纯化水微生物限度
001纯化水微生物限度检查法操作规程
001纯化水微生物限度检查法操作规程操作规程：001纯化水微生物限度检查法一、目的和适用范围本操作规程适用于纯化水微生物限度检查法的操作流程。
检查目的是为了评估纯化水中微生物的数量和种类，确保纯化水的质量符合相关法规和标准。
二、设备和试剂1.无菌工作台2.显微镜3.火焰消毒器4.纯化水样品5.温度控制设备6.无菌试剂瓶7.营养基培养物8.细菌计数板三、操作步骤1.检查前准备1.1确保工作区域干净整洁，并进行必要的消毒。
1.2准备所需的设备和试剂。
1.3校验设备的准确性和完整性。
2.样品取样2.1使用无菌容器取样纯化水样品。
2.2尽量避免样品接触到空气。
2.3快速将样品送至检测实验室。
3.样品处理3.1使用无菌器具将样品分配到多个无菌试剂瓶中。
3.2确保样品的稀释比例符合标准要求。
4.培养试验4.1取一定量的样品，将其滴入细菌计数板的每个孔中。
4.2使用无菌移液器将细菌计数板放入孔内的细菌培养基中。
4.3将细菌计数板密封，并标注好样品信息。
4.4将细菌计数板放置于设定好的温度和湿度下进行培养。
4.5培养时间根据实验要求确定。
5.计数和分析5.1培养结束后，取出细菌计数板，使用显微镜在指定区域进行微生物计数。
5.2统计每个孔中微生物的数量，并记录下来。
5.3分析结果，与相关法规和标准进行比较。
5.4如结果符合要求，则纯化水样品通过检查；如结果不符合要求，则需进行进一步处理。
6.结果记录和报告6.1将检查结果记录在检测报告中，包括样品信息、检测日期、微生物数量等。
6.2将报告存档，并按要求进行归档保存。
四、操作注意事项1.操作过程必须保持无菌状态，避免样品的污染。
2.使用的设备和试剂必须保持干净和完整。
3.细菌计数板的培养条件必须按标准要求进行控制。
4.操作人员应熟悉操作流程和相关法规和标准，严格遵守操作规程。
五、操作记录1.操作人员应按要求记录操作流程、设备校验、样品信息等重要数据。
2.操作记录应包括操作日期、操作人员、操作步骤和结果等信息。
纯化水微生物限度标准操作规程
1。
目的：建立一个纯化水微生物限度检测方法的标准操作规程。
2. 适用范围：适用于纯化水的微生物限度检测。
3. 责任者：微生物限度检测人员。
4。
操作规程：4。
1 本操作过程应在无菌环境下进行，操作前用紫外光灯照射30分钟以上进行灭菌。
4.2 将待测纯化水样品、培养基及其他所需用具放入无菌室中。
4.3 纯化水稀释：4。
3.1 取6支已灭菌的试管，分别加入9ml无菌水，并按10—1～10—6的顺序编号.4。
3。
2 用移液枪吸取1ml纯化水样品，注入10-1倍稀释的试管中。
用移液枪吹吸三次，使纯化水样品与无菌水水充分混匀。
4.3。
3 从10-1倍稀释的试管中吸取1ml稀释液，注入10—2倍稀释的试管中，重复第2步的混匀操作。
依次类推，直达完成最后一支试管的稀释.4。
4 涂布平板操作：4。
4.1 将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。
4.4.2 取100μl稀释液，滴加到培养基表面;4。
4.3 将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃尽后,冷却8～10s；4.4。
4 用涂布器将稀释液均匀地涂布在培养基表面。
涂布时可转动培养皿,使涂布均匀.4.4。
5 按上述方法依次将10—1～10-6的稀释液涂布于平板上，每个稀释度的样品涂布两个平板。
4。
5 将涂布好的培养基置于36±0。
5℃培养箱中培养,连续培养3～5天。
4。
6 培养3～5天后对所有培养基进行菌落计数。
纯化水的微生物限度检查方法验证
微生物限度检查方法验证——纯化水的微生物限度检查方法验证验证方案制定人：部门：日期：验证方案审核人：部门：日期：验证方案批准人：部门：日期：1验证目的：当建立纯化水的微生物限度检查法时，应进行细菌、霉菌和酵母菌检查方法的验证，以确认所采用的方法适合于纯化水的细菌、霉菌和酵母菌检查。
2验证方案：照《中国药典》2005版二部附录Ⅺ J 方法。
2.1仪器与试药2.1.2仪器：STV3无菌检查薄膜过滤器（浙江宁海白石药检仪器厂），微孔滤膜（孔径0.45um,直径50mm）。
2.1.3试药：2.1.4培养基：营养琼脂培养基，玫瑰红钠琼脂培养基，营养肉汤培养基。
来源：北京三药科技开发公司生产中国药品生物制品检定所监制2.1.5试液：生理盐水，pH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液。
（均按照《中国药典》2005版二部附录Ⅺ H、J要求配制）2.1.6对照菌株：大肠埃希菌[CMCC(B) 44 102]、金黄色葡萄球菌[CMCC(B) 26 003]、枯草芽孢杆菌[CMCC(B) 63 501]、白色念珠菌[CMCC(F) 98 001]、黑曲霉 [CMCC(F) 98 003]。
