思明南路422号(72)发明人 袁吉锋 陈玉芬 (74)专利代理机构 厦门创象知识产权代理有限公司 35232代理人 王凤玲 尤怀成(51)Int.Cl.C12N 15/70(2006.01)C12N 1/21(2006.01)C12P 7/42(2006.01)C12R 1/19(2006.01)(54)发明名称一种生产原儿茶酸的大肠杆菌工程菌构建方法及应用(57)摘要本发明涉及一种生产原儿茶酸的大肠杆菌构建方法及应用,该方法包括:PCR扩增获取PmLAAD、HmaS、HMO、BFD、HFD1、HpaBC、PobA七种基因;构建质粒pET -PmLAAD -HmaS、质粒pCDF -HMO -BFD、质粒pACYC -HpaBC和质粒pACYC -PobA和质粒pRSF -HFD1;将上述部分质粒共同转入大肠杆菌MG1655RARE感受态细胞中,分别得到第一重组大肠杆菌工程菌和第二重组大肠杆菌工程菌。

根据本发明实施例,该方法获得的重组大肠杆菌可使原儿茶酸达最大收率,具有广阔的工业化应用前景。

权利要求书1页 说明书6页序列表4页 附图3页CN 111647616 A 2020.09.11C N 111647616A1.一种生产原儿茶酸的大肠杆菌工程菌构建方法,其特征在于,包括以下步骤:PCR扩增获取PmLAAD、HmaS、HMO、BFD、HFD1、HpaBC、PobA七种基因,将PmLAAD和HmaS基因双片段、HMO和BFD基因双片段用BsaI酶切,随后分别连接进入经BamHI和XhoI双酶切的表达载体pETDuet -1、pCDFDuet -1,得到质粒pET -PmLAAD -HmaS和质粒pCDF -HMO -BFD;将HFD1酶切后,连接进入表达载体pRSFDuet -1中得到质粒pRSF -HFD1;将HpaBC、PobA基因单片段酶切,分别连接经BamHI和XhoI双酶切的pACYCDuet -1载体,获得质粒pACYC -HpaBC和质粒pACYC -PobA;将质粒pET -PmLAAD -HmaS、质粒pCDF -HMO -BFD、质粒pRSF -HFD1和质粒pACYC -HpaBC共同转入大肠杆菌MG1655 RARE感受态细胞中,得到第一重组大肠杆菌工程菌MG1655-PCA1;将质粒pET -PmLAAD -HmaS、质粒pCDF -HMO -BFD、质粒pRSF -HFD1和质粒pACYC -PobA共同转入大肠杆菌MG1655 RARE感受态细胞中,得到第二重组大肠杆菌工程菌MG1655-PCA2。

原儿茶酸99-50-3

原儿茶酸99-50-3
欧洲陆运危规 : 无数据资料 国际海运危规 : 无数据资料 国际空运危规 : 无数据资料
14.2 联合国(UN)规定的名称
欧洲陆运危规:非危险货物 国际海运危规:非危险货物 国际空运危规:非危险货物
14.3 运输危险类别
欧洲陆运危规 : - 国际海运危规 : -
国际空运危规 : -
14.4 包裹组
欧洲陆运危规 : -
无数据资料
12.3 生物积累的潜在可能性
无数据资料
12.4 土壤中的迁移
无数据资料
12.5 PBT 和 vPvB的结果评价
无数据资料
12.6 其它不利的影响
无数据资料
13 废弃处置
13.1 废物处理方法
产品 无数据资料 污染了的包装物 无数据资料 进一步的说明: 无数据资料
14 运输信息
14.1 UN编号
11.1 毒理学影响的信息
急性毒性 无数据资料 亚 急性毒性 无数据资料 刺激性(总述) 无数据资料 皮肤腐蚀/刺激 无数据资料 严重眼损伤 / 眼刺激 无数据资料 呼吸道或皮肤过敏 如果通过皮肤吸收可能是有害的。造成皮肤刺激。 生殖细胞诱变 无数据资料 致癌性 IARC:此产品中没有大于或等于0.1%含量的组分被IARC鉴别为可能的或肯定的人类致癌物。 生殖毒性 生殖细胞突变性-体外试验-老鼠-淋巴细胞哺乳动物体细胞突变细胞突变性-体外试验-人-淋巴细胞DNA抑 制细胞突变性-体外试验-仓鼠-子宫细胞发生分析 特异性靶器官系统毒性(一次接触) 化学物质毒性作用登记:UL0560000 特异性靶器官系统毒性(反复接触) 无数据资料 潜在的健康影响
https:// 4/4
4.3 及时的医疗处理和所需的特殊处理的说明和指示
如必要的话,戴自给式呼吸器去救火。

