天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)
简介：
Leagene 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化天门冬氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，草酰乙酸与NADH 经LDH 催化生成NAD +，上述方法实际为AST 速率法，其反应公式如下：在上述偶联反应中，NADPH 的氧化速率与样本中酶活性呈正比。对于单试剂比色法，血清与试剂完整成分的底物溶液混匀，ALT 催化反应立即启动，进而计算酶的活性单位。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：
操作步骤(仅供参考)：
1、 准备样品：
① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，
-20℃保存1个月有效，用于AST/GOT 的检测。
② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个
月有效，用于AST/GOT 的检测。
③ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续
计算单位蛋白重量组织或细胞内的AST/GOT 含量。
2、 分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避
免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。
编号 名称
TE0135 100T
TE0135 200T
Storage
ALT 检测液(R)
成分 终浓度 2×50ml 2×100ml 4℃ 避光
Tris 缓冲液 100mM L-天门冬氨酸 240mM 酮戊二酸 12mM NADH 0.22mM LDH 2500U/L 防腐剂 15mM
使用说明书
1份
加入物
空白管 测定管 AST 检测液(R)(μl)
900
900
混匀孵育。
蒸馏水(μl) 45 －
待测样品(μl) －45
混匀，孵育，在340nm处各管吸光度变化，计算各管Δ
A/min。
3、生化分析仪检测：按照下表设置主要参数。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用
量或适当稀释后再进行测定。
波长340nm
反应温度37℃
孵育时间90s
比色杯光径 1.0cm
系数3376
待测样品15μl
ALT检测液(R) 300μl
计算：
分光光度计计算公式：AST(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(945/45)=ΔA/min×3376 生化分析仪计算公式：AST(U/L)=ΔA/min×(106/6220)×(315/15)=ΔA/min×3376
参考范围：成年健康人血清AST：8-40U/L
注意事项：
1、抗坏血酸≤30mg/dl，游离胆红素≤40mg/dl，结合胆红素≤40mg/dl，甘油三酯
≤2000mg/dl对测定结果无影响。
2、如果生化分析仪内无所要求波长的滤光片，应选择接近的滤光片。
3、二硝基苯肼显色液溶解以后，如果仍然有结晶析出，应弃用。
4、严重黄疸、脂血或溶血的血清，可能会引起测定管吸光度增高。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
有效期：12个月有效。打开包装以后，4℃保存一个月。
r-谷氨酰转移酶
r-谷氨酰转移酶 【原理】r－谷氨酰转移酶GGT，旧称r－谷氨酰转肽酶r－GT，它是催化谷胱甘肽上的r－谷i氨酰基转移到另一个肽或另一个氨基酸上的酶。GGT生要存在干细胞膜和微粒体上，参与谷胱甘肽的代谢。肾脏、肝脏和胰腺含量丰富，但血清中GGT主要来自肝胆系统。GGT在肝脏中广泛分布于肝细胞的毛细胆管一侧和整个胆管系统，因此当肝内合成亢进或胆汁排出受阻时，血清中GGT增高[1]。 【参考值】硝基苯酚速率法（37℃）：＜50U/L。 【临床意义】 （1）胆道阻塞性疾病：原发性胆汁性肝硬化、硬化性胆管炎等所致的慢性胆汁淤积，肝癌时由于肝内阻塞，诱使肝细胞产生多量GGT同时癌细胞也合成GGT均可使GGT明显升高，可达参考值上限的10倍以上。此时GGT、ALP、5－核苷酸酶（5－NT）、亮氨酸氨基肽酶（LAP）及血清胆红素呈平行增加。 （2）急、慢性病毒性肝炎、肝硬化：急性肝炎时，GGT呈中等度升高；慢性肝炎、肝硬化的非洁动期，酶活性正常，若GGT持续升高，提示病变洁动或病情恶化。 （3）急、慢性酒精性肝炎、药物性肝炎：GGT可呈明显或中度以上升高（300～1000U/L），ALT和AST仅轻度增高，甚至正常。酗酒者当其戒酒后GGT可随之下降。 （4）其他：脂肪肝、胰腺炎、胰腺肿瘤、前列腺肿瘤等GGT亦可轻度增高。 ★★★下面是参考： 谷草转氨酶在心肌细胞中含量最高，但肝脏损害时其血清浓度也可升高，临床一般常作为心肌梗塞和心肌炎的辅助检查。谷草转氨酶的正常值为0～40μ/L，当谷丙转氨酶（ALT）明显升高，谷丙/谷草比值＞1时，就提示有肝实质的损害。 γ-谷氨(酰转肽酶（γ-GT）广泛分布于人体组织中，肾内最多，其次为胰和肝，胚胎期则以肝内最多，在肝内主要分布于肝细胞浆和肝内胆管上皮中，正常人血清中γ-GT主要来自肝脏。正常值为3～50μ/L（γ-谷氨酰对硝基本胺法）。此酶在急性肝炎、慢性活动性肝炎及肝硬变失代偿时仅轻中度升高。但当阻塞性黄疸时，此酶因排泄障碍而逆流入血，原发性肝癌时，此酶在肝内合成亢进，均可引起血中转肽酶显著升高，甚至达正常的10倍以上。酒精中毒者ν-GT亦明显升高，有助于诊断酒精性肝病。在急性肝炎时，ν-GT下降至正常较转氨酶为迟，如ν-GT持续升高，提示转为慢性肝病。慢性肝病尤其是肝硬化时，ν-GT持续低值提示预后不良
