碱性磷酸酶的检测与临床应用
碱性磷酸酶活性测定
方法评价
优点：灵敏度较高，显色稳定，
不需去蛋白，操作简单、快速；
缺点：准确度和精密度都较低,受
胆红素和溶血的干扰。
实验材料与仪器
器材： 新鲜血清、移液器、试管及试管 架、吸量管、恒温水浴箱、分光 光度计
移液器
1.调刻度 2.取样 注意：加不同物质换 枪头
实验材料与仪器
试剂盒：
1.混合液：磷酸苯二钠、4-氨基安替比林 2.标准液：已知浓度的酚溶液 3.样 品：血清 4.蒸馏水 5.显色剂:高铁氰化钾
生物化学与分子生物学实验
血清碱性磷酸酶活性测定
授课教师：
实验目的
1.学习血清碱性磷酸酶活性测定 的原理及方法 2.了解血清碱性磷酸酶活性测定 的临床意义
基本概念
酶活性：即酶催化化学反应的能力。
酶的活性通常以活性单位表示。
它反映在规定的条件下，酶促反应 在单位时间内（秒、分或小时）生 成一定量的产物（mg、μg 、μmol） 或消耗一定量的底物所需的酶量。
——呆小病、磷酸酶过少症、维生素C缺 乏症等。
Katal单位：1Katal指在规定条件下， 每秒钟转化1mol底物的酶量。 1Katal=60×106IU
本实验以血清在37℃，pH为10的
条件下，与AKP底物液作用30min， 每生成1mg酚所需的酶量为1个酶
活性单位。
实验原理
碱性磷酸酶（AKP）在碱性条件下
催化磷酸苯二钠水解，释放出酚和
磷酸，酚在碱性溶液中与4-氨基安
基本概念
酶活性单位是衡量酶数量的尺度， 同一种酶由于实验方法、测定条件 不同，酶活性单位的规定也不同。
在相同测定条件下，酶活性单位越 大，表示酶的含量越高，酶促反应 速度越快。
血清中碱性磷酸酶的测定
果。
误差分析
误差来源识别
分析测定过程中可能存在的误差来源，如试剂不稳定 性、操作不规范等。
误差评估
对误差进行定量评估，了解误差对测定结果的影响程 度。
误差控制
采取相应的措施控制误差，如定期校准仪器、规范操 作流程等，以提高测定结果的准确性和可靠性。
05 结论
CHAPTER
实验总结
实验原理
本实验基于碱性磷酸酶在pH值为9.6 的磷酸盐缓冲液中，能够将磷酸苯二 钠水解为苯酚和磷酸，苯酚在硫酸的 作用下可以形成稳定的苯酚钠盐，进 而通过分光光度计测定其吸光度，从 而计算碱性磷酸酶的活性。
02
探索其他相关指标与碱性磷酸酶的关联性，以更全面地评估肝
胆疾病的病情和治疗效果。
针对实验中的关键步骤和影响因素进行深入研究，以提高实验
03
的准确性和可靠性。
谢谢
THANKS
测定方法分类
根据测定原理，碱性磷酸酶的 测定方法可分为化学法和生物 法两类。
化学法包括酚试剂法、磷酸苯 二钠法等；生物法包括利用同 工酶的电泳法和免疫法等。
其中，酚试剂法由于操作简便、 准确度高，是目前临床上最常 用的测定方法。
03 实验步骤
CHAPTER
样本采集与处理
采集血清样本
从患者静脉采血，分离出血清， 避免溶血和污染。
数据转换
根据需要，将测量值转换为相应 的浓度或活性单位，以便进行比 较和解释。
结果判断与解读
正常范围判断
01
根据参考值范围，判断血清中碱性磷酸酶的活性是否在正常范
围内。
异常结果解读
02
对于异常结果，应结合临床情况和相关指标进行分析，以确定
可能的病因或病理状态。
碱性磷酸酶(AKP、ALP)的测定及医学意义
碱性磷酸酶（AKP、ALP）的测定及医学意义
1．正常参考值：
①速率法
女性：
1～12岁：＜500 U/L
15岁以上：40～150 U/L
男性：
1～12岁：＜500 U/L
12～15岁：＜750 U/L
25岁以上：40～150 U/L
②比色法：
健康成年人：3-13 金氏单位
儿童：5-28 金氏单位
2．临床意义
碱性磷酸酶活力测定常作为肝胆疾病和骨骼疾病的临床辅助诊断的指标。
血清碱性磷酸活力增高可见于下列疾病：
①肝胆疾病：阻塞性黄疸、急性或慢性黄疸型肝炎、肝癌等。
②骨骼疾病：由于骨的损伤或疾病使成骨细胞内所含高浓度的碱性磷酸酶释放入
血液中，引起血清碱性磷酸酶活力增高。
如纤维性骨炎、成骨不全症、佝偻病、骨软化病、骨转移癌和骨折修复愈合期等。
生化实验碱性磷酸酶的提取与鉴定
实验中的问题与改进
通过总结实验中的问题 并寻找改进方法，我们 可以提高实验效率和准 确性，从而更好地完成 生化实验任务并为未来 的研究打下坚实基础
生化实验:碱性 磷酸酶的提取与
鉴定
1 实验目的 3 实验步骤 5 实验结论 7 实验思考与拓展 9 实验中的问题与改进
-
2 实验原理 4 结果分析 6 实验讨论与改进 8 实验总结
1
实验目的
实验目的
本实验旨在学习 掌握碱性磷酸酶 的提取与鉴定方 法，了解其理化 性质及生物学意 义
2
实验原理
实验原理
该酶的理化性质及生物学意义，还锻炼了我们的实验操作技巧和处理生化样品的能力
2
通过实验，我们认识到碱性磷酸酶作为一种重要的生物酶，在生物体内发挥着参与物质代谢、能量转 化等重要生物学功能。此外，该酶在临床诊断、生物工程和环境监测等领域也具有广泛的应用价值
在实验过程中，我们需要注意实验细节和试剂的正确使用，以保证实验结果的准确性和可靠性。例如，
4
结果分析
结果分析
通过本实验，我们成功地提取并鉴 定了碱性磷酸酶
实验结果显示，该酶具有较高的活 性，且蛋白质浓度符合预期
通过本实验，我们掌握了碱性磷酸 酶的提取与鉴定方法，了解了其理 化性质及生物学意义
同时，实验过程中需要注意操作细 节和试剂的正确使用，以保证实验
