人类对苯硫脲尝味能力的遗传分析

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基于PCR-RFLP技术的苯硫脲尝味的群体遗传学分析

基于PCR-RFLP技术的苯硫脲尝味的群体遗传学分析

基于PCR-RFLP技术的苯硫脲尝味的群体遗传学分析王晓博;杨丽【摘要】为测定苯硫脲尝味基因的表现型以及基因型,采用阈值法测定120名大学生对苯硫脲的尝味敏感性,采用PCR-RFLP技术在分子水平上测定PTC尝味的基因型予以验证.结果显示,120名调查对象的基因型与表现型基本一致.经验证,该群体处于遗传平衡,味盲基因频率为0.3415,味盲率为11.67%,男女生味盲率分别为15%和10%,二者比较差别无统计学意义.由于实验对象来自不同的地区,又属于不同的民族,通过计算得出PTC味盲与民族和地理位置有关.【期刊名称】《哈尔滨师范大学自然科学学报》【年(卷),期】2015(031)004【总页数】5页(P97-101)【关键词】苯硫脲尝味敏感性;味盲率;基因频率;PCR-RFLP【作者】王晓博;杨丽【作者单位】内蒙古大学;内蒙古大学【正文语种】中文【中图分类】O342+.30 引言苯硫脲(phenylthiocarbamide,PTC)是一种白色结晶状化合物,由于含有N-C=S基团,呈苦涩味[1].人类对苯硫脲的尝味能力具有显著的遗传学特征[1],人 PTC苦味的尝味能力由7号染色体上(7q35-7q36)的一种苦味味觉感受器基因TAS2R38决定,该等位基因符合孟德尔遗传性状,属于常染色体不完全显性遗传,可以采用阈值法测定苯硫脲的尝味敏感性[2-4].绝大多数尝味者与味盲者的区别在于三处单核苷酸多态性(single nucleotide polymorphisms,SNPs).味盲者的PTC编码区有五个限制性内切酶Fnu4H1的识别位点(识别序列5'-GC↓NGC–3'),如果是尝味者,则其第785位SNP恰好形成了一个额外的Fnu4H1识别位点(GCTGC).因此可以利用这个SNP造成的限制性位点多态性,设计引物,克隆该基因,酶切电泳确定并验证基因型[5].1 调查对象与实验材料1.1 调查对象受试者为在校大学生,年龄为20~23岁,共120人,其中男生40人,女生80人.1.2 实验材料1.2.1 基因型检测材料受试者用灭菌牙签刮取口腔上皮细胞,用于提取目的基因;PCR引物委托上海生工生物技术有限公司合成,预期扩增产物303bp;上游引物:hPTC Forward5’-aactggcagaataaagatctcaatttat-3’下游引物:hPTC Reverse5’-aacacaaaccatcacccctatttt-3’1.2.2 试剂和工具酶苯硫脲 (PTC)结晶,dNTPs,Tris碱,Na2EDTA·2H2O,蛋白酶K,溴化乙锭,琼脂糖,100 bp DNA ladder Marker,灭菌超纯水等,Taq DNA聚合酶,限制性内切酶Fnu4H1等.1.3 方法1.3.1 试剂的配制称取苯硫脲结晶与超纯水制成浓度梯度依次为 1/1500、1/3000、1/6000、1/12000、1/24000、1/48000、 1/96000、 1/192000、 1/384000、1/768000、1/1536000、1/3072000、1/6144000 的14种PTC溶液,标号1~14,过滤灭菌;另取蒸馏水作为第15号液.1.3.2 PTC 尝味能力的测定用滴管滴3~4滴14号液于受试者舌根部,让其尝味,之后用蒸馏水做同样试验;受试者若不能准确鉴别两种溶液的味道,则用13号溶液重复试验,(按浓度递增以此类推)直至能明确鉴别出PTC的苦味为止;当受试者鉴别出某一号溶液时,用此号溶液重复尝味3次,若结果相同时,则记录此时的浓度等级号,若受试者直到1号液仍尝不出苦味,则其尝味浓度等级定为<1号.1.3.3 人口腔上皮细胞总DNA的提取在1.5 mL灭菌离心管中加入200 μL缓冲液Chelex;受试者用无菌牙签轻刮口腔腮内侧,刮下来的细胞在缓冲液中漂洗;加2 μL蛋白酶K,盖盖颠倒混匀,56℃水浴30 min;冷却室温,涡旋振荡器涡旋振荡混匀10 s;离心机13200 rmp瞬时离心10 s;沸水浴中煮沸8 min;涡旋振荡器涡旋振荡混匀20 s,离心机13200 rpm离心3 min;基因组DNA于4℃保存备用.1.3.4 PCR扩增PTC基因片段及检测PCR产物4℃保存备用.将PTC基因PCR扩增产物电泳检测,在凝胶成像系统中拍照.1.3.5 PTC基因PCR产物酶切及电泳检测将PTC基因PCR产物37℃恒温Fnu4H1酶切3h或过夜,酶切产物4℃保存备用.分别依次加入 100 bp DNA ladder Marker对照,10 μL PCR产物对照,电泳50 min;凝胶EB染色后,放入凝胶成像系统中拍照.表1 120名学生PTC尝味能力测试结果浓度等级性别男女合计地域内蒙古区内内蒙古区外合计≤1156516 2 1 0 1 1 0 1 3 0 0 0 0 0 0 4 0 0 0 0 0 0 5 1 2 3 3 0 36 3 1 4 4 0 47 15 16 31 9 22 318 39 12 6 6 12 9 13 36 49 33 16 49 10 3 69 7 2 9 11 0 4 4 3 1 4 12 0 0 0 0 0 0 13 0 1 1 1 0 1 14 0 0 0 0 0 0 15 0 0 0 00 0合计40 80 120 72 48 1202 结果与分析2.1 PTC尝味能力分布120名学生PTC尝味阈值统计结果见表1,图1、图2为PTC尝味能力分布图.从图中可以看出,PTC尝味能力呈双峰分布,且双峰性十分明显,双峰间的谷底是6号溶液处,故确定第6号液为味盲界限.不能尝出6号溶液及以上(<6)者为味盲,共检出 14人,味盲率为11.67%,其中不能尝出1号溶液的6人,占全部味盲总数的42.86%,峰值在<1位置;能尝出6~14号浓度的为尝味者,共106人,占88.33%,阈值集中在7~9号浓度范围内,峰值在9号处.尝味者中以7号至10号为尝味者杂合体,检出101人;11~14号为纯合体,检出5人.尝味者平均尝味阈值(±SD)为7.900±1.6886.图1 PTC尝味能力测试结果(按性别划分)图2 PTC尝味能力测试结果(按地域划分)2.2 性别与PTC尝味能力的关系苯硫脲味盲基因存在于7号常染色体上,因此从理论上讲,男、女味盲率应该没有显著差异,但文献报道,女性味盲率高于男性[6-7].在收集的资料中,从表1可以看出,40名男生中,尝味者34人,平均阈值为7.5500±1.0720;味盲者6人,占15%;80位女生中,尝味者72人,平均阈值为8.075±2.2460;味盲者 8 人,占 10%.女生味盲率(10%)较男生味盲率(15%)偏低,此现象的原因可能与男女两性舌部的解剖学差异相关,平均而言,女性比男性具有更多的蕈状味蕾、有更多的味孔,所以女性与男性相比对PTC苦味更加敏感[8-9].此外,男女尝味者平均阈值的差异,经 t检验,t=1.28 <2.5,无显著性差异.男女味盲率的差异经χ2检验,P>0.05,也无显著意义.这说明,PTC味盲与性别的关系不大.2.3 不同民族PTC尝味能力的测定研究发现人类苯硫腺尝味多态性有种族及民族差异,国内曾报告过一些少数民族的群体资料[10],不同民族人群甚至同一民族在不同地区对PTC的尝味能力不同[11].笔者检测的120人中有蒙古族15人,女生14人,男生仅1人,PTC尝味能力分布域为7~10号液,分别为1,2,10,2人,平均阈值为8.8667±0.7180;味盲率为 0.汉族有105人,男生39人,女生66人.PTC尝味能力分布在1,2,5,6,7,8,9,10,11,13,分别为6,1,3,4,30,10,39,7,4,1 人,平均阈值为7.7619 ±2.2362.