临床标本收集及保存
临床检验标本采集、运输、保存操作规程
临床检验标本采集、运输、保存操作规程临床检验标本采集、运输和保存操作规程第一章体液标本的采集、运输和保存操作规程一、尿液标本的采集、运输和保存尿液标本的采集、运输和保存是临床检验中非常重要的一环。
尿液干化学测定的检查项目包括尿液比重、pH值、尿胆原、胆红素、潜血、酮体、蛋白质、白细胞、亚硝酸盐、葡萄糖和抗坏血酸等。
同时也需要检测尿液有形成份,如红细胞和白细胞形态等。
此外,还需要检测24小时尿总蛋白、尿肌酐和尿尿酸等。
二、脑脊液标本的采集、运输和保存脑脊液标本的采集、运输和保存也是非常重要的。
在采集脑脊液标本时,需要注意消毒和无菌操作。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
三、浆膜腔积液标本的采集、运输和保存浆膜腔积液标本的采集、运输和保存需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
四、分泌物标本的采集、运输分泌物标本的采集、运输需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温。
五、分泌物革兰阴性双球菌检测标本的采集、运输分泌物革兰阴性双球菌检测标本的采集、运输需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温。
六、标本的采集、运输和保存标本的采集、运输和保存需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
七、前列腺液标本的采集、运输和保存前列腺液标本的采集、运输和保存需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
八、粪便采集、运输和保存粪便采集、运输和保存需要注意消毒和无菌操作。
采集时需要避免污染和空气污染。
运输时需要保持标本的低温,保存时需要在低温环境下保存。
第二章血液一般检验的标本采集、运输和保存操作规程一、未梢血标本采集未梢血标本采集需要注意消毒和无菌操作。
临床基因扩增检验实验室临床标本接收及保存标准操作程序
临床基因扩增检验实验室临床标本接收及保存标准操作程
序
一、目的:
规范临床基因扩增检验实验室对临床标本的接受处理及保存,以确认标本送检的有效性。
二、适用范围:
临床基因扩增检验实验室收检的临床标本。
三、职责:
由临床基因扩增检验实验室专业技术人员制定程序文件,实验室负责人审核,科室主任批准实施。
四、程序:
1、核对标本的送检目的及标本是否符合送检目的要求。
2、标本收到后应立即处理,并按照样品编码规则进行编号。
3、标本保存:
1)DNA血清标本:
静脉血分离血清后放置-20℃保存,原抽血试管保留在
4℃冰箱7天,以便查对。
留取的血清一个月后放置-80℃
长期保存。
2)RNA血浆标本:
EDTA抗凝血分离血浆后血浆放置-80℃保存,原抽血试管放置4℃冰箱7天,以便查对。
3)痰标本:。
临床标本管理制度
临床标本管理制度一、总则临床标本管理是医院医疗质量管理的重要组成部分,对于确保医疗质量、促进医疗科研、保障患者权益起着不可替代的作用。
为此,制定本制度,明确标本采集、标本保存、标本运输和标本处置等各个环节的管理要求,确保医院临床标本管理的规范化、规范化和安全化。
二、管理机构医院设立标本管理委员会,负责临床标本管理制度的制定、实施和监督。
标本管理委员会由医院临床科室主任、医技科室主任、感染科专家和医院院感科负责人等组成。
委员会每年至少召开一次全院标本管理工作会议,总结工作经验,制定年度工作计划,审查重大标本管理事件,及时发现问题,改进工作。
三、标本采集1. 临床科室必须按照《医院标本采集操作规范》的要求定期对临床工作人员进行标本采集技能培训和考核,确保标本采集操作规范、准确、规范。
2. 临床科室必须加强对患者采集液体标本、组织标本等操作的监督和管理,确保标本采集的质量和完整性。
四、标本保存1. 标本保存设施必须符合国家和地方法规的要求,保证各类标本冷藏、冷冻、恒温等要求,防止标本变质和污染。
2. 医院要制定标本保存的归档管理规定,对于临床标本按照标本种类、患者信息、保存时间等建立档案,以便于随时查询、溯源。
五、标本运输1. 标本运输需要专门的人员进行操作,运输人员必须经过标本运输技能培训和考核。
2. 标本运输需要专门的设备和工具,确保标本在运输过程中不破损、不渗漏、不污染。
六、标本处置1. 标本处置应按照国家和地方法规的要求进行,不得将过期、失效、废弃的标本随意丢弃。
2. 对于传染性疾病的标本,必须按照国家和地方法规的要求进行高度消毒处理,严禁随意处置。
七、质量管理1. 医院标本管理委员会要定期对各个科室的标本管理工作进行检查和评估,及时发现问题并下发整改通知。