原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用

原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用

动物营养学报2019,31(11):4978⁃4985ChineseJournalofAnimalNutrition㊀doi:10.3969/j.issn.1006⁃267x.2019.11.011原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用胡睿智1㊀贺宇佳2㊀李柏珍1㊀伍树松1∗(1.湖南农业大学动物科学技术学院,湖南省畜禽安全生产协同创新中心,长沙410128;2.湖南农业大学动物医学院,长沙410128)摘㊀要:原儿茶酸是一种广泛存在于自然界中的酚类物质,具有抗炎㊁抗氧化㊁抑菌等作用㊂近年来研究表明,原儿茶酸还是花青素等植物多酚的主要酚类代谢产物,是多酚在体内发挥生理功能的次级活性产物之一㊂本文综述了原儿茶酸的主要生理功能及其潜在的作用机理,并在此基础上探讨了其在畜禽生产中的应用前景㊂关键词:原儿茶酸;多酚;生理功能;作用机理;畜禽生产中图分类号:S816.7㊀㊀㊀㊀文献标识码:A㊀㊀㊀㊀文章编号:1006⁃267X(2019)11⁃4978⁃08收稿日期:2019-04-19基金项目:国家自然科学基金(31772819);湖南省优秀青年基金(2019JJ30012);湖南省百人计划作者简介:胡睿智(1995 ),男,湖南长沙人,硕士研究生,从事分子营养与单胃动物营养研究㊂E⁃mail:470346437@qq.com∗通信作者:伍树松,副教授,硕士生导师,E⁃mail:wush688@126.com㊀㊀在现代集约化养殖中,畜禽由于易受到环境㊁饲粮等各种不良因素的影响,从而引发起机体的应激反应,造成机体代谢紊乱㊁生长发育受阻和抗病能力减弱,最终导致生长缓慢㊁发病㊁甚至死亡㊂畜禽养殖中广泛使用添加抗生素的方式来解决这些问题,但长期大规模的使用抗生素会严重影响人类的自身健康和环境安全㊂因此,开发寻求天然㊁生理活性强㊁无毒副作用和环境污染小的新型饲料添加剂产品已成为研究热点㊂1㊀原儿茶酸(protocatechuicacid,PCA)㊀㊀原儿茶酸分子式为3,4-二羟基苯甲酸,相对分子质量为154.12,是一种在植物界中分布广泛的天然酚酸[1],常见的水果如覆盆子㊁蓝莓㊁桑椹[1],传统的中草药如刺五加㊁五味子㊁杜仲[2-4],以及植物果实和叶子如松针㊁松塔等[5-6]均含量丰富㊂近期研究表明,原儿茶酸是花青素在体内的主要酚类代谢产物[7]㊂花青素具有抗炎㊁抗氧化等生理功能,应用于畜禽生产中具有促进生长性能㊁提高畜禽免疫力的特点[8],但其进入体内可被快速代谢生成一系列次级代谢产物,而原儿茶酸被认为是花青素在体内发挥生理功能的主要活性代谢产物之一[9]㊂原儿茶酸因具有抗氧化㊁抗炎㊁抑菌等生理功能已被应用于医药㊁保健等领域[10]㊂本文就原儿茶酸的国内外研究现状,总结其生理功能及潜在作用机理,探讨其在畜禽生产中的应用价值及潜力㊂1.1㊀原儿茶酸来源㊀㊀我国蕴含着巨大的原儿茶酸资源,为原儿茶酸的开发利用提供了有力保障㊂富含原儿茶酸的刺五加和五味子广泛分布于我国东北㊁华北地区,如黑龙江㊁辽宁等省[11-12];而杜仲产于我国中部及西南部,湖南省是杜仲的主要产区,张家界市慈利县作为全国最大的杜仲生产基地,杜仲种植面积达15万亩(1亩ʈ666.67m2)以上[13]㊂此外,松树在我国资源极为丰富,松针㊁松塔等属于可持续利用的再生资源,极易获取,而目前松针㊁松塔大多作为燃料使用[5-6]㊂1.2㊀原儿茶酸的生物合成㊀㊀原儿茶酸能以微生物中的莽草酸途径以葡萄糖为底物进行生物合成㊂莽草酸途径是微生物合成芳香族化合物为机体提供芳香族氨基酸的主要途径[16]㊂原儿茶酸的生物合成途径如图1所示:葡萄糖糖酵解途径(embden⁃meyerhof⁃parnaspath⁃11期胡睿智等:原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用way,EMP)和磷酸戊糖途径(pentosephosphatepathway,PPP)分别生成磷酸烯醇式丙酮酸(phos⁃phoenolpyruvicacid,PEP)和赤藓糖-4-磷酸(erythrose⁃4⁃phosphate,E4P)[16]㊂PEP和E4P是莽草酸途径的起始底物,首先在2-酮-3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸合酶(3⁃deoxy⁃D⁃ara⁃bino⁃heptulosonate⁃7⁃phosphatesynthase)作用下生成2-酮-3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸(3⁃deoxy⁃D⁃arabino⁃heptulosonate⁃7⁃phosphate,DAHP),之后DAHP在3-脱氧奎尼酸合酶(3⁃dehydro⁃quinatesynthase)催化下生成3-脱氧奎尼酸(3⁃de⁃hydroquinate,DHQ),而后DHQ在3-脱氢奎尼酸脱水酶(3⁃dehydroquinatedehydratase)作用下脱水生成3-脱氢莽草酸(3⁃dehydroshikimate,DHS),通过基因工程方法在大肠杆菌内引入3-脱氢莽草酸脱羟酶和原儿茶酸脱羧酶的肺炎克雷伯菌基因,则大肠杆菌可以将DHS转化为原儿茶酸[14-16]㊂目前使用大肠杆菌工程菌以葡萄糖合成DHS的摩尔转化率在30%以上,而DHS合成原儿茶酸摩尔转换率超过95%[17]㊂相对于天然提取法和以香草酸为底物的化学合成法,利用大肠杆菌工程菌以葡萄糖为底物合成原儿茶酸具有成本低㊁绿色㊁环保等优势,可规模化生产以满足畜禽养殖的需求㊂㊀㊀EMP:葡萄糖糖酵解途径embden⁃meyerhof⁃parnaspathway;PPP:磷酸戊糖途径pentosephosphatepathway;PEP:磷酸烯醇式丙酮酸phosphoenolpyruvicacid;E4P:赤藓糖-4-磷酸erythrose⁃4⁃phosphate;DAHP:2-酮-3-脱氧-D-阿拉伯庚酮糖酸-7-磷酸3⁃deoxy⁃D⁃arabino⁃heptulosonate⁃7⁃phosphate,DHQ:3-脱氣奎尼酸合3⁃dehydroquinate;DHS:3-脱氢莽草酸3⁃de⁃hydroshikimate;PCA:原儿茶酸protocatechuicacid㊂图1㊀原儿茶酸的生物合成Fig.1㊀Biosynthesisofprotocatechuicacid[14-16]2㊀原儿茶酸的生理功能及潜在作用机理2.1㊀抗氧化㊀㊀植物多酚特有的羟基结构使其具有较强的抗氧化能力,多酚的抗氧化能力与其羟基数目以及位置有关:原儿茶酸具有邻苯二酚,邻位羟基极易发生自氧化作用,缩合形成醌类结构,羟基给出的氢离子能与活性氧自由基(reactiveoxygenspe⁃cies,ROS)结合使其淬灭[18]㊂在由过氧化氢(H2O2)诱导的细胞氧化应激模型中,原儿茶酸能显著降低细胞内ROS含量,减轻ROS造成的细胞结构损伤,缓解氧化应激引起的细胞凋亡[19-20]㊂在1,2-二苦基-2-三硝基苯亚肼(1,1⁃diphenyl⁃2⁃picrylhydrazyl,DPPH)自由基和H2O2清除率试验以及氧化应激细胞模型中,原儿茶酸的抗氧化能力强于维生素C㊁维生素E以及二丁基羟基甲苯等抗氧化剂[20-21]㊂㊀㊀原儿茶酸能通过上调机体抗氧化酶的表达来提高机体抗氧化能力㊂机体的ROS反应是一种连锁反应,由于电子传递㊁药物㊁外界刺激等因素使氧气(O2)获得1个电子,转换为超氧化物阴离子(O-2㊃),O-2㊃在超氧化物歧化酶(superoxidedis⁃mutase,SOD)作用下生成过氧化氢H2O2,而H2O2在过氧化氢酶(catalase,CAT)或谷胱甘肽过氧化物酶(glutathioneperoxidase,GSH⁃Px)作用下清除[21]㊂原儿茶酸能上调机体SOD㊁CAT㊁GSH⁃Px活性,增强机体抗氧化能力㊂Zhang等[22]研究发现,灌服10mg/kgBW的原儿茶酸能显著提高老年大鼠(22月龄)肝脏SOD㊁CAT㊁GSH⁃Px活性,显著降低丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量㊂王一冰[23]研究报道,在饲粮中添加300mg/kg的原儿茶酸,能显著降低肉鸡肝脏中MDA含量,并能提高肝脏中总抗氧化能力(totalantioxidantcapacity,T⁃AOC)和GSH⁃Px活性㊂此9794㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报31卷外,原儿茶酸能与过渡金属离子螯合[21],当体内抗氧化酶系统无法有效清除H2O2和O-2㊃时,那么在过渡金属离子作用下H2O2和O-2㊃会产生芬顿反应生成氧化性更强的羟自由基(㊃OH),而原儿茶酸能与过渡金属离子结合减少㊃OH生成[24]㊂原儿茶酸还能通过调控核因子E2相关因子2(nu⁃clearfactor⁃E2⁃relatedfactor2,Nrf2)信号通路来上调抗氧化酶的表达㊂抗氧化反应元件(antioxidantresponsiveelement,ARE)是一个特异的DNA启动子结合序列,是机体抗氧化应激的保护性顺式应答元件,调控着抗氧化酶的表达,而ARE启动子受到Nrf2信号通路的调控,在正常状态下Nrf2与Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白1(Kelchsamplere⁃latedprotein1,Keap1)结合被 锚定 