结果的准确性和可靠性
5
实验结论
实验中的问题与改进
在实验过程中，我们可能会遇到一
01
些问题，例如提取的酶活性不高、
血清碱性磷酸酶活性测定
检测方法的准确性评估
参考方法：国际标 准或国家标准的血 清碱性磷酸酶活性 测定方法
准确性评估指标： 回收率、精密度、 线性范围、干扰因 素等
准确性评估方法： 与参考方法进行比 对，或与其他实验 室进行比对
操作规程标准化：制定标准化的操作规程，确保检测过程的规范性和一致性。
室内质量控制：通过定期进行室内质量控制，监控检测过程的稳定性和准确性，及时发现 并纠正误差。
实验室间质量控制
定期进行实验室间比对实验，确 保不同实验室间的检测结果具有 可比性。
对实验室内部质量控制数据进行 分析，及时发现和解决潜在问题。
检测方法的标准化
检测方法的标准化是确保血清碱性磷酸酶活性测定准确性和可靠性的关键步骤。
标准化包括使用统一的仪器设备、试剂和操作程序，以及定期对标准品进行校准等。
标准化可 标准化对于血清碱性磷酸酶活性测定的临床应用和科学研究具有重要意义。
检测方法的临床应用范围
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
参与权威机构组织的质控活动， 获取质控样品并按照要求进行检 测。
关注国内外质量控制动态，更新 质量控制方法和标准。
质量控制的监测指标
精密度：测定结果的重复性和稳 定性
灵敏度：检测低浓度样本的能力
添加标题
添加标题
添加标题
添加标题
准确度：测定结果与真实值的接 近程度
抗干扰能力：抵抗非特异性物质 干扰的能力
药物使用：某些药物可能影响血 清碱性磷酸酶活性。
药物因素
药物种类：不 同药物对血清 碱性磷酸酶活 性的影响不同
综述：碱性磷酸酶在临床方面的应用
综述：碱性磷酸酶在临床诊断与治疗中的应用作者：陆双妙 201540007医学检验技术15级17班1组碱性磷酸酶在临床诊断与治疗中的应用陆双妙广西医科大学15级17班1组（广西南宁）前言：碱性磷酸酶（ALP或AKP）是广泛分布于人体肝脏、骨骼、肠、肾和胎盘等组织经肝脏向胆外排出的一种酶。
随着对其研究的深入发展，涉及的内容和应用范围越来越广泛。
本文综合概述了碱性磷酸酶主要在临床检验方面的应用。
摘要：碱性磷酸酶按分布部位的不同可分为骨碱性磷酸酶、血清碱性磷酸酶以及中性粒细胞碱性磷酸酶等，本文分别探讨及阐述了它们各自在临床诊断中的应用和价值。
关键词：碱性磷酸酶1.骨碱性磷酸酶在临床诊断中的应用①检测骨碱性磷酸酶含量对小儿佝偻病的早期诊断价值佝偻病是婴幼儿的常见病，也是我国重点防治的儿科疾病之一。
佝偻病是由于维生素D 摄入不足或吸收障碍导致机体内钙、磷代谢紊乱，继而使骨发育障碍。
佝偻病如果不及时发现并治疗，可能造成骨骼的畸形，对患儿生理和心理造成损害，严重的佝偻病还会对患儿的神经、肌肉等系统或组织造成损害，故早期对婴幼儿进行佝偻病的筛查十分重要。
佝偻病早期缺乏特异性症状，患儿常常出现易激惹、夜惊、多汗等，且目前临床上对于、佝偻病的早期筛查尚无较为有效的指标，而对于<2岁，尤其是<1岁的婴幼儿，其血生化、X 线的表现均不明显，故临床上早期诊断婴幼儿佝偻病的困难很大①。
虽然我国佝偻病的发病率近年来逐年下降，但仍然很高②。
佝偻病如果不及时治疗，很容易造成畸形，严重者甚至会损伤神经系统，故对佝偻病进行早期、有效的筛查十分重要。
BALP是由成骨细胞合成的一种生物酶，其含量与成骨细胞的活性成正比，佝偻病患儿在临床症状未出现之前，骨钙化受阻就已经发生，当骨钙化不足时，成骨细胞活性增强，BALP含量也随之升高。
通过研究，898.IC 得出的结果显示，观察组患儿血清中BALP含量显著高于对照组(P<0．05)，而观察组BALP≥200 U／L的阳性检出率高达91．5％，显著高于对照组的21．0％(P<O．05)，这说明在未出现明显临床症状时，成骨细胞已经开始活跃，验证了上述的观点，说明BALP对于骨钙化不足较为敏感。
肠外营养中血清碱性磷酸酶的临床意义与监测策略
肠外营养中血清碱性磷酸酶的临床意义与监测策略肠外营养（TPN）在临床实践中被广泛运用于提供肠道无法充分吸收营养的患者。
TPN可以有效补充患者所需的营养物质，但同时也带来了一系列的代谢异常。
血清碱性磷酸酶（ALP）是一种由肝脏、骨骼和肠道分泌的酶，参与骨代谢和胆汁生成等过程。
其临床意义在于评估肝胆疾病、骨代谢异常以及胆汁堵塞等情况。
然而，在TPN中，血清ALP的水平可能会受到干扰，需谨慎监测和解读。
肠外营养中，血清ALP的升高与TPN相关的肝胆道病变有关。
长期使用TPN可能导致高脂肉肝、胆汁淤积、胆汁酸代谢紊乱等，并进一步导致血清ALP水平升高。
因此，在TPN治疗期间，及时监测血清ALP水平对于早期发现和干预肝胆损伤具有重要意义。
监测策略方面，血清ALP的监测频率应根据患者的具体情况和TPN使用时间来决定。
对于TPN治疗时间较短且没有肝胆道疾病史的患者，每周监测一次即可。
而对于长期使用TPN及存在肝胆道疾病风险的患者，则应每两周进行一次监测。
此外，监测血清ALP水平的同时还要结合其他肝功能指标、骨骼代谢指标和胆汁相应指标的变化进行综合分析。
只有综合分析才能全面了解患者的肝胆道情况和TPN治疗的效果。
需要注意的是，血清ALP水平的升高并不一定意味着存在肝胆疾病或骨骼异常。
其他因素，如干扰药物的使用、急性炎症反应、骨折愈合过程以及儿童生长发育等，都可能对血清ALP水平产生影响。
