【生物课件】第六章发酵生产员染菌及防治

合集下载

发酵生产染菌及其防治-PPT精选全文

发酵生产染菌及其防治-PPT精选全文
积物,在关闭时不会使紧密面轧坏。 4)、检修方便。但须定期检查隔膜有否老化及脱
落。
(2)管路得连接
管子得连接有螺纹连接、法兰连接与焊接三种。
A、 螺纹连接。
需在管端铰出螺纹,安装时在螺纹上涂以白漆并加麻 丝(或聚四氟乙烯薄膜)作填料,密封要求高得可用石墨粉加 少许机油作填料,用氧化铅甘油胶合剂更好。
过滤器器壁腐蚀形成氧化铁层,就是多孔物质,空气 会短路,使空气中带菌并造成污染。
过滤介质变位:
活性炭棉花作为介质得过滤器,活性炭 受到气流得冲击而破碎、灰化、体积减小、 空间增大,上下两端得棉花受空气得顶撞力 而逐渐改变位置。
设备与管件得渗漏一般就是指设备与管件由于腐蚀、 内应力或其她原因形成微小漏孔所发生得渗漏现象。
这些漏孔很小,特别就是不锈钢材料形成得漏孔更小, 有时肉眼不能直接觉察,需要通过一定得试漏方法才能发 现。
1、发酵罐得渗漏
(1)冷却管得渗漏
由于发酵液腐蚀、固体物料摩擦引起管外壁磨损。管 内冷却水得浸泡、冲击、蒸汽冲击导致管内壁磨损。所以 冷却管就是发酵罐中最容易渗漏得部件之一。
截止阀在使用中经常发生以下两个问题:
a 阀心轧坏。物料中得硬质物或焊接施工后得焊渣以 及螺钉零件等被带到阀内,当关闭得,阀心与阀座被上述坚 硬物轧住,能将紧密面轧成凹凸不平得痕迹,就关不严密。
b 填料得渗漏。操作时用扳手过分关紧,会使阀杆弯 曲,弯曲后得阀杆不仅启动费力,并且使填料部分不紧密而 引起渗漏。阀门在使用一定时间后,阀杆磨损或填料损坏 也会引起渗漏,就需要将填料压盖适当拧紧或更换填料。
发酵工厂得有关管路要保持光滑、通畅、密封性 好,以避免与减少管道染菌得机会。
例如:
法兰与管子焊接时受热不匀使法兰翘曲密封面发生 凹凸不平现象就会造成死角。

生物发酵生产染菌及防治

生物发酵生产染菌及防治

第一节 染菌对发酵的影响
但是,不管是对于哪种发酵过程,一旦发生染菌,都 会由于培养基中的营养成分被消耗或代谢产物被分解,严 重影响到产物的生成,使发酵产品的产量大为降低。谷氨 酸发酵周期短,生产菌繁殖快,培养基不太丰富,一般较 少污染杂菌,但噬菌体污染对谷氨酸发酵的威胁非常大。
二、染菌发生的不同时间对发酵的影响
发酵生产染菌及防治
第一节 染菌对发酵的影响 第二节 发酵异常现象及原因分析 第三节 杂菌污染的途径和防治
第一节 染菌对发酵的影响
尽管染菌对发酵过程的影响是很大的,但由于生产的 产品不同、污染杂菌的种类和性质不同、染菌发生的时间 不同以及染菌的途径和程度不同,染菌造成的危害及后果 也是不相同的。
一、染菌对不同发酵过程的影响第一节 染菌对发酵的影响
4.发酵后期染菌 由于到了发酵后期,培养基中的 糖、氮等营养物质已接近耗尽,且发酵的产物也已积累 较多,如果染菌量不太大,对发酵的影响相对来说就要 小一些,可继续进行发酵。对发酵产物来说,发酵后期 染菌对不同的产物的影响也是不同的,如抗生素、柠檬 酸的发酵,染菌对产物的影响不大;肌苷酸、谷氨酸、 氨基酸等的发酵,后期染菌也会影响产物的产量、提取 和产品的质量。
第二节 发酵异常现象及原因分析
一、种子培养和发酵的异常现象
发酵过程中的种子培养和发酵的异常现象是指发酵过 程中的某些物理参数、化学参数或生物参数发生与原有规 律不同的改变,这些改变必然影响发酵水平,使生产蒙受 损失。对此,应及时查明原因,加以解决。
1.种子培养异常 种子培养异常表现在培养的种子质量不合格。种子质 量不合格会给发酵带来较大的影响,然而种子内在质量常 被忽视。由于种子培养的周期短,可供分析的数据较少, 因此种子异常的原因一般较难确定,也使得由种子质量引 起的发酵异常原因不易查清。种子培养异常的表现主要有 菌体生长缓慢、菌丝结团、茵体老化以及培养液的理化参 数变化。

