发酵过程中染菌的有效控制及预防
发酵工程中的染菌原因及解决办法
学生综述性论文题目：发酵过程中染菌的分析、检测及预防姓名：刘莉学号：2008132114专业：生物技术班级：083班课程名称：微生物工程指导教师：燕平梅课程学期：2010至2011学年第一学期发酵过程中染菌的分析、检测及预防姓名：刘莉指导老师：燕平梅（太原师范学院生物系083班学号：2008132114）摘要：通过分析发酵过程中染菌的各种原因，总结检测染菌的方法，并提出染菌后应采取哪些措施及预防染菌的方法。
关键词：发酵；染菌；危害；检查；预防前言：发酵工业生产中，污染杂菌造成发酵失败的事故时常发生，严重影响发酵生产，关于发酵过程是否污染杂菌，如何检测，染了菌后如何处理等等，这些问题的研究是十分有意义的。
内容：1发酵染菌的危害1.1不同种类的杂菌对发酵的影响青霉素发酵：污染细短产气杆菌比粗大杆菌的危害大链霉素发酵：污染细短杆菌、假单孢杆菌和产气杆菌比粗大杆菌的危害大四环素发酵：污染双球菌、芽孢杆菌和夹膜杆菌的危害较大柠檬酸发酵：最怕污染青霉菌肌苷、肌苷酸发酵：污染芽孢杆菌的危害最大谷氨酸发酵：最怕污染噬菌体高温淀粉酶发酵：污染芽孢杆菌和噬菌体的危害较大1.2不同染菌时间对发酵的影响1.2.1种子培养期染菌菌体浓度低、培养基营养丰富1.2.2发酵前期染菌杂菌与生产菌争夺营养成分，干扰生产菌的繁殖和产物的形成1.2.3发酵中期染菌严重干扰生产菌的繁殖和产物的生成1.2.4发酵后期染菌如杂菌量不大，可继续发酵。
如污染严重，可采取措施提前放罐1.3不同染菌途径对发酵的影响种子带菌：种子带菌可使发酵染菌具有延续性空气带菌：空气带菌也使发酵染菌具有延续性，导致染菌范围扩大至所有发酵罐培养基或设备灭菌不彻底：一般为孤立事件，不具有延续性设备渗漏：这种途径造成染菌的危害性较大1.4染菌对产物提取和产品质量的影响1.4.1对过滤的影响发酵液的粘度加大；菌体大多自溶；由于发酵不彻底，基质的残留浓度加度。
造成过滤时间拉长，影响设备的周转使用，破坏生产平衡；大幅度降低过滤收率。
7发酵过程控制6发酵染菌及其防治
发酵染菌及其防治
2、发酵染菌对提炼的影响 、 染菌发酵液中含有比正常发酵液更多的水溶性蛋 白和其它杂质。 白和其它杂质。 采用有机溶剂萃取的提炼工艺， 极易发生乳化， 采用有机溶剂萃取的提炼工艺，则极易发生乳化， 很难使水相和溶剂相分离，影响进一步提纯。 很难使水相和溶剂相分离，影响进一步提纯。 采用直接用离子交换树脂的提取工艺，如链霉素、 采用直接用离子交换树脂的提取工艺，如链霉素、 庆大霉素， 庆大霉素，染菌后大量杂菌黏附在离子交换树脂 表面，或被离子交换树脂吸附，大大降低离子交 表面，或被离子交换树脂吸附，大大降低离子交 换树脂的交换容量， 换树脂的交换容量，而且有的杂菌很难用水冲洗 干净，洗脱时与产物一起进入洗脱液， 干净，洗脱时与产物一起进入洗脱液，影响进一 步提纯。 步提纯。
பைடு நூலகம்
发酵染菌及其防治
上海第三制药厂染菌原因分析 百分率% 项目 百分率 14.15 种子带菌 14.20 盘管穿孔 23.30 阀门渗漏 10.0 空气系统有菌 25.80 管理不善 7.49 其它 5.78 原因不明
发酵染菌及其防治
管理不善而染菌的有31个罐批， 管理不善而染菌的有 个罐批，占25.08％经 个罐批 ％ 分析有下表所列原因： 分析有下表所列原因： 项目 进罐前未做设备严密度检查 接种违反操作规程 检修质量缺乏验收制度 操作不熟练 配料违反工艺规程 调度不当 百分率% 百分率 25.8 25.8 19.35 19.35 6.45 3.25
发酵染菌及其防治
第四制药厂链霉素发酵染菌原因分析 百分率% 项目 百分率 外界带入杂菌（取样、补料） 8.20 外界带入杂菌（取样、补料） 7.60 设备穿孔 26.00 空气系统有菌 1.60 停电罐压跌零 11.00 接种 0.60 蒸汽压力不足或蒸汽量不足 7.80 管理问题 1.60 操作违反规程 0.60 种子带菌 35.00 原因不明
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略1. 引言1.1 毕赤酵母发酵过程的重要性毕赤酵母是一种重要的微生物，在食品发酵工业中起着至关重要的作用。
它能够利用糖类等有机物质进行代谢，产生乙醇和二氧化碳等物质，从而发挥酵母发酵的作用。
毕赤酵母发酵过程不仅可以用于生产啤酒、面包、酸奶等食品，还可以用于生产化妆品、药品等工业产品。
其发酵产物具有丰富的营养价值和特殊的风味，深受人们喜爱。
毕赤酵母发酵可以促进食品中有害物质的降解和清除，提高食品的品质和安全性。
其产生的乙醇和二氧化碳等物质可以抑制有害微生物的生长，延长食品的保存期限。
毕赤酵母发酵可以改善食品的口感和营养价值，使食品更加美味可口。
发酵产物中的氨基酸、酶类等对人体具有益处，有助于促进消化吸收，提高食品的营养价值。
毕赤酵母发酵过程还可以带来经济效益，推动相关产业的发展。
发酵工业是一个重要的产业领域，毕赤酵母作为其中的关键微生物，在食品、医药、化工等领域都具有广泛的应用前景。
加强对毕赤酵母发酵过程的研究和控制，不仅有助于提高食品的质量和安全性，还有利于推动发酵产业的发展和壮大。
1.2 染菌对发酵过程的影响染菌是毕赤酵母发酵过程中常见的问题，而染菌会对发酵过程造成严重影响。
染菌会影响毕赤酵母的生长和繁殖，导致发酵速度变慢甚至停滞，影响产物的质量和产量。
染菌会引起发酵罐内环境的污染，可能产生异味、变色等问题，影响产品的口感和外观。
