常见蛋白酶抑制剂

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蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂
因此研究者认为,应对这些药物开展长期的临床试验及售后监督,以弄清该合并症的发生率以及可能的治疗 方法。
相互作用
相互作用
该品可与利托那韦结合使用以提高药效,用于治疗用其他抗逆转录病毒疗法治疗无效的HⅣ。
毒副作用
毒副作用
美国疾病控制和预防中心Hoimberg等报告,使用蛋白酶抑制剂可增加HⅣ-1感染者的心肌梗死发病危险, 尽管发生率并不高。蛋白酶抑制剂治疗HⅣ-1感染有效,但可增加高脂血症和高血糖危险,并可导致胰岛素抵抗。 因此,有人担心,长期应用蛋白酶抑制剂会增加心肌梗死、心绞痛和脑血管意外发病危险。Hoimberg等在1993年 1月至2002年1月期间对美国8个城市9个HⅣ诊所的5672例HⅣ-1感染患者进行了长期观察(17712.4人年)。病 人平均年龄为42.6岁,其中男性占82%。Lancet 2002?360?1747 结果显示,1996年开始应用蛋白酶抑制剂, 数年后心肌梗死发病率有所增高(趋势检验,P=0.0125)。在3247例应用蛋白酶抑制剂的患者中,发生心肌梗 死19例(1.42/1000人年),而在2425例未用蛋白酶抑制剂的患者中,只发生2例(0.046/1000人年)?比值比 为7.1,95%CI为1.6~44.3;Cox比例危险模型—校正后危险率比为6.5,95%CI为0.9~47.8 。使用蛋白 酶抑制剂种类对心肌梗死发病率无显著影响。共发生15例心绞痛,其中11例用蛋白酶抑制剂(比值比为1.93, 95%CI为1.63~5.95)。发生脑血管意外14例,每组7例。研究者认为,蛋白酶抑制剂可增加心肌梗死发病危险, 但心肌梗死发病率并不高,并且通常发生在有其他心血管病危险因素的患者中,不要因此而给HⅣ-1感染患者停 用蛋白酶抑制剂。及早戒烟、诊断和治疗高脂血症、改善胰岛素抵抗和降压治疗都可减少蛋白酶抑制剂的这一并 发症。

常见蛋白酶抑制剂

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当前位置:生物帮〉实验技巧 > 生物化学技术>正文蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全日期:2012—06-13 来源:互联网标签:相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要: 破碎细胞提取蛋白质得同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速得被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解、以下列举了5种常用得蛋白酶抑制剂与她们各自得作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质得敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶得浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销!ﻫIbidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下得细胞培养系统广州赛诚生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质得同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速得被抑制以保持蛋白质不被降解、在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解、以下列举了5种常用得蛋白酶抑制剂与她们各自得作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质得敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶得浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中得溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂得沉淀。

在宝灵曼公司得目录上可查到更完整得蛋白酶与蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂PMSF1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)与巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保存一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0。

1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离与纯化步骤中加入新鲜得PMSF。

EDTA1)抑制金属蛋白水解酶;2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;3)溶液在4℃稳定六个月以上;4)工作浓度:0、5~1.5mmol/L、(0.2~0、5mg/ml);5)加入NaOH调节溶液得pH值,否则EDTA不溶解。

胃蛋白酶抑制剂(pepstanti n)l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D与凝乳酶;2)1mg/ml溶于甲醇中;3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;4)1作浓度:0、7ug/ml(1umol/L)5)在水中不溶解。

常见蛋白酶抑制剂

常见蛋白酶抑制剂

蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全标签:相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销!Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统广州赛诚生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂PMSF1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保存一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。

EDTA1)抑制金属蛋白水解酶;2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;3)溶液在4℃稳定六个月以上;4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。

胃蛋白酶抑制剂(pepst anti n)l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;2)1mg/ml溶于甲醇中;3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)5)在水中不溶解。

蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂引言蛋白酶抑制剂是一类用于抑制酶活性的化合物,其中蛋白酶是一种催化蛋白质水解的酶。

蛋白酶在生物体中起着重要的调控作用,参与多种生物反应的调节和控制。

然而,在某些情况下,蛋白酶的过度活化可能导致疾病的发生和发展。

因此,研发蛋白酶抑制剂成为一种重要的医药研究方向。

本文将介绍蛋白酶抑制剂的基本分类、作用机制以及在药物研发中的应用。

分类根据蛋白酶抑制剂对酶活性的抑制方式,蛋白酶抑制剂可分为两大类:1.反式抑制剂:反式抑制剂与酶结合后形成稳定的酶-抑制剂复合物,从而阻止酶催化反应的进行。

典型的例子是蛋白酶抑制剂Aprotinin,它通过与蛋白酶结合形成稳定的复合物,从而抑制蛋白酶的活性。

2.逆式抑制剂:逆式抑制剂通过与酶催化中心结合,改变酶的构象和活性。

这类抑制剂通常是模拟酶底物的分子结构,与酶催化中心发生特异性的相互作用。

逆式抑制剂的典型例子是酶的底物类似物,如硫氰酸酰胺(p-Tosyl-L-phenylalanine chloromethyl ketone,TPCK)可以选择性地抑制胰蛋白酶的活性。

