内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究

合集下载

铁皮石斛化学成分及功能的研究进展

铁皮石斛化学成分及功能的研究进展摘要：铁皮石斛为兰科多年生附生草本植物，其新鲜或干燥茎入药，在我国已经有两千多年的药用历史，具有益胃生津、滋阴清热的功效和抗疲劳、祛痰镇咳等作用。

本文以近十年来国内外发表的文献为依据，对铁皮石斛的化学成分及主要功能进行归纳、总结。

得出铁皮石斛是名贵的中草药之一。

其含有多糖、芪类、生物碱、氨基酸和微量元素等多种成分，具有增强免疫、抗氧化、抗肿瘤、抗疲劳、降血糖和养阴生津等多种生物活性。

关键词：铁皮石斛；多糖；氨基酸；生物活性。

1前言铁皮石斛(D.candidum Wall. ex Lindl )为兰科石斛属植物，又名黑节草、铁吊兰等。

铁皮石斛加工而成螺旋状圆柱体，南方称其为“铁皮枫斗”，北方和中国药典则称为“耳环石斛”[1]。

其新鲜或干燥茎入药，在我国已经有两千多年的药用历史，具有益胃生津、滋阴清热的功效和抗疲劳、祛痰镇咳等作用。

现代研究证明，多糖是铁皮石斛的主要药效成分，具有抗氧化，降血糖，生津止渴，增加干燥综合征患者的唾液分泌，提高机体免疫力，抑制肿瘤，降压等作用；芪类化合物中的菲和联苄具有抗肿瘤和抗多药耐药性的作用，由于中药铁皮石斛功效确切，2010年版《中国药典》将其作为新增品种单独列出，与中药石斛区别开来。

近年来，对铁皮石斛化学成分进行了大量的研究，发现铁皮石斛化学成分多样。

本文就近年来铁皮石斛的化学成分和药理作用研究情况进行综述，为铁皮石斛活性成分研究和合理开发利用提供依据。

2铁皮石斛化学成分的测定2.1多糖（polysaccharide)多糖是铁皮石斛的主要成分，水溶性多糖含量高达22%。

石斛生理活性的强弱与其多糖含量密切相关。

多糖含量越高，质越重，嚼之越有粘性，质量更优。

在铁皮石斛的不同部位，总多糖的质量分数由高到低依次为茎中、茎上、茎下、根部。

但水溶性多糖分布规律是叶≥根＞茎。

何铁光等研究了铁皮石斛原球茎的多糖DCPP3c—1后发现其主要由甘露糖、鼠李糖、半乳糖醛酸、葡萄糖、半乳糖和阿拉伯糖组成，其分子物质的量之比为1.1204：1：1.046：23.354：3.828：1.046，经过红外光谱分析及高碘酸氧化后研究表明DCPP3c一1含有糖醛酸基团，是酸性多糖，其中1—6键连接的残基占14.0，1—2或1—4键连接的残基占40.7，1—3键连接的残基占45.3。

铁皮石斛有效成分相关研究

铁皮石斛有效成分相关研究摘要：铁皮石斛是一味名贵中药材，具有很高的药用价值，广泛用于滋补和珍贵食品。

并且有着重要的研究意义。

本文主要围绕石斛的石斛多糖，石斛碱等有效成分及其药理作用进行论述。

最终得出石斛这味中药材对一些疾病有着很好的治疗作用。

旨在为进一步深化研究铁皮石斛有效成分，为之后铁皮石斛可以更好的利用奠定基础。

关键字：有效成分；药理作用；铁皮石斛铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Mi-g0)为兰科植物铁皮石斛干燥茎，被称为九大仙草之一。

主产于四川、云南、贵州等地，尤其以广南种铁皮石斛质量最佳。

铁皮石斛被列为《中国药典》收载的5种石斛属植物之一，于2010年单列铁皮石斛。

铁皮石斛是我国传统的名贵中药材。

现代中医药理论认为，铁皮石斛具有健脾养胃、滋阴补肾、润肺生津等功效，用于治疗慢性萎缩性胃炎、高血压、糖尿病、抗肿瘤、抗衰老等。

铁皮石斛常以铁皮枫斗的形式作为药材使用。

铁皮枫斗是将铁皮石斛的茎，在烘烤干燥时手工双向扭曲成螺旋弹簧状的传统药材，目的是将铁皮石斛表皮细胞外的角质层破裂，使有效成分在煎煮时容易释出。

铁皮石斛种子极小、无胚乳、生长周期很长，在自然条件下需与某些真菌共生才能萌发生长，加上因其的凸效的药用价值与近代人类不合理开发，造成野生资源匮乏，1987年被列为国家重点保护的珍稀濒危药用植物。

