高效液相色谱常见故障排除及维护保养优秀课件
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液相色谱仪日常维护及常见故障解决精品PPT课件
流动相内含有空气 - 脱气处理 检测池内有气泡 - 冲洗检测池或在检测池出口接一段内径0.009“的
管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
逻辑判断及处理
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
问题
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
*清洁程度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
二、液相色谱仪故障分析
能引起HPLC发生问题的潜在因素:
工作环境 流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 数据处理装置
电源及地线 泵 保护柱 连接管路 检测器 操作
一、液相色谱仪日常维护及注意事项
1 流动相 2 脱气机（在线） 3 泵（单元、二元、四元） 4 进样器（手动、自动） 5色谱柱 6 检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)
1 流动相
溶剂 乙睛
水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV截止波长（nm） 190 190 195 200 210 210 220 220 240 265
色谱柱保护
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时，应使用一个廉价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色 谱仪上的泵。
管子(此法只适用于耐压检测器 !!!) 色谱柱内有未洗脱尽的组份 - 洗脱色谱柱. 系统有漏液之处 - 检漏并处理 电噪声 - 去除噪声源, 信号线屏蔽, 检查系统接地状况 检测器光源灯能量低 - 更换光源灯 检测池污染 - 冲洗检测池
逻辑判断及处理
化学品
*色谱柱/保护柱 *溶液 *样品
问题
环境
*电源 *地线 *温度 *湿度
*清洁程度
机器
*泵 *进样器 *检测器 *数据处理单元
液相色谱仪器出现故障可以从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速的变化 2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、峰形 3.从数据结果中分析
典型故障分析及实例基线噪声
流动池污染后，会造成灵敏度下降、 噪声加大，应避免脏的样品进入流动 池。定期使用异丙醇冲洗系统对保持 流动池性能有一定好处。
更换氘灯。
二、液相色谱仪故障分析
能引起HPLC发生问题的潜在因素:
工作环境 流动相 进样器 在线过滤器 色谱柱 数据处理装置
电源及地线 泵 保护柱 连接管路 检测器 操作
一、液相色谱仪日常维护及注意事项
1 流动相 2 脱气机（在线） 3 泵（单元、二元、四元） 4 进样器（手动、自动） 5色谱柱 6 检测器(VWD/DAD/FLD/RID…)
1 流动相
溶剂 乙睛
水 环己烷 己烷 甲醇 乙醇 乙醚 二氯甲烷 氯仿 四氯化碳 四氢呋喃 甲苯
UV截止波长（nm） 190 190 195 200 210 210 220 220 240 265
色谱柱保护
色谱柱的再生
进行色谱柱再生时，应使用一个廉价的泵，我们建议最好不使用您的高效液相色 谱仪上的泵。
液相色谱常见问题及其对策-三PPT课件
堵塞
检查进样针头是否堵塞、进样阀是否 损坏、管路是否畅通等，采取相应措 施进行疏通或更换。
泄漏
检查接口是否松动、密封垫是否老化 、管路是否破损等，及时紧固或更换 相关部件。
其他辅助设备故障处理
柱温箱故障
