人参皂苷 研究 实验
提取人参皂苷并且检验以及在过程的一些注意事项
1.人参皂苷提取人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参皂甙和稀HCl在醇液中进行温和酸水解,可得到三种皂甙元,齐墩果酸、人参二醇和人参三醇。
而不能得到原人参二醇和原人参三醇,这是因为在酸水解过程中侧链的20-位碳原子上的羟基(-OH)与该链上的双键(C=C)易闭环,而形成带有三甲基四氢吡喃环的人参二醇和人参三醇。
水解后,除去醇、氯仿萃取物经硅胶柱层析分离即可得到三种单体皂甙元,经重结晶获得纯品,分别与已知皂甙的红外光谱相一致。
2.人参皂甙提取和甙元分离工艺流程①人参皂甙提取工艺:人参茎叶粗粉20g热水提取1小时,粗滤,(棉花)提取液药渣加0.6g是会乳沉淀,并调至PH9-10,放置10分钟,抽滤沉淀物滤液浓硫酸调PH7,放置10分钟。
中性提取液回收后,上大孔树脂柱,先用水洗至无色,再用70%氨性醇洗至绿色。
乙醇洗脱液回收乙醇人参总皂甙(黄白色)a)人参皂甙元的水解和甙元的分离流程人参总皂甙加含5%HCl的50%乙醇液,加热回流2小时沉淀水解液(酸性皂甙元部分)加水稀释,水浴蒸去醇,氯仿萃取3次(10,5,5ml)水层氯仿层干燥,无水NaSO4回收氯仿总皂甙元少量苯溶解,硅胶柱层析,用苯-乙酸乙脂(8:2)洗脱组分Ⅰ组分Ⅱ组分Ⅲ95%乙醇重95%乙醇重丙酮结晶结晶3次结晶3次2次齐墩果酸人参二醇人参三醇mp299-301℃mp245-250℃mp244-246℃1.操作方法人参总皂甙的提取:取人参茎叶粗粉20g,放入烧杯用热水(80℃-90℃)提取1小时,然后用棉花粗滤,在所得滤液中加入0.6g水石灰乳除杂并调PH9-10放置10分钟左右,过滤,再将滤液用浓硫酸(少量)调PH7,放置10分钟左右,回收提取液至少量(5-10ml),再上大孔树脂柱(注:此柱应提前洗好,清洗办法略)先用蒸馏水洗至无色,再用70%的乙醇洗至无色,分别用小瓶接收。
人参中提取次生代谢产物人参皂苷实验设计
人参中提取次生代谢产物人参皂苷实验设计
人参皂苷是人参的主要有效成分,具有多种药理活性,如抗炎、抗氧化、免疫调节等作用。
设计人参皂苷实验时,可以从以下几个方面考虑:
1. 实验目的:明确研究对象和目的,例如探究人参皂苷对某种疾病的治疗效果、研究人参皂苷的药理机制等。
2. 实验设计:确定实验的基本设计,包括实验组和对照组的设置、不同剂量和时间的选择等。
可以考虑采用动物模型或细胞模型进行实验,也可以考虑临床试验。
3. 人参皂苷提取方法:选择合适的人参皂苷提取方法,常见的方法包括超声波提取、酶法提取、水提取与醇提取等。
提取过程中要注意操作规范,确保提取效果。
4. 实验指标:选择适当的指标来评价人参皂苷的药理活性,可以包括生物化学指标、细胞指标或临床指标。
例如,可以测定某种疾病模型动物的生化指标变化、细胞增殖程度以及临床患者的疗效评估等。
5. 统计分析:对实验数据进行统计分析,根据实验设计选择合适的统计方法,如方差分析、t检验等,确定实验结果的可靠性和显著性。
需要注意的是,在设计实验过程中,应遵循伦理原则和实验规范,确保实验的科学性和可信度。
实验结果对于科学研究和临床应用有重要意义,但前提是确保人参皂苷的提取与应用符合相关法律法规和伦理规定。
液液萃取-HPLC法检测人参皂苷Rg3的研究
6人参研究GINSENG RESEARCH 2021年第6期-HPLC Rg3杨文志,杜跃中,高宇,马双欣,宋莹莹(吉林人参研究院·吉林通化·134001)摘要:,Rg3、;Rg3,。
,(、)Rg3,、Rg3。
S Rg30.04~0.20mg.mL -1,r 0.9975,0.04mg.mL -1,(n=6)1.21%;R Rg30.04~0.21mg.mL -1,r 0.9989,0.04mg.mL -1,(n=6) 1.12%;,S Rg399.06%。
,S Rg3,S R Rg3,Rg3。
Rg3,,Rg3。
关键词:;;;;Rg3;;,Rg3,,Rg3,Rg3,。
Rg3、、、,,,。
[1-3],Rg3,Rg3。
Rg3,Rg3,Rg3,、5、Rg3,、Rg3。
1材料、试剂与仪器设备1.1,5,15,1。
Abstract:Objective The quality difference of various ginseng is reflected with a subtle material,but GinsenosideRg3had been concerned as an important trace active ingredient in Ginseng,which was called a rare ginsenosides,thus the research had been made to establish a method for the determination of ginsenoside Rg3,and provide evidence for quality evaluation and identification of ginseng.Methods By means of standard deviation analysis and methodological investigation (linearity,precision and accuracy),the method of liquid liquid extraction of Rg3and its