来源：广州药物研究中心2.2对照菌液的制备：取大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌的营养琼脂斜面新鲜培养物各1环分别接种于15ml 营养肉汤培养基内，于30～35℃培养18～24小时后，稀释至1：105～1：107，，取1ml注入平皿中，注入约45℃的营养琼脂培养基约15ml，混匀，凝固后置30～35℃培养48h，进行活菌计数。
取白色念珠菌的玫瑰红钠琼脂斜面新鲜培养物1环接种于改良的马丁琼脂培养基内，于25～28℃培养24～48小时后稀释至1：105～1：106，取1ml注入平皿中，注入约45℃的玫瑰红钠琼脂培养基约15ml，混匀，凝固后置25～28℃培养72h，进行活菌计数。
取黑曲霉的玫瑰红钠琼脂新鲜培养物1环接种于改良的马丁琼脂培养基内斜面中，于25～28℃培养5～7天后，用3～5ml0.9%的无菌氯化钠溶液洗脱。
纯化水微生物限度检验记录
生产单位：水系统编号：
取样日期：检验日期：
「微生物限度」（需氧菌总数）：
1.1培养基和设备室温：℃；相对湿度：%RH
A.R2A培养基供应商：配制批号：有效期至：
B.生化培养箱型号：编号：有效期至：
C.立式蒸汽灭菌器型号：编号：有效期至：
D.净化工作台型号：编号：
E.集菌仪型号：编号：
F.滤膜孔径：直径：
1.2供试液的制备
取纯化水10ml，加至50ml已灭菌的纯化水中，混匀，用薄膜过滤器（0.45±0.02um，50MM直径）过滤，减压抽干。
1.3需氧菌总数检查
1.3.1需氧菌总数：取出滤膜，将滤膜放入制备好的R2A培养基平板上，在30～35℃培养5天，计数。
1.3.3阴性对照
1.3.3.1需氧菌阴性对照：取50ml已灭菌的纯化水按供试品同法处理，作为阴性对照。
1.4结果记录
1.4.1需氧菌培养
检验者/日期：校对者/日期：
审核结论：该检验记录原始、真实，内容完整、齐全，书写清晰，所有检测项目全部符合规定。
□是□否审核者/日期：。
纯化水微生物限度
纯化水微生物限度纯化水微生物限度纯净水一直被认为是一种非常纯洁的水，这种水通常经过多道过滤和杀菌处理后制成，免受细菌、病毒和其他污染物的影响。
然而，即使在这种精心处理下，这种水中仍然可能会存在微生物。
因此，对于纯化水流出的微生物含量，需要进行严格的微生物限度检测。
微生物限度测试是指用于检测一种物质或产品中微生物数量的方法。
无论是工业领域中还是生活中，这种测试都是必须的。
毕竟，微生物极易污染食品、药品等领域的产品，从而对人体健康造成风险。
在纯水的生产中，微生物的检测是非常重要的，以确保该纯净水符合消费者的期望，并不会对人体健康造成任何影响。
纯化水中的微生物通常分为条件致病菌和微生物总数两类，严格来说，测试方法也有区别。
一般情况下，微生物限度测试对微生物的检测方法通常分为两类：定量测试和定性测试。
其中，定量测试主要是通过某些方法来确定在一个单位体积的样品中存在的微生物数量。
而定性测试则用于鉴定样品中存在的微生物种类。
在测试中，微生物限度是指许可的最大微生物污染限度。
这个标准是通过广泛的分析研究得出的，考虑到人体健康，通常确保水中微生物的数量达到或低于限度标准。
微生物限制测试方法微生物数量测试是通过微孔过滤或膜过滤的方法实现的。
测试前，先将其他可能影响测试结果的物质从样品中清除，如有机物、重金属等。
同时，也需要确保测试环境无菌，以防止来自其他来源的污染。
有许多方法可以用来测试水中微生物的数量，包括经典培养方法、膜滤法、逆渗透法、带电滤膜法等。
其中，经典培养法基于样品中微生物的数量可以在营养琼脂平板上形成的生长菌的数量来计算微生物的数量。
另外，PCR和荧光定量PCR也是常用的微生物测试方法。
PCR是利用酶处理编码基因组重复的DNA片段，这些片段往往存在于微生物基因组中，从而得出微生物数量。
荧光定量PCR可以通过将DNA序列标记成不同的颜色来来区分不同微生物的种类。
需要注意的是，由于不同的测试方法可能具有不同的检测灵敏度以及检测对象的差异，因此微生物限度的标准也可能会不同，这需要在测试前进行明确定义。
纯化水的检验流程
纯化水的检验流程1.微生物限度检测实验前准备：实验所用的仪器（培养皿和玻璃杯薄膜过滤器所用的三角瓶、各种试管、镊子过滤用的薄膜用纯化水浸泡）高压蒸汽器121℃灭菌15分。
转移到生物实验室放在试验台后打开风机和紫外灯二次灭菌30分。
培养基的准备：玫瑰红钠（用于霉菌和酵母菌培养时间3—5天、23—28℃）、营养琼脂（用于细菌的培养，培养时间18—24小时、温度30—35℃）实验流程：首先取样。
在车间、实验室、每个用水点按序取样250ml每个取样点取样三次、微生物检测应在取样1小时内进行。
或者冷藏4小时内进行。