检查温度传感器是否损坏、加热 元件是否正常工作、控温系统是 否稳定等，根据情况进行维修或
更换。
脱气机故障
考虑方法的回收率、精密度、准确性和操作简便性等因素。
对于复杂样品，可能需要采用多种前处理方法的组合。
避免干扰物质引入
使用高纯度的试剂和清洁的容器和设备，以减少干扰 物质的影响。
在前处理过程中，要注意避免引入干扰物质，如试剂 中的杂质、容器和设备的污染等。
对于可能引入干扰物质的步骤，要进行严格的控制和 验证。
流动相通过固定相时，与固定相 发生作用（吸附、分配、离子交 换等），使各组分在两相间的分
配系数发生变化。
反复多次利用上述过程，各组分 在移动速度上产生较大的差别， 被分离成单个组分依次从柱内流
出。
系统组成及功能
进样系统
将样品注入色谱柱。
检测系统
检测色谱柱流出物 的组分及含量。
输液系统
提供稳定、可调的 流动相流速。
自动化前处理技术可以减少人为操作误差和样品交叉污染的风险。
在使用自动化前处理技术时，要注意设备的维护和校准，确保设备的正常运行和准确性。
06 环境条件改善举措
实验室温湿度控制要求
1 2
温湿度对液相色谱仪器的影响
过高或过低的温度和湿度可能导致仪器性能不稳 定、色谱柱效降低等。
温湿度控制标准
建议将实验室温度控制在20-25℃，相对湿度保 持在40%-60%之间。
检查进样针头是否堵塞、进样阀是否 损坏、管路是否畅通等，采取相应措 施进行疏通或更换。
泄漏
检查接口是否松动、密封垫是否老化 、管路是否破损等，及时紧固或更换 相关部件。
其他辅助设备故障处理
柱温箱故障
检查温度传感器是否损坏、加热 元件是否正常工作、控温系统是 否稳定等，根据情况进行维修或
更换。
脱气机故障
考虑方法的回收率、精密度、准确性和操作简便性等因素。
对于复杂样品，可能需要采用多种前处理方法的组合。
避免干扰物质引入
使用高纯度的试剂和清洁的容器和设备，以减少干扰 物质的影响。
在前处理过程中，要注意避免引入干扰物质，如试剂 中的杂质、容器和设备的污染等。
对于可能引入干扰物质的步骤，要进行严格的控制和 验证。
流动相通过固定相时，与固定相 发生作用（吸附、分配、离子交 换等），使各组分在两相间的分
配系数发生变化。
反复多次利用上述过程，各组分 在移动速度上产生较大的差别， 被分离成单个组分依次从柱内流
出。
系统组成及功能
进样系统
将样品注入色谱柱。
检测系统
检测色谱柱流出物 的组分及含量。
输液系统
提供稳定、可调的 流动相流速。
自动化前处理技术可以减少人为操作误差和样品交叉污染的风险。
在使用自动化前处理技术时，要注意设备的维护和校准，确保设备的正常运行和准确性。
06 环境条件改善举措
实验室温湿度控制要求
1 2
温湿度对液相色谱仪器的影响
过高或过低的温度和湿度可能导致仪器性能不稳 定、色谱柱效降低等。
温湿度控制标准
建议将实验室温度控制在20-25℃，相对湿度保 持在40%-60%之间。
Waters高效液相色谱维护与保养ppt课件
通过进标样建立一个校正曲线（一般是6针标 样）。校正曲线的横坐标是标样的浓度（含 量），纵坐标是峰面积；校正曲线就相当于： Y=aX+b的公式。校正曲线建立好后样品的峰 面积带入方程就可以得到相应的浓度（含量）。
.
10
第二部分HPLC的组成
输液系统 泵以及流 动相
进样系统 进样阀
分离系统 -色谱柱
.
4
术语
• 8、色谱峰：色谱柱流出组分通过检测器时产 生的响应信号的微分曲线。
• 9、峰底：峰的起点与终点间的直线
• 10、峰高：在峰的两侧拐点处所作切线与峰底 相交两点之间的距离。 11、半峰宽（W1/2）：通过峰高的中点做平 行与峰底的直线，与其峰两侧相交两点间的距 离。 12、峰面积（A）：峰与峰底间的面积，又称 作响应值。
• 13、拖尾峰：后沿较前沿平缓的不对称峰。
• 14、前伸峰：前沿较后沿平缓的不对称峰
.
5
术语
• 15、死时间（t0）:不被固定相滞留的组分， 从进样到出峰最大之所需的时间
• 16、保留时间（tR）：组分从进样到出峰最 大之所需的时间。
• 17、死体积（V0）：不被固定相滞留的组分， 从进样到出峰最大之所需的流动相的体积
.
