厌氧型细菌及检验

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临床微生物学检验技术复习练习试题(四)

临床微生物学检验技术复习练习试题厌氧性细菌及检验选择题A 型题1．下列产生外毒素的细菌中哪种细菌产生的毒素引起食物中毒A 霍乱弧菌B 肉毒杆菌C 白喉杆菌D 链球菌E 破伤风杆菌2．预防和治疗破伤风的方法是:A 清创处理B 有效抗生素治疗C 注射破伤风抗毒素血清D A+BE A+B+C3．当一民工因铁钉深刺足底造成外伤送医院急诊时，医生应首先考虑给予注射A．破伤风类毒素B．破伤风抗毒素C．白百破三联疫苗D．丙种球蛋白E．破伤风菌苗4.王某，48岁，建筑工人；因牙关紧闭、四肢痉孪而入院。

8天前，右脚被铁钉扎伤，伤口深，但几日后自愈。

5日后右腿有些麻木和疼痛，且咀嚼不便，吞咽困难，最后全身抽搐，四肢痉挛。

入院诊断为破伤风，请问下述哪项是最佳治疗原则A 注射青霉素B 注射破伤风抗毒素和白百破疫苗C 注射破伤风抗毒素和青霉素D 注射破伤风抗毒素E 注射青霉素和白百破疫苗5．鉴定破伤风杆菌有无致病性的最重要的根据是A G+细长杆菌B 顶端圆形芽孢C 有周身鞭毛D 专性厌氧生长E 产生特异性外毒素6．破伤风梭菌除致破伤风病外，还能引起何种疾病EA．菌血症B．食物中毒C．组织坏死D．坏死性肠炎E．以上均不是7．下列搭配哪项不恰当：A 大肠杆菌EHEC组——出血性肠炎B 炭疽杆菌——气性坏疽C 破伤风杆菌——脐带风D 淋球菌——尿道炎E 脑膜炎球菌——流行性脑脊髓膜炎8．不是肉毒梭菌特点的是A 芽胞位于菌体次极端，菌体呈网球拍状B 严格厌氧C 致病物质主要是肉毒毒素D 引起疾病主要是细菌性食物中毒E 肉毒毒素作用机制是阻止神经组织释放乙酰胆碱B型题A 常因滥用抗生素所致的疾病B 常经呼吸道所致的疾病C 常经消化道所致的疾病D 常经产道所致的疾病E 常因战伤所致的疾病1．假膜性肠炎2．气性坏疽3．肉毒中毒X型题1．可能引起食物中毒较常见的细菌有A 金葡菌B 伤寒杆菌C 产气荚膜杆菌D 破伤风杆菌E 副溶血性弧菌2．产气荚膜芽孢梭菌引起的疾病有A 气性坏疽B 坏死性肠炎C 产褥热D 食物中毒E 伪膜性肠炎3．有迁徙性生长现象的是A 链球菌B 变形杆菌C 破伤风杆菌D 结核杆菌E 大肠杆菌4．属G- 菌A 脆弱类杆菌B 具核梭杆菌C 艰难杆菌D 双歧杆菌E 丙酸杆菌5．无芽胞厌氧菌A 优杆菌属B 梭杆菌属C 伊色列放线菌D 肉毒梭菌E 乳酸杆菌属填空题1．厌氧菌感染的原因：、、。

临床检验主管技师微生物检验第十七章厌氧性细菌及检验

第十七章厌氧性细菌及检验本章内容一、概述厌氧菌的分类厌氧菌的临床意义厌氧菌感染厌氧菌标本的采集与送检厌氧菌的分离与鉴定厌氧环境的指示二、常见厌氧菌破伤风杆菌产气荚膜梭菌肉毒梭菌艰难梭菌厌氧球菌无芽胞厌氧菌厌氧菌概述一大群专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。

G+有芽胞的梭菌：有芽胞，抵抗力强，广泛存在，可出芽繁殖，产生多种外毒素，引起严重疾病。

G+/G-无芽胞的球菌与杆菌：人体正常菌群，可存在于口腔、肠道、上呼吸道、泌尿生殖道等。

致病性属条件致病性的内源性感染。

厌氧菌概述——分类《伯杰系统细菌学手册》分类标准：无芽胞厌氧菌有40多个菌属，300多个菌种和亚种；而有芽胞的厌氧菌只有梭菌属，包括130个种。

据耐氧性分类（1）专性厌氧菌：是指在降低氧分压的条件下才能生长的细菌。

又分为极度厌氧菌（氧分压＜0.5%，空气中暴露10min致死，如丁酸弧菌）和中度厌氧菌（氧分压为2%～8%，空气中暴露60～90min能生存，如大多数人类致病厌氧菌）。