发酵染菌及其防治

发酵染菌及其防治

不同杂菌的种类对发酵的影响
发酵过程 危害最大的杂菌种类
细短产气杆菌 细短杆菌、假单孢杆菌 双球菌、芽孢杆菌、荚膜杆菌
青霉素的发酵 链霉素的发酵 四环素的发酵 谷氨酸的发酵 柠檬酸的发酵
噬菌体
青霉菌

不同生产阶段染菌对发酵的影响
种子培养期染菌 对整个发酵过程的危害极大。
发酵前期染菌
严重干扰生产菌的生长繁殖。
整、安装未对中、法兰与管子的焊接不好、受
热不均匀使法兰翘曲以及密封面不平等现象, 从而形成“死角”而染菌 。
防治 措施
• 采用单独的排气、排水和排污管可有效防止 染菌的发生。
• 法兰的加工、焊接和安装要符合灭菌的要求
尽可能减少或取消连接法兰等措施 。
图5-5 灭菌时蒸汽不易通达的“死角”及其消除方法
含量的变化是有规律的。染菌后,培养基中糖的消耗发生 变化 ,引起排气中CO2含量的异常变化,如杂菌污染时, 糖耗加快, CO2含量含量增加,噬菌体污染后,糖耗减慢, CO2含量减少。因此,可根据CO2含量的异常变化判断染 菌。
其它异常现象
还可以根据其他的一些异常现象,如菌体生长
不良、PH值的异常变化、发酵过程中泡沫的异常
染菌程度越严重,即在发酵罐内的杂菌数量 就多,对发酵的危害也就越大。但当生产菌在发 酵过程已有大量的繁殖,并已在发酵液中占优势, 如果污染极少量的杂菌,此时对发酵不会带来太 大的影响。

发酵异常现象及染菌原因分析
1 2 3 溶解氧的异常变化 排出的CO2异常变化
染菌 原因 分析
设备渗漏方面原因分析
染菌对发酵的影响
1 污染杂菌的不同种类
2 不同阶段染菌 不同染菌的原因 不同染菌程度
3

发酵染菌及防治

发酵染菌及防治

原因 培养物和培养基不相匹配、培养环境差、接种量少、杂菌 污染等
发酵异常
菌体生长差:由于种子质量问题或者是种子的保藏时间 较长,导致活菌少或孢子萌发率低,延迟期长,发酵液 内的菌体数量少。
种子质量差,发酵条件差,培养基质量差均可引起糖、 氧消耗慢甚至停滞。
发酵异常
pH异常 表现为pH突然升高或突然降 低,主要与培养基原料差、 灭菌不彻底,加糖和加油过 于集中。
终适当加入杀菌剂或抗生 素及正常的发酵液以抑制 杂菌的生长速度。
代谢产物已达一定水平
产品的含量达一定值,只 要明确是染菌也可放罐
无提取价值的发酵液
加热至120℃,保 持30分钟后排放
杂菌污染后的挽救和处理
染菌后对设备的处理
1. 发酵罐需要放罐后彻底清洗
2. 空罐加热灭菌至120℃以上、保持30min后才能使用
染菌隐患的检查
发酵过程的异常现象观察法
溶氧异常
排气中的CO2异常变化
发酵染菌的原因
发酵工艺流程中的各环节漏洞
发酵过程管理不善
染菌原因的分析
国外一发酵工厂的染菌原因分析
染菌原因的分析
国内一发酵企业染菌的原因分析
杂菌污染后的挽救和处理
种子培养期染菌的处理 物料管道 供气管道 有 备用种子 无 重新制 备种子
要保持较长时间的排气
预防噬菌体的危害
利用细菌或放线菌进行的发酵容易感染噬菌体 噬菌体直径约0.1微米,可以通过细菌过滤器,所以通 用的空气过滤器不易将其除去。 引起原因: 1. 设备的渗漏 2. 空气系统、培养基
灭菌不彻底
噬菌体的防治措施
定期检查噬菌体并采取有效措施 排气管要气封或引入药液(高锰酸钾、漂白粉或石灰水等 溶液)槽中