染菌还可能产生有害物质，对发酵产物的安全性构成威胁。
对于发酵过程来说，一旦染菌出现，往往需要加大处理的力度和时间，甚至可能需要废弃整批产品，造成浪费和经济损失。
预防染菌的重要性不言而喻。
只有加强对发酵过程中的染菌问题的监测和预防，才能确保毕赤酵母发酵过程的顺利进行，保证产品的质量和安全。
在制定相关的预防措施时，需要考虑到发酵环境的清洁、员工个人卫生习惯以及设备设施的维护和清洁等方面，从多个角度综合预防染菌问题的发生，保障生产的稳定和安全进行。
发酵过程中控制杂菌的方法
发酵过程中控制杂菌的方法
1.设备与环境消毒：
-在发酵前，应对所有接触发酵物料的设备，如发酵罐、管道、过滤器、阀门等进行全面、彻底的清洁和消毒，可使用高温蒸汽灭菌、化学消毒剂浸泡等方式进行消毒处理。
2.培养基灭菌：
-制备的发酵培养基必须在严格的无菌条件下操作，通过高压蒸汽灭菌或其它适用方式彻底灭菌，确保无任何杂菌存在。
3.无菌操作技术：
-接种、转接、取样等操作应在无菌操作台上进行，操作人员需要穿戴无菌防护装备，遵循无菌操作规程，避免引入杂菌。
4.种子纯化：
-使用纯净、活性良好的种子进行接种，必要时对种子进行多次传代净化，剔除可能携带的杂菌。
5.温度与pH控制：
-发酵过程中适当调整和控制温度、pH值等参数，创造有利于目标菌株生长而不利于杂菌滋生的条件。
6.监控与检测：
-定期对发酵过程进行监测，包括pH值、溶解氧、浊度等指标的变化，及时发现异常。
并对发酵液进行微生物检测，一旦发现杂菌污染，立即采取相应措施。
7.添加抑菌剂：
-在某些情况下，可在发酵过程中添加适量的抑菌剂或抗生素来抑制杂菌生长，但这需要考虑对目标菌株的影响。
8.应急措施：
-若发现早期染菌，可通过降低培养温度、调整补料策略、补充杀菌剂或抗生素等手段尝试挽救；若中后期染菌且不影响产品质量，则可考虑提前终止发酵。
9.优化工艺流程：
-改进工艺流程，如采用一次性使用系统、密闭连续流发酵技术等，减少人为操作带来的污染风险。
发酵工艺染菌综合分析及防止措施
发酵工艺染菌综合分析及防止措施YUKI was compiled on the morning of December 16, 2020发酵工艺：染菌(bacteria infection)综合分析及防止措施原创2016-07-01 arrowone1.造成发酵染菌的可能途径有哪些?菌种培养过程操作不当培养基灭菌不彻底发酵设备(如发酵罐、管道)密封不严空气除菌不净2.既然染菌不可避免，哪我们应该怎样做?要提高生产技术水平，强化生产过程的管理，把握好各个易染菌的环节，尽可能防止发酵染菌的发生；而且一旦发生染菌，要能尽快找出其污染的原因，并采取相应的有效措施，把发酵染菌造成的损失降低到最小。
3.不同发酵过程相对危害最大的杂菌种类？青爲素的发酵细短产气杆菌链霧素的发酵细短杆菌、假单泡杆菌四环素的发酵双球菌、芽他杆菌、荚膜杆菌谷氨酸的发酵噬菌体柠檬酸的发酵青霉菌4.不同生产阶段染菌对发酵的影响：种子培养期染菌:对整个发酵过程的危害极大发酵前期染菌：严重干扰生产菌的生长繁殖发酵中期染菌：干扰生产菌的代谢，影响产物的生成发酵后期染菌：影响相对较小5.不同染菌原因对发酵的影响：种子带菌：将导致染菌范围不断扩大，使生产蒙受重大损失。
空气带菌：使发酵大面积染菌培养基或设备灭菌不彻底：一般不具延续性，使单个（批）发酵罐发酵失败设备渗漏：染菌儿率较大&发酵异常现象及染菌原因分析：（1）溶解氧的异常变化当杂菌是好气性微生物时，溶解氧的变化是在较短时间内下降，直至接近于零，且在长时间内不能回升；当杂菌是非好气性微生物，而生产菌由于受污染而抑制生长，使耗氧量减少，溶解氧升高。
（2）排气的C02异常变化如杂菌污染时，糖耗加快，C02含量含量增加，噬菌体污染后，糖耗减慢，C02 含量减少。
因此，可根据C02含量的异常变化判断染菌。
（3）其它异常现象：如菌体生长不良、pH值的异常变化、发酵过程中泡沫的异常增多、发酵液的颜色异常变化、代谢产物含量的异常下跌、发酵周期的异常拖长、发酵液的粘度异常增加等判断染菌。
发酵染菌应急预案
一、编制目的为确保发酵过程中染菌事件得到及时、有效的控制和处理，最大限度地减少染菌对产品质量、生产进度和安全生产的影响，特制定本应急预案。
二、适用范围本预案适用于我公司在发酵过程中发生的各类染菌事件，包括但不限于菌种污染、物料污染、设备污染等。
三、组织机构及职责1. 应急领导小组：负责组织、指挥和协调染菌事件的应急处置工作。
组长：生产部经理副组长：质量部经理、安全环保部经理成员：各部门负责人及关键岗位人员2. 应急处置小组：负责染菌事件的现场处置工作。
组长：质量部经理副组长：生产部经理、安全环保部经理成员：各车间负责人、检验员、操作工等四、应急处置程序1. 染菌事件发现（1）操作工发现染菌迹象，立即向车间负责人报告；（2）车间负责人接到报告后，立即向应急处置小组组长报告。
2. 现场调查（1）应急处置小组组长组织相关人员对染菌事件进行调查，确定染菌范围、原因及影响；（2）调查过程中，需做好现场保护，防止染菌扩散。
3. 应急处置措施（1）根据染菌原因，采取相应的消毒、清洗、更换设备等措施；（2）对受污染的产品进行隔离，避免污染其他产品；（3）对受污染的物料进行无害化处理或销毁；（4）对染菌原因进行分析，制定预防措施，防止类似事件再次发生。
4. 信息报告（1）染菌事件发生后，应急处置小组组长立即向公司领导及相关部门报告；（2）公司领导接到报告后，根据染菌事件的影响程度，决定是否启动应急预案。