味盲率为13.33%,经 t检验,t=3.52 >2.5,平均阈值有显著性差异.味盲率差异极显著.由此初步可知,蒙古族和汉族PTC 尝味能力有差别.笔者认为蒙古族起源的非均一性和历史上蒙、汉族长期的基因交流,可能是导致这种情况的重要原因[12].但由于蒙古族样本容量太小,因此统计结果的可靠性有待进一步确认.2.4 地理位置与PTC味盲的关系据肖春杰[13]等报道,味盲基因在我国分布有明显规律,即华南地区味盲基因频率最低,而西北地区,尤其新疆北部地区的味盲基因频率最高,其差异幅度相当大.PTC尝味能力在不同地理位置分布见表1.120名大学生中,内蒙古籍学生(区内)有72人,味盲者13人,味盲率18.06%;省外的学生有48人,检出味盲者1人,味盲率2.08%;区内和区外的味盲率有显著的差异性,由于区外的同学均为东部,而内蒙古地处西部,因此,基本说明PTC味盲与地理位置有一定的关系,由于所取的样本容量太小,不能够有力的说明东部地区味盲率要远比西部地区低.2.5 群体的甚因频率和基因型频率由表型判断,群体共120人,基因型为TT的5人,Tt的为101人,tt的为14人.则群体的基因型频率为:TT的频率为:P2=5/120×100%=4.17%Tt的频率为:2pq=101/120×100%=84.17%tt的频率为:q2=14/120 ×100%=11.66%由此,T基因的基因频率为:P=f(T)=f(TT)+1/2f(Tt)=4.17%+84.17%/2=46.255%,t基因的基因频率为:q=1-P=1-46.255%=53.745%.根据Hardy-Weinberg公式计算出隐性基因t的频率为T基因的基因频率为p=1-q=1-34.15%=65.85%.χ2值为 =0.17,自由度 df=1,当 p=0.05,查表得χ2=3.84 >0.17,统计学认为在 5%显著水平上差异不显著,观察数与理论数无明显差异,即证明本群体处于遗传平衡,且味盲基因频率为34.15%,与郑连斌[14]等测定的内蒙古蒙、汉两族的PTC味盲基因频率接近,但略微偏高,但低于庄振西[15]等测定的蒙古族、汉族和朝鲜族青少年的味盲基因频率,更低于白人的基因频率.2.6 PTC酶切电泳检测图谱分析对照DNA ladder Marker的指示条带位置,查看PCR产物和酶切产物的泳道中各有几条带.PCR产物预期只有一条约300 bp的带.酶切产物中如果只有一条与PCR产物同样位置的带,说明是tt纯合体(303 bp);如果只有两条带,一条暗淡,在前方较远处(64 bp),另一条明亮比PCR产物带稍靠前(238 bp),说明是TT纯合体;如果有三条带,一条明亮、与PCR产物位置相同,另一条比PCR产物带稍靠前,还有一条暗淡、在前方较远处,则说明是Tt杂合体.下面仅展示部分PCR产物和酶切产物的电泳结果(如图3所示),来验证前文PTC尝味的结果.所有对象的基因型都得到PCR-RFLP的验证,与由表型得到的结果基本一致.图3 PCR产物(左)和酶切产物(右)的电泳结果3 小结该调查群体中,味盲基因(t)频率为0.3415,味盲率为11.67%,比我国平均味盲率8.28%高[16-17],男女生味盲率分别为 15% 和 10%,二者比较差别无统计学意义,这说明,PTC味盲与性别的关系不大.但由于实验对象来自不同的地区,又属于不同的民族,通过计算得出PTC味盲与民族和地理位置有关.所有对象的基因型都得到PCR-RFLP的验证,与由表型得到的结果基本一致,这就排除了由尝味错误所产生的偶然误差,使结果更可靠.参考文献[1]沈海娥,陈晶,赵杰,等.河北省汉族大学生苯硫脲尝味能力测定与分析[J].河北联合大学学报:医学版,2013,03:303-304.[2]Bernd Bufe,Paul A.S.Breslinet al.The Molecular Basis of Individual Differences in Phenylthiocarbamide and Propylthiouracil Bitterness Perception[J].Current Biology,2005:154.[3]Guo SW,Shen FM et al.Threshold distributions of phenylthiocarbamide(PTC)in the Chinese population.[J].Annals of the New York Academy of Sciences,1999:855.[4]Akcasu A,Ozalp E.Distribution of taste thresholds for phenylthiocarbamide among different age groups in Turkey [J].Pahlavi medical journal,1977:83.[5]Borum Sagong,Jae Woong Baeet al.Multiplex minisequencing screening for PTC genotype associated with bitter taste perception[J].Molecular Biology Reports,2014:413.[6]Filiptsova I A,Timoshyna,et al.The population structure of Ukrainein relation to the phenylthiocarbamide sensitivity[J].Egyptian Journal of Medical Human Genetics,2014.[7]Grunwarl P,Herman C.Distribution of taste sensitivity forphenylthiocarbamide in Yugoslavia.[J].Nature,1962:194.[8]陈建国,张亮,沈福民,等.味觉生理与味觉行为[J].中国行为医学科学,1998(3):76-78.[9]Guo Sunwei,Danielle R.Reed.The genetics of phenylthiocarbamide perception[J].Annals of Human Biology,2001:282.[10]徐玖瑾,毛钟荣,李绍武,等.中国不同民族中苯硫脲味盲基因频率的研究[J].遗传学报,1982(4):308-314.[11]赵淑娟,庞有志,杨又兵,等.苯硫脲(PTC)味盲基因频率的测定与分析[J].河南科技大学学报:医学版,2005(2):97-98.[12]马慰国,李静宜,周德华,等.1476例回族苯硫脲味盲频率的比较分析[J].遗传,1987(5):34-35.[13]肖春杰,Cavalli-Sforza L L,EMinch,等.中国人群的等位基因地理分布图[J].遗传学报,2000(1):1-6.[14]郑连斌,陆舜华,王双喜,等.内蒙古蒙、汉民族PTC味盲基因频率[J].遗传,1991(4):34.[15]王惠孚,王贵琛,庄振西,等.500例汉族青少年PTC尝味能力测定[J].锦州医学院学报,1980(3):20-23.[16]刘继云,杨春玫,孙建永,等.1016名学生PTC尝味能力基因频率的调查[J].张家口医学院学报,2001(1):55-56.[17]Prodi D A,Drayna Det al.Bitter taste study in a sardinian genetic isolate supports the association of phenylthiocarbamide sensitivity to the TAS2R38 bitter receptor gene.[J].Chemical Senses,2004:298.。