（2）微需氧菌：能在含5%～10%CO2空气中的固体培养基表面生长的细菌，如弯曲菌属。

（3）耐氧菌：其耐氧程度刚好能在新鲜配制的固体培养基表面生长。

一旦生长，暴露数小时仍不死亡，如第三梭菌、溶组织梭菌。

厌氧菌概述——临床意义及感染感染类型外源性感染：梭状芽胞杆菌属引起的感染。

内源性感染：无芽胞厌氧菌大多数是人体正常菌群，属于条件致病菌，在一定条件下可引起感染，一般不在人群中传播。

感染的危险因素：组织缺氧缺血；机体免疫功能下降；某些手术及创伤易发生厌氧菌感染；长期应用某些抗菌药物；深部需氧菌感染。

感染的临床指征：感染局部产生大量气体；多发生在黏膜附近；深部外伤后继发感染；分泌物有恶臭或为暗红色；常见于长期应用氨基糖苷类抗生素治疗无效的病例；镜检有细菌，常规培养阴性。

厌氧菌概述——标本的采集与送检重要原则：标本绝对不能被正常菌群所污染；应尽量避免接触空气。

适宜标本血液、骨髓、脑脊液、关节液、心包液、胸腔积液、腹腔液、胆汁、由活检或尸体解剖获得的组织标本、深部脓肿抽取物、经环甲膜以下或肺穿刺抽取的肺渗出物、后穹窿穿刺抽取的盆腔渗出液及无菌套管抽取的宫腔内容物、膀胱穿刺液及其它组织穿刺液等不宜标本鼻咽拭子、齿龈拭子、直肠拭子、喀出的痰液、自然排出的尿液和导出的尿液、流出的脓液、接近皮肤或黏膜的分泌物、阴道分泌物、胃和小肠内容物、粪便（艰难梭菌除外）等厌氧菌概述——标本的采集与送检采集多采用针筒抽取、穿刺等，应严格无菌操作，严禁接触空气。

谈厌氧菌检验的重要性及注意事项

谈厌氧菌检验的重要性及注意事项目的：研究厌氧菌检验的重要性及注意事项。

方法：结合临床经验，回顾性阐述厌氧菌检验的注意事项。

结果：厌氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到临床重视。

临床感染的很多实例证明开展厌氧菌检验极为必要。

结论：不同地区和不同医院厌氧菌的耐药谱不同，经验用药时要根据本地区和本实验室的药敏谱选药。

因此，为提高疗效，减少抗生素的毒副作用，最好根据药敏试验选择药物治疗。

标签：厌氧菌；无氧；培养；检验厌氧菌是一类在无氧条件下比在有氧环境中生长好的细菌，这类细菌缺乏完整的代谢酶体系，其能量代谢以无氧发酵的方式进行。

它能引起人体不同部位的感染，包括阑尾炎、胆囊炎、中耳炎、口腔感染、心内膜炎、子宫内膜炎、脑脓肿、心肌坏死、骨髓炎、腹膜炎、脓胸、输卵管炎、脓毒性关节炎、肝脓肿、鼻窦炎、肠道手术或创伤后伤口感染、盆腔炎以及菌血症等。

厌氧菌在感染性疾病中的致病作用日益受到临床重视，临床感染的很多实例证明开展厌氧菌检验极为必要。

1 厌氧菌检验概况过去我国厌氧菌培养在实验室检验中开展的并不理想，临床医生重视程度不够，大多数实验室没有将厌氧菌培养作为常规检验开展，加上厌氧菌培养方法学落后，且受培养基的配制和保存的限制，制约了厌氧菌培养在实验室中的正常开展，造成厌氧菌的漏检率很高。

据报道[1]，我国从未开展过厌氧菌培养的实验室占77%之多，有90%的实验室没有鉴定厌氧菌的设备，几乎所有临床细菌室均不开展厌氧菌药敏试验。

近年来，国内从临床感染病例中分离出厌氧菌的报道日益增多，临床医生已认识到厌氧菌在感染性疾病中的重要性，并能识别厌氧菌的重要特征，能认真、正确地采样、送检，且随着厌氧菌培养技术的不断进步，厌氧菌检验已成为临床细菌学检验的重要组成部分。