在细胞质中,当机体受到外界刺激时,上游蛋白激酶被活化诱导Nrf2的磷酸化使Nrf2的构象改变,促使其与Keap1分离,Nrf2识别ARE启动子并与之结合,进而促进目标基因转录[10]㊂Vari等[25]研究发现,原儿茶酸是通过上调c⁃JunN-末端激酶(c⁃JunN⁃terminalkinase,JNK)的磷酸化,激活Nrf2⁃ARE信号通路上调机体抗氧化酶系统表达㊂2.2㊀抑菌作用㊀㊀原儿茶酸是刺五加㊁丹参等传统中草药的主要抑菌成分[2-4]㊂原儿茶酸能够抑制革兰氏阳性菌㊁革兰氏阴性菌等致病菌以及真菌的生长,表1总结了原儿茶酸对于不同细菌和真菌的最小抑菌浓度㊂原儿茶酸的抑菌活性不受温度的影响,经过100ħ加热后原儿茶酸还可具有灭菌活性[26]㊂在与不同抗菌药(黏菌素㊁克林沙星㊁阿米卡星㊁磷霉素)联用时,原儿茶酸还具有协同相加效应[27]㊂原儿茶酸可以选择性地抑制致病菌的生长而不影响益生菌的生长㊂Pacheco等[28]研究发现,在20mmol/mL浓度时,原儿茶酸能抑制肠杆菌和鼠伤寒沙门氏菌的生长,但并不影响鼠李糖乳杆菌和嗜酸乳杆菌的生长㊂表1㊀原儿茶酸对不同细菌和真菌的最小抑菌浓度Table1㊀Minimuminhibitoryconcentrationofprotocatechuicacidondifferentbacteriaandfungi菌种Strains最小抑菌浓度Minimuminhibitoryconcentration/(mg/mL)参考文献Reference金黄色葡萄球菌Staphylococcusaureus0.5㊁0.7㊁0.9Gutierrez等[29]㊁袁胜浩等[30]㊁Ajiboye等[31]阪崎克罗诺肠杆菌Cronobactersakazakii2.5贾振宇等[32]蜡样芽孢杆菌Bacilluscereus1.0Gutierrez等[29]大肠杆菌Escherichiacoli0.5㊁0.6㊁3.0Gutierrez等[29]㊁袁胜浩等[30]㊁Ajiboye等[31]绿脓杆菌Pseudomonasaeruginosa0.75袁胜浩等[30]枯草芽孢杆菌Bacillussubtilis0.50袁胜浩等[30]白色念珠菌Moniliaalbican1.0袁胜浩等[30]幽门螺旋杆菌Helicobacterpylori0.04Liu等[33]鼠伤寒沙门氏菌Salmonellatyphimurium20Pacheco等[28]㊀㊀目前,原儿茶酸的抗菌机理尚不明确,根据已有的文献,原儿茶酸的抗菌机理可能与以下几点有关:1)原儿茶酸具有邻羟基,羟基是疏水性基团可以和细胞膜的脂质双分子层结合,影响细胞膜磷脂与蛋白质的相互作用,改变细胞膜结构㊁功能和通透性[32-34]㊂贾振宇等[32]研究发现,在经过原儿茶酸处理后,阪崎克罗诺肠杆菌胞内pH降低,细胞膜电位发生超极化/去极化,细菌细胞膜完整性降低,电镜下细菌表面出现皱缩和塌陷㊂2)原儿茶酸能与铁形成稳定的配合物,而铁的缺乏会使金属酶如血红素酶和核糖苷酸还原酶的活性下降,双歧杆菌和乳酸杆菌等有益菌不含有血红素酶,且双歧杆菌和乳酸杆菌的核糖苷酸酶还原酶等含铁酶被使用腺苷钴胺的酶取代因此不受影响,而大肠杆菌等致病菌则会在原儿茶酸作用下抑制生长[28,35]㊂3)多酚在高剂量下会发生促氧化作用[36]㊂原儿茶酸的邻苯二酚结构决定其羟基极易发生断裂,高剂量下断裂的羟基能给出的电子能使O2活化成O-2㊃,O-2㊃从而引起细菌细胞膜脂质过氧化,而O-2㊃在SOD作用下生成089411期胡睿智等:原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用H2O2[36]㊂大肠杆菌㊁金黄色葡萄球菌等致病菌中二价铁离子(Fe2+)含量高于嗜酸乳杆菌㊁鼠李糖乳杆菌等益生菌,其更易发生芬顿反应生成更多的㊃OH,过量的㊃OH直接作用于DNA导致断裂,引起细菌凋亡[31]㊂2.3㊀抗炎㊀㊀当机体受到细菌㊁病毒等有害物质的入侵,会通过一系列的信号途径,引起机体的炎症反应[37]㊂炎症反应本是一种机体自身保护性反应,但炎症因子的长期或者过度激活会导致组织器官损伤[37]㊂前文中已经概述原儿茶酸能减少机体ROS和具有抑菌作用,而ROS和革兰氏阴性菌的细胞壁产生脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)均能刺激机体产生炎症反应,而原儿茶酸能减少ROS和LPS的产生从而缓解机体炎症反应㊂㊀㊀大量研究表明原儿茶酸能降低促炎因子水平㊂Zhang等[38]研究表明,在LPS诱导的小鼠急性肺损伤模型中,原儿茶酸能降低肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor,TNF⁃α)和白细胞介素-1β(interleukin⁃1β,IL⁃1β)的含量㊂Farombi等[39]研究报道,在由葡聚糖硫酸钠诱导的溃疡性结肠炎大鼠模型中,原儿茶酸能抑制环氧合酶-2(cyclooxygenase⁃2,COX⁃2)和诱导型一氧化氮合酶(inducednitricoxidesynthase,iNOS)蛋白质表达,降低肝脏中IL⁃1β㊁白细胞介素-2(interleukin⁃2,IL⁃2)㊁TNF⁃α含量㊂促炎因子如TNF⁃α能诱导淋巴细胞和上皮细胞产生多种黏附分子,诱导趋化因子产生,促使炎症细胞向炎症局部聚集,进一步造成组织损伤[38]㊂此外,TNF⁃α能活化巨噬细胞和单核细胞,产生IL⁃1β㊁白细胞介素-6(interleukin⁃6,IL⁃6)㊁白细胞介素-8(interleu⁃kin⁃8,IL⁃8)等促炎细胞因子,使炎性反应进一步扩大[37]㊂综上,原儿茶酸可减少促炎因子的生成,缓解炎症反应,防止炎症反应的扩大化㊂㊀㊀原儿茶酸主要通过介导核转录因子-κB(nu⁃clearfactor⁃κB,NF⁃κB)和丝裂原活化蛋白激酶(mitogen⁃activatedproteinkinase,MAPK)通路发挥其抗炎症功能[38,40]㊂NF⁃κB是一种由p50亚基和p65亚基组合的二聚体,在正常状态时,NF⁃κB与NF⁃κB抑制蛋白(inhibitorofNF⁃κB,IκB)结合,无法进入细胞核转录㊂当受到外界刺激时,IκB发生磷酸化,NF⁃κB解离进入细胞核内,与特定DNA位点结合诱导多种炎症因子如TNF⁃α㊁IL⁃1㊁IL⁃6等的表达[41]㊂NF⁃κB信号通路受到多种蛋白激酶调控,如p38丝裂原活化蛋白激酶(p38mitogen⁃activatedproteinkinase,p38MAPK)㊁细胞外信号调激酶(extracellularregulatedproteinkinases,ERK)㊁JNK㊁过氧化物酶体增殖物激活受体(per⁃oxisomeproliferators⁃activatedreceptors,PPAR)㊂Wang等[42]研究报道,原儿茶酸能通过作用于过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(peroxisomeprolif⁃erators⁃activatedreceptors⁃γ,PPAR⁃γ),通过上调PPAR⁃γ的表达来抑制NF⁃κB的活化㊂Zhang等[38]研究报道,原儿茶酸能够阻断LPS诱导的p38MAPK蛋白激酶和NF⁃κB的活化,即通过抑制p38MAPK⁃NF⁃κB信号通路来缓解炎症反应㊂此外,原儿茶酸能抑制由LPS引起磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(phosphatidylinositol3⁃kinase/Akt/mammaliantar⁃getofrapamycin,PI3K/Akt/mTOR)信号通路㊁JNK信号通路㊁Toll样受体信号通路的激活,抑制NF⁃κB的活化,缓解炎症反应[40]㊂2.4㊀抗病毒㊀㊀体外细胞试验和动物试验均有报道原儿茶酸还具有抗病毒作用,原儿茶酸对乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)[43]㊁传染性法氏囊病毒(infectiousbursaldiseasevirus,IBDV)[44]㊁禽流感病毒(avianinfluenzavirustypeA,H9N2)[45]㊁新城疫病毒(newcastlediseasevirus,NDV)[46]有明显的抑制作用㊂目前有关原儿茶酸抗病毒机理的研究相对较少,根据已有的文献,原儿茶酸的抗病毒机理可能与以下几点有关:1)原儿茶酸能提高机体免疫力,增强对病毒抵抗力㊂环磷酰胺是一种免疫抑制剂,能抑制动物的体液免疫应答和细胞免疫应答[47]㊂在环磷酰胺诱导的肉鸡免疫抑制模型中,原儿茶酸能阻断由环磷酰胺引起的法氏囊㊁胸腺和脾脏指数降低,提高新城疫-传染性支气管炎二联活疫苗的抗体产生水平,提高机体细胞和体液免疫水平[48]㊂Guo等[46]研究表明,在接种新城疫病毒NDV弱毒鸡模型中,与口服125mg/kg黄芪多糖组相比,口服40mg/kg的原儿茶酸组对比对照组能显著提高了新城疫病毒NDV抗体和促进淋巴细胞增殖,提高机体体液免疫和细胞免疫能力,并且鸡的存活率(70%)高于黄芪多糖组(50%)㊂2)原儿茶酸能通过调控细胞凋亡,加快感染病毒细胞凋亡过程,防止病毒感染㊂Ou等[44]1894㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报31卷研究表明,经过原儿茶酸处理后,感染传染性法氏囊病毒IBDV鸡的法氏囊中IBDV病毒量显著低于对照组,口服20mg/kg原儿茶酸组的存活率达到90%㊂原儿茶酸可以在感染病毒早期通过下调抗凋亡蛋白B淋巴细胞瘤-2蛋白(B⁃celllympho⁃ma⁃2protein,Bcl⁃2)和上调促凋亡蛋白Bcl⁃2相关X蛋白(Bcl⁃2associatedXprotein,Bax)的表达,加速法氏囊内感染病毒的淋巴细胞凋亡速率,减少了病毒的复制达到抗病毒的作用[49]㊂3)原儿茶酸能够通过调控MAPK信号通路,诱导细胞外信号相关激酶ERK1/2的磷酸化,抑制HepG2.2.15细胞中的HNF4a和HNFla启动子基因表达,从而抑制HBV病毒的复制[50]㊂㊀㊀综上所述,原儿茶酸具有抗氧化㊁抑菌㊁抗炎㊁抗病毒等多种生物学活性,其潜在作用机理如图2所示㊂㊀㊀Bax:Bcl⁃2相关X蛋白Bcl⁃2associatedxprotein;Bcl⁃2:B淋巴细胞瘤-2蛋白B⁃celllymphoma⁃2protein;ROS:活性氧自由基reactiveoxygenspecies;ERK1/2:细胞外信号调激酶1/2extracellularregulatedproteinkinases1/2;Nrf2⁃ARE:核因子E2相关因子2-抗氧化反应元件nuclearfactor⁃E2⁃relatedfactor2⁃antioxidantresponsiveelement;JNK:c⁃JunN-末端激酶c⁃JunN⁃terminalkinase;LPS:脂多糖lipopolysaccharides;