实验七 人类血型与PTC尝味能力

实验七 人类血型与PTC尝味能力

tt
具体步骤
X² 检验
提出假设:本班级人群的PTC尝味能力分布符合 Hardy-Weinberg平衡。建立检验水准α=0.05。 完善表格:填入实际观察值→计算预期理论值
基因型个体数 实际观察值(O) 预期理论值(E) X²=∑(O-E) ² /E TT p2×N Tt 2pq ×N tt q2×N
3
PTC尝味能力的鉴定
实验原理:
PTC(苯硫脲)是一种白色结晶物质,有苦 涩味,对人无毒副作用。人对苯硫脲的尝味 能力属于不完全显性遗传,由一对等位基因 T和t 控制。
实验方法步骤
①3种不同浓度的PTC溶液: 1/500 000 1/50 000 1/25 000 按浓度由低到高进行品尝! ②确定并记录基因型: 1/500 000: TT 1/50 000 : Tt 1/25 00 : tt (味盲,是一类完全正常的人群)
制,那么在自由确定了3个数据4、2、5后,最后一个数只 能是9。所以自由度等于3。
任何统计量的自由度=n-限制条件的个数
基因型个体数
实际观察值(O) 预期理论值(E)
TT
Tt
tt
如何确定本表格的自由度?
自由度=(表型数量-1)-1 = 2-1 = 1
X2界值表

结论推出方法
当p>α(0.05)时,不拒绝检验假设。即所检测的两组人 群(平衡人群与待测人群)之间的差异由偶然因素造成的可 能性(p)>0.05,即两组人群无本质性差异,不拒绝假设。 待测人群是平衡人群(PTC尝味能力分布在本班级 人群中达到了遗传平衡)。 当 p≤α(0.05) 时,拒绝假设。即所检测的两组人群 ( 平衡 人群与待测人群 ) 之间的差异是由偶然因素造成的可能性 (p)<0.05,由必然因素所致的可能性大,两组人群有本质 差异,拒绝检验假设。

PTC尝味实验

PTC尝味实验

PTC尝味实验
PTC(苯硫脲)是一种人工合成的化合物,不同的人对其溶液的苦味有不同的尝味能力。

这种尝味能力是由一对等位基因(T、t)所决定的遗传性状。

基中T对t为不完全显性。

正常尝味者的基因型为TT,能尝出1/750 000~1/6 000 000 mol/L的PTC溶液的苦味;具有Tt基因型的人尝味能力较低,只能尝出1/480 000~1/380 000 mol/L 的PTC溶液的苦味;而基因型tt的人只能尝出1/24 000 mol/L的PTC 溶液的苦味,遗传学上称其为PTC味盲。

【溶液配制】
称取PTC结晶1.3g,加蒸馏水1000mL,置室温下1~2d即可完全溶解,期间应不断摇晃加以加快溶解过程。

由此配成的溶液浓度为1/750 mol/L,称为母液(1号液),2~14号液均由1号液稀释而成。

【实验步骤】
1、让受试者坐于椅子上,仰头张口,用滴管滴5~10滴14号液于受试者的舌根部,让受试者徐徐咽下品味,然后用蒸馏水做同样的试验。

2、询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道。

若不能鉴别蜮鉴别不准,则依次用13号、12号溶液重复试验,直至能明确鉴别出PTC 的苦味为至。

3、当受试者鉴别出来某1号溶液时,应当用此号溶液重复品尝3次,3次结果相同时,才是可靠的。

4、测定时,应将PTC溶液与蒸馏水反复交替给受试者,以免由于受试者的猜想及其他心理作用影响结果的准确性。

【实验结果】
根据受试者最初觉察苦味溶液的编号,而查出相应的基因型:tt基因型的阈值范围为1~6号;
Tt基因型的阈值范围为7~10号;
TT基因型的阈值范围为11~14号。

人体一些单基因性状遗传分析

人体一些单基因性状遗传分析

人体一些单基因性状遗传分析单基因性状是指受一对等位基因控制的性状。

单基因性状的遗传方式可分为:常染色体显性遗传(AD)、常染色体隐性遗传(AR)和伴性遗传(SL)3大类。

伴性遗传又可分为:X伴性显性遗传(XD)、X伴性隐性遗传(XR)和Y伴性遗传。

下面分析一些完全显性的人体单基因性状的遗传方式供参考。

1 人体形态性状的遗传1.1 头形指成年人的头形,头横幅与前后之比例(横幅/前后)> 0.80的为短头。

俗称“扁头”,为AD。

比例<0.80者为长头,是AR。

1.2 发旋在头顶靠后方的中线处有一螺纹即发旋。

螺纹处头发纹路有两种方式:①右旋,即顺时针方向,是AD。

②左旋。

即逆时针方向,是AR。

1.3头发卷发是AD,直发是AR。

1.4头发颜色黑发是AD,金发是AR。

1.5前额发际着生头发区域的边缘即发际。

前额发际有两种情况:①前额发际向脑门突出一三角形发突,即AD。

②前额发际平齐的为AR(图1)。

先天性卵巢发育不全症患者后发际低,是临床诊断标志之一。

1.6眼睑俗称“眼皮”。

双眼皮是AD,单眼皮是AR。

1.7蒙古褶亦称“内眦皱襞”。

即上眼皮在眼内角向下延伸形成的皮肤皱褶,此褶不同程度地遮盖着泪阜。

有蒙古褶为AD,无蒙古褶为AR。

蒙古褶是大部分蒙古人种(亦称黄色人种)的特征。

非洲南部的科萨人这种特征也颇明显(图2)。

1.8眼色即虹膜的颜色。

褐色眼或棕色眼是AD,蓝色眼或黑色眼是AR。

1.9睫毛长睫毛为AD,短睫毛为AR。

1.10耳垂有耳垂,即耳垂下悬,与头连接处向上凹陷,为AD。

无耳垂,即耳轮一直向下延续到头部,为AR(图3.①)。

1.11达尔文氏结节人类耳轮边缘后上部有一个小结节,称达尔文氏结节,又称耳轮结节。

一般认为这个突起和猴类耳壳的耳尖相当。

有这个结节为AD,没有为AR。

但有的人仅一个耳有此特征,有的个体具显性基因,但由于外显率低,类似隐性表现型。

也有人认为达尔文氏结节与鼻尖厚度是连锁遗传(图3.②)。

苯硫脲(PTC)尝味能力与人体体表性状诸指标间关系的探讨

苯硫脲(PTC)尝味能力与人体体表性状诸指标间关系的探讨

作者: 赖荣兴;罗兴华;龚惠兰;刘家骏;雷桂成;薛方亮;黄美好
作者机构: 广州体育学院;广东省体校
出版物刊名: 广州体育学院学报
页码: 42-46页
主题词: 人体体表;单基因性状;尝味者;性状发育;多基因性状;多基因遗传性状;苯硫脲;环境因素;运动员选材;优秀运动员
摘要: <正> 人体体表性状如身高、体重、体脂肪、下肢长等是运动员选材的重要指标。