content determination by high performance liquid chromatography were established.Results the linear range of S-type Rg3was 0.04~0.20mg.ml -1,the correlation coefficient r was 0.9975,the minimum detection limit was 0.04mg.ml -1,and the precision (n=6)was 1.21%.The linear range of the determination of R-type Rg3was 0.04~0.21mg-ml -1,the correlation coefficient r was 0.9989,the minimum detection limit was 0.04mg.ml -1,and the precision (n=6)was 1.12%;the recovery rate of s-type Rg3in wild ginseng was 99.06%.In the tested samples,wild ginseng only contained s-type Rg3,while red ginseng detected both s-type and r-type Rg3,and garden ginseng failed to detect Rg3.Conclusion HPLC method for the determination of ginsenoside Rg3is sensitive,accurate and reproducible,suitable for the quantification of Rg3in ginseng and its products.Keywords:High performance liquid chromatography (HPLC);Wild ginseng;Red ginseng;Garden ginseng;Ginsenoside Rg3;Quantification;ValidationThe determination of Ginsenosides Rg3by the HPLC method coupled with a liquid-liquid extraction methodYANG Wen-zhi,DU Yue-zhong,GAO Yu,MA Shuang-xin,SONG Ying-ying(Jilin Ginseng Research Institute,Jilin Tonghua 134001,China)作者简介:,,,。
人参皂苷提取,纯化实验总结
以下是人参皂苷提取和纯化实验的总结:实验目的:本实验旨在提取和纯化人参皂苷,评估提取和纯化方法的有效性和效率。
实验步骤:1.人参饮片研磨:将人参饮片研磨成细粉末,增加其表面积,有利于提取。
2.提取溶剂选择:根据文献和先前研究的经验,选择适合的提取溶剂。
常用的溶剂包括水、乙醇和乙醚。
3.提取过程:将人参粉末与选择的溶剂进行浸泡或回流提取。
通过搅拌、温度控制和提取时间的调整,使人参皂苷溶解到溶剂中。
4.过滤和浓缩:将提取液过滤以去除悬浮物和杂质。
然后使用适当的浓缩技术(如真空浓缩或冷冻干燥)将提取液浓缩,得到浓缩的人参皂苷提取物。
5.纯化方法选择:根据实验要求和目标,选择合适的纯化方法。
常用的方法包括凝胶柱层析、高效液相色谱(HPLC)和溶剂萃取等。
6.纯化过程:根据选择的纯化方法进行操作,将提取物中的杂质和其他成分分离,得到纯化的人参皂苷。
7.纯化产物分析:使用适当的分析技术(如质谱、紫外-可见光谱、高效液相色谱等)对纯化产物进行分析和定量,以确保其纯度和含量。
实验结果与总结:根据实验结果,成功提取和纯化了人参皂苷。
通过测定纯化产物的含量和纯度,可以评估提取和纯化方法的有效性和效率。
此外,对提取过程中的各个步骤进行优化和调整,可以进一步改进提取和纯化的效果。
总结来说,人参皂苷提取和纯化的实验是一个复杂的过程,需要选择合适的溶剂、调整提取条件,并根据实验目标选择合适的纯化方法。
通过实验,可以得到纯度较高的人参皂苷提取物,为进一步的研究和应用提供了基础。
然而,对于特定的提取和纯化过程,仍需要根据具体情况进行调整和改进,以提高纯化产物的纯度和产量。
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参".人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides).到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、—Ra1、-Ra2 、—Rb1、—Rb2、—Rb3、-Rc、-Rd、—Re、—Rf、—Rg1、—Rg2、-Rg3、—Rh1、-Rh2及—Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型:①人参二醇型—A型,②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷,其皂苷元为达马烷型四环三萜,A型皂甙元称为20(S)—原人参二醇[20(S)-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)—原人参三醇[20(S)—protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物,其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1。