薄膜过滤法检测，一个样过滤一份，就是200ml的纯化水通过滤膜，（将该滤膜浸泡在纯化水（屈臣氏的蒸馏水）中后灭菌）然后把过滤后的薄膜、分别放入有培养基的平皿中铺平中间不能有气泡，一支放于玫瑰红钠培养基内（用于霉菌和酵母菌培养时间3—5天、23—28℃）一支放于营养琼脂（用于细菌的培养，培养时间18—24小时、温度30—35℃）检测结果判定！以1ml供试品的菌落数报告菌数，供试品菌落数1ml、不得超过100cfu 霉菌和酵母菌1ml不得超过100cfu参照依据：参照《中华人民共和国药典》2010版第二部微生物限度检查及（附录XI J）微生物限度标准和GB/T14233.2医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分生物学试验方法。
纯化水微生物检测报告2.酸碱度：取本品1ml加甲基红2滴不得显示红色，另取本品10ml加溴麝香草酚蓝5滴不得显示蓝色。
3.硝酸盐：取本品5ml放冰浴中冷却，加入10%氯化钾溶液0.4ml与0.1%二苯胺硫酸溶液0.1ml摇匀缓缓的加入（用直管加优级纯硫酸）5ml摇匀（反复颠倒几次）将试管放入50度水浴中15分钟，溶液产生的蓝色，与标准硝酸盐溶液0.3ml、加无硝酸盐的水4.7ml、用同一种方法（指的是摇匀后放入50℃水浴中15分钟）处理后的颜色对照不得更深（0.000006%）4.亚硝酸盐：取本品10ml放置纳试比色管加对氨基本磺酰胺的稀盐酸溶液与盐酸萘乙二胺产生的粉色，与标准亚硝酸盐溶液0.2ml，加无亚硝酸盐的水9.8ml用同一方法处理后的颜色比较不得更深。
纯化水微生物限度检查方法验证方案
纯化水微生物限度检查方法验证方案产品名称：纯化水验证类型：验证部门：质量部目录1、概述2、验证目的3、适用范围4、验证小组成员及职责5、验证项目6、验证内容7、验证总结论8、偏差处理情况9、再验证周期10、结果审批及综合评价11、参考文献验证方案签字表1、概述纯化水作为我公司的一种用于产品生产的原辅料及清洁用水，为保证产品的质量，应对纯化水进行微生物限度检查方法的确认，参照《中国药典》2015年版二部纯化水微生物限度的要求，重新建立微生物限度检查的试验，以确认改产品在该试验条件下所采用的方法适合于该产品的微生物限度检查。
2、验证目的按照《中国药典》2015年版规定对纯化水微生物限度检查采用薄膜过滤法进行试验，在现有检验程序、检测条件及培养条件下，通过试验以确认所采用的方法适合于纯化水需氧菌总数的测定；3、适用范围本验证方案适用于本公司 QC 实验室，对纯化水微生物限度检查方法（薄膜过滤法）适用性的验证。
4、验证小组成员及职责5、验证项目及描述5.1项目：需氧菌总数检查方法的验证5.2 描述取三个不同批号的纯化水用薄膜过滤法检测微生物限度，通过比较试验菌的恢复生长结果评价整个检验方法的准确性、有效性，通过计算回收率来判断检查方法是否有影响，通过验证来确认薄膜过滤法适合于纯化水需氧菌总数的测定。
三次试验中，稀释剂对照回收率应在 50%～200%范围内，试验组回收率也应在 50%～200%范围内。
进行微生物限度检查方法（薄膜过滤法）验证时，所有的平皿和稀释剂都应该严格灭菌消毒、灭菌，确保对试验结果没有影响。
6、验证内容：6.1 人员培训、仪器设备、培养基、菌种及相关文件的确认6.1.1人员培训6.1.2验证用仪器设备的确认6.1.3相关文件确认6.1.4 试验用菌株的确认6.1.5培养基及冲洗液的确认6.2试验步骤6.2.1.菌液的制备取铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌工作用菌种挑取少量培养物接种至10ml胰酪大豆胨液体培养基中，30～35℃培养18～24小时。
纯化水微生物限度检测
纯化水微生物限度检测纯化水微生物限度检测包括了对水中微生物污染程度的评估与监测，其重要性在于确保水的纯度达到合适的标准。
该检测是环境监测中的重要部分，相对于检测其他物质，水质检测需要对多种微生物进行监测。
本文将从纯化水微生物限度检测的必要性、检测方法、影响因素等方面展开分析。
一、纯化水微生物限度检测的必要性纯化水微生物限度检测是确保现代社会得到健康饮用水供应的必要手段。
水是支撑人类生产和生活不可缺少的资源，为了保障水的安全，国际水研究会提出了对水安全的三条标准：化学安全、生物学安全和物理学安全。
其中生物学安全主要是指检测水体中的细菌、病毒、藻类、真菌等微生物是否达到了国家卫生标准水净化处理后的标准要求。
通常情况下，对于自然水源或市政供水，人们都会采用纯水处理技术，除去其中存在的大部分异质物、有机物、无机物和微生物，但这并不意味着此时的水已经完全可供直接饮用或是直接应用于生产和科研实验等领域。
因此，水质检测是必要的，并且其微生物检测部分尤为重要。
二、纯化水微生物限度检测的方法微生物检测主要包括菌落计数法和涂布法等。
菌落计数法是确定水中菌落总数的标准方法，其主要包括直接计数法和滤膜计数法。
直接计数法是指直接将样品涂在平板上，然后通过计算实现细菌数目的统计。