发酵生产染菌及防治

发酵生产染菌及防治

一、项目背景在工业生产中,发酵生产过程大多为纯种培养过程,需要在没有杂菌污染的条件下进行。

而发酵生产的环节又比较多,因此在发酵生产中要完全杜绝染菌就有很大的困难。

一旦发生染菌,就应该尽快找出污染的原因,并采取相应的有效措施,把发酵染菌造成的损失降低到最小。

二、项目目标及任务1、项目目标:能大致说出染菌对发酵过程的影响,染菌发生的不同时期、程度对发酵的影响。

2、项目任务(1)能根据生产中发酵异常现象进行原因分析,包括种子培养和发酵的异常现象、染菌的检查和判断、发酵染菌原因分析等。

(2)能够判断杂菌污染的途径,挽救与处理杂菌污染的措施。

三、项目的理论依据1、染菌发生的不同时间对发酵的影响(1)种子培养其染菌种子培养的目的主要是使微生物细胞生长与繁殖,增加微生物的数目,薇发酵做准备。

一般种子罐中的微生物菌体浓度较低,而其培养基的营养又十分丰富,容易发生染菌。

若将污染的种子带入发酵罐,则会造成更大的危害,因此应严格控制种子染菌的情况的发生。

一旦发现种子受到杂菌的污染,应经灭菌后弃去,并对种子罐、管道等进行仔细检查和彻底灭菌。

(2)发酵前期染菌在发酵前期,微生物菌体主要是处于生长、繁殖阶段,这段时期代谢的产物很少,相对而言这个时期也容易发生染菌。

染菌后的杂菌迅速繁殖,与生产菌争夺培养基中的营养物质,严重干扰生产菌的正常生长、繁殖及产物的生成,甚至会抑制或杀灭生成菌。

(3)发酵中期染菌发酵中期染菌将会导致培养基中的营养物质大量消耗,并严重干扰生产菌的生长和代谢,影响产物的生成。

有的杂菌在染菌后大量繁殖,产生酸性物质,使pH下降,糖、氮等的消耗加速,菌体发生自溶,致使发酵液发黏,并产生大量的泡沫,最终导致代谢产物的积累减少或停止;有的染菌后会使已生成的产物被利用或破坏。

从目前的情况来看,发酵中期染菌一般较难挽救,危害性较大,在生产过程中应尽力做到早发现、快处理。

(4)发酵后期染菌由于到了发酵后期,培养基中的糖、氮等营养物质已接近耗尽,且发酵的产物也已积累较多,如果染菌量不太大,对发酵的影响相对来说就要小一些,可继续进行发酵。

发酵工程制药—发酵染菌及防治

发酵工程制药—发酵染菌及防治

三、不同染菌途径对发酵的影响
04 设备渗漏 染菌几率较大
03 培养基或设备灭菌不彻底 一般不具延续性,使单个(批)发 酵罐发酵失败
01 种子带菌 将导致染菌范围不断扩大,使生产 蒙受重大损失。
02 空气带菌 使发酵大面积染菌
四、不同染菌时间对发酵的影响
染菌时间:指无菌检查方法确准的污染时间,不是杂菌进入培养液的时间
(四)培养基灭菌不彻底导致染菌及防治
原料性状及灭菌技术的好坏影响灭菌质量。 1、原料性状 稀薄的培养基易灭菌彻底;而淀粉质原料特别是有颗粒时易灭菌不彻底或是升温过快或混 合不均时,易结块,使中心部位在灭菌时“夹生”,导致在发酵过程中团块散开而染菌。 防止措施: 淀粉质培养基以实罐灭菌为好,在升温时先搅拌均匀,加入一定量的a-淀粉酶进行液化, 并将原料大颗粒筛去。
放掉部分料液,补入必要营 养,重新灭菌再接种发酵
降温培养、调节pH、补加 培养基
发酵中后期染菌的处理

