血清总胆红素及结合胆红素测定PPT优秀课件
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血清胆红素ppt课件.ppt
篮球比赛是根据运动队在规定的比赛 时间里 得分多 少来决 定胜负 的，因 此，篮 球比赛 的计时 计分系 统是一 种得分 类型的 系统
孕妇黄疸
列举几种常见的妊娠期黄疸性疾病： 一、先兆子痫毒血症：发生在孕妇妊娠20周以后，先兆子痫只 是在疾病进展时才累及肝脏。先兆子痫可有ALT升高，除非合 并DIC，黄疽少见。肝组织正常，或有出血性坏死，但无炎症。 二、妊娠期肝内淤胆症：以全身上下瘙痒、淤胆的生化改变为 特征。发生于妊娠中、末期，先有皮肤瘙痒，继而出现黄疸， 直接胆红素为主。血清胆固醇、胆酸、ALP和γGT升高，而ALT 正常或轻度升高。瘙痒和黄疸常在分娩后2周内消失，再次妊娠 再次发作。 三、妊娠急性脂肪肝：罕见的致死性疾病，常发生在妊娠后期， 好转的病例可完全恢复，再次妊娠时罕见再发。起病急剧，常 有上腹部剧痛、淀粉酶增高、类似急性胰腺炎。常有重度黄疸， 血清胆红素增高，而尿胆红素阴性。20%～40%的病例伴有先 兆子痈。重症病人实验室检查可有肝衰竭、急性肾功衰竭或弥 漫性血管内凝血(DIC)的表现。肝脏B型超声检查呈脂肪肝波形。 如果携带乙肝病毒的孕妇发生这种情况，因HBsAg(+)易被误诊 为暴发性乙型肝炎。
4.粪胆原: 尿胆原大部分从粪便排出,称为粪胆原。
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5.胆红素肠肝循环 小部分胆红素经肠道吸收,通过门静脉回到肝内,其中
大部分再转变为结合胆红素,又随胆汁排入肠内,形成胆 红素肠肝循环。
引起黄疸。
阻塞性黄 疸根据阻 塞的部位 可分为肝 外胆管及 肝内胆阻 塞两类。
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血清总胆红素和结合胆红素测定
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THANKS
病理因素
肝病
肝炎、肝硬化等肝病可能导致血 清总胆红素水平升高。
胆道疾病
胆结石、胆囊炎等胆道疾病可能导 致血清总胆红素水平升高。
其他疾病
如溶血性贫血、急性胰腺炎等也可 能导致血清总胆红素水平升高。
药物因素
抗生素
长期使用某些抗生素如红霉素、 氯霉素等可能导致血清总胆红素
水平升高。
抗结核药
抗结核药物如利福平、异烟肼等 可能导致血清总胆红素水平升高。
抗肿瘤药
抗肿瘤药物如顺铂、阿霉素等可 能导致血清总胆红素水平升高。
05
血清总胆红素和结合胆红 素测定的注意事项
标本采集注意事项
空腹采集
为避免食物中色素对血清总胆红素和 结合胆红素测定的干扰，采集标本前 应确保受检者空腹至少8小时。
避免溶血
避免使用止血带
使用止血带会阻断静脉回流，导致血 液浓缩，影响测定结果。
正常值范围
成人
0-6.8μmol/L（0-0.3mg/dl）
新生儿
2.5-10μmol/L（0.1-0.4mg/dl）
03
血清总胆红素和结合胆红 素测定的临床意义
鉴别黄疸的类型
鉴别黄疸类型
血清总胆红素和结合胆红素测定可以 鉴别黄疸的类型，如溶血性黄疸、肝 细胞性黄疸和梗阻性黄疸。
判断黄疸程度
通过测定血清总胆红素和结合胆红素 水平，可以判断黄疸的严重程度，为 后续治疗提供依据。
采血时应避免采血部位发生溶血，因 为红细胞中的胆红素会干扰测定结果。