滤膜计数法与直接计数法类似，我们可以先将样品过滤然后直接将过滤膜放在培养基上，然后进行培养，统计出菌落数。
涂布法是将样品涂在培养基上，通过培养时间、培养温度等环境条件来判断样品中有无微生物存在。
当然根据实验需要，也可对微生物进行分离鉴定。
三、影响纯化水微生物限度检测的因素微生物检测在水质检测中占有重要的位置，但同时在微生物检测过程中也有一些因素可能引起检测结果的偏差，例如缺氧、污染源、物种种类等因素将影响样品的真实性。
使用的培养基和培养条件也会影响到微生物的生长情况。
当检测样品来源于管道、水井等地下水源时，还需注意该地区自然生存的微生物种类、菌株以及排放规模等因素。
纯化水微生物限度检查标准操作规程
纯化水微生物限度检查标准操作规程1目的规定纯化水微生物限度检查操作。
2适用范围本文件适用于纯化水微生物限度检查操作。
3职责微生物限度检查操作人员。
4微生物限度检查方法纯化水采用薄膜过滤法进行检查。
滤膜孔径应不大于0.45μm，直径一般为50mm。
5内容5.1设备洁净工作台、恒温培养箱（30~35℃）、恒温水浴锅、电热干燥箱（250~300℃）、高压蒸汽灭菌器（使用时要进行灭菌效果检查并应定期请有关部门检定）。
5.2仪器及器皿5.2.1薄膜过滤器、放大镜、显微镜。
5.2.2玻璃器皿：蓝盖试剂瓶（250ml）、培养皿（90mm）、吸管（l0ml分度0.l）、载玻片、盖玻片。
玻璃器皿用前应洗涤干净无残留抗菌物质。
吸管口上端距0.5cm处塞入约2cm的适宜疏松棉花，置吸管桶内或用牛皮纸包好。
玻璃器皿，均于高压蒸汽121℃灭菌30min，烘干备用。
5.3用具5.3.1大、小橡皮胶头（放于干净带盖的容器中，并应定期用75%乙醇溶液浸泡）。
纯化水微生物限度检查标准操作规程5.3.2无菌衣、帽、口罩、手套（洗净后配套，用牛皮纸包严）灭菌，备用。
也可用一次性无菌衣、帽、口罩、手套。
5.3.3酒精灯、酒精棉球、灭菌剪刀、灭菌镊子、试管架、无菌滤杯、无菌滤膜、打火机、记号笔、接种环、灭菌抹布等。
5.4消毒液5.4.10.1%苯扎溴铵溶液（供洗手、擦拭操作台面用）。
5.4.275%乙醇溶液5.4.33~5%来苏尔溶液5.5培养基R2A琼脂培养基5.5.1灭菌前后应对培养基的pH值进行校验。
5.5.2配制的培养基不应有沉淀，如有沉淀，应于溶化后趁热过滤灭菌后使用。
5.5.3培养基的分装量不得超过容器的2/3，以免灭菌时溢出。
包装时，塞子必须塞紧以免松动或脱落造成染菌。
5.5.4培养基配制后应在2h内灭菌，避免细菌繁殖。
5.5.5灭菌后的培养基在2~8℃处保存备用，放置时间不能过长，以免水分散失及染菌。
已熔化的培养基应一次用完，开启后不宜再用。
纯化水微生物限度3篇
纯化水微生物限度第一篇：纯化水微生物限度的意义及相关标准纯化水作为一种高纯度水，广泛应用于制药、化妆品、食品等领域。
然而，由于其生产工艺的限制以及存储条件的不同，纯化水中可能存在微生物污染，对使用后的产品品质和安全性产生极大影响。
因此，为了确保纯化水质量，需要建立微生物限度标准，对纯化水中的微生物进行检测和控制。
本文就对纯化水微生物限度的意义及相关标准进行探讨。
1. 纯化水微生物限度的意义纯化水微生物限度的建立，可以保证纯化水的质量，把纯化水使用的过程中的风险控制在一定范围内。
其意义如下：（1）保证产品的高质量纯化水广泛应用于制药、化妆品、食品等行业，其质量直接影响到后续产品的质量。
由于微生物的污染会导致产品品质的下降和稳定性的降低，而纯化水微生物限度的建立可以防止这种情况的发生，保证产品的高质量。
（2）营造安全的工作环境对于制药、化妆品等高风险行业，纯化水微生物限度的建立可以在一定程度上降低员工的工作风险和安全隐患，营造安全的工作环境。
（3）切实维护客户利益对于各个行业从业者而言，客户利益是重中之重。
纯化水微生物限度的建立可以保证纯化水的质量，从而维护客户的合法权益。
2. 纯化水微生物限度的检测标准国内外对纯化水微生物限度的检测标准均有详细规定，主要包括药典标准和相关法规及行业标准。
下面分别介绍如下：（1）药典标准《中华人民共和国药典》（2015年版）规定了注射用水、纯化水和蒸馏水等药用水的微生物限度。
其中，注射用水的微生物限度为：总细菌数（TAMC）不超过10 CFU/mL，酵母菌和霉菌数（TYMC）不超过10 CFU/mL；纯化水的微生物限度为：TAMC不超过100 CFU/mL，TYMC不超过10 CFU/mL；蒸馏水的微生物限度为：TAMC不超过100 CFU/mL，TYMC不超过10CFU/mL。
（2）相关法规及行业标准对于纯化水微生物限度的检测标准，国家卫生部于2002年发布了《医疗机构感染管理规定》，规定了医疗机构制备药用水的质量要求及微生物限度，其中，纯化水的微生物限度为TAMC不超过100 CFU/mL，TYMC不超过10 CFU/mL。
纯化水和注射用水微生物限度试验
纯化水和注射用水微生物限度试验1目的测试纯化水和注射用水中的细菌、霉菌和酵母菌的数量。
