总胆红素(tbil)钒酸盐氧化法

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钒酸盐氧化法与干化学法测定总胆红素的方法学比较

/3卷
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钒酸盐法干化学法预期偏倚相对偏倚
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血清总胆红素(TBIL)—生化检测项目

血清总胆红素（TBIL）
一、检测原理
在PH2.9左右时，钒酸盐可将胆红素氧化成胆绿素，在去污剂和钒酸盐的共同作用下，游离胆红素和结合胆红素均发生氧化，发生氧化后，胆红素在黄光波段的特异性吸光度会出现明显下降，在451或545nm波长处检测胆红素时，胆红素的吸光度降低程度与样品中的总胆红素浓度成正比，而求出总胆红素的浓度。

二、参考区间
血清：5—22umol/L
三、临床意义
1、血清TBIL增高主要见于：病毒性肝炎、中毒性肝炎、肝内或肝外胆道阻塞、溶血性疾病、新生儿生理性溶血等
2、测定血清TBIL和直接胆红素（DBIL）鉴别黄疸类型有较大意义：
①溶血性黄疸：TBIL增高，DBIL正常或稍升高。

②肝细胞性黄疸：TBIL和DBIL均升高。

③阻塞性黄疸：TBIL和DBIL均升高，但以DBIL升高为主。

总胆红素 (钒酸盐氧化法)试剂盒标准操作程序.

总胆红素(钒酸盐氧化法)试剂盒标准操作程序1.摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清样本中总接胆红素的含量。

2.适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清样本中总接胆红素的含量。

3.职责使用AU5811自动生化分析仪进行测定总接胆红素浓度的工作人员要严格按照本SOP程序进行，室负责人监督管理；本SOP的改动，可由任一使用本SOP的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的总接胆红素（钒酸盐氧化法）试剂盒采用的是钒酸盐氧化法。

5.原理pH3.0左右，在起加速剂作用的表面活性剂的条件下，能够增进未结合胆红素的溶解度，样本中的总胆红素被钒酸盐氧化成胆绿素。

与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。

所以通过测定胆红素氧化前后吸光度的变化，就可以计算出样本中的总胆红素的浓度。

−−→胆红素钒酸盐−胆绿素6.仪器AU5811自动生化分析仪7.试剂7.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供7.2试剂瓶内主要成分：R1：枸橼酸盐缓冲液（pH2.6）、表面活性剂；R2：磷酸盐缓冲液、偏钒酸盐7.3试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用科华公司的校准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。

8.2质控品：罗氏公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。

每日在测定前做一次质控加试剂后做一次质控。

该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

8.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。

8.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》8.5室间质评：分别参加河北省室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。

钒酸盐氧化法和亚硝酸钠氧化法测定血清总胆红素的方法比较

钒酸盐氧化法和亚硝酸钠氧化法测定血清总胆红素的方法比较【摘要】目的：对钒酸盐氧化法和亚硝酸钠氧化法测定血清总胆红素进行方法比较。

方法：采用两种方法测定血清总胆红素值，进行比较，同时对两种方法的重复性试验、线性试验、干扰试验以及回收试验进行分析总结。

结果：两种方法有很好的相关性，钒酸盐氧化法和亚硝酸钠氧化法测定总胆红素（TB）批内变异系数分别为低值2.8%、2.0%，高值1.8%、1.3%；批间变异系数低值分别为2.8%、2.5%，高值分别为1.8%、1.4%；平均回收率分别为105%、102%；线性分别达到434.3 μmol/L、500.0 μmol/L；较轻微的溶血、脂浊、维生素C对两种方法测定TB无明显干扰。

结论：亚硝酸钠氧化法与钒酸盐氧化法相比具有较好的重复性和回收率，但对溶血、脂浊、维生素C的抗干扰能力不及钒酸盐氧化法。

【关键词】血清总胆红素；钒酸盐氧化法；亚硝酸钠氧化法1 材料与仪器1.1 试剂：钒酸盐氧化法TB（批号0106113）由四川迈克科技有限责任公司提供，亚硝酸钠氧化法TB（批号R113DGC）由上海蓝怡科技有限公司提供，胆红素标准TB浓度为157 μmol/L（批号R201HGC）由上海蓝怡公司提供。