2
第一部分术语
• 1、液相色谱法：就是用液体作为流动相的 色谱法。
• 2、固定相：在色谱法中，静止不动的一相 （固体或液体）称为固定相
• 3、流动相：能运动的一相（一般是气体或 液体）称为流动相
• 4、色谱图：色谱柱流出物通过检测器时所
产生的响应信号对时间的曲线图。纵坐标
为信号强度（通常我们所说的样品浓度），
.
8
第一部分术语
22、面积归一法：将所有峰的面积总和定 为1，测量各峰的面积和色谱图上除溶剂 峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积 占总峰面积的百分率。是包含水分在内 的一个计算结果。
.
10
第二部分HPLC的组成
输液系统 泵以及流 动相
进样系统 进样阀
分离系统 -色谱柱
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4
术语
• 8、色谱峰：色谱柱流出组分通过检测器时产 生的响应信号的微分曲线。
• 9、峰底：峰的起点与终点间的直线
• 10、峰高：在峰的两侧拐点处所作切线与峰底 相交两点之间的距离。 11、半峰宽（W1/2）：通过峰高的中点做平 行与峰底的直线，与其峰两侧相交两点间的距 离。 12、峰面积（A）：峰与峰底间的面积，又称 作响应值。
• 13、拖尾峰：后沿较前沿平缓的不对称峰。
• 14、前伸峰：前沿较后沿平缓的不对称峰
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5
术语
• 15、死时间（t0）:不被固定相滞留的组分， 从进样到出峰最大之所需的时间
• 16、保留时间（tR）：组分从进样到出峰最 大之所需的时间。
• 17、死体积（V0）：不被固定相滞留的组分， 从进样到出峰最大之所需的流动相的体积
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2
第一部分术语
• 1、液相色谱法：就是用液体作为流动相的 色谱法。
• 2、固定相：在色谱法中，静止不动的一相 （固体或液体）称为固定相
• 3、流动相：能运动的一相（一般是气体或 液体）称为流动相
• 4、色谱图：色谱柱流出物通过检测器时所
产生的响应信号对时间的曲线图。纵坐标
为信号强度（通常我们所说的样品浓度），
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8
第一部分术语
22、面积归一法：将所有峰的面积总和定 为1，测量各峰的面积和色谱图上除溶剂 峰以外的总色谱峰面积，计算各峰面积 占总峰面积的百分率。是包含水分在内 的一个计算结果。
高效液相色谱仪器故障的诊断与维修-ppt课件.ppt
峰变宽 漏夜
故障排除 增加浓度 使系统到达平衡 检查进样器 使用柱温箱
检查漏夜的位置并维修
出现两个或多个未被完 选择其它色谱条件以改善分离
全分离的物质的峰
效果
检测器时间常数太大 使用较小的时间常数
ppt课件
11
4.峰分叉
现象
判断
柱性能下降
保护柱失效
故障排除 更换色普柱 换柱芯
峰分叉
色谱柱或保护柱被污染 清洗柱或保护柱，必要时更换
检测池被污染或有气体
用甲醇或其他强极性的溶剂冲 洗流通池
ppt课件
21
现象
判断
故障排除
测定的波长选择有误 基线漂移
使用分光光度计说明背景吸收， 如背景值高，说明流动相含有 紫外吸收化合物导致基线漂移。 使用的流动相应在紫外截止波 长以外，或更换溶剂
系统泄漏
检查并进行维修
样品中有强保留的物质 用强度合适的溶剂清洗色谱柱
判断
故障排除
样品前处理时产生降解 用标准品对照、检查样品处理过
或混入杂质
程，换新样品
色谱图出 现鬼峰 前一次进样的洗脱物
增加分析时间或梯度洗脱、提高 流速、如问题仍存在，两次进样 间用强溶剂冲洗色谱柱
注射器脏
清洗注射器、冲洗进样口
ppt课件
15
现象
判断
故障排除
流动相被污染