为提高感染性疾病的病原学诊断水平，开展厌氧菌培养是非常必要的。

据资料显示，如仅做需氧菌培养，在23份漏检标本中检出9株厌氧菌，这说明在做细菌需氧菌培养的同时应做厌氧菌培养[2]，否则将会造成大量病原菌漏检，它不仅关系到疾病诊断的正确性，且影响治疗效果或导致治疗不彻底。

厌氧菌检验微生物学实验

实验六、厌氧菌检验一、厌氧培养1、刨肉基法方法：将破伤风梭菌、产气荚膜梭菌分别接种在庖肉培养基中，35℃48h，观察结果。

2、厌氧罐法方法：将破伤风梭菌接种在高渗芽孢培养基中并放置于厌氧罐中；将破伤风梭菌、产气荚膜梭菌分别接种在血平板中并置于厌氧罐中，放厌氧袋，密闭，置35℃48h观察结果。

二、观察厌氧菌培养结果：1、庖肉基1）破伤风梭菌：肉汤混浊，部分消化，微变黑，有少量气体，有腐败性恶臭味。

2）产气荚膜梭菌：产生气体，肉渣呈粉红色，不被消化。

2、血平板1）破伤风梭菌：呈薄膜状生长，菌落半透明、灰白色、边缘疏松呈羽毛状，伴β溶血。

2）产气荚膜梭菌：多数菌株有双层溶血环，内环完全溶血，外环不完全溶血。

3、梭菌平板破伤风梭菌：形成直径1mm 以上不规则的菌落，中心紧密，周边疏松，似羽毛状。

三、涂片、革兰染色镜检：破伤风梭菌产气荚膜梭菌G-，细长，芽胞圆形，比菌体大，G+，粗短大杆菌，两端钝圆，单个或成双排列。

位于菌体顶端，使细菌呈鼓槌状芽胞椭圆形，位于菌体中央或次极端，芽胞直径不大于菌体四、芽孢染色：制片①5%孔雀绿加热3~5min，水洗甩干；②0.5%沙黄水溶液染色0.5~1.0min，水洗甩干干后镜检，如图所示：菌体呈红色，芽孢呈淡绿色。

破伤风梭菌产气荚膜梭菌五、汹涌发酵试验（试教）产气荚膜梭菌：分解乳糖产酸，使酪蛋白变性，同时产生大量气体，将凝固的酪蛋白冲成蜂窝状，并将液面上的凡土林层向上推挤，甚至冲开管口棉塞，气势凶猛，为“汹涌发酵”。

六、讨论：1、做生化试验时，有些细菌为致病菌，故实验时要保护好自己，且实验废弃物要妥善处理，以免发生有害菌的感染。

2、所有接种的菌株暴露于有氧环境中不得超过20min3、厌氧菌检验：可据厌氧菌的菌体形态、染色反应、菌落性状以及对某些抗生素的敏感性等作出初步鉴定。

最后鉴定则要进行生化反应及终末代谢产物等项检查。

4、破伤风梭菌微生物检验：根据破伤风的典型临床表现即可作出诊断，故一般不作细菌学检查。

厌氧菌及检验

二、厌氧菌感染
（一）厌氧菌在正常人体的分布
厌氧菌与需氧菌一起组成了人体的正常菌群。人体许多部位厌氧菌在种类和数量上远多于需氧菌，如在结肠中 99%的细菌都是厌氧菌。临床厌氧菌感染中，由正常菌群的无芽胞厌氧菌的感染最为多见。
常见厌氧菌在正常人体的分布
主要菌属
芽胞厌氧菌梭菌属无芽胞厌氧菌革兰阳性杆菌丙酸杆菌属双歧杆菌属乳杆菌属优杆菌属放线菌属革兰阴性杆菌类杆菌属普雷沃菌属紫单胞菌属梭杆菌属革兰阳性球菌消化球菌属消化链球菌属革兰阴性球菌韦荣菌属 0 ＋＋＋＋－＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－＋－＋＋＋＋ 0 0 0 0 ＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋＋－＋＋＋＋＋ 0 0 ＋＋ 0 ＋ 0 0 ＋－＋－＋＝＋＋＋＋＋＋－＋＋＋＋＋＋＋＋－ 0 ＋－ 0 0 ＋－＋－＋＋＋－ 0 0 0 ＋＋＋－＋－
5. 厌氧袋运送法
6. 棉拭运送法（略）应在20~30min内处理完毕，最迟不超过2h，防止标本中兼性厌氧菌过度生长，抑制厌氧菌的生长。如不能及时接种，应将标本保存于室温（因冷藏对厌氧菌有害气味直接涂片染色镜检
分离培养
（接种非选择性及选择性培养基）
（二）厌氧菌感染的原因 1. 局部组织的氧化还原电势降低如血管损伤、烧伤、动脉硬化、肿瘤压迫、组织坏死等，可造成局部组织的缺血、缺氧，使 Eｈ降低；此外，大面积外伤伴有需氧菌感染消耗了氧，为厌氧菌感染提供了条件。 2 . 机体免疫功能下降如接受免疫抑制剂、放疗或化疗的患者；糖尿病、慢性肝、肾疾病病人及老人、婴幼儿、早产儿等，因免疫力下降易併发厌氧菌感染。