脂肪乳注射液（C14～24）为华瑞制药有限公司生产，批号为051109001。

维生素C为西南药业有限公司生产，批号为060105002。

1.2 仪器：日立公司生产的H7060全自动生化仪，希森美康公司生产的SF-3000血细胞分析仪。

2 方法与结果2.1 两种方法测定参数：严格按照试剂说明书设定，采用两点终点法检测。

2.2 重复性实验：（1）批内重复性实验：取两份不同病人血清标本混合，分别用钒酸盐氧化法和亚硝酸钠氧化法测定TB，连续重复测定20次，计算变异系数（CV）。

（2）批间重复性实验：取两份不同病人血清标本混合，分装保存后分别用两种方法测定TB，1天测1次，连续测定20天，计算CV。

钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析评判

钒酸盐氧化法测定血清胆红素的分析评判【摘要】目的：对测定胆红素的钒酸盐氧化法进行分析评判。

方式：用钒酸盐氧化法测定胆红素，并对其的周密度、稳固性、灵敏度及干扰因素进行分析。

结果：钒酸盐氧化法测定胆红素的批内、批间CV<%，可信检测范围可达:钒酸盐总胆红素(TBil)684 μmol/L,直接胆红素(DBil)342 μmol/L，回收率达到%～%。

用1∶8肝素抗凝，测定直接胆红素明显降低，P<；1∶10肝素抗凝，测定直接胆红素，有轻度的负干扰。

维生素C≤ g/L时，无干扰，而溶血及脂质对钒酸盐氧化法干扰小。

结论：钒酸盐氧化法应用方便，重复性好，灵敏度高，抗干扰性强。

【关键词】胆红素；钒酸盐氧化法；肝素抗凝1993年日本学者Tokuda发表了血清胆红素的钒酸盐氧化测定法。

随着商品化钒酸盐胆红素氧化法试剂的推行，目前国内用户众多［1］。

本文对其周密度、稳固性、灵敏度及干扰因素进行评判和分析。

1 材料和方式试剂和仪器试剂钒酸盐总胆红素（TBil）试剂盒、直接胆红素（DBil）试剂盒由东瓯生物工程提供，临床用20%英脱利匹特脂肪乳由华瑞制药提供，维生素C由湖北中天爱白药业提供，12 500 U/2 ml肝素注射液由天津市生物化学制药厂提供。

血红蛋白液的制备：取1份约3 ml 肝素钠抗凝血，反复加入生理盐水洗涤，最后加入蒸馏水离心取上清液，用KX21N血细胞分析仪测Hb为100 g/L。

仪器日立7060全自动生化分析仪，Sysmex KX21N血细胞分析仪。

统计学处置计量资料数据以±s表示，采纳配对t查验。

P<具有统计学意义，利用SPSS 软件进行统计分析。

测定原理在pH 3周围，表面活性剂和钒酸作用于血清TBil，使之氧化成胆绿素，使胆红素所特有的黄色减少，由此测定钒酸作用前后450 nm吸光度的转变求出血清中TBil的浓度。

在pH 3周围，当试剂中缺少表面活性剂时，钒酸只与血清中结合胆红素作用，使之氧化成胆绿素，现在测定450 nm吸光度下降值求出血清中DBil 的浓度。

钒酸盐法检测总胆红素(TBIL)干扰1例

钒酸盐法检测总胆红素(TBIL)干扰1例胆红素测定应用最广泛的化学测定方法是根据Ehrlich在1883年建立的重氮反应方法，但其影响因素多，尤其溶血、脂血对其影响更大，且需在使用时临时配制试剂，比较麻烦[1]。

氧化酶法受溶血影响较大，而钒酸盐法弥补了这些缺点，它具有抗溶血、抗黄疸、抗脂血等优点，能够测定总胆红素（TBIL）和直接胆红素（DBIL）；同时该试剂具有良好的稳定性，试剂开瓶稳定性极佳，试剂可室温储藏。