轻微染菌





代谢产物已达一定水平



无提取价值的发酵液

适当加入杀菌剂或抗生素及正 常的发酵液以抑制杂菌的生长 速度。
明确是染菌可放罐或继续培养
加热至120℃,保持30分钟 后排放
处理措施应具体问题具体分析、多种方法综合应用,如 案例:柠檬酸发酵中期染菌,处理措施:
✓ Ⅰ发酵初期,溶解氧基本不变 ✓ Ⅱ对数生长期,溶解氧浓度迅速下降 ✓ Ⅲ发酵中期,溶解氧有波动但变化不大 ✓ Ⅳ发酵后期,溶解氧浓度上升
ⅠⅡ Ⅲ

➢ 异常的溶解氧曲线
1、当感染噬菌体时,生产菌的呼 吸作用受抑制,溶解氧浓度迅速上 升。感染噬菌体时的溶解氧的变化 比菌体浓度变化更灵敏。

【生物】第六章发酵生产染菌及防治

【生物】第六章发酵生产染菌及防治
.
第二节 发酵异常现象及原因分析
(1)菌体生长缓慢 种子培养过程中菌体数量增长 缓慢的原因很多。培养基原料质量下降、菌体老化、灭 菌操作失误、供氧不足、培养温度偏高或偏低、酸碱度 调节不当等都会引起菌体生长缓慢。此外,接种物冷藏 时间长或接种量过低而导致菌体量少,或接种物本身质 量较差等也都会使(3)代谢不正常 代谢不正常表现为糖、氨基氮等 变化不正常,菌体浓度和代谢产物不正常。造成代谢不正 常的原因很复杂,除与接种物质量和培养基质量差有关外, 还与培养环境条件差、接种量小、杂菌污染等有关。
2.发酵异常 不同种类的发酵过程所发生的发酵异常现象,形式虽 然不尽相同,但均表现出菌体生长速度缓慢、菌体代谢异 常或过早老化、耗糖慢、pH值的异常变化、发酵过程中泡 沫的异常增多、发酵液颜色的异常变化、代谢产物含量的 异常下跌、发酵周期的异常拖长、发酵液的黏度异常增加 等。
从发生染菌的时间来看,染菌可分为种子培养期染菌、 发酵前期染菌、发酵中期染菌和发酵后期染菌等四个不同 的染菌时期,不同的染菌时期对发酵所产生的影响也是有 区别的。
.
第一节 染菌对发酵的影响
1.种子培养期染菌 种子培养的目的主要是使微 生物细胞生长与繁殖,增加微生物的数目,为发酵做准 备。一般种子罐中的微生物菌体浓度较低,而其培养基 的营养又十分丰富,容易发生染菌。若将污染的种子带 入发酵罐,则会造成更大的危害。因此应严格控制种子 染菌情况的发生。一旦发现种子受到杂菌的污染,应经 灭菌后弃去,并对种子罐、管道等进行仔细检查和彻底 灭菌。
.
第二节 发酵异常现象及原因分析
由于污染的杂菌好氧性不同,产生溶解氧异常的现象也 是不同的。当杂菌是好氧性微生物时,溶解氧的变化是在较 短时间内下降,直到接近于零,且在长时间内不能回升;但 并非一旦染菌溶氧就下降,当杂菌是非好氧性微生物,而生 产菌由于受污染而抑制生长,使耗氧量减少,溶解氧反而升 高。一般,补料或加油也会引起溶解氧迅速下降,在低谷处 维持1-3h即回升。这与染菌使溶氧变化是不同的。