2. 对于重大标本管理事件,医院要及时组织开展调查和问题追踪,对于责任人进行追责。
八、保密管理临床标本中含有患者的个人信息,医院要建立完善的保密管理制度,严格保护患者隐私不被泄露。
临床实验室标本保存要求标准
临床实验室标本保存要求标准一、血液标本。
1. 全血标本。
- 短期保存(一般1 - 2天)- 应保存在4℃冰箱中。
例如血常规检测的EDTA抗凝全血标本,在这个温度下可以维持细胞形态和成分相对稳定,防止血液变质和微生物生长。
- 长期保存(数周 - 数月)- 可保存在 - 20℃或更低温度(如 - 80℃)的低温冰箱中。
如果是用于基因检测的全血标本,需要加入特殊的保护剂(如RNA保护剂等)后再进行低温保存,以保证核酸的完整性。
2. 血清标本。
- 短期保存(1 - 7天)- 4℃冰箱保存。
如生化检验(肝功能、肾功能等)的血清标本,在这个温度下,大多数酶类、蛋白质、电解质等成分相对稳定。
- 长期保存(数月 - 年)- - 20℃或 - 80℃保存。
对于一些特殊的血清学检测项目,如自身抗体检测,长期保存的血清标本可用于后续的复查或进一步研究。
在冷冻保存前,应将血清分装成小份,避免反复冻融,因为反复冻融可能会导致蛋白质变性、酶活性丧失等问题。
3. 血浆标本。
- 短期保存(1 - 2天)- 4℃冰箱保存。
像凝血功能检测的血浆标本,在4℃时凝血因子等成分能保持一定的活性。
- 长期保存(数周 - 数月)- - 20℃或 - 80℃保存。
对于一些血浆中的特殊成分检测,如血浆蛋白组学研究相关的标本,需要在低温下长期保存,同样要注意分装以防止反复冻融。
二、尿液标本。
1. 常规尿液标本。
- 短期保存(数小时 - 1天)- 一般保存在2 - 8℃冰箱中。
如果是用于尿液常规检查(如尿比重、酸碱度、尿蛋白、尿糖等检测)的标本,这个温度可以减缓尿液中成分的分解和微生物生长。
如果不能及时检测,可在尿液中加入适量的防腐剂(如甲苯,每100ml尿液加0.5ml 甲苯),甲苯可在尿液表面形成一层薄膜,阻止尿液与空气接触,从而减少细菌繁殖和化学成分的改变。
- 长期保存(数天 - 周,特殊情况)- - 20℃保存。
对于一些需要长期保存尿液标本进行特殊成分分析(如尿微量蛋白检测等)的情况,可将尿液离心后取上清液,加入保护剂(如蛋白酶抑制剂等,根据检测项目而定)后冷冻保存。
医院关于临床实验(检验、病理)标本采集、运送管理制度
医院关于临床实验(检验、病理)标本采集、运送管理制度第一章总则第一条为了规范临床实验(检验、病理)标本的采集、运送和管理,确保检验结果的准确性和患者安全,根据《医疗机构临床实验室管理办法》、《医疗机构标本采集、运送和检测规范》等规定,制定本制度。
第二条本制度适用于本院临床实验(检验、病理)标本的采集、运送、接收、处理、储存、分发、废弃等环节的管理。
第三条临床实验(检验、病理)标本采集、运送工作应遵循科学、规范、安全、高效的原则,确保标本质量,为临床诊断、治疗和科研提供准确、及时的信息。
第四条医院设立临床实验(检验、病理)标本采集、运送管理领导小组,负责全院临床实验(检验、病理)标本采集、运送工作的组织、协调和监督。
第二章组织机构与职责第五条临床实验(检验、病理)标本采集、运送管理领导小组由院长、副院长、医务科、护理部、检验科、病理科、放射科等相关科室负责人组成。
第六条临床实验(检验、病理)标本采集、运送管理领导小组职责:(一)制定和完善临床实验(检验、病理)标本采集、运送管理制度;(二)监督和检查临床实验(检验、病理)标本采集、运送工作的实施情况;(三)协调解决临床实验(检验、病理)标本采集、运送过程中出现的问题;(四)组织培训和考核临床实验(检验、病理)标本采集、运送相关人员;(五)定期评估临床实验(检验、病理)标本采集、运送工作的质量和效率。
第七条临床实验(检验、病理)标本采集、运送工作人员职责:(一)严格按照规定程序和操作规程进行标本采集、运送;(二)确保标本质量和完整性,防止标本污染、损坏和丢失;(三)及时、准确地将标本送达实验室,确保检验结果的及时性;(四)参与临床实验(检验、病理)标本采集、运送相关培训和考核;(五)报告临床实验(检验、病理)标本采集、运送过程中出现的问题,并提出改进建议。
第三章标本采集与运送第八条临床实验(检验、病理)标本的采集应由具备相应资质的医护人员负责,严格按照国家相关规定和医院操作规程进行。
临床微生物标本的采集,储存和转运
临床微生物标本的采集,储存和转运微生物检验的基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的标本采集1.尽早采集2.无菌操作3.合适部位4.适量标本5.适当方法6.安全采集1-尽早采集标本“采集重在时效性”1.1最好是病程早期、急性期1.2尽量在抗生素使用之前采集1.3对已用抗生素又不能停药者,可在下次用药前采集2-合适部位“背景干扰”2.1无菌标本:注意局部及周围皮肤的消毒,严格进行无菌操作与外界相通的腔道:避开腔道口区标本,以免皮肤表面正常菌群的污染,造成混淆和误诊。
