血片制作染色和血检质量控制培训
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影响染色效果的因素
血片染色好坏除了与玻片是否清洁，血片 制作质量好坏等有关外，还受到以下几个 因素的影响：
（1）染料溶剂的质量 染料、甲醇和甘油 如果不纯，常使配制的染液偏酸或偏碱而 影响染色效果。因此必须用分析纯的甲醇 和中性甘油，而且在配制时所用的器具必 须干净而无水份。
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影响染色效果的因素
22
影响染色效果的因素
（6）染色用水 染液的稀释用水和染色后冲洗用 水应选择Ph7.0~7.2清洁水，通常使用的新鲜 的蒸馏水或过滤的冷开水，以及自来水、井水、 河水、泉水和雨水等。如果偏酸或偏碱，可用缓 冲蒸馏水调整。染色后发现血膜颜色偏蓝（偏碱） 或偏红（偏酸）时，可用与之相反的酸、碱度水 冲洗血片予以纠正。
成批血片染色：将已固定薄血膜的血片插入染 色缸，倒入2%吉氏染液稀释液（2毫升原液加中性 蒸馏水98毫升稀释均匀即成），同时对厚薄血膜染 色30分钟（如染液不合标准时，得酌情增减染色时 间），然后用清水轻轻将染液冲去，再用清水轻轻冲 洗一次，干净后将血片标本（血膜面朝下）插于晾干 板上，待干镜检。
16
一、血片制作
血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂
呈薄膜状，称薄血膜；一种是血液涂成圆盘，称 厚血膜。薄血膜上的血细胞要求平辅在玻片上面。
发热病人血片
标本片 1
血膜的制作（取血时间）
取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普 查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期 疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
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影响染色效果的因素
（4）染液的稀释浓度 染液的浓度高其着 色就快而深，从而疟原虫寄生红细胞的薛氏 点粗大显著，但颜色常偏碱；染液浓度过低 则染色时间久，颜色偏酸，薛氏点不明显或 消失。
21
影响染色效果的因素
（5）染色时间 染色时间长染色效果好， 反之较差。室温高则着色快，染色时间可 略缩短，气温低可适当延长。因此染色时 间应根据染液的质量、新旧、稀释浓度和 气温而适当增减。
涂2个厚血膜1个薄血膜，以
防血膜脱落而影响检查；
疟疾调查时，每张玻片
可涂制2~3人血膜。
6
血膜的制作
血膜编号 血膜制成后，立即用特种 蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的 号码，以防差错，待薄血膜干后再用 铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号 和受检者的个人编号，依次顺序插入 标本盒内。
7
制作血膜的注意事项
血片的染色 （三）吉氏染液血片染色方法
先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干 后进行染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚 血膜溶脱血红蛋白，然后才进行染色。
单张血片染色：薄血膜经固定干燥后， 用2%吉氏染液稀释液1~2毫升，滴入血片 标本上染色30分钟左右，或用中性蒸馏水1毫 升，加吉氏母液1~2滴，混合均匀后滴入血 片标本上，染色10~20分钟，然后用清水轻 轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。
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血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
注意：蛋白质是二性电解质，当其处于较等电点为酸的溶液中时， 便呈硷的作用，即与酸结合* ，这就说明为何在染液偏酸时， 伊红的着色力强，使红细胞着色鲜艳而淋巴细胞和原虫的胞浆 着色不著；反之，蛋白质在偏硷的溶液中呈酸的作用而中和硷 基，也就说明为何染液偏硷时，红细胞和嗜伊红白细胞的颗粒 等被染成紫兰色。
（2）染液的新旧 新配制的染液因色素尚 未充分溶解，染色力较弱且常呈现偏碱性。 染液存放时间越久，染色力越强。通常在 染液配制1~2周后才使用，盛装染液的瓶 子应加塞盖密。以防吸潮而影响染液质量。
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影响染色效果的因素
（3）染液稀释后使用时间 吉氏和瑞氏染 液的主要成份是美蓝、伊红和由美蓝氧化 产生的天青，三者能在酒精溶液中溶解， 但在水溶液中伊红遇到美蓝和天青即产生 沉淀。因此，必须在稀释染液当时使用， 一般在半小时内染色力最强。
30
三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
因此，为尽可能多地发现病人， 各地把临床初诊为疟疾、疑似 疟疾、发热原因不明和感冒及 其它发热的“四热”病人列为 血检对象。
31
三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