1、有效成分1.1多糖类很多植物中都含有多糖，但含有活性多糖的却极其少见。

经现代科学技术测定，铁皮石斛中含有丰富的石斛活性多糖，其含量在25％及以上。

多糖是铁皮石斛中最主要的有效成分。

水溶性多糖是铁皮石斛最重要的活性物质之一。

有资料显示，将铁皮石斛进行分离纯化，可得到三种结构的多糖。

这三种结构的多糖均为O一乙酰葡萄甘露聚糖。

有资料显示，O一乙酰葡萄甘露聚糖具有增强T细胞、B细胞及巨噬细胞功能的作用。

黄民权等提取分离了铁皮石斛中的多糖，研究发现主要由D-木糖、L．阿拉伯糖组成和D．葡萄糖组成。

铁皮石斛化学成分及其药理作用研究进展

奎等人发现人工种植的铁皮石斛和野生的铁皮石斛多糖含量分别为２５．３１％和２９．３８％，差别不是很大。曾淑华和蒙爱东ｌ４等人研究发现，９种不同来源的铁皮石斛多糖累积的高峰期为当年的１２月份，所以他们建议铁皮石斛的采收周期
海峡药学
２０１４年
第２６卷第１２期
铁皮石斛化学成分及其药理作用研究进展
林平发（福建生物工程职业技术学院福州３５０００２）
摘要：铁皮石斛是一味名贵的传统ｑ－药，位列中华九大仙草之首，索有“ 植物黄金” 、 “ 药界大熊猫” 之称。由于其具有巨大的药用价值和保健功
需氨基酸的平均质量分数为０．２８— ２．９６ａｒｇ・ｇ～，其含量随着铁皮石斛生长周期的延长而增加。１．４微量元素药材中的微量元素含量往往会对药效会造成一定的影响，同时药材中的重金属的微量超标会影响药材的品质。黎万奎等对铁皮石斛中１０种微量元素进行研究表明除铜外，铁皮石斛组织培养物中其他微量元素均高于其
１．２生物碱
生物碱是铁斛中分离等到７个化合物，并应用现代光
铁皮石斛中的含量比较低。诸燕等人对人工栽培的铁皮石斛与市场购买的铁皮枫斗药材总生物碱进行分析表明，其生物碱含量在０．０１９０％～０．０４３０％之间。并对浙江省１、２、３年生的１１个铁皮石斛种质样品检测其平均总生物碱，表明随着时问的增长，铁皮石斛总平均生物碱含量分别为为０．０２５３％，０．０２７０％，０．０３２６％，显示生物碱的量增多不明显。

中药铁皮石斛主要化学成分及药理作用研究进展

中药铁皮石斛主要化学成分及药理作用研究进展【摘要】铁皮石斛是中医传统的养阴药物,具有良好的补益功能和清虚热、降虚火作用。

近年来大量现代研究表明,铁皮石斛含有丰富的多糖、生物碱、氛基酸、微量元素等成分。

具有良好的杭肿瘤、降血糖、抗氧化、杭衰老、改善肝功能、提高免疫力等功效。

现对铁皮石斛化学成分及药理作用的研究状况做一综述为其进一步研究及临床应用提供参考。

【关键词】铁皮石斛成分药理铁皮石斛为兰科植物Dendrobium officinale KimuraMigo 的干燥茎,在《神?r本草经》中位列为上品,一种名贵的中药材,1963年《中国药典》收载以来,铁皮石斛均为石斛项下品种。

2010年版《中国药典》将铁皮石斛单列而区别于其他石斛。

其功能为益胃生滋阴清热。

用于热病津伤,口干烦渴,食少干呕,病后虚热不退,阴虚火旺,骨蒸劳热,目暗不明,筋骨痿软。

主要分布于贵州、广西、浙江、福建、云南、湖南等地。

近年来对铁皮石斛的研究较多,现就铁皮石斛的主要化学成分及药理方面的研究进展综述如下。

1 铁皮石斛的化学成分1.1 多糖多糖是生物体内普遍存在的一类由单糖缩合形成糖苷键,并以线性或分枝方式连接而成的重要有机高分子化合物,一般认为多糖的活性与分子量、溶解度、黏度、结构有关,多糖分子量越大,不利于吸收而无法发挥生物活性作用;分子量过小,则无法形成活性功能聚合结构。

铁皮石斛多糖含量因产地、品种、生长季节、生长年限、不同部位等有所区别。

HUANG MQ等[1]研究的结果显示,铁皮石斛中所含的多糖主要有D-木糖、L-阿拉伯糖及D-葡萄糖等。

罗秋莲等[2]从铁皮石斛中分离出4种β-构型的甘露吡喃型酸性多糖。

铁皮石斛多糖属于非淀粉类多糖为膳食多糖,不能被人类肠道直接消化吸收,但可以被肠道微生物降解,从而问接的消化吸收。

颜美秋等[3]研究铁皮石斛多糖含量随种植年限变化规律发现,2年生>3年生>4年生,2年后铁皮石斛多糖含量随种植年限增加而减少。

铁皮石斛原球茎与活体真菌液体悬浮共培养研究

铁皮石斛原球茎与活体真菌液体悬浮共培养研究［摘要］目的：建立铁皮石斛原球茎与活体真菌MF24液体悬浮共培养体系，为原球茎产业化生产提供科学依据。

方法：研究原球茎的培养体系是否适用于MF24真菌的生长，对光照和黑暗条件下单独培养的原球茎及与真菌共培养的原球茎的生长状况进行研究，测定生物量及增殖倍数，用HPLC分析比较原球茎中11个特征峰面积的变化。

结果：MF24真菌在培养原球茎的6，7V液体培养基中能正常生长，以1 500 lx光照8～10 h·d-1会延缓真菌的生长速度。

原球茎在光照或暗培养条件下都能正常生长，在原球茎培养初期加入MF24真菌，两者相互抑制生长。

在原球茎的生长稳定期接入5块直径9 mm真菌菌块，对原球茎的生长和化学成分的种类无显著影响，但光照条件下共培养5 d的原球茎中有10个化合物含量比对照降低13.64%～138.47%，暗培养条件下共培养5 d的原球茎中有7个化合物含量比对照提高0.71%～12.82%，4个化合物含量比对照小幅降低3.03%～14.14%。