因此，在解读监测结果时需结合临床实际情况，综合考虑。
综上所述，肠外营养中血清ALP水平的监测具有重要的临床意义。
对于使用TPN的患者，及时监测血清ALP水平可以帮助早期发现和干预TPN相关的肝胆道病变，从而提高治疗效果和患者的生存质量。
在进行监测时，应根据患者的具体情况和TPN使用时间制定监测策略，并综合分析其他相关指标的变化，才能更好地评估患者的肝胆道状况和TPN治疗效果。
血清碱性磷酸酶活性测定
优选血清碱性磷酸酶活性测定
主要内容：
⑴ 实验目的 ⑵ 实验原理
⑶ 实验器材与试剂 ⑷ 实验操作 ⑸ 计算 ⑹ 临床意义 ⑺ 注意事项
基本概念
酶活力：称酶活性，是表示催化某一特定反应 的能 力。可以用在一定条件下所催化的某一特 定化学速度表示。
酶催化反应速度越快，酶活力升高，反之活力愈 低。
底物液
铁氰化钾溶液 血清
4．酚标准工作液（0.05mg/ml） 购买合格的二级 标准品。
实验操作
取4支试管，如下操作：
血清（ml） 酚标准液 蒸馏水
测定管 0.100 —— ——
pH10碳酸盐缓冲液 1.00
标准管 —— 0.100 —— 1.00
空白管 —— —— 0.100 1.00
对照管 —— —— —— 1.00
2．20mmol/L磷酸苯二钠溶液 先将500ml蒸馏水 煮沸，迅速加入磷酸苯二钠2.18g(磷酸苯二钠如含2 分子结晶水，则应称取2.54g) ，冷却后加氯仿2ml防 腐，在4℃冰箱保存。（用剩的溶液不应再倒回瓶中）
3．显色液（铁氰化钾的硼酸溶液） 称取铁氰化 钾2.5g，硼酸17g，各自溶于蒸馏水400ml中，两液混 合后，加蒸馏水至1L，置棕色瓶中避光保存(如出现 蓝绿色即弃去)。
试剂与仪器
器材： 5ml移液管，1ml移液管，100或200ul微量可调式移液 器，721E分光光度计，1cm比色皿，37℃ 恒温水浴
试剂： 1．0.1mol/L碳酸盐缓冲液(pH10.0) 无水碳酸钠
6.36g，碳酸氢钠3.36g，4-氨基安替比林1.5g，溶于 800mL蒸馏水中，定容至1L。置棕色瓶中保存。
思考
如何测定酶活力的大小？
碱性磷酸酶染色(NAP)
碱性磷酸酶染色（NAP）碱性磷酸酶染色（NAP）在临床的应用基本属于常规筛查的染色法。
（1）原理（偶氮偶联法）：血细胞内的碱性磷酸酶在pH 9.4～9.6的条件下将基质液中的α-磷酸萘酚钠水解，产生α-萘酚与重氮盐偶联形成不溶性灰黑色沉淀，定位于酶活性所在之处。
（2）结果判断：阳性结果为胞质内出现灰褐色至深黑色颗粒状或片状沉淀①（一）灰褐色沉淀，为0分。
②（+）胞质出现灰褐色沉淀，为1分。
③（++）胞质深褐色沉淀，为2分。
④（+++）胞质中已基本充满棕黑色颗粒状沉淀，但密度较低，为3分。
⑤（++++）胞质全被深黑色团块沉淀所充满，密度高，甚至遮盖胞核，为4分。
（3）参考值：成熟中性粒细胞碱性磷酸酶（NAP）的积分值为7～51。
由于各实验室的实验条件不同，正常值也有差异，应建立本实验室的正常值。
这里的正常值仅供参考。
（4）临床意义1）生理变化：①年龄变化：新生儿NAP活性增高，以后下降。
儿童期各年龄大致相似，成年期较儿童期活性减低，老年期更低。
②应激状态下的变化：紧张、恐惧、激烈运动等NAP活性可增高。
③月经周期中的变化：经前期增高，行经后降低，经后期恢复。
④妊娠期的变化：妊娠2～3个月的NAP积分值轻度增高，以后逐月增高，分娩时达高峰，产后则恢复正常。
2）病理性变化：①感染：细菌性感染时NAP积分值增高。
在细菌性感染中球菌性感染较杆菌性感染为高；在球菌性感染中，急性较慢性为高。
病毒性感染时，NAP积分值一般无明显变化。
因此本染色法有时可帮助鉴别细菌性感染和病毒性感染；②血液病：慢性粒细胞白血病的NAP积分值明显减低，常为“0”，缓解时NAP积分值上升到正常。
类白血病反应时的NAP积分值明显增高，中性杆状核粒细胞的碱性磷酸酶活性增强，甚至中性晚幼粒细胞也呈阳性反应。
因此本法常用来鉴别慢粒和类白血病反应及观察慢粒疗效的指标之一；急性粒细胞白血病时NAP积分值减低，急性淋巴细胞白血病时NAP积分值一般增高，因此本法可作为鉴别急粒和急淋的方法之一；急性单核细胞白血病时NAP积分值一般减低，有时可正常；粒细胞白血病合并细菌性感染时NAP积分值可增高，但不如单纯细菌性感染增高的明显；再生障碍性贫血的NAP积分值增高，当病情好转时，NAP积分值可下降，完全缓解时NAP活性可恢复到正常，因此本法对再障的诊断、疗效观察和估计病情均有一定意义；阵发性睡眠性血红蛋白尿的NAP积分值减低，因此本法可作为鉴别阵发性睡眠性血红蛋白尿和再生障碍性贫血的方法之一；真性红细胞增多症的NAP积分值升高，而继发性红细胞增多症的NAP积分值无明显变化。
血清碱性磷酸酶测定标准操作规程
血清碱性磷酸酶测定标准操作规程1.检验原理：(对硝基酚磷酸盐连续监测法)以磷酸对硝基酚二钠(PNPP)为底物，2—氨基-2-甲基丙醇(AMP)为磷酸酰基的受体。
在碱性环境，碱性磷酸酶催化PNPP水解产生的游离对硝基酚，对硝基酚在碱性溶液中转变成黄色。
根据在405nm 处吸光度增高速率来计算碱性磷酸酶的活性单位。
PNPP+H2O9阻'->对硝基酚+无机磷-20°C保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法；仪器法(详见DF-603/DI-600标准操作规程)5.参考范围6.检验结果的解释：6.1样本含量超出线性范围时，建议用0.9%(W∕V)的氯化钠溶液稀释样本。
