沉降菌测试标准操作规程

版本号
修订原因
修订日期
01
新订
附录
测试区域 测试依据 测试日期
沉降菌测试记录
编码：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
测试人员 培养基用量
测试状态
培养时间
培养温度
报告日期
测试房间
现场操 采样点
房间编 作人员 布置类
号数
型
沉降菌菌落数/cfu
a b 测点1 测点2 测点3 测点4
符合规定
更鞋间
PLES123
8.1将已制备好的培养皿按采样点布置图逐个放置，然后从里到外逐个
打开培养皿盖，使培养基表面暴露在空气中。
8.2静态测试时，培养皿暴露时间为30min，动态测试时，培养皿暴露时
间为不大于4h。
9、培养：取样结束后将平皿倒置于生化培养箱内35℃培养72小时，并
以未采样的营养琼脂平皿作对照皿。
10、结果计算
培养时间
报告日期现场操 采样点Fra bibliotek房间编 作人员 布置类
号数
型
沉降菌菌落数/cfu
a b 测点1 测点2 测点3 测点4
更衣 PLEQ003
缓冲间1 PLEQ004
取样间 PLEQ005
缓冲间2 PLEQ006 阴性对照
洁净度级别
AB
C
标准
＜1 5
50
沉降菌
警戒限
-- 3
40
cfu/4小时
纠偏限
-- 4
二更2 PLEZ122
缓冲间1 PLEZ123
缓冲间2 PLEZ124
微生物限度 室
PLEZ125
净化操作台 PLEZ125
阳性对照室 PLEZ126
净化操作台 PLEZ126 阴性对照
洁净度级别
沉降菌 cfu/4小时
标准 警戒限 纠偏限
备注
AB ＜1 5 -- 3 -- 4
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
C
D
50
100
40
80
45
90
采样点布置类型：
1 3
2 1 4 2 b a
沉降菌测试记录
编码：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
测试区域 测试依据 测试日期 测试状态 培养温度
测试房间
测试人员
培养基用量
男一更
PLES124
女一更
PLES125
男二更
PLES126
女二更
PLES127
手消毒间 PLES128
外用酊剂线 PLES129
酊剂配制间 PLES130
酊剂灌装间 PLES131
预留间1 PLES132 溶液剂灌装 PLES133 理瓶、洗瓶 PLES138
瓶子暂存间 PLES139
洗衣整衣间 PLES140 消毒液配制 PLES141
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
不合格品存 PLES142
洁具存放间 PLES143
模具存放间 PLES144
容器存放 PLES145
容器洗涤 PLES146 内包材存放 PLES147 溶液剂配制 PLES148 半固体配制 PLES149
11.3若测试结果超标时应及时与生产部门联系，对该区域进行消毒或其
它处理，然后重新测试至合格。
11.4洁净区沉降菌控制标准
洁净度级别
A
B
C
D
沉降菌
标准
＜1
5
cfu/4小
50
100
时
警戒限
--
3
40
80
纠偏限
--
4
45
90
1、 表中数值均为平均值。 2、 单个沉降碟的暴露时间可以少于4小时，同一位置可使用多个沉 降碟连续进行检测并积累计数。
测试区域 测试依据 测试日期 测试状态 培养温度
测试房间
沉降菌测试记录
编码：SOP-ZL-HJ-006-01-R1
测试人员
培养基用量
培养时间
报告日期
现场操 采样点
房间编 作人员 布置类
号数
型
沉降菌菌落数/cfu
a b 测点1 测点2 测点3 测点4
符合规定
一更 PLEZ120
二更1 PLEZ121
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
阴性对照
洁净度级别
沉降菌 cfu/4小时
标准 警戒限 纠偏限
备注
AB ＜1 5 -- 3 -- 4
是□ 否
□
C
D
50
100
40
80
45
90
采样点布置类型：
1 3 2 1 4 2 a b
45
符合规定