自1993年日本学者Tokuda发表了血清胆红素的钒酸氧化测定方法后，国内众多的文献报道均认为该方法与传统方法（改良J-G法）具有良好的相关性，线性、特异性达到较理想的水平。

最近，笔者在工作中发现一起由于球蛋白异常增高而引起的TBIL（试剂为上海复星长征）检测结果异常，现报告分析如下，以供同行参考。

病例简介：患者女，68岁，以多发性骨髓瘤、肾结石并积水收入我院外骨科住院。

于第二天取空腹静脉血做肝功、肾功、血脂、血糖和电解质检测，最近几天无特殊用药。

静脉血经3000r/min离心后血清呈淡黄色，按操作规程要求在BECKMA COULTER UniCeL DXC 800全自动生化分析仪上进行检测，发现TBIL检测结果异常，结果是380.5umol,与血清颜色严重不符。

为排除检测结果可能存在干扰，采用重氮法在同一仪器重新复检，结果为21.5umol、说明TBIL在检测过程中出现了干扰，导致结果增高。

为观测本例标本在用钒酸盐法检测胆红素的过程中是否存在干扰，在36±1℃的水浴箱内模拟BECKMA COULTER UniCeL DXC 800全自动生化分析仪比色杯内反应过程：取洁净玻璃试管两只，分别加入TBIL试剂R1800uL预温一分钟，时间到加入待检血浆28uL混匀，孵育4分30秒，加入R2400uL混匀，反应液在读数时间内出现乳状混浊，且混浊随着时间延长颗粒变粗。

用其他血浆重复上述步骤，在读数时间内反应液未出现混浊，证明在检测过程中出现干扰，导致检测结果假性增高。

总胆红素钒酸盐氧化法试剂盒标准操作程序

总胆红素(钒酸盐氧化法)试剂盒标准操作程序1.摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清样本中总接胆红素的含量。

2.适用范围程序适用于AU5811自动生化分析仪检测血清样本中总接胆红素的含量。

4.检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的总接胆红素（钒酸盐氧化法）试剂盒采用的是钒酸盐氧化法。

5.原理pH3.0左右，在起加速剂作用的表面活性剂的条件下，能够增进未结合胆红素的溶解度，样本中的总胆红素被钒酸盐氧化成胆绿素。

与此同时，胆红素特有的黄色也随之消失。

所以通过测定胆红素氧化前后吸光度的变化，就可以计算出样本中的总胆红素的浓度。

6.仪器AU5811自动生化分析仪7.试剂1.1试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供1.2试剂瓶内主要成分：R1：枸橼酸盐缓冲液（pH2.6）、表面活性剂；R2：磷酸盐缓冲液、偏钒酸盐1.3试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年2.标准品和质量控制2.1校准程序：使用科华公司的校准品对自动分析仪进行校准。

按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。

2.2质控品：罗氏公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。

每日在测定前做一次质控加试剂后做一次质控。

该质控品为干粉包装，在2-8℃冰箱可稳定到失效期，使用前用5ml去离子水复溶，待质控物充分溶解（大约30分钟）后使用。

2.3质控数据管理：按程序对检验后的质控后结果进行转换，及时质控数据进行分析处理，如出现失控值，应及时分析失控原因，并填写好相关失控记录。

2.4质控判断规则：按《Westgard多规则质控方法测定标准操作程序》2.5室间质评：分别参加河北省室间质评，对回报的室间质评结果按《室间质量评价程序》进行处理。

血清总胆红素重氮盐法和钒酸盐氧化法测定方法的比较

科学研究创新血清总胆红素重氮盐法和钒酸盐氧化法测定方法的比较郭晶晶孟超刘茜（江苏省医疗器械检验所江苏南京210019）摘要：胆红素是血红蛋白的代谢产物，主要涉及肝脏代谢，血清胆红素水平是肝胆疾病的重要诊断指标。