结论：在适宜的条件下，活体真菌MF24可与铁皮石斛原球茎共培养，并影响其次生代谢水平。

［关键词］铁皮石斛；原球茎；小菇属真菌；液体悬浮共培养；生物量；HPLC铁皮石斛Dendrobium officinale Kimura et Migo是重要的石斛药材来源[1]，利用液体悬浮培养生产铁皮石斛原球茎以代替原植物提取有效成分，是解决铁皮石斛药用资源紧缺的方法之一[2]，但如何提高原球茎的内在质量是工业化生产的关键问题。

植物内生真菌与其宿主是协同进化的，近年来，大量的研究表明内生真菌能够影响植物次生代谢产物的合成[3]。

在以往的研究中，先分别培养真菌MF24 Mycena sp.和铁皮石斛原球茎，再将发酵培养的真菌灭活制成诱导子（代谢物），加入原球茎中共同培养，来提高目的次生产物的含量[4]。

目前，将活体内生真菌菌丝体与宿主细胞直接共培养或利用内生真菌来诱导宿主细胞提高目的次生产物产量的研究少见报道。

石斛化学成分与药理活性研究进展

天津农业科学ＴｉａｎｊｉｎＡｇｒｉｃｕｈｕｒａｌＳｃｉｅｎｃｅｓ
・植物生理与生物技术
石斛化学成分与药理活性研究进展
屈小媛，武玉祥，张久磊
（１．贵州省生物研究所，贵州贵阳５５０００９；２．贵阳药用植物园，贵州贵阳５５０００２）
ａｓｗｅｌｌａｓｓｗｅｅｔｉｎｆｌａｖｏｒ．ａｎｄｔｈｅｎｉｔｉｓｌｉｓｔｅｄａｓｏｎｅｏｆｔｏｐｇｒａｄｅ．Ｄｅｎｄｒｏｂｉｕｍｈａｓａｄｖａｎｔａｇｅｓｓｕｃｈａｓａｎｔｉｔｕｍｏｒａｃｔｉｖｉｔｙ，ａｎｔｉ — ａｇｉｎｇ，
ｄｒｙｍｏｕｔｈｐｏｌｙｄｉｐｓｉａａｎｄｈｅａｔａｆｔｅｒｉｌｌｎｅｓｓａｓｗｅｌｌａｓｈｅａｄｄａｒｋｕｎｋｎｏｗｎ．Ｔｈｉｓｐａｐｅｒｇａｖｅａｂｉｅｒｆａｃｃｏｕｎｔｏｎｔｈｅｃｈｅｍｉｃａｌｃｏｎ —
Ａｂｓｔｒａｃｔ：ＤｅｎｄｒｏｂｉｕｍｉｓａｇｅｎｕｓｏｆＯｒｃｈｉｄａｃｅａｅｉｎｌａｒｇｅｒ．Ｉｔｉｓａｋｉｎｄｏｆｒａｒｅｍｅｄｉｃｉｎａｌｍａｔｅｒｉａｌａｎｄｈａｓａｔｉｏｎａｌ

铁皮石斛原球茎多糖的诱导、提纯、理化性质及生物活性研究

铁皮石斛原球茎多糖的诱导、提纯、理化性质及生物活性研究多糖是石斛的主要药用成分。

现代药理学研究表明，石斛多糖具有延缓衰老、增强免疫力、抗肿瘤、降血糖等多种药理活性。

铁皮石斛（Dendrobium candidum Wall．ex Lindl）是石斛中的极品，具有益胃生津、滋阴清热、润肺止咳的功效。

近年来，由于过度消耗，石斛野生资源已濒临绝迹。

由此，提出铁皮石斛胚性组织原球茎（protocorm）替代其原植株成为药源的可能性。

但迄今有关铁皮石斛原球茎多糖的研究尚未见报道。

本研究旨在优化铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的培养条件，了解铁皮石斛原球茎多糖的理化性质和生物活性。

研究结果如下：1．铁皮石斛原球茎悬浮培养诱导高含量多糖的研究（1）铁皮石斛原球茎生长、多糖积累以及营养物消耗的动态变化为筛选适合铁皮石斛原球茎的最佳培养方式，对比了固体培养和液体悬浮培养这两种培养方式，并研究了液体悬浮培养基质的营养消耗趋势，同时分析了液体培养液中pH值和电导率的变化。

结果表明：原球茎在固体培养条件下，培养60d后干重达到最大为13.40g／L，多糖产量最大值为2412.5mg／L，在液体悬浮培养条件下，干重需要50d达到最大为17.64g／L，多糖产量最大值为3081.2mg／L，液体悬浮培养在干重量、多糖含量和多糖产量等方面优于固体培养。

在70d的周期内，悬浮培养原球茎以近“S”型曲线生长；原球茎在培养初期生长较缓慢，培养10d后原球茎生长进入快速生长期，原球茎干重量在第50d有最大值（17.64g／L），随后下降，60d后原球茎开始衰亡。

