亚甲基蓝水素检测法
液相色谱串联质谱法测定水产品中亮绿、亚甲基蓝及其代谢物残留量
第38卷第1期2019年1月分析测试学报FENXI CESHI XUEBAO(Journal of Instrumental Analysis)Vol.38 No. 158-63d o i: 10.3969/j.issn.1004 -4957. 2019.01.008液相色谱-串联质谱法测定水产品中亮绿、亚甲基蓝及其代谢物残留量余玮玥12，黄冬梅2*，史永富2,孔聪2,田良良2,韩峰2,张政权12(1.上海海洋大学食品学院，上海201306; 2.中国水产科学研究院东海水产研究所农业部远洋与极地渔业创新重点实验室，上海200090)摘要：建立了水产品中亮绿、亚甲基蓝及其代谢物残留量同时测定的液相色谱-串联质谱（LC- MS/MS)方法。
样品经乙酸铁缓冲溶液和乙腈提取，二氯甲烷液液萃取，PRS固相萃取柱净化，氮吹浓缩，定容后测定。
以2mm〇l/L乙酸铵(含0.1%甲酸）、乙腈和甲醇为流动相，C AP C E LLP A K C1S色谱柱进行分离，在选择反应监测（SRM)模式下测定，外标法定量。
在最佳实验条件下，5种化合物在1.0-100.0 |x g/L范围内线性关系良好（2>0.999)，检出限（LO D，S/W&3)均为1.0|xg/kg，定量下限（LOQ，S/W&10)均为 2.0|xg/k g;在水产品中加标水平为10、5.0、10.0|xg/k g时，回收率为70.3%~92.1%，相对标准偏差（RSD，™=6)为2.3% ~ 13%。
该方法灵敏度高，能有效检测水产品中亮绿、亚甲基蓝及其代谢物的残留量。
关键词：亮绿；亚甲基蓝；代谢物；水产品；液相色谱-串联质谱(L C-MS/MS)中图分类号：O650.63; TS200.3文献标识码：A文章编号：104 -4950(2019)01 -0058 -06D e t e r m i n a t i o n o f B r i l l i a n t G r e e n，M e t h y l e n e B l u e a n d T h e i r M e t a b o l i t e s i nA q u a t i c P r o d u c t s b y L i q u i d C h r o m a t o g r a p h y -T a n d e m M a s s S p e c t r o m e t r yY U W e i-y u e1’2，H U A N G D o n g-m e i2*，S H I Y o n g-fu2，K O N G Cong2，T IA N L ia n g-lia n g2，H A N Feng2，Z H A N G Z heng-q u a n1,2(1.College of Food Science and Technology，Shanghai Ocean University，Shanghai 201306，China；2.KeyOcean and Polar Fisheries Innovation，Ministry of Agriculture，East China Sea Fishery Research Institute，Chinese Academy of Fishery Sciences，Shanghai200090，China)A b s t r a c t:A liq u id chrom atography - tandem mass s p e ctro m e tric(LC - MS/M S)m ethod was de veloped fo r the d e term in ation o f b r illia n t g re e n，m ethylene b lu e and th e ir m etabolites in aquatic p ro du c ts.The samples were extracted w ith am m onium acetate b u ffe r solution and a c e to n itrile，follow e d bye xtractio n w ith d ich lo ro m e th a n e，then p u rifie d on a PRS solid phase extractio n co lu m n.The eluentwas concentrated by nitrogen b lo w in g，d ilu te d to a certain volum e and d e te rm in e d.The targets wereseparated on a C A P C E L L P A K C18colum n w ith 2 m m o l/!L aqueous am m onium acetate c o n tain ing0. 1% fo rm ic a c id，a c e to n itrile and m ethanol as m o b ile phases.The de term in ation o f the analyteswas perform ed by LC - M S/M S in selected reaction m o n ito rin g(S R M)m o d e，and the external sta ard m ethod was used fo r q u a n tita tio n.There existed good lin e a r relatio nships fo r the analytes in therange o f1.0 - 100. 