测定过程中的注意事项
仪器校准
为确保测定结果的准确性，应定期对测定仪器进 行校准。
避免试剂污染
在操作过程中，应避免试剂被污染，以免影响测 定结果。
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谷草比谷丙
天冬氨酸氨基转移酶/谷丙转氨酶 AST/ALT<1。如果感染HBV后，只是表现一般的炎 症反应和肝细胞的变性改变，如：急性肝炎、慢 性肝炎或肝硬化，大量释放出来的主要是ALT，因 此，此时AST/ALT<1 AST/ALT>1。如果肝细胞发生坏死、分解，AST大 量释放出来，AST明显升高。而ALT由于发病过程 中，大量释放，甚至耗竭，因此血清中含量增高 的负担就不如AST，因此出现AST/ALT的比值升高 。
↓急性肾小管坏死
肌酐
肌酐(creatinine，Cr)是肌肉在人体内代谢的产物，每20g肌肉代谢 可产生1mg肌酐。肌酐主要由肾小球滤过排出体外。血中肌酐来自外 源性和内源性两种，外源性肌酐是肉类食物在体内代谢后的产物；内 源性肌酐是体内肌肉组织代谢的产物。 增高：见于肢端肥大症、巨人症、糖尿病、感染、甲状腺功能减低、 进食肉类、运动、摄入药物（如维生素C、左旋多巴、甲基多巴等） 。 减低：见于急性或慢性肾功能不全、重度充血性心力衰竭、甲状腺 功能亢进、贫血、肌营养不良、白血病、素食者，以及服用雄激素、 噻嗪类药等。
直接胆红素（DBIL）
又称结合胆红素。未结合胆红素在肝细胞 内转化，与葡糖醛酸结合形成结合胆红素 ，结合胆红素用凡登伯定性试验呈直接反 应，故将这种胆红素称为直接胆红素。 ↑：经肝细胞处理和处理后胆红素从胆道 的排泄发生障碍 梗阻性黄疸：胆道梗阻、淤胆型肝炎 肝细胞性黄疸 ：乙肝、丙肝、脂肪肝、肝 硬化
尿素氮（ BUN）
尿素氮是人体蛋白质代谢的主要终末产物 通常肾脏为排泄尿素的主要器官，尿素从肾小球滤过后在各段小管均 可重吸收，但肾小管内尿流速越快重吸收越少，也即达到了最大清除 率。和血肌酐一样，在肾功能损害早期，血尿素氮可在正常范围。当 肾小球滤过率下降到正常的50%以下时，血尿素氮的浓度才迅速升高 。 ↑ 1、器质性肾功能损害：急慢性肾衰竭 2、肾前性少尿：严重脱水、大量腹水、心脏循环功能衰竭、 肝肾综合征 3、蛋白质分解或摄入过多：如急性传染病、高热、上消化道 大出血、大面积烧伤、严重创伤、大手术后和甲状腺功能亢、高蛋白 饮食等
胆红素
在各种重氮试剂法中，改良J-G法为推荐方
法，其灵敏度、准确度和特异性均较高。
改良J-G法
原理： 血清中结合胆红素可直接与重氮试剂反应产生偶
氮胆红素，所以称为直胆，非结合胆红素测定时 要以咖啡因-苯甲酸钠-醋酸钠为加速剂破坏胆红 素分子内氢键再与重氮试剂反应，叠氮钠破坏剩 余重氮试剂，加入碱性酒石酸钠使最大吸光度由 530nm转到600nm，非胆红素的黄色色素及其它 红色与棕色色素产生的吸光度降至可忽略不计， 使灵敏度和特异性升高，最后形成的绿色是由兰 色的碱性偶氮胆红素和咖啡因与对氨基苯磺酸之 间形成的黄色色素混合而成。
0.2 40
0.3 0.2
0.2 60
0.4 0.1
0.2 80
பைடு நூலகம்0.2 /
0.2 100
相当于胆红素浓度 （μmol/L）
改良J-G法操作步骤
加入物（ml） H2 O 对照管 0.2 总胆红素管 / 结合胆红素管 /
血清
咖啡因苯甲酸钠试剂 对氨基苯磺酸溶液 重氮试剂
/
1.6 0.4 /
0.2
1.6 / 0.4