多糖的积累与原球茎生长有一定的相关性，多糖含量从10d起开始逐步增长，30d达到最大（213.5mg／g·DW），而后迅速降低。

在悬浮培养过程中，糖和磷的消耗速度较快，铵态氮优于硝态氮被吸收利用；pH值在培养前10d快速下降，随后又逐渐回升；在指数生长期，培养基中电导率降低与原球茎干重量增加之间有线性负相关性。

铁皮石斛促生内生真菌的功能研究进展

１内生真菌与宿主的关系
内生真菌因其独特的生活环境，与宿主关系密切。内生真菌与宿主协同演化中形成互惠共生关系，一方
面内生真菌在宿主中吸收营养后能分泌植物生长所需要的激素，提高营养元素和代谢产物的积累［７－１０１；另
一
２．２提高石斛营养元素的积累
具有相同或相近的生源合成途径，产生一些重要的抗
通讯作者：林江波，硕士，副研究员。Ｅ－ｍａｉｌ：］ｉｎｊｉａｎｇｂｏ
１９７６＠ｙａｈｏｏ．ｃｏｍ．ｃｎ
项目来源：福建省科技厅公益类科研专项（２０１６Ｒ１０１２ — ５）
资助。
－
５２－
中国园艺文摘
人类疾病的药物，这类内生菌也是目前开发药用资源的重要途经［２０］ｏ相子春从铁皮石斛根部分离到内
张集慧等采用ＨＰＬＣ法分析铁皮石斛内生菌
元素的净增率尤为显著，增量均在１００％以上。
２．３提高石斛代谢产物积累量
石斛所含化学成分主要包括多糖类、生物碱类、联苄类、菲类、芴酮类、半萜类、甾体、酚类等［１５１７］，内生真菌在与石斛的协同作用下，能诱导这些次生代
中药材，具有很高的药用价值；同时，盆栽铁皮石斛已成为一种高档的观赏花卉，也具有很高的观赏价值。
铁皮石斛多附生于树上或岩石上，生长缓慢，自身繁
殖力低，野生时需要与内生菌共生才能完成生活史。
铁皮石斛体内包含多种内生真菌，但只有部分内生真

铁皮石斛有效成分及药理作用的研究进展

铁皮石斛有效成分及药理作用的研究进展张绘芳1,郭慧2【摘要】铁皮石斛主要含石斛多糖、生物碱、氨基酸、微量元素和菲类化合物等有效成分;现代研究表明,其具有增强机体免疫力、抗肿瘤、促进消化液分泌、抑制血小板凝集、降血脂、降血糖、抗氧化、抗衰老和退热止痛等药理作用。

本文通过对相关文献的整理和归纳,对铁皮石斛有效化学成分和药理作用的研究概况作一综述,为开发利用有药用价值的天然产物提供参考。

【关键词】铁皮石斛;化学成分;药理作用铁皮石斛(Dendrobium candidum Wall.ex Lindl)为兰科(Orchidiaceae)石斛属多年生草本植物的新鲜或干燥茎。

铁皮石斛又名铁皮枫斗、耳环石斛、铁皮兰、黑节草等,为石斛之上品,名列“中华九大仙草”之首。

其味甘,性微寒,归胃、肾经,具有养阴清热、益胃生津的功效,药用价值历代为人们所推崇。

本文就近年来对铁皮石斛的化学成分和药理作用研究情况做一次较全面回顾,旨在使该种传统中药的独特药用价值被更多地了解,为进一步研究、开发和利用提供参考。

1 有效化学成分1.1 多糖多糖是铁皮石斛中一种重要的活性物质,且含量较高。

研究表明,多糖成分与铁皮石斛的药效,如增强机体免疫机能、杭肿瘤、杭衰老、杭疲劳、降血糖等方面,有着密切的联系。

实验证明从铁皮石斛中能分离纯化得到三种多糖I、II、III,并确定它们为一类0-乙酸葡萄甘露聚糖。

杨虹等运用糖组成分析、甲基化分析及NMR 等方法研究铁皮石斛多糖DT2、DT3的化学结构,主要以。

α-(1-4)-D-Glc为主链。

这种多糖具有增长T细胞、B细胞、NK细胞和巨噬细胞功能的作用。

1.2 生物碱生物碱类成分是石斛属植物中最早分离并进行结构确认的化合物,其研究开始于20世纪30年代。

陈晓梅等对铁皮石斛和金钗石斛的化学成分进行比较,两者有10个生物碱类的相同成分,铁皮石斛中生物碱类成分数量和含量均低于金钗石斛,但就所含的相同化学成分而言,铁皮石斛的质量好于金钗石斛。

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎诱导作用的研究

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎诱导作用的研究由于铁皮石斛繁殖能力低、生长缓慢、成熟周期长，加上近年来的过分采挖，野生资源已濒临枯竭。

因此，用铁皮石斛组培苗或原球茎代替野生药材的研究在我国逐渐引起关注。

根据兰科植物与真菌共生形成菌根的特点，本文对真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长发育及其质量的影响进行了较系统研究。

选用24种真菌制成诱导子与液体培养的铁皮石斛原球茎共培养后发现：10号真菌诱导子对原球茎生长量有提高作用，而其它真菌诱导子无影响；多种诱导子分别处理的原球茎的提取物对T淋巴细胞增殖有促进作用，其中24号真菌诱导子处理的原球茎的提取物既可促进淋巴细胞的增殖、也可抑制肿瘤细胞生长。