7.2.单位换算：ukat∕L=U∕L*16.67*IO-38.检验方法的局限性8.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在405nm处吸光度大于1.000时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：R1：无色透明液体，无悬浮物及沉淀；R2无色或淡黄色透明液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3空白吸光度：在37℃、405rπn处，光径IenI时，空白吸光度A≤1.0008.4空白吸光度变化率：在37C、405nm处，光径ICm时，用生理盐水作为样品加入试剂测试时，Z∖A∕minW0.005.1.15分析灵敏度：在405nm处,光径Icm时，测量120U/L的碱性磷酸酶时，吸光度变化4A∕min20.015.8.6线性范围：试剂的线性区间为[25-750]U∕L,在此线性区间内：a)线性相关系数r应不小于0.9900；b)[25-100]U/L区间内，线性绝对偏差不超过土10U/L；(100-750)U/L区间内,线性相对偏差不超过±10%。
8.7重复性:CV≤5%8.8批间精密度:R≤10%8.9准确度：相对偏差应不大于±10%。
8.10稳定性：(2-8)C下，原包装存放的试剂有效期为12个月,取到期后一个月的试剂进行测试，应满足1-7、9的要求。
alp成分
alp成分ALP成分一、概述碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，ALP）是一种广泛存在于生物体内的酶，主要作用是水解磷酸盐酯键。
在人体中，ALP主要存在于肝、胆道、骨和肠道等组织中，因此成为了临床上常用的生物标志物。
本文将详细介绍ALP成分的来源、结构、功能及其在临床诊断中的应用。
二、来源1. 组织来源（1）肝脏：肝脏是人体内最重要的ALP产生器官之一，大约有70%～80%的总ALP来自肝脏。
（2）胆道：胆汁中含有较高浓度的ALP，因此胆道疾病也会导致血清ALP升高。
（3）骨：成年人体内大约有20%～30%的总ALP来自骨组织。
（4）肠道：小肠和结肠上皮细胞表面均含有少量ALP。
2. 分子形态人体内存在多种形态的ALP，包括：（1）碱性成纤维细胞型(ALPI)：主要由肝脏和骨骼组织分泌。
（2）碱性肝型(ALPII)：主要由肝脏分泌，但也有可能由胆道分泌。
（3）碱性肠型(ALPIII)：主要由小肠和结肠上皮细胞分泌。
（4）碱性胎儿型(ALPVI)：主要由胎盘和成纤维细胞分泌，新生儿体内含有较高浓度的ALPVI。
三、结构ALP是一种糖基化磷脂酰肌醇(GPI)-锚定的磷酸酯水解酶，其分子量为50～100 kDa。
人体内ALP的活性受多种因素影响，包括PH值、离子强度、离子种类、温度等。
此外，ALP活性还受到抑制剂和激动剂的调节。
四、功能1. 水解磷酸盐ALP能够水解多种磷酸盐物质，如ATP、ADP、AMP等。
在人体内，ALP主要参与以下反应：（1）碱性成纤维细胞型(ALPI)：参与无机磷的吸收和转运过程。
（2）碱性肝型(ALPII)：参与胆汁酸合成和胆汁中磷脂的代谢。
（3）碱性肠型(ALPIII)：参与核苷酸的代谢。
（4）碱性胎儿型(ALPVI)：在胎儿生长发育过程中起重要作用。
2. 参与骨代谢ALP是骨细胞分泌的一种重要蛋白质，在骨代谢过程中起到重要作用。
ALP能够水解磷酸盐，释放出磷离子，促进骨钙化过程。
碱性磷酸酶和骨碱性磷酸酶的临床应用
建血运而无明显 功能 障碍 ｌ１ｊ。本组 中 ４ 后残 留成角 小 于 ４５ ，无水平 方 向移位 ， ｎｅｃｋ ｆｒ０ｃｔｔｍ：ｓ ｉｎ ｅｈｉｌｄｒｅａ Ｊ Ｐｅｄｉａｔｒｏｎｈ性坏 死 ，２例 分别 经 ２年 １十 月 前臂 尚存 ５ｏ ～６０ 者 ，旋前 和旋 后 活动
２Ｏｔ ７＇１４．
吸收 ，功能评价 尚可 ，可能 已发 生再血 管 化 。故只有 当患儿 骨骼成熟后桡骨头仍
参 考 文 棘
４ （ ∞ －Ｈ ｍ ＿唧 Ｐ，ＡＩ 一ＲｏｍｅｒａＡ ． 曙 。ｓ Ｊ，ｅｔ ＩＮｓｐｔａｃｅｄ ｒａｄｉａｌ ｎｅｃｋ ｆｒａｃ—
明显畸形并影响前臂旋转活动者才考虑 １ Ｗ ｉｌｋｉｎｓ ＫＥ． ａ 值ｍ ＨＧ ． Ｆｒａｃｔｕｒｅｓ ｏｆ
ｔｒ￣ｒｔｅｄｕｌｌａｒｙ ｐｉｎｎｈａｇ（ＭｅｔＢｉｚ￣ｕｔｅｃｈｎ Ｌｑｕｅ）．
Ｊ Ｐｅｄｉａｔｌ＂ｏｎ ｋ ，１９９７，ｌ７：３２５－３３１
（收蒋 日期 ：２０００。１２．１３）
碱 性磷 酸 酶和 骨碱 性磷 酸 酶 的临床 应用
刘敏 彭 明惺 彭 志英 郑 虎
碱 性 磷 酸 酶 （ａｌｋａｌｉｎｅ ｐｈｅｓ０ｈａｔａｓｅ， ＡＬＰ、ＢＡＬＰ活性。所有检测者均排除了 ＡＬＰ）和 骨 碱 性 磷 酸 酶 （ｂｏｎｅ ａｌｋ￣ｉｎｅ 肝 、肾等疾 病。
结 果
ｐ｝ ｔａｓｅ，ＢＡＬＰ）是 评 价骨 形成 和 骨
二、试 剂及 仪器
采用对硝基苯磷 酸法及 麦胚 凝集沉
转化 的常用 指标 之 一 ｌ 。ＡＬＰ来 源 的
５ｇ／Ｌ麦胚 凝集 素 （ｓ ｍ 公 司 ）；３５ 淀法检 测 ２２４名儿 童 的 ＡＬＰ及 ＢＡＬＰ
组织部位 较 多 ，特异 性 差。而 ＢＡＬＰ来 ｍｒｒ￣ｌ／Ｌ ＳＤＳ生 理 盐 水 ：２０ ｇ／Ｌ Ｔｒｉｔｏｎ 结果见表 １。