但上述这些性状为多基因遗传性状,在发育过程中,往往受环境因素的影响。

而人类另一些性状如PTC尝味能力、ABO血型等则是单基因性状,环境因素的影响较小,性状发育比较稳定。

为此,人们期望通过研究多基因性状与单基因性状的关系,从单基因性状来预测多基因性状的发育状况,为预测运动员今后的发育、选拔优秀运动员,提供较为可靠的依据。

作者近年来对PTC尝味能力与人体体表性状诸指标间关系进行了探讨。

现将情况总结报导如下。

遗传学实验指导

遗传学实验指导

《遗传学》实验学习指导《遗传学》是生命科学中的中心学科。

同时也是一门实践性很强的学科。

它是指导育种工作的理论基础,在传统育种、转基因育种、人体基因产物的产业化生产、各种传染性疾病病原菌的遗传分析研究及疫苗的生产、人类遗传病的基因治疗等人类面临的难题中发挥着巨大作用。

对于现代从事生命科学的人,学习和掌握遗传学基本实验方法是十分必要和有益的。

一实验要求:(一)实验前:预习实验内容,了解实验原理、实验目的,逐点分析实验操作过程,对每一个细节进行深刻的理解,不仅要知道实验该如何操作,而且要知道实验为什么要这样做,弄清实验操作过程中需要注意的细节,做到心中有数,以提高实验成功的可能性。

(二)实验操作过程中:一丝不苟,认真操作每一个环节,对实验现象和实验数据进行认真的观察记录。

(三)实验后:对实验结果和数据进行及时总结整理。

结合所学的理论对实验结果进行分析,写出实验报告。

对成功的实验可以提出改进的方法或建议。

对于不成功的实验要分析失败的原因。

(四)强调动手能力的培养:在实验分组上,多数实验是以1人为组,单独操作。

对学生实验成绩的评定上,包括实验操作。

二实验教材及学时(一)实验教材:以《遗传学实验》刘祖洞江绍慧编为主,根据理论课所学内容,也采用了其它教材的个别实验。

如:《遗传学手册》第三章“遗传学教学实验”的内容。

(二)实验总学时:30三实验内容及注意事项:(一)实验内容:见下表:(二)实验目的意义及注意事项1 植物有丝分裂的观察目的:观察染色体在有丝分裂中的动态变化过程,识别有丝分裂各个时期特点,加深对有丝分裂遗传学意义的理解。

掌握观察植物根尖有丝分裂的压片方法。

注意事项:(1)根尖解离时间适合;(2)取材部位一定要准确,只有分生区的细胞才有分裂相(部位准);(3)取材料要少,有利于着色和细胞分散。

2 染色体的核型分析目的:学习植物染色体核型分析的过程,掌握植物染色体组型分析的方法。

注意事项:(1)核型分析的关键需要较多的染色体分散好、形态好的细胞,因此,要求根尖的预处理要好,保证有较多的中期分裂相;(2)根尖的预处理应根据不同的药物,注意预处理药物的浓度、温度和时间;(3)制片时,细胞尽可能分散,压片时用力均匀,勿搓动;(4)测量数据尽可能接近染色体的实际长度;3 减数分裂装片的制片与观察目的:(1)观察染色体在减数分裂中的行为和变化过程,识别减数分裂各个时期特点,加深对减数分裂遗传学意义的理解;(2)掌握观察植物减数分裂的制片技术。

PTC实验报告

PTC实验报告

实验十一人群中P.T.C味盲基因频率的分析一、实验目的:通过对人体P.T.C (苯硫脲)的味觉调查,练习计算基因频率与基因型频率并加深对基因平衡定律及选择对改变基因频率影响的理解。

二、实验原理:人体对P.T.C (苯硫脲—Phenyl thiocarbamlde)尝味的能力是由一对等位基因(T/t)所决定的遗传性状,T对t为不完全显性。

苯硫脲是一种白色结晶状有机化合物,有(N=C=S)硫酰胺基而带苦味。

在人群中味觉正常者(TT)能尝出的浓度为1/750000—1/6000000的P.T.C溶液中的苦味;杂合子(Tt)只能尝出1/48000—1/380000的P.T.C溶液的苦味;基因型tt的人,只能尝出低于1/24000 P.T.C溶液的苦味,甚至对P.T.C的结晶物也尝不出苦味来,这类人在遗传学上被称为味盲。

根据基因平衡规律,在人群中味觉基因(T/t)的频率和基因型频率是保持平衡状态的而且始终保持不变。

三、实验材料及方法(一) P.T.C溶液的配制:原液:取P.T.C结晶1.3g,加蒸馏水100ml,时时摇晃,在室温(20℃左右)1—2日即完全溶解。

(二)将配制好的14种(见附表) P.T.C溶液,分装于消毒好的滴瓶中。

(三)若干毫升蒸馏水和洗净的滴管。

(四)操作要求:1.受试者坐在椅子上,仰头张嘴,实验者用滴管先吸取第14号P.T.C溶液,滴5—10滴于舌根部,令受试者徐徐咽下品味,然后再用滴管自盛有蒸馏水的滴瓶中吸取蒸馏水,滴5—10滴于舌根部,令受试者徐徐咽下品味。