5. 恢复生产（1）在确保染菌得到有效控制后，恢复正常生产；（2）对恢复生产过程中的各项指标进行严格监控，确保产品质量。
五、应急保障措施1. 物资保障：储备充足的消毒剂、清洗剂、防护用品等应急物资；2. 技术保障：定期对操作人员进行应急培训，提高应急处置能力；3. 人员保障：确保应急队伍的稳定，确保应急处置工作顺利开展。
六、预案的修订与实施1. 本预案由生产部、质量部、安全环保部共同编制，经公司领导批准后实施；2. 本预案应根据实际情况进行修订，修订后的预案经公司领导批准后实施；3. 各部门应按照本预案的要求，做好应急处置工作，确保染菌事件得到及时、有效的处理。
发酵生产中的染菌原因分析及控制预防
发酵生产中的染菌原因分析及控制预防作者：周海宏来源：《中国科技博览》2017年第22期[摘要]近年来，我国的发酵行业也在不断地发展，在工业发酵生产过程中仍然会出现一些染菌问题，企业对染菌问题的关注度比较大。
对发酵生产中染菌原因进行分析，并采用有效的方式进行染菌情况预防及控制，这对于提升企业生产积极性具有重大的经济效益与生产效益。
因此，本文将主要探讨发酵生产中染菌原因分析以及控制对策，为有效预防及控制发酵生产过程中的染菌情况提供合理的参考意见。
[关键词]发酵生产；染菌原因；控制预防中图分类号：TQ927 文献标识码：A 文章编号：1009-914X（2017）22-0397-010.引言发酵过程主要是指微生物在进行纯种培养，在纯种培养过程中也只是允许特定的一些微生物生长。
在发酵生产过程中，如果处理不当，不仅会出现目的菌种，同时也会含有一些其他的微生物存在，我们将这种现象称之为染菌。
染菌会对目的菌的生长或代谢造成比较严重的影响，阻碍目的菌进一步生长代谢，最终致使非目的菌快速生长，影响发酵的成果。
造成染菌的原因是多种多样的，因此，对发酵生产中的染菌原因以及控制预防措施进行研究进行分析具有重要的现实意义。
1.发酵生产中染菌形成原因发酵生产过程中产生染菌现象是比较常见的现象，产生染菌的主要原因包括PH异常、溶氧异常、发酵泡沫过多以及菌体的浓度不正常。
但主要从配料、发酵这两个方向去分析产生染菌的原因。
如果对配料没有消毒彻底，维持罐积累残渣没有彻底清除，没有按照相应的操作流程进行操作产生负压。
空间消毒不够彻底、没有有效控制喷射器的温度、没有及时检查进发酵各个地方的压垫，都可能出现染菌情况。
因此，在生产过程中需要定期地对碱水清洗进行检查，对换热器进行打压，这样能有效地预防缓解染菌状况的产生。
发酵生产产生染菌原因主要表现在发酵前期、中后期。
（1）发酵前期原因。
在发酵前期，因为温度比较高、缺乏生物素或者通风量过于大，这使得检查菌体时出现不规则排列的形状。
发酵过程染菌及防治方法
发酵设备及管道的密封不严，导致外界杂菌进 入发酵体系。
操作不当
如无菌操作不严格、接种时带人杂菌等。
环境卫生差
空气、水、原料等带菌，成为发酵染菌的来源。
02 发酵过程染菌的防治方法
物理防治方法
01
灭菌
通过高温或紫外线照射等方法， 彻底杀死或消除染菌，防止其繁 殖。
02
03
过滤
隔离
01 制定严格的发酵生产管理制度，规范操作流程和 记录。
02 对生产过程中的温度、湿度、压力、流量等关键 参数进行实时监控和记录。
03 定期对生产环境进行监测，确保环境卫生符合要 求。
建立完善的染菌预防和应对机制
制定详细的染菌应急 预案，明确应对措施 和责任人。
对染菌情况进行调查 和分析，找出原因并 采取有效的纠正措施。
建立染菌报告制度， 要求操作员及时上 报染菌情况。
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03 发酵过程染菌的检测与监 测
染菌的检测方法
01
02
03
04
微生物培养法
通过在选择性培养基上培养可 疑菌落，根据菌落特征、染色 反应和生化试验进行鉴定。
免疫学检测法
利用特异性抗体与可疑菌的抗 原发生反应，通过显色反应或 荧光标记等方法进行检测。
分子生物学检测法
利用基因探针、PCR技术和基 因测序等技术，对可疑菌的核
发酵过程染菌及防治方法
contents
目录
• 发酵过程染菌概述 • 发酵过程染菌的防治方法 • 发酵过程染菌的检测与监测 • 发酵过程染菌的预防措施与建议
01 发酵过程染菌概述
染菌的定义与分类
定义
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略【摘要】本文主要探讨了毕赤酵母发酵过程中可能出现的染菌问题，并提出了相应的分析及预防策略。
在染菌分析部分，详细分析了可能引起染菌的原因，为后续的预防提供了指导。
在预防策略部分，从加强消毒管理、控制环境温湿度、严格进料检验等方面提出了针对性的预防措施。
文章还介绍了预防策略的实施方法，为质量管理提供了具体操作方案。
结论总结了本文的研究成果，展望了未来可能的研究方向，为相关领域的研究提供了参考价值。
通过本文的研究，将对毕赤酵母发酵工艺的质量控制和生产实践提供重要的指导和帮助。
【关键词】毕赤酵母、发酵过程、染菌分析、染菌原因、预防策略、实施、结论总结、未来展望、研究背景、研究意义1. 引言1.1 研究背景毕赤酵母是一种在食品工业中广泛应用的发酵剂，能够有效地促进面包、酒类等食品的发酵过程，提高其品质和口感。
在毕赤酵母的发酵过程中，常常会出现染菌现象，从而影响产品的质量和安全。
对毕赤酵母发酵过程中的染菌问题进行深入研究，寻找原因并提出有效的预防策略，对于保障食品安全和质量具有重要意义。