通过对24号真菌形态学特性的研究和ITS序列的分析，初步确定24号真菌为小菇属真菌。

培养基添加24号真菌诱导子培养106小时，可以使液体培养的铁皮石斛原球茎总生物碱含量比对照提高58.2％。

薄层层析和高效液相色谱分析结果表明：24号真菌诱导子处理的原球茎比处理前有7种新成分出现；其中有3种成分为野生铁皮石斛所特有。

采用液体-固体双重循环培养方法实现原球茎的快速繁殖，并研究各个环节中原球茎生长和发育的因素。

研究结果表明选择1／2MS固体培养基、20％马铃薯提取液、3％蔗糖、pH5.8的培养条件对原球茎的生长较为有利；其中培养基中添加马铃薯提取液是原球茎快速生长和BAP促进其分化苗的必要条件。

pH6.0、添加灭活真菌的培养基上的原球茎生长受到抑制；激素NAA可使原球茎生长量比对照提高16％。

铁皮石斛原球茎在液体培养体系(67-V)生长迅速、品质良好；由此获得的原球茎向固体培养转移的最优培养基为全1／2MS固体培养基。

循环培养过程中筛选出了性状稳定的G、B、E、Hp6原球茎株系；其中株系B和Hp6的总生物碱的含量比普通原球茎(CK)高20％以上。

而株系G的原球茎阶段稳定、对真菌诱导子敏感。

在此基础上，对原球茎株系G进行单一胚系筛选，选出的铁皮石斛原球茎苗不发育株系(SUDP)的形态发生和发育速度一致的，性状稳定，适合作诱导作用的实验。

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物碱含量影响及其机理

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生物碱含量影响及其机理铁皮石斛(Dendrobium officinale Kimura et Migo)是兰科石斛属多年生附生草本植物,是一种兼具观赏价值与药用价值的中草药。

本文选用铁皮石斛原球茎为材料(产地为福建连城),对原球茎离体培养条件进行优化,并以此为基础测定不同浓度和处理时间尖孢镰刀菌诱导子处理下铁皮石斛原球茎总生物碱含量的变化。

同时克隆了两个调控生物碱合成途径相关酶的基因——DoHDR基因和DoIspF基因,并进行了基因相对表达量分析。

1铁皮石斛离体培养条件优化以连城铁皮石斛为材料,优化铁皮石斛离体培养条件。

①对比水杨酸、蛋白胨和番茄汁对铁皮石斛原球茎增殖的影响,结果显示,当水杨酸浓度为2 mg/L时原球茎增殖效果最好,但原球茎生长状态不好。

蛋白胨浓度为2 mg/L时最有利原球茎增殖,番茄汁添加量为100 ml/L时原球茎增殖效果最好,且原球茎生长旺盛。

②比较几组不同混合有机添加物对铁皮石斛原球茎增殖的影响,采用的添加物组合分别为香蕉和土豆、苹果和土豆、香蕉和苹果、番茄和土豆。

结果表明添加50g/L土豆增殖效果最好③比较不同容器和培养方式对原球茎增殖的影响,结果表明,采用三角瓶液体振荡培养最有利原球茎增殖。

2真菌诱导子对铁皮石斛总生物碱含量的影响基于优化的离体培养条件下所得到的大量原球茎,比较不同浓度不同处理时间尖孢镰刀菌诱导子对铁皮石斛总生物碱的影响,结果发现当诱导子浓度较低时(100mg/L,200mg/L),总生物碱含量随处理时间增加呈先上升后下降的趋势,当诱导子浓度较高时(500 mg/L),总生物碱含量先下降后上升,而当诱导子浓度过高时(1000 mg/L)总生物碱合成受到抑制,含量都比较低。

而最适宜生物碱合成与积累的条件为200 mg/L诱导子处理3天,总生物碱含量最高。

3铁皮石斛HDR基因和IspF基因的克隆和生物信息学分析以铁皮石斛原球茎为材料采用同源克隆与RACE相结合的方法,得到铁皮石斛MEP途径的2个基因——DoHDR和DoIspF,DoHDR全长1784 bp,包含完整ORF,长度为1382 bp,编码460个氨基酸,生物信息学分析表明该基因编码的蛋白为稳定的酸性亲水蛋白,不具有跨膜结构,不含信号肽,二级结构预测表明,该蛋白主要含有α-螺旋、p-折叠和无规则卷曲。

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响

真菌诱导子对铁皮石斛原球茎生长及次生代谢产物的影响铁皮石斛Dendrobium candidum Wall．Ex Lindl是《中华人民共和国药典》收载的5种石斛属植物之一，是石斛属药用植物中最为珍稀名贵的种，有着极高的药用价值。

近年来，由于过度采挖和生境的破坏，铁皮石斛的自然资源已濒临枯竭。

而铁皮石斛独特的生理和生态学特点，又使其目前的人工栽培技术还不够成熟，难以实现大面积栽培。

如何能够在保护铁皮石斛自然资源的前提下充分利用它为人类的健康保护事业作出贡献，成为目前一个急待解决的问题。

根据该植物与真菌形成菌根的特点，本论文对铁皮石斛原球茎与小菇属真菌MF24（Mycenasp．）诱导子的相互作用进行了系统研究；对MF24诱导子处理铁皮石斛原球茎、对照铁皮石斛原球茎、铁皮石斛原药材和金钗石斛原药材的化学成分进行了分析比较；对诱导子处理的铁皮石斛原球茎的次生代谢产物进行了研究：并以分离得到的铁皮石斛原球茎中的化学成分为标准，应用HPLC法分析了诱导子处理对原球茎中这些成分含量的影响，为解决铁皮石斛资源紧缺问题开辟新途径。