2.2正常菌群寄生部位:采集时应特别小心;应明确检查的目的菌在进行分离培养时,采用特殊选择性培养基2.3血标本采集:应避免输液的影响。
3-无菌操作采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近皮肤或粘膜常居菌群污染和防止外源性细菌污染标本。
3.1.在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时,应注意对局部及周围皮肤的消毒,严格进行无菌操作;3.2.对于采集与外界相通的腔道标本时,如窦道标本,应从窦道底部取活组织检查,而非从窦道口取标本,以免受皮肤表面正常菌群的污染,造成混淆和误诊;3.3.采集的标本均应盛于无菌容器内送检。
盛装标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌,或使用一次性无菌容器,不能用消毒剂或酸类处理。
标本中也不得添加防腐剂,一面降低病原菌的分离率。
4-适量标本4.1标本采集应足量。
标本量过少,可能会导致假阴性结果。
4.1.1血液标本:通常成人采血量每瓶8-10ml,儿童每瓶1-5ml;脑脊液、骨髓、4.1.2脓肿、穿刺液、引流液、痰液等标本:三1ml尿液标本:>3ml4.1.3粪标本:1-3g 或 1-3ml4.2结核标本采集量要求特殊:4.2.1痰、肺泡灌洗液或支气管冲洗液:>5ml;4.2.2清晨中段尿:5-10ml;4.2.3粪标本:>1g;4.2.4穿刺液(胸水、腹水、关节液等):5- 10ml。
医院实验室临床标本核收、登记、分装和保存程序
医院实验室临床标本核收、登记、分装和保存程序1.目的:规范临床标本的验收、登记和保存程序,及时发现标本采集、处理、分装和送收过程中的不符合项目,保证标本符合检测项目的要求,找出原因,改善标本采集质量。
2.范围:适用于检验科受理的所有临床标本。
3.定义:无。
4.权责4.1检验科标本接收处工作人员负责标本的初步核对和分类。
4.2各专业组负责标本的核收、不合格标本的清退、标本的内部传递处理和保存。
5.制度内容5.1标本的收集5.1.1检验科标本收集人员必须明确本科室接收标本的范围,非本科室接受范围内的标本不予受理。
5.1.2标本收集人员必须按时间及时收集标本。
5.2标本的核收登记5.2.1各部门在收到分检标本后,通过LIS扫描,确认标本接收时间,病人信息、检测要求。
对于条码识别困难(如条码玷污,破损等)的标本, LIS系统补打条码,核对信息后重新粘贴。
5.2.2识别抽血量不够或种类不符的标本,分别作标本不合格处理。
5.2.3识别含有血凝块的血凝标本和血常规标本,分别作标本不合格处理。
5.2.4离心分离血清或血浆标本,目测分检不合格的溶血标本,目测血清或血浆不够测定量的标本,分别作标本不合格处理。
5.2.5分别登记清退不合格的标本,登记内容至少应包括:病人信息、不合格原因、日期,以便分析原因,并通过LIS或电话及时通知送检部门。
定期汇总不合格样本信息。
5.2.6实施分装的样本应选择恰当的容器,并标记可溯源至原标本的唯一性的编码。
5.2.7对于临床医生口头申请临时增加的检验项目,检验人员应接受、登记,并复述口头医嘱内容,确保医嘱准确无误,并确保原标本合格的情况下给予检测。
5.3非常标本的接受和处理5.3.1对分析物不稳定或不可替代的样品(如脑脊液、活体标本),病人的信息识别不确定时,可先处理,再与送检者确认。
5.3.2对特殊或紧急的标本,包括绿色通道标本,允许送检人员的口头申请,但必须在发出报告前提供患者的信息。
5-临床标本采集、保存及核酸的提取-唐翠燕
• 总之,标本的收集及适当的预处理,对用 于PCR测定的核酸模板的成功提取,具有
决定作用。
二、核酸的提取
• 待检样品中的核酸是PCR反应的模板,由 于PCR具有高度的特异性和敏感性,一些 样品甚至简单到不需要任何处理便可用于 PCR。但是在大多数的情况下,还是需要 对样品作适当的处理才能用于PCR。
• 下列试剂是制备RNA的常规试剂:
• 裂解液:4mol/L GuSCN,25mmol/L柠檬 酸钠pH7.0,0.5%Sarkosyl, 100mmol/Lβ-巯基乙醇(用前加入)
• 饱和酚:氯仿:异戊醇(50:49:1)
• 3mol/L NaAc pH5.2 • 无水乙醇 • 75%乙醇 • DEPC处理的无菌去离子水 • RNAasin(RNA酶抑制剂)
钟,待大块状物下沉后,取上清立即离 心,其后的沉淀即可用于DNA提取。如不 立即用于核酸提取,则需保存于-20℃下。
• 2.4 脓液
• 脓液的处理依情况而定,如用于分枝杆菌 (如结核杆菌)核酸测定的标本,粘稠的 脓液同痰标本的处理模式,先进行液化, 再离心取沉淀提取DNA;水样的脓液则直 接离心,沉淀用生理盐水洗2~3次后,即 可用于DNA提取。