目前，针对毕赤酵母发酵过程中的染菌现象的研究相对较少，有待进一步探讨。
通过对染菌分析和染菌原因分析，可以更好地了解毕赤酵母发酵过程中染菌问题的发生机制，为制定针对性的预防策略提供实质性的依据。
本研究旨在探讨毕赤酵母发酵过程中的染菌问题，分析染菌原因并提出有效的预防策略，为食品工业的生产提供指导和参考。
1.2 研究意义毕赤酵母是一种常用的工业微生物，其发酵过程在食品和饮料生产中起着重要作用。
染菌是影响发酵过程的主要因素之一，严重影响产品质量和生产效率。
对毕赤酵母发酵过程中的染菌进行分析和预防具有重要的研究意义。
通过深入研究毕赤酵母发酵过程中的染菌情况，可以揭示染菌对发酵过程的影响及其机制，为解决发酵过程中的质量问题提供理论支持。
通过分析染菌原因，可以找到引起染菌的关键环节，有针对性地加强相关环节的监测和控制，从而提高发酵产品的质量和产量。
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略毕赤酵母发酵是一种常见的工业发酵过程，其在食品、饮料和医药等领域都有着广泛的应用。
毕赤酵母发酵过程中由于环境条件的复杂性，容易受到微生物的污染，特别是细菌和霉菌的污染。
对毕赤酵母发酵过程中的染菌情况进行分析，并针对性地制定预防策略，对保证发酵过程的正常进行具有重要的意义。
一、毕赤酵母发酵过程的染菌分析1. 染菌来源毕赤酵母发酵过程中的染菌主要来源于空气、设备、原料和操作人员等多方面。
空气中的微生物是主要的污染源之一，霉菌和细菌通过空气传播，进入发酵罐内生长繁殖。
设备和原料表面的微生物也可能成为污染源，而操作人员是最主要的传播者之一，他们带入的微生物会在整个生产过程中传播。
2. 染菌类型毕赤酵母发酵过程中常见的污染微生物主要包括大肠杆菌、枯草杆菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、酵母菌等。
这些微生物在发酵过程中会引起产品变质、发酵过程中断甚至损坏生产设备。
3. 染菌对发酵过程的影响毕赤酵母发酵过程中的染菌会对产品质量产生负面影响。
细菌和霉菌的生长会产生代谢产物，例如：酸、醇、酸酐等，这些物质会使发酵液的pH值发生变化，抑制毕赤酵母的生长和发酵，进而影响产品品质。
染菌还会导致产品发酵时间延长、产量降低、产品产生异味、变质等。
二、毕赤酵母发酵过程的染菌预防策略1. 空气处理空气中的微生物是毕赤酵母发酵过程中最主要的污染来源之一。
对空气中的微生物进行有效处理是预防染菌的关键。
首先要对生产车间进行合理的空气过滤，安装高效过滤器，过滤空气中的微生物。
其次要对生产车间进行定期通风，保持空气清新。
还可在生产车间内设置紫外线杀菌灯，对空气中的微生物进行消毒。
2. 设备和原料消毒设备和原料表面的微生物也是毕赤酵母发酵过程中的污染源之一。
要对生产设备和原料表面进行定期清洁和消毒。
在生产过程中，要定期清洁发酵罐、管道、搅拌器等设备，以确保设备表面的微生物得到有效控制。
要对原料进行严格的检验和消毒处理，确保其不受到外源污染。
发酵过程染菌及防治方法
泡沫过多
一般在发酵过程中泡沫的消长是有一定规律的。
但是，由于菌体生长差、代谢速度慢、接种物嫩或种子未及 时移种而过老、蛋白质类胶体物质多等都会使发酵液在不断 通气、搅拌下产生大量的泡沫。 除此以外，培养基灭菌时温度过高或时间过长，葡萄糖受到 破坏产生的氨基糖会抑制菌体的生长，也会使泡沫大量产生， 从而使发酵过程的泡沫发生异常。
发酵过程是否染菌应以无菌试验的结果为依据进行判断。
在发酵过程中，如何及早发现杂菌的污染并及时采取措施 加以处理，是避免染菌造成严重经济损失的重要手段。因 此，生产上要求能准确、迅速的检查出杂菌的污染。 目前常用于检查是否染菌的无菌试验方法主要有显微镜检 查法、肉汤培养法、平板（双碟）培养法、发酵过程的异 常观察法（如溶氧量）等。
第三节
杂菌污染的预防
一、种子带菌及其防治 二、空气带菌及其防治 三、操作失误导致染菌及其防治 四、设备渗漏或“死角”造成的染菌及其防 治
一、种子带菌及其防治
原因 保藏斜面试管菌种染菌、培养基和器具灭菌不彻底、种子转移
和接种过程染菌、种子培养所涉及的设备和装置染菌。
措施 ① 严格控制无菌室的污染，根据生产工艺的要求和特点，建立
发酵中期染菌将会导致培养基中的营养物质大量消耗，并 严重干扰生产菌的代谢，影响产物的生成。 有的染菌后杂菌大量繁殖，产生酸性物质，使pH值下降， 糖、氮等的消耗加速；菌体自溶，致使发酵液发粘，产生大 量的泡沫，代谢产物的积累减少或停止； 有的染菌后会使已生成的产物被利用或破坏。 从目前的情况来看，发酵中期染菌一般较难挽救，危害性 较大，在生产过程中应尽力做到早发现、快处理。
发酵过程中的染菌定义、影响因素和防治
❖ 染菌的防治
一、染菌的影响
发酵过程污染杂菌，会严重的影响生产，是发 酵工业的致命伤。 造成大量原材料的浪费，在经济上造成巨大 损失 扰乱生产秩序，破坏生产计划。 遇到连续染菌，特别在找不到染菌原因往往 会影响人们的情绪和生产积极性。 影响产品外观及内在质量
❖染菌的防治
❖染菌的防治
（二）染菌原因
造成染菌的因素很多，但总结几十年的经验，对 绝大部分罐批染菌的原因是比较清楚的，但在实际 生产中发酵染菌率仍比较高，可以说产生这种现象 大多数是由于工作中“明知故犯”“不负责任”和 “侥幸心理”所造成的。例如，灭菌的蒸汽压不足 不能灭菌；设备有渗漏不能进罐等等都是众所周知 的，但因为有侥幸心理还是照样灭菌，进罐，结果 以污染杂菌而告终。现将我们收集到的国内外几家 抗生素工厂发酵染菌原因列于下：