2测试依据2005版药典。
3测试要求纯化水：细菌、霉菌和酵母菌总数不得超过100cfu/ml。
注射用水；细菌、霉菌和酵母菌总数不得超过10cfu/100ml4工作环境100级洁净条件下局部100级单向流空气区域内，按无菌操作要求进行。
5器具和试剂取水容器、平皿、薄膜过滤器、滤纸、手提消毒锅、镊子。
营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基氯化钠蛋白胨缓冲液。
6取水样在制水装置的储水桶的出水口、回水口和用水终端处分别取样，纯化水各点取100ml，注射用水也分别各取100ml.7过滤、接种和培养用氯化钠蛋白胨缓冲液冲洗滤膜，取纯化水1 ml加氯化钠蛋白胨缓冲液到100ml，混匀后过滤，用镊子取出滤膜，菌面朝上贴于营养琼脂培养基面上，用同法制备滤膜二张，分别贴于玫瑰红钠琼脂培养基和酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基上，细菌培养30℃，48小时，霉菌和酝母菌25℃培养72小时。
注射用水：将三个采样点采取的水样各100ml，分别过滤制备滤膜，菌面朝上分别贴于营养琼脂培养基、玫瑰红钠琼脂培养基、酵母浸出粉胨葡萄糖琼脂培养基上，细菌在30℃培养48小时，霉菌和酵母菌在25℃培养72小时。
8计数和报告用放大镜观察逐片计数，纯化水以每1ml供试品的菌落数为报告数，注射用水以100ml供试品的菌落数为报告数。
PH7.0氯化钠-蛋白胨缓冲液的配制1用途稀释液,冲洗液.2配方蛋白胨1.0g/l ,氯化钠4.3 g/l ,磷酸二氢钾3.5 g/l,磷酸氢二钠7.23 g/l。
3用法取本品质16.2xx,加蒸馏水(PH为6.6)1000ml,加热完全溶解后,校正PH值7.02,滤清、分装、灭菌。
倘若PH值偏差，用,磷酸二氢钾或磷酸氢二钠调节至7.02(灭菌后会降低0.02)。
联系电话。
纯化水微生物限度检查法验证方案
纯化水微生物限度检查法验证方案1. 验证目的：纯化水微生物限度试验采用薄膜过滤法检查。
确认该方法适合于纯化水细菌、霉菌及酵母菌数测定。
2.职责2.1验证委员会：负责验证方案及报告的批准并组织协调验证工作并签发验证证书。
2.2.验证组长2.2.1.负责验证方案的起草2.2.2.负责验证的协调工作，以保证本验证方案的顺利实施。
2.2.3.负责验证报告的审批。
2.2.4.负责发放验证证书。
2.2.5.负责再验证周期的确认。
2．3. 质保部2．3.1.负责验证方案审核2．3.2.负责取样及对样品的检验2．3.3.负责收集验证记录，并加以分析后，起草验证报告。
2．3.4.负责验证数据及结果的审核3. 参照标准：2005版中国药典二部附录XI J微生物限度检查法。
4. 验证项目：细菌、霉菌及酵母菌计数方法的验证。
5. 合格标准：试验组的菌回收率和稀释剂对照组的菌回收率均不得低于70%。
6. 试验材料：6.1. 被验证产品：品名纯化水取样点总出水口洗瓶用水洗涤消毒检验量 5ml6.2. 仪器设备：6.2.1. SYQ/ZDX-35B1型自动座式压力蒸汽灭菌器6.2.2. YOKO-ZX紫外分析暗箱6.2.3. SW-EJ-2FB双人净化工作台6.2.4. 101-2A电热鼓风干燥箱6.2.5.SPX-250B型生化培养箱 (23～28℃)6.2.6.PHW-200S恒温培养箱(35～37℃)6.2.7.CR-50×50×65数显隔水式恒温培养箱(30～35℃) 6.3. 稀释剂： 0.9%无菌氯化钠溶液6.4. 验证用培养基6.5. 验证用菌株：(第3代)7. 菌液制备7.1. 取经35～36℃培养18~24小时的大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、与枯草芽孢杆菌营养肉汤新鲜培养物1ml加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-6~10-7约为50~100cfu∕ml的菌悬液备用。
7.2.取经24～25℃培养24~48小时的白色念珠菌改良马丁液体培养物1ml加入到9ml0.9%无菌氯化钠溶液中，10倍稀释至10-5约为50~100cfu∕ml的菌悬液备用。
2020版药典中关于纯化水和注射水的要求
2020版药典中关于纯化水和注射水的要求2020版药典中关于纯化水和注射水的要求纯化水的要求纯化水在药物生产中具有重要的作用，2020版药典对其要求有以下几点：1.纯度要求：纯化水应当符合国际药典中规定的相关要求，如欧洲药典(EP)、美国药典(USP)等。
2.微生物限度：纯化水应符合微生物限度的要求。
根据药典，纯化水应当不存在大肠杆菌、霉菌、酵母菌等有害微生物。
3.化学指标：纯化水的各项化学指标应按照国家相关标准要求进行测试，包括总溶解固体含量、重金属含量、无机盐和有机杂质含量等。