PPAR⁃γ:过氧化物酶体增殖物激活受体-γperoxisomeproliferators⁃ac⁃tivatedreceptors⁃γ;PCA:原儿茶酸protocatechuicacid;mTOR:哺乳动物类雷帕霉素靶蛋白mammaliantargetofrapamycin;p38MAPK:p38丝裂原活化蛋白激酶p38mitogen⁃activatedproteinkinase;O-2㊃:超氧化物阴离子superoxideanion㊂图2㊀原儿茶酸的潜在作用机理Fig.2㊀Potentialfunctionmechanismsofprotocatechuicacid[21,24-25,30-33,35,38-39,45,47-48]3㊀原儿茶酸在畜禽生产上应用前景㊀㊀规模化养猪生产中,早期断奶会诱发氧化应激与炎症反应,造成仔猪肠道损伤,易受到致病菌侵染[51]㊂原儿茶酸能减轻早期断奶仔猪氧化应激与炎症反应㊂陈鹏等[52]在断奶仔猪饲粮中添加杜仲叶提取物,与基础饲粮相比,250mg/kg的杜仲叶提取物能显著提高断奶仔猪的平均日增重,与添加50mg/kg金霉素的抗生素组无显著差异㊂本课题组通过内毒素诱导的断奶仔猪肠黏膜损伤试验发现,原儿茶酸能有效提高仔猪抗氧化能力并降低炎症反应,减少肠黏膜损伤,从而提高断奶仔猪的生长性能㊂此外,原儿茶酸还能减少肠道中致病菌的丰度,改善肠道菌群结构,从而缓解断奶造成的肠道损伤㊂Fang等[53]研究发现,与添加400mg/kg杆菌肽锌和300mg/kg卡巴多的抗生素对照组相比,刺五加提取物能显著提高断奶仔猪十二指肠㊁空肠和回肠的绒毛高度,降低隐窝深度,并能增加乳酸乳杆菌㊁唾液乳杆菌㊁枯草芽孢杆菌等益生菌丰度,降低金黄色葡萄球菌㊁鼠伤寒沙门氏菌㊁大肠杆菌丰度,减少断奶应激导致的腹泻㊂王一冰[23]在黄羽肉鸡饲粮中添加原儿茶酸,与添加200mg/kg恩拉霉素的抗生素对照组相比,添加原儿茶酸能增加盲肠菌群的α多样性,显289411期胡睿智等:原儿茶酸的生理功能及其在畜禽生产中的应用著提高厚壁菌门的相对丰度,降低拟杆菌门和变形菌门的相对丰度,300mg/kg的原儿茶酸能显著提高黄羽肉鸡末重,降低料重比㊂原儿茶酸还能缓解热应激诱导的氧化应激,减轻家禽氧化损伤,提高家禽生产性能[54]㊂4㊀小㊀结㊀㊀综上,原儿茶酸具有多种生物学功能,应用于畜禽生产中可潜在提高畜禽生产性能和免疫能力,且其来源广泛,生物合成成本低,因此在畜禽生产中具有很好的应用前景㊂然而,一些问题的存在限制了其合理有效利用,如:1)原儿茶酸的作用机理尚不清楚,需要找到其在体内的关键作用靶点;2)原儿茶酸的代谢途径,生物利用率尚不清楚,在畜禽饲粮中的适宜添加比例还有待研究;3)原儿茶酸在畜禽生产中应用较少,如何将原儿茶酸更好应用于畜禽生产中还需深入研究㊂因此,系统地研究原儿茶酸的生物功能,探究其分子作用机理及生物利用率,可为其作为一种新型绿色饲料添加剂合理应用于畜禽生产提供有效参考与理论依据㊂参考文献:[1]㊀PACHECO⁃PALENCIALA,MERTENS⁃TALCOTTS,TALCOTTST.Chemicalcomposition,antioxidantproperties,andthermalstabilityofaphytochemicalen⁃richedoilfromaçai(EuterpeoleraceaMart.)[J].JournalofAgriculturalandFoodChemistry,2008,56(12):4631-4636.[2]㊀尚海花,王淼,刘颖,等.HPLC法测定不同产地刺五加中原儿茶酸㊁紫丁香苷㊁绿原酸㊁刺五加苷E和异嗪皮啶[J].现代药物与临床,2018,33(6):1324-1328.[3]㊀SZOPAA,KOKOTKIEWICZA,BEDNARZM,etal.StudiesontheaccumulationofphenolicacidsandflavonoidsindifferentinvitroculturesystemsofSchisandrachinensis(Turcz.)Baill.UsingaDAD⁃HPLCmethod[J].PhytochemistryLetters,2017,20:462-469.[4]㊀YINMC,LINCC,WUHC,etal.Apoptoticeffectsofprotocatechuicacidinhumanbreast,lung,liver,cervix,andprostatecancercells:potentialmechanismsofaction[J].JournalofAgriculturalandFoodChem⁃istry,2009,57(14):6468-6473.[5]㊀吴道勋,刘璐,王莹,等.云南松松塔中原儿茶酸提取工艺的研究[J].大理学院学报,2014,13(4):4-6,7.[6]㊀邓毅,宁红霞,沈薇,等.HPLC同时测定雪松松针中没食子酸㊁原儿茶酸和儿茶素的含量[J].中国现代应用药学,2014,31(9):1104-1107.[7]㊀DEFERRARSRM,CZANKC,ZHANGQ,etal.Thepharmacokineticsofanthocyaninsandtheirmetabo⁃litesinhumans[J].BritishJournalofPharmacology,2014,171(13):3268-3282.[8]㊀胡睿智,贺宇佳,何子煜,等.矢车菊素-3-葡萄糖苷的吸收㊁代谢及生理功能研究进展[J].动物营养学报,2019,31(05):2052-2062.[9]㊀KAYCD,KROONPA,CASSIDYA.Thebioactivityofdietaryanthocyaninsislikelytobemediatedbytheirdegradationproducts[J].MolecularNutrition&FoodResearch,2009,53(Suppl.1):S92-S101.[10]㊀KAKKARS,BAISS.Areviewonprotocatechuicacidanditspharmacologicalpotential[J].ISRNPharma⁃cology,2014,2014:952943.[11]㊀胡理乐,张海英,秦岭,等.中国五味子分布范围及气候变化影响预测[J].应用生态学报,2012,23(9):2445-2450.[12]㊀程海涛,刘德江,罗志文,等.药用植物刺五加资源分布与环境因子的相关性[J].黑龙江医药科学,2012,35(4):8-9.[13]㊀王效宇,陈毅烽,伍江波,等.湖南省杜仲产业现状调查[J].经济林研究,2016,34(4):158-162.[14]㊀REISFS,CᶄIRICᶄA,STOJKOVICᶄD,etal.EffectsofdifferentcultureconditionsonbiologicalpotentialandmetabolitesproductioninthreePenicilliumisolates[J].DrugDevelopmentandIndustrialPharmacy,2015,41(2):253-262.[15]㊀LIWS,XIEDM,FROSTJW.Benzene⁃freesynthe⁃sisofcatechol:interfacingmicrobialandchemicalca⁃talysis[J].JournaloftheAmericanChemicalSociety,2005,127(9):2874-2882.[16]㊀王佳.改造木糖非磷酸化代谢途径及莽草酸途径生物合成高附加值产物[D].博士学位论文.北京:北京化工大学,2018.[17]㊀WUFL,CAOP,SONGGT,etal.Expandingtherepertoireofaromaticchemicalsbymicrobialproduc⁃tion[J].JournalofChemicalTechnologyandBiotech⁃nology,2018,93(10):2804-2816.[18]㊀SROKAZ,CISOWSKIW.Hydrogenperoxidescaven⁃ging,antioxidantandanti⁃radicalactivityofsomephe⁃nolicacids[J].FoodandChemicalToxicology,2003,41(6):753-758.3894㊀动㊀物㊀营㊀养㊀学㊀报31卷[19]㊀SHIGF,ANLJ,JIANGB,etal.Alpiniaprotocate⁃chuicacidprotectsagainstoxidativedamageinvitroandreducesoxidativestressinvivo[J].NeuroscienceLetters,2006,403(3):206-210.[20]㊀CHOUTH,DINGHY,LINRJ,etal.InhibitionofmelanogenesisandoxidationbyprotocatechuicacidfromOriganumvulgare(oregano)[J].JournalofNaturalProducts,2010,73(11):1767-1774.[21]㊀LIXC,WANGXZ,CHENDF,etal.Antioxidantactivityandmechanismofprotocatechuicacidinvitro[J].FunctionalFoodsinHealth&Disease,2011,1(7):232-244.[22]㊀ZHANGXL,SHIGF,LIUXZ,etal.Anti⁃ageingeffectsofprotocatechuicacidfromAlpiniaonspleenandliverantioxidativesystemofsenescentmice[J].CellBiochemistry&Function,2011,29(4):342-347.[23]㊀王一冰.原儿茶酸影响动物肠道屏障功能的研究[D].博士学位论文.杭州:浙江大学,2017.[24]㊀刘时中.自由基与衰老[J].生理科学进展,1983,14(2):147-152.[25]㊀VARIR,D 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原儿茶酸调节神经干/祖细胞分化的作用研究