但是，随着疟疾流行程度的降低，“四 热”病人中查出的疟疾病例所占的比例 也发生了变化。上世纪90年代初，在全 国10 省、区发病率稳定在1/万以下地 区开展研究，发现 92.33 %的病例发 生在临床诊断为疟疾、疑似疟疾（包括 来自高疟区流动人口）中（见表）。
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血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：伊红是酸性水溶性钠盐，美兰是碱性 水溶性盐酸盐，当它们各自溶化水中时，就离 解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸 性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、 嗜伊红白血球颗粒等即可结合成不易溶于水的 沈淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰 离子，美兰就与疟原虫、淋巴和大单核细胞的 胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸性蛋白质结合 染成兰色。#
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二、血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染液种类：目前所用的血片染色液，虽然名称 很多，但都是从罗门诺夫斯基氏创造的染液 变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液 两大类，前者包括罗氏、西氏（Simon)、 J.S.B氏染液等，后者包括利氏 (Leishman)、瑞氏和吉氏染液等。这些染 液中的主要染剂都包含美兰、伊红和由美兰 氧化所成的天青，所以称多色性染剂。
浓液混入瓶内，至25毫升甲醇 洗净钵中甘油染液为止，塞紧瓶
2、甘油25毫升
塞，充分摇匀，置于55~60℃ 3、甲醇25毫升
水浴中或温箱内24小时或室温
内3~5天，多加摇动，即成原
液。吉氏染液是目前较优良的血
膜染剂，即使在炎热天气中，亦
可经久不变。 15
血片的染色 （三）吉氏染液血片染色方法
先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干后进行 染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚血膜溶脱血红 蛋白，然后才进行染色。
取血方法 采血部位一般人为耳垂，指头， 通常在耳垂取血（现场取血用采血针采血， 一人一针，避免血传疾病）。先用75% 酒精棉球消毒取血部位（冬季用手捻动耳 垂使其充血后再行消毒），待酒精干后， 用左手拇指和食指紧捏耳垂上方，右手持 消毒针迅速刺入耳垂下端1~2毫米，不宜 过深或过浅。然后用右手中指轻轻向上挤 压出血。
因此血检的目的在于通过对发热病 人血检达到确诊疟疾病例。它的意 义在于及时发现传染源和明确感染 的疟原虫种类，以能针对虫种选择 正确的治疗方案。
28
三、发热病人血检的质量控制 2 、血检对象 在疟疾严重流行时期，卫生部 有关文件中提出，疟区的各级 医疗卫生单位，都要把发热病 人血检疟原虫列为常规。
23
影响染色效果的因素
（7）染色后不要直接将染液倒掉，应沿玻 片或染色缸边缘加水使染液表面一层溢出， 并轻轻冲洗，以免染液色素颗粒沾污血膜。
24
三、发热病人血检的质量控制
19世纪后期，显微镜的出现
使人们不断发现了传染病的病因，
1880年法国军医拉韦朗
（Laveran）第一次见到并描述
了人红细胞内的疟原虫，至此才
3
取血量及涂片法（涂片操作）
薄血膜 取洁净的载玻片2 张，1张平置在桌上，以左 手拇指，食指夹持载玻片 两端（手指切勿接触玻片 表面），用另一张边缘平 滑（最好为磨口边缘）的 载玻片做推片，用推片一 端边缘的中点从取血部分 取约1微升的血量（相当于 1/4火柴头大小），使血 滴与平置的载玻片接触， 并形成25~30度夹角，待 血液向两侧扩展约2厘米长 度时，均匀而迅速地轻轻 向左推出（约2.5厘米 长）。
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血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞 的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又 具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来 只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染 剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显 著的既兰又红的紫兰色，而较小或菲薄的原 虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环 状体期；发作后数小时，环状体发育到滋养体 期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断的有 利时机；36~48小时，可检出裂殖体；发作 一、二次后，配子体出现较多。
恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20小 时内取血，初发患者退热后常查不到原虫。
2