第六章6_发酵过程控制6-染菌和防治课件

第六章6_发酵过程控制6-染菌和防治课件

第六节 染菌和防治
(一)染菌对发酵的影响 3、不同时间染菌对发酵的影响 (3)发酵中期染菌 杂菌 发酵中期染菌会严重干扰产生菌的代谢。 发酵中期染菌会严重干扰产生菌的代谢。杂菌 pH 下降;糖、氮消耗快,发 大量产酸,培养液 大量产酸,培养液pH pH下降;糖、氮消耗快,发 酵液发粘,菌丝自溶,产物分泌减少或停止,有 时甚至会使已产生的产物分解。有时也会使发酵 液发臭,产生大量泡沫。 措施 降温培养,减少补料,密切注意代谢变 化情况。如果发酵单位到达一定水平可以提前放 罐,或者抗生素生产中可以将高单位的发酵液输 送一部分到染菌罐,抑制杂菌。
加强设备本身及附属零部件的严密度检查,对克 服染菌是极其主要的,也是重要的。
第六节 染菌和防治
设备渗漏的原因:
第六节 染菌和防治
�冷却管的渗漏
发酵罐中最容易渗漏的部件之一 。 最易穿孔的是冷却列管的弯曲处;冷却水的压力通常 大于罐压,如有微孔,冷却水会进入发酵液引起染菌。
�罐体的穿孔
特别是罐底。每年大修时需检查钢板减薄的程度。 有夹套的发酵罐检查罐壁有无渗漏。
五、染菌的防治 5、发酵染菌后的措施 �染菌后的培养基必须灭菌后才可放入下水道。 灭菌方法:可通蒸汽灭菌,也可加入过氧乙酸等 化学灭菌剂搅拌半小时,才放下水道。否则由于 各罐的管道相通,会造成其它罐的染菌,而且直 接放下水道也会造成空气的污染而导致其它罐批 染菌。 ,对症下药,该罐也 �染菌的罐要找染菌的原因 染菌的罐要找染菌的原因,对症下药,该罐也 要彻底清洗,进行空罐消毒,才可进罐。 ,空气用 �染菌厉害时,车间环境要用石灰消毒 染菌厉害时,车间环境要用石灰消毒,空气用 甲醛熏蒸。若染噬菌体,空气必须用甲醛蒸汽消 毒。
�蒸汽总压是否达到要求标准杂菌数量因季节而有很大差别 。 �环境中的 环境中的杂菌数量因季节而有很大差别 杂菌数量因季节而有很大差别。

7发酵过程控制6发酵染菌及其防治49页PPT

7发酵过程控制6发酵染菌及其防治49页PPT
在这个时期要特别警惕以制止染菌的发生。
染菌措施 可以用降低培养温度,调整补料量, 用酸碱调pH值,缩短培养周期等措施予以补救。 如果前期染菌,且培养基养料消耗不多,可以重 新灭菌,补加一些营养,重新接种再用。
发酵染菌及其防治
(3)发酵中期染菌
发酵中期染菌会严重干扰产生菌的代谢。杂菌大 量产酸,培养液pH下降;糖、氮消耗快,发酵 液发粘,菌丝自溶,产物分泌减少或停止,有时 甚至会使已产生的产物分解。有时也会使发酵液 发臭,产生大量泡沫。
发酵染菌及其防治
2、污染不同种类和性质的微生物的影响
(1)污染噬菌体 噬菌体的感染力很强,传播蔓延迅速,也较防 治,故危害极大。污染噬菌体后,可使发酵产 量大幅度下降,严重的造成断种,被迫停产。
发酵染菌及其防治
(2)污染其它杂菌
有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫,即使添 加消泡剂也无法控制逃液,影响发酵过程的通气搅 拌。 有的杂菌会使发酵液发臭、发酸,致使pH下降,使 不耐酸的产品破坏。特别是染芽孢杆菌,由于芽孢 耐热,不易杀死,往往一次染菌后会反复染菌。
降低产量。
品 灰黄霉素、制霉菌素、克念菌素等抗生素抑制霉菌,对
细菌几乎没有抑制和杀灭作用。
发酵染菌及其防治
疫苗生产危害很大。现在疫苗多采用深层培养,这
不 是一类不加提纯而直接使用的产品,在其深层培养
同 过程中,一旦污染杂菌,不论死菌、活菌或内外毒
产 品
素,都应全部废弃。因此,发酵罐容积越大,污染 杂菌后的损失也越大。
发酵染菌及其防治
(二)发酵染菌对提炼和产品质量的影响
1、发酵染菌对过滤的影响
染菌的发酵液一般发粘,菌体大多数自溶,所以在 发酵液过滤时不能或很难形成滤饼,导致过滤困难。 即使采取加热、冷却、添加助滤剂等措施,使部分 蛋白质凝聚,但效果并不理想。