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法) 简介： Leagene 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂速率法)其检测原理是天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化天门冬氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，草酰乙酸与NADH 经LDH 催化生成NAD +，上述方法实际为AST 速率法，其反应公式如下：在上述偶联反应中，NADPH 的氧化速率与样本中酶活性呈正比。对于单试剂比色法，血清与试剂完整成分的底物溶液混匀，ALT 催化反应立即启动，进而计算酶的活性单位。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定， -20℃保存1个月有效，用于AST/GOT 的检测。 ② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个 月有效，用于AST/GOT 的检测。 ③ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的AST/GOT 含量。 2、 分光光度计检测：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避 免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。 编号 名称 TE0135 100T TE0135 200T Storage ALT 检测液(R) 成分 终浓度 2×50ml 2×100ml 4℃ 避光 Tris 缓冲液 100mM L-天门冬氨酸 240mM 酮戊二酸 12mM NADH 0.22mM LDH 2500U/L 防腐剂 15mM 使用说明书 1份 加入物 空白管 测定管 AST 检测液(R)(μl) 900 900
y谷氨酰转移酶偏高是怎么一回事
y谷氨酰转移酶偏高是怎么一回事 首先大家要知道y谷氨酰转移酶，是什么意思它是反映自己肝功能的重要指标。所以大家一定要保护肝脏这些器官，如果保护不当被病毒感染时就会使y谷氨酰转移酶偏高。所以大家一定要注意平时的一些小，当一些良好的小习惯养成的时候也是对自己身体的一种保护。那么现在就让我们来了解一下y谷氨酰转移酶偏高危害吧。 γ-谷氨酰转肽酶简称γ-GT或GGT。它存在于肾、胰、肝、脾、肠、脑、肺、骨骼肌和心肌等组织中，在肝内主要存在于肝细胞浆和肝内胆管上皮中。GGT对各种肝胆疾病均有一定的临床价值。在大多数肝胆疾病中，其活力均升高，但在不同的肝胆疾病中，其升高的程度与其他血清酶活性的相对比例不尽相同。γ-谷氨酰转肽酶(GGT) 是一种方便的、高敏感的、低花费、常用的检测酶类之一。它作为肝脏功能异常和酗酒的标志已广泛的被临床接受，主要用于诊断肝胆疾病。
γ-谷氨酰转肽酶(GGT)，临床意义，肝脏疾病，酒精肝 人体各组织均含有GGT，尤以分泌或吸收能力强的富含蛋白质的组织中最多，如胆管、肾脏、胰腺、附睾等。人体各器官中GGT含量按下列顺序排列：肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑。而在肾脏、胰腺和肝脏中，此酶的含量之比约为100：8：4(1)。肝脏含酶丰富,酶参与肝脏复杂的代谢功能,由于肝脏病理改变,使酶含量改变,故反映在血清中酶的浓度也有变化,根据血清酶活性的增高或降低,可判断肝脏病变的性质和程度。人血清中的γ谷氨酰转肽酶主要来自肝脏，因此具有较强的特异性。在肝功能检查中，经常会出现γ谷氨酰转肽酶偏高的现象，为探讨引起γ谷氨酰转肽酶偏高的原因，和对肝功能的影响。 现在大家都知道y谷氨酰转移酶偏高的危害了，所以大家一定要注意自己的一些小习惯。不要随便的暴饮暴食，这样的习惯只会一时爽后悔终身。可见平时的生活中许多的小习惯，看着是个小问题随时都会变成一个大问题。所以大家一定要养成一些良好的习惯，这样对做任何事都有好处。相信通过大家的努力，自己身体都会健康的!
谷氨酰转移酶测定
谷氨酰转移酶测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 L-γ-谷氨酰-3羧基-4硝基苯胺 + 甘氨酰甘氨酸GGT L-γ-谷氨酰甘氨酰甘氨酸 + 5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 在上述反应中， 5氨基2硝基苯甲酸盐的生成速率与样本中γ谷氨酰基转移酶的活力成正比，通过在405 nm处监测吸光度的上升速率，即可测得样本中γ谷氨酰基转移酶的活性。 3 标本： 3.1 病人准备：无特殊。 3.2 类型：血清或EDTA血浆。 3.3 标本存放：室温可保存8小时；2～8℃可保存3天；-20℃保存至少可稳定1周。
3.4 标本运输：常温条件下保存运输。 3.5 标本拒收标准：细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司GGT试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成 试剂1（R1）：Tris缓冲 液100mmol/ L 甘氨酰甘氨酸 125mmol/L 试剂2（R2）：Tris缓冲 液100mmol/ L L-γ-谷氨酰 -3羧基-4硝基 苯胺 14.5mmol/L 4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 4.1.3 试剂稳定性与贮存:2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。 4.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 4.2 校准品：使用上海复星长征医学科学有限公司提供的GGT校准品对自动分析仪进行校准。 4.3 质控品：使用正常值、病理值复合控制品。 5 仪器 AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪 6 操作步骤 6.1 样品的准备：将标好号的样品离心后放到仪器规定的位置。 6.2 试剂的检测：仪器开机后，检查各种试剂的位置，体积等确认无误后方可进行测定。 6.3 项目基本参数：参见生化检验AU2700生化分析仪，罗氏P800生化分析仪, 西门子ADVIA-2400生化分析仪，东芝TBA-120生化分析仪项目测定参数。
γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)测定试剂盒(GCANA底物法)产品技术要求百奥泰康
γ-谷氨酰基转移酶（γ-GT）测定试剂盒（GCANA底物法） 适用范围：该试剂盒用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。 1.1 产品规格 试剂1:60mL×5，试剂2:12mL×5； 试剂1:60mL×5，试剂2:60mL×1； 试剂1:60mL×2，试剂2:12mL×2； 试剂1:60mL×2，试剂2:24mL×1； 试剂1:80mL×4，试剂2:16mL×4； 试剂1:80mL×4，试剂2:64mL×1； 试剂1:80mL×2，试剂2:16mL×2； 试剂1:80mL×2，试剂2:32mL×1； 试剂1:50mL×3，试剂2:10mL×3； 试剂1:50mL×3，试剂2:30mL×1； 试剂1:40mL×3，试剂2:24mL×1； 试剂1:50mL×4，试剂2:20mL×2； 试剂1:50mL×4，试剂2:40mL×1； 试剂1:60mL×1，试剂2:12mL×1； 试剂1:50mL×1，试剂2:10mL×1； 试剂1:40mL×1，试剂2:；8mL×1； 试剂1:500mL×1，试剂2:100mL×1； 试剂1:5000mL×1，试剂2:1000mL×1； 1.2 组成成分
该试剂盒由试剂1（R1）和试剂2（R2）组成。 1.2.1试剂组成 试剂1: Tris缓冲溶液≥50.0mmol/L 双甘肽≥100.0mmol/L 试剂2：L-g-谷氨酰-3-羟基-4-硝基苯胺≥3.0mmol/L 2.1 外观 a) R1应为无色溶液，无混浊，无未溶解物。 b) R2应为淡黄色溶液，无混浊，无未溶解物。 2.2 净含量 液体组分不少于标示值。 2.3 试剂空白 2.3.1试剂空白吸光度 应不大于1.200。 2.3.2试剂空白吸光度变化率 应不大于0.005/min。 2.4 分析灵敏度 γ-GT试剂盒测定活性50U/L的被测物时，吸光度变化率（ΔA/min）应不小于0.015。 2.5 准确度 测试参考物质，相对偏差应不超过±10%。 2.6 精密度 2.6.1重复性
r谷氨酰基转移酶偏高是由什么引起的
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 r谷氨酰基转移酶偏高是由什么引起的 导语：大家都知道，酶的作用之一就是催化，r谷氨酰基转移酶与肝胆有着非常密切的关系，主要来衡量肝胆的情况。r谷氨酰基转移酶偏高，最有可能的原 大家都知道，酶的作用之一就是催化，r谷氨酰基转移酶与肝胆有着非常密切的关系，主要来衡量肝胆的情况。r谷氨酰基转移酶偏高，最有可能的原因是你胆管受阻或是患了慢性肝炎。要想快速使这种酶降低，饮食上要忌烟酒，不要熬夜加班。酶的本质是蛋白质，因此不要过多摄入高蛋白的食物。 r谷氨酰转移酶偏高的原因是什么？哪些原因会引起谷氨酰基转移酶偏高呢？常见的病理性因素：谷氨酰转移酶偏高的原因一：原发性肝硬化、肝癌时由于肝内阻塞，肝脏损伤，从而导致谷氨酰转移酶升高，肝癌时期谷氨酰转移酶升高达到高峰。谷氨酰转移酶偏高的原因二：急、慢性病毒性肝炎、肝硬化时，谷氨酰转移酶都会升高。如果慢性肝炎、肝硬化患者属于非活动期，若谷氨酰转移酶升高，则表明病情恶化。 非病理性因素：谷氨酰转移酶偏高的原因一：对于长期饮酒，造成脂肪肝，肝脏受损，肝功能下降，从而导致谷氨酰转移酶会有明显的升高现象。谷氨酰转移酶偏高的原因二：由于饮食不当形成的脂肪肝、胰腺炎、胰腺肿瘤等也同样会引起谷氨酰转移酶升高。谷氨酰转移酶偏高的原因三：20～30岁超负荷的男性谷氨酰氨基转移酶升高约58%。50～60岁男、女性谷氨酰氨基转移均约升高30%。慢性酒精中毒者谷氨酰氨基转移酶约升高20%～400%。90kg～40kg的女性谷氨酰氨基转移酶可升高42%。4～10岁的儿童谷氨酰氨基转移酶约降低10%。 谷氨酰转移酶偏高的原因四：对于女性安眠药可导致谷氨酰氨基转 生活常识分享
第7章 氨基酸代谢习题
第七章蛋白质分解代谢 复习测试 （一）名词解释 1．腐败作用 2．联合脱氨基作用 3．鸟氨酸循环 4．一碳单位 5．生糖氨基酸 （二）选择题 A型题： 1．生物体内氨基酸脱氨基的主要方式为： A．氧化脱氨基 B．还原脱氨基 C．直接脱氨基 D．转氨基 E．联合脱氨基 2．人体内氨的最主要代谢去路为： A．合成非必需氨基酸 B．合成必需氨基酸 +随尿排出 C．合成NH 4 D．合成尿素随尿排出 E．合成嘌呤、嘧啶、核苷酸等 3．转氨酶的辅酶组分含有： A．泛酸 B．吡哆醛 C．尼克酸 D．核黄素 E．硫胺素 4．可经脱氨基作用直接生成α-酮戊二酸的氨基酸是： A．谷氨酸 B．甘氨酸 C．丝氨酸 D．苏氨酸 E．天冬氨酸 5．经转氨基作用可生成草酰乙酸的氨基酸是： A．甘氨酸 B．天冬氨酸 C．蛋氨酸 D．苏氨酸 E．丝氨酸 6．ALT（GPT）活性最高的组织是： A．心肌 B．脑 C．骨骼肌 D．肝 E．肾7．AST（GOT）活性最高的组织是： A．心肌 B．脑 C．骨骼肌 D．肝 E．肾8．能直接进行氧化脱氨基作用的氨基酸是：
A．天冬氨酸 B．缬氨酸 C．谷氨酸 D．丝氨酸 E．丙氨酸 9．嘌呤核苷酸循环脱氨基作用主要在哪种组织中进行： A．肝 B．肾 C．脑 D．肌肉 E．肺 10．嘌呤核苷酸循环中由IMP生成AMP时的氨基来自： A．天冬氨酸的α-氨基 B．氨基甲酰磷酸 C．谷氨酸的α-氨基 D．谷氨酰胺的酰胺基 E．赖氨酸的α-氨基 11．在尿素合成过程中下列哪步反应需要ATP： A．鸟氨酸+氨基甲酰磷酸→瓜氨酸+磷酸 B．瓜氨酸+天冬氨酸→精氨酸代琥珀酸 C．精氨酸代琥珀酸→精氨酸+延胡索酸 D．精氨酸→鸟氨酸+尿素 E．草酰乙酸+谷氨酸→天冬氨酸+α-酮戊二酸 12．肾产生的氨主要来自： A．氨基酸的联合脱氨基作用 B．谷氨酰胺的水解 C．尿素的水解 D．氨基酸的非氧化脱氨基作用 E．胺的氧化 13．下列哪组反应在线粒体中进行： A. 鸟氨酸与氨基甲酰磷酸反应 B. 瓜氨酸与天冬氨酸反应 C．精氨酸生成反应 D．延胡索酸生成反应 E．精氨酸分解成尿素反应 14．鸟氨酸循环的限速酶是： A．氨基甲酰磷酸合成酶 B．鸟氨酸氨基甲酰转移酶 C．精氨酸代琥珀酸合成酶 D．精氨酸代琥珀酸裂解酶 E．精氨酸酶 15．氨基酸分解产生的NH 在体内主要的存在形式是： 3 A．尿素 B．天冬氨酸 C．谷氨酰胺