作用机制蛋白酶抑制剂能够通过不同的机制来抑制蛋白酶的活性。

以下是几种常见的作用机制:1.受体拮抗作用:某些蛋白酶抑制剂能够与蛋白酶结合并阻断其与受体的相互作用,从而抑制了受体的活化。

这种机制在很多药物设计中都有重要的应用。

2.亲和力增强:一些蛋白酶抑制剂可以增强与酶的结合亲和力,从而阻止酶底物结合,进而抑制了酶的活性。

3.酶底物竞争:逆式抑制剂通过与酶催化中心竞争底物结合位点,从而阻断底物与酶的结合,进而抑制了酶活性的发生。

4.构象改变:某些蛋白酶抑制剂能够与酶发生特异性相互作用,改变酶的构象从而影响酶的活性。

应用蛋白酶抑制剂在医药领域有着广泛的应用。

以下是一些典型的应用示例:1.抗癌药物:蛋白酶在肿瘤细胞中起着重要的作用,因此蛋白酶抑制剂被广泛用于抗癌药物的研发。

例如,蛋白酶抑制剂Paclitaxel可以通过抑制肿瘤细胞内的蛋白酶活性来抑制细胞的增殖。

蛋白酶体抑制剂作用机制_概述说明以及解释

蛋白酶体抑制剂作用机制_概述说明以及解释

蛋白酶体抑制剂作用机制概述说明以及解释引言部分内容:1.1 概述蛋白酶体抑制剂是一类能够干扰细胞内蛋白酶体功能的化合物或分子。

蛋白酶体是细胞中主要负责蛋白质降解的细胞器,通过这一过程可以清除老化、变性或异常的蛋白质,并参与调控许多生物学过程。

因此,研究和理解蛋白酶体抑制剂的作用机制具有重要的理论和实践意义。

1.2 文章结构本文主要从以下几个方面对蛋白酶体抑制剂作用机制进行探讨:首先介绍了什么是蛋白酶体抑制剂以及其在细胞中的功能和调控;接着概述了常见的蛋白酶体抑制剂及其分类,并阐述了它们在药物研发中的应用和前景展望;然后解释了蛋白酶体抑制剂对蛋白降解途径和产生效果的机理,并探讨了其对生物学意义和影响因素;最后总结了文章的主要内容,并展望了蛋白酶体抑制剂在未来研究和应用方面的发展。

1.3 目的本文旨在对蛋白酶体抑制剂的作用机制进行综述,希望通过深入探讨蛋白酶体抑制剂对细胞内蛋白酶体的影响,加深我们对这类化合物或分子的理解,并为进一步研究和开发具有潜力的药物提供参考。

相信通过本文的阐述,读者能够更好地认识和理解蛋白酶体抑制剂在生物学领域中所扮演的关键角色。

2. 蛋白酶体抑制剂的作用机制:2.1 什么是蛋白酶体抑制剂:蛋白酶体抑制剂是一类能够干扰蛋白酶体功能的化合物或药物。

蛋白酶体是细胞内起着关键作用的小囊泡结构,负责进行细胞内的蛋白质降解和回收。

2.2 蛋白酶体在细胞中的功能和调控:蛋白酶体参与了多种生物学过程,包括细胞周期调控、免疫应答、应激响应以及疾病发展等。

蛋白酶体内含有多种不同类型的蛋白水解酶(即蛋白酶),它们协同作用来降解细胞内已经老化或异常的蛋白质,并将其分解成氨基酸片段供细胞再利用。

2.3 蛋白酶体抑制剂对蛋白酶体的影响与作用机制:蛋白酶体抑制剂可以干扰或阻止蛋白酶体的正常功能。

它们通过不同的机制影响蛋白酶体,例如抑制蛋白酶体中的水解酶活性、阻止蛋白质进入蛋白酶体或干扰蛋白质在蛋白酶体内的降解过程。

蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂

蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂PMSF PMSF即Phenylmethanesulfonyl fluoride,中文名为苯甲基磺酰氟。

分子式为C7H7FO2S,分子量为174.19,纯度>99%。

常用生化试剂,用于抑制蛋白酶.【配制方法】用异丙醇溶解PMSF成 1.74mg/ml(10mmol/L),分装成小份贮存于-20℃。

如有必要可配成浓度高达17.4mg/ml的贮存液(100mmol/L)。

【注意】PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。

一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。

凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

PMSF在水溶液中不稳定。

应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。

pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

蛋白水解酶抑制剂啊实验室常用的啊主要用于组织匀浆时用!!1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保存一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。

蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白质提取‎过程中常用‎的蛋白酶和‎磷酸酶抑制‎剂详细使用‎说明转自:http://www.bioas‎/html/980.html在与蛋白相‎关的检测中‎,最关键的一‎步便是蛋白‎质的提取。