• 2.2 痰
• 痰属于分泌物,临床上常用作结核杆菌 DNA测定样本,由于痰中含有大量粘蛋白 和杂质,故在核酸提取时,需对样本进行 初步处理,用4%NaOH液化,需注意的 是,液化时不能加热,液化时间不能过 长。
• 液化标本如不立即用于核酸提取,可保存 于-20℃下。此外,对用于非结核杆菌如肺 炎支原体的PCR检测,痰标本只能室温悬 浮于生理盐水中,充分振荡混匀,促使大 块粘状物下沉,取上清离心,所得到的沉
5
• 2.3 75%乙醇漂洗DNA,是为了去除残余 的盐类,去除过量SDS和酚等杂物,因为 SDS在75%的乙醇中保持溶解状态,不与 DNA共沉淀,从而通过弃上清液去除这种 去污剂,避免对以后PCR反应的影响。
临床样本的采集、运输和保存及核酸提取
2)荧光光度法 荧光染料溴化乙锭,可嵌入到碱基平面,而发 出荧光,且荧光强度与核酸含量呈正比。 适用于低浓度核酸溶液的定量分析(1-5ng)
EB与DNA的结合
纯度鉴定
紫外分光光度法:
在260nm和280nm处测定DAN溶液的光吸收,纯的DNA A260与A280之比 应在1.80 (1.60~1.80),低于此值表明制备物中留有蛋白质成份。高 于此值表明有RNA的残留量
RNA测定,标本的获取和保存方式对测定结 果,可能有决定性影响。最好是使用EDTA 抗凝(严禁使用肝素)全血标本,抗凝后6小 时内分离血浆,如使用血清标本,则需尽 快(2小时内)分离血清,标本的短期(1~2 周)保存可在-20℃下,较长期保存应在70℃下
肝素的作用机理
肝素对MLV逆转录酶和TAQ DNA聚合酶均很强的抑 制作用,如果临床标本为肝素抗凝,则在核酸纯化过 程中,标本中的肝素可结合于DNA和RNA上
研究背景
二、核酸的提取
核酸提取的重要性
核酸提取是临床PCR检验最为关键的部分, 亦是手式操作的主要部分
核酸提取的成败关系到临床PCR检验的正确 与否
临床PCR检验操作中最易出问题的环节
(一)、提取核酸总的原则
保证核酸一级结构的完整性; 其他生物大分子如蛋白质、多糖和脂类 分子的污染应
日期、时间及相关临床信息
全血
以全血作为待测标本时,必须注意抗凝剂 的选择,一般使用EDTA-Na2或枸椽酸钠,不 可使用肝素
全血样本如用于DNA提取检测,可4℃下短 期保存,如用于RNA检测,则应在取血后, 尽快提取RNA
血清(浆)
DNA测定,可按照一般的血清标本处理程序, 对测定影响不大
3、核酸的浓缩、沉淀与洗涤
如何正确收集和保存检验标本
如何正确收集和保存检验标本收集和保存检验标本是医学工作中非常重要的一环,能够直接影响到检验结果的准确性和可靠性。
正确的标本收集和保存方法不仅可以确保检验结果的准确性,还可以提高工作效率和患者满意度。
下面将介绍如何正确收集和保存检验标本,希望对大家有所帮助。
一、标本收集前准备工作在收集检验标本之前,首先需要进行一些准备工作,以确保整个收集过程的顺利进行。
首先要确认所需检验项目,并了解各项检验项目的要求和规范。
其次要准备好收集所需的器材和试剂,确保器材的干净和完整。
最后要对标本收集的时间、地点和方法进行安排,做好工作计划。
二、收集全血标本1. 静脉血采集:在采集全血标本时,应选择适合的静脉采血点,如尺桡动脉或肘窝静脉。
在采血前要消毒采血点,采用一次性无菌针头直接穿刺采血。
采血时要注意采血管的顺序和采血量的控制,避免造成患者不必要的伤害。
2. 指尖血采集:对于某些特殊检验项目,如血糖、血液生化等,可以采用指尖血的方法进行采集。
在采集指尖血时,应注意取血点的选择和擦拭方法,避免污染。
三、收集尿液标本1. 早晨尿液:在收集尿液标本时,应选择晨起第一次排尿的尿液,称为早晨尿液。
在收集前要注意口腔卫生和手部卫生,避免尿液被污染。
收集后要尽快送检,避免标本的漂移和变质。
2. 24小时尿量:某些尿液检验需要采集24小时尿量,此时要准备好尿野和标尿杯,并按照规定的时间、量进行尿液的收集和保存,以确保检验结果的准确性。
四、保存检验标本1. 血液标本:采集完全血标本后,应将标本置于适当的试管或容器中,用胶带封口并标注相关信息,如患者姓名、检验项目、采集时间等。
然后放置于适当的温度和环境中,避免受到光线、热量和震动的影响。
2. 尿液标本:采集尿液标本后,应将尿液标本装入尿杯中,并用胶带封口,并标注相关信息。
然后放置于冰箱或阴凉处,避免变质和漂移。
在长时间保存前要确定标本的保存时间和方法,以保证检验结果的准确性。
综上所述,正确收集和保存检验标本对于确保检验结果的准确性和可靠性非常重要。
专业知识 临床检验标本采集、运输、保存操作规程
临床检验标本采集、运输、保存操作规程一、标本采集1.1采集时间标本采集应遵循医嘱,根据检验目的和要求,在合适的时间进行采集。
一般而言,早晨空腹时采集某些标本(如血液、尿液等)较为适宜,以便获得更为准确的结果。