天冬氨酸氨基转移酶
天冬氨酸氨基转移酶(aspartateaminotransferase AST)，原名谷草转移酶(glutamic oxaloacetic transaminase GOT)，是体内重要的转氨酶，在体内各组织中广泛存在，AST以心脏活性最高。正常人血清中含量甚微。 天冬氨酸氨基转移酶正常范围 正常情况下，血液中来自肝细胞的天冬氨酸氨基转移酶的范围是0-40U/L（单位）。 天冬氨酸氨基转移酶的意义 在肝功能检查中，谷丙转氨酶是反映肝细胞受损的指标的，而天冬氨酸氨基转移酶是反映肝细胞坏死的标准。对于肝硬化、肝纤维化、肝癌的检测非常准确。可以和谷丙转氨酶结合起来反映肝功能的状况，比如谷丙转氨酶/天冬氨酸氨基转移酶比值均在1.0以下为肝硬化或早期肝硬化患者。 天冬氨酸氨基转移酶偏高 在肝功能检查中，天冬氨酸氨基转移酶偏高不一定就是肝炎引起的。因为饮酒、劳累、熬夜、剧烈运动、药物都可能引起天冬氨酸氨基转移酶偏高。所以出现天冬氨酸氨基转移酶偏高也不用过于紧张，需到正规医院进行确诊即可。 天冬氨酸氨基转移酶偏高原因
天冬氨酸氨基转移酶高说明存在肝细胞损伤，一般见于各种乙肝，肝硬化，脂肪肝，酒精肝等肝胆疾病，应做进一步检查，如测乙肝两对半等，以确定天冬氨酸氨基转移酶高的原因，并对症治疗。 天冬氨酸氨基转移酶高的情况也常会在体检中出现，很多人不解。 转氨酶是催化氨基酸与酮酸之间氨基转移的一类酶。普遍存在于动物、植物组织和微生物中，心肌、脑、肝、肾等动物组织以及绿豆芽中含量较高。种类很多，体内除赖氨酸、苏氨酸中外，其余α-氨基酸都可参加转氨基作用并各有其特异的转氨酶。其中以谷丙转氨酶(GPT)和天冬氨酸氨基转移酶(GOT)最为重要。 天冬氨酸氨基转移酶高说明存在肝细胞损伤，一般见于各种乙肝，肝硬化，脂肪肝，酒精肝等肝胆疾病。但是，一些外界因素也可使天冬氨酸氨基转移酶一过性增高，如运动，进食，饮酒，熬夜，药物(消炎药即抗生素，但感冒药不是消炎药，要区分开，但是不管是感冒药还是消炎药，服用后都有可能引起天冬氨酸氨基转移酶高)等。应排除这些情况复查一次，若天冬氨酸氨基转移酶持续增高，应做进一步检查，如测乙肝两对半等，以确定天冬氨酸氨基转移酶高的原因，并对症治疗。
GGT 文档,γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)测定试剂盒标准操作规程
1、方法依据： 深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）测定试剂盒测定方法 2、适用范围： 适用于人血清γ-谷氨酰转移酶（γ-GT）的测定。 3、试剂仪器： 3.1 试剂：深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司原装试剂盒。 3.2 试剂储存：未打开的试剂盒避光保存于2℃～8℃，有效期为一年。试剂开瓶后应避光保存，在2℃～8℃可稳定30天。试剂不可冰冻。 3.3 仪器：迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪. 4、操作程序 4.1方法原理 γ-GT 催化谷氨酰基转移给受体的反应。本法以L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸为底物，将底物上的谷氨酰基转移至受体双甘肽，生成5-氨基-2-硝基苯甲酸盐。在405 nm进 行吸光度检测，吸光度升高的速率与标本中γ-GT 活力成正比。 γ-GT L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-苯基重氮酸 + 双甘肽5-氨基-2-硝基苯甲酸盐 + L-γ-谷氨酰双甘肽 4.2样本要求 新鲜血清样本，采集后及时测定，应避免溶血和污染。血清样本于20℃～25℃保存可稳定6天 4.3上机操作 4.3.1试剂装载、校准、样品和质控血清分析操作详见“《迈瑞BS-2000M全自动生化分析仪标准操作、维护、保养规程》” 4.3.2 校准： 4.3.2.1 标准液的准备：标准液的准备：校准品使用深圳迈瑞生物医疗电子股份有限公司配套冻干品，按说明书要求稀释后分装，-20℃冷冻保存，用前提前15分钟从冰箱中取出，
复溶到室温后上机检测。 4.3.2.2 校准程序：首次使用校准。当有以下情况时需重新校准： 1）换试剂批号或出现质控漂移时； 2）当仪器做完保养后； 3）仪器进行零件更换时。 每次试验前用准备好的校准品进行校准，校准通过后进行检测。 4.3.2.3 质控：在标本开始之前做质控，质控通过后方能进行标本的检测。 4.3.3 测试基本参数 4.4参考范围 女：9～39 U/L 男：11～61 U/L（37℃） （注：各实验室应有自己的参考范围。） 4.5 方法评价 线性范围：4～650 U/L。样本中含量超出可报告范围，请用生理盐水稀释后测定，结果乘以稀释倍数。反应曲线异常时应进行重复测定确认。 精密度：批内变异系数：CV ≤ 3.0%； 批间变异系数：CV ≤ 4.5%。 分析灵敏度：本试剂盒的检测低限4U/L。 5、临床意义
口服脾酪氨酸激酶抑制剂治疗类风湿关节炎