发酵染菌及防治PPT文档44页

发酵染菌及防治PPT文档44页
发酵染菌及防治
1、合法而稳定的权力在使用得当时很 少遇到 抵抗。 ——塞 ·约翰 逊 2、权力会使人渐渐失去温厚善良的美 德。— —伯克
3、最大限度地行使权力总是令人反感 ;权力 不易确 定之处 始终存 在着危 险。— —塞·约翰逊 4、权力会奴化一切。——塔西佗
5、虽然权力是一头固执的熊,可是金 子可以 拉着它 的鼻子 走。— —莎士 比
谢谢你的阅读
❖ 知识就是财富 ❖ 丰富你的人生
7德 72、家庭成为快乐的种子在外也不致成为障碍物但在旅行之际却是夜间的伴侣。——西塞罗 73、坚持意志伟大的事业需要始终不渝的精神。——伏尔泰 74、路漫漫其修道远,吾将上下而求索。——屈原 75、内外相应,言行相称。——韩非

《发酵染菌》PPT课件

《发酵染菌》PPT课件
(1)种子培养期染菌
由于接种量较小,生产菌生长一开始不占优势,而 且培养液中几乎没有抗生素(产物)或只有很少抗 生素(产物)。因而它防御杂菌能力低,容易污染 杂菌。如在此阶段染菌,应将培养液全部废弃。
精选课件ppt
8
(2)发酵前期染菌
发酵前期最易染菌,且危害最大。
原因 发酵前期菌量不很多,与杂菌没有竞争优势; 且还未合成产物(抗生素)或产生很少,抵御杂菌能力 弱。
精选课件ppt
10
(二)发酵染菌对提炼和产品质量的影响
1、发酵染菌对过滤的影响
1)对过滤的影响: 菌体大多自溶;由于发酵不彻底,基质的残留
浓度增加;发酵液的粘度加大。 2)造成的后果:
过滤时间拉长,影响设备的周转使用;破坏生 产平衡,大幅度降低过滤收率。
污染杂菌的种类对过滤的影响程度有差异。
精选课件ppt
染杂菌后的损失也越精选大课。件ppt
5
2、污染不同种类和性质的微生物的影响
(1)污染噬菌体
噬菌体的感染力很强,传播蔓延迅速,也较防治, 故危害极大。污染噬菌体后,可使发酵产量大幅度下 降,严重的造成断种,被迫停产。
(2)污染其它杂菌
有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫,即使添加 消泡剂也无法控制逃液,影响发酵过程的通气搅拌。
精选课件ppt
24
2、从染菌的时间来分析
发酵早期染菌:种子带菌、培养基和设备灭菌不彻底、设 备或管道有死角;
中、后期染菌:中间补料、设备渗漏、操作不合理。
3、从染菌的类型来分析
耐热性芽孢杆菌:死角或灭菌不彻底; 球菌、酵母:可能是从蒸汽的冷凝水或空气中带来的; 浅绿色菌落(革兰氏阴性杆菌) :发酵罐的冷却管或夹套渗
措施 降温培养,减少补料,密切注意代谢变化情况。如 果发酵单位到达一定水平可以提前放罐,或者抗生素生产中 可以将高单位的发酵液输送一部分到染菌罐,抑制杂菌。