实验十二厌氧性细菌(1稿)

实验十二厌氧性细菌（厌氧培养方法）厌氧性细菌（Anaerobicbacteria）是一大群必须在无氧或低氧环境中才能生长繁殖的细菌；一般情况下，这类细菌在无氧条件下比在有氧环境中生长好，不能在空气（氧气浓度大于18%）和（或）二氧化碳浓度小于10%以下的固体培养基表面生长。

这类细菌缺乏完整的代谢酶体系，其能量代谢多以无氧发酵的方式进行。

（一）无芽胞厌氧菌主要种类及生物学性状无芽胞厌氧菌共有23个属，与人类疾病相关的主要有10个属。

1.革兰阴性厌氧杆菌有8个属，类杆菌属中的脆弱类杆菌最为重要。

形态呈多形性，有荚膜。

除类杆菌在培养基上生长迅速外，其余均生长缓慢。

2.革兰阴性厌氧菌有3个属，其中以韦荣菌属最重要。

为咽喉部主要厌氧菌，但在临床厌氧菌分离标本中，分离率小于1%，且为混合感染菌之一。

其他革兰阴性球菌极少分离到。

3.革兰阳性厌氧菌有5个属，其中有临床意义的是消化链球菌属，主要寄居在阴道。

本菌属细菌生长缓慢，培养需5～7天。

4.革兰阳性厌氧杆菌有7个属，其中以下列3个属为主：（1）丙酸杆菌属：小杆菌，无鞭毛，能在普通培养基上生长，需要2～5天，与人类有关的有3个种，以痤疮丙酸杆菌最为常见。