血膜的制作（取血操作）
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三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
但根据20世纪80年代各地的观察结果表表明， 全部血检阳性的病例中，有47.8%（江苏）、 73.5%（山东）、77.7%（南方7省）、 84.1%（河南）是在临床初诊为疟疾、疑似疟 疾的发热病中查出的，而其它15%~42%的病 例，是在临床初诊为发热原因不明和感冒及其它 发热病人中查出的。
疟疾病例确诊的金标。
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三、发热病人血检的质量控制
1 、目的与意义
在疟疾诊断标准中把疟疾病例分为 疑似病例、临床病例、确诊病例和 带虫者，前两者依据流行病学史和 临床表现即可做出诊断，而后两者 需通过发现病原方能做出诊断。另 外，除带虫者外，病例的最基本临 床表现为发热。
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三、发热病人血检的质量控制 1 、目的与意义
伊红在水溶液内遇到美兰或天青，时间一长即可互相化合 而产生沈淀从而失去染色力，因此，吉氏母液绝对不能进水。
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血片的染色
（二）吉氏染液母液配置方法
取吉氏粉0.5克Hale Waihona Puke Baidu于研钵中，
加少量甘油充分研磨，再加再磨，
至25毫升加完为止，倒入60或 100毫升带有玻塞的有色玻瓶中。
材料：
在研钵中加少量甲醇，洗去甘油 1、吉氏粉0.5克
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（涂片操作）
厚血膜 用推片的一 角，从取血部位刮取 约4微升血量（相当 于火柴头大小），使 血滴与平置的载玻片 接触，再由里向外或 由外向里一个方向旋 转，转2~4圈，涂成 直径0.8~1厘米大小 圆形厚血膜，血膜厚 薄均匀，过厚易于脱 落，过薄达不到检出 率的要求。
5
血膜的制作（涂片操作）
涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜 涂在一张载片上。方法是将载片分为6等分， 第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3 格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。 作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个； 门诊和发热病人血片
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三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
表 各类发热病人血检原虫阳性率
临床初诊 疟疾
血检人数 阳性人数 阳性率% 10931 670 64.49
占总阳性人数 %
64.24
疑似疟疾 24733
发热原因不明 10602
其它
96084
293 76 4
2.35 0.02 0.004
28.09 7.29 0.38
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三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
表中显示，在诊断为发热原
因不明的病人中，原虫阳性率仅为
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制作血膜的注意事项
3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或 火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。 夏天标本尽可能24~48小时内固定染色； 冬天也不能超过72小时。放置时间越久， 厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若 不能及时染色，膜血膜宜先用甲醇固定 （1~3分钟）然后用过滤清水对厚血膜 溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以 后染色。
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、 磨损。制作血膜的载玻片必须完 全清洁而毫无油渍或污垢。制片 时，手指只能持载片的边缘，不 能接触玻片表面，以免油污使薄 血膜产生空白区以及厚血膜脱落。 作为推片的玻片边缘一定要平滑， 才能使推出的血膜均匀一致。
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制作血膜的注意事项
2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜 未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧， 造成血膜厚薄不均，厚处不一溶血和着色而影 响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍 蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标 本盒并盖严，新的木制标本盒需敞开放置一段 时间，让木醇挥发后才能使用，以免厚血膜红 蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。