0 p g/L w ith th e ir c o rre la tio n coe fficien ts(r2)large r than 0•999. The lim its o fd e te c tio n(L O D，//N^3)and q u a n tita tio n(L O Q，/A^^10) were 1.0 (x g/k g and2.0 (xg/k g，resp e ctive ly.The average recoveries at three spiked levels o f 1.0, 5.0 and 10.0 x g,k g were in therange o f70. 3%-92. 1% w ith th e ir re la tive standard deviations(R S D s，^ =6) o f2.3%- 13% .The m ethod has h ig h s e n s itiv ity and cou ld be used in the effective de tection on residues o f b rillia n tg re e n，m ethylene b lue and th e ir m etabolites in aq ua tic p ro d u cts.K e y w o rd s：b rillia n t green；m ethylene b lu e;m e ta b o lite s;aquatic p ro d u c ts;liq u id chrom atogra-收稿日期：2018 -06 -26;修回日期：2018 -08 -05基金项目：农业国家、行业标准制定和修定项目（农办质[201〇25号）*通讯作者：黄冬梅，研究员，研究方向：食品质量安全，E-mail: hdm2001@第1期余玮玥等：液相色谱-串联质谱法测定水产品中亮绿、亚甲基蓝及其代谢物残留量59ph y- tandem mass spectrom etry(LC - M S/M S)亮绿(B r illia n t g re e n，B G)属于三苯甲烷类染料，与孔雀石绿的分子结构式相似。
连续流动-亚甲基蓝分光光度法测定水质中的硫化物
水体中的污染物包括重金属，硝 酸 盐 ，磷 酸 盐 ，细菌和硫化物等，
其中硫化物是表征水体污染的重要指标。 目前国家标准规定的测定方法
N N 主 要 是 , - 二乙氨基苯胺分光光度法、碘量法和气相分子吸收光谱法，
3 . 1 标准曲线的绘制
分别量取适量的 硫 化 物 标 准 溶 液 ，[3]并 用 0.01mol/L 氢氧化钠溶液 mL 稀 释 定 容 至 100 ，制 备 6 个浓度点的标准系列，硫化物浓度分别为0.000 mg/L、0.010mg/L、0.050 mg/L、0.100mg/L、0.500 mg/L、1.00mg/L。在通 Y x 过数据单元处理后得到标准曲线方程为： =250.5 +24028.10，线性相关 R 系 数 =0.99986。
2 . 2 . 2 仪器工作条件
比 色 杯 光 程 ：30m m ; 波长 :660 nm ; 电 压 ：220V ; 进 样 时 间 ： 60s ; 清洗时间：70s ; 空 气 ：3s。
样 品 在 酸 化 条 件 下 ，硫 化 物 转 化 为 硫 化 氢 ，硫 化 氢 被 氢 氧 化 钠 溶 液
Determination of sulfide in water by continuous flow - methylene blue spectrophotometry
Xiu Sha,Liu Jiao (Guangzhou City Secondary Water Supply Technical Consulting Service Center, Guangzhou Guangdong 510010,China)
水质-硫化物的测定-亚甲基蓝分光光度法
水质-硫化物的测定-亚甲基蓝分光光度法1 适用范围本标准规定了测定水中氨氮的纳氏试剂分光光度法。
本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。
2 引用标准GB/T 16489-1996《水质硫化物的测定亚甲基蓝分光光度法》3 方法原理样品经酸化，硫化物转化成硫化氢气体，通入氮将其吹出，转移到盛乙酸锌-乙酸钠溶液的吸收显色管中，与N,N-二甲基对苯二胺和硫酸亚铁反应生成蓝色的络合亚甲基蓝，在665nm波长处测定。
4 试剂和材料4.1 去离子除氧水：将蒸馏水通过离子交换柱制得去离子水，通入氮气至饱和（以200～300ml/min的速度通氮气约20min），以除去水中的溶解氧。
制得的去离子除氧水应立即盖严，并存放于玻璃瓶内。
4.2 氮气：纯度＞99.99%。
4.3 硫酸：ρ=1.84g/ml。
4.4磷酸：ρ=1.69g/ml。
4.5 N,N-二甲基对苯二胺（对氨基二甲基苯胺）溶液：称取2g N,N-二甲基对苯二胺盐酸盐溶于200ml水中，缓缓加入200ml浓硫酸，冷却后用水稀释至1000ml,入10ml沸水中，继续煮沸至溶液澄清，冷却后储存于试剂瓶中，临用现配。
4.13 碘标准溶液(0.10mol/L):准确称取6.345g碘于烧杯中，加入20g碘化钾和10ml水，搅拌至完全溶解，用水稀释至500ml，摇匀并储存于棕色瓶中。
4.14 重铬酸钾溶液c(1/6K2CrO7)=0.10mol/L:准确称取4.9030g重铬酸钾（优级纯，经110℃干燥2h）溶于水，移入1000ml容量瓶，用水稀释至标线，摇匀。