具体例子如下：•微生物限度的要求：纯化水样品应按照规定的方法进行微生物限度测试，如培养基培养法、细菌总数法等。
测试结果应在规定的范围内，确保纯化水的微生物水平符合要求。
•化学指标的要求：纯化水样品应按照规定的方法进行化学指标测试。
例如，总溶解固体含量可以使用电导率法进行测定；重金属含量可以使用原子吸收光谱法或者电感耦合等离子体发射光谱法进行测定。
注射水的要求注射水是一种应用广泛的药物配制溶剂，2020版药典对其要求有以下几点：1.纯度要求：注射水应当符合国际药典中规定的相关要求，如欧洲药典(EP)、美国药典(USP)等。
2.微生物限度：注射水应符合微生物限度的要求，不得存在大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌等病原微生物。
3.化学指标：注射水的各项化学指标应按照国家相关标准要求进行测试，包括总溶解固体含量、重金属含量、无机盐和有机杂质含量等。
具体例子如下：•微生物限度的要求：注射水样品应按照规定的方法进行微生物限度测试，如微生物计数法、培养方法等。
测试结果应在规定的范围内，确保注射水不含有任何病原微生物。
•化学指标的要求：注射水样品应按照规定的方法进行化学指标测试。
例如，总溶解固体含量可以使用电导率法进行测定；重金属含量可以使用原子吸收光谱法或者电感耦合等离子体发射光谱法进行测定。
以上是2020版药典关于纯化水和注射水的要求的简要介绍，这些要求的实施有助于保证纯化水和注射水的质量和安全性，从而确保药物的有效性和可靠性。
纯化水微生物限度检测
1. 目的
本规程旨在为微生物限度检查提供一个标准化方法。
2. 适用范围
微生物限度实验室
3. 责任者
QC主管生测员
4. 安全注意事项
严格无菌操作，防止微生物污染。
5. 规程
5.1 取样
a．在车间、实验室所有用水点按序取样，标明日期和取样点位置，一个监测点取水3次，一次250mL，送检验室按中国药典2010年版二部标准进行全检。
b．取样前将直接接触样品的容器用75%酒精棉球进行擦拭，采用灭菌后瓶收集样品。
c．取样时，取样人洗手并消毒，取样前用纯化水淋洗检验用取样瓶和瓶塞3次。
灭菌瓶至少取200mL用于微生物检验用水，微生物检验应在取样后的1小时内进行，或将样品冷藏并在4小时内进行检验。
5.2 微生物限度检查
纯化水检验标准微生物限度检查采用平皿法和薄膜过滤法。
5.3 微生物培养
（1）除另有规定，本检查法中细菌培养温度为30-35℃，霉菌、酵母菌培养温度为23-28℃.
（2）一般营养琼脂培养基用于细菌计数，培养18-24h；玫瑰红钠琼脂培养基用于霉菌及酵母菌计数，培养3-5天。
6．结果判断
以1mL供试品的菌落数报告菌数。
供试品细菌数每1ml不得过100cfu；霉菌与酵母菌总数每1ml不得过100cfu。
阴性对照不得有菌落生长。
7. 附表及附录
附录1：纯化水微生物限度检测报告
8. 制定依据
参照《中华人民共和国药典》2010版第二部微生物限度检查及（附录XI J）微生物限度标准，和GB/T14233.2医用输液、输血、注射器具检验方法第二部分生物学试验方法。
附录一
纯化水微生物限度检测报告。
中国药典2020版二部纯化水微生物检查
中国药典2020版二部纯化水微生物检查【原创实用版】目录1.概述2.中国药典 2020 版二部纯化水微生物检查的标准3.微生物检查的方法4.微生物检查的注意事项5.结论正文1.概述纯化水是制药工业中常用的一种水质，其微生物质量对于药品的质量和安全性至关重要。
为了保证纯化水的微生物质量，我国制定了一系列的标准和方法。
本文将介绍中国药典 2020 版二部纯化水微生物检查的相关内容。
2.中国药典 2020 版二部纯化水微生物检查的标准中国药典 2020 版二部对于纯化水的微生物检查有严格的标准。
其中，纯化水的微生物限度要求如下：- 细菌总数：≤10cfu/ml- 霉菌和酵母菌：≤1cfu/ml- 细菌内毒素：≤0.25EU/ml3.微生物检查的方法微生物检查通常包括以下几个步骤：- 采样：在纯化水的生产过程中随机采样，保证样品具有代表性。
- 培养：将样品在适当的培养基中进行培养，以便微生物生长和繁殖。
- 计数：在适当的时间点对培养基中的微生物进行计数，以了解样品中微生物的数量。
- 鉴定：通过显微镜观察和生化试验等方法，对微生物进行鉴定，以确定其种类。
4.微生物检查的注意事项在进行纯化水微生物检查时，应注意以下几点：- 采样时应保证样品的无菌性，避免样品被污染。
- 选择适当的培养基和培养条件，以保证微生物的生长和繁殖。
- 在进行微生物计数时，要保证计数方法的准确性和精度。
- 定期对纯化水微生物检查的设备和方法进行验证，以确保检查结果的可靠性。
5.结论通过对中国药典 2020 版二部纯化水微生物检查的研究，我们可以了解到，我国对于纯化水的微生物质量有着严格的要求。
微生物检查的方法和注意事项也需要我们在实际操作中严格遵守，以保证药品的质量和安全性。