在提取的过‎程中,我们要经常‎加入以防止‎。

另外在磷酸化‎蛋白的研究‎过程中,也是必不可‎少的。

本文详细总‎结了常用的‎P MSF、 Leupe‎p tin亮‎肽素、Aprot‎i nin抑‎肽酶、Pepst‎a tin胃‎、EDTA-Na2等以及NaF‎氟化钠、Na3VO‎4原矾酸钠、Beta-glyce‎r opho‎s phat‎e甘油磷酸‎钠、Na2P2‎O4焦磷酸钠等的‎溶液配制、贮存液与工‎作液浓度及‎保存条件。

一、蛋白酶抑制‎剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白‎酶抑制剂,如胰凝乳蛋‎白酶、胰蛋白酶和‎凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋‎白酶如木瓜‎蛋白酶。

溶解性:溶于异丙醇‎、乙醇、甲醇和丙二‎醇里>10mg/ml。

在水溶液中不‎稳定。

在100%异丙醇,25℃时稳定至少‎9个月。

分子量:174.2使用:贮存浓度2‎00mM,工作浓度1‎m MLeupe‎p tin 亮肽素特性‎:抑制丝氨酸‎和半胱氨酸‎蛋白酶如胰‎蛋白酶、木瓜蛋白酶‎、纤溶酶和组‎织蛋白酶B‎。

溶解性:高度溶于水‎(1mg/ml)。

4℃一周稳定,分成小份,冷冻在 -20℃至少6个月‎。

分子量:C20H3‎8N6O4‎×1/2 H2SO4‎:475.6 C20H3‎8N6O4‎x 1/2 H2SO4‎× H2O:493.6使用:贮存浓度1‎m g/ml,工作浓度0‎.5 ug/ml (1mM)。

Aprot‎i nin抑‎肽酶特性:丝氨酸蛋白‎酶抑制剂,抑制纤维蛋‎白溶酶、激肽释放酶‎、胰蛋白酶、糜蛋白酶的‎高活性。

不抑制凝血‎酶或因子X‎。

溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如0.1M tris,pH8.0)。

蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明

蛋白质提取过程中常用的蛋白酶和磷酸酶抑制剂详细使用说明一、蛋白酶抑制剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶、胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶。

溶解性:溶于异丙醇、乙醇、甲醇和丙二醇里>10mg/ml。

在水溶液中不稳定。

在100%异丙醇,25℃时稳定至少9个月。

分子量:174.2使用:贮存浓度200mM,工作浓度1mMLeupeptin 亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、纤溶酶和组织蛋白酶B。

溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。

4℃一周稳定,分成小份,冷冻在-20℃至少6个月。

分子量:C20H38N6O4 ×1/2 H2SO4:475.6 C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 × H2O:493.6使用:贮存浓度1mg/ml,工作浓度0.5 ug/ml (1mM)。

Aprotinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶、激肽释放酶、胰蛋白酶、糜蛋白酶的高活性。

不抑制凝血酶或因子X。

溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如0.1M tris,pH8.0)。

pH约7~8的溶液在4℃可保存1周,分装保存在-20℃可至少保存6个月。

避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。

分子量:6,512使用:贮存浓度1mg/ml,工作浓度0.06~2.0 ug/ml(0.01~0.3 uM)。

Pepstatin胃蛋白酶抑制剂特性:抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶、肾素、组织蛋白酶D、凝乳酶、许多微生物酸性蛋白酶溶解性:溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇,过夜溶解可达到1 mg/ml;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。

4℃稳定一周,分装储存于-20℃时可保存1个月。

分子量:685.9使用:贮存浓度1mg/ml,使用浓度0.7 μg/ml(1 μM)。

EDTA-Na2特性:金属蛋白酶抑制剂溶解性:溶于水至0.5M,在pH8-9的条件下,4℃稳定至少6个月分子量:372.24使用:工作浓度0.2~0.5 mg/ml(0.5~1.3 mM),不需现用现配,在溶液pH值调至8~9时再加入。

蛋白酶抑制剂成分

蛋白酶抑制剂成分

蛋白酶抑制剂成分蛋白酶抑制剂是一种可以抑制蛋白酶活性的化合物。

蛋白酶是一种酶类,它在细胞内起着非常重要的作用,可以分解蛋白质分子,使其成为更小的分子。

但是,在某些情况下,过多的蛋白酶活性会导致细胞内的蛋白质被分解得过快,从而对细胞造成伤害。

因此,蛋白酶抑制剂成分可以在一定程度上保护细胞免受蛋白酶的伤害。

目前,已经发现了很多种蛋白酶抑制剂成分,其中一些已经被广泛应用于医学和生物学领域。

以下是一些常见的蛋白酶抑制剂成分:1. 蛋白酶抑制剂-1(Protease Inhibitor-1)蛋白酶抑制剂-1是一种天然存在于人体中的蛋白质,它可以抑制多种蛋白酶的活性。

研究表明,蛋白酶抑制剂-1可以对多种疾病有治疗作用,如心血管疾病、肿瘤、炎症等。

2. 甲基硫代咪唑(Methylthioadenosine)甲基硫代咪唑是一种天然存在于人体中的化合物,它可以抑制多种蛋白酶的活性。

研究表明,甲基硫代咪唑可以对多种疾病有治疗作用,如肿瘤、炎症等。

3. 金黄色葡萄球菌蛋白酶抑制剂(Staphylococcus aureus Protease Inhibitor)金黄色葡萄球菌蛋白酶抑制剂是一种可以抑制金黄色葡萄球菌产生的多种蛋白酶的化合物。