4.15 硫代硫酸钠标准溶液，c（Na2S2O3）=0.1mol/L:称取24.8g硫代硫酸钠溶于水，加1g无水碳酸钠，移入1000ml棕色容量瓶，用水稀释至标线，摇匀。
放置一周后标定其准确浓度。
溶液如呈现浑浊，必须过滤。
标定方法：在250ml碘量瓶中，加入1g碘化钾和50ml水，加15.00ml重铬酸钾标准溶液，震荡至完全溶解后，加5ml硫酸溶液（4.10），立即密塞摇匀。
亚甲基蓝测定方法
亚甲基蓝测定方法
嘿，朋友们！今天咱来聊聊亚甲基蓝测定方法。
这亚甲基蓝啊，就像是我们化学世界里的一个小精灵，调皮又重要。
你看啊，要进行亚甲基蓝测定，首先得准备好各种家伙什儿。
就像你要去钓鱼，得先有鱼竿、鱼饵不是？那我们需要什么呢？当然是各种试剂、仪器啦。
然后呢，就是具体操作啦。
这可不能马虎，就跟做饭似的，调料放多了放少了味道可就不一样了。
先把样品处理好，这一步可得细心，要是处理得不好，那后面可就全乱套啦。
接着按照步骤一步步来，该加试剂就加试剂，该搅拌就搅拌，别偷懒哦！
这过程中，你得时刻盯着，就像看着自己的宝贝似的。
稍有个不对劲，就得赶紧调整。
不然等最后结果出来，哎呀，那可就傻眼啦！你说这是不是很重要？
想象一下，要是你不注意这些细节，那得出的结果能靠谱吗？就好比你走路不看路，那不得摔跟头呀！
等所有步骤都完成了，就等着看结果啦。
这时候就像开奖一样，心里还挺紧张呢。
要是结果好，那当然开心啦，要是不太理想，也别灰心，找找原因，下次再来嘛。
说真的，这亚甲基蓝测定方法可真是个技术活。
它需要我们的耐心、细心和专心。
可别小瞧了它，在很多领域都有着重要的作用呢。
比如在水质检测中，它能帮我们判断水的质量好不好；在医学上，也可能会用到它呢。
所以啊，朋友们，好好掌握这个方法吧，它就像一把钥匙，可以为我们打开很多知识的大门呢。
让我们一起努力，把这个小精灵驯服得服服帖帖的！。
高效液相色谱法测定养殖水体中的亚甲基蓝
高效液相色谱法测定养殖水体中的亚甲基蓝龙举;李子孟;喻亮;李佩佩;严忠雍;张小军【摘要】[目的]探讨一种高效液相色谱法测定水产养殖水体环境中亚甲基蓝含量的分析方法,为亚甲基蓝测定方法的建立提供参考.[方法]将水样经预处理后利用二氯甲烷萃取,经旋转蒸发仪抽真空浓缩净化后高效液相色谱-紫外检测器检测,采用外标法定量分析.[结果]亚甲基蓝在0.05～1.00 mg/L质量浓度范围内线性相关系数均大于0.999;在0.06 ～0.80 mg/L添加范围内的平均回收率为75.2％～ 86.0％,相对标准偏差均小于12.0％;方法定量限为0.05 mg/L.[结论]该方法的重现性较好,操作方便,定性准确且回收率较高,能够用于快速分析水产养殖水体环境中亚甲基蓝含量.【期刊名称】《安徽农业科学》【年(卷),期】2015(000)024【总页数】3页(P5-6,16)【关键词】高效液相色谱;养殖水体;环境;亚甲基蓝【作者】龙举;李子孟;喻亮;李佩佩;严忠雍;张小军【作者单位】浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021;浙江省海洋水产研究所,浙江省海水增养殖重点实验室,浙江舟山316021【正文语种】中文【中图分类】S949亚甲基蓝(methylene blue，MB)是一种人工合成的噻嗪类染料，被广泛应用于化学指示剂、染料、生物染色剂和药物等方面［1］。
基于亚甲基蓝的氧化还原性，它作为药物使用时主要用作解毒剂，可用于亚硝酸盐、氰化物、硝基苯、乙酰苯胺等药物中毒以及氨基比啉、磺胺类等药物引起的高铁血红蛋白症。
海水—阴离子洗涤剂的测定—亚甲基蓝分光光度法
FHZDZHS0044 海水阴离子洗涤剂的测定亚甲基蓝分光光度法F-HZ-DZ-HS-0044海水—阴离子洗涤剂的测定—亚甲基蓝分光光度法1 范围本方法适用于海水中阴离子洗涤剂的测定。
对有较深颜色的水样本法受干扰。
检出限：10.0μg/L.2 原理阴离子洗涤剂与亚甲基蓝反应，生成蓝色的离子对化合物，用氯仿萃取后，在波长650nm 处测定吸光度。
测定结果以直链烷基苯磺酸钠(LAS，烷基平均碳原子数为12)的表观浓度表示，实际上是测定了亚甲基蓝活性物质(MBAS)。
有机的硫酸盐、磺酸盐、羟酸盐、酚类及无机的氰酸盐、硝酸盐和硫氰酸盐等引起正干扰，有机胺类则引起负干扰。
3 试剂除非另作说明，所用试剂均为分析纯，所用水为蒸馏水或等效纯水。
3.1 氯仿(CHCl3)。
3.2 硫酸C(H2SO4)=0.5mol/L。
3.3 氢氧化钠溶液C(NaOH)=1mol/L：称取10.0g氢氧化钠(NaOH)溶于水并稀至250mL，搅匀，保存于聚乙烯瓶中。
3.4 氯化钠溶液，300g/L。
3.5 亚甲基蓝溶液：于1000mL烧杯中加入500mL水，加入50g磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O），搅拌下缓缓加入6.8mL硫酸（ρ1.84g/mL），加入50mg亚甲基蓝（C16H18N3 ClS·3H2O），搅拌溶解，加水至1000mL，混匀。
移入棕色试剂瓶保存。
3.6 洗涤液：于1000mL烧杯中加入500mL水，加入50g磷酸二氢钠，搅拌下缓缓加入6.8mL 硫酸（ρ1.84g/mL），搅拌溶解，加水至1000mL，混匀。
3.7 直链烷基苯磺酸钠(LAS，烷基平均碳原子数为12，标准试剂)标准溶液3.7.1 直链烷基苯磺酸钠标准贮备溶液，1.00mg/mL：称取100.0mg LAS 溶于50mL水中，移入100mL容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀。