（2）双歧杆菌：呈多形性，有分枝，无动力，严格厌氧，耐酸。

29个种中有10个种与人类有关，其中只有齿双歧杆菌与龋齿和牙周炎有关。

其他种极少从临床标本中分离到。

（3）优杆菌属：单一形态或多形态，动力不定，严格厌氧，生化反应活泼，生长缓慢，常需培养7天，最常见的是迟钝优杆菌。

（二）微生物学检查要从感染灶深部采取标本。

最好是切取感染灶组织或活检标本，立即送检医.学教育网搜集整理。

1.直接涂片镜检：将采集的标本直接涂片染色镜检，观察细菌形态、染色及菌量，为进一步培养以及初步诊断提供依据。

厌氧菌的采集、送检、培养、分离鉴定及注意事项

厌氧菌在有氧的情况下不能生长。

要培养厌氧菌，必须创造一个环境中的游离氧，以降低氧化还原电势。

如疱肉培养基、硫基乙酸钠培养基，牛心脑浸液培养基等。

常用的厌氧培养方法有许多，可根据实际情况选用。

1.厌氧缸法：接种好标本的平板或液体培养基试管，可放入厌氧缸内培养，厌氧缸是普通的干燥缸，用物理化学的方法使缸内造成厌氧环境，从而将厌氧菌培养出来。

2.厌氧袋：即在塑料袋内造成厌氧环境来培养厌氧菌。

塑料袋透明而不透气，内装气体发生管、美兰指示剂管、钯催化剂管、干燥剂。

放入已接种好的平板后，尽量挤出袋内空气，然后密封袋口。

先折断气体发生管，后折断美兰指示剂管，命名袋内在半小时内造成无气环境。

如不突变表示袋内已达厌氧状态，可以孵育（较为推荐）。

3.厌氧手套箱：是迄今为止国际上公认的培养厌氧菌最佳仪器之一。

它是一个密闭的大型金属箱，箱的前面有一个有机玻璃做的透明面板，板上装有两个手套，可通过手套在箱内进行操作，故名。

箱侧有一交换室，具有内外二门，内门通箱内先关着。

欲放物入箱，先打开外门，放入交换室，关上外门进行抽气和换气达到厌氧状态，然后手伸入手套把交换室内门打开，将物品移入箱内，关上内门。

箱内保持厌氧状态，也是利用充气中的氢在钯的催化下和箱中钱残余氧化合成水的原理。

该箱可调节温度，本身是孵箱或孵箱即附在其内，还可放入解剖显微镜便于观察厌氧菌菌落，这种厌氧箱适于作厌氧细菌的大量培养研究，大量培养基可放入作预还原和厌氧性无菌试验。

金属硬壁型厌氧箱的抽气、充气、厌氧环境和温度等均系自动调节。

4.厌氧盒：原理同厌氧袋，有成品销售。

5.生物耗氧法：在一密闭的容器内放以生物，消耗氧气，同时产生二氧化碳，供细菌生长用。

我没见过。

6.焦性末食子酸法：在一洁净的玻片上铺上纱布或滤纸，均匀撒上焦性末食子酸，然后再混入NaHCO3粉末或NaOH溶液，迅速将已接种细菌的平板倒扣在上面，用融化的白蜡封边，造成一个封闭空间。

焦性末食子酸与碱反应后耗氧。

厌氧性细菌及检验

厌氧性细菌及检验● 考点概念及分类厌氧菌标本的采集与送检厌氧菌的别离与鉴定〔内容讲解〕一、厌氧菌概述概念：一大群专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。

生物学分类：主要厌氧菌的分类如以下列图：厌氧菌在正常人体的分布正常人的肠道、口腔、阴道等处均有大量的厌氧菌寄居。

厌氧菌与需氧菌和兼性厌氧菌共同组成人体的正常菌群，其中绝大多数为无芽胞厌氧菌，最多的是类杆菌。

二、厌氧菌标本的采集与送检注意：标本绝对不能被正常菌群所污染；应尽量预防接触空气。

1.采集〔不同部位采纳不同采集方法〕标本来源搜集方法封闭性脓肿针管抽取妇女生殖道后穹窿穿刺抽取下呼吸道分泌物肺穿刺术胸腔胸腔穿刺术窦道、子宫腔、深部创伤用静脉注射的塑料导管穿入感染部位抽吸组织无菌外科切开尿道膀胱穿刺术标本送到实验室，应在20～30分钟内处理完毕，不超过2h。

如不能及时接种，可将标本置室温保存。

〔1〕针筒运送；〔2〕无菌小瓶运送；〔3〕棉拭子运送；〔4〕厌氧罐或厌氧袋运送。

三、厌氧菌的别离与鉴定〔一〕直接镜检依据形态和染色性，结合标本性状与气味，初步对标本中可能有的细菌作出估量。

菌名革兰染色形态及其他特征脆弱类杆菌G-b 两端钝圆，着色深，中间色浅且不均匀，且有气泡，长短不一产黑素普雷沃菌G-b多形性，长短不一，有浓染和空泡，无鞭毛和芽胞。

标本有恶臭，琥珀味，紫外线照耀发红色荧光具核梭杆菌G-b 菌体细长，两头尖，紫色颗粒菌体长轴成双排列，标本有丁酸味坏死梭杆菌G-b 高度多形性，长短不一，菌体中部膨胀呈圆球形韦荣球菌G-c 极小的革兰阴性球菌消化链球菌G+c 革兰阳性呈链状的小球菌乳酸杆菌G+b 细长，有时多形性，呈单、双、短链或栅状排列痤疮丙酸杆菌G+b排列特别呈X、Y、V或栅状，标本有丙酸气味双歧杆菌G+b 多形性，有分支呈Y、V形成棒状，标本有醋酸气味放线菌G+b 分支呈棒状、X、Y、V或栅状，脓汁中得黄色颗粒，有琥珀酸味破伤风杆菌G+b 细长、梭形或鼓槌形，有芽胞，有周鞭毛产气荚膜梭菌G+b 粗大杆菌，呈单或双排列，有芽胞，有荚膜困难梭菌G+b 粗长杆菌，有芽胞，有鞭毛，近来觉察有荚膜〔二〕别离培养主要分初代培养和次代培养两个阶段，初代培养的一般原则是：〔1〕先将标本涂片染色直接镜检，指导培养基的选择；〔2〕尽量选用在厌氧菌中覆盖面宽的非选择性培养基；〔3〕最好多项选择1～2种覆盖面不同的选择性培养基；〔4〕尽量保证培养基新奇；〔5〕要考虑到微需氧菌存在的可能。