纯化水微生物限度检查方法
纯化水微生物限度检查方法1. 纯化水微生物限度检查方法纯化水是指经过特殊处理后去除了多种杂质和微生物的水，主要用于实验室、制药、电子工业等领域。
为确保纯化水的质量，需要进行微生物限度检查。
以下为纯化水微生物限度检查方法及其详细描述。
2. 样品采集要选择好样品采集点。
在采集前要将取样的操作员的手洗净，然后用70%的酒精或其他消毒剂在取样点上喷洒并擦拭，等待其干燥。
样品可以用无菌的容器，如无菌烧杯或无菌注射器采集。
3. 检查项目常规情况下，对于纯化水的微生物限度检查主要包括大肠杆菌、菌落总数和霉菌的检测。
4. 大肠杆菌检测大肠杆菌是一种重要的致病菌，其检测可以反映样品是否受到粪便污染。
根据GMP规定，1毫升纯化水中的大肠杆菌不应超过10个。
5. 菌落总数检测菌落总数是指在一定条件下，菌落形成的总数。
对纯化水进行菌落总数检测，可以评估其细菌含量及其污染情况。
普遍认为，1毫升纯化水中的细菌菌落总数不应超过100CFU （菌落形成单位）。
6. 霉菌检测霉菌是一种常见的微生物，常常伴随着水污染。
过多的霉菌会对人体健康造成危害。
对于纯化水，检测霉菌可以评估其存在程度和可能的污染源。
GMP规定，1毫升纯化水中的霉菌不应超过10CFU。
7. 检测方法目前，常用的检测方法有培养法、分子生物学方法和流式细胞仪法。
培养法是一种较为传统的方法，通常通过在培养基上进行菌落总数检测，可以获得较为准确的结果。
分子生物学方法则是一种新兴的技术，可以通过检测DNA、RNA或蛋白质，进行微生物的检测。
流式细胞仪则是一种高通量的技术，可以进行密集的细胞计数和分类。
8. 注意事项在进行微生物限度检查时，要特别注意以下几点。
所有的操作应当严格按照GMP要求进行，确保检测的结果准确可靠。
其次要加强检测设备的维护及保养，确保设备的准确性和稳定性。
最后需要注意的是，纯化水的质量与检测方法密切相关，应根据不同领域的需求，选择相应的检测方法和标准。
纯化水微生物限度 (2)
纯化水微生物限度简介纯化水是指经过特殊处理的去除了杂质、溶解性和可溶性有机质、有毒有害物质等的水。
在许多领域，纯化水是必需的，例如药品制造、实验室研究、电子产品制造等。
然而，即使经过纯化的水也可能含有微生物。
微生物是一类生物体，包括细菌、真菌、病毒等。
在纯化水中存在微生物是不可避免的，因为微生物广泛分布于自然环境中。
为了确保纯化水的质量和安全，需要规定纯化水中微生物的限度。
本文将介绍纯化水微生物限度的相关内容。
纯化水微生物限度的重要性纯化水微生物限度的重要性可以从以下几个方面进行说明：1. 确保纯化水的质量纯化水的质量直接影响到各个领域中的生产和实验结果。
微生物的存在可能会对产品质量产生负面影响，例如腐蚀设备、降低药物纯度等。
通过规定微生物的限度，可以保证纯化水质量的可靠性。
2. 保障生产和实验的可靠性在药品制造、实验室研究等领域，微生物的存在可能会对实验结果产生干扰，或者导致生产过程中的异常情况。
为了保障生产和实验的可靠性，需要确定纯化水中微生物的限度。
3. 保护人体健康纯化水在医疗、食品等领域中被广泛应用，直接接触人体。
如果纯化水中含有过多的微生物，可能会对人体健康产生危害。
因此，通过规定微生物的限度，可以保护人体健康。
纯化水微生物限度的标准和方法纯化水微生物限度的标准和方法多样，下面将介绍一些常见的标准和方法。
1. 美国药典（USP）标准美国药典（USP）是一个常用的药品质量标准，在其中也规定了纯化水微生物限度的相关内容。
USP在纯化水微生物限度测试中使用了菌落计数法和限定菌的检验方法。
菌落计数法是一种常规的微生物计数方法，可以测定纯化水中微生物的数量。
限定菌的检验方法则是针对特定的微生物进行检验。
2. 欧洲药典（EP）标准欧洲药典（EP）也对纯化水微生物限度进行了规定。
EP规定了纯化水的微生物限度测试方法，包括总菌落计数、霉菌和酵母菌的计数，以及大肠杆菌和沙门氏菌的检验。
EP还规定了纯化水微生物限度的要求，例如纯化水中不得含有大肠杆菌、沙门氏菌等致病菌。
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纯化水微生物限度
滤膜法微生物检测：
将适当孔径的滤膜放入滤器，过滤样品，由于滤膜的作用而将微生物保留在膜的表面上。
样品中微生物生长抑制剂可在过滤后用无菌水冲洗滤器而除去。
然后，将滤膜放在培养基上培养，营养物和代谢物通过滤膜的微孔进行交换，在滤膜表面上培养出的菌落可以计数，并和样品量相关。
滤膜法的优点：
- 与直接法比较，可以检测大量的样品
- 浓缩效应使微生物检测的准确度提高
- 带有菌落的滤膜，可作为检测的永久记录存档
- 可见的菌落和样品量直接对应，得出定量结果
操作具体一点就是：薄膜过滤法检测，一个样过滤一份，就是200ml的纯化水通过滤膜，将该滤膜浸泡在灭菌好的l生理盐水中，再接种到平皿中，制成10级、100级、1000级稀释倍数的细菌、霉菌和酵母菌稀释培养皿，即可