一、获得了真菌诱导子在铁皮石斛原球茎培养中的最佳工艺首次以来源于铁皮石斛的小菇属内生真菌MF24（Mycena sp．）为诱导子，对铁皮石斛原球茎与诱导子在固体培养基上相互作用过程中诱导子的处理方法、使用剂量、加入时间及与原球茎作用时间等因素对原球茎生长及次生代谢产物的影响进行了系统研究，获得二者相互作用的最佳工艺为：以MF24菌麦麸液体培养基摇床发酵培养的发酵液为诱导子，以250mL·L<sup>-1</sup>(诱导子·培养基<sup>-1</sup>)的剂量加入以1／2MS土豆固体培养基光照培养16周的铁皮石斛原球茎中，继续培养6周后收获。

与单独培养的原球茎相比，在此条件下培养的原球茎鲜重提高了50％，干重提高了28％，总生物碱含量提高了12％。

石斛属药用植物内生真菌多样性研究共3篇

石斛属药用植物内生真菌多样性研究共3篇石斛属药用植物内生真菌多样性研究1石斛属药用植物内生真菌多样性研究石斛属是一种重要的中草药材，广泛应用于中医领域。

石斛植物对人体健康有多种功效，如降血糖、抗氧化等。

然而，石斛植物内生真菌的多样性及其在石斛植物中的作用仍然是一个未开发的领域，因此需要针对其进行研究。

石斛植物内生真菌研究可以通过多种方法进行。

其中一个常用的方法是利用真菌的DNA条形码技术。

这种技术既可优化物种鉴定的速度，又能对大量样本进行快速、准确的物种鉴定。

石斛植物内生真菌的多样性是一个长期存在的问题。

目前有多项研究表明，石斛植物内生真菌的种类非常繁多，种类分布广泛，主要分布在植物的根部、地下块茎和地下根系中。

内生真菌能够影响植物的形态和生长，同时也能够影响植物的代谢过程和生理活动。

石斛植物内生真菌的生物学功能也值得研究。

内生真菌的存在往往为植物提供生长上的帮助。

例如，内生真菌能够调节植物的光合作用、氮代谢和抗病能力。

同时，内生真菌也能够产生抗菌素和植物激素，增强植物的免疫力和生长能力。

最近的研究表明，石斛植物内生真菌的多样性不只是单重的功能，而是多种功能共同存在的表现。

例如，一项新的研究发现，一种新的内生真菌种类能够抵抗普通草履虫鞭毛虫，并提高了石斛植物的生长速度。

这种真菌所产生的化学物质还能够增强石斛植物的活性成分，进一步提高了其药效。

综上所述，石斛属药用植物内生真菌的多样性研究是一个非常重要的领域。

这些研究可以为中医领域提供更多的药用植物品种，同时可以帮助人们更好地理解内生真菌对植物代谢和生理活动的影响。

这些研究也将为开发新型药物和治疗方法提供更为广阔的空间综上所述，石斛属药用植物内生真菌具有多样性和生物学功能多样的特点。

研究表明，内生真菌能够影响植物生长和代谢，并产生多种活性成分，从而具有广阔的药用潜力。

因此，加强对石斛植物内生真菌的研究和开发，将为中医药的发展和人类健康的改善提供有益的支持石斛属药用植物内生真菌多样性研究2石斛属药用植物内生真菌多样性研究石斛属是一类常见的药用植物，它们被广泛应用于中药制剂、保健品等领域。

内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究共3篇

内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究共3篇内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究1内生真菌MF24对铁皮石斛原球茎诱导作用及石斛的化学成分和活性研究铁皮石斛（Dendrobium officinale）是我国重要的中药材之一，具有抗炎、抗氧化、降血糖等多种药理作用。

