常见蛋白酶抑制剂

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蛋白酶及蛋白酶抑制剂大全

日期：2012-06-13 来源：互联网

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摘要: 破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度

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蛋白酶抑制剂

破碎细胞提取蛋白质的同时可释放出蛋白酶，这些蛋白酶需要迅速的被抑制以保持蛋白质不被降解。在蛋白质提取过程中，需要加入蛋白酶抑制剂以防止蛋白水解。以下列举了5种常用的蛋白酶抑制剂和他们各自的作用特点，因为各种蛋白酶对不同蛋白质的敏感性各不相同，因此需要调整各种蛋白酶的浓度。由于蛋白酶抑制剂在液体中的溶解度极低，尤其应注意在缓冲液中加人蛋白酶抑制剂时应充分混匀以减少蛋白酶抑制剂的沉淀。在宝灵曼公司的目录上可查到更完整的蛋白酶和蛋白酶抑制剂表。

常用抑制剂

PMSF

1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶，凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶);

2)10mg/ml溶于异丙醇中;

3)在室温下可保存一年;

4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1.0mmol/L);

5)在水液体溶液中不稳定，必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF。

EDTA

1)抑制金属蛋白水解酶;

2)0.5mol/L水溶液，pH8~9;

3)溶液在4℃稳定六个月以上;

4)工作浓度:0.5~1.5mmol/L. (0.2~0.5mg/ml);

5)加入NaOH调节溶液的pH值，否则EDTA不溶解。

胃蛋白酶抑制剂(pepst anti n)

l)抑制酸性蛋白酶如胃蛋白酶，血管紧张肽原酶，组织蛋白酶D和凝乳酶;

2)1mg/ml溶于甲醇中;

3}储存液在4℃一周内稳定，-20℃稳定6个月;

4)1作浓度:0.7ug/ml(1umol/L)

5)在水中不溶解。

亮抑蛋白酶肽(leupeptin)

1)抑制丝氨酸和巯基蛋白酶，如木瓜蛋白酶，血浆酶和组织蛋白酶B;

2)lOmg/ml溶于水;

3)储存液4℃稳定一周，-20℃稳定6个月;

4)工作浓度0.5mg/ml。

胰蛋白酶抑制剂(aprotinin)

1)抑制丝氨酸蛋白酶，如血浆酶，血管舒缓素，胰蛋白酶和胰凝乳蛋白酶;

2)lOmg/ml溶于水，pH7~8

3}储存液4℃稳定一周，-20℃稳定6个月;

4)工作浓度:0.06~2.0ug/ml(0.01~0.3umol/L);

5)避免反复冻融:

6)在pH>12.8时失活。

蛋白酶抑制剂混合使用

35ug/ml PMSF…………………………………丝氨酸蛋白酶抑制剂

0.3mg/ml EDTA…………………………………金属蛋白酶抑制剂

0.7ug/ml胃蛋白酶抑制剂(Pepstatin)…………酸性蛋白酶抑制剂

0.5ug/ml亮抑蛋白肽酶(Leupeptin)……………广谱蛋白酶抑制剂

常用蛋白酶抑制剂表

作者：青岚点击：次

来源于-生物秀知道

首页实验实验中心常用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度

常用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮

存与工作液浓度

2014-06-09 23:01:02 来源：浏览次数：119 网友评论 0 条

[常用蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)和磷酸酶抑制剂的贮存与工作液浓度] 在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提取。蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF，Leupeptin 亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(proteas [蛋白酶抑制剂分子量溶解性磷酸酶抑制剂工作浓度贮存液胰蛋白酶丝氨酸]

在与蛋白相关的检测中，首先最关键的一步便是蛋白质的提取。蛋白质的提取过程中，我们要经常加和蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)以防止蛋白质的降解。另外在磷酸化蛋白的研究过程中，磷酸酶抑制剂也是必不可少的，本文总结了常用的蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)PMSF，Leupeptin 亮肽素，Aprotinin抑肽酶，Pepstatin胃蛋白酶抑制剂(pr otease inhibitor)，EDTA-Na2等以及磷酸酶抑制剂NaF氟化钠，Na3VO4 原矾酸钠，B ETA-glycerophosphate甘油磷酸钠，Na2P2O4 焦磷酸钠等。对这些蛋白酶抑制剂(prote ase inhibitor)的溶解配制，贮存液与工作液浓度，保存都做了详细的说明。

蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)

PMSF：

特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)，如胰凝乳蛋白酶，胰蛋白酶和凝血酶，也抑制半胱氨酸蛋白酶如木瓜蛋白酶（可逆的地面处理）。

溶解性：溶于异丙醇，乙醇，甲醇和丙二醇果>10mg/ml。在水溶液中不稳定。在100%异丙醇，+25℃时稳定至少9个月

分子量：174.2

使用：贮存浓度：200mM，工作浓度：1mM

Leupeptin 亮肽素

特性：抑制丝氨酸和半胱氨酸蛋白酶如胰蛋白酶，木瓜蛋白酶，纤溶酶，和组织蛋白酶B 溶解性：高度溶于水（1mg/ml）。4℃一周稳定,分成小份冷冻在-20℃至少6个月

分子量：C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4:475.6

C20H38N6O4 x 1/2 H2SO4 x H2O:493.6

使用：贮存浓度：1mg/ml，工作浓度0.5 ug/ml (1mM)

Aprotinin抑肽酶

特性：丝氨酸蛋白酶抑制剂(protease inhibitor)，抑制纤维蛋白溶酶，激肽释放酶，胰蛋白酶，糜蛋白酶的高活性。不抑制凝血酶或因子X。