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □ D 100 80 90
备注
采样点布置类型：
1 3 2 1 4 2 a b
2
3 6 13 32 63
6.2最少培养皿数 在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数，见下表
洁净度级别
所需Φ90mm培养皿数(以沉降0.5 h /静态或4h /动 态计)
100
14
10000
2
100000
2
6.3采样点布置类型
a c b
f e d
g i h
6.4采样点的位置 6.4.1一般布置在离地面0.8-1.5m之间或操作平台的高度，除受洁净室 （区）的设备限制外，应在整个洁净室（区）均匀布置。 6.4.2每个采样点一般采样一次，也可以多于1次。 6.4.3布置采样点时，应避开回风口，测试人员应在采样口的下风侧。 7、培养基制备 7.1依据检测区域的取样点数，按照《培养基配制标准操作规程》制备 适量的营养琼脂培养基。 7.2在超净工作台内，以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿 约15ml的装量分装，待培养基凝固后移出洁净区。 7.3将制备的营养琼脂平皿倒置于生化培养箱内35℃培养48小时，确认 无菌落数后使用。 7.4培养皿传进洁净室（区）测试前要进行表面消毒。 8、测试
=
---平均菌落数 M1---1号培养皿的菌落数 M2---2号培养皿的菌落数 Mn---n号培养皿的菌落数 n---培养皿的总数
11.1 每个测点的沉降菌的平均菌落数必须低于所规定评定标准的界
限。
11.2 在静态测试时，若某测点的沉降菌平均菌落数超过评定标准，则
应重新采样两次，两次测试结果均合格才能判为符合。
12、注意事项 12.1采样前应仔细检查每个培养皿的质量，如发现变质、破损或污染的 应剔除。 12.2应采取一切措施防止采样过程的污染和其他可能对样本的污染。 12.3测试用具要作灭菌处理，以确保测试的可靠性、正确性。 13、检测频率：1次/3个月。 14、附录 附录《沉降菌测试记录》 15、历史修订记录和原因
10.1 用计数方法得出各个培养皿的菌落数。
10.1.1用肉眼对培养皿上所有的菌落直接计数、标记或在菌落计数器上
点计，然后用5～10倍放大镜检查，有否遗漏。
10.1.2 培养皿上有2个或2个以上的菌落重叠，可分辨时仍以2个或2个
以上菌落计数。
10.2 每个测点的沉降菌平均菌落数的计算:
式中： 11、结果评定
房间面积 （m）
＜10
≥10—＜20 ≥20—＜40 ≥40—＜100 ≥100—＜200 ≥200—＜400 ≥400—＜1000 ≥1000—＜2000
≥2000
100 2—3
4 8 16
40 80 160 400 800
洁净度级别 10000 2 2 2
4 10 20 40 100 200
100000 2 2 2
废弃间
PLES150
中检室
PLES151
中间站
PLES152
称量间、 （前室）
PLES153
称量、配料 PLES154
粉碎、过筛 PLES155
半固体灌装 PLES156
原辅料暂存 PLES157
缓冲室
PLES158
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
是□ 否 □
2.2培养基：营养琼脂培养基
2.3生化培养箱：必须定期对生化培养箱进行校验。
2.4自动台式灭菌器：使用时应严格按照仪器说明书操作。
3、 测试条件
3.1温度和相对湿度：洁净室（区）的温度和相对湿度应与其生产及工
艺要求相适应，温度控制在18℃～26℃，相对湿度控制在45%～65%为
宜。
3.2压差：空气洁净度不同的洁净室（区）之间压差应≥10Pa。 4、测试状态：动态测试和静态测试。静态测试时，室内测试人员不得 多于2人；动态测试时，现场人员数按《洁净区人员控制管理制度》中 规定执行，记录中注明现场人员数量及测试点位置。 5、测试时间：对单向流，测试应在净化空气调节系统运行不少于10分 钟后开始；对非单向流，测试应在净化空气调节系统运行不少于30分钟 后开始。 6、采样点数量及布置 6.1最少采样点数目