临床医学检验考试辅导《微生物检验》第十七章厌氧性细菌及检验练习

第十七章厌氧性细菌及检验一、A11、厌氧菌感染的危险因素不包括（）。

A、组织缺氧或氧化还原电势降低B、机体免疫功能下降C、长期应用抗菌药物D、紫外线下照射E、深部需氧菌感染2、能引起毒血症的厌氧菌是（）。

A、α-溶血链球菌B、腐生葡萄球菌C、产气荚膜梭菌D、鼠伤寒沙门菌E、金黄色葡萄球菌3、细菌毒素中，毒性最强的是（）。

A、破伤风痉挛毒素B、金黄色葡萄球菌肠毒素C、白喉外毒素D、霍乱肠毒素E、肉毒毒素4、抗生素相关性伪膜性肠炎一般由下述哪种细菌所致（）。

A、破伤风梭菌B、产气荚膜梭菌C、艰难梭菌D、肉毒梭菌E、诺威梭菌5、引起假膜性肠炎的病原体是（）。

A、双歧杆菌B、消化链球菌C、艰难梭菌D、大肠埃希菌E、白色念珠菌6、下列属于专性厌氧的细菌是（）。

A、军团菌B、布鲁菌C、破伤风杆菌D、肠球菌E、幽门螺杆菌7、假设1位施工工人不慎脚踩在包装箱木板的铁钉上，医生给患者清创包扎时，还应给患者注射（）。

A、胎盘球蛋白B、破伤风抗毒素C、磺胺嘧啶D、干扰素E、人血白蛋白8、下列描述哪项是错误的（）。

A、病原菌致病力的强弱度称为毒力B、毒力主要由侵袭力和毒素所决定C、破伤风毒素属于内毒素D、侵袭力是指病原菌突破宿主机体的防御功能，并能在体内定居、繁殖和扩散的能力E、霍乱肠毒素属于外毒素二、A21、患者，女性，36岁，下腹部疼痛4天，左下腹部有中度痉挛性疼痛，阴道有大量黄色、无气味的分泌物。

一周前曾做过经阴道的结扎手术，患者阴道后穹隆穿刺术，得20ml带血、恶臭的脓性液体，厌氧菌培养得G-杆菌。

可能是下列哪种菌感染（）。

A、变形杆菌B、大肠杆菌C、铜绿假单胞菌D、肺炎杆菌E、脆弱类杆菌2、脓胸患者，怀疑厌氧菌感染，抽取脓汁应如何运送（）。

A、注入无菌试管内B、针筒运送C、注入血培养瓶内D、注入无菌小瓶内E、用无菌拭子蘸取后放到增菌管内3、王某，48岁，建筑工人，因牙关紧闭，四肢痉挛而入院，8天前，右脚被铁钉扎伤，伤口深，但几日后自愈。