这种化合物可以用于治疗金黄色葡萄球菌感染等疾病。

4. 蛋白酶抑制剂A(Protease Inhibitor A)蛋白酶抑制剂A是一种可以抑制多种蛋白酶活性的化合物。

研究表明,蛋白酶抑制剂A可以对多种疾病有治疗作用,如肿瘤、心血管疾病等。

5. 磷酸二酯酶抑制剂(Phosphodiesterase Inhibitor)磷酸二酯酶抑制剂是一种可以抑制多种磷酸二酯酶活性的化合物。

研究表明,磷酸二酯酶抑制剂可以对多种疾病有治疗作用,如心血管疾病、哮喘等。

总之,蛋白酶抑制剂成分具有广泛的应用前景,在医学和生物学领域都有着重要的作用。

未来,随着科学技术的不断发展,相信会有更多的蛋白酶抑制剂成分被发现,并用于治疗更多的疾病。

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度在与蛋白相关的检测中,首先最关键的一步便是蛋白质的提取。

蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。

另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的,本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂,EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3VO4 原矾酸钠,BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠,Na2P2O4 焦磷酸钠等。

对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制,贮存液与工作液浓度,保存都做了详细的说明。

蛋白酶抑制剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶(可逆的地面处理)。

溶解性:溶于异丙醇,乙醇,甲醇和丙二醇果>10mg/ml。

在水溶液中不稳定。

在100%异丙醇,+25℃时稳定至少9个月分子量:174.2使用:贮存浓度:200mM,工作浓度:1mMLeupeptin 亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,纤溶酶,和组织蛋白酶B 溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。

4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月分子量:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6使用:贮存浓度:1mg/ml,工作浓度0.5 ug/ml (1mM)Aprotinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶的高活性。

不抑制凝血酶或因子X。

溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如,tris,0.1M,pH8.0)。

pH约7-8的溶液在4℃可保存1周,分装保存在-20℃可至少保存6个月。

避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。

蛋白酶抑制剂种类

蛋白酶抑制剂种类

蛋白酶抑制剂种类
蛋白酶抑制剂是一类能够抑制蛋白酶活性的物质,主要存在于某些植物、动物和一些微生物中。

以下是一些常见的蛋白酶抑制剂种类:
1.胰蛋白酶抑制剂:抑制胰蛋白酶活性的蛋白质,是植物中广泛存在的一类蛋白质。

它们可以抑制胰蛋白酶、糜蛋白酶、羧基肽酶等,从而影响这些酶所催化的蛋白质的水解。

2.丝氨酸蛋白酶抑制剂:这是蛋白质水解酶中的一大类,主要包括抑胃素、抑胰蛋白酶、抑糜蛋白酶等。

它们能可逆地与相应的丝氨酸蛋白酶形成共价键,因而能够阻断某些内肽酶催化蛋白质水解的能力。

3.天冬氨酸蛋白酶抑制剂:主要存在于豆科植物中,能够抑制枯草杆菌蛋白酶的活性。

4.半胱氨酸蛋白酶抑制剂:这种抑制剂可以与半胱氨酸蛋白酶形成共价键,因而能够抑制这些酶的活性。

5.金属蛋白酶抑制剂:这类抑制剂主要通过与金属蛋白酶的活性中心发生相互作用,从而抑制其活性。

这些抑制剂在生物体的生长、发育和防御等方面有着重要的作用。

同时,在食品工业和医药工业中,它们也有着广泛的应用。

例如,某些蛋白酶抑制剂可以作为防腐剂,用于延长食品的保质期;在医药方面,也可以利用这些抑制剂来研发新药或探索新的治疗手段。

此外,还有一种与蛋白酶抑制剂相似的物质叫做抗蛋白酶,其主要作用是抑制或灭活蛋白酶的活性,以避免食物中的蛋白质被过度分
解或破坏。

例如,胰凝乳蛋白酶抑制剂就是一种抗胰蛋白酶,能抑制胰蛋白酶和糜蛋白酶的活性,从而保护消化道中的蛋白质。

如需获取更多有关蛋白酶抑制剂的信息,建议查阅相关文献或咨询生物学家获取帮助。

蛋白酶抑制剂PMSF

蛋白酶抑制剂PMSF

PMSF
分子式:C7H7FO2S
分子量:
1)抑制(如胰蛋白酶,,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于异丙醇(或无水乙醇)中;它对异丙醇没有特殊要求,分析纯即可,它也可以用DMSO进行配置,储存浓度同样为100mM
3)在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.;
4)工作浓度:17~174ug/ml(~1mM),储存液浓度为100或200mM;
5)在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。