血液骨源性碱性磷酸酶的测定及临床应用
目前一些家长在铺天盖地的广告 宣传 下，擅 自给孩子补 充维生素 Ｄ和钙剂 ， 由于个体的差异 、 吸收能力的不 同， 不同 的人使用 同一产品 、 同一剂量 的钙剂 ， 其结果可能是某些人有 效， 某些人无效造成 浪费。而且过 量的维生素 Ｄ和钙剂导致 维生素 Ｄ中毒 和高钙血症 ， 量少又达不 到补钙的效 果 ； 胎儿 在生长发育过程 中，需母体提供大量的钙来保证其骨骼 的正 常发 育 ， 孕产妇钙不 足现 象严重 ， 由于未能科学有效地进行补 钙， 造成孕妇钙 中毒和高钙血症 。 由于发钙 、 尿钙 、 血钙评价人 体钙营养状况不 可靠 ，单次尿检测定尿钙测定结果无任何临 床价值 。２０ ０ ２年 ７月 以来 ， 我们利用北京金域高科诊断技术 有限公 司生产 的 Ｂ Ｐ测定试 剂检测各类标本 １ ０ 次 ， Ａ ３人 ２ 发
维普资讯
■ 噙 园
血液 骨源 性碱 性 磷 酸酶 的测 定及 临床 应 用
曾新 建
（ 怀化市第 五医院， 湖南 怀化 ４ ８ ０ ） １ ０ ０
【 摘要 】目的
检测小儿 ／ 成人血 中骨源性碱 性磷 酸酶（Ａ ） ， 以筛查或辅助诊 断 因钙营养不 良引 Ｂ Ｐ 活性 籍
ｍｅａ ｌ Ｂ ｉ ａ ｅ ａ ｄ ｂ ｎ ａｃ ｆ ａ ｉｎ ｄ ｓｕ ｃｉｎ ｆｒｏｈ ｒｒａ ｏ ｓ Ｍ ｅ ｈ ｄ ＢＡ ｃ ｉｅｄ ｔｃｉｎ ｐ ｓ ｓｗｉ ｔｂ ｉ ｂ ｅｄ ｓ ｓ ｎ ｅｃ ｌ ｉｃ ｔ ｙ ｆ ｎ ｔ ｔｅ ｅ ｓ ｎ ． ｏ ｃｏ ｅ ｏ ｉ ｏ ｏ ｏ ｔｏ Ｐ ａ ｔ ｅｅ ｔ ａ ｅ ｔ ｖ ｏ ｓ ｈ ｉ ｍｍｕ ｉ ｆ ｔ ｔ ｎａ ｄ ｃ ｍｐ ｅｅｙ ｂｏ ｄ ｄ ｙ ｃ ｅ ｃ ｌ ｅ ｈ ｉａ ｒ ｃｐ ｅＲ＆Ｄ ｉ ｔｎ ａ ｄ ｅ ｌｒｍｅｒ ａ ｄ Ｃ Ｂ— ｎｔ ｉ ｉ ｒ ｉ ｎ ｏ ｌｔｌ ｌｏ ｒ ｈ ｍｉａ ｃ ｎ ｃ ｌ ｉ ｉｌ ｙ ｎ ｌａ ｏ ｔ ｐｎ ｗ ｔ ｓａ ｄ ｒ ｏｏ ｉ ｔ ｅ ｂ ｒ Ｏ ｈ ｉｏ ｐ ｒ ｏ ｓ ｎ ｅ ｃ ｅ ｄ ｒ ｓ ｌ Ｒｅ ｕ ｔ ＮＢＡＰ ｗ ｒ ｅｅ ｔｄ ｉ ７ ｈｌ ｒ ｎ ｔ ｅ ｍｅ ｎ ｖ ｌ ｅ ｗ ｓ ２ ５±３ ／ ； ３ ａ ｅ ｔ ｅ ｔｎ ｅ ｒ ａ ｅ ｕｔ ． ｓｌ ｅ ｅ ｄ ｔ ｅ ｎ ８ ３ ｃ ｉ ｅ ： ｈ ａ ａｕ ａ ２ ｃ ｄ ０ＵＬ ３ ０ ａ ｕ ｓＡＢ ｒ ｅｅ ｔｄ ｔ ｅ ｍｅ ｎ ｖ ｕ ＆ ４ ｄ ｈ ＡＰ ｗｅ ｅｄ ｔ ｅ ．ｈ ａ ａ ｅ Ｗ Ｓ １ ０±２ Ｌ Ｃｏ ｃ ｕ ｉ ｎ Ｄｅｅ ｔ ｎ ｏ ＡＰ Ｗ ｓ ｆｌｆｒ ｓ ｔ ｇ ｃ ｌ ０ Ｕ／ ． ｎ ｌ ｓｏ ｔ ｉ ｆ ｃ ｏ Ｂ ａ ｕ ｅｕ ０ ｉ ｉ ｓ ｓ ａ ｓｎ ｔ ｅ ｂ ｎ ａｃｆ ａｉｎ ｄ ｓ ｎ ｔ ｎ ｏ ａ ｃｕ ｍａｎ ｔ ｔ ｎ ｏ ｒｓ ｐ ｌｉ ｇｃ ｃ ｕ ｓ ｉｎ ｉ ｃ ｌ ｏ ｈｌ ｒ ｎ ａ ｄ ｐ ｅ — ｈ ｅ ｃ ｌｉ ｃ ｔ ｙ ｆ ｃ ｉ ｒ ｌ ｉ ｍ ｌ ｕｒ ｉ ， ｒ ｏ ｕ ｐｙｎ ａ ｉｍ ｃｅ ｔ ａ ｌ ｆｒｃ ｉ ｅ ｒ ｇ ｏ ｉ ｏ ｕ ｏ ｃ ｉ ｏ ｆ ｌ ｉ ｆ ｙ ｄ ｎ
血清碱性磷酸酶ALP测定
血清碱性磷酸酶ALP测定1 检验目的指导本室工作人员规范操作本检测项目，确保检测结果的准确。
2 实验原理本试剂以国际临床化学会（IFCC）推荐方法为基础，所采用的反应原理与反应式如下。
ALP对-硝基苯磷酸盐 + H2O ----------- 对硝基酚 + 磷酸在上述反应中，对-硝基苯酚的生成速率与样本中碱性磷酸酶的活力成正比。
通过在405 nm处监测吸光度的上升速率，即可测得样本中碱性磷酸酶的活性。
3 标本采集与处理：3.1 病人准备：无特殊要求。
3.2 标本类型：标本最好是无溶血的血清。
3.3 血清分离：应在收集后两小时内分离出来。
避免使用含EDTA或草酸盐的血浆。
3.4 标本存放：2～3天内的活性损失：15～25℃保存：<10%；标本稳定性：4～8℃保存稳定7天；-20℃保存至少可稳定2个月标本。
如果分析延迟8小时以上，最好把血清冷藏。
冷冻的血清在融解后会表现出血清值的显著降低。
3.5 标本运输：常温条件下运输3.6 标本拒收标准：细菌污染的不能做测定。
4 实验材料：4.1 试剂：上海复星长征医学科学有限公司ALP试剂盒（沪食药监械（准）字2014第2400166号 YZB/沪 1546-40-2014）4.1.1 试剂组成试剂1（R1）：乙酸镁3.0mmol/L硫酸锌 1.5mmol/LHEDTA 3.0mmol/LAMP缓冲液420mmol/L试剂2（R2）：对-硝基苯磷酸盐81.5mmol/LAMP缓冲液420mmol/LHEDTA5.0mmol/L4.1.2 试剂准备：试剂为即用式。
4.1.3 试剂稳定性与贮存：在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂（盒）自生产之日起有效期为12个月。
试剂启用后，在2～10℃避光的条件下可稳定14天。
4.1.4 变质指示：当试剂有浊度时，表明有细菌污染，不能继续使用。
4.1.5 注意事项：试剂中含有稳定剂，可能存在一定的刺激作用或毒性，请勿直接接触皮肤、眼睛。
碱性磷酸酶的检测与临床应用汇总.