此溶液1.00mL含1.00mg LAS。
在冰箱内保存，可稳定6个月。
亚甲基蓝法测定油田污水中硫化物实验装置及条件的优化
亚甲基蓝法测定油田污水中硫化物实验装置及条件的优化摘要：本文对亚甲基蓝分光光度法测定油田污水中硫化物的预处理装置和实验条件进行了改进和优化，使亚甲基蓝分光光度法具有较高的准确度、精密度和回收率，并且操作、清洗更简便。
标准曲线的线性范围可由0.005mg/L～0.700mg/L 扩展到0.000mg/L～1.239mg/L。
关键词：亚甲基蓝分光光度法硫化物酸化吹气吸收装置一、前言油田污水中硫化物是指水中溶解性无机硫化物和酸溶性金属硫化物，通常测定的水中硫化物是指溶解的H2S 、HS-及酸可溶性金属硫化物。
目前测定污水中硫化物含量主要有碘量法和亚甲基蓝分光光度法，其中对于硫化物含量较低的油田污水采用国标GB/T 16489-1996《水质硫化物的测定亚甲基蓝分光光度法》。
二、试验部分1.试验原理样品经酸化，硫化物转化成硫化氢，用氮气将硫化氢吹出，转移到盛有乙酸锌-乙酸钠的吸收显色管中，在Fe3+存在下，N，N-二甲基对苯二胺和S2-生成蓝色的络合物亚甲基蓝，于665nm波长处测定其吸光值。
2.预处理装置的改进GB/T 16489-1996《水质硫化物的测定亚甲基蓝分光光度法》中酸化╟吹气╟吸收预处理装置分为加酸、通氮和排硫化氢3个管路，反应瓶为双颈瓶，存在装置弯管、接口较多，清洗较困难等不足，需要对该预处理装置进行改进。
2.1将反应瓶由双颈瓶改为单颈瓶，容积为500ml，取消直型冷凝管，产生的硫化氢从加酸-吹气装置的外管排出。
2.2将加酸、通氮、排硫化氢集中于一体，安装于瓶颈中部，分为内外两个管路，内管的反应瓶内弯管部分改为直管，用于加酸和吹入氮气，外管用于排出硫化氢气体。
改进后的加酸╟吹气╟吸收装置各部分均由玻璃磨口连接，避免H2S气体损失。
2.3吸收管底部直径由原来的1cm增加到2cm，体积由原来的50ml增大到100ml。
将吸收显色管的排气口缩至约1.5 mm，其作用是增加排气阻力，提高吸收液对硫化氢的吸收效率。
亚甲基蓝试液配制方法
5,5 亚甲基蓝试验液(1.5 g /L)5.5.1 配制由于亚甲基蓝在干燥过程中性质发生变化，应在未干燥情况下使用，故需在(105士0-5)℃下干燥4h后，测定其水分。
亚甲基蓝未干燥品的取用量按式(1)计算:式中:m,—未干燥的亚甲基蓝的质量，9;E—水分， %;，—干燥品需要量，9;P—亚甲基蓝的纯度，0oo按式 ( 1) 计算与1.5 g 亚甲基蓝干燥品相当的未千燥品的量，将称取的亚甲基蓝(称准到1m g)溶于温度为(6。
士10) c的缓冲溶液中，待全部溶解后，冷却到室温过滤于1 000 mL 容量瓶内，分次用缓冲溶液洗涤滤渣，再用缓冲溶液稀释至标线。
8 亚甲墓蓝试验液的标定亚甲基蓝试验液配置中所用亚甲基蓝指示剂含量在98.5%以上，严格按照5.5.1配制，可直接应用于脱色试验操作，也可用下述方法之一进行标定。
8.1 碘量法准确吸取亚甲基蓝试验液50.00 m L于250m L棕色容量瓶中，加入36%乙酸25m L，摇匀，准确加入0.1 m ol/L碘标准溶液30m L，立即大力振摇片刻，将瓶置于黑暗处1h，其间每隔10m in振摇1次，用水稀释至标线，摇匀，立即用滤纸过滤，弃去最初溶液20 mL，其后滤液收集于干燥三角烧瓶中。
准确吸取上述滤液100m L，用0.1 m ol/L硫代硫酸钠溶液滴定到浅黄色，以淀粉液作指示剂继续滴定到无色为终点。
另取 5 0 m L缓冲液置于250m L容量瓶中，同时作一空白试验。
亚甲基蓝溶液浓度按式(3)计算:亚甲基蓝溶液浓度 (g /L ) = c(V ，一 V) X 3 .1 96 ·············⋯⋯ (3)式中:。
-一硫代硫酸钠的浓度，mol/L;V,—空白试验所消耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL;V—试样所耗硫代硫酸钠溶液的体积，mL;319 .6—亚甲基蓝(C,6H,8CIN,S)的摩尔质量，g/mol,8.2 重铬酸钾法准确吸取亚甲基蓝试验溶液50.00 m L置于容量为400m L烧杯中，准确加入 (1/6K2Cr207)=0.100m ol/L重铬酸钾标准溶液25. 00 ml，放入水浴中加热至(75士2)'C，并在(75土2)℃不断搅拌.保8 亚甲墓蓝试验液的标定亚甲基蓝试验液配置中所用亚甲基蓝指示剂含量在98.5%以上，严格按照5.5.1配制，可直接应用于脱色试验操作，也可用下述方法之一进行标定。
水质-硫化物的测定-亚甲基蓝分光光度法
水质-硫化物的测定-亚甲基蓝分光光度法1 适用范围本标准规定了测定水中氨氮的纳氏试剂分光光度法。
本标准适用于地表水、地下水、生活污水和工业废水中氨氮的测定。
2 引用标准GB/T 16489-1996《水质硫化物的测定亚甲基蓝分光光度法》3 方法原理样品经酸化，硫化物转化成硫化氢气体，通入氮将其吹出，转移到盛乙酸锌-乙酸钠溶液的吸收显色管中，与N,N-二甲基对苯二胺和硫酸亚铁反应生成蓝色的络合亚甲基蓝，在665nm波长处测定。
4 试剂和材料4.1 去离子除氧水：将蒸馏水通过离子交换柱制得去离子水，通入氮气至饱和（以200～300ml/min的速度通氮气约20min），以除去水中的溶解氧。
制得的去离子除氧水应立即盖严，并存放于玻璃瓶内。
4.2 氮气：纯度＞99.99%。
4.3 硫酸：ρ=1.84g/ml。
4.4磷酸：ρ=1.69g/ml。