1.2采集方法根据检验要求,选择合适的容器和采集方法。
一般来说,血液标本宜采用静脉采血,使用消毒后的采血器进行采集。
尿液标本则需使用清洁、无污染的容器,并确保在采集过程中避免污染。
其他体液标本也应根据其特性及检验目的选择合适的容器和采集方法。
1.3采集量应根据检验要求和实验方法确定采集标本的量。
不同的检验项目需要不同的标本量,因此应确保采集足够的标本以供分析。
1.4采集部位根据检验目的和要求,选择合适的采集部位。
如血液标本可选择肘静脉、楼动脉等;尿液标本则需收集尿液;粪便标本应取自患者粪便的不同部位,以便全面评估病情。
1.5防止污染在采集过程中,应严格遵守无菌操作原则,防止外界污染影响标本的质量。
采集后的标本应立即送往实验室进行检测,以避免长时间放置引起的变化。
1.6其他注意事项采集前应告知患者相关注意事项,如饮食、休息等;对于特殊患者,如新生儿、重症患者等,应结合实际情况制定合适的采集方案。
此外,应注意保护患者隐私和个人信息的安全。
二、标本运输2.1运输方式标本运输应根据检验要求选择合适的运输方式。
一般而言,血液、尿液等常见标本可采用常规的物流方式进行运输,如快递、包裹等。
对于具有特殊要求或易失活的标本,如细胞培养物、微生物等,则需采用专门的运输设备或冷链运输方式,以确保标本在运输过程中的质量和安全。
3.2运输温度对于需要特殊温度保存的标本,如冷冻标本、细胞培养物等,应确保在运输过程中保持适宜的温度。
可采用保温箱、干冰等设备进行温度控制。
对于常温运输的标本,也要尽量减少暴露在高温或低温环境中的时间,以避免对标本产生不良影响。
4.3运输时间标本运输时间应尽可能短,以减少运输过程中可能出现的问题。
临床诊断标本采集、运送、接收、储存流程
临床诊断标本采集、运送、接收、储存流程1. 采集标本- 根据医嘱和患者信息,选择合适的标本采集时间和方法。
- 采集标本前,准备好所需的标本采集器具和试管等物品。
- 对于血液标本,确保患者已经空腹并且按照规定的方法采集。
- 对于尿液标本,提醒患者按照采集方法进行尿液的收集。
- 对于其他标本类型,根据具体要求采集并储存在合适的中。
2. 标本运送- 将采集好的标本放入标本袋或中,确保标本的标识清晰可见。
- 标本袋或上应注明患者的姓名、标本类型、采集日期和时间等信息。
- 标本运送前,确保密封好标本袋或,防止标本泄漏。
- 根据实际情况,选择合适的运送方式和温度要求。
- 将标本交给专门负责标本运送的工作人员,并妥善记录运送时间和人员信息。
3. 标本接收- 接收标本时,仔细核对标本袋或上的信息和标识,确保与标本申请单上的信息一致。
- 检查标本的完整性和密封性,如发现异常,及时联系采集人员或相关部门。
- 标本接收后,及时登记入系统,并安排储存和分发等后续工作。
- 如有特殊要求的标本,按照相应的处理流程进行处理。
4. 标本储存- 根据标本类型和要求,将标本储存在指定的储存设备或中。
- 标本储存设备应具备适当的温度控制和防护措施。
- 对于易腐坏的标本,应采取相应的处理和保鲜措施。
- 定期检查储存设备和的状态,如发现问题及时维护或更换。
- 根据标本的保存期限,合理安排标本的销毁和清理工作。
以上是临床诊断标本采集、运送、接收、储存流程的基本步骤和要求。
在执行过程中,应严格遵守相关标准和规范,确保标本的质量和安全性。
同时,也要充分考虑患者的权益和隐私保护,保证操作的合法性和合规性。
请注意,此文档仅提供概要信息,并不涵盖所有细节和特殊情况。
具体操作时,请参考相关的规章制度和指南,并遵循医院或实验室的具体要求。
临床标本的采集、验收、保存及核酸的提取
三、核酸的提取方法
待测标本中的核酸是PCR反应的模板,由 于PCR具有高度的特异性和敏感性,一些样本简 单到不需要任何处理即可用于PCR。但大多数 情况下还需对样本进行适当的处理,其目的为: 1)纯化样本中的核酸,除去杂质,2)使待扩 增的靶序列暴露及核酸模板得到浓缩3)有利于 评价扩增体系的灵感度。
3、RNA的提取
异硫氰胍(GuSCN)结合氯仿-酚提取RNA方法。
(1)试剂 1) 裂解液:4mol /L GuSCN,25mmol /L柠檬酸钠 pH7.0,0.5% Sarkosyl,100mmol /Lβ-巯基乙醇 2) 饱和酚:氯仿:异戊醇(50:49:1) 3mol /LNaAc pH5.2 3) 无水乙醇 4) 75%乙醇 5) DEPC处理的无菌去离子水 6) RNasin(RNA酶抑制剂)
经高压灭菌的一次性使用的塑料制品如试管, 离心管等基本上无RNase,可以不经预处理直接 用于制备和储存RNA。实验室用的普通玻璃器皿 经常有RNase污染,使用前必须于180℃干烤8小 时以上,或用1%焦碳酸二乙酯(DEPC)的水溶液 浸泡用于制备RNA的烧杯,试管和其他用品。 DEPC是RNase的强烈抑制剂。灌满DEPC的器皿于 37℃下放置2小时,然后用灭菌水淋洗数次,并 于100℃干烤15分钟,最后高压蒸汽下15分钟。 上述处理可除去器皿上痕量的DEPC以防DEPC通过 羧甲基化作用对RNA的嘌呤碱基进行修饰。