❖染菌的防治
日本工业技术院发酵研究所多年来抗生素发酵染菌原因分析
项目
百分率%
种子带菌或怀疑种子带菌
9.64
接种时罐压跌零
0.19
培养基灭菌不透
0.79
总空气系统有菌
19.96
泡沫冒顶
❖染菌的防治
2、污染不同种类和性质的微生物的影响
（1）污染噬菌体 噬菌体的感染力很强，传播蔓延迅速，也 较防治，故危害极大。污染噬菌体后，可 使发酵产量大幅度下降，严重的造成断种， 被迫停产。
❖染菌的防治
（2）污染其它杂菌
有些杂菌会使生产菌自溶产生大量泡沫， 即使添加消泡剂也无法控制逃液，影响发酵过 程的通气搅拌。 有的杂菌会使发酵液发臭、发酸，致使pH下 降，使不耐酸的产品破坏。特别是染芽孢杆菌， 由于芽孢耐热，不易杀死，往往一次染菌后会 反复染菌。
生物发酵过程中染菌的控制和防范
由于掌握 了先 进 的灭 菌技 术 ．使 发酵染 菌率 控制 较好 。 根 据这 成功 的经 验 ． 我们 要从 染菌 的表观 究其 本 质 ． 抓住 规律 ． 从 而不断地 提 出解 决 和防治 染 菌 的措 施 ． 降低染 菌率
不 稳定 等 对 种子 、发酵及 流加糖 连 消系统 的 阀 门、 维持罐 压 料阀 、 过 滤罐 、 排 污 阀门及排 空 阀 、 进
问题 ． 主要 分发 酵前期 及 中后 期进 行分 析 发酵前 期 异常现 象及 分析 ： 发酵 前期 温度过 高 、生 物 素缺乏或 者通 风量
能够 对噬菌 体 的抑制起 到很好 的效 果 噬菌体 作
为细 菌病毒 ． 与发 酵生 产关 系密切 ． 发酵 罐一旦感 染噬 菌体 不但严 重影 响产 酸 ．对 提取收 率及产 量 也有 很大 影响 ．出现 噬菌体 以后 必须选 育抗 噬菌 体菌 株和 配合其 他措施 使生 产继续 进行 直接 关 系企 业 的经济 收益 。为此 ， 许多 学者进行 研究 ， 利
１ 使 用 基 因工 程 改造 的菌 种
随着科 学技 术 的进 步 ．通 过基 因工 程技术 对 菌 种进 行改造 ． 已经十分 成熟 ． 通过 基 因重 组对 菌
株 的构造 和筛选 ． 得到 抗噬菌 体 的菌株进 行发 酵 ．
种工 艺参数 纷 繁复杂 ．调控不 好将 影响后 续＿ 丁序 的正 常运转 ． 然 而发酵 上 的问题是 最多 的 发酵 染 菌及 让噬 菌体也 是常 见 的 ．以下对 发酵 常 出现 的
太大会 导 致镜 检 时菌 体 不规 则 缺少 八 字排 列 ． 如
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
——■一
第 ３期
李德衡 ． 等： 生 物 发 酵 过 程 中 染菌 的控 制 和 防 范
发酵过程中的防染菌防治研究_于利东
40生物技术世界 ＢＩＯＴＥＣＨＷＯＲＬＤ发酵是大规模的对动植物细胞或各种微生物进行生长和培养，通过动植物细胞或微生物产生的生理变化和化学变化，大量的积累和产生人们需要的代谢产物的过程。
酿酒、发面等都是发酵的简单应用［１］。
发酵工程是生物工程的重要组成部分。
发酵按照不同的原料可分为废水发酵、糖类物质发酵等；按照不同的产物可分为抗生素发酵、有机酸发酵、维生素发酵等；按照不同的形式可分为液态深层发酵和固态发酵；按照不同的工艺流程可分为连续发酵、分批发酵和流加发酵；按照不同的氧需求可分为通风发酵和厌氧发酵。
１ 加强染菌的管理和监督虽然发酵工厂的技术和生产装备有所改进，染菌率逐渐下降，但是大多数发酵工厂的染菌率仍然很高，达３２％以上，严重降低了生产水平，使生产成本大量增加。
想要控制染菌率，使染菌率降到最低，就要加强染菌的管理和监督。
在管理过程中，应当将工厂的发酵车间分块管理，分成发酵培养、空气系统、补料系统和种子培养四个板块。
工厂中层以上管理人员应当根据染菌制定相应的工作标准、预防措施和考核制度。
严格要求工人按照工作标准实施发酵，每个板块应当确定一名管理人员，负责检查和监督工人是否按照工作标准实施发酵。
各个车间的管理人员应当根据多年的防染菌经验，全面结合各个板块实际的情况，总结出产生染菌的主要原因，并根据原因制定预防措施。
制定相应的奖惩制度，定期对比各个车间的染菌率，对染菌率最低的车间部门可以通过奖金、大会表扬等方式进行奖励，对染菌率较高的车间部门进行处罚、口头批评等，并对车间管理人员作出相应处罚。
２ 染菌的有效处理发酵工厂应当重视霉菌室的岗位职能。
染菌产生后霉菌室应当充分发挥部门职能，霉菌室工作人员应当在显微镜下仔细观察染菌的染色深浅、形状及大小，准确拍片并备案，及时上报有关部门，并在２４小时内对斜面进行培养，将单菌涂片，确定染菌是否为芽孢杆菌。
染菌产生后霉菌室工作人员应当定期选取无菌样，测定染菌的数目和繁殖速度，根据工作经验预估染菌进罐的时间，测定时间以相隔８小时为宜。
发酵过程中染菌的有效控制及预防
发酵过程中染菌的有效控制及预防邢攀科摘要：针对微生物发酵过程中的染菌现象，分析了导致发酵染菌的几种主要原因，并提出了有效控制方法，以预防为主，及时观察分析，杜绝发酵染菌的隐患。
关键词：发酵染菌微生物发酵前言：杂菌感染，简称染菌，普遍存在于微生物发酵工业生产中。
特别是夏季，随着气温的不断升高．在丙酮、醇粮食发酵法工业生产中尤其突出[5]。
发酵过程是利用某种特定的微生物在一定的环境中进行新陈代谢，从而获得某种产品。
现代发酵工业要求纯种培养，不仅斜面、种子和培养基以及发酵罐、管道等须经严格灭菌除去各种杂菌，而且在需氧发酵中通入的空气也需经过除菌处理。
只有这样，才能确保生产不受杂菌污染，从而保证生产菌的旺盛生长。