解开了困扰人们数千年的疟疾的
病因之谜。
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三、发热病人血检的质量控制
此后，随着显微镜的不断改进和
血膜上疟原虫染色方法的出现，使显
微镜检查疟原虫的方法成为疟疾病原
学诊断的重要手段。尽管这种方法存
在着操作复杂、技术难于掌握等缺点，
但以其高特异性一直被作为确诊病例
主要依据。时止今日，由于技术的、
经济的等原因，镜检疟原虫仍是我国
影响染色效果的因素
血片染色好坏除了与玻片是否清洁，血片 制作质量好坏等有关外，还受到以下几个 因素的影响：
（1）染料溶剂的质量 染料、甲醇和甘油 如果不纯，常使配制的染液偏酸或偏碱而 影响染色效果。因此必须用分析纯的甲醇 和中性甘油，而且在配制时所用的器具必 须干净而无水份。
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影响染色效果的因素
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影响染色效果的因素
（6）染色用水 染液的稀释用水和染色后冲洗用 水应选择Ph7.0~7.2清洁水，通常使用的新鲜 的蒸馏水或过滤的冷开水，以及自来水、井水、 河水、泉水和雨水等。如果偏酸或偏碱，可用缓 冲蒸馏水调整。染色后发现血膜颜色偏蓝（偏碱） 或偏红（偏酸）时，可用与之相反的酸、碱度水 冲洗血片予以纠正。
成批血片染色：将已固定薄血膜的血片插入染 色缸，倒入2%吉氏染液稀释液（2毫升原液加中性 蒸馏水98毫升稀释均匀即成），同时对厚薄血膜染 色30分钟（如染液不合标准时，得酌情增减染色时 间），然后用清水轻轻将染液冲去，再用清水轻轻冲 洗一次，干净后将血片标本（血膜面朝下）插于晾干 板上，待干镜检。
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一、血片制作
血膜的制作 用于检查疟原虫的血涂片有两种：一种是将血液涂
呈薄膜状，称薄血膜；一种是血液涂成圆盘，称 厚血膜。薄血膜上的血细胞要求平辅在玻片上面。
发热病人血片
标本片 1
血膜的制作（取血时间）
取血时机 现症病人一般可随时取血，疟疾普 查时可不考虑取血时机。但在诊断或需要某期 疟原虫作标本时，则应掌握适宜的取血时机。
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影响染色效果的因素
（4）染液的稀释浓度 染液的浓度高其着 色就快而深，从而疟原虫寄生红细胞的薛氏 点粗大显著，但颜色常偏碱；染液浓度过低 则染色时间久，颜色偏酸，薛氏点不明显或 消失。
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影响染色效果的因素
（5）染色时间 染色时间长染色效果好， 反之较差。室温高则着色快，染色时间可 略缩短，气温低可适当延长。因此染色时 间应根据染液的质量、新旧、稀释浓度和 气温而适当增减。
涂2个厚血膜1个薄血膜，以
防血膜脱落而影响检查；
疟疾调查时，每张玻片
可涂制2~3人血膜。
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血膜的制作
血膜编号 血膜制成后，立即用特种 蜡笔或水笔于玻片面上写上受检者的 号码，以防差错，待薄血膜干后再用 铅笔于薄血膜中写上血片种类的代号 和受检者的个人编号，依次顺序插入 标本盒内。
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制作血膜的注意事项
血片的染色 （三）吉氏染液血片染色方法
先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干 后进行染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚 血膜溶脱血红蛋白，然后才进行染色。
单张血片染色：薄血膜经固定干燥后， 用2%吉氏染液稀释液1~2毫升，滴入血片 标本上染色30分钟左右，或用中性蒸馏水1毫 升，加吉氏母液1~2滴，混合均匀后滴入血 片标本上，染色10~20分钟，然后用清水轻 轻将片上的染液冲洗干净，晾干镜检。
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血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
注意：蛋白质是二性电解质，当其处于较等电点为酸的溶液中时， 便呈硷的作用，即与酸结合* ，这就说明为何在染液偏酸时， 伊红的着色力强，使红细胞着色鲜艳而淋巴细胞和原虫的胞浆 着色不著；反之，蛋白质在偏硷的溶液中呈酸的作用而中和硷 基，也就说明为何染液偏硷时，红细胞和嗜伊红白细胞的颗粒 等被染成紫兰色。
（2）染液的新旧 新配制的染液因色素尚 未充分溶解，染色力较弱且常呈现偏碱性。 染液存放时间越久，染色力越强。通常在 染液配制1~2周后才使用，盛装染液的瓶 子应加塞盖密。以防吸潮而影响染液质量。
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影响染色效果的因素