• 但由于骨组织中此酶亦很活跃。因此，孕妇、 骨折愈合期、骨软化症。佝偻病、骨细胞癌、 骨质疏松、肝脓肿、肝结核、肝硬变、白血病 、甲状腺机能亢进时，血清碱性磷酸酶亦可升 高，所以对人体的危害是比较大的。
测定方法
• 我国曾应用较广的为磷酸苯二钠比色法，但现 在应用较多的是连续检测法。原理为以磷酸对 硝基酚为底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇或二乙醇 胺为磷酸酰基的受体。在碱性环境下，ALP催 化4-NPP水解产生游离的对硝基酚，在碱性溶 液中转变成黄色。根据405nm处吸光度增高速 率来计算ALP活性单位。
肝胆疾病引起的ALP升高
• 肝细胞参与合成ALP，肝胆疾病时增高的ALP来 自肝细胞。
淤胆性疾病时ALP的升高
• ALP存在于毛细胆管面的微绒毛上，在胆汁分 泌障碍时明显增高。因胆汁酸刺激而ALP mRNA转译增高，肝细胞合成ALP亦增高。ALP 经胆汁排出，肝内外胆管阻塞时，ALP有非常 明显的升高，ALP升高先于黄疸的出现，在黄 疸消退后还可持续异常。在原发性胆汁肝硬化 、药物性肝炎、肝移植排斥或淤胆型病毒性肝 炎引起的肝内淤胆，都会使ALP升高，甚至高 达正常值的4倍。
碱性磷酸酶的检测与临床应用
梅河口市新华医院
简介
• 碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中， 其中以肝脏为最多其次为肾脏，骨骼、肠、和 胎盘等组织,这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸 基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成 5’-OH末端。
• 但它不是单一的酶，而是一组同功酶。目前已 发现有 AKP1 、AKP2 、AKP3 、AKP4 、AKP5 与 AKP6 六种同功酶。其中第 1 、 2 、 6 种均 来自肝脏，第 3 种来自骨细胞，第 4 种产生于 胎盘及癌细胞，而第 5 种则来自小肠绒毛上皮 与成纤维细胞。
碱性磷酸酶km测定实验报告
碱性磷酸酶km测定实验报告碱性磷酸酶（alkaline phosphatase，简称ALP）是一种存在于人体组织和体液中的酶类，其活性的测定对于临床诊断和疾病监测具有重要意义。
本文将对碱性磷酸酶的KM测定实验进行详细介绍和分析。
一、实验目的本实验旨在测定碱性磷酸酶的KM值，以了解其底物浓度对酶活性的影响，并探讨酶底物的亲和力。
二、实验原理碱性磷酸酶是一种催化磷酸酯水解的酶，其底物为磷酸酯类物质。
当底物浓度较低时，酶活性会受到限制，因此，通过测定不同底物浓度下的酶活性，可以得到碱性磷酸酶的KM值。
KM值是酶与底物结合的亲和力指标，数值越小表示酶对底物的结合越紧密。
三、实验步骤1. 准备实验所需材料和试剂，包括碱性磷酸酶酶液、磷酸酯底物、缓冲液等。
2. 制备一系列不同浓度的磷酸酯底物溶液，如0.1 mM、0.2 mM、0.3 mM等。
3. 将不同浓度的磷酸酯底物溶液分别与碱性磷酸酶酶液混合，使其反应一定时间。
4. 停止反应，并加入一定量的酶抑制剂，以停止碱性磷酸酶的活性。
5. 使用特定的检测方法，如比色法或荧光法，测定反应液中产生的产物浓度。
6. 根据不同底物浓度下产物浓度的变化，绘制酶活性与底物浓度的曲线。
7. 通过曲线拟合，计算出碱性磷酸酶的KM值。
四、实验结果与分析根据实验数据绘制的酶活性与底物浓度曲线，可以观察到酶活性随着底物浓度的增加而逐渐增加，但增加速率逐渐减缓。
这是因为底物浓度增加，酶与底物的结合也增加，但当底物浓度达到一定程度时，酶的活性已经接近饱和状态，进一步增加底物浓度对酶活性的影响较小。
通过对曲线的拟合，可以计算出碱性磷酸酶的KM值。
KM值表示酶与底物结合的亲和力，数值越小表示酶对底物的结合越紧密。
在实验中，我们可以通过计算得到不同底物浓度下的KM值，从而了解碱性磷酸酶与底物之间的亲和力变化情况。
五、实验误差与改进在实验过程中，可能存在一些误差，如底物溶液的制备误差、酶活性的测定误差等。
检验科生化碱性磷酸酶测定的标准规程
碱性磷酸酶测定的标准规程【目的】体外检测血清中碱性磷酸酶（ALP ）的含量。
【职责】1.实验室工作人员均应熟知并严格遵守本SOP ，室负责人监督落实。
2.本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经下述人员批准签字：室负责人、科主任。
【标本类型及实验前准备】1.受检者的准备病人空腹12h ，不饮酒24h 后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
对于体检对象抽血前应有2周时间保持平时的饮食习惯，应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
2.静脉采血除非是卧床的病人，一般在采血时取坐位。
体位影响水分在血管内外的分布，会影响测试项目的浓度。
在采血前至少应静坐5分钟，一般从肘静脉取血，使用止血带的时间不超过1分钟，穿刺成功后立即松开止血带。
【仪器设备】东芝TBA-FX8全自动生化分析仪，低速离心机一、检测原理本试剂方法学原理以IFCC 推荐的方法为基础。
该方法采用对-硝基苯磷酸盐为底物，在最适反应条件下，样本中的碱性磷酸酶（ALP ）催化下述转磷酸反应：磷酸硝基酚-对O H 硝基苯磷酸盐-对2++−−→−ALP在上述反应中，对-硝基酚的生成速率与样本中碱性磷酸酶的活力成正比，通过在405nm 波长处测定吸光度的上升速率，即可测得样本中碱性磷酸酶的活力1.试剂本科使用上海复星长征医学科学有限公司ALP试剂盒，为液体双试剂，其各组分如下：试剂1（R1）乙酸镁 3.0 mmol/L硫酸锌 1.5 mmol/LHEDTA 3.0 mmol/LAMP缓冲液420 mmol/L试剂2（R2）对 - 硝基苯磷酸盐 81.5 mmol/LAMP缓冲液420 mmol/LEDTA 5.0 mmol/L2.校准要求2.1校准品：使用与试剂配套使用的复星长征临床化学校准血清（货号：4490050/4590050）对测定进行校准。