染菌的结果，轻者影响产量或产品质量，重者导致倒罐，甚至停产。
工业发酵中污染杂菌造成的损失是十分惊人的，所以必须认真对待除菌。
1 发酵过程对设备的要求1.1发酵罐发酵罐在使用之前，需要进行认真检查，以消除染菌隐患，如搅拌系统转动有无异常;机械密封是否严密:罐内的螺丝是否松动;罐内的管道有无堵塞;夹层或罐内盘管是否泄漏;罐体连接阀门严密度等等。
机械密封目前在发酵罐上得到广泛应用，取代了以前搅拌轴采用的填料密封形式，但是由于安装精度不高或选用的机械密封不合适，仍然会由于轴封泄露造成染菌，因此在安装搅拌轴时要注意对中，为了便于观察罐内发酵情况，在人型发酵罐内一般设置有冲洗视镜的蒸汽管道，但是蒸汽一旦冷凝在管道中，冷凝水并不能完全保证无菌，因此冲洗视镜的蒸汽管道要去除，杜绝染菌隐患。
如果罐内雾气大看小清楚，可以采用更高亮度的视镜灯[6]。
1.2发酵罐附属设备发酵罐附属设备有空气净化系统，温度、压力流量等控制系统及相应的管道阀门。
哪一个环节出问题都会造成发酵失败[3]。
1.2.1空气净化系统传统的空气净化使用活性炭、棉花、超细玻璃纤维纸做过滤器Ul，过滤效果差，操作复杂。
目前国内的膜过滤技术比较成熟，用偏二氟乙烯((PVDF)制成的折叠微孔滤膜滤芯，过滤精度高，流量大。
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略毕赤酵母是一种常用的发酵剂，其发酵过程非常重要，但同时也容易受到细菌、霉菌、酵母等微生物的污染。
为了保证毕赤酵母的发酵质量，减少污染对生产的影响，需要对发酵过程进行染菌分析，并制定有效的预防策略。
1. 采样点的选择毕赤酵母发酵过程中，应该选择合适的采样点进行染菌分析。
常见的采样点包括发酵罐内、发酵罐表面、发酵液中等。
这些采样点能够全面反映发酵过程中的微生物污染情况。
2. 样品的获取获取样品时应采取无菌操作，避免外界微生物的污染。
在获取样品时应穿戴无菌手套，使用无菌器具，并及时密封样品瓶，防止外界微生物污染。
3. 染菌分析方法常用的毕赤酵母发酵过程染菌分析方法包括培养法、PCR法、荧光定量PCR法等。
其中培养法是最常用的方法，通过将样品接种到适当的培养基上，观察培养基上的细菌、霉菌、酵母等微生物的数量和种类，从而判断发酵过程中的微生物污染情况。
根据染菌分析结果，可以了解到发酵过程中存在的微生物种类、数量及其对发酵的影响程度。
根据染菌分析结果，可以制定相应的预防策略，确保毕赤酵母的发酵质量。
二、毕赤酵母发酵过程的预防策略1. 严格控制生产环境在毕赤酵母生产过程中，应该严格控制生产环境，避免外界微生物的污染。
生产车间应该保持洁净，空气中的微生物浓度应该控制在合理范围内。
生产设备和器具应该经常进行消毒和清洁，避免微生物的残留。
2. 采取适当的处理措施在毕赤酵母发酵过程中，可以采取适当的处理措施来预防微生物的污染。
在原料投入前对原料进行消毒处理，使用含有抗菌成分的添加剂等。
3. 加强对发酵过程的监控加强对发酵过程的监控，及时发现发酵过程中的微生物污染情况，可以采取相应的应对措施，减少微生物对发酵的影响。
4. 建立完善的质量控制体系建立完善的毕赤酵母发酵质量控制体系，对发酵过程进行全面、系统的质量控制，以确保发酵过程中微生物的质量。
5. 培训员工对生产中的员工进行相关的微生物防控知识培训，提高其对微生物的认识和预防能力。
毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略
曹家明，许超群，曾宪放．毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略［Ｊ］．江苏农业科学，２０２０，４８（８）：２６５－２７１．ｄｏｉ：１０．１５８８９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００２－１３０２．２０２０．０８．０４９毕赤酵母发酵过程的染菌分析及预防策略曹家明，许超群，曾宪放（上海泽润生物科技有限公司，上海２０１２０３） 摘要：针对毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）在发酵过程中发生的染菌现象，按照质量控制要素及工艺流程进行全面分析。
通过对工作种子库、一级种子、二级种子、滤芯、发酵罐及发酵菌体进行系统排查发现，染菌是由赛多利斯取样阀密封圈磨损及试验人员的不规范操作造成的。
因而在试验操作、设备维护、车间管理、文件修订、人员培训等方面实施一系列纠正预防措施，随后进行多批次的发酵生产。
结果表明，试验结果与历史数据具有高度的一致性，从而避免了染菌现象的再次发生。
关键词：毕赤酵母；发酵；染菌分析；预防策略 中图分类号：Ｓ１８２ 文献标志码：Ａ 文章编号：１００２－１３０２（２０２０）０８－０２６５－０７收稿日期：２０１９－０３－１８基金项目：国家“重大新药创制”科技重大专项（编号：２０１５ＺＸ０９１０１０３５、２０１７ＺＸ０９３０８００３）；上海市“科技创新行动计划”生物医药领域科技支撑项目（编号：１８４３１９０５６００）；上海市科技人才计划（编号：１６ＱＢ１４０４２００）。
作者简介：曹家明（１９８５—），男，江苏常州人，硕士，工程师，主要从事生物药物开发、基因工程菌发酵、蛋白药物纯化等方面的研究。
Ｅ－ｍａｉｌ：ｃａｏｊｉａｍｉｎｇ＠ｗａｌｖａｘ．ｃｏｍ。