4.5 N,N-二甲基对苯二胺（对氨基二甲基苯胺）溶液：称取2g N,N-二甲基对苯二胺盐酸盐溶于200ml水中，缓缓加入200ml浓硫酸，冷却后用水稀释至1000ml,入10ml沸水中，继续煮沸至溶液澄清，冷却后储存于试剂瓶中，临用现配。
4.13 碘标准溶液(0.10mol/L):准确称取6.345g碘于烧杯中，加入20g碘化钾和10ml水，搅拌至完全溶解，用水稀释至500ml，摇匀并储存于棕色瓶中。
4.14 重铬酸钾溶液c(1/6K2CrO7)=0.10mol/L:准确称取4.9030g重铬酸钾（优级纯，经110℃干燥2h）溶于水，移入1000ml容量瓶，用水稀释至标线，摇匀。
4.15 硫代硫酸钠标准溶液，c（Na2S2O3）=0.1mol/L:称取24.8g硫代硫酸钠溶于水，加1g无水碳酸钠，移入1000ml棕色容量瓶，用水稀释至标线，摇匀。
放置一周后标定其准确浓度。
溶液如呈现浑浊，必须过滤。
标定方法：在250ml碘量瓶中，加入1g碘化钾和50ml水，加15.00ml重铬酸钾标准溶液，震荡至完全溶解后，加5ml硫酸溶液（4.10），立即密塞摇匀。
高效液相色谱法检测水产品中亚甲基蓝的残留
高效液相色谱法检测水产品中亚甲基蓝的残留吴艳兵;王建华;李广领【期刊名称】《湖南农业科学》【年(卷),期】2008(000)003【摘要】建立了鱼类水产品中亚甲基蓝残留的分析方法.采用乙腈/10%盐酸羟胺为提取溶剂,提取液经二氯甲烷萃取净化后,采用高效液相色谱进行分析.方法在0.025～10.0 ?g/ml间呈线性相关,回归方程为y=658.61x-50.55,相关系数为R2:0.999 7,检出限为2.70 ?g/kg.对于0.01 mg/kg、0.02 mg/kg、0.04 mg/kg、0.08 mg/kg 4个添加水平,平均回收率为78.3%～86.9%,相对标准偏差为4.16%～9.75%.该法具有准确、灵敏、重复性好等优点,适合水产品中的亚甲基蓝残留的检测.【总页数】3页(P165-167)【作者】吴艳兵;王建华;李广领【作者单位】河南科技学院资源与环境学院,河南,新乡,453003;河南科技学院资源与环境学院,河南,新乡,453003;河南科技学院资源与环境学院,河南,新乡,453003【正文语种】中文【中图分类】O657.7【相关文献】1.超高效液相色谱-串联质谱联用法对水产品中亚甲基蓝及其代谢物残留的检测 [J], 杨方;范克伟;刘正才;吴德峰;林永辉;陈健;陈国南2.超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定水产品中亚甲基蓝及代谢物 [J], 崔瑾;杨洪生;章建浩;吴光红;3.超高效液相色谱-电喷雾串联质谱法测定水产品中亚甲基蓝及代谢物 [J], 崔瑾;杨洪生;章建浩;吴光红4.液相色谱串联质谱法测定进出口水产品中亚甲基蓝药物残留 [J], 殷居易;陈杰;汤海青;莫燕霞;顾晓俊;陈梅珍;吴维尔;何卫敏;;;;;;;;5.淡水鱼中亚甲基蓝、孔雀石绿类药物残留检测 [J], 施雅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
亚甲基蓝分光光度法测定污水中硫化物的方法验证
亚甲基蓝分光光度法测定污水中硫化物的方法验证亚甲基蓝分光光度法测定污水中硫化物的方法验证摘要：本文通过实验室研究，验证了亚甲基蓝分光光度法测定污水中硫化物的可行性和准确性。
首先，我们对亚甲基蓝分光光度法进行了原理的简要阐述；其次，详细介绍了实验过程、实验条件和所使用的试剂；最后，对实验结果进行了分析和讨论，证明了该方法的有效性。
关键词：亚甲基蓝、分光光度法、硫化物、污水、方法验证引言污水中硫化物的浓度检测对于环境保护和水质管理具有重要意义。
目前，常用的测定方法包括电极法、分光光度法、火势反应法等。
其中，亚甲基蓝分光光度法因其操作简单、结果准确的特点，已广泛应用于水环境中硫化物的浓度测定。
本文旨在验证亚甲基蓝分光光度法在污水样品中测定硫化物的可行性和准确性。
材料与方法试剂的制备：我们使用纯净水溶解亚甲基蓝试剂，配制成1 mmol/L的亚甲基蓝溶液。
同时，制备含有不同浓度硫化物的模拟污水样品。
实验仪器：本实验使用的主要仪器包括分光光度计、常规实验室玻璃仪器等。
实验步骤：1. 取一定量的模拟污水样品，使用高速离心机去除悬浮固体颗粒，并过滤得到澄清的样品。
2. 取适量的澄清样品，分别加入不同体积的亚甲基蓝溶液，混合均匀。
3. 将混合溶液放入分光光度计进行测定，并记录吸光度值。
4. 以亚甲基蓝溶液与纯净水的混合溶液为对照，测定其吸光度值。
5. 重复步骤2-4，将不同浓度硫化物的模拟污水样品进行测定，得到各浓度下的吸光度值。
数据处理与分析根据实验结果，我们得到了在不同硫化物浓度下的吸光度值。
利用吸光度值与硫化物浓度之间的线性关系，我们可以建立一个标准曲线。
进一步，通过对实际污水样品进行测定，并参照标准曲线，我们可以计算出样品中硫化物的浓度。
结果与讨论我们针对不同浓度硫化物的模拟污水样品进行了实验测定。
通过建立标准曲线，我们发现吸光度与硫化物浓度呈现良好的线性关系，相关系数为0.98。
这证实了亚甲基蓝分光光度法在污水中测定硫化物的可行性。
亚甲基蓝标准溶液配制
亚甲基蓝标准溶液配制
亚甲基蓝是一种常用的生物染色剂，在生物学实验中有着广泛的应用。
它可以
用于细胞染色、蛋白质电泳等实验中。
而要使用亚甲基蓝进行实验，首先就需要配制亚甲基蓝标准溶液。
下面我们将介绍亚甲基蓝标准溶液的配制方法。
首先，准备所需试剂和设备，亚甲基蓝固体粉末、蒸馏水、蒸馏水浴、烧杯、
磁力搅拌器、PH试纸、分析天平。
接下来，按照以下步骤进行亚甲基蓝标准溶液的配制：
1. 称取适量的亚甲基蓝固体粉末，通常情况下，我们会根据需要的浓度来计算