分，包括非结合胆红素（Bu）、胆红素单 葡萄醛酸酯（mBc）、胆红素双葡萄醛酸 酯（dBc）、δ胆红素（Bδ）、以及光照射 后产生的光胆红素，并加以准确定量。 该法灵敏度高、特异性强，是目前胆红素 测定的最可靠方法。 但该法仪器昂贵，技术要求高。
直接分光光度法是专用于新生儿血清总胆
红素测定，采用双波长比色避免溶血干扰， 方法简单，不需要样品空白，但该法不适 合自动化大批量分析。
0.2
/ / 0.4
每加一种试剂后混匀，置37℃10分钟
叠氮钠溶液
咖啡因苯甲酸钠试剂 碱性酒石酸钠溶液
肝功能ppt课件
18
凝血酶原时间（PT）
PT与凝血因子 I 、II 、V、VII 和 X 相关， 而它们全由肝脏合成，故 PT可反映肝脏的 合成功能。较明显延长者表明有严重肝病
II 、VII、X因子为Vit K依赖性， Vit K 缺乏时 PT延长
慢性胆汁郁积伴脂肪吸收不良时亦间延长 严重肝病而出现DIC时，PT延长
安替比林血浆清除率 14C氨基比林呼气试验 静脉色氨酸耐量试验 利多卡因代谢试验
25
反映胆汁淤积
胆红素 胆汁酸 γ- 谷氨酰基转移酶（γ-GT） 碱性磷酸酶（AKP） 5’- 核苷酸酶（5’-NT） 亮氨酸氨基肽酶（LAP）
血清总胆红素（TB）>17.1μmol/L， 称黄疸
17.1~34.1μmol/L，称隐性黄疸 直接胆红素（CB）约占TB的1/5 溶血性黄疸CB/TB<0.2；梗阻性黄疸
CB/TB >0.5；肝细胞性黄疸介于两 者之间
6
尿胆红素
尿液中胆红素阳性表示CB增高，见 于胆系梗阻性病变
CB为水溶性，梗阻性病变时，CB “返入”血液，经肾脏排出
10
总胆汁酸（TBA）
生理情况下，餐后血清TBA会一过性增高 本参数可反映肝细胞的摄取、合成和分泌功能 肝细胞轻度损害时，血清TBA就可增高，且较敏感 存在门体分流时，经肠道吸收的胆汁酸直接进入
体循环，使血清TBA增高 胆道排泄功能下降、小肠疾病也可增高
11
胆酸和鹅脱氧胆酸
胆道梗阻时，CA和CDCA均升高， 但CA/CDCA>1
如肾脏功能损害，尿胆红素可能阴 性
7
尿胆素原
UCB产生过多（溶血）和肝功能不全时， 从肠道吸收的胆素原不能被完全处理 掉，于是经肾脏排出，使尿胆素原增 多
凝血酶原时间（PT）
PT与凝血因子 I 、II 、V、VII 和 X 相关， 而它们全由肝脏合成，故 PT可反映肝脏的 合成功能。较明显延长者表明有严重肝病
II 、VII、X因子为Vit K依赖性， Vit K 缺乏时 PT延长
慢性胆汁郁积伴脂肪吸收不良时亦间延长 严重肝病而出现DIC时，PT延长
安替比林血浆清除率 14C氨基比林呼气试验 静脉色氨酸耐量试验 利多卡因代谢试验
25
反映胆汁淤积
胆红素 胆汁酸 γ- 谷氨酰基转移酶（γ-GT） 碱性磷酸酶（AKP） 5’- 核苷酸酶（5’-NT） 亮氨酸氨基肽酶（LAP）
血清总胆红素（TB）>17.1μmol/L， 称黄疸
17.1~34.1μmol/L，称隐性黄疸 直接胆红素（CB）约占TB的1/5 溶血性黄疸CB/TB<0.2；梗阻性黄疸
CB/TB >0.5；肝细胞性黄疸介于两 者之间
6
尿胆红素
尿液中胆红素阳性表示CB增高，见 于胆系梗阻性病变
CB为水溶性，梗阻性病变时，CB “返入”血液，经肾脏排出
10
总胆汁酸（TBA）
生理情况下，餐后血清TBA会一过性增高 本参数可反映肝细胞的摄取、合成和分泌功能 肝细胞轻度损害时，血清TBA就可增高，且较敏感 存在门体分流时，经肠道吸收的胆汁酸直接进入
体循环，使血清TBA增高 胆道排泄功能下降、小肠疾病也可增高