2.询问受试者能否鉴别此种溶液的味道。

如若不能鉴别或鉴别不准确(如认为P.T.C溶液味道是酸、咸、辣或说不出的其他药味)则再用稍浓的13号溶液重复尝试,……直至能说明P.T.C的苦味为止。

3.当受试者鉴别某一种溶液时,应当再用此号溶液重复尝味三次,三次结果相同,才算可靠。

4.测定过程中应将P .T.C 溶液与蒸馏水反复交替使用,以免由于受试者的猜想及其心理作用影响结果的准确性。

实验七:苯硫脲 尝味

实验七:苯硫脲  尝味
7
(2)操作步骤
①让受试者坐在椅子上,仰头张嘴,用取无菌棉签
或滴管滴2~5滴14号液于舌根部,让受试者徐徐下
咽品味,并用蒸馏水作对照试验。 ②询问受试者能否鉴别此两种溶液的味道,若不能鉴别 或不能断定,则依次用13号、12号……溶液重复试验(应 注意与蒸馏水交替测试),直到明确鉴别出PTC的苦味为 止。
12
三、 常规性状的调查
1.卷舌性状调查 部分人能够卷舌: 舌的两侧能够在 口腔中向上卷成 槽行,甚至卷成 筒状。卷舌着受 显性基因T控制。
图2 卷 舌 1、有卷舌 2、无卷舌
13
2. 眼睑性状调查:人群中的
眼睑可以分为单重眼睑(单眼 皮)和双重眼睑(双眼皮)两 种性状;一般认为双眼皮是受 显性基因控制,位显性性状; 单眼皮为隐性性状。
1、有美人尖 2、无美人尖
16
5.发式和发旋的调查:人群中发式有直 发和卷发之分,其中直发为隐性性状, 东方人多是此性状;卷发属于显性性状。 人群中的发旋螺纹方向受遗传因素控制, 顺时针方向为显性性状,逆时针为隐性 性状。
17
6.拇指端关节外展的调查:人群中来自些人的拇 指的最后一节能够弯向桡侧,与拇指垂直轴线 呈60度,该性状为纯合隐性性状。
ptcptc溶液浓度溶液浓度基因型基因型表型表型11750000750000tttt纯合尝味者纯合尝味者11400004000011500000500000tttt杂合尝味者杂合尝味者112400024000ttttptc溶液浓度个体基因型与个体表型的关系人类对ptc尝味能力属于不完全显性遗传半显性遗传而且已知纯合体味盲tt容易患结节性甲状腺肿因此可以把ptc的尝味能力作为一种辅助性诊断指标
实 验 :苯硫脲 PTC尝味 (ph实e验nylthiocarbamide,PTC)

人群中PTC

人群中PTC

实验分析与讨论
经卡方检测,群体是否处于平衡状态,若不 平衡,为什么?
实验步骤
1、受测者从低浓度的14号溶液依次尝味。用滴管向 受测者舌根部滴5-6滴溶液,然后记录受测者第一 次尝到苦味时的溶液等级号。 2、对尝味结果报告不确切或模棱两可者,重复进 行测试,直至认为可靠后才记录其溶液等级号。
实验结果
1. 统计全班各血型人数所占比例。 2. 归纳全班同学的尝味结果,估计计算群体的 基因频率,进一步估算群体的基因型频率,并做 χ2检验,检验群体是否处于平衡状态。
人群中PTC 味盲基因频率的分析
实验目的
1、了解人类中的部分遗传性状。 2、掌握人群中PTC味盲基因频率的分析方法,加
深对苯基硫代碳酰二胺(PTC),是 一种白色结晶状化合物,由于含有硫酰胺基而具苦 涩味。
PTC尝味能力是一个遗传性状,受单基因控制, 在不同人群中对该物质的尝味能力不同。利用这一 原理,将PTC配制成各种浓度的溶液,由低浓度到 高浓度逐步测试学生的尝味能力,由此可区分出味 盲(隐性纯合体)、高度敏感(显性纯合体)和介 于二者之间的人(杂合体)。据此可对人群中味盲 基因的频率进行分析。
材料和方法
称取克的苯硫脲,依下表配制苯硫脲溶液:
1统122利度据P用 12PP归据2PPP2用P2P据2归1苯1据据利度归利度苯22归P、、、、、、、、、、、、、、TTTTTTTTT计用敏此滴纳此滴此纳硫此此用敏纳用敏硫纳CCCCCCCCC受 受 对 掌 了 掌 掌对 掌掌 了 了 对 掌尝 尝 尝 尝 尝 尝 尝 尝 尝全 这 感 可 管全 可 管 可 全 脲 可 可 这 感 全 这 感 脲 全测测尝握解握握 尝握 握解解尝握味味味味味味味味味班一(对向 班对向对班,对对一(班一(,班者者味人人人人 味人 人人人味人能能能能能能能能能各原显人受 同人受人同又人人原显同原显又同从从结群类群群 结群 群类类结群力力力力力力力力力血理性群测 学群测群学称群群理性学理性称学低低果中中中中 果中 中中中果中是是是是是是是是是型,纯中者 的中者中的苯中中,纯的,纯苯的浓浓报的报的的报PPPPPP一一一一一一一一一人将合味舌 尝味舌味尝基味味将合尝将合基尝TTTTTT度度告部告部部告CCCCCC个个个个个个个个个数体盲根 味盲根盲味硫盲盲体味体硫味PPP味味味 味 味味的的不分不分分不TTT遗遗遗遗遗遗遗遗遗所)基部 结基部基结代基基)结)代结CCC盲 盲 盲盲盲 盲确遗确遗遗确11传传传传传传传传传配 配 配占和因滴果因滴因果碳因因和果和碳果44基基基 基 基基切传切传传切号号性性性性性性性性性制制制比介的,的的,酰的的介,介酰,55因因因 因 因因或性或性性或溶溶--66状状状状状状状状状成成成例于频估频频估二频频于估于二估滴 滴频频频 频 频频模状模状状模液液,,,,,,,,,各各各。二率计率率计胺率率二计二胺计溶 溶率率率 率 率率棱。棱。。棱依依受受受受受受受受受种种种者进计进进计(进进者计者(计液 液的的的 的 的的两两两次次单单单单单单单单单浓浓浓之行算行行算行行之算之算PP, ,分分分 分 分分可可可尝尝TT基基基基基基基基基度度度间分群分分群分分间群间群CC然 然析析析 析 析析者者者味味因因因因因因因因因的)的的)的析体析析体析析的体的体后 后方方方 方 方方,,,。。控控控控控控控控控溶溶溶,,人。的。。的。。人的人的记 记法法法 法 法法重重重制制制制制制制制制液液液是是(基基(基(基录 录,,, , ,,复复复,,,,,,,,,,,,一一杂因因杂因杂因受 受加加加 加 加加进进进在在在在在在在在在由由由种种合频频合频合频测 测深深深 深 深深行行行不不不不不不不不不低低低白白体率率体率体率者 者对对对 对 对对测测测同同同同同同同同同浓浓浓色色),,),),第 第群群群 群 群群试试试人人人人人人人人人度度度结结。进进。进。进一 一体体体 体 体体,,,群群群群群群群群群到到到晶晶一一一一次 次遗遗遗 遗 遗遗直直直中中中中中中中中中高高高状状步步步步尝 尝传传传 传 传传至至至对对对对对对对对对浓浓浓化化估估估估到 到学学学 学 学学认认认该该该该该该该该该度度度合合算算算算苦 苦中中中 中 中中为为为物物物物物物物物物逐逐逐物物群群群群味 味遗遗遗 遗 遗遗可可可质质质质质质质质质步步步,,体体体体时 时传传传 传 传传靠靠靠的的的的的的的的的测测测由由的的的的的 的平平平 平 平平后后后尝尝尝尝尝尝尝尝尝试试试于于基基基基溶 溶衡衡衡 衡 衡衡才才才味味味味味味味味味学学学含含因因因因液 液定定定 定 定定记记记能能能能能能能能能生生生有有型型型型等 等律律律 律 律律录录录力力力力力力力力力的的的硫硫频频频频级 级的的的 的 的的其其其不不不不不不不不不尝尝尝酰酰率率率率号 号认认认 认 认认溶溶溶同同同同同同同同同味味味胺胺,,,,。 。识识识 识 识识液液液。。。。。。。。。能能能基基并并并并。。。 。 。。等等等力力力而而做做做做级级级,,,具具χχχχ2222号号号由由由苦苦检检检检。 。 。此此此涩 涩验验验验可可可味味,,,,区区区。。检检检检分分分验验验验出出出群群群群味味味体体体体盲盲盲是是是是(((否否否否隐隐隐处处处处性性性于于于于纯纯纯平平平平合合合衡衡衡衡体体体状状状状)))态态态态、、、。。。。高高高