所需的亚甲基蓝粉末的质量。
2. 将称取的亚甲基蓝粉末加入烧杯中。
3. 加入适量的蒸馏水，然后用磁力搅拌器进行充分的搅拌，直到亚甲基蓝完全
溶解在水中。
4. 使用PH试纸检测溶液的PH值，通常情况下，亚甲基蓝标准溶液的PH值应该在4.5-
5.0之间。
5. 最后，用分析天平将溶液的质量进行调整，直到达到所需的浓度。
至此，亚甲基蓝标准溶液的配制就完成了。
在实验中，我们可以根据需要将其
稀释至所需的浓度来使用。
需要注意的是，在配制亚甲基蓝标准溶液的过程中，要严格按照配制比例和步
骤操作，避免因为操作不当导致溶液浓度不准确。
另外，亚甲基蓝是一种有毒物质，操作时需要佩戴防护手套和口罩，避免接触皮肤和吸入其蒸汽。
总的来说，亚甲基蓝标准溶液的配制并不复杂，只需要严格按照配制步骤进行操作，就可以获得所需浓度的亚甲基蓝标准溶液，为后续的实验提供可靠的支持。
希望以上内容对您有所帮助，谢谢阅读！。
(完整版)阴离子表面活性剂分析方法亚甲基蓝分光光度法(GB7494-87)
阴离子表面活性剂分析方法亚甲基蓝分光光度法(GB7494-87)1.1 阴离子表面活性剂含义阴离子表面活性剂主要指直链烷基苯磺酸钠类物质。
它的污染会造成水面产生不易消失的泡沫，并消耗水中的溶解氧。
2.1 适用范围：本方法适用于测定饮用水、地面水、生活污水及工业废水中的低浓度亚甲蓝活性物质（MBAS），亦即阴离子表面活性物质。
在实验条件下，主要被测物是LAS、烷基磺酸钠和脂肪醇硫酸钠，但可能存在一些正的和负的干扰。
当采用10mm光程的比色皿，试份体积为100ml时，本方法的最低检出浓度为0.05mg/L LAS，检测上限为2.0mg/L LAS。
2.2 原理：阳离子染料亚甲蓝与阴离子表面活性剂作用，生成蓝色的盐类，统称亚甲蓝活性物质（MBAS）。
该生成物可被氯仿萃取，其色度与浓度成正比，用分光光度计在波长652nm处测量氯仿层的吸光度。
2.3 试剂：在测定过程中，仅使用公认的分析纯试剂和蒸馏水，或具有同等纯度的水。
2.3.1氢氧化钠4%（NaOH）：1mol/L。
2.3.2硫酸3%（H2SO4）：0.5mol/L。
2.3.3氯仿（CHCl3）：三氯甲烷（分析纯）2.3.4直链烷基苯磺酸钠贮备溶液。
称取0.100g标准物LAS（平均分子量344.4），准确至0.001g，溶于50ml水中，转移到100ml 容量瓶中，稀释至标线并混匀。
每毫升含1.00mgLAS。
保存于4℃冰箱中。
每周配制一次。
2.3.5直链烷基苯磺酸钠标准溶液。
当天配制准确吸取10.00ml直链烷基苯磺酸钠贮备溶液（2.3.4），用水稀释至1000ml，每毫升10.00μgLAS。
2.3.6亚甲蓝溶液。
先称取50g一水磷酸二氢钠（NaH2PO4·H2O）溶于300ml水中，转移到1000ml容量瓶中，缓慢加入6.8ml浓硫酸（H2SO4，ρ=1.84g/ml），摇匀。
另称取30mg亚甲蓝（指示剂级），用50ml 水溶解后也移入容量瓶，用水稀释至标线，摇匀。
亚甲基蓝分光光度法测定污水中硫化物的方法验证
亚甲基蓝分光光度法测定污水中硫化物的方法验证1. 引言硫化物是一种常见的水体污染物，来源包括工业废水、农业排水和城市污水等。
高浓度硫化物的存在对水环境和生态系统造成严峻恐吓，因此准确测定硫化物的浓度对于水质监测和环境保卫至关重要。
亚甲基蓝分光光度法作为一种广泛应用于硫化物浓度测定的方法，具有操作简便、灵敏度高和精确度较高的优点。
本文将针对亚甲基蓝分光光度法测定污水中硫化物的方法进行验证。
2. 试验设计2.1 试验材料本次试验所需材料包括：标准硫化物溶液、亚甲基蓝溶液、硫酸钠、氢氧化钠、硫酸铜等。
2.2 试验步骤（1）样品制备：取适量待测样品，加入适量氢氧化钠溶液，使溶液呈碱性。
（2）生成硫化物：向碱性溶液中滴加硫酸铜溶液，并持续搅拌，在通风橱中加热反应，使硫酸铜与硫化物反应生成黑色硫化铜沉淀。
（3）分离沉淀：用无菌滤纸或玻璃纤维滤纸过滤，收集滤液。
（4）取适量滤液：向收集到的滤液中加入亚甲基蓝溶液，产生蓝色络合物。
（5）测定吸光度：用紫外可见分光光度计测定亚甲基蓝络合物的吸光度，并与标准曲线相对应计算硫化物的浓度。
3. 试验结果3.1 标准曲线的绘制通过制备一系列不同浓度的硫化物溶液，用亚甲基蓝分光光度法测定它们的吸光度值，然后绘制硫化物浓度与吸光度值的标准曲线。
曲线应满足一定的线性干系，以确保测定结果的准确性。
3.2 检测样品的回收率取一定量的含有已知硫化物浓度的样品，用亚甲基蓝分光光度法测量其硫化物浓度。
然后将样品中硫化物浓度的测定结果与样品的真实浓度进行对比，计算回收率。
重复测量一系列样品，得到平均回收率。
3.3 重复性和精密度重复测量同一样品的硫化物浓度，计算吸光度和浓度的标准差，以评估方法的重复性和精密度。
4. 结果分析通过绘制标准曲线和计算回收率、重复性和精密度，可以对亚甲基蓝分光光度法进行方法验证。
若果标准曲线的线性干系良好，回收率靠近100%，重复性和精密度良好，那么该方法可较为准确地测定污水中硫化物的浓度。
硫化氢——亚甲基蓝分光光度法方法确认
硫化氢——亚甲基蓝分光光度法方法确认硫化氢（H2S）是一种常见的有毒气体，具有剧毒和刺激性。
因此，准确地检测和监测环境中的硫化氢浓度对于保护人体健康和环境安全至关重要。
亚甲基蓝分光光度法是一种常用的方法，用于检测硫化氢浓度。
亚甲基蓝分光光度法是一种基于吸光度测量的定量分析方法，通过硫化氢和亚甲基蓝反应生成硫蓝质，进而测定硫化氢浓度。
该方法的原理是硫化氢可以与亚甲基蓝分子发生反应，生成硫蓝质衍生物。
硫蓝质在一定波长范围内有最大的吸收峰，可以根据其吸光度的强弱来确定硫化氢的浓度。