体内的胆红素包括直接胆红素、间接胆红素，二者之和称为总胆红素，临床对胆红素的生化检测有多种方法。

本文使用重氮盐法和钒酸盐法对血清总胆红素进行测定，比较两种方法检测结果的差异。

实验结果发现，两种方法的重复性和准确度均能满足临床要求，钒酸盐法的准确度高于重氮盐法。

关键词：胆红素代谢胆红素测定方法重氮盐法钒酸盐法方法比较中图分类号：R446.1文献标识码：A文章编号：1674-098X(2022)02(a)-0004-03肝脏是人体最大的实质性器官，具有复杂而重要的生理功能，参与代谢是肝脏最主要的功能。

肝脏参与三大营养物质的代谢过程：肝脏可以合成蛋白质，亦可以分解蛋白质。

人体有超过40%的蛋白质是在肝脏合成的，血浆白蛋白则完全由肝脏合成。

肝脏细胞含有蛋白质脱氨酶和转氨酶，从而分解蛋白质，氨进一步转变成尿素排泄。

人体摄入的糖类在肝脏转变为葡萄糖，当血糖浓度升高时，血糖可转变成葡萄糖聚合物以糖原的形式贮存于肝脏；当血糖浓度降低时，肝糖原可以迅速分解成葡萄糖，向人体供能，从而保持血糖的稳定。

当人体摄入的糖类物质较少时，肝脏可以将氨基酸、丙酮酸等非糖类物质转变成肝糖原，以满足机体对葡萄糖的消耗。

肝脏可以合成胆固醇，胆固醇转变成胆汁酸盐，胆汁酸盐使脂肪乳化成微粒，脂肪微粒可被身体吸收。

脂类物质可直接与肝脏中的蛋白质结合成脂蛋白。

肝脏参与维生素的代谢。

一些脂溶性维生素可长期大量储存于肝脏中，如维生素A、维生素D、维生素B12的储存量可满足几个月甚至是一两年的使用。

肝脏中可形成有多种凝血因子，如凝血因子I，同时，肝脏可形成抗凝血因子，如肝素。

由于肝脏的体积大，可以贮存的血量多，因此肝脏也是主要的贮血器官［1］。

总胆红素(TBIL)测定试剂盒(钒酸盐氧化法)产品技术要求lideman

总胆红素（TBIL）测定试剂盒(钒酸盐氧化法)适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中总胆红素的含量。

1.1 规格试剂1（R1）：5×60mL，试剂2（R2）：5×15mL；试剂1（R1）：4×80mL，试剂2（R2）：4×20mL；试剂1（R1）：3×40mL，试剂2（R2）：3×10mL；试剂1（R1）：2×80mL，试剂2（R2）：2×20mL；试剂1（R1）：2×400mL，试剂2（R2）：2×100mL；试剂1（R1）：1×20mL，试剂2（R2）：1×6mL。

1.2 试剂组成表1 试剂组成2.1 外观液体双试剂：R1为无色澄清液体，R2为浅黄绿色澄清液体。

2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。

2.3 空白吸光度在37℃、450 nm波长、1cm光径条件下，试剂空白吸光度应≤0.05 ABS。

2.4 分析灵敏度浓度为100µmol/L时，吸光度变化范围在（0.05-0.2）之间。

2.5 线性范围在[1-680]µmol/L线性范围内，线性相关系数r≥0.995。

在(150–680]µmol/L 范围内的相对偏差≤10%；测定结果[1-150]µmol/L时绝对偏差≤15µmol/L。

2.6 精密度试剂盒测试项目精密度CV≤5%。

2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对偏差应< 6%。

2.8 准确度相对偏差：用参考物质配制一定浓度的溶液作为样本进行检测，其测量结果在（101–340）µmol/L范围内的相对偏差≤10%；在（0-100）µmol/L范围内的绝对偏差≤10µmol/L。

2.9 稳定性原包装试剂，在（2-8）℃下有效期为18个月，取失效期的试剂盒检测其外观、空白吸光度、分析灵敏度、线性范围、精密度和准确度试验结果满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。