自从Ｃｒｅｇｇ等于１９８５年利用重组毕赤酵母（Ｐｉｃｈｉａｐａｓｔｏｒｉｓ）成功表达外源蛋白［１］以来，毕赤酵母因高效表达外源蛋白、操作简单、易于培养、生产成本低廉等优点而受到科学家和工业界的青睐，目前已有超过５００个蛋白在毕赤酵母中表达成功，表达产物包括干扰素、酶制剂、抗体等［２－４］。
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发酵过程中染菌的有效控制及预防邢攀科摘要：针对微生物发酵过程中的染菌现象，分析了导致发酵染菌的几种主要原因，并提出了有效控制方法，以预防为主，及时观察分析，杜绝发酵染菌的隐患。
关键词：发酵染菌微生物发酵前言：杂菌感染，简称染菌，普遍存在于微生物发酵工业生产中。
特别是夏季，随着气温的不断升高．在丙酮、醇粮食发酵法工业生产中尤其突出[5]。
发酵过程是利用某种特定的微生物在一定的环境中进行新陈代谢，从而获得某种产品。
现代发酵工业要求纯种培养，不仅斜面、种子和培养基以及发酵罐、管道等须经严格灭菌除去各种杂菌，而且在需氧发酵中通入的空气也需经过除菌处理。
只有这样，才能确保生产不受杂菌污染，从而保证生产菌的旺盛生长。
染菌的结果，轻者影响产量或产品质量，重者导致倒罐，甚至停产。
工业发酵中污染杂菌造成的损失是十分惊人的，所以必须认真对待除菌。
1 发酵过程对设备的要求1.1发酵罐发酵罐在使用之前，需要进行认真检查，以消除染菌隐患，如搅拌系统转动有无异常;机械密封是否严密:罐内的螺丝是否松动;罐内的管道有无堵塞;夹层或罐内盘管是否泄漏;罐体连接阀门严密度等等。
机械密封目前在发酵罐上得到广泛应用，取代了以前搅拌轴采用的填料密封形式，但是由于安装精度不高或选用的机械密封不合适，仍然会由于轴封泄露造成染菌，因此在安装搅拌轴时要注意对中，为了便于观察罐内发酵情况，在人型发酵罐内一般设置有冲洗视镜的蒸汽管道，但是蒸汽一旦冷凝在管道中，冷凝水并不能完全保证无菌，因此冲洗视镜的蒸汽管道要去除，杜绝染菌隐患。
如果罐内雾气大看小清楚，可以采用更高亮度的视镜灯[6]。
1.2发酵罐附属设备发酵罐附属设备有空气净化系统，温度、压力流量等控制系统及相应的管道阀门。
哪一个环节出问题都会造成发酵失败[3]。
1.2.1空气净化系统传统的空气净化使用活性炭、棉花、超细玻璃纤维纸做过滤器Ul，过滤效果差，操作复杂。
目前国内的膜过滤技术比较成熟，用偏二氟乙烯((PVDF)制成的折叠微孔滤膜滤芯，过滤精度高，流量大。
使用时只要注意过滤器前压缩空气除湿脱油，并按规范对过滤器灭菌，空气保证无菌还足没有问题的。
而且PVDF膜对压缩空气中的水分不敏感，膜本身的疏水性强，使用中注意过滤器排水，解决了以前当空气湿度过大导致棉花过滤器不能使用的问题[3]。
1.2.2温度、压力流量等控制系统发酵罐实消是对发酵培养基进行彻底的灭菌处理，利用高温过饱和蒸汽的强穿透能力使各种细菌、真菌蛋白质凝固而死亡。
在工业灭菌中，对预热时间、蒸汽阀门的开度、灭菌温度、灭菌压力和泡沫控制等，都有严格要求，一个环节出现问题，就容易导致染菌。
一般工业上灭菌温度在1100C，灭菌压力O.SMPa以上，而保证灭菌温度和压力准确的就是各种温度探头、压力传感器。
因此定期对这类探头、传感器、电极的检定十分重要[3]。
1.2.3阀门阀门对介质的密封性可分为4级[3]，公称级、低漏级、蒸汽级和原子级。
公称级与低漏级密封适用于关闭要求不严密的阀门，例如用于控制流量的阀门。
蒸汽级密封适用于蒸汽和大部分其他工业用阀门的阀座、阀杆和阀体连接部的密封。
原子级密封适用于介质密封性要求极高的场合，如宇宙飞船和原子能动力设备等。
发酵工业中由于使用高温蒸汽对发酵设备进行灭菌，因此阀门要求是蒸汽级密封。
阀门在发酵设备中使用最多，用的阀门也有各种型号，考虑到阀门使用范围和易于维护，发酵工业上使用最多的是截止阀。
近年来国内已开发发酵专用阀门，效果较为理想，如条件许可，也可选用。
2 发酵过程对空气的要求采用空气净化设备系统制备无菌空气，要严格控制好下述两点：一是提高空气进入压缩机之前的洁净度，二是除尽压缩空气中夹带的油水。
否则会影响无菌空气质量[1]。
2.1空气过滤器工业用的空气除菌系统中的空气过滤器一般都比较庞大，如果其中的纤维铺设不匀，密的部分阻力大，松的部分阻力小，就会使较多的空气沿着阻力小的部分流出，从而形成短路。
走短路的那部分空气没有经过充分过滤而带菌，进入发酵罐将使发酵染菌。
纤维层装得太松对过滤不利，太紧同样也会影响过滤效率。
同时，在过滤介质用蒸汽灭菌时，太紧则蒸汽穿透力差，穿透力差灭菌效果也差。
所以用过分压实纤维层的办法试图达到增加过滤效率的目的，实际上是适得其反。
对于棉花过滤器最合适的充填密度是160 ～180公斤／米3；玻璃纤维是130 ～180公斤／米3左右。
在铺纤维时分层均匀铺设是必要的。
过滤器器壁腐蚀形成氧化铁层，氧化铁是一种多孔物质，空气会在其中穿过而得不到过滤，因而也会使空气中带茵并造成污染。
采用活性炭棉花作为过滤介质的空气过滤器，活性炭受到气流的冲击互相碰撞、摩擦而破碎并逐渐灰化，使活性炭的体积减小空间增大，上下两端的棉花受空气的顶撞力而逐渐改变位置。
之后，灰化的活性炭随气流逸出，整个过滤介质的体积减小使过滤层倾斜甚至发生翻身的现象，致使大量未经过滤的空气进入发酵罐内造成严重的染菌事故。
在用蒸汽灭菌时，检查排出蒸汽的情况可以判断过滤层是否有问题。
排出蒸汽均匀并呈青色有力表示情况良好，排出蒸汽呈雾状无力表明压得太紧，而当排出蒸汽断续不均匀以及进出口两测的压力降过小时则就有可能是过滤层有位移现象，发现不正常的情况应立即予以纠正。