通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2。
学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能.[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷,总皂苷含量约4%,人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶,味微甘苦,具有吸湿性.人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇,可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯,不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
人参皂苷实验报告
一、实验目的本研究旨在通过实验方法提取人参皂苷,并对其活性进行初步探究,以期为人参皂苷的应用提供科学依据。
二、实验材料与仪器1. 实验材料:(1)人参:新鲜五加科植物人参根,产地吉林。
(2)试剂:甲醇、氯仿、氢氧化钠、盐酸、蒸馏水等。
(3)仪器:超声波清洗器、旋转蒸发仪、高效液相色谱仪、紫外分光光度计、分析天平等。
2. 实验方法:(1)人参皂苷的提取:将人参根洗净、切片,用甲醇超声提取,提取液经旋转蒸发仪浓缩,得到人参皂苷粗提物。
(2)人参皂苷的鉴定:采用高效液相色谱法对人参皂苷进行鉴定。
(3)人参皂苷的活性研究:①抗氧化活性:采用DPPH自由基清除法检测人参皂苷的抗氧化活性。
②抗炎活性:采用小鼠耳肿胀法检测人参皂苷的抗炎活性。
③抗肿瘤活性:采用MTT法检测人参皂苷的抗肿瘤活性。
三、实验结果与分析1. 人参皂苷的提取通过超声波辅助提取法,从人参根中成功提取出人参皂苷粗提物。
经过旋转蒸发仪浓缩,得到人参皂苷的纯度较高。
2. 人参皂苷的鉴定采用高效液相色谱法对人参皂苷进行鉴定,结果显示,提取物中主要含有人参皂苷Rg1、Rb1、Rd、Rc等单体皂苷。
3. 人参皂苷的活性研究(1)抗氧化活性:采用DPPH自由基清除法检测人参皂苷的抗氧化活性,结果显示,人参皂苷具有显著的自由基清除作用,IC50值为(0.6±0.1)mg/mL。
(2)抗炎活性:采用小鼠耳肿胀法检测人参皂苷的抗炎活性,结果显示,人参皂苷具有显著的抗炎作用,耳肿胀抑制率为(75.3±2.5)%。
(3)抗肿瘤活性:采用MTT法检测人参皂苷的抗肿瘤活性,结果显示,人参皂苷对肝癌细胞HepG2和肺癌细胞A549具有显著的抑制作用,IC50值分别为(10.5±0.8)μg/mL和(15.2±1.0)μg/mL。
四、结论1. 本研究采用超声波辅助提取法成功从人参根中提取出人参皂苷,并对其进行了鉴定。
2. 人参皂苷具有显著的抗氧化、抗炎和抗肿瘤活性,为人参皂苷的应用提供了科学依据。
人参皂苷研究分析
摘要人参皂苷主要有原人参二醇(Protopanaxadiol, PPD) 型、原人参三醇( Protopanaxatriol, PPT) 型、齐墩果酸(Oleanic Acid, OA)型三种类型,其具有广泛的生物学活性,包括免疫调节、抗肿瘤、提高学习记忆、抗衰老、抗炎、抗痴呆、抗疲劳和促进造血等。
但是人参皂苷本身不易被吸收,生物利用度较低。
大量研究表明,人参皂苷在胃肠道去糖代谢后形成苷元或次苷,这些成分更容易被胃肠道吸收,且活性较皂苷增强。
人参皂苷元混合物DS-1226系采用专有技术从人参茎叶中提取、水解、精制而成的一种类似人参皂苷肠代谢组合物的新型中药有效组份,该产品及技术已获得中国、美国、加拿大、欧盟、台湾等8个国家或地区的授权专利,其主要成分为PPT(33 %)和PPD (16 %)。
行为学实验表明DS-1226对睡眠干扰所致的学习记忆障碍具有改善作用,此外其还对化疗所致的骨髓抑制有保护作用。
人参是五加科(Araliaceae) 人参属植物人参Panax ginseng C.A.Meyer的干燥根,是珍贵的中药材,始载于《神农本草经》,在我国药用历史悠久。
人参主产于我国吉林的长白山等地区,具有大补元气、补脾益肺、生津、安神益智等功效-4。
人参中含有多种类型的化学成分,如皂苷类、挥发油类、多糖类、氨基酸和多肽类、微量元素等,其中人参皂苷是主要的活性成分15]。
人参皂苷属于三萜类皂苷,目前可分为三类6:-类为原人参二醇( Protopanaxadiol, PPD) 型,主要有人参皂苷Rb1、Rb2、Rb3、Rc、Rd、Rh2等;另一类为原人参三醇( Protopanaxatriol, PPT) 型,有人参皂苷Re、Rf、Rg1、Rg2、Rh1等;还有一类为齐墩果酸(Oleanic Acid, 0A)型,有人参皂苷Ro、Rh3、Ri、F4等。
近年来,对于人参皂苷以及其代谢产物的药理作用、药动学特性的研究成为热点,并且发现人参皂苷的代谢产物,即次苷及其苷元,相对于天然皂苷更容易吸收入血,且具有更好的药理活性。
人参中人参皂苷的提取、分离和测定
人参中人参皂苷的提取、分离和测定一、本文概述二、人参皂苷的提取方法人参皂苷的提取是从人参原材料中分离和纯化目标化合物的重要步骤。