胆红素检测原理钒酸盐氧化法

胆红素检测原理钒酸盐氧化法
胆红素是一种重要的生化指标，用于评估肝脏功能和溶血性疾病。

胆红素的检测原理有多种方法，其中钒酸盐氧化法是一种常用
的方法。

钒酸盐氧化法是一种通过氧化反应来检测胆红素含量的方法。

在这个方法中，胆红素与钒酸盐在酸性条件下发生氧化反应，生成
绿色的氧化产物。

这种氧化产物的浓度与胆红素的含量成正比，因
此可以通过测量氧化产物的浓度来间接测定胆红素的含量。

具体来说，钒酸盐氧化法的步骤包括，首先将待测样品与酸性
溶液混合，然后加入钒酸盐溶液。

在酸性条件下，胆红素与钒酸盐
发生氧化反应，生成绿色的氧化产物。

接下来，可以使用分光光度
计等仪器测量氧化产物的吸光度，通过标准曲线来计算胆红素的含量。

钒酸盐氧化法作为一种简便、快速、准确的胆红素检测方法，
被广泛应用于临床实验室和医学研究中。

它不仅可以用于检测肝功
能和溶血性疾病，还可以用于监测黄疸患者的疾病进展和治疗效果。

总的来说，钒酸盐氧化法作为一种胆红素检测原理，为临床诊断和治疗提供了重要的技术支持，为医学研究和临床实践带来了便利和可靠性。

总胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法)产品技术要求2022年

总胆红素测定试剂盒（钒酸盐氧化法）1范围本标准规定了总胆红素测定试剂盒的定义、产品分类、方法原理、要求、检验规则、试验方法、标志、标签、使用说明书、包装、运输和贮存等要求。

本标准适用于由生物化学方法制备的总胆红素测定试剂盒（钒酸盐氧化法）（以下简称试剂盒）质量检定。

本试剂盒用于体外定量检测人血清中总胆红素（TBIL）的含量。

适用于日立7600、雅培C16000、东芝（FR-120/FR-2000）、AU（480/5800）、迈瑞420、西门子2400、贝克曼DXC800全自动生化分析仪器。

2规范性引用文件下列文件中的条款通过本标准的引用而构成为本标准的条款。

凡是注日期的引用文件，其随后所有的修改单（不包括勘误表的内容）或修改版均不适用于本标准，然而，鼓励根据本标准达成协议的各方研究是否可使用这些文件的最新版本。

凡是不注日期的引用文件，其最新版本适用于本标准。

WS/T 124—1999 临床化学体外诊断试剂盒质量检验总则医疗器械产品技术要求编写指导原则3定义本标准采用下列定义：3.1线性范围：是指化学反应中最低检出量与最高测定量之间的范围。

3.2单包装试剂：双试剂单包装由单瓶试剂1（R1）、试剂2（R2）组成。

3.3试剂空白吸光度：是指用蒸馏水调零的空白试剂吸光度。

3.4试剂空白变化率：是指用蒸馏水调零的空白试剂的吸光度在一定时间内的变化。

3.5分析灵敏度：校准曲线的斜率。

3.6批内精密度：是指对同一样品用同一单包装试剂、同一方法在同样条件下多次重复测试，所得各次结果与均值之间的符合程度。

3.7批间精密度：是指用同一份样品，用不同批试剂盒在同样条件进行测试，所得各次结果与均值之间的符合程度。

3.8准确度：是指测试值与理论值（靶值）之间的符合程度。

3.9稳定性：是指试剂盒在规定的贮存条件下、规定的有效期内的质量稳定程度。

4产品分类液体双试剂，由试剂1（R1）、试剂2（R2）组成，其产品规格按用户机型需要而定，具体如下：5方法原理5.1检测原理样本中的总胆红素易被氧化成胆绿素，而一定缓冲体系中间接胆红素不被氧化，通过测 450nm 反应吸光度下降值可求出样本中总胆红素的含量。