临床检验技师-微生物检验(2019)讲义第十七章_厌氧性细菌及检验

G+有芽胞的梭菌：有芽胞，抵抗力强，广泛存在，可出芽繁殖，产生多种外毒素，引起严重疾病。

G+/G-无芽胞的球菌与杆菌：人体正常菌群，可存在于口腔、肠道、上呼吸道、泌尿生殖道等。

致病性属条件致病性的内源性感染。

厌氧菌概述——分类《伯杰系统细菌学手册》分类标准：无芽胞厌氧菌有40多个菌属，300多个菌种和亚种；而有芽胞的厌氧菌只有梭菌属，包括130个种。

据耐氧性分类（1）专性厌氧菌：是指在降低氧分压的条件下才能生长的细菌。

（2）微需氧菌：能在含5%～10%CO2空气中的固体培养基表面生长的细菌，如弯曲菌属。

（3）耐氧菌：其耐氧程度刚好能在新鲜配制的固体培养基表面生长。

一旦生长，暴露数小时仍不死亡，如第三梭菌、溶组织梭菌。

厌氧菌概述——临床意义及感染感染类型外源性感染：梭状芽胞杆菌属引起的感染。

内源性感染：无芽胞厌氧菌大多数是人体正常菌群，属于条件致病菌，在一定条件下可引起感染，一般不在人群中传播。

感染的危险因素：组织缺氧缺血；机体免疫功能下降；某些手术及创伤易发生厌氧菌感染；长期应用某些抗菌药物；深部需氧菌感染。

厌氧菌概述——标本的采集与送检厌氧菌概述——标本的采集与送检采集多采用针筒抽取、穿刺等，应严格无菌操作，严禁接触空气。

厌氧菌ppt课件

三、临床常见的厌氧菌
• （一）厌氧性球菌 • （二）革兰阴性无芽胞厌氧杆菌 • （三）革兰阳性无芽胞厌氧杆菌 • （四）梭状芽胞杆菌属
（一）厌氧性球菌
• G＋C：主要包括消化球菌属（黑色消化球
菌Peptococcus niger）和消化链球菌属（Peptostreptococcus anarobius）等9个种。
表1-2 不同部位标本采集法
标本来源封闭性脓肿妇女生殖道下呼吸道分泌物
胸腔组织尿道窦道、子宫腔、深部创伤
收集方法针管抽取后穹窿穿刺抽取肺穿刺术胸腔穿刺术无菌外科切开上阴部膀胱穿刺用静脉注射的塑料导管穿入感染部位抽吸
在紧急情况下，可用棉拭子取材，并采用适合的培养基传送，做厌氧菌培养，最理想是能取得组织标本，因厌氧菌在组织中比在渗出物中更易生长，而且组织标本可真实反映出感染过程的细菌学变化。
3.厌氧菌的感染遍及临床各科，且多为混合感染；
4.厌氧菌对常用的氨基糖甙类抗生素耐药，而对甲硝唑（灭滴灵）普遍敏感。 5.厌氧菌的分离鉴定较繁琐，目前国内大多医院尚未开展此工作，而发达国家早已列为临床检验常规。
种类
•主要可分为两大类，一类是有芽胞厌氧菌，
另一类是无芽胞厌氧菌。
•据目前最新资料显示，有芽胞厌氧菌只有
以及深部脓肿渗出物，经气管抽取的肺渗出物或直接由肺抽取渗出物以及其它组织穿刺液等。
下列标本无送检价值，不宜做厌氧菌培养：
①鼻咽拭子；②齿龈拭子；③痰和气管抽取物；④胃和肠道内容物、肛拭；⑤接近皮肤和粘膜的分泌物；⑥褥疮溃疡及粘膜层表面；⑦排出的尿或导尿；⑧阴道或子宫拭子；⑨前列腺分泌物。
每次标本接种前均应观察标本的性状，包括标本的气味、是否脓性、带血或腐败物质等，厌氧菌的代谢产物中有某些带气味的物质，对厌氧菌的鉴定很重要。均要求详细记录。

厌氧菌培养与鉴定技术

ANAEROBIC/HYPOXEMIC WORKSTATION历史：所有这些罐子，其培养皿/样本操作均在有氧环境中进行，而仅在培养时才置于厌氧环境中。

ELECTROTEKELECTROTEK完善的厌氧培养技术始于适当的样本采集和运输。

适当地采集试样，并快速置于厌氧运输小瓶中ELECTROTEK厌氧罐由于不能提供操作过程的厌氧环境，并且因容量的限制而无法实现灵活的样本厌氧培养，故其应用也越来越受到限制。

一台允许所有操作与培养综合功能的厌氧工作站使厌氧菌实验避免了氧气暴露的风险。

因不当的制备或贮存，使培养介质含有氧气或氧化性物质，最终将抑制厌氧菌的生长。

任何时候都应当使用经预还原处理的厌氧培养介质。

ELECTROTEK专性厌氧菌培养最好是在经预还原处理且厌氧灭菌的培养基上（PRAS培养基）。

养肉汤。

预还原是指氧气通过培养基组分物质化学移除。

ELECTROTEK以下为常见的主要用于临床标本厌氧菌分离的培养基：1、布鲁氏菌血琼脂2、卡那霉素/万古霉素血琼脂（KVLB琼脂）3、拟杆菌属胆汁七叶甙琼脂（BBE琼脂）4、苯乙醇琼脂（PEA琼脂）5、硫乙醇酸钠肉汤ELECTROTEKELECTROTEK布鲁氏菌血琼脂：含有血细胞允许溶血试验，可使特定微生物快速生长非选择性培养基，所有厌氧菌均能很好生长同样，疾病预防控制中心的厌氧菌血琼脂也可被使用。