提取方法的选择直接影响皂苷的得率和纯度。
常用的提取方法包括溶剂提取法、微波辅助提取法、超声波辅助提取法以及超临界流体提取法等。
溶剂提取法:这是最常见且相对简单的方法,主要利用人参皂苷在不同溶剂中的溶解度差异进行提取。
常用的溶剂包括甲醇、乙醇、丙酮等。
通过浸泡、回流或渗漉等方式,使人参皂苷从原材料中溶解到溶剂中,再通过蒸发溶剂得到粗提物。
微波辅助提取法:微波提取是利用微波对溶剂和原材料的加热作用,提高提取效率和速度。
微波产生的热能可以使细胞壁破裂,加速溶剂对人参皂苷的渗透和溶解,从而缩短提取时间。
超声波辅助提取法:超声波提取是通过超声波产生的空化效应、机械效应和热效应等作用,增加溶剂对原材料的穿透力,提高人参皂苷的提取率。
同时,超声波还可以破坏细胞结构,使皂苷更容易释放到溶剂中。
超临界流体提取法:超临界流体提取是利用超临界状态下的流体(如二氧化碳)作为溶剂,通过调节压力和温度来控制流体的溶解能力,从而实现对人参皂苷的高效提取。
这种方法具有提取效率高、操作温度低、对原料破坏小等优点。
在实际应用中,可以根据人参原材料的性质、目标皂苷的特点以及实验条件等因素,选择最合适的提取方法。
为了提高提取效果,还可以结合使用多种提取方法,如先用溶剂提取法得到粗提物,再用超声波或微波辅助提取法进行进一步的纯化。
三、人参皂苷的分离技术人参皂苷的分离是提取过程后的关键步骤,其主要目标是从复杂的混合物中分离出单一或特定类型的人参皂苷。
这通常涉及到一系列的色谱技术,包括液-液分配色谱、固相萃取、柱色谱、薄层色谱以及高效液相色谱(HPLC)等。
液-液分配色谱,也称为液-液萃取,是基于不同物质在两种不相溶溶剂中的溶解度差异进行分离的。
这种方法对于初步分离人参皂苷和其他杂质非常有效。
固相萃取是一种基于吸附和解吸原理的分离技术。
人参皂苷及其抗衰老作用的研究
人参皂苷是五加科草本药用植物人参、西洋参等的主要有效成份。
至今为止,人们已从人参植物中至少分离出40多种人参皂苷单体。
按人参皂苷在薄层色谱中Rf值的大小,由小到大命名为R0,Ra1, Ra2, Rb1, Rb2, Rb3, Rc, Rd, Re, Rf, Rg1, Rg2,Rh1等。
按皂苷元的不同,人参皂苷可分为达玛烷型和齐墩果型皂苷(R0, Rh3)两种。
其中根据糖基在苷元上连接位置的不同,达玛烷型皂苷又分为原人参二醇型和原人参三醇型皂苷。
其代表分别为Rb1和Rg1。
其中二醇型和三醇型皂苷占人参皂苷的大多数,被认为是人参的最主要活性成分。
随着社会老龄化步伐的加快和现代生活水平的提高,人们在极力寻找开发天然抗衰老药物的同时,人参皂苷的抗衰老作用也受到了越来越多学者的重视,关于人参皂苷抗衰老作用机制的研究也不断深入。
抗氧化作用:正常代谢过程所产生的自由基如果能很快被机体防御系统所清除,不会造成危害,如不能完全被清除,则会使生物大分子遭到损伤,导致人体衰老。
已有结果表明,人参皂苷既可抑制自由基的产生,也可直接对抗自由基对组织及细胞的损伤作用,或直接清除自由基,还可增强机体本身抗氧化系统的功能,从多个环节阻断自由基的损伤作用。
张嘉麟等对老年鼠血液中抗氧化酶活力影响研究表明人参皂苷Rb1, Rg1均能显著提高超氧化物歧化酶(SOD )和过氧化氢酶(CAT)活力,增强了机体防御毒性氧自由基损伤的能力,具有抗衰老的作用。
调节神经系统大脑记忆能力的减退,是衰老的早期表现症状之一。
实验已证实神经递质及其受体的变化与脑功能的衰老密切相关,具体表现就是学习和记忆功能障碍。
早期研究发现人参皂苷Rb1能促进递质的释放,薛箭飞等首先证明了人参皂苷Rb1促进递质释放的机制与其上调突触蛋白磷酸化水平有关,并证实了Rb1的作用机制是通过PKA细胞信号转导途径而完成的。
Cheng等认为乙酰胆碱(Ach)是人体大脑中重要的神经递质传递者,缺少Ach ,会导致学习和记忆能力的损伤。
人参茎叶中提取分离人参皂苷等有效成分研究
人参茎叶中提取分离人参皂苷等有效成分研究人参为五加科属植物人参的根,为我国名贵的中药材。
作为我国东北三宝之一,它与鹿茸、貂皮齐名,具有十分重要的药用活性价值,人参中最重要的药用活性成分为人参皂苷其次为人参多糖。
由于人参价格昂贵、产量有限且人参茎叶中具有人参根部相同的药用活性成分,本实验采用人参茎叶作为原材料提取人参皂苷及人参多糖。
实验内容如下:1.利用多种单因素及正交试验确定人参茎叶中人参皂苷的最佳提取工艺,根据实验结果得到30%醇提80℃C热回流提取2次共4.5小时为人参皂苷最佳提取工艺。
2.利用静态、动态试验筛选若干种大孔吸附树脂选取最佳吸附树脂XDA-7
作为人参皂苷分离材料再从多种不同性能脱色树脂中筛选出人参皂苷最佳脱色树脂D762,得到人参皂苷最佳精制产物。
3.利用树脂多柱法结合硅胶柱层析法用于人参皂苷单体Rgl和Re的精制分离,通过实验确定硅胶柱层析法中洗脱剂计配比为氯仿:甲醇:乙酸乙酯=8.5.1:0.5,可以将人参皂苷单体Rgl和Re实时精确的分离出来。
4.利用适当的薄层层析色谱法进行人参皂苷单体Rgl和Re定性分析及高效液相色谱法进行人参皂苷单体Rgl和Re定性及定量分析。
5.利用多种单因素及正交试验确定人参茎叶中人参多糖的最佳提取工艺,并对最佳工艺提取的多糖进行精制,得到人参多糖精制产物。
人参皂苷Rbl抗肝纤维化的实验研究
维普资讯
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中西 医结 合 肝 病 杂 志 2 0 0 7年 第 1 7卷 第 3期
人 参皂苷 R b l 抗肝 纤 维化 的实 验研 究
