食品分析实验硫氰酸钾比色法测定食品中铁

实验十一 硫氰酸钾比色法测定食品中铁

一、实验内容

使用可见分光光度计测定样品中铁的含量。

二、实验目的与要求

1、学习掌握分光光度计测定的原理及操作技术。

2、掌握绘制工作曲线法进行定量测定。

三、实验原理

硫氰酸钾比色法：在酸性条件下，三价铁离子与硫氰酸钾作用，生成血红色的硫氰酸铁络合物，溶液颜色深浅与铁离子浓度成正比，故可以比色测定。

反应式如下：

Fe 2(SO 4)3 + 6 KCNS 2 Fe(CNS)3 + 3 K 2SO 4

四、试剂

（1）2% KMnO 4溶液

（2）20% KCNS 溶液

（3）2% K 2S 2O 7溶液

（4）浓H 2SO 4

（5）铁标准使用液：准确称取0.4979g 硫酸亚铁（FeSO 4 · 7H 2O ）溶于100 mL

水中，加入5 mL 浓硫酸微热，溶解即滴加2 %高锰酸钾溶液，至最后一滴红色不褪色为止，用水定容至1000 mL ，摇匀，得标准贮备液，此液每毫升含Fe 3+100µg。取铁标准贮备液10 mL 于100 mL 容量瓶中，加水至刻度，混匀，得标准使用液，此液每mL 含Fe 3+10µg。

五、仪器

可见分光光度计

六、实验步骤

1、样品处理：称取均匀样品12.5g ，干法灰化后，加入2mL (1:1)盐酸，在水浴上蒸干，再加入5mL 蒸馏水，加热煮沸后移入100mL 容量瓶中，以水定容，混匀。

2、标准曲线绘制：准确吸取上述铁标准溶液0.0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0mL ，分别置于25mL 容量瓶或比色管中，各加5mL 水，0.5ml 浓硫酸，0.2mL 2%

过硫酸钾，2mL 20%硫氰酸钾，混匀后稀释至刻度，用1cm比色皿，在485nm处，以试剂空白作参比液测定吸光度。以铁含量（µg）为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

3、样品测定：准确吸取样液5～10mL，置于25mL容量瓶或比色管中，以下按标准曲线绘制步骤进行，测得吸光度，从标准曲线上查出相对应的铁的含量。

七、结果处理

x

Fe (µg/100g) = ——————× 100

m × (V

1/V

2

)

式中： x —从标准曲线上查得测定用样液相当的铁含量，µg

V

1

—测定用样液体积，mL

V

2

—样液总体积，mL

m —样品质量，g

八、说明

1、加入的过硫酸钾是作为氧化剂，以防止三价铁转变成二价铁。

2、硫氰酸铁的稳定性差，时间稍长，红色会逐渐消退，故应在规定时间内完成比色。

3、随硫氰酸根浓度的增加，Fe3+可与之形成FeCNS2+直至Fe(CNS)

6

3-等一系列化合物，溶液颜色由橙黄色至血红色，影响测定，因此，应严格控制硫氰酸钾的用量。