清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入 口过滤器、使用HPLC级试剂
衡
统平衡
室温不稳
基线漂移 流动相污染或分解
使用柱温箱、将系统置于恒温、 空气对流小的环境
清洗溶剂贮液瓶、清洗溶剂入 口过滤器、使用HPLC级试剂
流动相脱气不充分
脱气重新平衡系统
高效液相色谱常见问题及维修保养
高效液相色谱常见问题及维修保养高效液相色谱常见问题1、液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么？①筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。
②存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子③可能柱超载，减少进样量。
2、HPLC灵敏度不够的主要原因及解决办法是什么？①样品量不足，解决办法为增加样品量②样品未从柱子中流出。
可根据样品的化学性质改变流动相或柱子③样品与检测器不匹配。
根据样品化学性质调整波长或改换检测器④检测器衰减太多。
调整衰减即可。
⑤检测器时间常数太大。
解决办法为降低时间参数⑥检测器池窗污染。
解决办法为清洗池窗。
⑦检测池中有气泡。
解决办法为排气。
⑧记录仪测压范围不当。
调整电压范围即可。
⑨流动相流量不合适。
调整流速即可。
⑩检测器与记录仪超出校正曲线。
解决办法为检查记录仪与检测器，重作校正曲线。
3、做HPLC分析时，柱压不稳定，原因何在？如何解决？①泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理；②比例阀失效，更换比例阀即可；③泵密封垫损坏，更换密封垫即可；④溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法；⑤系统检漏，找出漏点，密封即可；⑥梯度洗脱，这时压力波动是正常的。
4、我购买的HPLC柱验收测试时柱压过高，请问为什么？柱压过高是HPLC柱用户最常碰到的问题。
其原因有多方面，而且常常并不是柱子本身的问题，您可按下面步骤检查问题的起因。
①拆去保护预柱，看柱压是否还高，否则是保护柱的问题，若柱压仍高，再检查；②把色谱柱从仪器上取下，看压力是否下降，否则是管路堵塞，需清洗，若压力下降，再检查；③将柱子的进出口反过来接在仪器上，用10倍柱体积的流动相冲洗柱子，（此时不要连接检测器，以防固体颗粒进入流动池）。
这时，如果柱压仍不下降，再检查；只用于使用过的柱子。
④更换柱子入口筛板，若柱压下降，说明您的溶剂或样品含有颗粒杂质，正是这些杂质将筛板堵塞引起压力上升。
高效液相色谱故障排除1.ppt
柱外效应的影响
检查毛细管连接
色谱柱和检测器之间有漏； 检测器的检测池过大
检查是否有漏；使用小的检测池
色谱柱温度太低； 流动相的黏度太高
连接用的毛细管太长； 柱外死体积太大
提高色谱柱温度
使用内径较细的较短的毛细管连 接； 检查柱外死体积
色谱柱柱效下降
使用较小粒径填料的色谱柱； 更换色谱柱
探索色谱新领域，默克与您共同努力！
色谱柱过载
将样品稀释
柱外效应的影响
检查毛细管连接
2002-9
探索色谱新领域，默克与您共同努力！
解决问题
峰形展宽
2002-9
可能原因
色谱柱或预柱被污染或不合适
解决办法
更换色谱柱或预柱
色谱柱“过载”或进样体积过大 减少进样体积；稀释样品
溶解样品的溶剂选用不当
用流动相溶解样品
缓冲溶液的浓度太稀
使用浓度稍高的缓冲溶液或者 换用其它的缓冲溶液
色谱柱的滤网堵塞
更换滤网；使用柱前过滤系统； 将样品过滤
柱外效应的影响； 死体积
检查毛细管连接
色谱柱有“塌陷”、短流或断流
更换色谱柱； 使用性质较温和的分离条件
2002-9
探索色谱新领域，默克与您共同努力！
解决问题
出现双重峰或 分叉峰
可能原因
样品体积过大； 色谱柱过载
溶解样品的溶剂选用不当
色谱柱有“塌陷”、短流或 断流
溶剂中的杂质会导致出现“鬼峰”，特别是梯度解吸时