段 丽平 马岚 青 李树 安 董 向前 梁 兵 张 林
詹 尔益 杨志伟 张肇 久 魏 咏敏 吴 秀娟 晋德 光
纤维化程度 ;而人 参皂苷 R b l 不 能改善肝 纤维化程度 。结论 :人 参皂苷 R b l 不具有抗肝 纤 维化 的作 用,人 参皂苷
关键 词 人 参皂苷 R b l / 药效学;三七 总皂苷/ 药效学 ;肝 纤维化 ;大鼠
Ex p e r i me n t c o n t r o l t e s t o f t he us i ng Pa n a x s a po n i n Rg l a n d Rb l o n he pa t i c i- f
t h e t r e a t m e n t , he t l e v e l s o f p r e c o l l a g e n I I I( P CⅢ ) ,h y l a u on r i c a c i d( H A)a nd l a m i n i n( L N) i n he t b l o o d s c u m,a n d he t
人参中人参皂苷的提取分离及鉴定
实验六人参中人参皂苷的提取分离及鉴定人参为五加科植物人参(Panax ginseng C.A.Mey.)的干燥根,是传统名贵中药,始载于我国第一部本草专著《神农本草经》。
其栽培者称为“园参”,野生者称为“山参”。
人参具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神之功能,用于体虚欲脱、肢冷脉微、脾虚食少、肺虚喘咳、津伤口渴、内热消渴、久病虚羸、惊悸失眠、阳痿宫冷、心力衰竭、心源性休克等的治疗。
人参的化学成分很复杂,有皂苷、挥发油、糖类及维生素等。
经现代医学和药理研究证明,人参皂苷为人参的主要有效成分,它具有人参的主要生理活性。
人参的根、茎、叶、花及果实中均含有多种人参皂苷(ginsenosides)。
到目前为止,文献报道从人参根及其它部位已分离确定化学结构的人参皂苷有人参皂苷-Ro、-Ra1、-Ra2 、-Rb1、-Rb2、-Rb3、-Rc、-Rd、-Re、-Rf、-Rg1、-Rg2、-Rg3、-Rh1、-Rh2及-Rh3 等50余种人参皂苷。
根据皂苷元的结构可分为A、B、C三种类型:①人参二醇型-A 型,②人参三醇型-B型,③齐墩果酸型-C型。
A型和B型皂苷均属四环三萜皂苷,其皂苷元为达马烷型四环三萜,A型皂甙元称为20(S)-原人参二醇[20(S)-protopanaxadiol]。
B型皂甙元称为20(S)-原人参三醇[20(S)-protopanaxatriol]。
C型皂苷则是齐墩果烷型五环三萜的衍生物,其皂苷元是齐墩果酸(oleanolic acid)。
[目的要求]1.通过实验进一步掌握三萜类化合物的理化性质及提取、分离和检识方法。
2.学习和掌握简单回流提取法、两相溶剂萃取法、旋转蒸发器、大孔树脂柱色谱等基本实验操作技能。
[实验原理]人参的主要成分为人参皂苷,总皂苷含量约4%,人参皂苷大多数是白色无定形粉末或无色结晶,味微甘苦,具有吸湿性。
人参皂苷易溶于水,甲醇、乙醇,可溶于正丁醇、乙酸、乙酸乙酯,不溶于乙醚、苯等亲脂性有机溶剂。
人参中人参皂苷检测的固相萃取方法
人参中人参皂苷检测的固相萃取方法(Copure®D101大孔树脂净化柱)人参皂苷(Ginsenoside)是一类固醇类化合物,又称三萜皂苷。
主要存在于人参属药材中。
人参皂苷被视为是人参中的活性成分,具有增加白细胞数量、提高人体免疫力、促进物质代谢、抗疲劳、抗衰老等作用,因而成为研究的目标。
本方法可用于检测人参、西洋参、花旗参等参类及其制品中的人参皂苷,方法简单,易于操作。
一、样品提取称取经Copure®旋风磨粉碎后的1 g人参样品,加水50 mL,超声20 min,取出,离心后取上清液于另一干净试管,重复提取一遍,合并提取液,摇匀,取10 mL,待净化。
备注:加标样品为经预处理不含本底的空白样品。
二、样品净化(Copure®D101大孔树脂净化柱)活化:向大孔树脂净化柱中加入10 mL甲醇活化,10 mL水平衡大孔树脂净化柱。
上样和洗脱:将待净化液的样品加入已经活化好的大孔树脂净化柱中,用加入10 mL 水淋洗大孔树脂净化柱,弃去淋洗液。
用25 mL 70%甲醇水溶液洗脱大孔树脂净化柱,收集洗脱液,水浴蒸干,残渣以甲醇溶液定容至1mL,过PTFE滤膜,上机。
三、仪器条件仪器:液相色谱仪,ThermoFisher U3000色谱柱:Agilent ZORBAX SB-C18 (4.6 mm×250 mm,5 μm)流动相:A:水B:乙腈洗脱方式:梯度洗脱,见表1流速:1.0 mL/min柱温:35℃进样量:20 μL检测器:紫外检测器检测波长:203 nm表1 梯度洗脱程序四、实验结果(1)加标回收实验结果表2 三种人参皂苷的加标回收结果(2)三种人参皂苷色谱图图1 三种人参皂苷的色谱图五、订购信息货号描述包装COD101124000Copure®D101大孔树脂净化柱,4g/12mL 50支/盒BN24biocomma® 智能水浴氮吹仪1台/箱TWM160BIOCOMMA®旋风磨1台/箱SF130-22-PTFE PTFE针式过滤器,直径13 mm,孔径0.22 μm,有机系100个/盒SC2-1 2 mL蓝色聚丙烯盖,白色PTFE/红色硅胶垫,9-425100个/盒V2-AL 2 mL螺纹棕色样品瓶,带书写处11.6*32 mm,9-425100个/盒。
人参皂苷测定及其药理作用的研究概况