发酵染菌及防治课件

发酵染菌及防治课件

• 2、应用
• (1)空气过滤系统。 • (2)液体培养基。 • (3)噬菌体检查,此时使用生产菌作为指示菌。
(二)平板划线培养或斜面培养检
查法
• 1、平板划线培养
• 固体平板置培养箱中37℃,保温24h,检查无菌 即可使用。将需要检查的样品在无菌的平板上划 线,分别置37℃、27℃培养,以适应嗜中温和低 温菌的生长,一般在8h后即可观察。
• (1)原因:产生菌孢子和种子质量不好、发酵条 件差、培养基质量差(灭菌不当)等。
• (2)措施:补充合适的氮源,或磷酸盐,提高发 酵温度。
• 2、pH异常
• 发酵过程中一般pH是有一定规律的。如不符合规 律则是发酵异常。
• (1)原因:培养基原料差、灭菌不彻底、加糖过 于集中等。
• (2)措施:可通过加酸或碱调节。最好加入一些 生理酸性或碱性盐或缓冲液来调节。
3、溶氧水平异常(p164)
• 正常发酵过程的溶氧水平是由一定规律的 。如果溶氧水平与一般规律不一致即发生 了异常变化。
• (1)原因:染菌。染菌的种类:好氧菌 、厌氧菌。菌体代谢异常、某些设备或工 艺发生故障或变化。
• (2)措施:检查无菌空气、管道是否渗 漏。搅拌设备是否正常运行等。
4、泡沫过多
(一)显微镜检查
• 1、细菌用革兰氏染色,必要时进行芽孢染色 和鞭毛染色,霉菌、酵母菌可直接观察。
(二)肉汤培养检查法
• 1、方法
• 液体培养基的检查:将需要检查的样品接入经灭菌, 并经过检查无菌的肉汤培养基中,放置37℃和27℃ 分别培养24h,进行观察,观察肉汤是否浑浊。并 取样镜检。
• 无菌空气的检查:将葡萄糖酚红肉汤培养基装在吸气 瓶中,灭菌后,37℃培养24h,若培养液未变浑浊 ,表明吸气瓶中的培养液是无菌的,把过滤后的空 气引入吸气瓶中,培养后,若培养液变混或变黄色 ,表明空气中仍有杂菌,说明过滤系统有问题。
  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
从发生染菌的时间来看,染菌可分为种子培养期染菌、 发酵前期染菌、发酵中期染菌和发酵后期染菌等四个不同 的染菌时期,不同的染菌时期对发酵所产生的影响也是有 区别的。
第一节 染菌对发酵的影响
1.种子培养期染菌 种子培养的目的主要是使微 生物细胞生长与繁殖,增加微生物的数目,为发酵做准 备。一般种子罐中的微生物菌体浓度较低,而其培养基 的营养又十分丰富,容易发生染菌。若将污染的种子带 入发酵罐,则会造成更大的危害。因此应严格控制种子 染菌情况的发生。一旦发现种子受到杂菌的污染,应经 灭菌后弃去,并对种子罐、管道等进行仔细检查和彻底 灭菌。
第一节 染菌对发酵的影响
4.发酵后期染菌 由于到了发酵后期,培养基中的 糖、氮等营养物质已接近耗尽,且发酵的产物也已积累 较多,如果染菌量不太大,对发酵的影响相对来说就要 小一些,可继续进行发酵。对发酵产物来说,发酵后期 染菌对不同的产物的影响也是不同的,如抗生素、柠檬 酸的发酵,染菌对产物的影响不大;肌苷酸、谷氨酸、 氨基酸等的发酵,后期染菌也会影响产物的产量、提取 和产品的质量。
第二节 发酵异常现象及原因分析
一、种子培养和发酵的异常现象
发酵过程中的种子培养和发酵的异常现象是指发酵过 程中的某些物理参数、化学参数或生物参数发生与原有规 律不同的改变,这些改变必然影响发酵水平,使生产蒙受 损失。对此,应及时查明原因,加以解决。
1.种子培养异常 种子培养异常表现在培养的种子质量不合格。种子质 量不合格会给发酵带来较大的影响,然而种子内在质量常 被忽视。由于种子培养的周期短,可供分析的数据较少, 因此种子异常的原因一般较难确定,也使得由种子质量引 起的发酵异常原因不易查清。种子培养异常的表现主要有 菌体生长缓慢、菌丝结团、茵体老化以及培养液的理化参 数变化。
第二节 发酵异常现象及原因分析
(1)菌体生长缓慢 种子培养过程中菌体数量增长 缓慢的原因很多。培养基原料质量下降、菌体老化、灭 菌操作失误、供氧不足、培养温度偏高或偏低、酸碱度 调节不当等都会引起菌体生长缓慢。此外,接种物冷藏 时间长或接种量过低而导致菌体量少,或接种物本身质 量较差等也都会使菌体数量增长缓慢。
第一节 染菌对发酵的影响