原儿茶酸调节神经干/祖细胞分化的作用研究
1 材料 与方 法
1 1 材 料 .
能诱导神经干/ 祖细胞 的分化 , 与 1 但 %胎 牛血 清 的联 合应
用时 , 原儿茶酸 ( .6mm l L ) 0 0 o ・ 有效地提高神经元的分化 比例 , 导神 经元 的成熟并促进 突触 的伸长 ; 介 另一方面 , 原儿
1 11 试 剂 . .
( i 公 司 ) 层 粘 连 蛋 白 (n ioe Sg ma ; Ivt gn公 司 ) 胎 牛 r ; 血清 ( 美 生 物 工 程 公 司 ) H P S R c e公 司 ) 华 ; E E ( oh ;
有效地促进神经干/ 细胞分化 为神 经元 的比例并提 高细胞 祖
关键词 : 神经干/ 祖细胞 ; 分化 ; 神经元 ; 儿茶 酸 ; 原 神经保 护 ;
期 等 。原 儿 茶 酸 ( rt a c u c , C 作 po ct h i ai P A) o e c d
仪 ( PC , ek a oh r ; 外 分 光 光度 仪 ( 。 E IS B cm nCu e) 紫 V 50, A C 6 J S O,Jpn ; 光 分 光 光 度 仪 ( P6 0 , aa ) 荧 F . 0 5
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文献标 志码 : 文章 编号 : 0 A 1 1—17 ( 0 2 0 0 9 8 2 1 )9—11 0 2 8— 6