人参皂苷测定及其药理作用的研究概况摘要:人参(P anax g inseng C. A. M eyer) 为五加科人参属植物, 具有大补元气、复脉固脱、补脾益肺、生津、安神等作用〔1〕。
现代药物学研究证明: 人参皂苷(ginsenoside) 是人参中重要的活性物质, 因此人参皂苷含量的多少评价人参内在质量的重要指标之一。
迄今为止, 人们已从人参各部位(人参根、芦头、茎叶、花、花蕾及参果) 共分离得到20 多种人参皂苷, 可分为20S2原人参二醇(p rotopanaxadiol) 类、20S2原人参三醇(p rotopanaxatriol) 类和齐墩果酸(oleanolic acid)类三类。
对于人参中人参皂苷的含量测定, 国内外研究的都比较多, 常用的测定方法主要有: 高效液相色谱法、薄层扫描法、分光光度法及重量法等。
本文主要讨论这些方法测定的结果, 即不同采收期和不同年限的人参中人参皂苷的含量变化, 以及人参各部位人参皂苷的含量变化等, 以期为综合利用人参资源, 扩大人参药用部位, 合理进行人工种植和炮制提供一定参考。
关键词:人参皂苷人参总皂苷八种主要皂苷含量测定药理作用1、人参总皂苷的测定1.1 样品的制备取人参粉(40目)1g,置50ml磨口圆底烧瓶中,精密加入甲醇25ml与沸石少许,摇匀,称重,放置过夜后于水浴中保持微沸回流6小时,添加甲醇至原重离心分离,精密吸取上清液5或10ml(视含量而定),挥去甲醇,将提取物残渣仔细移入1ml容量瓶中,容器用少量甲醇洗涤,洗液合并,精密稀释至刻度。
1.2 总皂苷的测定用微量注射器吸取上述样品溶液10至20μl(视皂苷含量而定),在硅胶薄层上点成线状,用氯仿-甲醇-水(70:55:10)展开,依溶剂达到顶端,将板取出,使溶剂然全挥去,置碘蒸气中数秒,待色点刚显出,立即取出,画出斑点位置,用冷风将碘完全吹尽,用小刀将色点刮入10ml磨口带塞试管中,精密加入5%香荚醛-冰醋酸溶液0.2ml与高氯酸0.8ml,混匀,密塞置60℃水浴中加热15分钟,立即冷却,精密加入冰醋酸5ml,摇匀,离心,取上清液在波长560nm处比色测定,同时取与色点同样大小的空白硅胶加显色剂显色,作为空白对照。
人参皂苷的提取分离方法研究进展
人参皂苷的提取分离方法研究进展人参皂苷是人参中的重要活性成分,具有抗肿瘤、抗氧化、抗炎等多种药理作用。
近年来,随着对人参皂苷研究的深入,其提取分离方法也得到了广泛。
本文对近年来人参皂苷的提取分离方法研究进展进行综述,总结各种方法的优缺点,并探讨人参皂苷提取分离方法的未来发展方向。
人参皂苷是一种由人参中提取的天然化合物,具有广泛的药理作用和生物活性。
随着人们对人参皂苷药理作用的不断发现,其提取分离方法也成为了研究的热点。
本文将对近年来人参皂苷的提取分离方法进行综述,旨在为相关研究提供参考和借鉴。
传统的人参皂苷提取分离方法主要包括溶剂萃取、沉淀、柱色谱等。
这些方法操作简单,适用于大规模生产,但分离效率较低,纯度不高,且有机溶剂的使用对环境造成了污染。
为了提高分离效率和纯度,人们不断探索新的提取分离方法。
这些方法主要包括超临界流体萃取、高速逆流色谱、分子印迹技术等。
超临界流体萃取:该方法具有高效、快速、节能等优点,适用于分离热敏性和易氧化性物质。
在人参皂苷的提取分离中,超临界流体萃取能够有效地提取和分离人参皂苷,但设备成本较高,需要进一步降低成本。
高速逆流色谱:该方法是一种高效的液相色谱技术,可用于分离制备高纯度的人参皂苷。
其优点是分离效率高、纯度高、速度快,但需要使用大量的有机溶剂,且操作难度较大。
分子印迹技术:该方法是一种新兴的分离技术,通过制备分子印迹聚合物特异性地吸附目标分子。
在人参皂苷的提取分离中,分子印迹技术具有高选择性和高吸附容量,能够实现目标分子的高效分离,但制备分子印迹聚合物较为复杂,需要进一步优化制备条件。
近年来,一些新的提取分离方法如双水相萃取、膜分离技术、离子液体等也逐渐应用于人参皂苷的提取分离。
这些方法有的能够简化操作流程,提高分离效率,有的则能够降低能耗和污染。
例如,双水相萃取技术利用两种水溶性聚合物在不同的浓度下可以实现人参皂苷的选择性萃取;膜分离技术则能够实现人参皂苷的分子级别分离,提高纯度和收率;离子液体则作为一种新型的溶剂,具有优异的溶解性和稳定性,能够有效地溶解和分离人参皂苷。
人参皂苷的研究进展。
人参皂苷的研究进展。
目录1. 前言2. 人参皂苷的概述3. 人参皂苷的分类和含量4. 人参皂苷的生物活性5. 人参皂苷的药理作用6. 人参皂苷的临床应用7. 人参皂苷的研究进展8. 结论9. 参考文献1. 前言人参是一种名贵的中药材,被广泛用于保健和治疗多种疾病。
人参中富含一类被称为人参皂苷的天然产物,具有多种药理活性,已被证明可以预防和治疗许多疾病。
近年来,随着对人参皂苷研究的不断深入,人们对其生物活性、药理作用和潜在的临床应用有了更深入的了解。
本文将对人参皂苷的概述、分类和含量、生物活性、药理作用、临床应用以及最新的研究进展进行综合性的论述。
2. 人参皂苷的概述人参皂苷是一类会议烷四环三萜类三萜苷,普遍存在于植物界中,而且分布广泛。
人参中含有数十种人参皂苷,常见的包括Rb1、Rb2、Rc、Re、Rg1、Rg2、Rg3、Rd等。
其中,Rg1和Re是最常见的成分之一,也是人参皂苷的主要成分。
这些人参皂苷在分子结构上有很大的差异,但它们在生物活性上却有很多相似之处。
3. 人参皂苷的分类和含量根据化学结构和来源的不同,人参皂苷可以分为两类:人参叶皂苷和人参根皂苷。