中性粒细胞碱性磷酸酶
中性粒细胞碱性磷酸酶中性粒细胞碱性磷酸酶（Neutrophil alkaline phosphatase，NAP）是一种酶，存在于中性粒细胞的细胞膜和细胞浆中。
它是一种重要的生物标志物，具有许多生理和病理过程中的关键作用。
本文将介绍中性粒细胞碱性磷酸酶的生物学功能、检测方法以及其在疾病诊断和预后评估中的临床应用。
中性粒细胞碱性磷酸酶是一种磷酸酶，具有催化磷酸酯水解的活性。
它由碱性磷酸酶家族的成员之一组成，与骨骼生长和骨重建等过程有关。
这种酶在中性粒细胞中的活性与细胞的发育状态和功能密切相关。
中性粒细胞碱性磷酸酶水平的变化可以反映细胞功能的改变，对于疾病的诊断和预后评估具有重要意义。
中性粒细胞碱性磷酸酶的检测主要通过染色法进行。
染色法将中性粒细胞与碱性磷酸酶底物结合，在底物的作用下产生有色产物。
根据产生的有色产物的数量，可以定量测定中性粒细胞碱性磷酸酶的活性。
目前，常用的染色方法有道格拉斯-多布因染色法和Kervran 染色法。
这些方法具有灵敏度高、重复性好的优点，已成为临床上常用的中性粒细胞碱性磷酸酶测定方法。
中性粒细胞碱性磷酸酶在疾病的诊断和预后评估中具有重要作用。
研究表明，中性粒细胞碱性磷酸酶水平的改变与多种疾病的发生和发展密切相关。
例如，在急性白血病和某些骨髓增生异常综合征中，中性粒细胞碱性磷酸酶活性明显降低；而在慢性髓样白血病等疾病中，中性粒细胞碱性磷酸酶活性明显升高。
因此，通过检测中性粒细胞碱性磷酸酶水平的变化，可以对疾病进行早期诊断和预后评估。
此外，中性粒细胞碱性磷酸酶还在炎症和感染过程中发挥重要作用。
炎症和感染会导致中性粒细胞复制增加和激活，从而增加中性粒细胞碱性磷酸酶的合成和释放。
因此，通过监测中性粒细胞碱性磷酸酶水平，可以评估炎症和感染的活动程度，指导临床治疗。
综上所述，中性粒细胞碱性磷酸酶是中性粒细胞中的一种重要酶类，对细胞功能的调节具有关键作用。
通过检测中性粒细胞碱性磷酸酶水平的改变，可以实现疾病的早期诊断和预后评估。
碱性磷酸酶的检测的原理
碱性磷酸酶的检测的原理
碱性磷酸酶是一种重要的酶，在生物体内发挥着重要的作用。
碱性磷酸酶可以加速细胞代谢中的一些反应，从而改变其物质组成和从而有助于调节代谢性状态。
它也可以抑制一些毒性物质，从而保护细胞免受损害。
碱性磷酸酶是一种活性很高的酶，由于它能够有效地对物质作用，因而在医学和农业上也具有重要的意义。
碱性磷酸酶的检测是临床检查和科学研究的一个重要方面。
碱性磷酸酶检测的原理是根据其氨基酸序列，通过化学或免疫反应来检测碱性磷酸酶的活性。
碱性磷酸酶主要由氨基酸组成，每种氨基酸有一定的氨基酸序列，这就是碱性磷酸酶的“氨基酸指纹”。
通过化学形式检测碱性磷酸酶，可以获得其“氨基酸指纹”，并
与标准进行比较。
如果“氨基酸指纹”与标准相同，则说明碱性磷酸酶的活性是足够的。
也可用免疫学方法来检测碱性磷酸酶，主要是根据碱性磷酸酶的特定抗原来识别。
通过使用抗体或抗原，可以识别该物质，从而确定其特异性，并进行活性检测。
此外，碱性磷酸酶可以用比色法或测光法进行检测，这种方法主要是根据碱性磷酸酶同酶原料反应而产生的磷酸酶产物，来检测碱性磷酸酶的活性。
综上所述，碱性磷酸酶的检测可以采用多种方法，包括识别氨基酸指纹的化学方法、免疫识别的免疫学方法和比色法、测光法等方法，
这些方法都可以有效地检测碱性磷酸酶的活性。
随着科学进步，碱性磷酸酶的检测技术也不断完善，有助于更好地了解和调节人体代谢状态，从而保护人体健康和抗病能力。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
正常范围
• 正常范围（连续监测法） • 女性，1-12岁小于500U/L；大于15岁， 40-150U/L； • 男性，1-12岁小于500U/L；12-15岁，小 于750U/L；大于15岁，40-150U/L。
临床意义
• 临床上测定ALP主要用于骨骼 、肝胆系统疾病 的诊断和鉴别诊断，尤其是黄疸的鉴别诊断。 对于不明原因的高ALP血清水平，可测定同工 酶以协助明确其器官来源。
• 3．病理性降低：见于重症慢性肾炎、儿童甲状 腺机能不全、贫血等。
抑制作用
• 除来源于胎盘外所有哺乳动物的ALP同工酶都 能被高精氨酸所抑制；而除来源于肠和胎盘外 所有的ALP同工酶都能被左旋咪唑所抑制；而 除了来源于胎盘的ALP(PALP和SEAP)外，几乎 所有的ALP都能在65℃2小时即被灭活。
肝胆疾病引起的ALP升高
• 肝细胞参与合成ALP，肝胆疾病时增高的ALP来 自肝细胞。
淤胆性疾病时ALP的升高
• ALP存在于毛细胆管面的微绒毛上，在胆汁分 泌障碍时明显增高。因胆汁酸刺激而ALP mRNA转译增高，肝细胞合成ALP亦增高。ALP 经胆汁排出，肝内外胆管阻塞时，ALP有非常 明显的升高，ALP升高先于黄疸的出现，在黄 疸消退后还可持续异常。在原发性胆汁肝硬化 、药物性肝炎、肝移植排斥或淤胆型病毒性肝 炎引起的肝内淤胆，都会使ALP升高，甚至高 达正常值的4倍。
碱性磷酸酶的检测与临床应用
梅河口市新华医院
简介
• 碱性磷酸酶是广泛分布于人体各脏器器官中， 其中以肝脏为最多其次为肾脏，骨骼、肠、和 胎盘等组织,这种酶能催化核酸分子脱掉5’磷酸 基团，从而使DNA或RNA片段的5’-P末端转换成 5’-OH末端。