三、染菌程度对发酵的影响
染菌的程度对发酵的影响是很大的。染菌程度愈严 重,即进入发酵罐内的杂菌数量愈多,对发酵的危害也 就愈大。当生产菌在发酵过程已有大量的繁殖,并已在 发酵液中占优势,污染极少量的杂茵,对发酵不会带来 太大的影响,因为进入发酵液的杂菌需要有一定的时间 才能达到危害发酵的程度,而且此时环境对杂菌繁殖已 相当不利。当然如果染菌程度严重时,尤其是在发酵的 前期或发酵的中期,对发酵将会产生严重的影响。
第一节 染菌对发酵的影响
但是,不管是对于哪种发酵过程,一旦发生染菌,都 会由于培养基中的营养成分被消耗或代谢产物被分解,严 重影响到产物的生成,使发酵产品的产量大为降低。谷氨 酸发酵周期短,生产菌繁殖快,培养基不太丰富,一般较 少污染杂菌,但噬菌体污染对谷氨酸发酵的威胁非常大。
二、染菌发生的不同时间对发酵的影响
第一节 染菌对发酵的影响
尽管染菌对发酵过程的影响是很大的,但由于生产的 产品不同、污染杂菌的种类和性质不同、染菌发生的时间 不同以及染菌的途径和程度不同,染菌造成的危害及后果 也是不相同的。
一、染菌对不同发酵过程的影响
由于各种发酵过程所使用的微生物菌种、培养基以及 发酵的条件、产物的性质不同,染菌造成的危害程度也不 同。如青霉素的发酵过程,由于许多杂菌都能产生青霉素 酶,因此不管染茵是发生在发酵前期、中期或后期,都会 使青霉素迅速被分解破坏,使目的产物最终产率降低,危 害十分严重。
第一节 染菌对发酵的影响
2.发酵前期染菌 在发酵前期,微生物菌体主要是 处于生长、繁殖阶段,这段时期代谢的产物很少,相对而 言这个时期也容易发生染菌,染菌后的杂菌将迅速繁殖, 与生产菌争夺培养基中的营养物质,严重干扰生产菌的正 常生长、繁殖及产物的生成,甚至会抑制或杀灭生产菌。
3.发酵中期染菌 发酵中期染菌将会导致培养基中 的营养物质大量消耗,并严重干扰生产菌的生长和代谢, 影响产物的生成。有的杂菌在染菌后大量繁殖,产生酸性 物质,使pH值下降,糖、氮等的消耗加速,菌体发生自溶, 致使发酵液发黏,并产生大量的泡沫,最终导致代谢产物 的积累减少或停止;有的染菌后会使已生成的产物被利用 或破坏。从目前的情况来看,发酵中期染菌一般较难挽救, 危害性较大,在生产过程中应尽力做到早发现,快处理。
第二节 发酵异常现象及原因分析
(2)菌丝结团 在培养过程中有些丝状菌容易产生 菌丝团,菌体仅在表面生长,菌丝向四周伸展,而菌丝 团的中央结实,使内部菌丝的营养吸收和呼吸受到很大 影响,从而不能正常地生长。菌丝结团的原因很多,诸 如通气不良或停止搅拌导致溶解氧浓度不足;原料质量 差或灭菌效果差导致培养基质量下降;接种的孢子或菌 丝保藏时间长而菌落数少,泡沫多;罐内装料小、菌丝 粘壁等会导致培养液的菌丝浓度比较低;此外接种物种 龄短等也会导致菌体生长缓慢,造成菌丝结团。
பைடு நூலகம் 第一节 染菌对发酵的影响
染菌的后果随污染的杂菌种类,数量和发酵阶段而有 所不同。一般,从染菌的种类大致可以判断其来源。染芽 孢杆菌有可能是灭菌不透所致;染大肠杆菌则怀疑是否有 脏水污染,如蛇管穿孔;染球菌、短杆菌有可能来自空气。 对抗生素发酵前期染菌比较麻烦,控制不当,杂菌生长比 生产菌快,则容易倒罐。遇到早期染菌,原则上可适当改 变生长参数,使有利于生产菌而不利于杂菌的生长,如降 低发酵温度等。加入某些抑制杂菌的化合物也不失为一种 应急办法,条件是这种化合物对生产菌无害,对生产影响 不大和在下游精制阶段能被完全去除。中后期染菌除非是 噬菌体否则后果不会那么严重,这时发酵液中已产生一定 浓度的抗生素,对杂菌已有一定抑制作用。实际生产中常 采用大接种量的原因之一是即使不慎污染了极少量杂菌, 生产菌也能很快占优势。
第一节 染菌对发酵的影响
对于核苷或核苷酸的发酵过程,由于所用的生产菌种 是多种营养缺陷型微生物,其生长能力差,所需的培养基 营养丰富,因此更容易受到杂菌的污染,而且染菌后,培 养基中的营养成分迅速被消耗,更加不利于生产菌的生长 和代谢产物的生成。对于柠檬酸等有机酸的发酵过程,一 般在产酸后,发酵液的pH值降低,此时杂菌的生长变得困 难,在发酵中、后期就较少发生染茵,因此对于有机酸的 发酵主要是要预防发酵前期染菌。
相关文档
最新文档