11
胆酸和鹅脱氧胆酸
胆道梗阻时，CA和CDCA均升高， 但CA/CDCA>1
如肾脏功能损害，尿胆红素可能阴 性
7
尿胆素原
UCB产生过多（溶血）和肝功能不全时， 从肠道吸收的胆素原不能被完全处理 掉，于是经肾脏排出，使尿胆素原增 多
生化检验胆红素 ppt课件
醛酸转移酶的催化作用与葡萄糖醛酸结合，形 成胆红素葡萄糖醛酸脂称为CB。为水溶性， 可通过肾小球滤过从尿排出。
结合胆红素与未结合胆红素的比较：
结合胆红素
游离胆红素
同义名称 与葡萄糖醛酸结合
直接胆红素（DB）、肝 胆红素
结合
水溶性
大
脂溶性
小
穿透细胞膜的能力及毒性
小
能否通过肾小球随尿排出
能
与重氮试剂的反应
▪ 临床表现：一般黄疸为轻度，呈浅柠檬色， 不伴皮肤瘙痒，有溶血相关症状，不同程 度的贫血和血红蛋白尿，急性溶血时可以 发热、寒战、头痛、呕吐、腰痛等。
▪ 实验室检查：
①血清TB增加，以UCB为主，CB基本正常。
②胆素原增加，尿中尿胆原增加，但无胆红 素，粪色加深。
③急性溶血时，尿隐血试验阳性。
正常胆红素代谢与溶血性黄疸：
溶血性黄疸 肝细胞性黄疸 胆汁淤积性黄疸 先天性非溶血性黄疸
▪ 按胆红素性质分类
以UCB增高为主的黄疸 以CB增高为主的黄疸
黄疸的概念
▪ 由于胆红素代谢障碍，血浆中胆红素含量 升高，致使皮肤、黏膜和巩膜发黄的病理 变化和临床表现。
▪ 血清中胆红素浓度超过正常值，但未超过 34.2μmol/L(2.0mg/L)，称为隐性黄疸；当 血清中胆红素浓度超过34.2μmol/L时，出 现显性黄疸。
胆红素在血液中的转运
▪ 胆红素在血液中主要以胆红素-血浆清蛋白复 合物的可逆形式存在和运输，少量与α1 球蛋
白形成复合物而运输。这种结合增加了胆红素 在血浆中的溶解度，便于运输；同时又限制了 胆红素自由透过各种生物膜，使其不至于对组 织产生毒性作用。
▪ 某些阴离子如磺胺类、脂肪酸、胆汁酸、水杨 酸等可与胆红素竞争与清蛋白结合，从而使胆 红素游离出来，增加其透入细胞的可能性。
结合胆红素与未结合胆红素的比较：
结合胆红素
游离胆红素
同义名称 与葡萄糖醛酸结合
直接胆红素（DB）、肝 胆红素
结合
水溶性
大
脂溶性
小
穿透细胞膜的能力及毒性
小
能否通过肾小球随尿排出
能
与重氮试剂的反应
▪ 临床表现：一般黄疸为轻度，呈浅柠檬色， 不伴皮肤瘙痒，有溶血相关症状，不同程 度的贫血和血红蛋白尿，急性溶血时可以 发热、寒战、头痛、呕吐、腰痛等。
▪ 实验室检查：
①血清TB增加，以UCB为主，CB基本正常。
②胆素原增加，尿中尿胆原增加，但无胆红 素，粪色加深。
③急性溶血时，尿隐血试验阳性。
正常胆红素代谢与溶血性黄疸：
溶血性黄疸 肝细胞性黄疸 胆汁淤积性黄疸 先天性非溶血性黄疸
▪ 按胆红素性质分类
以UCB增高为主的黄疸 以CB增高为主的黄疸
黄疸的概念
▪ 由于胆红素代谢障碍，血浆中胆红素含量 升高，致使皮肤、黏膜和巩膜发黄的病理 变化和临床表现。
▪ 血清中胆红素浓度超过正常值，但未超过 34.2μmol/L(2.0mg/L)，称为隐性黄疸；当 血清中胆红素浓度超过34.2μmol/L时，出 现显性黄疸。
胆红素在血液中的转运
▪ 胆红素在血液中主要以胆红素-血浆清蛋白复 合物的可逆形式存在和运输，少量与α1 球蛋
白形成复合物而运输。这种结合增加了胆红素 在血浆中的溶解度，便于运输；同时又限制了 胆红素自由透过各种生物膜，使其不至于对组 织产生毒性作用。
▪ 某些阴离子如磺胺类、脂肪酸、胆汁酸、水杨 酸等可与胆红素竞争与清蛋白结合，从而使胆 红素游离出来，增加其透入细胞的可能性。