2002-9
注意： 只能使用色谱级的溶剂! 不能使用旧的或未经过滤的缓冲溶液
探索色谱新领域，默克与您共同努力！
溶剂
溶剂混合产生的问题
流动相中所使用的不同溶剂必须互溶
最新2019-高效液相色谱常见故障及解决方案-PPT课件
解
流动相脱气不充 分
故障排除 分析之前应有足够的 时间使系统平衡 使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境 清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
脱气重新平衡系统
现象
判断
故障排除
流动相配比不当 或流速变化
更改配比或流速
柱被污染
冲洗柱或更换柱
基线漂
移
固定相流失
为说明问题存在，用 一段连接管路代替色 谱柱，通流动相检测 基线
故障排除
用标准品对照、检查样 品处理过程，换新样品
色谱图
出现鬼 前一次进样的洗
峰
脱物
增加分析时间或梯度洗 脱、提高流速、如问题 仍存在，两次进样间用 强溶剂冲洗色谱柱
注射器脏
清洗注射器、冲洗进样 口
现象 判断
故障排除
流动相被污染
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
柱被污染
色谱图 出现鬼
流动相选择不当 选择恰当的流动相
3.峰变宽
现象 判断
故障排除
柱性能下降
更换色谱柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 峰变宽 被污染
色谱柱选择不当
清洗柱或保护柱，必 要时更换
选择恰当的色谱柱
流动相选择不当 选择恰当的流动相
流动相流速太低 调节流速
现象
判断 缓冲液浓度太低 系统没到达平衡 进样器问题 环境温度变化
溶剂配比不合适 调节溶剂配比
进样体积太大或 样品浓度太高
减小进样体积
9.保留时间不断变化
现象 判断
故障排除
流速变化
重新设定流速,检查泵 是否正常工作
系统没有达到平 衡 保留时 间不断 柱被污染 变化
液相色谱仪的维护与常见故障47页PPT
液相色谱仪的维护与常见故 障
41、实际上，我们想要的不是针对犯 罪的法 律，而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民，就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律，法律受制于情 理。— —托·富 勒
45、法律的制定是为了保证每一个人 自由发 挥自己 的才能 ，而不 是为了 束缚他 的才能 。—— 罗伯斯 庇尔
谢谢
11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
41、实际上，我们想要的不是针对犯 罪的法 律，而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民，就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律，法律受制于情 理。— —托·富 勒
45、法律的制定是为了保证每一个人 自由发 挥自己 的才能 ，而不 是为了 束缚他 的才能 。—— 罗伯斯 庇尔
谢谢
11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
高效液相色谱仪器维护和保养PPT34页
Βιβλιοθήκη 高效液相色谱仪器维护和保 养
41、实际上，我们想要的不是针对犯 罪的法 律，而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民，就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律，法律受制于情 理。— —托·富 勒
45、法律的制定是为了保证每一个人 自由发 挥自己 的才能 ，而不 是为了 束缚他 的才能 。—— 罗伯斯 庇尔