用平皿法检测纯化水的微生物限度
摘要：目的探讨平皿法检查纯化水微生物限度的可行性。
方法采用《中华人民共和国药典》2005年版二部附录平皿法和薄膜过滤法同时时纯化水进行微生物限度检壹并作出比较。
结果平皿法操作简便，菌落清晰．准确可靠。
结论平皿法检测纯化水微生物限度是可行的，尤其适用药厂、医院开展此项检验。
关键词；纯化水；微生物限度；平皿法；薄膜过滤法
纯化水为蒸馏法、离子交换法、反渗透法或其它适宜的方法制得的供药用的水，不含任何附加剂。
纯化水的优劣，直接关系到药品质量。
《中华人民共和国药典》2005年版规定其微生物限度检查采用薄膜过滤法。
并规定其细菌、霉菌和酵母菌总数每毫升不得过100个。
由于此法操作较繁，滤膜较小(直径只有50mm)，菌落多时清晰度欠佳，影响计数的准确性。
笔者采用平皿法进行比较，该法操作简便，菌落清晰，计数准确，效果较为理想。
1 材料和仪器
1．1 样品来源 19批纯化水系辖区内7家制药厂生产的为微生物限度检查验证用送样检品。
其中用
盐水瓶盛装的12个批次，三角烧瓶盛装的7个批次。
1．2 培养基和仪器设备
1．2．1 培养基：营养琼脂培养基批号050401，玫瑰红钠琼脂培养基批号050202，蛋白胨批号050523均为北京三药科技开发公司生产。
1．2．2 仪器设备：开放式滤器(配以滤膜孔径0．45 m，规格50mm)(上海医药工业研究院)；电动吸引器(上海医疗设备厂)；电热立式压力蒸汽消毒器(浙江绍兴医械总厂)；隔水式恒温培养箱(上海精密实验设备有限公司)；鼓风电热恒温干燥箱(浙江嘉兴电热仪器厂)；生化培养箱(广东医疗仪器厂)。
2 方法
按《中华人民共和国药典》2005年版二部附录微生物限度检查。
2．1 薄膜过滤法每批样品取灭菌薄膜过滤器2 套，每套分别加入样品lml 及pH7．0无菌氯化钠蛋白胨100ml ，经负压抽滤后，分别取出滤膜，菌面朝上，贴于营养琼脂培养基和玫瑰红钠培养基上，前者在35 C培养48h，后者在25 C培养72h，计数菌落。
2．2 平皿法取原液和1：1O供试液各lml 置直径90mm 的无菌平皿中，注入15～20ml 温度不超过45℃溶化的营养琼脂和玫瑰红钠琼脂培养基混匀，凝固，倒置培养，每个稀释级各制备2个平皿。
培养温度，时间同薄膜过滤法。
3 结果
19批样品经二法对比，15批吻合，其细菌数、霉菌及酵母菌总数少于lOO个，符合规定。
其中4批差异较大。
4 讨论
4．1 薄膜过滤法检测纯化水的微生物限度操作比较繁琐，除了过滤器需经灭菌外，负压抽滤的技术也相当重要，压力过大，滤膜易碎，如不抽干，取滤膜时供试液流失，都会影响结果的准确性。
4．2 纯化水的制备达不到完全灭菌，加之有时储存过久或盛器未经灭菌，可能导致染菌较多。
由于薄膜的直径仅50mm，菌落多肘，重叠情况严重，模糊不清，给准确计数带来困难，导致结果判断错误。
4．3 平皿法是药典规定的检查不含抑菌成分且溶于水的供试品的常规微生物限度检查法，具有操作简便，菌落清晰度好等特点，用于纯化水的微生物检查应该在情理之中。
我们认为平皿法尤其适用于药厂和医院制剂室开展对纯化水的微生物限度检查工作，值得提倡。
Ⅴ、回收率的计算：
按如下公式计算试验组的菌回收率：
试验组的平均菌落数-供试品对照组的平均菌落数
试验组的菌回收率= ×100%
菌液组的平均菌落数
Ⅵ、结果判断：在3次独立的平行试验中，阴性对照组不得有菌生长,若试验组的菌回收率均不低于70%，则可照该供试液制备方法和计数法测定该供试品的细菌、霉菌及酵母菌数；若任一次试验中试验组的菌回收率低于70%，应采用培养基稀释法、离心沉淀集菌法、薄膜过滤法、中和法等方法或联合使用这些方法消除供试品的抑菌活性，并重新进行方法验证
庄子云：“人生天地之间，若白驹过隙，忽然而已。
”是呀，春秋置换，日月交替，这从指尖悄然划过的时光，没有一点声响，没有一刻停留，仿佛眨眼的功夫，半生已过。
人活在世上，就像暂时寄宿于尘世，当生命的列车驶到终点，情愿也罢，不情愿也罢，微笑也罢，苦笑也罢，都不得不向生命挥手作别。
我们无法挽住时光的脚步，无法改变人生的宿命。
但我们可以拿起生活的画笔，把自己的人生涂抹成色彩靓丽的颜色。
生命如此短暂，岂容随意挥霍！只有在该辛勤耕耘的时候播洒汗水，一程风雨后，人生的筐篓里才能装满硕果。
就算是烟花划过天空，也要留下短暂的绚烂。
只有让这仅有一次的生命丰盈充实，才不枉来尘世走一遭。
雁过留声，人过留名，这一趟人生旅程，总该留下点儿什么！
生活是柴米油盐的平淡，也是行色匆匆的奔波。
一粥一饭来之不易，一丝一缕物力维艰。
前行的路上，有风也有雨。
有时候，风雨扑面而来，打在脸上，很疼，可是，我们不能向生活低头认输，咬牙抹去脸上的雨水，还有泪水，甩开脚步，接着向前。
我们需要呈现最好的自己给世界，需要许诺最好的生活给家人。
所以，生活再累，不能后退。
即使生活赐予我们一杯不加糖的苦咖啡，皱一皱眉头，也要饮下。