其主要成分为多糖类化合物、黄酮类化合物以及生物碱类化合物等。

然而，因为采摘破坏了生态环境，铁皮石斛野生种群逐渐减少，市场供应紧张，价格居高不下。

因此，采用组织培养繁殖铁皮石斛已成为解决上述问题的一种途径。

在铁皮石斛的组织培养过程中，内生真菌MF24作为拟南芥（Arabidopsis thaliana）的内生真菌，对D. officinale原球茎进行了诱导实验。

结果表明，内生真菌MF24可以诱导铁皮石斛原球茎增殖和分化。

经过诱导处理的原球茎的菌落增生量明显高于未经处理的对照组，而且诱导处理组的原球茎增殖率也显著高于对照组（P<0.05）。

与对照组相比，诱导处理后的原球茎还表现出更多的生长点和更长的侧芽。

这说明内生真菌MF24可以促进铁皮石斛原球茎的增殖和分化，为高效的组织培养提供了依据。

此外，研究人员还分离和鉴定了铁皮石斛的主要化学成分。

采用高效液相色谱HPLC和液相质谱联用技术（HPLC-MS）对铁皮石斛中的化学成分进行了分析。

结果显示，D. officinale中的主要化学成分为多糖类化合物、黄酮糖类化合物和酚酸类化合物。

其中多糖类化合物含量最高，为6.68 mg/g，黄酮糖类化合物和酚酸类化合物的含量分别为2.52 mg/g和1.74 mg/g。

这些化学成分是铁皮石斛具有药用价值的主要基础。

最后，还对铁皮石斛的化学成分进行了活性研究。

采用自由基清除试验和DNA断裂试验检测了铁皮石斛的抗氧化和抗突变能力。

研究结果表明，铁皮石斛具有较强的自由基清除能力，能有效预防DNA的氧化损伤和突变。

铁皮石斛内生真菌研究进展

铁皮石斛内生真菌研究进展徐焰平【摘要】目前已经从不同生境的铁皮石斛（ Dendrobium officinale Kimura et Migo）中分离到内生真菌252株，这些内生真菌涵盖了真菌门（ Eumycota；Mycobionta）5个亚门中的半知菌亚门（ Deuterornycotina）、担子菌亚门（ Basidiomycotina）和子囊菌亚门（ Ascomycotina）等3个亚门，已经鉴定的内生真菌分属于48个属。

有些内生真菌对铁皮石斛的种子萌发和植株生长均有促进作用。

对铁皮石斛内生真菌的多样性和分类、铁皮石斛内生菌与宿主的关系进行了综述，探讨研究中存在的问题，并对今后研究方向提出建议。

%Sofar252endophyteshavebeenisolatedfromDendrobiumofficinaleofdi fferenthabitats,theycovered three subphylaDeuterornycotina,Basidiomycotina and Ascomycotina of five subphyla of the phylum of Eumycota. The endophytes that have been identified belonged to 48 genera. Many of endophytic fungi possess promotion without ex-ception to seed germination,plant’s growth,reproductive growth of D. officinale. The diversity,classification,the relation of D. officinale with the host was reviewed in this paper;and proposals on directions for further studies were put forward.【期刊名称】《微生物学杂志》【年(卷),期】2015(000)005【总页数】5页(P108-112)【关键词】铁皮石斛;内生真菌;多样性;鉴定;分类【作者】徐焰平【作者单位】泉州医学高等专科学校检验预防系，福建泉州 362010【正文语种】中文【中图分类】Q93-31内生真菌(endophytic fungi)是指在其生活史中的一定阶段或全部阶段生活在健康植物的组织和器官内，对植物组织没有引起明显病害症状的真菌，包括在其生活史中的某一阶段营表面生活的腐生菌、对宿主暂时没有伤害的潜伏性病原菌和菌根菌[1] 。

铁皮石斛的化学成分、药理作用和临床应用

增高【２ｌＪ。
ｔｕｇｕｏｃｈａｎｇ＠ｙａｈｏｏ．ｏ哪．∞
・７０・
２．４对消化系统的作用铁皮斛味甘、性微寒．既可养阴．又
万方数据
ＳｔｒａｉｔＰｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌＪｏｕｒｎａｌＶｏｌ２２Ｎｏ．２２０１０
能清热。对阴虚胃火盛型的胃病，服用铁皮石斛更是大有益处。用浸膏灌胃对家兔进行观察．铁皮石斛能对抗阿托品对唾液分泌的抑制作用，与西洋参有协同作用，合用后还能促进正常家兔的唾液分泌【２２】。３临床应用现代临床和药理研究证明，铁皮石斛具有滋阴润肺、养胃生津、清热明目、补五脏虚劳的功效。在恶性肿瘤的辅助治疗、慢性胃炎、糖尿病、慢性咽炎、久病体虚免疫功能低下、眼‘ 科保健等方面都有广泛的应用。铁皮石斛在恶性肿瘤的治疗中，一方面因其所含的菲类物质鼓槌菲（ｃｈｒｙｓｏｔｏｘｅｎｅ）和毛兰素（ｅｒｉａｎｉｎ）有明显的抗癌活性；另一方面因其多糖类成分能显著增加细胞免疫功能和体液免疫功能。增强单核一巨噬细胞吞噬功能。因而对临床肿瘤放、化疗患者及各种原因造成的免疫低下患者可以起到很有效的辅助治疗作用。陈晓萍（２３）等通过８０例肺癌放、化疗患者结合铁皮枫斗制剂的治疗，表明铁皮枫斗制剂对气阴两虚证及肺癌患者症状改善效果显著。以铁皮石斛为主制成的铁皮枫斗颗粒和铁皮枫斗胶囊有效改善慢性萎缩性胃炎气阴两虚证，临床未发现任何副作用【２４】。实验研究证明铁皮石斛还具有很好降血糖效果。因铁皮的抗氧化和免疫调节功能，故对中老年人群具有增强机体免疫力、抗衰老的保健的功效。４结语铁皮石斛是石斛属植物中的名贵品种，在治疗和日常保健中都有广泛的应用，而且通过实验研究，对小鼠无急性毒性
（２２】徐建华，李莉，陈立钻．铁皮石斛与西洋参的养阴生津作用研究（Ｊ］．中草药．１９９５。２６（２）：７９．［２３】陈晓萍．张沂平，朱婀如，等．铁皮枫斗颗粒（胶囊）治疗肺癌放化