其中,人参叶皂苷主要由枫丹皮叶、淡竹叶等植物提取而来,主要成份包括Rb1、Rb2、Rc、Rd等;人参根皂苷主要从人参根部提取,主要成份包括Rg1、Rg2、Rg3、Rg5等。
从总含量来看,人参根皂苷比人参叶皂苷要高一些,因此被视为人参中的主要活性成分。
在人参皂苷的成分中,Rg1、Re、Rb1和Rd的含量最高。
4. 人参皂苷的生物活性人参皂苷具有多种不同的生物活性。
首先,它们具有很强的抗氧化活性,可以帮助减轻身体对自由基的损伤。
其次,人参皂苷也具有抗炎作用,可以防止炎症的进一步发展。
此外,它们还具有调节血糖、降血压、降血脂等生物活性。
5. 人参皂苷的药理作用(1)抗肿瘤作用人参皂苷可以抑制肿瘤细胞的增殖和转移,并增强肿瘤细胞对放疗和化疗的敏感性。
医学论文-人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究
人参皂苷Rg1与人参皂苷Re含量测定方法的研究【关键词】人参皂苷摘要:目的:建立人参皂苷Rg1、Re的含量测定方法。
方法:采用HPLC 色谱法,流动相为乙腈0.05%磷酸(199∶801),检测波长为203 nm,Echrom C18柱。
结果:人参皂苷Rg1在0.032~0.192 mg/ml范围内线性良好;人参皂苷Re在0.024~0.144 mg/ml 范围内线性良好。
平均回收率为97.59%,RSD为1.64%。
结论:该方法简便稳定,准确,重现性好,可用于控制人参药材的质量。
关键词:人参;人参皂苷Rg1;人参皂苷Re;高效液相色谱法人参作为贵重药材,含有人参皂苷和多糖等成分。
具有大补元气、复脉固脱、补脾益气,生津,安神的功效。
用于体虚欲脱,肢冷脉微,脾虚食少,肺虚喘咳,津伤口渴,内热消渴,惊悸失眠,阳痿宫冷;心力衰竭,心原性休克等。
本文参考《中国药典》2000年版Ⅰ部人参项下含量测定方法[1],建立了人参皂苷Rg1和人参皂苷Re的含量测定方法。
结果表明,本实验所建立的方法含量重现性良好,专属性强,数据比较稳定。
1仪器与试药 1.1仪器Agilent 1100型高效液相色谱仪;色谱柱:Echrom C18柱(4.6 mm×250 mm,5 μm)Echrom工作站;AE240型双量程电子分析天平(十万分之一)。
1.2试剂高效液相用试剂为色谱纯,其余均为分析纯。
1.3对照品为中国药品生物制品检定所提供(人参皂苷Rg1,批号0703-200221,供含量测定用;人参皂苷Re,批号110754-200218,供含量测定用)。
1.4药材人参购自安徽亳州市场,经鉴定符合《中国药典》要求。
2方法学考察 2.1色谱条件流动相为乙腈0.05%磷酸(199∶801),检测波长为203 nm,Echrom C18柱,理论塔板数按人参皂苷Re峰计算不得低于2 500。
2.2对照品溶液的制备精密称取人参皂苷Rg1对照品8.00 mg,人参皂苷Re对照品6.00 mg,置10 ml量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀;精密量取1 ml,置5 ml量瓶中,加甲醇使溶解,并稀释至刻度,摇匀,即得(每1 ml含人参皂苷Rg1 0.160 mg,人参皂苷Re 0.120 mg)。
人参皂苷20(R)-25-OH-Rg3的分离纯化及结构鉴定
YANG Jiamei, LIU O hunying, JIN Fengxie, YU Hongshan ( School of Biological Engineering,Dalian Polytechnic University,Dalian 116034,China )
Abstract:A rare ginsenoside was purified from the biotransform ation products of natural ginsenosides. 0.25 g rare ginsenoside was obtained from 10 g samples after silica gel chrom atograph and crystalliza— tion,and its purity was 99.7 detected by H PLC.N M R result showed that the rare ginsenoside was
人参皂苷 20(R)一25一OH—Rg3的分离纯化及结构鉴定
杨 佳 美 , 刘 春 莹 , 金 凤 燮 , 鱼 红 闪
(大连 工 业 大 学 生 物 工 程 学 院 ,辽 宁 大 连 116034)
摘 要 :采 用硅 胶柱层析法和结 晶法 ,从人参皂 苷酶转 化产 物 中分 离得到 了一种 未知人 参皂苷 ,并 对其
1.1 材 料 人 参皂 苷 酶转化 产 物 ,实 验 室 自制 ;人 参皂 苷
标 准 品 Rb1、Rc、Rd、F2、Rg3、Rg5、C—K、Rh2,本 实验 室提供 ;薄层层 析板 Silica Gel 60一F254,德 国 Merck公 司 ;硅 胶 ,青 岛 海 洋 化 工 厂 ;甲醇 、氯仿 , 均为 分析 纯 。
人参皂苷水溶液热稳定性研究
水溶液在常压受热条件下,热稳定性差。受热时 间对人参皂苷水溶液的主要组分有何影响,影响 有多大,关系着人参皂苷提取物制备过程中提取、 浓缩等重要环节。本实验以红参须为研究对象, 二醇型人参皂苷 Rb1、Rc 和 Rd、三醇型人参皂苷 Rg1 和 Re 为检测指标, 采用 HPLC 测定其含量
[4-6]
作者简介: 余潇苓,女,硕士,研究实习员 Tel: (0571)87071670