亚甲基蓝分光光度法的步骤如下：1.准备样品溶液：将收集到的空气或水中的硫化氢样品溶解在一定体积的溶剂中，如水或酸性介质中，以得到一定浓度的硫化氢溶液。
2.亚甲基蓝反应：将样品溶液与亚甲基蓝试剂反应并静置片刻，使硫化氢与亚甲基蓝充分反应生成硫蓝质衍生物。
3.吸光度测量：将反应产物溶液置于分光光度计中进行吸光度测量。
在测量前，必须先测定溶剂的基线吸光度，然后将样品溶液放入光度计中，利用硫蓝质的吸光度强度来确定硫化氢的浓度。
4.构建标准曲线：根据不同浓度的硫化氢样品制备一系列的标准溶液，分别进行吸光度测量，并将吸光度与浓度数据进行线性回归分析，得出一个标准曲线。
5.检测样品浓度：利用标准曲线插值法，将待测样品的吸光度值与标准曲线进行比较，确定硫化氢的浓度。
然而1.影响因素：此方法容易受到环境因素和干扰物的影响。
例如，亚甲基蓝可能与其他气体或化合物发生反应，导致结果误差。
2.微量分析不准确：如果测量的硫化氢浓度很低（微量），可能会导致分析结果的不准确性。
3.检测范围限制：亚甲基蓝分光光度法对硫化氢的检测范围有一定限制，无法检测过高或过低浓度的硫化氢。
4.实际应用中的不适用性：该方法在实际应用中可能存在一些不适用性，例如在高湿度或极端温度条件下，反应速率可能会受到影响。
总体而言，亚甲基蓝分光光度法是一种常见且有价值的方法，用于检测硫化氢浓度。
测定亚甲基蓝的碘量法原理
测定亚甲基蓝的碘量法原理
亚甲基蓝碘量法是一种常用的测定细菌中还原酶活性的方法。
该方法
利用亚甲基蓝作为电子受体，通过被还原的亚甲基蓝变为无色的还原产物，测定还原过程中氧化还原体系中的碘离子的消耗量，进而反映出相应的还
原酶活性。
具体操作步骤如下：
1.准备样品：将细菌培养物分装到试管中，离心沉淀后将上清液吸取
出来备用。
2.加入试剂：向上清液中加入含有亚甲基蓝和碘化钾的混合试剂，混
匀后置于恒温水浴中反应一定时间。
3.反应终止：加入氧化钠溶液，将反应物中剩余未参与反应的碘离子
氧化成碘酸根离子。
4.测定光密度：使用分光光度计测定反应产物的吸光度值，然后对照
标准曲线计算出反应液中碘离子的消耗量，进而反映出样品中的还原酶活性。
亚甲基蓝碘量法的优点是易于操作，成本低廉，且具有较高的灵敏度
和准确性。
不过，该方法的测定结果可能受到多种因素的影响，如温度、
反应时间、光密度等，需要在实验设计中充分考虑这些因素。
实验1 亚甲基蓝测试和阳离子交换容量测定
钻井液工艺原理实验
地学资源勘查实验教学中心 郑秀华 教授
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实验1 亚甲基蓝测试和阳离子交 换容量测定
Methylene Blue Test and Cation Exchange Capacity
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一、实验目的
通过实验掌握用亚甲基蓝(Methylene Blue)测定钻井液的阳离子交换容量 （Cation Exchange Capacity--CEC） 的方法；
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亚甲基蓝试验和终点的确定
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三 、实验方法及步骤
将2mL钻井液（或需使用2～10mL亚甲基蓝的对应的体积） 加入已加入10mL水的250mL烧瓶中，加入15mL 3％的双 氧水和0.5mL稀硫酸。缓缓煮沸10min，然后用水稀释至 50mL。
用移液管向烧瓶中加入亚甲基蓝溶液（1mL=0.01毫克当 量），待滴入0.5mL亚甲基蓝溶液后，摇动烧瓶约30s。当 其中固体仍处于悬浮状态时，用玻璃棒蘸一滴烧瓶中的样品并 将其放在一张滤纸上。如在已染了色的固体周围出现绿蓝色圈 时即达到终点。
如观察到液滴周围扩散的色环，再摇动烧瓶1min，然后取一 滴样品滴到滤纸上，如再次有明显的蓝色环，说明已到终点。 如色环未出现或出现后又消失，则继续上述过程，直到摇动 2min后滴在滤纸上的液滴出现稳定明显的色环为止。
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四、实验要求
数据记录。 数据处理：计算亚甲基蓝容量，钻井液中膨
阴离子表面活性剂的快速分析一般都用阳离子两相滴定法即混合指示剂法
阴离子表面活性剂的快速分析一般都用阳离子两相滴定法即混合指示剂法(GB5173-1985)和亚甲基蓝法。
前者的优点是随阴离子活性物种类的变化而引起等当点的变动小，结果比较准确，所以被国际标准化组织和中国国家标准局采用，其缺点是混合指示剂太贵，有时也难买到。
亚甲基蓝法也是一种较为准确的方法。
单新良和任苏明分别采用溴化乙啶一专利蓝和百里酚蓝一亚甲基蓝混合指示剂，用阳离子标准滴定液两相滴定阴离子活性物，均取得了较满意的结果这里介绍亚甲基蓝法、溴化乙啶.专利蓝混合指示法和百里酚蓝一亚甲基蓝法。
【方法一】亚甲基蓝指示剂法(一)方法概述亚甲蓝无机酸盐属于阳离子性染料。
溶于水而不溶于氯仿中，但阴离子活性物与亚甲蓝生成的络合物溶于氯仿中。
用阳离子表面活性剂标准溶液滴定溶液中的阴离子活性物，当接近终点时，阳离子表面活性剂与络合物起复分解反应，而释放出亚甲蓝，蓝色从氯仿层逐渐转移到水层。
以氯仿层和水层呈同一蓝色为滴定终点。
(二)仪器和试剂(1)具塞量筒l00ml。
(2)容量瓶500ml。
(3)移液管25ml。
(4)氯仿化学纯。