口服脾酪氨酸激酶抑制剂治疗类风湿关节炎 摘要 背景 脾酪氨酸激酶(Syk)是一种免疫信号的重要调节剂。这个2期研究的目的是评价应用于患有活动性类风湿样关节炎的患者的R788（一种口服Syk的抑制剂）的有效性和安全性，不管其是否采用甲氨蝶呤治疗。 方法 我们在一项为期6个月、双盲、安慰剂-对照试验中纳入457例患者，这些患者患有活动性类风湿样关节炎并不管其是否采用长期甲氨蝶呤治疗。主要结局是在第6个月时达到美国风湿病学会(ACR) 20反应(即触痛和肿胀关节数至少减低20%并且5项标准中至少有3项改善)。结果 在第6个月时R788以剂量100 mg每天2次和剂量150 mg每天1次治疗显著优于安慰剂(ACR 20反应率分别67%和57%，与这两个剂量组相比用安慰剂为35%；P<0.001)。至于ACR 50也更优，表明至少改善50%(43%和32%相比19%；与服用100-mg剂量的安慰剂比较P<0.001，与服用150-mg剂量的安慰剂比较P = 0.007)和ACR 70 (28%和14%相比10%；与服用100-mg剂量的安慰剂比较，P<0.001，与服用150-mg 剂量的安慰剂比较P = 0.34)。在第一周治疗结束时，可以观察到明显的临床效应。不良效应包括腹泻(服用100-mg剂量 R788受试者为19%vs服用安慰剂受试者为3%)，上呼吸道感染(14%vs7%)，和嗜中性粒细胞减少症(6%vs1%)。使用R788一个月后与基线水平相比心脏收缩压增高大约3mmHg，而使用安慰剂的患者血压下降2mmHg；有23%服用R788的病人和7%服用安慰剂的病人需要开始或改变抗高血压的治疗。 结论 在这项2期研究中，一个Syk抑制剂在类风湿样关节炎患者中减轻疾病活动度；不良事件包括腹泻，高血压，和中性粒细胞减少。将需要更深入的研究进一步在类风湿样关节炎患者中评估Syk-抑制治疗的安全性和有效性。(由Rigel提供资金; 临床试验政府编号NCT00665925.) 脾酪氨酸激酶(Syk)是一种细胞内细胞质的激酶，它是一种重要的免疫受体递质，在巨噬细胞、中性粒细胞、肥大细胞和B细胞中传递信号。脾酪氨酸激酶存在于类风湿关节炎患者的滑膜细胞上。Sky的激活对于细胞因子和金属蛋白酶的产生是很重要的，其中可由类风湿关节炎患者成纤维细胞样滑膜细胞中的TNF-α诱导产生。在胶原诱导性关节炎的侵蚀性模型中，R788一种口服前体药其可以迅速转换成有效型并且相对选择性的阻止sky，R460，（其具有强有力的抗炎症活动的作用，显示出Syk抑制剂是如何对类风湿炎达到治疗作用的。 在一项既往的12-周，剂量递增、随机化、安慰剂-对照试验(临床试验政府编号NCT00326339)包括189例罹患活动型类风湿关节炎不论是否经过甲氨蝶呤的治疗的患者，与获得安慰剂或50mgR788一天两次治疗组相比，100mg一天两次和150mg一天两次的高剂量治疗的两组可以看到血清IL-6基质金属蛋白酶3和关节炎活动的显著下降。显著地负性事件有腹泻、中性粒细胞减少症和高血压。 在那些阳性结果的基础上，设计出了规模更大和为期更长的2期试验去评估在接受长期甲氨蝶呤治疗的活动性类风湿样关节炎患者中R788的作用。主要目标是在这一群体中经过为期6个月的带有安慰剂对照的情况下去鉴定R788的有效性和安全性。 方法 病人和研究设计 我们在6个国家（保加利亚、哥伦比亚、墨西哥、波兰、罗马尼亚、美国）的64个站点进
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 1. 实验原理：国际临床化学学会(IFCC)推荐的紫外连续监测法，酶偶联反应式为： L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸A S T草酰乙酸 +L-谷氨酸草酰乙酸+ NADH +H+MDH苹果酸脱氢酶L-苹果酸+NAD++H2O 在340nm波长下，监测NADH的氧化速率，即吸光度的下降速率与AST活性呈正比。 2. 标本： 2.1 病人准备：12小时禁食。 2.2 类型：血清，肝素或EDTA血浆。 3. 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～25℃保存：<10%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定3个月。 4. 标本运输：常温条件下保存运输。 5. 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。 6. 实验材料 6.1 试剂：欧泰克AST测定试剂盒 6.1.1 试剂组成 Tris缓冲液pH7.8 80mmol/L
L-天门冬氨酸240mmol/L MDH(苹果酸脱氢酶) ≥600U/L LDH(乳酸脱氢酶) ≥1200U/L a-酮戊二酸12mmol/L NADH 0.18mmol/L 6.1.2 试剂准备：试剂为即用式。 6.1.3 试剂稳定性与贮存 试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。试剂不可冰冻。 6.1.4 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。 6.1.5 注意事项：试剂中含叠氮钠（0.95g/L）为防腐剂。不可入口！避免接触皮肤及粘膜。应采取必要的预防措施使用试剂。 6.2 校准品：使用罗氏公司提供的复合校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。 6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。 7. 仪器：日立7060生化分析仪 8. 操作步骤
天冬氨酸氨基转移酶高是什么原因引起的-
天冬氨酸氨基转移酶高是什么原因引起的? 天冬氨酸氨基转移酶是属于一种人体然组织当中比较丰富的组织，存在于人体的肝脏、心脏，以及骨骼等，出现天冬氨酸氨基转移酶高会容易导致一些肝脏或者是心脏部位疾病，而引起天冬氨酸氨基转移酶高是由于长期酗酒或者是长期身体劳累所引起的疾病，需要及时进行治疗。 ★天冬氨酸氨基转移酶 天门冬氨酸氨基转移酶，存在于人体各种组织中，以心肌含量最丰富，其次是肝脏。在肝脏内，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)绝对值超过谷氨酸氨基转移酶(ALT)。AST以其在细胞内分布的部位不同分为两种同工酶，即细胞质型天门冬氨酸氨基转移酶(s-AST)和线粒体型天门冬氨酸氨基转移酶(m-AST)。由于m-AST 定位于线粒体内，不易释放入血。当肝细胞出现坏死时，m-AST 从线粒体中释放出来，使得血清中的AST增高。同工酶的测定有助于了解心肌、肝、肾组织的损伤程度。 ★临床意义 血清天门冬氨酸氨基转移酶测定有助于判定心和肝细胞有