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的方法评价马荣红;王晖;秦锦屏【期刊名称】《实验与检验医学》【年(卷),期】2002(020)002【摘要】目的对钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素进行方法学评价.方法采用钒酸盐氧化法测定血清总、直接胆红素,与重氮法测定血清总、直接胆红素进行了比较.结果钒酸盐氧化法(Y)与重氮法(X)相关性良好,相关方程:YTBIL=1.184XTBIL-1.29(r=0.9954),YDBIL=0.982XDBIL+1.43(r=0.9947);总胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.67%、3.02%,平均回收率达98.3%,在0～628μmol/L范围内线性良好.直接胆红素批内、批间平均变异系数分别为1.72%、3.28%,平均回收率达97.6%,在0～229μmol/L范围内线性良好.标本中甘油三酯含量≤5mmol/L、维生素C含量≤0.5g/L时,对钒酸盐氧化法测定总、直接胆红素均无干扰,但对重氮法有明显干扰;血红蛋白对钒酸盐氧化法和重氮法测定总、直接胆红素均产生正干扰.结论钒酸盐氧化法是一种准确、灵敏、特异性较重氮法高的方法,适用于常规自动化测定血清总、直接胆红素,但在抗血红蛋白干扰方面有待改进.【总页数】3页(P93-94,127)【作者】马荣红;王晖;秦锦屏【作者单位】430022,华中科技大学同济医学院附属协和医院,检验科;430022,华中科技大学同济医学院附属协和医院,检验科;430022,华中科技大学同济医学院附属协和医院,检验科【正文语种】中文【中图分类】R446.11+2【相关文献】1.改良化学氧化法测定血清总胆红素、直接胆红素的评价2.生理盐水与人血清做稀释剂对钒酸盐氧化法测定直接胆红素的影响3.钒酸盐氧化法测定总胆红素及直接胆红素的实验评价4.血清总胆红素、直接胆红素的钒酸氧化法测定5.钒酸盐氧化法和亚硝酸钠氧化法测定血清总胆红素的方法比较因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

总胆红素测定试剂盒(钒酸盐氧化法)产品技术要求zhongshengbeikong

总胆红素测定试剂盒（钒酸盐氧化法）适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中总胆红素的浓度。

1.1包装规格液体双剂型试剂1（R1）：60mL×4，试剂2（R2）：15mL×4，校准品：0.5mL×1；试剂1（R1）：80mL×2，试剂2（R2）：20mL×2，校准品：0.5mL×2（1个浓度）；试剂1（R1）：48mL×3，试剂2（R2）：36mL×1，校准品：0.5mL×1。

1.2主要组成成分试剂1（R1）液体：柠檬酸缓冲液（pH 3.0） 100mmol/L表面活性剂试剂2（R2）液体：偏钒酸钠 4mmol/L校准品冻干粉：水溶液基质（1个浓度）胆红素、二牛磺酸胆红素校准品定值范围 150μmol/L～200μmol/L（每批定值,详见值单）2.1 外观试剂盒中各组件的外观应满足：2.1.1试剂1（R1）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

2.1.2试剂2（R2）应为无色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

2.1.3校准品应为浅黄色冻干粉，复溶后应为黄色透明溶液，无杂质、无絮状物，外包装完整无破损。

2.2 净含量液体试剂净含量应不少于标示值。

2.3 试剂空白吸光度在波长450nm（440nm～470nm）（光径1cm）处，试剂空白吸光度（A）应≤0.050。

2.4准确度测定SRM 909，测定结果的相对偏差应不超过±10％。

2.5分析灵敏度对应于浓度为171μmol/L（10.0mg/dL）的T.Bili所产生的吸光度差值（△A）应在0.100～0.400范围内。

2.6重复性重复测试高、低浓度样本，变异系数（CV）应≤5%。

2.7批间差测试高、低浓度样本，批间差（R）应≤5%。

2.8线性范围在[1.71，684]μmol/L范围内，线性相关系数（r）应≥0.990；在（34.2，684]μmol/L，线性相对偏差应不超过±10％；在[1.71，34.2]μmol/L，线性绝对偏差应不超过±3.42μmol/L。