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
41、实际上，我们想要的不是针对犯 罪的法 律，而 是针对 疯狂的 法律。 ——马 克·吐温 42、法律的力量应当跟随着公民，就 像影子 跟随着 身体一 样。— —贝卡 利亚 43、法律和制度必须跟上人类思想进 步。— —杰弗 逊 44、人类受制于法律，法律受制于情 理。— —托·富 勒
45、法律的制定是为了保证每一个人 自由发 挥自己 的才能 ，而不 是为了 束缚他 的才能 。—— 罗伯斯 庇尔
31、只有永远躺在泥坑里的人，才不会再掉进坑里。——黑格尔 32、希望的灯一旦熄灭，生活刹那间变成了一片黑暗。——普列姆昌德 33、希望是人生的乳母。——科策布 34、形成天才的决定因素应该是勤奋。——郭沫若 35、学到很多东西的诀窍，就是一下子不要学很多。——洛克
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泵流速设定太低 设定正确的流速
色谱柱选择不恰
当
压力值 低
柱温过高
更换恰当的色谱柱 降低柱温
系统漏液
检查漏液位置并维修
流动相使用不当 改变流动相
4.压力不稳
现象 判断
压力变 化重现 采用梯度 性不好
泵内有 气泡
溶剂脱气不适当
压力波 泵密封垫损坏
动
溶剂混合器故障
漏液
连接口太松 管路损坏
故障排除
所引起的压力是正常
系统泄漏
检查并进行维修
现象 判断
流动相脱气不够 充分
保留时
间不断 变化
室温变化
柱恒温箱设置有 误
故障排除
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂 使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境
设置正确的温度
10.基线漂移
现象 判断 系统不稳或没有 达到平衡
室温不稳
基线漂
移
流动相污染或分
无样品
加样品
பைடு நூலகம்
检测器与数据处 理装置链接故障
检查并正确链接
6.负峰
现象 判断
故障排除
连接数据处理系 出现所 统信号线接反 有负峰 记录仪或检测器
信号极性相反
正确连接 改变极性设置
离子对分离体系
对峰的影响
出现一 个或几 个负峰
使用的流动相吸 收高
自动进样器注射
进空气
在流动相中溶解样品 使用流动相稀释样品 清洗自动进样器
峰拖尾 被污染
要时更换
色谱柱选择不当 选择恰当的色谱柱
流动相选择不当 选择恰当的流动相
3.峰变宽
现象 判断
故障排除
柱性能下降
更换色谱柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 峰变宽 被污染
色谱柱选择不当
清洗柱或保护柱，必 要时更换
选择恰当的色谱柱
流动相选择不当 选择恰当的流动相
流动相流速太低 调节流速
现象
泵流速设定太高 设定正确的流速
流动相使用不恰 当
使用恰当的流动相
缓冲结晶盐沉淀 冲洗
压力值 高
样品与流动相不 互溶
稀释或改变流动相
柱温太低
升高温度
色谱柱性能下降 换柱
现象 判断
溶剂贮液器中过
压力值 滤器脏
高
链接管路阻塞
故障排除 清洗 冲洗，必要时更换
进样阀阻塞
冲洗进样器
3.压力低
现象 判断
故障排除
冲洗柱或更换柱
溶剂配比不合适 调节溶剂配比
进样体积太大或 样品浓度太高
减小进样体积
9.保留时间不断变化
现象 判断
流速变化
系统没有达到平 衡 保留时 间不断 柱被污染 变化 流动相被污染
故障排除 重新设定流速,检查泵 是否正常工作
分析之前应有足够的 时间使系统平衡
冲洗柱或更换柱
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
7.鬼峰
现象
判断
样品前处理时产 生降解或混入杂 质
故障排除
用标准品对照、检查样 品处理过程，换新样品
色谱图
出现鬼 前一次进样的洗
峰
脱物
增加分析时间或梯度洗 脱、提高流速、如问题 仍存在，两次进样间用 强溶剂冲洗色谱柱