无坏死及损伤程度。AST增高：常见于急、慢性重症肝炎、肝硬变、心肌炎、心肌梗塞、肾炎、胆管炎、皮肌炎、胰腺炎等病症。 由于心肌含AST量最高，其次是肝脏，所以心和肝细胞损伤后血中酶活性能迅速升高。但仅仅测定总AST活性不能完全反映心与肝损伤程度和判定预后。测定血清m-AST可间接了解肝细胞超微结构损伤及线粒体损害的严重程度。m-AST不仅能作为心、肝细胞坏死的指标，也能作为对心与肝脏疾病动态监测的指标。 ★正常值参考范围 血清天门冬氨酸氨基转移酶的正常参考值：15～40U/L。 ★天冬氨酸氨基转移酶高是什么原因 天冬氨酸氨基转移酶存在于心肌、骨骼肌、肝脏，以心肌含量最高，肝脏次之。正常人血清中含量很低，但当肝细胞或心肌细胞受损时，由于细胞膜通透性增加，胞浆内的ALT与AST释放入血浆，致使血清中转氨酶活性升高。可以和谷丙转氨酶结合起来反映肝功能的状况。 在肝功能检查中，天氨酸氨基转移酶偏高不一定就是肝炎引
谷氨酰转肽酶偏高的危害和治疗
谷氨酰转肽酶偏高的危害和治疗 北京海文医院肝病科蒋国红治疗肝病专家为大家详细的介绍！谷氨酰转肽酶广泛分布于人体组织中，肾内最多，其次为胰和肝，胚胎期则以肝内最多，在肝内主要分布于肝细胞浆和肝内胆管上皮中，正常人血清中谷氨酰转肽酶主要来自肝脏。 谷氨酰转肽酶临床诊断标准 谷氨酰转肽酶正常值一般认为是在0～40之间，大于这个范围就认为是谷氨酰转肽酶偏高了。谷氨酰转肽酶在急性肝炎、慢性活动性肝炎及肝硬变失代偿时都会出轻中度的升高，当出现阻塞性黄疸时，可出现谷氨酰转肽酶的显著升高。谷氨酰转肽酶升高除了肝病患者肝脏受损引起，也有健康人群在服用安眠药、抗糖尿病药物时等也会引起谷氨酰转肽酶的升高。 谷氨酰转肽酶偏高的原因 1、谷氨酰转肽酶偏高也会因为长期嗜酒，或者长期服药造成，避孕药也可引起谷氨酰转肽酶偏高; 2、谷氨酰转肽酶偏高可由原发性肝癌，腺癌等引起，特别是在恶性肿瘤发生率高达90%; 3、谷氨酰转肽酶偏高常见于肝病，如病毒性肝炎、急性肝炎、慢性肝炎活动期等，也可见于胆脏疾病; 4、谷氨酰转肽酶偏高也可能是因为人们工作压力大，环境污染严重而导致的进行性肌营养不良症，最终引起谷氨酰转肽酶的偏高。 谷氨酰转肽酶偏高的危害 对于原发性或转移性肝癌病引起的谷氨酰转肽酶偏高，会在癌组织本身或其周围的炎症的刺激作用下，使肝细胞膜的通透性增加，使病情进一步的恶化。对于是阻塞性黄疸、急性肝炎、慢性肝炎活动期、胆道感染、肝硬化等引起的谷氨酰转肽酶偏高，会导致坏死区邻近的肝细胞仙酶合成亢进，如长期升高，可能有肝坏死倾向。由于谷氨酰转肽酶升高常意味着是肝脏炎症加剧症状，肝脏遭受着持续不断的损伤，酒精肝或阻塞性黄疸可能会引起肝纤维化导致肝硬化，原发性肝癌引起的可能有生命危险。 谷氨酰转肽酶偏高的治疗 由于谷氨酰转肽酶主要存在肝脏内，肝细胞损伤、肝功能不足时都可引起谷氨酰转肽酶偏高，常见引起谷氨酰转肽酶偏高的疾病主要有：急慢性病毒性肝炎(以乙肝较多)、酒精肝、中毒性肝损伤、肝硬化、肝癌等。因此在确定具体发病原因后，患者应积极采取有效的治疗措施，专家建议肝病患者采用“861生物体系疗法”。该疗法适用于各型病毒性肝炎、
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定
血清天门冬氨酸氨基转移酶测定 1 检验目的 指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。 2 实验原理 本试剂以国际临床化学联合会(IFCC)推荐方法为基础，所采用的反应原理与反应式如下。 ⑴样本中的天门冬氨酸氨基转移酶催化L-天冬氨酸和α-氧代戊二酸氨基转移，生成草酰乙酸和L谷氨酸； ⑵在还原型辅酶I（NADH+H+）和苹果酸脱氢酶（MDH）的存在下，草酰乙酸被还原为L-苹果酸，还原型辅酶I （NADH+H+）被氧化为辅酶I（NAD），从而使波长340 nm处的吸光度值下降。通过对波长340 nm处吸光度值的下降速率进行监测，即可测得样本中天门冬氨酸氨基转移酶（AST）的活性 L-天门冬氨酸+ -酮戊二酸AST草酰乙酸+L-谷氨酸 草酰乙酸+ NADH +H+ MDH苹果酸脱氢酶L-苹果酸+NAD+
3 标本 3.1 病人准备：12小时禁食。 3.2 类型：血清。 3.3 标本存放：3天内的活性损失：2～8℃保存：<8%；15～ 25℃保存：<10%；标本稳定性：-20℃保存至少可稳定3个 月。 3.4 标本运输：常温条件下保存运输。 3.5 标本拒收标准：标本溶血、细菌污染的标本。 4 实验材料 4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司AST试剂盒（沪 食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014） 4.1.1 试剂组成 试剂1（R1）：乳酸脱氢酶＞1365 U/L NADH 0.26mmol/ L-天冬氨酸300mmol/L Tris缓冲液 88mmol/L 试剂2（R2）：苹果酸脱氢 酶＞1635 U/L α氧代戊二 酸 36mmol/L
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法)
γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮微板法) 简介： L-γ-谷氨酰基转移酶(GGT 或γ-GT)是催化γ-谷氨酰基移换反应的酶，γ-谷氨酰基从谷胱甘肽或其他含γ-谷氨酰基物质中转移到另一肽或氨基酸分子上。γ-谷氨酰基转移酶(GGT)检测试剂盒(重氮比色法)以萘胺盐为底物，在GGT 催化下，γ-谷氨酰基转移到甘肽分子上，同时释放出游离的α-萘酚，后者与重氮盐反应，产生红色化合物，其颜色深浅与GGT 浓度呈正比，通过酶标仪检测530nm 处吸光度，进而计算酶的活性。该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 准备样品： ① 血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定，-20℃ 保存，用于GGT 的检测。 ② 细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存，用于GGT 的检测。 ③ (选做)样品准备完毕后可以用BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续计 算单位蛋白重量组织或细胞内的GGT 含量。 2、 制作GGT 标准曲线：按下表制备标准曲线。 3、 GGT 酶促反应：按照下表设置对照管、标准管、测定管，溶液应按照顺序依次加入， 并注意避免产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进 编号 名称 TE0141 100T Storage 试剂(A): 萘酚标准(1.5mmol/L) 1ml 4℃ 避光 试剂(B): GGT assay buffer 5ml RT 试剂(C): GGT 显色剂 2支 4℃ 避光 试剂(D): 显色剂稀释液 250ml RT 使用说明书 1份 加入物 0 1 2 3 4 5 萘酚标准(0.15mmol/L)(ml) 0 0.02 0.04 0.06 0.08 0.1 蒸馏水(ml) 0.1 0.08 0.06 0.04 0.02 0 相当于GGT(U/L) 20 40 60 80 100
y谷氨酰转移酶偏高是怎么一回事
如对您有帮助，可购买打赏，谢谢 生活常识分享y谷氨酰转移酶偏高是怎么一回事 导语：首先大家要知道y谷氨酰转移酶，是什么意思它是反映自己肝功能的重要指标。所以大家一定要保护肝脏这些器官，如果保护不当被病毒感染时就会 首先大家要知道y谷氨酰转移酶，是什么意思它是反映自己肝功能的重要指标。所以大家一定要保护肝脏这些器官，如果保护不当被病毒感染时就会使y谷氨酰转移酶偏高。所以大家一定要注意平时的一些小，当一些良好的小习惯养成的时候也是对自己身体的一种保护。那么现在就让我们来了解一下y谷氨酰转移酶偏高危害吧。 γ-谷氨酰转肽酶简称γ-GT或GGT。它存在于肾、胰、肝、脾、肠、脑、肺、骨骼肌和心肌等组织中，在肝内主要存在于肝细胞浆和肝内胆管上皮中。GGT对各种肝胆疾病均有一定的临床价值。在大多数肝胆疾病中，其活力均升高，但在不同的肝胆疾病中，其升高的程度与其他血清酶活性的相对比例不尽相同。γ-谷氨酰转肽酶(GGT)是一种方便的、高敏感的、低花费、常用的检测酶类之一。它作为肝脏功能异常和酗酒的标志已广泛的被临床接受，主要用于诊断肝胆疾病。 γ-谷氨酰转肽酶(GGT)，临床意义，肝脏疾病，酒精肝 人体各组织均含有GGT，尤以分泌或吸收能力强的富含蛋白质的组织中最多，如胆管、肾脏、胰腺、附睾等。人体各器官中GGT含量按下列顺序排列：肾、前列腺、胰、肝、盲肠和脑。而在肾脏、胰腺和肝脏中，此酶的含量之比约为100：8：4(1)。肝脏含酶丰富，酶参与肝脏复杂的代谢功能，由于肝脏病理改变，使酶含量改变，故反映在血清中酶的浓度也有变化，根据血清酶活性的增高或降低，可判断肝脏病变的性质和程度。人血清中的γ谷氨酰转肽酶主要来自肝脏，因此具有较强的特异性。在肝功能检查中，经常会出现γ谷氨酰转肽酶
天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒(天门冬氨酸底物法)产品技术要求senmeixikema
天门冬氨酸氨基转移酶测定试剂盒(天门冬氨酸底物法) 适用范围：用于体外定量检测人血清中天门冬氨酸氨基转移酶的活性。 1.1规格 a) 试剂1：2×50ml，试剂2：2×10ml； b) 试剂1：2×60ml，试剂2：2×12ml； c) 试剂1：2×90ml，试剂2：2×18ml； d) 试剂1：2×400ml，试剂2：2×80ml； e) 试剂1：3×80ml，试剂2：3×16ml； f) 试剂1：4×50ml，试剂2：4×25ml； g) 试剂1：4×60ml，试剂2：4×12ml； h) 试剂1：6×50ml，试剂2：6×55.5ml； i) 试剂1：6×66ml，试剂2：6×16.5ml； j) 试剂1：8×50ml，试剂2：2×40ml； k) 试剂1：8×60ml，试剂2：2×48ml； l) 试剂1：12×20ml，试剂2：12×4ml； m) 试剂1：4×50ml，试剂2：4×10ml； n) 试剂1：1×50ml，试剂2：1×10ml； o) 试剂1：2×40ml，试剂2：2×8ml。 1.2 组成 试剂主要组分见表1： 表1 试剂主要组分 2.1 外观
外包装完整无破损，标签清晰；试剂1应为无色或淡黄色透明溶液；试剂2应为无色或淡黄色透明溶液。 2.2 净含量 应不低于试剂瓶标示装量。 2.3 试剂空白 2.3.1 试剂空白吸光度 在340nm处测定试剂空白吸光度，应≥1.0。 2.3.2 试剂空白吸光度变化率 试剂空白吸光度变化率（△A/min）应≤0.004。 2.4 分析灵敏度 测定浓度为150U/L的样品，吸光度变化率（△A/min）应不低于0.015。 2.5 线性 2.5.1在[5，500]U/L范围内，线性回归的相关系数应不低于0.990； 2.5.2测试浓度[50，500]U/L的样品，相对偏差应不超过±10%；测试浓度[5，50)U/L的样品，绝对偏差应不超过±5U/L。 2.6 重复性 2.6.1 批内重复性 变异系数(CV)应不超过5%。 2.6.2 批间差 对同一份样品进行重复测定，相对极差(R)应不超过10%。 2.7 准确度 回收率应在90%～110% 范围内。 2.8 稳定性 原包装试剂在2℃～8℃条件下有效期为18个月，取到效期后6个月内的试剂盒检测，应符合本技术要求2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1、2.7之规定。
γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒(GCANA底物法,液体Ⅰ型)产品技术要求