胆红素代谢图示PPT课件
与胆红素的代谢。
胆红素代谢的生理意义
01
维持体内胆红素平衡
胆红素的代谢过程有助于维持体内胆红素的平衡，确保正常的生理功能。
02
促进脂质和脂溶性维生素的消化吸收
胆红素作为胆汁的主要成分，有助于促进脂质和脂溶性维生素的消化吸
收。
03
保护机体免受氧化应激损伤
初级胆红素具有抗氧化作用，可以清除体内的自由基，保护机体免受氧
药物治疗需要长期坚持，并根据病情调整药物剂量和种类，以达到最佳的治疗效 果。
手术治疗
对于某些胆红素代谢异常的疾病，如胆道闭锁、先天性胆管 扩张等，手术治疗是必要的。手术方法包括胆道疏通、胆肠 吻合等，以恢复胆汁的正常排泄，降低胆红素水平。
手术治疗需要在专业医生的指导下进行，并严格掌握手术适 应症和禁忌症，以确保手术安全有效。
CHAPTER
血液检测
血清胆红素测定
通过抽取静脉血液检测血清中胆红素 的含量，包括总胆红素和直接胆红素 。
肝功能检查
通过检测血液中相关酶的活性，间接 评估胆红素代谢的状况。
尿液检测
尿胆原测定
检测尿液中尿胆原的含量，了解胆红 素代谢的情况。
尿胆红素测定
检测尿液中尿胆红素的含量，有助于 鉴别黄疸的类型。
胆红素代谢的重要性
胆红素是人体内重要的代谢产物，其 代谢过程对于维持人体健康具有重要 意义。
了解胆红素代谢的过程有助于预防和 治疗黄疸等疾病，提高人们的健康水 平。
02 胆红素代谢概述
CHAPTER
胆红素的来源
血会分解产 生胆红素。
肠道细菌作用
总结词
由于肝内或肝外胆管梗阻导致胆汁排泄受阻，胆汁逆流入血而形成梗阻性黄疸。
详细描述
血液透析患者血清总胆红素结合胆红素比值检测及临床意义
结果展示与解读
结果展示
通过表格、图表等形式展示血清总胆红素和结合胆红素 的检测结果，以及相关性分析和回归分析的结果。
结果解读
根据统计结果，分析血清总胆红素和结合胆红素之间的 关系，探讨其在血液透析患者中的临床意义。例如，高 血清总胆红素水平可能提示患者存在肝功能异常或胆汁 淤积等问题，而高结合胆红素水平则可能与溶血性疾病 或肝细胞损伤有关。通过监测这些指标的变化，可以及 时了解患者的病情变化和治疗效果，为临床诊断和治疗 提供有力支持。
血液透析过程
将患者的血液引出体外，通过透析器 与透析液进行物质交换，清除体内的 代谢废物、维持电解质和酸碱平衡； 同时清除体内过多的水分，并将经过 净化的血液回输。
血液透析对患者胆红素的影响机制
血液透析对胆红素的清除
血液透析可以清除血液中的小分子物质，包括胆红素。在透析过程中，胆红素 通过透析膜与透析液中的成分进行交换，从而降低血清中的胆红素水平。
该比值能够反映血液透析患者的肝功能状态，对于评估患 者的病情和预后具有重要意义。
要点二
探讨该比值在血液透析患者中的 临床意义
通过检测血清总胆红素和结合胆红素的比值，可以及时发 现血液透析患者可能出现的肝功能异常，为临床诊断和治 疗提供依据。
血液透析患者现状
血液透析患者数量不断增加
随着人口老龄化和慢性肾脏病发病率的上升，需要进行血液透析治疗的患者数量也在不断 增加。
调整透析方案
根据该比值的动态变化，医生可及时调整 透析方案，如增加透析频率、调整透析液 成分等，以提高透析治疗效果和患者生活 质量。
指导临床治疗策略调整
个体化治疗
血清总胆红素结合胆红素比值可为血液透析 患者的个体化治疗提供指导。针对不同患者 的具体情况，医生可制定针对性的治疗方案 ，如调整药物剂量、选择更合适的透析方式 等。