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素的实验观察与讨论

钒酸盐氧化法测定血清总胆红素的实验观察与讨论目前，不少临床实验室在应用钒酸盐氧化法测定血清总胆红素，该方法具有影响因素少，试剂成本低，结果稳定，线性范围宽（0-1026umol/L）等优点，但在实际应用过程中，我们也遇到了一些问题，并通过反复试验找到了相应的改进措施，效果良好，现报道如下：1 材料和方法1.1原理在pH3附近,标本中的总胆红素因表面活性剂和钒酸的作用直接被氧化成胆绿素,此时由于胆红素特有的黄色减少，测定钒酸作用前后的吸光度之差,可直接求出总胆红素的浓度。

1.2仪器：贝克曼LX20生化分析仪1.3试剂上海华氏亚太生物制药有限公司钒酸盐氧化法总胆红素测定试剂盒,液体双试剂(R1: Tris-HCL 缓冲液，表面活性剂；R2:磷酸盐缓冲液化学氧化剂钒酸钠)1.4胆红素标准品(日本和光纯药工业株式会社提供)。

1.5用450nm波长的测试方法与应用630nm波长的测试方法除波长与反应方向不同,其它实验参数均相同。

实验所给予的各样本胆红素值均为抽查病人样本用重氮法测定所得。

X代表测定均值， CV代表变异系数，n代表重复测定次数，胆红素单位为umol/L .2 观察与讨论2.1间接胆红素浓度大量增多的样本的检测。

临床上常遇到由于间接胆红素的大量增多而致总胆红素浓度大幅升高的病例,如蚕豆黄,新生儿溶血症等疾病，血液间接胆红素的比例可高达90%以上,由于间接胆红素的极性基团被掩蔽,在被钒酸氧化前有一个被表面活性剂处理的过程,间接胆红素含量越高,则在较短时间内处理得越不完全,导致第二试剂加入后未被表面活性剂完全处理的间接胆红素不能及时地被钒酸所氧化,单位时间内胆红素的实际反应量减少,在试剂盒设置的反应时间结束时,仍然显示出较高的吸光度,也就是说标本内的胆红素并没有完全参与反应,因此测得结果低于样本的实际浓度,误差幅度则随着间接胆红素在标本中比例的扩大而增加,为此我们采取稀释样本(一般将样本用生理盐水作2-5倍稀释即可),适当延长样本与第一试剂中表面活性剂的作用时间(原300秒改为420秒)。

总胆红素(TBIL) 钒酸盐氧化法

目录1. 检测原理2. 标本采集与处理2.1 受检者的准备2.2 静脉采血2.3 抗凝剂2.4 标本处理3. 试剂3.1 试剂3.2 校准血清3.3 试剂与校准血清的稳定性4. 仪器5. 操作6. 计算7. 操作性能7.1 精密度7.2 准确度7.3 灵敏度7.4 可报告范围7.5 特异性7.6 干扰8. 参考值9. 临床意义附录A: 参数1. 检测原理钒酸盐测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度。

胆红素————胆绿素pH 3.02. 标本采集与处理2.1 受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。

体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。

注意有无应用影响测试项目的药物。

此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。

应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。

体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。

在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：血浆多主张用EDTANa2（1mg/mL）抗凝。

2.4 标本处理：血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂3.1 试剂：本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：3.2 校准血清：使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。

试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。

总胆红素操作程序

总胆红素操作程序1.目的规范总胆红素（TBIL）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。

2．范围本操作规程适用于生化室工作人员、实习人员、进修人员的操作前培训。

3.术语4．测定原理4．1测定方法：钒酸盐法4．2 测定原理：在特定条件下（PH3.0），血清中胆红素与钒酸反应，生成胆绿素，其在450nm 处吸光度的下降与血清中总胆红素含量成正比。