没食子酸和原儿茶酸的制备方法及其反应催化剂的制备方法[发明专利]

没食子酸和原儿茶酸的制备方法及其反应催化剂的制备方法[发明专利]

(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910452089.8(22)申请日 2019.05.28(71)申请人 南京趣酶生物科技有限公司地址 210062 江苏省南京市高新区新锦湖路3-1号中丹生态生命科学产业园一期B栋811室申请人 上海仁酶生物科技有限公司(72)发明人 林涛 于丽珺 徐明文 蒋丽丽 (74)专利代理机构 南京正联知识产权代理有限公司 32243代理人 蒯建伟(51)Int.Cl.C12N 15/70(2006.01)C12N 15/66(2006.01)C12P 7/42(2006.01)C12N 9/88(2006.01)C12N 9/02(2006.01) (54)发明名称没食子酸和原儿茶酸的制备方法及其反应催化剂的制备方法(57)摘要本发明公开了一种没食子酸和原儿茶酸的制备方法及其反应催化剂的制备方法,通过对3-脱氢莽草酸脱水酶基因aroZ 片段或者对羟苯甲酸羟化酶基因pobA 片段进行构建,形成有催化性质的酶液,然后进行生物合成反应,合成原儿茶酸和没食子酸;本发明的有益效果:以葡萄糖为原料,其价格实惠,来源广泛,而且整个工艺得到了简化,减少环境污染,降低没食子酸生产成本。