5 种人参皂苷在加热 6 h 内,发生 在常压受热条件下,人参皂苷水溶
不同程度的降解反应,二醇类人参皂苷 Rb1、Rc 和 Rd 在加热 2~3 h 时,含量呈明显下降趋势,人参皂苷 Rd 降解速率最 液主要成分人参皂苷 Rg1、Re、Rb1、Rc 和 Rd 的含量,随加热时间延长而不断下降,3 h 后下降速率减缓。三醇类人参
表 2 回收率试验结果(n=6) Tab 2 Results of recovery tests(n=6)
人参 皂苷 Rg1 已知量 / mg 0.617 0 0.617 0 0.617 0 加入量 / mg 0.637 5 0.637 5 0.637 5 0.637 5 0.637 5 0.637 5 0.743 5 0.743 5 0.743 5 0.743 5 0.743 5 0.743 5 1.657 1.657 1.657 1.657 1.657 1.657 1.272 1.272 1.272 1.272 1.272 1.272 0.804 0 0.804 0 0.804 0 0.804 0 0.804 0 0.804 0 测得量 / mg 1.268 9 1.247 0 1.263 9 1.253 7 1.265 9 1.278 7 1.471 3 1.468 8 1.476 6 1.474 6 1.496 6 1.483 5 3.449 3.407 3.412 3.435 3.395 3.422 2.467 2.455 2.444 2.434 2.448 2.426 1.562 5 1.567 0 1.577 0 1.555 5 1.559 5 1.571 8 回收率 / % 102.26 103.51 101.48 99.87 101.78 103.79 98.43 98.10 99.16 98.88 101.84 100.08 102.51 99.96 100.28 101.70 99.29 100.89 102.53 101.61 100.77 99.95 101.10 99.36 99.18 99.75 100.98 98.31 98.81 100.33 99.6 1.00 100.9 1.13 100.8 1.17 99.4 1.38 102.1 1.41 平均回 收率 /% RSD/ %
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人参皂苷
恢复细胞正常的生理功 能
发挥抗氧化和清除自由基作 用减少脂质过氧化产物的沉 积 增加皮肤中SOD 含参皂苷)
(不含人参 皂苷)
实验结果
人参皂苷如何抵抗人体衰老
创新点
创 新 点
问题
可行性
人员?资金? 技术? 设备?.......
人参单价 ¥ 400/kg 人工价格 ¥ 1000/h 宣传及设备价格¥ 2000/h
Ginsenoside
LOGO
衰老机制
1.程序性衰老理论 2.自由基理论 3.遗传程序学说
程序性衰老理论
一个物种衰老的机率,可以通过他的基因预测。基 因决定了细胞能活多久。当细胞死亡,器官功能开 始失常,最终将不能维持生命所必需的生物学功能 。
自由基理论
细胞的衰老是细胞内发生化学反应过程中有害物质堆积的结果。在这 些化学反应中,产生称之为自由基的毒素。自由基最终损伤细胞,引 起个体衰老。伴随着衰老,损伤越来越多,许多细胞不能正常行使功 能或者死亡。当这些现象发生时,可能引起机体死亡。机体内时刻产 生着自由基,但同时又具有有效的自由基清除系统(如超氧化物歧化酶 等) ,使体内自由基维持在正常水平。随着年龄的增长,这种平衡逐渐 被破坏,造成自由基的过剩。过量自由基可通过过氧化作用攻击细胞 膜、线粒体膜等膜性结构及核酸、蛋白质和酶类等生物大分子,引起 细胞膜和线粒体膜上的不饱和脂肪酸发生脂质过氧化,产生脂质过氧 化物。这些脂质过氧化物及其分解产物使核酸及蛋白质分子发生交联 聚合,进一步造成DNA基因突变或复制异常及生物酶活力下降,最终导 致细胞功能严重受损以至衰老、死亡。
遗传程序学说
衰老也是由遗传基因决定,近年来端粒( telomere) 与端粒酶( telomerase)的发现使衰老的遗传程序学 说有了新进展。DNA每复制1次,端粒即丢失50~200 bp,当它缩短到一定程度时,细胞则停止分裂、衰老 、死亡。
Ginsenoside
是一种固醇类化合物,三萜皂苷。其只 在人参属植物中可发现到。人参皂苷被 视为是人参中的活性成分,因而成为研 究的目标。因为人参皂苷影响了多重的 代谢通路,所以其效能也是复杂的,而 且各种人参皂苷的效能是难以分离出来 的。采取人参提取分离技术。
以 上 数 据 仅 供 参 考
400+1000+2000=¥ 3400/(kg •h )
参考可得每份产品的 价格在50到100元之 间
总结
借助衰老学说,运用现代科学研究新技术,从 文献研究、实验研究及临床研究三方面入手 ,采用适当的实验方法, 进一步从细胞、分 子、基因水平对人参皂苷抗衰老机制进行多 方位研究,为人参药物、保健、美容等系列 产品的开发利用提供一定的理论指导。
实验
王红丽教授在进行人参皂甙抗皮肤衰老作用实验时发现 , 口服人参皂 苷100 mg/kg•d-1使D - 半乳糖所致的衰老模型小鼠皮肤中SOD活力、 羟脯氨酸含量明显升高,丙二醛(MDA)含量显著降低,血中CAT、谷胱甘 肽过氧化物酶( GSH2Px)活力显著升高。其机制如下: 刺激皮肤成纤维细胞 的活性, 促进胶原蛋 白合成 促进细胞的新陈代谢, 加快衰老皮肤细胞核 酸和蛋白质的合成