医学检验·检查项目：红细胞血清总胆红素_课件模板
医学检验·各论：红细胞血清总胆红素 >>>
临床意义：
数亚急性肝炎可无黄疸出现。胆汁淤积性 肝炎，血清胆红素甚高，而肝细胞受损程 度较轻。 (5)有助于了解新生儿溶血症的 严重程度，制定合理的治疗方案。 (6)再 生障碍性贫血，慢性肾炎贫血患者STB减 低。
医学检验·各论：红细胞血清总胆红素 >>>
正常值： 血清总胆红素：2～20μmol/L(0.1～
1.2mg/dl)。
医学检验·各论：红细胞血清总胆红素 >>>
相关检查： δ-胆红素、脂蛋白X（LP-X）、粪胆素、 尿胆素、尿胆原（URO）、总胆汁酸。
医学检验·各论：红细胞血清总胆红素 >>>
相关症状： 胆道蛔虫症、尿胆原排泻增加、婴儿脸色 发黄、黄指甲、新生儿母乳喂养后出现黄 疸、肝功能衰竭。
医学检验·各论：红细胞血清总胆红素 >>>
临床意义：
66.8μmol/L，肝细胞性黄疸为17.1～ 119.7μmol/L，溶血性黄疸为 <85.5μmol/L。 (3)胆红素分类鉴别黄疸 类型：总胆红素和非结合胆红素增高，见 于溶血性黄疸、血型不合的输血反应、恶 性疟疾及新生儿黄疸等，以非结合胆红素 增高为主;总胆红素和结合胆红素增高为 阻塞
医学检验·各论：红细胞血清总胆红素 >>>
临床意义：
性黄疸，如胆石症、肝癌、胰头癌等，以 结合胆红素增高为主;总胆红素、结合胆 红素、非结合胆红素均增高为肝细胞性黄 疸，如急性黄疸性肝炎、慢性活动性肝炎、 肝硬化和急性黄色肝坏死等。 (4)用于肝 细胞损害程度和预后判断：在肝脏疾病中， 胆红素浓度明显升高，常反映肝细胞损伤 严重，预后不良。但少
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- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
【试剂】
1．0.1mol/LTris-HCl缓冲液(pH8.2) 称取三羟甲基氨基甲烷 (Tris)1.211g，胆酸钠172.3mg,十二烷基硫酸钠(SDS)432.6mg， 溶于去离子水90ml中，在室温(25～30℃)用1mol/L盐酸调节pH至 8.2(约用6ml)，再加蒸馏水至100ml，置冰箱保存，此液含 4mmol/L胆酸钠、15mmol/L SDS。
4．总胆红素标准液(342μmol/L) 按胆红素测定J-G法中方法配制，或 市售合乎要求的标准液。
5．结合胆红素标准液 将DTB配于胆红素浓度可忽略不计的人血清中， 或用冻干品按说明书要求重建。配制后分装于聚丙烯管内，－70℃保 存，可稳定6个月。冻干品未重建前置低温中，至少稳定1年。
【操作步骤】
• (3) 新生儿溶血症 血清胆红素有助于了解疾病严重程度。
• (4) 再生障碍性贫血及数种继发性贫血(主要见于癌或慢性 肾炎引起)，血清总胆红素减少。
【临床意义】
2．血清结合胆红素测定的意义 结合胆红素 与总胆红素的比值可用于鉴别黄疸类型。
• (1) 比值＜20% 溶血性黄疸，阵发性血红 蛋白尿，恶性贫血，红细胞增多症等。
2．0.2mol/L磷酸盐缓冲液(pH4.5)。
3．BOD溶液 如系冻干品，按说明书要求复溶，但复溶后冰箱保存不宜 过长(约可保存1周)，如系液体(可能含有甘油)，置4℃冰箱可保存较 长时间，BOD贮存溶液的酶活性一般在数千至1万～2万U/L，BOD 工作液酶活性可按反应液中BOD终浓度达0.3～1.0U/ml计算。
•
【操作步骤】 1.样品的测定 取3支试管，按下表程序操作.
