【CN109970882A】一种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法【专利】
一种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法
一种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法多硫酸化硫酸软骨素制备方法
多硫酸化硫酸软骨素是一种重要的生物活性分子，具有广泛的应用前景。
下面
介绍一种制备多硫酸化硫酸软骨素的方法。
首先，准备好所需的材料。
这些材料包括硫酸软骨素、过硫酸铵和一定量的溶剂。
硫酸软骨素一般可以通过鱼骨、牛骨等动物骨骼的提取物得到。
接下来，在一个反应容器中将硫酸软骨素溶解在溶剂中，形成硫酸软骨素溶液。
溶剂的选择可以根据具体实验需要进行调整，常用的溶剂有水、甲醇等。
然后，将过硫酸铵逐渐加入到硫酸软骨素溶液中，并同时进行搅拌以确保充分
混合。
过硫酸铵的加入量可以根据实验需求进行调整，一般建议按照硫酸软骨素的质量比例添加。
接下来，将反应容器密封，并在适当的温度条件下进行反应。
反应温度可以根
据不同的实验需要进行调整，一般在常温下进行。
反应完成后，可以通过一些物理或化学方法去除未反应的杂质，并将产物进行
纯化和干燥。
最常用的纯化方法是溶剂萃取和沉淀法。
最后，得到的多硫酸化硫酸软骨素可以用于进一步的应用研究或者制备相应的
产品。
综上所述，这种制备多硫酸化硫酸软骨素的方法简便易行，可以根据实验需求
进行调整。
它为多硫酸化硫酸软骨素的制备提供了一种有效的途径，对于促进其应用和研究具有重要意义。
一种多硫酸化硫酸软骨素及其制备方法[发明专利]
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专利名称：一种多硫酸化硫酸软骨素及其制备方法专利类型：发明专利
发明人：姬胜利,崔慧斐,迟延青,曹吉超,王凤山
申请号：CN200510045393.9
申请日：20051220
公开号：CN1789287A
公开日：
20060621
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明公开了一种多硫酸化硫酸软骨素，其分子中含有葡萄糖醛酸衍生物和乙酰氨基半乳糖衍生物，其特征是：分子结构由2－O－硫酸基－葡萄糖醛酸－(1→3)－2－N－乙酰基－2－脱氧－4或6－O－硫酸基半乳糖组成，分子量为1kD～30kD，硫酸根与羧酸根的比值为2～4。
本发明还公开了该多硫酸化硫酸软骨素制备方法，是将硫酸软骨素磺化得到。
本发明的多硫酸化硫酸软骨素具有明显的抗肿瘤增殖和抑制肿瘤转移、抑制肥大细胞脱颗粒等作用，抗凝效价≤10IU/mg，并且还具有较强的抗炎和镇痛作用。
申请人：山东大学
地址：250100 山东省济南市历下区山大南路27号
国籍：CN
代理机构：济南圣达专利商标事务所
代理人：郑华清
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一种酶法制备硫酸软骨素的方法[发明专利]
![一种酶法制备硫酸软骨素的方法[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/7dfa3f05a22d7375a417866fb84ae45c3a35c25e.png)
(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201610997085.4(22)申请日 2016.11.14(71)申请人 江南大学地址 214122 江苏省无锡市蠡湖大道1800号(72)发明人 康振 陈坚 堵国成 周正雄 (74)专利代理机构 哈尔滨市阳光惠远知识产权代理有限公司 23211代理人 张勇(51)Int.Cl.C12P 19/26(2006.01)C12N 1/21(2006.01)C12N 1/19(2006.01)C12R 1/19(2006.01)C12R 1/84(2006.01)(54)发明名称一种酶法制备硫酸软骨素的方法(57)摘要本发明公开了一种酶法制备硫酸软骨素的方法，属生物医药领域。
本发明制备硫酸软骨素是以软骨素为底物，经微生物细胞异源表达的软骨素4-硫酸转移酶催化形成具有生物学活性的硫酸软骨素A或软骨素6-硫酸转移酶催化形成具有生物学活性的硫酸软骨素C，并经酰基硫酸转移酶提供PAPS硫酸基供体及再生系统。
本发明为生物学活性物质硫酸软骨素A和硫酸软骨素C的合成及工业化生产方式提供了新的途径。
权利要求书1页 说明书4页 附图2页CN 106755205 A 2017.05.31C N 106755205A1.一种制备硫酸软骨素的方法，其特征在于，是以含软骨素为底物，经PAPS再生系统和软骨素4-硫酸转移酶硫酸化修饰形成不含其他糖胺聚糖的CSA；或者经PAPS再生系统和软骨素6-硫酸转移酶硫酸化修饰形成不含其他糖胺聚糖的CSC；编码所述软骨素4-硫酸转移酶、软骨素6-硫酸转移酶的基因来源于动物，在微生物中异源表达得到；所述软骨素4-硫酸转移酶是将NCBI中Gene ID：58250的基因以pET系列载体为表达载体，在大肠杆菌进行表达得到的，或者以pPIC系列载体为表达载体在毕赤酵母中表达得到的；所述软骨素6-硫酸转移酶是将NCBI中Gene ID：53374的基因以pET系列载体为表达载体，在大肠杆菌中表达得到的；或者以pPIC系列载体为表达载体在毕赤酵母中表达得到。
一种硫酸软骨素的制备方法及应用[发明专利]
![一种硫酸软骨素的制备方法及应用[发明专利]](https://img.taocdn.com/s3/m/f826f1cae2bd960591c677b7.png)
专利名称：一种硫酸软骨素的制备方法及应用专利类型：发明专利
发明人：王秋音,赵健,王光音
申请号：CN202010550758.8
申请日：20200616
公开号：CN111471120A
公开日：
20200731
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供了一种硫酸软骨素的制备方法，所述硫酸软骨素的制备方法包括以下步骤：预处理；第一次提取；第二次提取；第一次超滤浓缩；第一次醇沉；醇洗脱水。
本发明还提供了一种上述硫酸软骨素在制备动脉粥样硬化疾病药物中的应用。
本发明能够高效进行硫酸软骨素的制备工作，以酶解法为主，并辅以超声波振动手段，促进酶解过程的启动以及提高了酶解过程中的酶活，显著的提高硫酸软骨素的生产效率，且能够有效促进硫酸软骨素与聚集蛋白糖糖链上的相连接核心蛋白质的糖苷键断裂，并对酶解所产生的多肽链及杂质蛋白进行针对性的水解，能够有效降低产物中的蛋白质残留问题，显著提高所得成品硫酸软骨素的纯度。
申请人：北京赫尔默技术有限公司
地址：100000 北京市顺义区天竺镇天竺家园17号楼17幢2层2711室
国籍：CN
代理机构：北京沁优知识产权代理有限公司
代理人：郭峰
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(19)中华人民共和国国家知识产权局
(12)发明专利申请
(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 201910175103.4
(22)申请日 2019.03.08
(71)申请人 河北常山生化药业股份有限公司
地址 053000 河北省石家庄市正定县银川
大街北首
(72)发明人 孟红卫 杨书红 赵红星 陈静
戚亦宁 李凯凯 韩胜男 李志敏
(74)专利代理机构 石家庄新世纪专利商标事务
所有限公司 13100
代理人 齐兰君
(51)Int.Cl.