权利要求书1页 说明书5页序列表4页 附图2页CN 110184288 A 2019.08.30C N 110184288A1.一种酶催化剂的制备方法,具体步骤如下:步骤一:将3-脱氢莽草酸脱水酶基因aroZ 片段或者对羟苯甲酸羟化酶基因pobA 片段重组到pET21a载体上,阳性重组质粒aroZ -pET21a(+)或者阳性重组质粒pobA -pET21a(+)转化表达宿主菌BL21(DE3),得到原核表达菌株aroZ -pET21a(+)/ BL21(DE3)或者原核表达菌株pobA -pET21a(+)/ BL21(DE3);步骤二:将上述表达菌株在加有终浓度为100ug/mL氨苄青霉素的5mL LB液体培养基中于37℃、200rpm振荡培养过夜后,按1%(V/V)比例接种于含有终浓度为100ug/mL氨苄青霉素的500mL LB液体培养基中,于37℃、200rpm振荡培养,待OD600在0.8-1.0之间时,加入终浓度为0.1mM的诱导剂IPTG(异丙基-β-D -硫代半乳糖苷,IPTG),并在25℃诱导过夜;步骤三:将步骤二所得液在8000rpm条件下离心收集,然后悬浮于50mM pH7.0 磷酸钠缓冲液中,超声破碎(200W,3s/5s,10min),4℃,12000rpm离心20min,得到3-脱氢莽草酸脱水酶催化剂或者对羟苯甲酸羟化酶催化剂。

原儿茶酸标准曲线_概述及解释说明

原儿茶酸标准曲线_概述及解释说明

原儿茶酸标准曲线概述及解释说明1. 引言1.1 概述原儿茶酸是一种重要的化学物质,广泛存在于茶叶、水果和蔬菜中。

它具有多种生物活性,如抗氧化、抗炎和抗癌等作用,因此备受研究者的关注。

为了准确测定原儿茶酸在样品中的含量,科学家们发展了一种称为原儿茶酸标准曲线的方法。

1.2 文章结构本文将分为四个部分进行讲述。

引言部分(第1部分)介绍了原儿茶酸标准曲线的概述以及文章的结构。

第2部分将详细说明原儿茶酸标准曲线的定义与背景、实验步骤以及数据处理方法。

第3部分将解释标准曲线的意义、构建标准曲线的原理和方法,以及曲线拟合与数据分析技术。

最后一部分(第4部分)总结实验结果并探讨标准曲线应用前景,同时对其局限性进行评估,并提出相应的优化措施。

1.3 目的本文旨在介绍原儿茶酸标准曲线的概念、构建和应用,帮助读者了解并掌握这一测定分析方法。

同时,通过对标准曲线的解释说明,使读者能够深入理解其意义和实用性,为相关研究和实验设计提供指导。

最终目的是促进原儿茶酸研究的深入发展,并推动该物质在医药、食品以及其他领域中的广泛应用。

2. 原儿茶酸标准曲线2.1 定义与背景原儿茶酸是一种重要的活性成分,广泛存在于茶叶及其他植物中。

它具有很多生物活性,包括抗氧化、抗炎、抑制肿瘤细胞生长等作用,因此在医药和食品工业中具有广阔的应用前景。

为了准确测定样品中原儿茶酸的含量,需要构建一个原儿茶酸的标准曲线来进行定量分析。

2.2 实验步骤构建原儿茶酸标准曲线通常需要以下实验步骤:第一步:准备工作首先,从市场上购买到高纯度的原儿茶酸标准品。

然后根据实际需要,采用适当的溶剂将标准品溶解,并配制出一系列不同浓度的原儿茶酸溶液。

第二步:测量吸光度使用紫外-可见光谱仪或其他适当的仪器,以特定波长(常见为279 nm)下测量每个不同浓度溶液的吸光度。

确保在测量过程中温度和其他条件保持一致。

第三步:制作标准曲线将各个浓度的溶液对应的吸光度值制作成一个原儿茶酸的标准曲线。

鸡血藤药材中原儿茶酸的含量测定

鸡血藤药材中原儿茶酸的含量测定

鸡血藤药材中原儿茶酸的含量测定林惠贞;刘浩文;韦玮;李雯婷;赵志敏;陈建萍;王冬梅【摘要】High performance liquid chromatography (HPLC)was developed for the quantitative analysis of protocatechuic acid (PA)in Spatholobi Caulis (the stem of Suberect spatholobus Dunn.).The prepa-ration method of sample solution was established by optimizing the extraction solvents,methods,times and the sizes of the crude drug.The sample solutions were analyzed using a C18 column (250 ×4.6 mm,5μm)with CH3 CN-φ=0.5%HAc (volumic ratio,10∶90)as mobile phase and detect ed at 260 nm with a flow rate of 1.0 mL·min-1 .The crude drug was extracted by boiling water for three times and 1.5 h for each time.The obtained aqueous solution was concentrated and followed by extracted with ethyl acetate for four times.The ethyl acetate layer was concentrated to dryness,and was resolved in methanol-water (volumic ratio,1∶1 )to give the sample solution previous to HPLC analysis.After systematic method evaluation,the results showed that the linear range was 8.56 ~214 μg·mL-1 with correlation coefficient R2 of 0.999 7;and the average recovery rate was 99.2%with RSD of 2.8%.The contents of PA in market-sold seven batches of Spatholobi Caulis were determined to be in the range of 65.8 1 ~122.35 μg·g-1.The established method was accurate and repeatable,which could be used for the quality control of Spatholobi Caulis.%建立测定鸡血藤药材中原儿茶酸含量的方法,并对制备供试品溶液的提取溶剂、提取方法、提取次数、药材粒度等进行了考察优化。