对于全血标本制备单个核细胞主要有两个途 径:1)使用淋巴细胞分离液分离。2)使用红细 胞裂解液,裂解红细胞后经生理盐水洗涤可得单 个核细胞,单个核细胞如不提取核酸可保存于70℃以下。
临床检验标本采集运输保存操作规程
临床检验标本采集运输保存操作规程一、概要临床检验标本的采集、运输、保存是临床工作中非常重要的环节,直接关系到检验结果的准确性和诊断的准确性。
因此,为了确保临床检验结果的准确性和诊断的准确性,特制定本操作规程,以规范临床检验标本的采集、运输、保存等工作。
二、采集1.标本采集前准备(1)检查标本采集物品是否齐全,并检查是否符合采样要求;(2)查看患者的相关信息,核对患者的身份信息,确认采集标本的准确性;(3)向患者解释采集标本的目的和方法,并获得患者的同意。
2.采集方法(1)洗手消毒,戴上一次性手套;(2)根据采集标本的不同种类,选择相应的采集器具,确保采集过程无菌;(3)按照标本采集要求,从患者身体的适当部位采集标本;(4)采集标本后,恢复住院患者原有的就医状态;三、运输1.运输要求(1)标本应在采集后尽快送达实验室;(2)标本运送途中,标本容器应放置在避光、干燥、通风良好的环境中;(3)标本运送途中应保持标本的稳定性,避免标本的破裂或泄漏;(4)标本运送过程中,应遵循相关法规,确保运输过程的安全性。
2.运送方法(1)标本应用密闭的容器运输,确保标本的稳定性;(3)运送途中请勿晃动标本,防止标本变质或破裂。
四、保存1.保存要求(1)标本应保存在适当的温度下,防止标本变质;(2)标本应放置在干燥、避光、通风良好的环境中,防止标本受潮或受光;(3)标本保存时间应符合实验室的规定,过期标本应予以丢弃。
2.保存方法(1)根据标本的种类,选择相应的保存方法,如鲜血标本应保存在冰箱中,尿液标本应保存在冰箱中等;五、安全问题1.采集安全(1)在采集标本之前,应了解患者的病情以及有无感染性风险;(2)采集过程中必须戴上一次性手套,并做好手卫生,防止交叉感染的发生;(3)采集过程中,要注意针具的安全使用,避免针具刺伤;(4)采集结束后,要将废弃的针头和一次性手套放入黄色或红色的医疗废物桶中。
2.运输安全(1)标本运送途中,应遵循相关法规,确保运输过程的安全性;(2)运送过程中,要注意标本容器的密闭性,避免标本的泄漏。
检验标本采集运送验收保存制度
检验标本采集运送验收保存制度Ⅰ 目的加强医学检验科标本采集.运送.验收.保存过程的管理,确保检验结果准确性。
Ⅰ 范围适用于医学检验科人员、临床护士、运送人员。
Ⅰ 制度一、标本采集(一)医护人员应了解在标本采集前影响结果的非病理性因素(药物、饮食、运动、治疗、生理变化、生活环境和习性、标本采集时间),正确指导患者,采取切实措施,规范采集标本前患者的一切行为,保证采集的标本符合疾病的实际情况,留取合格的标本。
(二)配备足够合格的采样人员,用合格的采样器材按标准的采样程序采样。
(三)血液标本采集基本要求:保持标本完整性,控制各种干扰因素,保持标本新鲜,在允许保存时间范围内,拒绝不合格血标本(脂血、溶血、凝固)。
(四)标本采集的时间1.随机和急诊标本:随机和急诊标本是指无时间限定或无法规定时而必须采集的血和尿标本。
此类标本在送检时应加以注明,评价检验结果时应注意昼夜节律影响。
便于分析检查结果时参考。
2.空腹标本:空腹标本一般指进食8小时后(不能超过12小时)在清晨采集;测定血肌酐应禁肉食3天,且不能饮咖啡、茶等;乳糜血患者检测血脂应素食3天后。
3.指定时间标本:指定时间标本多属功能试验采集的各种标本,因试验目的不同,采集标本的时间各有不同,必须按试验要求采集,如葡萄糖耐量试验等。
(五)静脉血采集基本要求1.患者体位:住院患者卧位。
不应在输液侧采血,如不可避免,必须注明。
否则一切后果由采血者负责。
2.血管选择:应选用较大的血管,常从肘静脉取血,也可选用其他部位的静脉。
小儿不能作静脉穿刺时采用毛细血管尤为合适。
3.注射器:针头外径1毫米。
针头外径>1毫米可引起创伤,导致血管碎片入血,促发凝血。
针头外径<0.7毫米血液采集时间延长,针头内压力梯度可导致溶血和血小板激活。
4.消毒部位:穿刺处所用消毒液已干。
5.止血带:压脉带控制在1分钟内,抽血时患者握拳。
抽血速度应缓慢,将血液沿管壁徐徐注入标本容器,以免产生大量泡沫或溶血,保证血量。
临床检验标本保存规范
临床检验标本保存规范一、血液标本的保存血液标本是临床检验中最常见的类型之一。
根据检测项目的不同,血液标本又可分为全血、血清和血浆。
1、全血标本全血标本常用于血常规检查。
采集后的全血标本应尽快送检,一般在室温下保存不超过 4 小时。
如果不能及时检测,可将其置于 4℃冰箱中保存,但保存时间也不应超过 24 小时。