5．标本5．1标本种类：新鲜无溶血血清。

5．2标本采集见生化标本采集程序。

6．试剂6．1试剂来源：和光试剂。

6．1．1组成包装规格：R1 540ml×4 R2 135ml×46．1．2试剂准备试剂为液体双试剂，无需配制,开瓶即可使用。

6．1．3试剂稳定性原装试剂在2～8℃避光保存，稳定期12个月。

试剂开瓶载机2～8℃稳定30天。

新打开试剂不宜与已用过的试剂混合在一起,否则易造成试剂稳定性下降。

7.仪器参数设定AU2700参数设定：和光试剂仪器参数设置具体参见试剂厂家提供的相关仪器的检测参数。

8．校准8．校准：具体参见临床生化校准程序8.1 校准条件：8.1.1仪器光路系统经过光路保养或更换光源等重要部件后。

8.1.2仪器经过大保养后。

8.1.3挪动仪器的安装地点。

8.1.4更换试剂批号。

8.1.5室内质控失控。

8．2 AU2700和光试剂系统的校准：8.2.1 准备：和光配套胆红素校准物.8.2.2 保存和稳定性：原校准品在2～8℃保存至有效期，1ml蒸馏水复溶，复溶后在2～8℃可保存7天。

8.2.3保存位置：低温冰箱-20℃。

8.2.4操作步骤：蓝色样本架的1号位置放蒸馏水；黄色样本架的9号位置放和光配套胆红素定标液→仪器主画面[USER] →[Calibration] →[选择校准项目]→[START]→[YES]。

9．室内质控及失控纠正：见临床生化室内质控程序9．1质控物来源：柏乐液体质控（批号:45612/45613）。

9．2质控物储存条件及准备：-15～-20℃保存至有效期，从低温冰箱取出后室温平衡30分钟。

钒酸盐氧化法测定总胆红素及直接胆红素的实验评价

钒酸盐氧化法测定总胆红素及直接胆红素的实验评价
蒋兴亮;唐中;周京国
【期刊名称】《川北医学院学报》
【年(卷),期】1999(14)2
【摘要】为了解钒酸盐氧化法测定血清胆红素的可行性,进行方法学评价.结果:总胆红素测定平均回收率为100.6%,线性达620μmol/L,批内CV%为2.1%,批间CV 为3.9%,与咖啡因法比较,Y＝0.991x+2.01,t=2.11,P＞0.2,r=0.998.直接胆红素线性达340μmol/L,批内CV 2.3%,批间CV 4.1%与改良Doumas法比
较,r=0.993x+0.99,t=1.47,P＞0.2,r=0.997.轻度乳糜血,Hb 4g/L以下对测定无干扰,试剂至少稳定两个月.结果表明钒酸盐氧化法测定血清胆红素具有灵敏、准确、重复性好等特点,可作为常规法使用.
【总页数】2页(P69-70)
【作者】蒋兴亮;唐中;周京国
【作者单位】川北医学院附属医院检验科,南充,637000;川北医学院附属医院检验科,南充,637000;川北医学院附属医院检验科,南充,637000
【正文语种】中文
【中图分类】R446.1
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5.钒酸盐氧化法和亚硝酸钠氧化法测定血清总胆红素的方法比较 [J], 张勇;马莉因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。

血清胆红素3种测定方法的比较

血清胆红素3种测定方法的比较
陈薇;胡汉宁;贺小玲
【期刊名称】《医学新知杂志》
【年(卷),期】2003(013)002
【摘要】目的选择测定血清胆红素的最佳方法.方法用重氮酸盐法、钒酸盐氧化法、胆红素氧化酶法对血清总胆红素(TBI)和直接胆红素(DBI)分别进行测定并比较.结果3种方法重复性试验批内变异和批间变异分别小于3.0%和5.0%;回收率均小于
5.0%;重氮法和钒酸盐法测定TBI的线性范围为0～700μmol/L,氧化酶法为0～550μmol/L;3种方法测定DBI的线性范围为0～400μmol/L;3种方法测定TBI、DBI,每2种方法之间具有高度相关性.结论钒酸盐法与氧化酶法、重氮酸盐法相比,
测定TBI和DBI具有检测范围大,抗干扰能力强等特点,更适合于临床常规检测.
【总页数】3页(P83-85)
【作者】陈薇;胡汉宁;贺小玲
【作者单位】武汉大学中南医院检验科,武汉,430071;武汉大学中南医院检验科,武汉,430071;武汉大学中南医院检验科,武汉,430071
【正文语种】中文
【中图分类】R446
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