总胆红素(tbil)钒酸盐氧化法

项目总胆红素(TBIL)方法钒酸盐氧化法

目录

1. 检测原理

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备

2.2 静脉采血

2.3 抗凝剂

2.4 标本处理

3. 试剂

3.1 试剂

3.2 校准血清

3.3 试剂与校准血清的稳定性

4. 仪器

5. 操作

6. 计算

7. 操作性能

7.1 精密度

7.2 准确度

7.3 灵敏度

7.4 可报告范围

7.5 特异性

7.6 干扰

8. 参考值

9. 临床意义

附录A: 参数

1. 检测原理

钒酸盐测定钒酸盐作用前后吸光度差异，可求得样品中的直接胆红素的浓度。

胆红素————胆绿素

pH 3.0

2. 标本采集与处理

2.1 受检者的准备：

病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。注意有无应用影响测试项目的药物。此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。

2.2 静脉采血：

除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。

2.3 抗凝剂：

血浆多主张用EDTANa2（1mg/mL）抗凝。

2.4 标本处理：

血标本室温放置30min～45min后离心分离血清或血浆，在两小时内检测完毕；如两小时内不能检测完毕，将离心分离血清或血浆置洁净试管加盖2-8℃保存。

3．试剂

3.1 试剂：

本科使用湖南永和阳光科技有限责任公司TBIL试剂盒，为液体双试剂，各组分如下：

组成浓度

R1：

柠檬酸缓冲液100mM

反应促进剂

表面活性剂

R2：

磷酸缓冲液10mM

偏钒酸钠

3.2 校准血清：

使用湖南永和阳光科技有限责任公司提供的40项校准血清。

校准频次：

空白定标：每日需做试剂空白定标。

全点定标：试剂换批号使用时或质控结果超过规定的2SD范围，需要全点定标。

3.3 试剂与校准血清的稳定性：

原包装试剂储存在2-8℃至标签所示失效日期。试剂开瓶后，在仪器中至少可保存30天。

试剂储存在18-22℃稳定28天，试剂应避免污染。试剂R1、R2颜色为无色，当试剂变色，按照试剂失效处理。

多项校准血清在2-8℃储存至标签所示失效日期，复溶后-20℃保存，可稳定一个月，只可冻融一次，避免反复冻融。参见校准血清说明书。

4．仪器

KONELAB 30型号仪器。

性能：波长450nm，仪器测定吸光度的灵敏度应达到0.001ABS以上。

5．操作

样品为血清或肝素/EDTA抗凝血浆。本法为终点法。参数见后附，附录A。

试剂参数设置、定标操作以及样本检测常规操作，见仪器操作规程。

6．计算

ΔA测定

C = ————×C0

ΔA标准

式中：c——测定总胆红素浓度，μmol/L；

ΔA测定——标本管吸光度；

ΔA标准——标准管吸光度；

C O——校准血清中总胆红素浓度，μmol/L；

7．操作性能

7.1 精密度：

批内CV< 0.67%，批间CV<2.97％。

7.2 准确度：

检测结果的相对不准确度≤±10%。

7.3 灵敏度：

总胆红素浓度为：90μmol/L时，显色吸光度A450nm为0.272～0.332。

7.4 可报告范围：

血清与试剂用量之比为1:25时，测定上限为680μmol /L。

7.5 特异性：

测量值在给定值的90%-110％范围内。

7.6 干扰：

内源性干扰物溶血、脂血、黄疸对测试结果无明显影响。

8．参考值

2.0～20.4μmol /L。

9．临床意义

胆红素是老化的血红细胞中血红蛋白的代谢产物,血液中总胆红素和直接胆红素的含量测定有利于肝病和黄疸病的诊断。

附录A: 参数