C08B 37/08(2006.01)
(54)发明名称一种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法(57)摘要本发明公开了一种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法，它包括多硫酸化硫酸软骨素制备、分离纯化、去甲酰胺、脱色、沉淀、冻干等步骤，本发明采用氯磺酸-甲酰胺混合液对硫酸软骨素进行磺化、加热降解，之后醇沉、过滤、脱色等操作，进一步纯化得到可改善骨关节功能的多硫酸化硫酸软骨素。
本发明将磺化和降解反应分开，先加入氯磺酸和甲酰胺进行磺化，后加热进行降解，且经过多步的醇沉和过滤，得到符合分子量、硫羧比、葡萄糖醛酸、游离硫酸盐含量等关键质量指标的多硫酸化硫酸软骨素，高度磺化的多硫酸软骨素含量高于70%，硫酸软骨素硫酸化程度高，性质稳定，不易被天然的硫酸软骨素酶降解，重均分子量Mw为7300～9300Da，具有良好的关节功能改善作用，可用于维持人和动物关节软骨完整
性。
权利要求书1页 说明书6页 附图2页CN 109970882 A 2019.07.05
C N 109970882
A
权 利 要 求 书1/1页CN 109970882 A
1.一种多硫酸化硫酸软骨素的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
a. 制备多硫酸化硫酸软骨素
在搅拌状态下，将15%～30%质量百分比浓度的硫酸软骨素甲酰胺溶液与氯磺酸和甲酰胺混合液混合后，在20～30℃下搅拌5小时，再升温至60～70℃降解后搅拌3～5小时，然后加入反应液4体积倍量的95%乙醇搅拌后静置，经固液分离后得到多硫酸化硫酸软骨素沉淀，所述氯磺酸和甲酰胺混合液中氯磺酸与硫酸软骨素的质量比为1.5～1.7:1，甲酰胺与硫酸软骨素的质量比为3～4:1；
b. 分离纯化多硫酸化软骨素
1、去甲酰胺和沉淀
将多硫酸化硫酸软骨素沉淀加入10倍硫酸软骨素投料质量倍量的纯化水溶解后，用氢氧化钠溶液调节pH至7.5～9.0，再加入上述反应液4体积倍量的95%乙醇，静置12小时后沉淀，再将固液分离后的沉淀加10倍硫酸软骨素投料质量倍量的纯化水溶解后，用氢氧化钠溶液调节pH至7.5～9.0后加热至60～65℃，保温3小时后经0.45μm滤膜过滤，再将滤液加入上述反应液4体积倍量的95%乙醇，再静置12小时后固液分离得到去甲酰胺的多硫酸化硫酸软骨素沉淀；
2、脱色
将去甲酰胺的多硫酸化硫酸软骨素沉淀溶于10倍硫酸软骨素投料质量倍量的纯化水中后加入1%溶液量NaCl搅拌溶解，再持续加入30%过氧化氢溶液，当溶液中过氧化氢浓度为0.5%时，用20%氢氧化钠溶液调整溶液pH值为10，然后在30℃、持续搅拌下将溶液在0.05～0.10MPa的真空度下抽真空脱色12小时，过程中保持pH值10，然后再将溶液恢复常压后在20～30℃下继续静置氧化脱色12小时，得到脱色的多硫酸化硫酸软骨素溶液；
3、沉淀
将上述脱色的多硫酸化硫酸软骨素溶液经0.45µm的膜过滤后，用3M盐酸调pH值至8.0，再加入步骤a中所述反应液4体积倍量的95%乙醇，静置沉淀12小时后固液分离，再将得到的多硫酸化硫酸软骨素沉淀加入10倍硫酸软骨素投料质量倍量的纯化水溶解，然后加入溶液量的1%NaCl搅拌溶解后，调节溶液pH值为6.0～7.0，经0.45µm或0.22µm的膜过滤得到过滤后的多硫酸化硫酸软骨素沉淀；
4、冻干
将上述过滤后的多硫酸化硫酸软骨素沉淀加入10倍硫酸软骨素投料质量的纯化水溶解，调节pH值6.0～7.0后经0.45µm的膜过滤后冻干，得到多硫酸化硫酸软骨素冻干品。
2。