(见水分解,使用前加入)
剧毒,严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。

为了安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。

一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。

凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。

在水溶液中不稳定。

应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。

在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。

pH值为时,20μmmol/lPMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。

PMSF的储存:2-8℃可以存放数月之久。

欲长期保存,可冻存在-20℃。

蛋白酶及其抑制剂

蛋白酶及其抑制剂
此Set中含有以下试剂AEBSF,HCl(Cat.No.101500) 50 mg,E-64(Cat.No.324890) 1 mg,EST (E-64d) (Cat.No.330005) 1 mg, Leupeptin, Hemisulfate (Cat.No.108975) 5 mg, Pepstatin A (Cat.No.516482) 5 mg, TLCK, HCl (Cat.No.616382) 50 mg, TPCK (Cat.No.616387) 250 mg
<1mM
50mg/2.09ml溶于水(100mM)
在1mM或更低浓度下使用
101500
说明书
50mg
100mg
500mg
1g
US$50.3
US$84.3
US$321
US$602
Amastatin
M.W.:474.6,可逆的丙氨酰-氨基肽酶抑制剂,其水溶液只可保存一天,其1mM的乙醇溶液在-20oC可保存一个月
冻干粉, -20oC保存,保质期五年,贮存液-20oC保存,保质期一个月
539132
说明书
1set
5set
US$92.5
US$366
Protease Inhibitor Cocktail Set III
溶于1ml DMSO的蛋白酶抑制剂混合物,每管含有如下组份: 100mM AEBSF (Cat.No. 101500), 80uM Aprotinin (Cat.No.616398), 5mM Bestatin(Cat.No.200484), 1.5mM E-64(Cat.No. 324890), 2mM Leupeptin(Cat.No.108975), 1mM Pepstatin A(Cat.No.516482),该混合物可用于哺乳动物细胞和组织抽提物蛋白酶的抑制,每ml可抑制20g组织中的蛋白酶

蛋白酶抑制剂的研究进展

蛋白酶抑制剂的研究进展

蛋白酶抑制剂的研究进展郭川微生物专业,200326031摘要:自然界共发现四大类蛋白酶抑制剂:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂、金属蛋白酶抑制剂和酸性蛋白酶抑制剂,本文就各大类蛋白酶抑制剂的结构特点,活性部位的研究概况及其在各领域应用的原理及进展。

关键词:蛋白酶抑制剂;结构;应用天然的蛋白酶抑制剂(PI)是对蛋白水解酶有抑制活性的一种小分子蛋白质,由于其分子量较小,所以在生物中普遍存在。

它能与蛋白酶的活性部位和变构部位结合,抑制酶的催化活性或阻止酶原转化有活性的酶。

在一系列重要的生理、病理过程中:如凝血、纤溶、补体活化、感染、细胞迁移等,PI发挥着关键性的调控作用,是生物体内免疫系统的重要组成部分。

从Kunitz等最早分离纯化出一种PI至今,已有多种PI被发现,根据其作用的蛋白酶主要分以下几类:抑制胰蛋白酶、胰凝乳蛋白酶等的丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶等的巯基蛋白酶抑制剂,抑制胃蛋白酶、组织蛋白酶D等的羧基蛋白酶抑制剂、抑制胶原酶、氨肽酶等的金属蛋白酶抑制剂等。

而根据作用于酶的活性基团不同及其氨基酸序列的同源性,可将自然界发现的PI分为四大类:丝氨酸蛋白酶抑制剂、巯基蛋白酶抑制剂(半胱氨酸蛋白酶抑制剂)、金属蛋白酶抑制剂和酸性蛋白酶抑制剂[1]。

1 结构与功能1.1丝氨酸蛋白酶抑制剂(Serine Protease Inhibitor,Serpin)丝氨酸蛋白酶抑制剂是一族由古代抑制剂趋异进化5亿年演变而来的结构序列同源的蛋白酶抑制剂。

Sepin为单一肽链蛋白质。

各种serpin大约有30%的同源序列,疏水区同源性高达70%。

血浆中的serpin多被糖基化,糖链经天东酰胺的酰胺基与主链相连。

位于抑制性serpin表面、距C端30~40个氨基酸处的环状结构区RSL(reactive site loop)中,存在能被靶酶的底物识别位点识别的氨基酸P1[2];近C端与P1相邻的氨基酸为P1’,依此类推,即肽链结构表示为N端-P15~P9~P1-P1’~P9’~P15’-C端。