（3）染液稀释后使用时间 吉氏和瑞氏染 液的主要成份是美蓝、伊红和由美蓝氧化 产生的天青，三者能在酒精溶液中溶解， 但在水溶液中伊红遇到美蓝和天青即产生 沉淀。因此，必须在稀释染液当时使用， 一般在半小时内染色力最强。
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三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
因此，为尽可能多地发现病人， 各地把临床初诊为疟疾、疑似 疟疾、发热原因不明和感冒及 其它发热的“四热”病人列为 血检对象。
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三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
但是，随着疟疾流行程度的降低，“四 热”病人中查出的疟疾病例所占的比例 也发生了变化。上世纪90年代初，在全 国10 省、区发病率稳定在1/万以下地 区开展研究，发现 92.33 %的病例发 生在临床诊断为疟疾、疑似疟疾（包括 来自高疟区流动人口）中（见表）。
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血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：伊红是酸性水溶性钠盐，美兰是碱性 水溶性盐酸盐，当它们各自溶化水中时，就离 解为带阳电和阴电的离子。伊红主要离解为酸 性的阳离子，在遇到碱性的蛋白质如血红蛋白、 嗜伊红白血球颗粒等即可结合成不易溶于水的 沈淀物染成红色。美兰主要离解为碱性的美兰 离子，美兰就与疟原虫、淋巴和大单核细胞的 胞浆、嗜碱性白细胞的颗粒等酸性蛋白质结合 染成兰色。#
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二、血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染液种类：目前所用的血片染色液，虽然名称 很多，但都是从罗门诺夫斯基氏创造的染液 变化过来的。总的可分为水溶液和酒精溶液 两大类，前者包括罗氏、西氏（Simon)、 J.S.B氏染液等，后者包括利氏 (Leishman)、瑞氏和吉氏染液等。这些染 液中的主要染剂都包含美兰、伊红和由美兰 氧化所成的天青，所以称多色性染剂。
浓液混入瓶内，至25毫升甲醇 洗净钵中甘油染液为止，塞紧瓶
2、甘油25毫升
塞，充分摇匀，置于55~60℃ 3、甲醇25毫升
水浴中或温箱内24小时或室温
内3~5天，多加摇动，即成原
液。吉氏染液是目前较优良的血
膜染剂，即使在炎热天气中，亦
可经久不变。 15
血片的染色 （三）吉氏染液血片染色方法
先用甲醇或无水酒精固定薄血膜，待干后进行 染色。亦可在固定薄血膜后用清水对厚血膜溶脱血红 蛋白，然后才进行染色。
取血方法 采血部位一般人为耳垂，指头， 通常在耳垂取血（现场取血用采血针采血， 一人一针，避免血传疾病）。先用75% 酒精棉球消毒取血部位（冬季用手捻动耳 垂使其充血后再行消毒），待酒精干后， 用左手拇指和食指紧捏耳垂上方，右手持 消毒针迅速刺入耳垂下端1~2毫米，不宜 过深或过浅。然后用右手中指轻轻向上挤 压出血。
因此血检的目的在于通过对发热病 人血检达到确诊疟疾病例。它的意 义在于及时发现传染源和明确感染 的疟原虫种类，以能针对虫种选择 正确的治疗方案。
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三、发热病人血检的质量控制 2 、血检对象 在疟疾严重流行时期，卫生部 有关文件中提出，疟区的各级 医疗卫生单位，都要把发热病 人血检疟原虫列为常规。
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影响染色效果的因素
（7）染色后不要直接将染液倒掉，应沿玻 片或染色缸边缘加水使染液表面一层溢出， 并轻轻冲洗，以免染液色素颗粒沾污血膜。
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三、发热病人血检的质量控制
19世纪后期，显微镜的出现
使人们不断发现了传染病的病因，
1880年法国军医拉韦朗
（Laveran）第一次见到并描述
了人红细胞内的疟原虫，至此才
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取血量及涂片法（涂片操作）
薄血膜 取洁净的载玻片2 张，1张平置在桌上，以左 手拇指，食指夹持载玻片 两端（手指切勿接触玻片 表面），用另一张边缘平 滑（最好为磨口边缘）的 载玻片做推片，用推片一 端边缘的中点从取血部分 取约1微升的血量（相当于 1/4火柴头大小），使血 滴与平置的载玻片接触， 并形成25~30度夹角，待 血液向两侧扩展约2厘米长 度时，均匀而迅速地轻轻 向左推出（约2.5厘米 长）。
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血片的染色 （一）染液的种类及染色原理
染色原理：美兰与伊红都不能使原虫和白细胞 的核着色，必须由天青作为媒介（染媒）才 能使其着色。天青虽然也是碱性染剂，但又 具有染媒作用，使原虫核和白细胞核等原来 只能染上极淡兰色的结构染上显著的酸性染 剂伊红，这样，就使白细胞粗大的核染成显 著的既兰又红的紫兰色，而较小或菲薄的原 虫核和淋巴细胞原浆中的颗粒染成紫红色。