γ-谷氨酰基转移酶测定试剂盒（GCANA底物法，液体Ⅰ型） 适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中γ-谷氨酰基转移酶的活性。 1.1规格 液体双剂型 试剂1（R1）：75mL×3，试剂2（R2）：52mL×1； 试剂1（R1）：60mL×3，试剂2（R2）：36mL×1； 试剂1（R1）：50mL×3，试剂2（R2）：36mL×1。 1.2规格划分说明 根据净含量划分规格。 1.3主要组成成分 试剂盒由试剂1（R1）液体和试剂2（R2）液体组成。 1.3.1试剂1（R1）液体： 缓冲液100 mmol/L （pH8.25） 双苷肽 100 mmol/L 曲拉通X-100 1% 1.3.2试剂2（R2）液体： L-γ-谷氨酰-3-羧基-4-硝基苯胺 2.9mmol/L 2.1 外观 试剂盒中各组件的外观应满足： a) 试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损； b) 试剂2（R2）应为浅黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。
2.2 净含量 液体试剂净含量应不少于标示值。 2.3 试剂空白吸光度 在波长405nm（400nm～420nm）（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤1.000；试剂空白吸光度变化率（△A/min）≤0.005。 2.4 准确度 测定GBW(E)090593，相对偏差应不超过±10％。 2.5 分析灵敏度 对应于活性为50U/L的γ-谷氨酰基转移酶所引起的吸光度变化率（△A/min）应在0.007～0.030的范围内。 2.6 重复性 重复测试血清样本或质控品，变异系数（CV）应≤4%。 2.7 批间差 测定血清样本，批间差（R）应≤5%。 2.8 线性范围 在[5，1000]U/L 范围内，线性相关系数（r）应≥0.990； 在[5，50]U/L范围内，线性绝对偏差应不超过± 5 U/L； 在(50，1000]U/L范围内，线性相对偏差应不超过± 10 ％。 2.9 试剂稳定性 2.9.1效期稳定性： 原包装的试剂盒在2℃～8℃避光贮存，有效期为12个月。试剂有效期满后3个月以内，试剂性能应符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(单试剂比色法)
天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(赖氏比色法) 简介： 转氨酶是催化α-氨基酸和α-酮酸之间氨基转换反应的一组酶，天门冬氨酸氨基转移酶(AST)旧称谷草转氨酶(GOT)主要存在于心肌、骨骼肌、肝脏，以心肌含量最高，肝脏次之。AST能够催化天门冬氨酸和a-酮戊二酸的氨基转移作用，形成谷氨酸和草酰乙酸。 Leagene 天门冬氨酸氨基转移酶(AST)检测试剂盒(赖氏比色法)其检测原理是天门冬氨酸氨基转移酶(AST)催化天门冬氨酸与α-酮戊二酸之间的氨基转移反应，在ALT催化下，其反应公式如下： L-天门冬氨酸+α-酮戊二酸→草酰乙酸+L-谷氨酸。 二硝基苯肼与α-酮酸反应，生成相应的二硝基苯腙，在碱性条件下，二硝基苯腙的吸收光谱有差异，通过分光光度计检测在处差异最大，以等摩尔浓度计算出丙酮酸的生成量，进而计算酶的活性。100T该检测试剂盒可检测50个样本(不含标准品)，该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、蒸馏水 2、离心管 3、水浴锅 4、比色杯 5、分光光度计 操作步骤(仅供参考)：1、准备样品：编号 名称TE0133 100T Storage 试剂(A): 丙酮酸标准(100mmol/L)1ml 4℃避光试剂(B): 丙酮酸标准稀释液2ml RT 试剂(C): 标准对照液2ml 4℃ 试剂(D): AST assay buffer30ml -20℃避光使用说明书1份
①血浆、血清样品：血浆、血清按照常规方法制备，可以直接用于本试剂盒的测定， -20℃保存1个月有效，用于AST/GOT的检测。 ②细胞或组织样品：取恰当细胞或组织进行匀浆，低速离心取上清，-20℃保存1个 月有效，用于AST/GOT的检测。 ③(选做)样品准备完毕后可以用BCA蛋白浓度测定试剂盒测定蛋白浓度，以便于后续 计算单位蛋白重量组织或细胞内的AST/GOT含量。 2、制作AST标准曲线：取适量的丙酮酸标准(100mmol/L)，按丙酮酸标准(100mmol/L)： 丙酮酸标准稀释液混合，即为丙酮酸标准工作液-丙酮酸标准(2mmol/L)，按下表制备标准曲线。最好设定平行检测管，求平均值。 加入物0 1 2 3 4 丙酮酸标准(2mmol/L)(μl) 0 20 40 60 80 标准对照液(μl) 40 40 40 40 40 AST assay buffer(μl)(37℃提前孵育5min) 200 180 160 140 120 相当于ALT/GPT(卡门单位) 0 24 61 114 190 混匀，向各管中加入二硝基苯肼显色液，混匀，孵育后，加入ALT显色基液，混匀。室温放置，分光光度计，以蒸馏水调零，读取各管吸光度。各管吸光度均减去”0”号管吸光度，所得吸光度差值(纵坐标)与对应的卡门酶活力单位(横坐标)作图。 3、AST酶促反应：按照下表设置对照管、测定管，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免 产生气泡。如果样品中的酶活性过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定。 加入物对照管测定管 待测样品(如血清等)(μl) 40 40 AST assay buffer(μl) 200 ? 混匀，水浴孵育。 AST assay buffer(μl)(37℃提前孵育5min) ?200 二硝基苯肼显色液(μl) 200 200 混匀，水浴孵育。 AST显色基液(ml) 2.0 2.0 4、AST检测：混匀，室温放置5min。分光光度计检测吸光度，比色杯光径1cm，以蒸馏 水调零，读取各管吸光度值。一般应数小时内检测完毕。 计算： 以标准管活力单位为横坐标，以吸光度值为纵坐标，绘制标准曲线。测定管吸光度减去对照管吸光度后，从标准曲线查得AST活力单位。