蛋白酶抑制剂的种类

蛋白酶抑制剂的种类
1.9g/10ml溶于水(0.5M)
1:50倍稀释至终浓度10mM
MW:380.2
金属蛋白酶的可逆性螯合物,可能同时影响其他金属依赖性生物过程。
其水溶液很稳定,其贮存液(pH8.5的0.5M水溶液)在4oC可保存数月
Leupeptin,半硫酸盐,二结晶水
10-100uM
5mg/1.054ml溶于水(10mM)
1:100倍稀释至终浓度100uM
MW:493.6
可逆的丝氨酸及半胱氨酸蛋白酶制剂,可抑制胰蛋白酶样蛋白酶及一些半胱氨酸蛋白酶如:Lys-C内切蛋白酶,激肽释放酶,木瓜蛋白酶,凝血酶,Cathepsin B及胰蛋白酶。
工作液的稳定期为数小时,贮存液(10mM水溶液)在4oC时稳定期为一周,-20oC时稳定期为一个月
Aprotinins
0.6-2ug/ml
10mg/ml溶于PBS
1:5000倍稀释至终浓度2ug/ ml
MW:6512
可逆的丝氨酸蛋白酶抑制剂,可抑制纤溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶,但不抑制凝血酶和Factor Xa。
非常稳定,当pH>12.8时失去活性,可溶于水(10mg/ml),-20oC下可长期保存
MW:505.5
不可逆的半胱氨酸蛋白酶抑制剂,可抑制Cathepsin B,L,S及木瓜蛋白酶。
避光保存,在pH5-9的缓冲液中,30OC下其半衰期为37小时,0OC下其半衰期为两周
Cathepsin/ Subtilisin Inhibitor
10-100uM
1mg/193ul溶于DMSO或乙醇(10mM)
工作液稳定期仅为数小时,但其10mM的水(或缓冲液)溶液贮存液在4oC可保存一周,在-20oC可保存一个月,还可溶于甲醇或DMSO

常用蛋白酶抑制剂

常用蛋白酶抑制剂

添加蛋白酶抑制剂是大多数细胞裂解和蛋白质提取的必要步骤。

蛋白质提取过程中,内源性蛋白酶会降解蛋白质,导致蛋白质产量的降低。

在裂解试剂中加入蛋白酶抑制剂,可防止提取蛋白的降解,确保在细胞裂解后获得蛋白质的产量。

蛋白酶抑制剂是生物或化学化合物,其作用是可逆或不可逆地结合蛋白酶。

大多数已知的蛋白酶属于四个进化上不同的酶家族之一,基于功能基团参与肽键的裂解。

一般情况下,蛋白提取过程中总是需要使用蛋白酶抑制剂。

大多数情况下,需使用几种不同抑制剂化合物的混合物(也称Cocktail,鸡尾酒),以确保蛋白质提取物在分析之前不会降解。

常见蛋白酶抑制剂
常见蛋白酶抑制剂活性组分
不可
常用蛋白酶抑制剂混合物组成
*EDTA影响蛋白活性时,需实验是否需要添加EDTA。

蛋白酶抑制剂技术原理和选择指南

蛋白酶抑制剂技术原理和选择指南

蛋白酶抑制剂技术原理和选择指南当细胞破碎的时候,蛋白水解酶就会被释放出来或被激活,使电泳结果复杂化,影响最终结果分析。

为了避免这些情况的出现,建议在样品制备时尽可能在低温下进行。

此外,许多蛋白酶在PH9以上就失活了,因此Tris碱,碳酸钠或碱性载体两性电解质往往能抑制蛋白水解。

但是有些蛋白酶在上述条件下仍然保持着活性,此时应当使用蛋白酶抑制剂。

因此对于我们想要研究的蛋白来说,选择性和有效的抑制这些蛋白酶对于蛋白纯化路线设计来说显得尤为重要。

蛋白酶抑制剂与蛋白酶一样,都是纷繁复杂的,通常使用许多化学物质作为蛋白酶抑制剂,如PMSF 和leupeptin。

而且由于一种蛋白酶抑制剂只对某一类蛋白酶起作用,因此通常建议复合使用蛋白酶抑制剂,如广谱蛋白酶抑制剂“鸡尾酒”,见下表(来自《蛋白质电泳实验技术》)。

蛋白酶抑制剂有效抑制的酶PMSF(Pheylmethylsulfonylfluoride)是很常见的抑制剂,使用浓度为1mmol/L不可逆抑制丝氨酸水解酶和一些半胱氨酸水解酶。

AEBSF 丝氨酸抑制剂,使用浓度为4mmol/L AEBSF的抑制活性与PMSF相近,但它更易溶于水而且毒性低EDTA,EGTA,使用浓度为1mmol/L 通过鳌合蛋白酶维持活性所必需的金属离子来抑制金属蛋白酶。

多肽蛋白酶抑制剂,使用浓度为2-20ug/ml 亮肽素(Leupeptin)能抑制多种丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶;抑肽素(pepstatin)抑制天冬氨酸蛋白酶;抑肽酶(aprotinin)能抑制许多丝氨酸蛋白酶;苯丁抑制剂(bestatin)能抑制氨基酸多肽酶TLCk,TPCK,使用浓度为0.1-0.5mmol/L不可逆的抑制丝氨酸和半胱氨酸的蛋白酶苄脒(Benzamidine)使用浓度为1-3mmol/L抑制丝氨酸蛋白酶但是这样配置溶液进行处理,有时也是颇为麻烦,而且效果可能并不好,目前有一些厂家试剂在简便操作,和抑制效果方面有不俗的表现,可以考虑在实验中选用,节约时间和便于结果分析。

常见蛋白酶抑制剂

常见蛋白酶抑制剂

当前位置:生物帮 > 实验技巧 > 生物化学技术 > 正文蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全日期:2012-06-13 来源:互联网标签:相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销!Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统广州赛诚生物基因表达调控专题蛋白酶抑制剂破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂PMSF1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);2)10mg/ml溶于异丙醇中;3)在室温下可保存一年;4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。