注射器脏
清洗注射器、冲洗进样 口
现象 判断
故障排除
流动相被污染
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
更换色普柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 峰分叉 被污染
进样体积太大或 样品浓度太高
清洗柱或保护柱，必 要时更换
降低进样体积或降低 样品浓度
样品溶剂不溶流 改变溶剂或采用流动
动相
相溶解样品
5.无峰
现象
判断 检测器参数设置 错误
样品降解
故障排除
设置正确的检测器参 数
检查样品配制过程， 更换样品
无峰 自动进样器故障 检查进样器
判断 缓冲液浓度太低 系统没到达平衡 进样器问题 环境温度变化
峰变宽 漏夜
出现两个或多个 未被完全分离的 物质的峰
检测器时间常数 太大
故障排除 增加浓度 使系统到达平衡 检查进样器 使用柱温箱 检查漏夜的位置并维 修
选择其它色谱条件以 改善分离效果
使用较小的时间常数
4.峰分叉
现象 判断
故障排除
柱性能下降
检测池被污染或 用甲醇或其他强极性
有气体
的溶剂冲洗流通池
现象 判断
测定的波长选择 有误 基线漂 移
系统泄漏 样品中有强保留 的物质
故障排除
使用分光光度计说明 背景吸收，如背景值 高，说明流动相含有 紫外吸收化合物导致 基线漂移。使用的流 动相应在紫外截止波 长以外，或更换溶剂
检查并进行维修
用强度合适的溶剂清 洗色谱柱
解
流动相脱气不充 分
故障排除 分析之前应有足够的 时间使系统平衡 使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境 清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂
脱气重新平衡系统
现象
判断
故障排除
流动相配比不当 或流速变化
更改配比或流速
柱被污染
冲洗柱或更换柱
基线漂
移
固定相流失
为说明问题存在，用 一段连接管路代替色 谱柱，通流动相检测 基线
高效液相色谱常见故障排除及 维护保养优秀课件
一、高效液相色谱仪器出现故障可以 从多方面入手
1.从部件的运转情况推测，如压力、流速 的变化
2.从色谱图的异常情况推测，如出峰时间、 峰形
3.从数据结果中分析
（一 ）、从压力变化判断
1.压力无
现象 判断
故障排除
电源不通 面版灯 不亮 接头松脱
检查电源 拧紧接头
泵头 漏液
接口太松 泵密封垫磨损
拧紧泵头螺丝 更换密封垫
现象
泵不送 溶剂
判断 泵头有气泡
使用的溶剂黏 性太高 溶剂贮液器中 过滤器脏 排空阀打开
控制器设定不 正确
流动相不够
故障排除 排气泡，溶剂需脱气 换低黏性溶剂 清洗贮液瓶、过滤器 关闭排空阀 设置正确 补足流动相
2.压力高
现象 判断
故障排除
柱被污染
色谱图 出现鬼
六通阀污染
峰
检测器污染
管路污染
流动相中含有稳 定剂或稳定剂变 化
清洗柱或更换柱 清洗六通阀 清晰检测器 冲洗
使用无防腐溶剂
8.保留时间变化
现象 判断
故障排除
系统不问或未达 分析之前应有足够的
到平衡
时间使系统平衡
室温波动大 保留时
间不重
复
柱被污染
使用柱温箱、将系统 置于恒温、空气对流 小的环境
11.无规则基线噪音
现象 判断
系统不稳或没有 达到平衡
系统泄漏
无规则
基线噪 音
流动相污染或分 解
柱被污染
色谱柱填料流失 或阻塞
故障排除 分析之前应有足够的 时间使系统平衡
检查并进行维修
清洗溶剂贮液瓶、清 洗溶剂入口过滤器、 使用HPLC级试剂 冲洗柱或更换柱
排气泡，溶剂需脱气 更换密封垫 清洗或更换混合器 拧紧接口 更换
（二）、从色谱图的异常情况
推测
1.峰前沿
现象 判断
故障排除
柱性能下降
更换色谱柱
保护柱失效 峰前沿
换柱芯
进样体积太大或 降低进样体积或降低 样品浓度太高 样品浓度
2.峰拖尾
现象 判断
柱性能下降
故障排除 更换色谱柱
保护柱失效
换柱芯
色谱柱或保护柱 清洗柱或保护柱，必