铁皮石斛化学成分及药理作用研究进展

铁皮石斛化学成分分析
铁皮石斛中含有丰富的生物活性成分，主要包括多糖、黄酮、酚类、氨基酸等。其中，铁皮石斛多糖是最为重要的有效成分之一，具有显著的免疫调节、抗肿瘤、抗氧化等作用。此外，铁皮石斛中还含有一些挥发性成分和菲类成分，这些成分也具有很好的药用价值。不同品种的铁皮石斛之间，其化学成分存在一定的差异，这也为铁皮石斛的品种筛选与品质鉴定提供了依据。
谢谢观看
铁皮石斛化学成分与其药理作用之间存在密切的。生物碱作为主要药效成分，与其抗肿瘤、抗氧化等药理作用密切相关。多糖则能够通过增强机体免疫力，调节机体代谢，发挥抗菌、抗炎等多方面的作用。挥发油则通过对机体的抗炎、抗菌、抗病毒等作用，间接发挥治疗作用。同时，铁皮石斛的不同化学成分之间可能存在协同作用，从而提高其药理作用的效果。
未来，随着科技的发展和铁皮石斛的深入研究，有望在以下几个方面拓展其应用前景：
1、扩大铁皮石斛种植面积，通过优化种植技术和管理模式，提高产量和品质，降低生产成本，满足市场需求；
2、深入研究和开发铁皮石斛新产品，如药物、保健品、食品等，拓展应用领域和市场份额；
3、加强铁皮石斛与其他中药材的复方研究，发挥其协同作用，提高临床疗效；
然而，不同的实验条件和用药剂量会对铁皮石斛的药理作用产生影响。例如，在低浓度时，铁皮石斛多糖主要发挥抗炎作用，而在高浓度时则主要表现为抗肿瘤作用。因此，在铁皮石斛的药理作用研究中，需要综合考虑实验条件和用药剂量的影响。
铁皮石斛应用前景展望
铁皮石斛具有广泛的药用价值和应用前景。目前，市场上的铁皮石斛产品主要包括保健品、中药饮片、食品等。随着人们对铁皮石斛认识的深入，其市场需求将继续增长，产品种类也将更加丰富。
3、抗炎作用：铁皮石斛的生物碱类化合物具有显著的抗炎作用，能够抑制炎症反应的发生和发展。研究表明，铁皮石斛生物碱能够抑制炎症介质的释放，减轻炎症反应引起的组织损伤。

一种铁皮石斛原球茎固体培养的菌根真菌诱导剂[发明专利]

专利名称：一种铁皮石斛原球茎固体培养的菌根真菌诱导剂专利类型：发明专利
发明人：郭顺星,陈晓梅,王春兰,孟志霞,肖培根
申请号：CN200510073049.0
申请日：20050531
公开号：CN1872996A
公开日：
20061206
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种菌根真菌诱导子在铁皮石斛原球茎固体培养中的应用技术，所用的真菌为分离自兰科药用植物铁皮石斛根内的真菌MF24(Mycena sp.)；先分别培养真菌和铁皮石斛原球茎，再将培养的真菌制成诱导子，加入铁皮石斛原球茎中共同培养。

采用该项新技术，可以提高铁皮石斛原球茎的产量和有效成分含量。

该项技术培养方法简单、不添加任何激素，生产出的铁皮石斛原球茎为绿色产品，可以代替铁皮石斛药材供药用。

申请人：中国医学科学院药用植物研究所
地址：100094 北京市海淀区西北旺中国医学科学院药用植物研究所
国籍：CN
更多信息请下载全文后查看。

铁皮石斛活性成分及其功能分析与研究

铁皮石斛活性成分及其功能分析与研究
铁皮石斛为我国传统滋阴名贵中药，其保健价值为人们所共识。

铁皮石斛为兰科石斛属植物铁皮石斛(Dendrobium0夕hcinale Kimura et Migo)的干燥茎，因表皮呈铁绿色而得名。

石斛属植物按形态、产地等可分为铁皮、金钗、霍山、黄草、环草、马鞭等数十个品种，其中以具茨山铁皮石斛最为珍贵。

具茨山野生铁皮石斛生于海拔100-3000m之间的山地半阴湿岩石、树皮上，喜温暖湿润气候和半阴湿的环境，不耐寒。

铁皮石斛的鲜茎可直接食用，或炖汤，或泡茶，或浸酒，通常加工成干品，如铁皮枫斗、铁皮石斛功能性饮料等。

近年来以铁皮石斛为原料生产的高级保健品越来越多，畅销河南郑州，新密等地区。

铁皮石斛中含有的主要活性成分为石斛多糖、石斛碱、氨基酸、芪类及其衍生物以及多种挥发性成分。

多糖是铁皮石斛的主要成分，与其药理活性有着密切的联系，多糖含量的高低是目前判断铁皮石斛质量的主要依据。

铁皮石斛多糖主要山葡萄糖、半乳糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖醛酸等单糖组成，与此同时，铁皮石斛多糖具有的抗氧化、抗炎、抗肿瘤、增强免疫功能等活性。

生物碱类成分是石斛属植物中最早分离并进行结构确认的化合物，低于金钗石斛，虽然总生物碱类成分含量较低，但就其中所含的特有生物碱类成分而言，具茨山铁皮石斛的质量好于金钗石斛。

与多糖类似，不同来源、组织器官、年份的具茨山铁皮石斛其生物碱的积累不同。

铁皮石斛具有抗衰老、抗肿瘤、降低血糖、提高免疫功能等作用，对恶性肿瘤、胃肠道疾病、糖尿病、白内障、关节炎、血栓闭塞性脉管炎及慢性咽炎等疾病具有很好的疗效，因此，被国际药用植物界称为“药界大熊猫”。