PTC

PTC

•题目:人群中PTC味盲基因频率的分析陈倩倩(交流生)1186271403131,摘要;通过实验掌握人群中PTC味盲基因频率的分析方法,加深对群体遗传学中遗传平衡定律的认识。

2.引言苯硫脲(phenythiocarbamide , PTC) 是一种白色结晶状化合物,其结构由于有N - C = S 基团(硫化酰胺基)而呈苦味对人无毒,在不同人群中对该物质的尝味能力不同。

这种尝味能力是由一对等位基因(T.t)所决定其中T对t为不完全显性。

基因型为TT,能尝出1/6000000—1/750000的PTC的苦味;Tt基因型,能尝出1/480000—1/380000溶液的苦味,基因型为tt,能尝出1/24000以上浓度PTC的苦味。

极个别体甚至对PTC的结晶也尝不出,这类个体在遗传学上称为PTC味盲。

在 7q染色体上,三个单核苷酸等位多态性AVI (无偿味能力) AAV PAV (有偿味能力)PTC 尝味能力的调查在研究人类群体遗传学、种族学方面有其科学价值;亦可作为双生子、亲子鉴定的简便易行的方法之一。

PTC 测定在医学领域尤让人感兴趣的是可用于研究某些疾病与尝味能力的关联,为疾病预防提供资料。

例如结节性甲状腺肿、先天愚型等患者中味盲者较多,而食管癌、胃癌等患者中味盲者较少。

若能应用该技术进行深入研究,可能会有新的发现。

将PTC配制成各种浓度的溶液,由低浓度到高浓度逐步测试学生的尝味能力,由此可区分出味盲(隐性纯合体)、高度敏感(显性纯合体)和介于二者之间的人(杂合体)。

据此可对人群中味盲基因的频率进行分析。

3.实验材料3.1实验材料配制苯硫脲溶液,对半稀释成14种浓度。

3.2实验方法1,PTC液的制取:取PTC粉末0.65g,加蒸馏水500ml,在室温下使其溶解,原叶浓度为1/750,原液为1号液,去原液100ml,用蒸馏水稀释一倍为2号液,取2号液100ml用蒸馏水稀释一倍成三号液,依次类推,直至14号液,14号液为1/6000000。

人群中PTC味盲基因频率的分析

人群中PTC味盲基因频率的分析

人群中PTC味盲基因频率的分析摘要:通过本次实验,掌握人群中PTC味盲基因频率的分析方法,加深对遗传学中遗传平衡定律的认识。

实验在班级内采取尝苯硫脲味道的方式进行,通过对味道敏感的不同确定出同学的基因型,初步估测人群中PTC味盲基因频率。

通过实验测出本次调查群体为平衡群体。

关键词:PTC味盲基因1.前言苯硫脲(phenythiocarbamide , PTC) 是一种白色结晶状化合物,其结构由于有N - C = S 基团(硫化酰胺基)而呈苦味对人无毒,在不同人群中对该物质的尝味能力不同。

2.实验2.1实验目的(1)提高对味盲基因频率的分析,了解群体基因频率测算的一般方法;(2)加深理解遗传平衡定律,了解改变遗传平衡的因素。

2.2实验原理苯硫脲(phenylthiourea)又称苯基硫代碳酰二胺(PTC,phenylthiocarbamide)是一种由尿素人工合成的白色晶状化合物,因分子结构苯环上带有硫代酰胺基(N-C=S)而有苦味。

1931-1932年Fox首先发现某些人对PTC有苦味感(尝味者、敏感者),而有些人则无苦味感(味盲者),从而将人类对PTC尝味分为两类。

但味盲者对不含硫代酰胺基的苦味物(如苦味酸等)还是有苦味的感觉。

1932年Blakeslee对PTC苦味敏感的家系进行了调查,证实人类对PTC的尝味能力是一种遗传性状。

人类对PTC尝味浓度阈值方面的差异树单基因遗传,随后的家系和双生子研究支持了这一观点,基因(T-t)位于7号染色体上,味盲者为隐性基因纯合体(tt),而尝味者是显性基因的纯合体(TT)或杂合体(Tt),遗传方式为不完全显性遗传(Bartoshuk et al,1994;Reed et al,1995)。

正常品味者的基因型是TT,能尝出1/750,000mol/l~1/6,000,000mol/l的PTC溶液的苦味;具有Tt基因型的人品尝能力较低,只能尝出1/48,000mol/l~1/380,000mol/l的PTC溶液的苦味;而tt基因型的人品尝能力最低,只能尝出1/24,000mol/l以上浓度的PTC溶液的苦味,个别人甚至对PTC结晶的苦味也品尝不出来,在遗传学上被成为PTC味盲。

苯硫脲尝味的遗传学调查

苯硫脲尝味的遗传学调查

苯硫脲尝味的遗传学调查【摘要】:苯硫脲(phenylthiocarbamide,PTC)是硫脲的苯基衍生物,为白色结晶粉末,因含有硫代酰胺基(N-C=S)官能团而有苦涩味。

人群中根据可以在PTC不同浓度范围内尝到苦涩味的能力即PTC尝味能力,分为尝味者和味盲者。

PTC尝味能力是受单基因控制的孟德尔遗传性状,是由位于7号染色体上(7q35-7q36)的一种苦味味觉感受器基因TAS2R38决定的,属于常染色体不完全显性遗传。

所以本次试验调查利用不同人的基因型对PTC 尝味浓度范围的不同进行表型检测和利用PCR技术进行PTC尝味基因型检测两条途径来对参与本次试验学生进行遗传学分析。

Abstract:phenylthiocarbamide (PTC) is the phenylthiourea derivatives, as a white crystalline powder, it contains glucosinolates amide (N - C = S) functional groups and have an indication. The crowd according to different concentration range can be in PTC taste an indication of the PTC taste ability, divided into taste and taste blindness. The PTC taste ability is controlled by single gene of Mendelian genetics,which is located on chromosome 7 (7 q35 q36) of a bitter taste receptor gene TAS2R38, belongs to the euchromosome incomplete dominant inheritance. So the experiment investigation use different people of different genotypes of PTC taste concentration range by PCR technology is used to detect the phenotype and PTC taste genotype testing two ways for students to participate in the test for genetic analysis.【关键字】:苯硫脲PTC尝味基因型检测PCR前言:该实验旨在调查参与实验同学的苯硫脲尝味能力和其对应的基因型是否一致,以及该基因型在总体中所占比例,验证该基因是否符合孟德尔遗传定律。