(5)月桂基硫酸钠标准溶液，c[CH3(CH2)l lOS03Na]=0.004mol／L纯度测定和配制方法参照GB 5173-l985。
(6)亚甲蓝溶液溶解0.1g亚甲蓝于50ml水中，稀释至l00ml，吸30ml于1000ml容量瓶中，加 6.8ml浓硫酸和50g无水硫酸钠，溶解后用水稀释至lL。
(7)十二烷基二甲基苄基溴化铵标准溶液，C[CH3(CH2)11N+(CH3)2CH2C6H5·Br-]=0.004mol/L精确称取 1.42～1.46g100％新洁尔灭(准确至0.O002g.)，溶于水中，转移至l000ml 容量瓶中，用水稀释至刻度。
对新配制的溶液用下面方法进行标定。
吸取25m10.004mol／L月桂醇硫酸钠标准溶液于100ml具塞量筒中，以下操作同试样测定。
按式(1)计算阳离子溶液的实际浓度c2。
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白金コロイド含有メチレンブルー溶液滴定による溶存水素濃度の定量分析
柳原紀之、佐藤文平、○首藤達哉
ミズ株式会社
Quantitative Analysis of Dissolved Hydrogen Concentration
Titrated with Platinum Colloid C ontaining Methylene Blue Solution
Tomoyuki Yanagihara, Bunpei Sato, ○Tatsuya Shudo
MiZ Co.,Ltd.,
[目的]
演者らは、ミズ社開発に係る特殊電解槽 1) を用いて生成した中性系高濃度電解水素水に、白金コ
薬理機能水について３件の特許出願をし、 ロイド等の貴金属コロイドを含有させてなる抗酸化機能水、
これらが順次国際公開 2) , 3) , 4) されている。
かかる機能水の研究開発途上で、 同水中に溶存している、 機能発現の鍵物質と目される水素の濃度を精確に計測する必要性を生じた。
そこで、従来の隔膜型ポ ーラログラフ方式を採用した溶存水素計により溶存水素(DH)濃度の計測を試みたところ、かかる従来 方式では、その計測原理から被計測液の液性に従う誤差を生じることがわかった。
こうした背景のも と、 DH濃度を精確に計測することを目的として鋭意研究を重ねた結果、 電気化学的アプローチとは異 なる新規なDH濃度の定量分析方法を開発するに至ったので、これを報告する。
[計測原理]
本法の基礎となる化学反応は以下の通りである。
まず、 電解水素水等の水素溶存水 （被検定水） に、 白金コロイド含有メチレンブルー溶液（PtMb溶液）を滴下すると、被検定水中に溶存している化学 的に不活性な分子状水素が白金コロイド触媒を介して活性化し、原子状水素へと変わる。
こうして生 じた原子状水素がメチレンブルーを２電子還元することで、メチレンブルーは酸化型（青色）から還 元型のロイコメチレンブルー（無色）へと変わってゆく。
(Fig.1)
かかる化学反応を基礎とするDH濃度の定量分析方法では、 外部環境から隔離した状態で、 電解水素 水等の水素溶存水（被検定水）に、予め濃度がわかっているPtMb溶液を滴下していく。
このときの 滴下操作を、被検定水の呈色変化を目視で観察しながら徐々に行う。
ここで、被検定水のDH濃度がメ チレンブルーの滴下量よりも上回っていれば、メチレンブルーは還元されて無色になるが、メチレン ブルー水溶液の滴下量を徐々に増やしていくと、
加えたメチレンブルーと被検定水中の溶存水素とが、 白金コロイド触媒を介して相互に打ち消しあって、やがてメチレンブルーの青色から無色への呈色変
化が観察できなくなる。
このときを終点とすれば、PtMb 溶液のメチレンブルー濃度と、同溶液の合 計滴下量から、被検定水のDH 濃度の実効値を求めることができる。
なお、計測精度向上のためには、ⅰ. PtMb 溶液中の溶存気体を窒素等の不活性ガスに置換しておく こと、ⅱ. 被検定水中の溶存気体のうち酸素濃度を別途計測しておき、計測した酸素で消費される水 素の値を求め、この損失分の補償をDH 濃度の実効値に対して行うことで、被検定水のDH 濃度の絶対 値を求めること、の両手順を踏むことが望ましい。
Fig.1 Explanation chart of measurement principle.
[結果と考察]
前述の特殊電解槽で一回電解処理した中性系高濃度電解水素水(pH 7.7、ORP –620mV)を被検定 水としたときのDH 濃度の絶対値は約1ppm であった。
中性系高濃度電解水素水のDH 濃度を計測するの に特に適した、被計測液の液性に従う誤差を生じることのない、PtMb 溶液滴定によるDH 濃度の定量 分析方法を得ることができた。
[文献]
1) 柳原紀之、佐藤文平、首藤達哉、国際公開パンフレット、国際公開番号:WO 03/002466 A1(Jan. 09,2003)
2) 柳原紀之、 佐藤文平、 首藤達哉、 国際公開パンフレット、 国際公開番号:WO 2004/039735 A1(May 13,2004)
3) 柳原紀之、 佐藤文平、 首藤達哉、 国際公開パンフレット、 国際公開番号:WO 2005/039602 A1(May 06,2005)
・M b
Pt colloid catalyst
H・
H・ H・
H・
H
＋ M b － e － H：H
H ＋ M bH(reduced methylene blue
: leucomethylene blue : water-clear)
M b ＋ (oxidized methylene blue : blue) e － H：H。