HPLC法测定有瓜石斛中原儿茶酸的含量

HPLC法测定有瓜石斛中原儿茶酸的含量

HPLC法测定有瓜石斛中原儿茶酸的含量朱莎;任晋;谢镇山;黄月纯;魏刚【摘要】Objective:To establish a method for determintation of protocatechuic acid in Herba flickingeriae by HPLC. Methods:HPLC method was used with the Zorbax SB-Aq column, the acetonitrile-0.1% phosphoric acid was employed as a mobile phase, detection wavelength was 220nm. Column temperature was 30℃, and flow rate was 1.0mL·min-1. Results:Baseline separation was obtained and linear relationship was good (r=1.0000) for protocatechuic acid content. The average recovery was 101.71%and RSD was 2.48%(n=6). The content of protocatechuic acid in the 12 samples of commercially available Herba flickingeriae were among 0.0374~0.203mg·g-1, with distinct difference. Conclusion:The method is sensitive, reliable and available for the quality control of Herba flickingeriae.%目的:建立有瓜石斛中原儿茶酸的含量测定方法.方法:采用高效液相色谱(HPLC)法.色谱柱为Zorbax SB-Aq色谱柱;流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液;检测波长为220nm;流速为1.0mL·min-1;柱温为30℃. 结果:原儿茶酸达到基线分离,线性关系良好(r=1.0000);平均加样回收率为101.71%,RSD为2.48%(n=6). 12批市售样品含量在0.0374~0.203mg·g-1范围内,差异相对较大. 结论:该方法灵敏,可靠,可用作有瓜石斛药材的质量评价指标之一.【期刊名称】《北方药学》【年(卷),期】2015(012)010【总页数】2页(P1-2)【关键词】有瓜石斛;原儿茶酸;高效液相色谱法【作者】朱莎;任晋;谢镇山;黄月纯;魏刚【作者单位】广州医科大学第一附属医院广州 510120;广州中医药大学广州510006;广州中医药大学广州 510006;广州中医药大学广州 510006;广州中医药大学第一附属医院广州 510405;广州中医药大学广州 510006【正文语种】中文【中图分类】R927.2HPLC法测定有瓜石斛中原儿茶酸的含量朱莎1,2任晋2谢镇山2黄月纯3*魏刚(21.广州医科大学第一附属医院广州510120;2.广州中医药大学广州510006;3.广州中医药大学第一附属医院广州510405)摘要:目的:建立有瓜石斛中原儿茶酸的含量测定方法。

HPLC法测定不同产地的鸡血藤中原儿茶酸的含量

HPLC法测定不同产地的鸡血藤中原儿茶酸的含量

HPLC法测定不同产地的鸡血藤中原儿茶酸的含量【摘要】目的建立鸡血藤的含量测定方法。

方法采用高效液相色谱法测定了原儿茶酸的含量, C18色谱柱(250mm×4.6mm,5μm),流动相为甲醇-水-冰醋酸(25:75:0.2),流速1.0ml/min,检测波长260nm。

结果原儿茶酸与样品中其他组分分离效果较好,原儿茶酸在31.1~93.3μg范围具有良好线性关系,相关系数 r = 0.9996;平均回收率为99.49%,RSD为1.58%(n=6)。

结论采用此法测定鸡血藤中原儿茶酸的含量,准确可靠,可用于该药材的质量控制。

【关键词】鸡血藤原儿茶酸高效液相色谱法【Abstract】 Objective To establish the method of detemteminefor Spatholobus suberectus Dunn.Methods HPLC method was developed for the determination of protocatechuic acid in Spatholobus suberectus Dunn. The separation was performed on C18 column with methyl alcohol-water- HAC(25:75:0.2) as a mobile phase where the flow rate was 1.0mL/min. The detection wavelength was set at 260 nm.Results A satisfactory separation between protocatechuic acid and impurity was obtained. The calibration curve was linear over the range from 31.1~93.3μg, r =0.9996; The average recovery was 99.49% , and RSD为1.58%(n=6).Conclusion The method was accurate and can be used for the detemrmination of constituents for Spatholobus suberectus Dunn.【Key words】 spatholobus suberectus dunn;protocatechuicacid;HPLC鸡血藤为豆科植物鸡血藤Spatholobus suberectus Dunn的干燥藤茎,别名血风藤、大血藤、血风、活血藤。

儿茶《中国药典》

儿茶《中国药典》

儿茶《中国药典》.txt年轻的时候拍下许多照片,摆在客厅给别人看;等到老了,才明白照片事拍给自己看的。

当大部分的人都在关注你飞得高不高时,只有少部分人关心你飞得累不累,这就是友情!儿茶《中国药典》:儿茶【拼音名】ér Chá【来源】本品为豆科合欢属植物儿茶树Acacia catechu(L. f.) Willd.的去皮枝、干的干燥煎膏。

冬季采收枝、干,除去外皮,砍成大块,加水煎煮,浓缩,干燥。

【性状】本品呈方形或不规则块状,大小不一。

表面棕褐色或黑褐色,光滑而稍有光泽。

质硬,易碎,断面不整齐,具光泽,有细孔,遇潮有黏性。

无臭,味涩、苦,略回甜。

【鉴别】(1)本品粉末棕褐色。

可见针状结晶及黄棕色块状物。

(2)取火柴杆浸于本品水浸液中,使轻微着色,待干燥后,再浸入盐酸中立即取出,置火焰附近烘烤,杆上即显深红色。

(3)取本品粉末0.5g,加乙醚30ml,超声处理10分钟,滤过,滤液蒸干,残渣用甲醇5ml使溶解,作为供试品溶液。

另取儿茶素和表儿茶素对照品,加甲醇制成每1ml各含0.2mg 的混合溶液,作为对照品溶液。

照薄层色谱法(附录Ⅵ B)试验,吸取供试品溶液5μl、对照品溶液2μl,分别点于同一纤维素预制板上,以正丁醇-醋酸-水(3:2:1)为展开剂,展开,取出,晾干,喷以10%硫酸乙醇溶液,加热至斑点显色清晰。

供试品色谱中,在与对照品色谱相应的位置上,显相同的红色斑点。

【炮制】除去杂质。

用时打碎。

【性味】苦、涩,微寒。

【归经】归肺经。

【功能主治】收湿生肌敛疮。

用于溃疡不敛,湿疹,口疮,跌扑伤痛,外伤出血。

【用法用量】 1~3g,包煎,多入丸散服。

外用适量。

【贮藏】置干燥处,防潮。

【摘录】《中国药典》页首《全国中草药汇编》:儿茶【拼音名】ér Chá【别名】儿茶膏、孩儿茶、黑儿茶【来源】为豆科金合欢属植物儿茶树Acacia catechu (L.) Willd.的干枝加水煎汁浓缩而成的干浸膏。

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