混匀后，波长600nm，对照管调零，读取吸 光度，在标准曲线上查出相应的胆红素浓度。
2.标准曲线制作
取5支试管，分别编号，然后按表稀释胆红 素储存液配制胆红素标准液。
混匀(不可产生气泡)，按总胆红素测定 法操作。每一浓度作3个平行管，并分 别做标准对照管，用各自的标准对照 管调零，读取标准管的吸光度。配制 标准液用的溶剂血清中尚有少量胆红 素，同样测定后得一吸光度值。每个 标准管的吸光度值均应减去此吸光度， 然后与相应胆红素浓度绘制标准曲线
• (2) 比值40%～60% 肝细胞性黄疸。 • (3) 比值＞60% 阻塞性黄疸。 • 但以上几类黄疸，尤其是(2)、(3)类之间有
重叠。
Ⅱ定胆总红胆d素红oi氧素n化和g酶结法合测胆
红素
【原理】
胆红素呈黄色，在450nm附近有最大吸收峰。胆红素 氧化酶(BOD)催化胆红素氧化，随着胆红素被氧化， A450nm下降，下降程度与胆红素被氧化的量相关。 在pH8.0条件下，未结合胆红素及结合胆红素均被氧 化，因而检测450nm吸光度的下降值可反映总胆红素 含量；加入SDS及胆酸钠等阴离子表面活性剂可促进 其氧化。
在pH3.7～4.5缓冲液中，BOD催化单葡萄糖醛酸胆红 素(mBc)、双葡萄糖醛酸胆红素(dBc)及大部分δ胆红 素氧化，非结合胆红素(Bu)在此pH条件下不被氧化。 用配制于人血清中的二牛磺酸胆红素 (ditaurobilirubin，DTB)作标准品，检测此条件下 450nm吸光度的下降值可反映结合胆红素的含量。
【检验原理】
总胆红素在pH3.0附近，在钒 酸盐和表面活性剂存在下，可以被 氧化成胆绿素。与此同时，胆红素 特有的黄色也随之消失。测定胆红 素氧化前后吸光度的差，可以计算 出样品中总胆红素的浓度。
• 【试剂】 1．咖啡因-苯甲酸钠试剂 2．碱性酒石酸钠溶液 3．72.5mmol/L亚硝酸钠溶液 4．28.9mmol/L对氨基苯磺酸溶液 5．重氮试剂 6．5.0g/L叠氮钠溶液。 7．胆红素标准液
总胆红素和结合胆红素测定分别按表标准管进行。取4支试 管，标明标准空白管，测定空白管，标准管和测定管。
加入BOD工作液后立即混匀，置37C水浴5min， 用分光光度计，在450nm波长，去离子水调零， 读取各管吸光度(A)。用于对照管的比色杯与非 对照管的比色杯不得混用。
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【参考范围】 血清总胆红素：5.1～19μmol/L(0.3～1.1mg/dl)； 血清结合胆红素：1.7～6.8μmol/L(0.1～0.4mg/dl)。
【临床意义】
1．血清总胆红素测定的意义
• (1) 有无黄疸及黄疸程度的鉴别。
• (2) 肝细胞损害程度和预后的判断 胆红素浓度明显升高 反映有严重的肝细胞损害。但某些疾病如胆汁淤积型肝炎 时，尽管肝细胞受累较轻，血清胆红素却可升高。
血清总胆红素及结 合胆红素测定
Ⅰ 重氮反应法测 定总胆红素和结合 胆红素• 【实验源自理】 血清中结合胆红素可直接与重氮试
剂反应，产生偶氮胆红素；非结合胆红 素须有加速剂咖啡因-苯甲酸钠-醋酸钠 作用，其分子内氢键破坏后才能与重氮 试剂反应，也产生偶氮胆红素。本法重 氮反应pH6.5，最后加入碱性酒石酸钠 使紫色偶氮胆红素(吸收峰530nm)转变 成蓝色偶氮胆红素，在600nm波长比色， 使检测灵敏度提高。