间日疟在寒热发作时，外周血液中主要可见环 状体期；发作后数小时，环状体发育到滋养体 期，疟色素形成，形态较易辩认，为诊断的有 利时机；36~48小时，可检出裂殖体；发作 一、二次后，配子体出现较多。
恶性疟较理想的取血时间是在发作后至20小 时内取血，初发患者退热后常查不到原虫。
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血膜的制作（取血操作）
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三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
但根据20世纪80年代各地的观察结果表表明， 全部血检阳性的病例中，有47.8%（江苏）、 73.5%（山东）、77.7%（南方7省）、 84.1%（河南）是在临床初诊为疟疾、疑似疟 疾的发热病中查出的，而其它15%~42%的病 例，是在临床初诊为发热原因不明和感冒及其它 发热病人中查出的。
疟疾病例确诊的金标。
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三、发热病人血检的质量控制
1 、目的与意义
在疟疾诊断标准中把疟疾病例分为 疑似病例、临床病例、确诊病例和 带虫者，前两者依据流行病学史和 临床表现即可做出诊断，而后两者 需通过发现病原方能做出诊断。另 外，除带虫者外，病例的最基本临 床表现为发热。
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三、发热病人血检的质量控制 1 、目的与意义
伊红在水溶液内遇到美兰或天青，时间一长即可互相化合 而产生沈淀从而失去染色力，因此，吉氏母液绝对不能进水。
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血片的染色
（二）吉氏染液母液配置方法
取吉氏粉0.5克Hale Waihona Puke Baidu于研钵中，
加少量甘油充分研磨，再加再磨，
至25毫升加完为止，倒入60或 100毫升带有玻塞的有色玻瓶中。
材料：
在研钵中加少量甲醇，洗去甘油 1、吉氏粉0.5克
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（涂片操作）
厚血膜 用推片的一 角，从取血部位刮取 约4微升血量（相当 于火柴头大小），使 血滴与平置的载玻片 接触，再由里向外或 由外向里一个方向旋 转，转2~4圈，涂成 直径0.8~1厘米大小 圆形厚血膜，血膜厚 薄均匀，过厚易于脱 落，过薄达不到检出 率的要求。
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血膜的制作（涂片操作）
涂制厚、薄血膜的位置 通常是将厚、薄血膜 涂在一张载片上。方法是将载片分为6等分， 第1、2格备贴标签及编号用；厚血膜涂在第3 格中央，薄血膜涂在第4格前缘至第6格中部。 作为标本的血片每张玻片涂厚、薄血膜各1个； 门诊和发热病人血片
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三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
表 各类发热病人血检原虫阳性率
临床初诊 疟疾
血检人数 阳性人数 阳性率% 10931 670 64.49
占总阳性人数 %
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疑似疟疾 24733
发热原因不明 10602
其它
96084
293 76 4
2.35 0.02 0.004
28.09 7.29 0.38
33
三、发热病人血检的质量控制
2 、血检对象
表中显示，在诊断为发热原
因不明的病人中，原虫阳性率仅为
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制作血膜的注意事项
3. 血膜让其自然干燥，切忌用太阳晒或 火烤，干透后才能用甲醇固定薄血膜。 夏天标本尽可能24~48小时内固定染色； 冬天也不能超过72小时。放置时间越久， 厚血膜越不易溶血，染色效果也差。若 不能及时染色，膜血膜宜先用甲醇固定 （1~3分钟）然后用过滤清水对厚血膜 溶血，晾干固定后装入盒内盖严，待以 后染色。
1. 玻片清洗时，避免玻片碰撞、 磨损。制作血膜的载玻片必须完 全清洁而毫无油渍或污垢。制片 时，手指只能持载片的边缘，不 能接触玻片表面，以免油污使薄 血膜产生空白区以及厚血膜脱落。 作为推片的玻片边缘一定要平滑， 才能使推出的血膜均匀一致。
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制作血膜的注意事项
2. 刚涂制的血膜要平放在标本盒内，厚血膜 未干前勿使标本盒倾斜，以免血膜倾向一侧， 造成血膜厚薄不均，厚处不一溶血和着色而影 响检查结果；晾干血膜时应注意防尘、防止苍 蝇、蟑螂等昆虫吮吸血膜，干后应及时装入标 本盒并盖严，新的木制标本盒需敞开放置一段 时间，让木醇挥发后才能使用，以免厚血膜红 蛋白被其固定，不能溶血或染色效果不佳。
解开了困扰人们数千年的疟疾的
病因之谜。
25
三、发热病人血检的质量控制
此后，随着显微镜的不断改进和
血膜上疟原虫染色方法的出现，使显
微镜检查疟原虫的方法成为疟疾病原
学诊断的重要手段。尽管这种方法存
在着操作复杂、技术难于掌握等缺点，
但以其高特异性一直被作为确诊病例
主要依据。时止今日，由于技术的、
经济的等原因，镜检疟原虫仍是我国