大多数产品在整个发酵期间需要改变空气流量，但油水分离设备、过滤器的过滤面积和长度是根据空气流速来设计的，空气流速的改变就会影响油水分离效果和过滤效率，所以设计时要充分注意这种情况，掌握空气流量改变的范围，选择合适的空气流速。
生产时各罐的发酵时间要尽量叉开，使空气流量均匀。
2.2 检查介质是否失效首要原因是油水分离系统效果不佳，油水分离不完全，进入总过滤器的空气相对湿度远高于50 ～60 ，使棉花活性炭过滤器和超纤维过滤器的过滤介质受潮而失效，这时应分别检查冷却、分离和加热效果，确定原因。
当然空气系统所有的设备必须定时打开排污阀排去油水，否则若设备内积污液太多也会使介质受湖，应落实制度定时排污。
另外，过滤器的蒸汽阀门漏，也会使介质受潮，应检查。
第二种原因是总过滤器的棉花活性炭翻身，空气走短路，过滤器没有起到应有静过滤作用，杂菌没有滤除，而进入发酵罐与种子罐，导致染菌。
第三种愿因是遏到染菌，拆装过滤器后，把棉花介质压得太紧，这样，虽然过滤效果好，但因介质太紧，使蒸汽穿透困难，导致过滤器灭菌不透而染菌。
这种情形可根据正常使用时，过滤器前后的空气压差来判断，若压差大，说明介质装填太紧。
具体装置可根据计算确定怀疑空气系统染菌时，既要检查油水分离情况，又应拆装过滤器。
若是新建工厂出现大批连续染菌，如确定是空气染菌，有可能是设计问题，这时应根据发酵规模及环境污染程度，更改设计的过滤器内空气线速度，提高其分离效率。
3 种子带菌的防止种子带菌的的主要原因有以下几方面：一是培养基及其用具的灭菌不彻底，二是菌种在保藏和培养过程中染菌，三是在移接过程染菌。
因此应对培养基、培养菌种所用的工具进行充分灭菌；同时对培养环境、菌种保藏环境和无菌室进行充分的灭菌；另外就是在菌种的移接过程中应严格按照无菌操作进行[4]。
3.1无菌室接种、移种等无菌操作需要在无菌室内进行。
无菌室面积一般6m2（长3m，宽2m，高2m）[2]。
为了减少外界空气的侵入，无菌室要有1 ～3个套间(缓冲过道)。
无菌室内部的墙壁、天花板要涂白漆或采用磨光石子，要求无裂缝，墙角最好做成圆弧形，便于揩擦清洗以减少空气中微生物的潜伏场所，室内布置应尽量简单，最好能安装空气调节装置，通入无菌空气并调节室内的温湿度。
无菌室的每个套间一般都用紫外线灭菌。
通常用30瓦紫外线灭菌灯照射20 ～30分钟即可。
紫外线杀菌的效率还与室内空气的性质有关；空气温度高杀菌效率高，空气中灰尘多杀调效率低，而相对湿度高则紫外线灯的使用寿命长。
紫外线能穿过石英但不能透过玻璃。
配合使用的化学灭菌药剂有：用作喷洒或揩擦的(以揩擦为主)有75%酒精、0.25%新洁而灭(季胺盐)、0.6 ～1%漂白粉、0.5%石炭酸、0.5%过氧乙酸、1%煤酚皂(来苏尔)、0.5%高锰酸钾、300单位/毫升土霉素、50单位/毫升制霉菌素等；用作熏蒸的有甲醛(每立方米空间约用10毫升)或硫磺(每立方米空间约用2 ～3克)。
要根据不同情况采用不同的灭菌剂。
如检查出无菌室中潜伏的微生物中细菌较多，用石炭酸、土霉素等灭菌较好；如无菌室中霉菌多可以采用制霉菌素；如有噬菌体则用甲醛、双氧水或高锰酸钾等较好。
无菌室内无菌度的要求是：把无菌培养皿平板打开盖子在无菌室内放置30分钟，根据一般工厂的经验，长出的菌落在3个以下为好。
在种子的无菌条件不要求很高的情况下，可以不采用无菌室而直接用无菌箱进行操作，但无菌要求很高的情况下，即使在无菌室内还要用无菌箱操作。
无菌室的利用次数要恰当，每次使用时间也不宜过长。
用具要经蒸汽灭菌或用灭菌剂揩擦后才能带入使用。
3.2灭菌锅灭菌锅是一种压力容器，作为培养种子及小型试验用具的灭菌之用，有立式和卧式两种。
灭菌操作时需要注意排气管是否畅通，因为灭菌锅的排气管较小，易被铁锈或瓶子破碎后的培养基等所堵塞。
如果排气管不道，锅内空气排不出去形成气团，蒸汽就不易渗入，从而使灭菌不彻底。
用某种较耐热的芽抱杆菌进行试验证明：在排气不通畅的情况下，以1公斤/厘米2的蒸汽压力经30分钟灭菌后进行检查，发现某些部位的三角瓶中，灭菌前放入的芽抱杆菌没有被杀死。
如果不是采用蒸汽而是用锅内烧水的办法进行灭菌，那末排气的时间更要长一些，不然水蒸汽来不及驱出空气而使被灭菌的瓶中的冷空气排不尽。
3.3摇瓶机摇瓶机(亦称摇床)是培养好气菌的小型试验设备或作为种子扩大培养之用，常用的摇瓶机有往复式和旋转式两种。
往复式摇瓶机的往复频率一般在80 ～140次／分，冲程一般为6 ～14厘米，如频率过快、冲程过大或瓶内液体装料过多，在摇动时液体要溅到包瓶口的纱布上易引起染菌，特别是启动时更易发生这种情况。
旋转式摇瓶机的偏心距一般在3 ～6厘米之间，旋转次数为60 ～300转／分。
放在摇瓶机上培养瓶中发酵液所需的氧是由室内空气经瓶口包扎的纱布(一般是八层)或棉塞通入的，所以氧的传递与瓶口的大小，瓶口的几何形状和棉塞或纱布层的厚度和密度有关。
在通常情况下，摇瓶的氧吸收系数(亚硫酸氧化值)K取决于摇瓶机的特性和三角瓶的装d料量。
往复式摇瓶机是利用曲柄原理带动摇床作往复运动，机身为铁制或木制的长方形框子，有一层至三层托盘，托盘上开有圆孔备放培养瓶，孔中凸出一三角形橡皮，用以固定培养瓶并减少瓶的震动，传动机构一般采用二级皮带轮减速，调换调速皮带轮可改变往复频率。
偏心轮上开有不同的偏心孔，以便调节偏心距。
往复式摇瓶机的频率和偏心距的大小对氧的吸收有明显的影响。
据有关文献报导，当冲程为10厘米、往复频率为200次/分，Kd 值可达2.41毫克分子氧/升，分，大气压；当冲程为5厘米、往复频率240次/分时，K值可d达1.25毫克分子氧/升，分，大气压。