湖北省襄阳地区大学生苯硫脲尝味能力测定与分析

湖北省襄阳地区大学生苯硫脲尝味能力测定与分析

中国卫生产业苯硫脲(PTC)是一种人工合成的白色晶体化合物,因其含有N-C=S 基而有苦涩味。

早年Fox 发现不同人对PTC 溶液的尝味能力不同,部分人甚至无苦味感[1],从而将人类分为PTC 尝味者与PTC 味盲者两类。

人们在尝味阈值上的差异是由一对位于7号染色体上的等位基因(T、t)控制[2],属于单基因遗传,其中T 对t 为不完全显性遗传[3]。

进行PTC 尝味基因的测定,在医学领域上,对分析某些疾病的遗传相关性有着重要作用[4]。

例如,味盲者中患结节性甲状腺肿、呆小症等疾病较多[5],原发性青光眼、抑郁症等疾病也与PTC 尝味能力相关[6],并且PTC尝味能力具有民族、地域、个体的差异[7]。

因此,在临床上,常把人们对PTC 溶液的尝味能力作为一种辅助性诊断指标。

该文将采用阈值法对该校479名大学生进行PTC 尝味能力进行测试和分析,用Hardy-Weinberg 定律计算其基因频率,并对不同性别的PTC 尝味进行测定分析,为人类遗传学及民族起源的研究提供基本数据。

1材料及方法1.1实验材料1.1.1实验对象湖北文理学院医学院479名学生,男180名,女299名。

受调查者身体健康,无残疾,年龄19~21周岁。

1.1.2实验药品苯硫脲(PTC)1.1.3实验器材电子天平,电热恒温水温箱及实验相关仪器设备。

1.2实验方法1.2.1溶液配制用电子天平称取1.3g PTC 结晶药品,用蒸馏水将其制成0.13%的原液,将原液置于1000mL 容量瓶中,在60℃水浴中加热1h 使其完全溶解,然后将其中500mL 倒至一个干净的500mL 容量瓶中,设为1号液;将剩下500mL 原液的1000mL 容量瓶中再加入蒸馏水至1000mL,不断摇晃,充分混合。

再将500mL 倒入另一干净的500mL 容量瓶中,设为2号液;这样依次成倍稀释,共配成14种浓度(mol/L)的PTC 溶液。

1.2.2测试步骤测试时,让受试者坐下,仰头张口伸舌。

医学遗传学实验五人类遗传性状分析

医学遗传学实验五人类遗传性状分析

实验原理
2、人类ABO血型系统的遗传
存在于人类红细胞表面的抗原性质是ABO血型划分的基础,这 种抗原决定于9q34上的一对复等位基因:IA、IB和i,且IA和IB 对i为显性,IA和IB为共显性。IA决定红细胞表面有抗原A,IB决 定红细胞表面有抗原B,i决定红细胞表面无抗原A和B。根据红 细胞表面是否含有抗原和所含抗原类型的不同,将人类的ABO血 型系统分为A型、B型、AB型和O型四种。此外,在不同血型人 的血清中所含抗体不同,即A型血清中含有抗B抗体,B型血清中 含有抗A抗体,O型血清中同时含有两种抗体,而AB型血清中那 么不含有这两种抗体。由于在相应的抗原抗体之间会发生凝集反 应,故在输血时对供血、受血者的血型有一定的限制,输血前一 定要进行血型的配型。
实验步骤
1、PTC尝味
1〕取无菌棉签,分别蘸取不同浓度的PTC溶液,自低浓度向高浓 度依次进行尝味。根据本人所感受到苦涩味的最低浓度,确定自 己的表现型和基因型。
2〕统计本实验室全体同学PTC尝味的表现型和基因型,将统计结 果填入下表。
实验室 总人 名称 数
1/750000尝味者 1/50000尝味者(Tt) 1/24000尝味者(tt)
实验原理
本实验通过调查的人类遗传性状,了解这些性状的遗传特性。
1、苯硫脲的味觉感受能力 人类味觉对苯硫脲〔又称苯基硫代碳酰二胺,PTC〕的敏感性由一
对等位基因〔T、t〕控制,属不完全显性遗传。基因型不同的个 体尝出含PTC溶液的浓度有明显的差异。为便于研究,将能尝出 PTC浓度在1/50000以下苦味者称为尝味者,对PTC浓度在 1/24000以上仍感觉无味者称为味盲者。
定时,必须重做。
实验结果
• 1、计算PTC尝味和ABO血型的基因型频率和基因频率。 • 2、根据PTC尝味实验的结果,理解不完全显性遗传的特点。 • 3、掌握ABO血型系统的原理、检测方法、结果分析和血型判定。 • 4、理解ABO血型系统的配型原那么及临床应用意义。2、ABO血型遗传分析

PTC尝味遗传分析实验

PTC尝味遗传分析实验

PTC尝味遗传分析实验一、实验目的1、了解人类一些常见遗传特性及其遗传方式。

2、使同学们大概知道自己的味觉敏感程度。

二、实验原理人类基本味觉有咸、甜、苦、酸等类。

味觉的适宜刺激是溶解在水中的物质,通过味觉能力测试,了解人群中个体差异。

研究味觉察觉阈和识别阈阈值分布规律和群体结构特点。

造成味觉个体差异的原因很多,有年龄、人种、民族、性别及健康状态等。

同一个人在反复辨别中会有30%的差异,与测试溶液的温度及与舌作用的时间、面积有关,但不会产生味觉类型的变化。

味觉差异与遗传有关,1931 年 Dupont公司研究苯硫脲(PTC)时,发现它能引起个体间味觉类型差异明显。

因PTC含有硫代酰胺基,多有苦味。

1931年12月,Blakeslee在新奥尔良市进行苯硫脲味觉调查,2550名自愿受试者结果表明:说苦的人占65.5%,说酸、其它味或没有味的人占34.5%。

不能尝出PTC苦味或高浓度下才尝出苦味的人称PTC味盲者。

人群尝味察觉阈呈双峰分布,识别阈呈三峰分布。

Snyder调查表明PTC味觉由遗传所决定,为常染色体上一对等位基因控制的不完全显性遗传,导致PTC味盲是隐性基因。

可作为群体基因、基因型频率结构研究。

1990年为止,我国已对29个民族进行PTC味觉调查,汉族味盲率9%左右,黎族4.62%,柯尔克孜族42.11%。

各种族特有频率越是接近白种人,味盲率就越高,越是接近有色人种,味盲率就越低。

Coon 1965年报告,白人味盲率在20%~40%,黑人在3%~10%。

三、实验用具药品药品试剂:不同浓度的PTC 、蒸馏水实验用具:多只用于滴溶液的一次性滴管四、实验步骤1、老师负责配制好不同浓度的PTC溶液,并按照浓度阶梯状分布写上编号,备用。