EDTA1)抑制金属蛋白水解酶;2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;3)溶液在4℃稳定六个月以上;4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。

胃蛋白酶抑制剂(pepst anti n)l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;2)1mg/ml溶于甲醇中;3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)5)在水中不溶解。

7组 蛋白酶抑制剂

7组  蛋白酶抑制剂




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各类蛋白质类PI的作用
ห้องสมุดไป่ตู้
丝氨酸PI:抗胰蛋白酶和凝 乳蛋白酶等多种蛋白酶 半胱氨酸PI:抑制木瓜蛋白

酶、组织蛋白酶和天冬酰胺
内肽酶等的活性

金属PI:抑制多种含有金属 离子活性中心的蛋白酶活性 酸性PI:

其他天然小分子类蛋白酶抑制剂

主要包括:植物中的黄酮类、多酚类化合物、以
及其他多种天然化合物,例如姜黄素、茶黄素、
艾滋病功能性治愈

2013年,美国首次“功能性治愈”艾滋病。
联合治疗使得艾滋病功能性治愈成为可能,即采用“鸡尾 酒”式的混合药物治疗方法,用蛋白酶抑制剂与逆转录酶 抑制剂联合治疗艾滋病。在疾病治疗方面,对感染者实施 早期的抗病毒药物治疗,使艾滋病新发感染病降低了67%.
虽然国内抗艾药物市场在逐渐走向成熟,但在蛋白酶抑制剂领域,中 国尚属于起步阶段。尽管今后随着其他蛋白酶抑制剂药物专利的到期,国 内企业会争相仿制,品种也会增多,但竞争亦将更加激烈。届时,制药企 业不仅要与进口药争市场,还要直面国内企业的竞争。因此,鉴于蛋白酶 抑制剂的市场在整个艾滋病药物市场增长的驱动下在相应扩大这一趋势, 国内抗艾滋病药生产企业不可对已取得的市场地位盲目乐观,应密切关注 国际市场上的动态,积极应对最新研发动态和产品的挑战和冲击。
第七节
蛋白酶抑制剂
什么是蛋白酶?

蛋白酶(Protease)是一类酶的总称,这类 酶能水解蛋白质里面的肽键

蛋白酶广泛存在于动物内脏、植物茎叶、 果实和微生物中

蛋白酶广泛应用在皮革、毛皮、丝绸、

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度

常用蛋白酶抑制剂和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度在与蛋白相关的检测中,首先最关键的一步便是蛋白质的提取。

蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂以防止蛋白质的降解。

另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的,本文总结了常用的蛋白酶抑制剂PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂,EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3VO4 原矾酸钠,BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠,Na2P2O4 焦磷酸钠等。

对这些蛋白酶抑制剂的溶解配制,贮存液与工作液浓度,保存都做了详细的说明。

蛋白酶抑制剂PMSF:特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶(可逆的地面处理)。

溶解性:溶于异丙醇,乙醇,甲醇和丙二醇果>10mg/ml。

在水溶液中不稳定。

在100%异丙醇,+25℃时稳定至少9个月分子量:174.2使用:贮存浓度:200mM,工作浓度:1mMLeupeptin 亮肽素特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,纤溶酶,和组织蛋白酶B 溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。

4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月分子量:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6使用:贮存浓度:1mg/ml,工作浓度0.5 ug/ml (1mM)Aprotinin抑肽酶特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂,抑制纤维蛋白溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶的高活性。

不抑制凝血酶或因子X。

溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如,tris,0.1M,pH8.0)。

pH约7-8的溶液在4℃可保存1周,分装保存在-20℃可至少保存6个月。

避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。

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蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全
日期:2012-06-13 来源:互联网
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相关专题:解析蛋白酶活性测定聚焦蛋白酶研究新进展
摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度
恩必美生物新一轮2-5折生物试剂大促销!
Ibidi细胞灌流培养系统-模拟血管血液流动状态下的细胞培养系统
广州赛诚生物基因表达调控专题
蛋白酶抑制剂
破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶,这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。

在蛋白质提取过程中,需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。

以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点,因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同,因此需要调整各种蛋白酶的浓度。

由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低,尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。

在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂
PMSF
1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);
2)10mg/ml溶于异丙醇中;
3)在室温下可保存一年;
4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);
5)在水液体溶液中不稳定,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。

EDTA
1)抑制金属蛋白水解酶;
2)0.5mol/L水溶液,pH8~9;
3)溶液在4℃稳定六个月以上;
4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);
5)加入NaOH调节溶液的pH值,否则EDTA不溶解。

胃蛋白酶抑制剂(pepst anti n)
l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶,血管紧张肽原酶,组织蛋白酶D和凝乳酶;
2)1mg/ml溶于甲醇中;
3}储存液在4℃一周内稳定,-20℃稳定6个月;
4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)
5)在水中不溶解。

亮抑蛋白酶肽(leupeptin)
1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶,如木瓜蛋白酶,血浆酶和组织蛋白酶B;
2)lOmg/ml溶于水;
3)储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度0.5mg/ml。

胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)
1)抑制丝氨酸蛋白酶,如血浆酶,血管舒缓素,胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;
2)lOmg/ml溶于水,pH7~8
3}储存液4℃稳定一周,-20℃稳定6个月;
4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L);
5)避免反复冻融:
6)在pH>12.8时失活。

蛋白酶抑制剂混合使用
35ug/ml PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂
0.3mg/ml EDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂
0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂
0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)……………广谱蛋白酶抑制剂
常用蛋白酶抑制剂表
作者:青岚点击:次
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首页实验实验中心常用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度
常用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮
存与工作液浓度
2014-06-09 23:01:02 来源:浏览次数:119 网友评论 0 条
[常用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度] 在与蛋白相关的检测中,首先最关键的一步便是蛋白质的提取。

蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)以防止蛋白质的降解。

另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的,本文总结了常用的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(proteas [蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸]
在与蛋白相关的检测中,首先最关键的一步便是蛋白质的提取。

蛋白质的提取过程中,我们要经常加和蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)以防止蛋白质的降解。

另外在磷酸化蛋白的研究过程中,磷酸酶抑制剂也是必不可少的,本文总结了常用的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF,Leupeptin 亮肽素,Aprotinin抑肽酶,Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(pr otease inhibitor),EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠,Na3VO4 原矾酸钠,B ETA-glycerophosphate甘油磷酸钠,Na2P2O4 焦磷酸钠等。

对这些蛋白酶抑制剂(prote ase inhibitor)的溶解配制,贮存液与工作液浓度,保存都做了详细的说明。

蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)
PMSF:
特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor),如胰凝乳蛋白酶,胰蛋白酶和凝血酶,也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶(可逆的地面处理)。

溶解性:溶于异丙醇,乙醇,甲醇和丙二醇果>10mg/ml。

在水溶液中不稳定。

在100%异丙醇,+25℃时稳定至少9个月
分子量:174.2
使用:贮存浓度:200mM,工作浓度:1mM
Leupeptin 亮肽素
特性:抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶,木瓜蛋白酶,纤溶酶,和组织蛋白酶B 溶解性:高度溶于水(1mg/ml)。

4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月
分子量:C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6
C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6
使用:贮存浓度:1mg/ml,工作浓度0.5 ug/ml (1mM)
Aprotinin抑肽酶
特性:丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor),抑制纤维蛋白溶酶,激肽释放酶,胰蛋白酶,糜蛋白酶的高活性。

不抑制凝血酶或因子X。

溶解性:易溶于水(10mg/ml)或缓冲液(例如,tris,0.1M,pH8.0)。

pH约7-8的溶液在4℃可保存1周,分装保存在-20℃可至少保存6个月。

避免反复冻融, pH>12.8的碱性环境可使其灭活。

分子量:6,512
使用:贮存浓度:1mg/ml, 工作浓度:0.06–2.0 ug/ml(0.01–0.3 uM)
Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)
特性:抑制天冬氨酸(酸)蛋白酶如胃蛋白酶,肾素,组织蛋白酶D,凝乳酶,许多微生物酸性蛋白酶
溶解性:溶于甲醇约1mg/ml;可溶于乙醇,过夜溶解可达到1 mg/ml;在6当量乙酸中溶解度为300ug/ml。

4℃稳定一周,分装储存于-20℃时可保存1个月
分子量: 685.9
使用:贮存浓度:1mg/ml,使用浓度:0.7 μg/ml(1 μM)
EDTA-Na2
特性:金属蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)
溶解性:溶于水至0.5M,在pH8-9的条件下,4℃稳定至少6个月
分子量: 372.24
使用:工作浓度:0.2–0.5 mg/ml(0.5–1.3 mM),不需现用现配,在溶液pH值调至8-9时再加入。

磷酸酶抑制剂
NaF氟化钠
溶解性:溶于水
分子量:41.99
使用:贮存液:5M 工作浓度:10-20mM
Na3VO4 原矾酸钠
分子量:183.91
溶解性:溶于水,我们购买过来的是原矾酸钠.原矾酸钠需要经过处理以后才能成为激活的矾酸钠,激活的矾酸钠才具有抑制去磷酸化的作用.原矾酸钠变成激活的矾酸钠的过程是:
100mM原矾酸钠激活储存液配制
(1).取0.183克的原矾酸钠溶解于10ml的双蒸水中,加酸调节PH至10(颜色变黄)
(2).煮至无色
(3).室温冷却
(4).重调PH至10
(5)重复(1)(2)(3)(4)直至溶液保持无色,并且PH稳定于10,分装100ul/管,每1 0ml裂解液加一管.(终浓度为1mM),-20度保存.
使用:贮存液:100mM 工作浓度:1mM
BETA-glycerophosphate 甘油磷酸钠
溶解性:溶于水
分子量:306.11
使用:贮存液:100mM 工作浓度:25mM
Na2P2O4 焦磷酸钠
溶解性:溶于水
分子量:265.9
贮存液:100mM, 工作浓度:1-2 mM
关键词:蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸。

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