• 但它不是单一的酶，而是一组同功酶。目前已 发现有 AKP1 、AKP2 、AKP3 、AKP4 、AKP5 与 AKP6 六种同功酶。其中第 1 、 2 、 6 种均 来自肝脏，第 3 种来自骨细胞，第 4 种产生于 胎盘及癌细胞，而第 5 种则来自小肠绒毛上皮 与成纤维细胞。
• 各种类型的骨质疏松，良性成骨细胞瘤等ALP 无明显变化。甲状旁腺功能亢进患者因田状旁 腺素过多引起溶骨作用加强，使ALP活力中度 或重度升高，同时血钙升高，血磷降低。此点 有助于与畸形骨炎、佝偻病的鉴别。
• 对血清ALP成分的测定结果表明，其主要作用 在于鉴别血清中升高的ALP是单独地还是同时 来自肝和骨组织。血液中同时出现肝型和骨型 ALP升高，最常见于恶性肿瘤。
• 单乙醇胺对碱性磷酸酶有温度依赖的抑制作用 ； • 较高浓度的无机磷可竞争性地抑制碱性磷酸酶 的活性； • EDTA通过络合碱性磷酸酶而导致该酶活性中心 微环境构象发生变化，从而不可逆地抑制碱性 磷酸酶的活性；
• 其他的抑制剂还有联苯胺(竞争性)、L-苯丙氨 酸和丹酰-L-苯丙氨酸(反竞争性)、含氮杂环氧 钒配合物(选择性)、五氯酚(对人胎盘碱性磷酸 酶反竞争性抑制)等。
• 1、生理性原因 儿童骨骼发育期、孕妇、骨折 愈合期，这些情况下骨组织中的碱性磷酸酶很 活跃，所以检测时值会偏高。 • 2、病理性原因 当人体患有阻塞性黄疸、原发 性肝癌、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等时， 肝细胞过度制造ALP，经淋巴道和肝窦进入血 液，同时由于胆汁排泄障碍，反流入血，引起 血清中的碱性磷酸酶偏高。
• 1．生理性增高：儿童在生理性的骨骼发育期， 碱性磷酸酶活力可比正常人高1～2倍。处于生 长期的青少年，以及孕妇和进食脂肪含量高的 食物后均可以升高。
• 2．病理性升高： • (1)骨骼疾病如佝偻病、软骨病、骨恶性肿 瘤、恶性肿瘤骨转移等； • (2)肝胆疾病如肝外胆道阻塞、肝癌、肝硬 化、毛细胆管性肝炎等； • (3)其他疾病如甲状旁腺机能亢进。
• 肝型ALP增加几乎都是肝脏恶性肿瘤浸润的结 果。肝型ALP继发性沉积于骨组织，常可引起 成骨反应，因而伴有骨型ALP增高。所以恶性 肿瘤患者血清肝型和骨型都增高的比例较大， 定量测定肝型与骨型ALP同工酶，对判断肿瘤 的扩散和疗效均具有重要价值。
碱性磷酸酶偏低的原因
• 碱性磷酸酶可出现偏高症状，同时，也可出现 偏低症状，碱性磷酸酶偏低的原因，主要可分 以下几种： • 1.常见于重症型慢性肾炎，甲状腺功能不全者 ； • 2.营养不良、呆小症；
• 但由于骨组织中此酶亦很活跃。因此，孕妇、 骨折愈合期、骨软化症。佝偻病、骨细胞癌、 骨质疏松、肝脓肿、肝结核、肝硬变、白血病 、甲状腺机能亢进时，血清碱性磷酸酶亦可升 高，所以对人体的危害是比较大的。
测定方法
• 我国曾应用较广的为磷酸苯二钠比色法，但现 在应用较多的是连续检测法。原理为以磷酸对 硝基酚为底物，2-氨基-2-甲基-1-丙醇或二乙醇 胺为磷酸酰基的受体。在碱性环境下，ALP催 化4-NPP水解产生游离的对硝基酚，在碱性溶 液中转变成黄色。根据405nm处吸光度增高速 率来计算ALP活性单位。
• ALP是一种含锌的糖蛋白，在碱性环境中（最 适Ph为10左右）可以水解各种天然及人工合成 的磷酸单酯化合物底物。
引起碱性磷酸酶升高的原因
• 当肝脏受到损伤或者障碍时经淋巴道和肝窦进 入血液，同时由于肝内胆道胆汁排泄障碍，反 流入血而引起血清碱性磷酸酶明显升高。碱性 磷酸酶偏高的原因可以分为生理性原因和病理 性原因，具体讨论如下：
成骨细胞与ALP
• 成骨细胞的活性及成骨作用的变化与血清ALP 的活力密切相关。骨骼疾病患者主要由于成骨 细胞增殖使血清ALP升高。畸形性骨炎显著升 高，为正常参考值上限的10倍至几十倍，但血 清钙磷多正常。
• 佝偻病和骨软化症患者ALP变化与病程、病情 有关，早期ALP轻度升高，随病情加重而呈持 续性上升，可达正常上限的4~10倍。治疗2周 后酶活力下降。骨折愈合期ALP活力轻度升高 ，成骨骨癌者显著升高。
肝内占位性病变时ALP的升高
• 即使无黄疸，在肝占位性病变时血清ALP也可升高，包 括肝肿瘤和肝脓肿，机制不明，可能与存在小胆管阻塞 有关。在单小叶或节段的胆管阻塞，血清ALP升高可以 是唯一的检验异常。 • 恶性肿瘤时ALP明显升高，是肿瘤的标记酶。在肝硬化 病人的病程观察中如发现血清ALP升高，须考虑合并 HCC的可能性。 • 肝转移性肿瘤与其他肝占位性病变一样，血清ALP可明 显升高。某些肝外肿瘤也可合成ALP，并不表示肝外肿 瘤已有肝转移。
• 3、骨骼有病时，例如佝偻病、骨上肿瘤、软骨 病等。 • 4、其他不是很常见的疾病，例如肾病、严重性 贫血、甲状腺机能不全、白血病等。
碱性磷酸酶高对人体的影响
• 碱性磷酸酶主要用于阻塞性黄疸、原发性肝癌 、继发性肝癌、胆汁淤积性肝炎等的检查?它主 要经淋巴道和肝窦进入血液，同时由于肝内胆 道胆汁排泄障碍，反流入血而引起血清碱性磷 酸酶明显升高。
• 血清中的ALP主要来自肝脏和骨骼。生长期儿 童血清内的大多数来自成骨细胞和生长中的骨 软骨细胞，少量来自肝。
生物化学特征
• 碱性磷酸酶是一种能够将对应底物去磷酸化的 酶，即通过水解磷酸单酯将底物分子上的磷酸 基团除去，并生成磷酸根离子和自由的羟基， 这类底物包括核酸、蛋白、生物碱等。
• 而该脱去磷酸基团的过程被称为去磷酸化或脱 磷酸化。碱性磷酸酶是磷酸酶的一种，磷酸酶 的作用与激酶的作用正相反，激酶是磷酸化酶 ，可以利用能量分子，如ATP，将磷酸基团加 到对应底物分子上。碱性磷酸酶在碱性环境有 最大活力，对来源于细菌中的ALP来说，其最 适pH是8.0，而对来源于牛的ALP则是8.5。
• 3.维生素C缺乏症坏血病、乳糜泻、恶病质、贫 血； • 4.遗传性低磷酸酶血症。 碱性磷酸酶出现低值的现象虽少见，但由于 碱性磷酸酶偏低，引主由病例性方面的因素引 起，因此，提醒广大临床医