需要注意的是,低温保存可能会影响某些细胞的形态和功能,因此在保存和运输过程中要避免剧烈震动。
2、血清标本血清标本常用于生化检验,如肝功能、肾功能、血糖、血脂等检测。
血液采集后,待其自然凝固(一般需要 30 分钟至 1 小时),然后通过离心分离出血清。
分离后的血清应尽快检测,若不能立即检测,可在 4℃冰箱中保存 3 7 天。
如需长期保存,应置于-20℃以下的冰箱中,可保存数月至数年,但应避免反复冻融,以免影响检测结果。
3、血浆标本血浆标本常用于凝血功能检测和部分激素检测。
采集血液时需加入抗凝剂,如肝素、枸橼酸钠等。
血浆标本在采集后应立即颠倒混匀,避免凝血。
在室温下,血浆标本应在 4 小时内完成检测;在 4℃冰箱中可保存 24 小时。
二、尿液标本的保存尿液标本的保存方法取决于检测目的。
1、常规尿液检查用于尿常规检查的尿液标本,最好采集新鲜尿液,并在 2 小时内送检。
如果不能及时送检,可在 4℃冰箱中保存,但保存时间不应超过 8 小时。
2、 24 小时尿液标本用于尿蛋白定量、尿肌酐等检测的 24 小时尿液标本,采集后应加入适量的防腐剂(如甲苯、浓盐酸等),以防止尿液变质。
在保存过程中,应将尿液置于阴凉处,温度控制在 2 8℃。
三、粪便标本的保存粪便标本主要用于寄生虫卵、细菌培养等检查。
1、一般检查用于一般性状和显微镜检查的粪便标本,应采集新鲜粪便,在 1 小时内送检。
2、细菌培养用于细菌培养的粪便标本,采集后应立即送检。
如果不能立即送检,可将其置于 CaryBlair 运送培养基中,在 4℃冰箱中保存不超过 24 小时。
临床样本的采集运输和保存及核酸提取
(一)、样本的采集
地贫检测样品采集: 外周血: ≥5mL 脐带血: 0.5~1mL 羊 水:20~30mL 绒 毛:≥15mg 唾 液 组 织
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标本采集的注意事项
所有标本的采集、运送和处理应在无菌操作,防止污染的原则 下进行
已采集标本都应置于防漏、密封的无菌容器中运送 采集足够量标本 每份标本都应标记患者姓名、送检号码、标本来源、具体部位、
临床标本的采集、处理、运送与 保存及DNA/RNA提取
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研究背景
样本的采集、处理 样本的保存 样本的运输 DNA的提取 RNA的提取
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研究背景
一、样本的采集、处 理、保存及运输
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临床标本的正确采集、运送、保存 的重要性
临床检验的质量保证关键性环节 解决涉及实验室检验的医患纠纷的方法之一
对标本进行煮沸、凝胶过滤、酸碱处理后凝胶过滤、 反复乙醇沉淀等均不能去除肝素的这种干扰作用
每μg核酸标本中加入0.1U的肝素,即可100%的抑制 酶活性
在标本中加入肝素酶I 或Ⅱ1~3 U/μg核酸在于5 mM Tris pH7.5, 1 mM CaCl2, 40 U RNasin 25 ℃下作用2 小时可去除肝素的抑制作用
总RNA电泳,观测各条带的含量,提示是否存在RNA 降解;如加样槽中存在条带,可能是DNA污染。
细胞破碎方法
1.匀浆法 2.捣碎法 3.研磨法 1.超声法 2.反复冻融法 3.冷热交替法 4.低渗裂解 1.有机溶剂 2.去垢剂
3.酶解法整理ppt
应用
机体软组织 动物韧性组织 细菌、酵母 细胞混悬液 培养细胞 细菌、病毒 红细胞 细菌、酵母、血液 组织、培养细胞、 血液 细菌、酵母、血液
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分离后单个核细胞加入细胞冻存液,混匀后进行分装,每管。
单个核细胞:4℃,24h内进行分离、分装。
分装后≤-150℃液氮中保存。
组织样本
样本采集严禁影响临床病理诊断。肿瘤直径≤1cm^3不建议采集或在病理医生指导下采集,采集部位应与用于石蜡切片相一致。
样本采集应在离体后30min内完成采集,采集时应避免坏死区及纤维化区,肿瘤细胞应>50%。
依据科研需求确定样本份数。
分离提取血浆、血清、白细胞层、血凝块进行分装,每例样本不少于3份。
血清/血浆:分装3管,管。
血凝块:分装2管,ห้องสมุดไป่ตู้cm^3/管。
EDTA抗凝:用于DNA提取、淋巴母细胞系建立和蛋白组学研究。分装3管、管
血清:室温血凝后≤30min内进行分离、分装;4℃,24h内进行分离、分装。
冷冻采集后的样本
依据科研需求确定样本份数。
采集量≥30g。
分装3管,10g/管。
冷冻干燥保存。
2≤-80℃长期保存.