2、受试者实验调查受试者端坐在凳子上,仰头张口,由合作者滴5~6滴溶液于受试者舌根部,徐徐下咽,并询问品出什么味道。

测定从14号液开始,逐次测定至尝出苦味为止,并记下号码。

遗传味觉-苯硫脲尝味能力的分析

遗传味觉-苯硫脲尝味能力的分析

遗传味觉-苯硫脲尝味能力的分析
张美英;王兆娣
【期刊名称】《中国优生与遗传杂志》
【年(卷),期】2001(9)1
【摘要】对常州地区 5 5 9人苯硫脲 (PTC)尝味能力测试结果分析表明 :PTC尝味阈值呈双峰分布 ,味盲峰值在 >1号 (1号相当PTC浓度 1/ 75 0 ) ,尝味峰值在第 9号 ,峰谷为第 3号 ,平均阈值9.44± 0 .0 8,味盲基因频率 0 .30 2 0 ,尝味基因频率0 .6 980 ,某些疾病与尝味能力有关。

【总页数】1页(P116-116)
【关键词】PTC;味盲;基因频率
【作者】张美英;王兆娣
【作者单位】江苏省人口学校
【正文语种】中文
【中图分类】R596
【相关文献】
1.河北省汉族大学生苯硫脲尝味能力测定与分析 [J], 沈海娥;陈晶;赵杰;李明;
2.湖北省襄阳地区大学生苯硫脲尝味能力测定与分析 [J], 王娅;曾繁荣;翟立红
3.安徽地区汉族学生苯硫脲尝味能力的测定与分析 [J], 杨元元
4.基于PCR-RFLP技术的苯硫脲尝味的群体遗传学分析 [J], 王晓博;杨丽
5.苯硫脲尝味能力测定与分析 [J], 邹妙雯;康宇佳;石金磊
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人类对苯硫脲尝味能力的遗传分析
高熹
168615140001
一、实验目的
通过人群中对苯硫脲尝味能力的测试,学习其特殊的试验方法,认识人体对苯硫脲敏感性的遗传特征。

二、实验原理
苯硫脲英文缩写为PTC,是一种白色晶体有刺激性气味的有毒物质,是一种白色结晶状药物,硫脲的苯基衍生物。

由于含有N-C=S基,所以有苦涩味。

主要用作各种族人群的遗传学分析用途,一个人能否尝出苦涩味是由其基因决定的,与所属民族有关。

由于基因表达的不同,不同人对该物质的味觉敏感度不同。

有的人能尝出1/750,000~1/50,000PTC浓度溶液的味道(苦味、苦涩、少数人感到甜味),这些人称为尝味者(AD);有的人只能尝出PTC浓度大于1/24,000溶液的味道,这些人均称为PTC味盲者(AR)。

PTC味盲是隐性遗传,因此如果父母都是苯硫脲味盲,那么子女也必定是味盲。

因此,在DNA的亲子鉴定诞生之前,曾经用苯硫脲尝味试验来作为双胞胎、亲子鉴定的参考资料。

苯硫脲这种物质要么味道非常苦,要么几乎没有任何味道,这主要取决于一个人的遗传情况,但也与生活习惯有一定的关系。

研究显示,吸烟者和长期饮用咖啡或茶的人往往对PTC更不敏感,需要更高浓度的PTC溶液才能尝出苦味。

这意味着,人类能感受出苦味的性质可能最初是出于自身防御的目的,因为自然界中很多苦味物质也往往是有毒的,因此通过辨别出这些物质,可使人类避免受到这些有毒物质的伤害。

PTC含有N-C=S苦味官能团,人类的其受体都为TAS2R38,位于人类7号染色体上。

苯硫脲尝味符合孟德尔遗传规律,尝味由显性基因T决定,味盲由隐性基因纯合子tt所决定。

卷心菜、绿花椰菜及其他十字花科植物也含有类似的硫脲类物质,因此食用的时候,有些人觉得这些菜特别的苦,不喜欢吃此类食物,而有些人则尝不出其中的苦味。

正常尝味者基因型为TT,能尝出1/750,000~1/6,000,000 g/mL PTC液的苦味。

杂合子尝味者基因型为Tt,能尝出1/48,000~1/380,000 g/mL PTC液的苦味。

味盲者基因型为tt,能尝出1/24,000 g/mL 及以上PTC液的苦味。

中国汉族人群中,PTC味盲约占9%。

已知味盲者易患结节性甲状腺肿,因
此可以把PTC的尝味能力作为一种辅助性诊断指标。

苯硫脲味盲者在各种族人中的比例约为:澳洲和新几内亚土著42%,白种人28%,日本人9%,汉族9%,美洲原住民2%。

苯硫脲味盲在新疆各族人群中的比例大致为:柯尔克孜族42%,哈萨克族34%,乌兹别克族30%,维吾尔族28%,塔塔尔族28%,锡伯族20%,汉族9%。

三、实验器材、材料和试剂
广口瓶(装有梯度浓度的苯硫脲溶液)、一次性长塑料滴管。

四、实验步骤
PTC溶液配制方法:PTC粉末0.65g,加蒸馏水500mL,在室温下溶解,其浓度为1/750,记为1号液。

取一号液稀释1倍为2号液,取2号液稀释1倍为3号液,依此类推,直至14号液。

14号液的浓度为1/6*10^-6。

1)将整套(1-14号)PTC溶液按照浓度由低到高依次排开。

2)实验者从最低浓度开始,吸取瓶中PTC溶液,滴在舌根部,仔细品味。

3)从低浓度到高浓度依次品尝,直到感受到溶液的味道“苦”为止,记下最后品尝PTC溶液的序号。

4)统计全班最后品尝PTC溶液的序号。

5)按照序号将结果分为三类,分比为TT纯合(1-6号)、Tt杂合(7-10号)与tt味盲(11-14号)。

五、实验结果及分析
1)全班统计结果TT1人 Tt16人 tt11人
2)基因型频率TT 3.57% Tt 57.14% tt 39.29%
3)基因频率p(T)=32.14% q(t)=67.86%
4)哈迪温伯格平衡时的基因频率p²TT 10.33% 2pqTt 43.62% q²tt 46.05% 通过测得的基因型频率和预测的Hardy-Weinberg平衡的基因型频率进行比较,我们可以发现,全班同学这一群体并不是平衡群体。

由于哈迪温伯格法则有适用条件是理想群体:无穷大,随机交配,没有突变,没有迁移和自然选择。

最可能的原因是选取的样本过小导致结果有较大的偏差。

同时,可以注意到的是,汉族人中PTC味盲为9%,而全班却接近40%,偏差程度很大,不排除同学们尝味不仔细的可能。

由于苦味在舌头根部感受最为灵敏,
可能同学们在滴溶液的时候,没有准确地将PTC溶液滴到舌头的根部,导致过多的“味盲”出现。

当然,也不能排除样本过小的可能性。

实验改进:可以采取书本上使用的双盲法进行PTC溶液尝味试验,可以更好地排除心理等其他因素的影响。

六、注意事项
1)谨防滴管接触受试者的口腔,避免交叉污染,否则应立即更换洁净滴管。

2)PTC溶液本身有一定的毒性,避免吞咽,实验结束后应漱口。

3)为了保证实验结果的准确性,尽量将PTC溶液滴在舌根部位。

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