ELECTROTEK卡那霉素/万古霉素血琼脂（KVLB ）：革兰氏阴性厌氧杆菌选择性培养基。

绝大多数的革兰氏阴性兼性厌氧杆菌被卡那霉素抑制，绝大多数革兰氏阳性菌被万古霉素抑制。

产色厌氧菌（如普雷沃菌属和卟啉单胞菌属）在KVLB 琼脂上产生许多色素。

ELECTROTEK 拟杆菌属胆汁七叶甙琼脂（BBE ）：绝大多数厌氧菌被庆大霉素和胆汁抑制，只有脆弱拟杆菌群作为唯一的厌氧菌能在此琼脂上快速生长。

当细菌（如脆弱拟杆菌群）分解七叶甙而生长于此琼脂上时，将显现深棕色反应。

ELECTROTEK苯乙醇琼脂（PEA ）：该介质支持绝大多数专性厌氧菌生长且抑制兼性厌氧菌生长（如肠杆菌科），专性厌氧菌可呈弥漫性或过度生长。

微生物检验厌氧性细菌及检验

第二十二章厌氧性细菌及检验本章考点：1.概述概念，分类标准及分类2.厌氧菌的分布与临床意义自然界和正常人体中的分布，临床意义3.厌氧菌标本的采集与送检标本的采集方法，标本的运送和处理4.分离与鉴定检验程序，检验方法概述一、概述（一）概念厌氧性细菌是一大群专性厌氧，必须在无氧环境中才能生长的细菌。

（二）厌氧菌的分类主要厌氧菌的分类见表5-22-1。

种和亚种类主要常见菌种革兰阳性有芽胞杆菌83 破伤风梭菌、肉毒梭菌、溶组织梭菌、梭菌属产气荚膜梭菌等革兰阳性无芽胞杆菌丙酸杆菌属8 痤疮丙酸杆菌、颗粒丙酸杆菌、贪梦丙酸杆菌优杆菌属34 不解乳优杆菌、迟缓优杆菌、粘性优杆菌、短优杆菌等乳酸杆菌属51 本菌属与致病关系不大放线菌属12 衣氏放线菌、溶齿放线菌、化脓放线菌等蛛网菌属 1 丙酸蛛网菌双歧杆菌属24 两歧双歧杆菌、青春双歧杆菌、婴儿双歧杆菌、短双歧杆菌、长双歧杆菌等革兰阴性无芽胞杆菌类杆菌属18 脆弱类杆菌、多形类杆菌、多形杆菌、普通类杆菌普雷沃菌属20 产黑色素普雷沃菌、中间普雷沃菌等紫单胞菌属12 不解糖紫单胞菌、牙髓紫单胞菌梭杆菌属16 具核梭杆菌、坏死梭杆菌、死亡梭杆菌等纤毛菌属 1 口腔纤毛菌沃廉菌属 2 产琥珀酸沃廉菌（来自牛瘤胃）和直线沃廉菌（来自人牙龈沟）月形单胞菌属生痰月形单胞菌（来自人牙龈沟）和反刍月形单胞菌（来自反刍动物瘤胃）革兰阳性厌氧球菌消化球菌属 1 黑色消化球菌消化链球菌属9 厌氧消化键球菌、不解糖化链球菌、吲哚消化链球菌、大消化链球菌、微小消化链球菌、产生消化链球菌、普氏消化链球菌、四联消化链球菌厌氧性链球菌成微需氧链球菌 4 麻疹链球菌、汉孙链球菌、多形链球菌、短小链球菌、另外还有已属于口腔链球菌的中间型链球菌和星群链球菌瘤胃球菌属8粪球菌属 3八叠球菌属 2革兰阴性氧球菌韦荣菌属7 小韦荣菌、产碱韦荣菌氨基酸球菌属 1 发酵氨基酸球菌巨球菌属 1 埃氏巨球菌二、厌氧菌感染（一）厌氧菌在正常人体的分布厌氧菌在人体的分布非常广泛，正常人的肠道、口腔、阴道等处均有大量的厌氧菌寄居。