胆汁样本
采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。
采集清晨胆汁、采集时尽量选择与其他常规检验同时进行。
胆汁保存应加入细胞培养液(RPMI1640)
胆汁内细胞采集分离方法同血液样本。
依据科研需求确定样本份数。
血浆:4℃,24h内进行分离、分装。
全血/血清/血浆/血凝块≤-80℃长期保存。
外周血单个核细胞样本
血液样本用EDTA抗凝采集
全血样本采集后应尽快用淋巴细胞分离液分离单个核细胞
分离后的单个核细胞应加入细胞冻存液,并利用程序降温仪或程序降温盒进行梯度降温。
冻存液配置为90%FCS+10%DMSO
依据科研需求确定样本份数。
临床标本收集及保存
临床样本的收集与保存
样本类型
采集方法
处理方法
保存方法
血液样本
根据研究需要采集治疗前,治疗中及治疗后的空腹外周静脉血。
采集时尽量选择与其他常规检验同时进行
分别采集抗凝血(依据研究目的选择抗凝剂)和非抗凝(干燥或促凝)血液样本
肿瘤血液样本采集英确保放/化疗前有进行
血浆样本分离应进行两次离心
尿液样本可处理为:全尿。
常温保存:≤4h
0-4℃≤24h。
全尿≤-80℃长期保存.
细胞≤-150℃长期保存。
粪便样本
粪便应取新鲜标本,盛器应洁净,不得混有尿液,不可有消毒剂及污水。
采集标本时应用干净的竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的粪便;外观无异常的粪便需从表面、深处及粪端多处取材,其量至少指头大小。
尿液样本含有细胞碎片等杂质,应进行离心。
尿液内细胞采集/分离方法同血液样本。
不同时段尿样研究方向:首次晨尿:白细胞、红细胞和激素浓度较高;随机尿样:适合常规筛查和细胞学检测;分级尿样:适用于分析物浓度;定时尿样:可用于比较生物分子排泄模式。
依据科研需求确定样本份数。
尿液样本≤100ml。
分装5管,1ml/管。
依据科研需求确定样本份数。
2.采集量≥3ml。
3.分装3管,管。
样本置于液氮内转运。
2.上清液-80℃长期保存。
3.分离细胞≤-150℃长期保存。
唾液样本
使用蛋白酶抑制剂处理样本
进行离心、分离上清和可能存在物质、采集上清和颗粒物。
依据科研需求确定样本份数。
分装3-5管,管。
样本置于液氮内转运。
≤-80℃长期保存。
样本采集时应在洁净环境中操作,保存RNA时应尽量在无菌环境下进行;采集不同样本时应更换采集器材、防止交叉污染。
4.采集顺序:标明“远癌-近癌-癌灶”顺序,正常组织(距癌灶边缘>3cm或最远端)→癌旁组织(距离癌灶边缘<3cm)→癌组织
采集后样本置于液态液氮中应使用内旋式冻存管,置于气相液氮或-80℃冰箱中可使用外旋式冻存管。
采集量≥10ml。
胆汁/RPMI1640比例为:1/25。
分装5管,2ml/管。
采集后4℃保存,时间≤12h内进行分装。
≤-150℃长期保存。
脑脊液
样本采集后应转入含有EDTA和氯化钠混合液中。
2.如果含有红细胞或颗粒物时应低温离心。
3.采集细胞应使用专业采集方法。
4.脑脊液保存应加入保护剂(DMSO)并使用程序降温仪进行梯度降温。
石蜡样本置于中性福尔马林中常温转运,尽快制成蜡块。
RNA later样本常温转运(≤24h),≤-20℃保存。
OCT样本≤-20℃保存。
新鲜组织样本置于液氮中保存。
培养细胞样本
采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。
吸出培养皿培养液,用PBS冲洗2次,加入胰蛋白酶37℃消化1min。
除去胰蛋白酶,加入5ml培养液混匀后取出细胞液进行离心。
除去上清液后加入细胞保护剂,胎牛血清及DMSO混匀放入内旋式冻存管内,进行程序降温。
干细胞保存加入特定细胞培养液及高浓度胎牛血清。
依据科研需求确定样本份数。
每皿细胞对应1个冻存管保存。
传代细胞建议取处于指数生长期、较大瓶皿培养的80%-90%汇合单层细胞。
收集培养液时,1000g/min离心5-10min。
加入胰蛋白酶后需放入恒温箱37℃恒温1min。
样本置于液氮内转运。
≤-150℃长期保存。
尿液样本
采集容器应无菌、干燥、洁净、具有防漏瓶盖。
进行毒理分析时应使用高密度聚丙烯类容器。
检测特殊分析物时应在分管前加入EDTA或焦亚硫酸钠等防腐剂。
避免经血、白带、精液、前列腺液、粪便污染。
特殊样本应避光保存
建议采集首次晨尿。
每份肿瘤样本应有配对的血液样本。
依据科研需求确定样本份数。
肿瘤、瘤旁及非瘤(正常)组织各2-3份。
石蜡/OCT样本1份或5张组织切片,用于形态学对照。
需留取质控样本()留取份数依据科研目的而定)
每份样本应≥^3或300mg或1*10^7细胞。
石蜡样本不小于**。
样本/福尔马林液比例应≥1/5。
样本置于液氮内转运。