动物细胞融合和单克隆抗体的制备

2．1．2动物细胞融合和单克隆抗体的制备一、重要知识回顾3.动物细胞融合（1）动物细胞融合也称，是指个或个动物细胞结合形成的过程。

融合后形成的具有原来或细胞遗传信息的细胞，称为细胞。

（2）动物细胞融合与植物原生质体融合的原理基本，诱导动物细胞融合的方法与植物原生质体融合的方法类似，常用的诱导因素有、、等。

（3）动物细胞融合的意义：克服了，成为研究、、和的重要手段。

（1）抗体：一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体。

从血清中分离出的抗体、、。

（2（3）杂交瘤细胞的特点：既能，又能产生。

（4）单克隆抗体的优点：，，并。

（5）单克隆抗体的作用：①：准确识别各种抗原物质的细微差异，并跟发生特异性结合，具有的优点。

②用于：主要用于治疗，可制成“”，也有少量用于治疗其它疾病。

二、自主检测（一）课堂例题例题1、基因型为Aa与基因型为Bb的动物体细胞混合，用灭活的仙台病毒处理后，不可能获得下列哪种基因型的细胞 A．AAaa B．AaBb C．Aabb D．BBbb例题2、某同学在学习“细胞工程”时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，你认为有几处是不正确的A．0 B．1 C．2 D．3例题3、下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，不正确的是A.B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B.融合后形成的杂交瘤细胞既能无限增殖，又能产生单克隆抗体C.体外培养时，一个B淋巴细胞不但能形成细胞株，而且还能形成细胞系D.单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显例题4、右图为细胞融合（A/和B为二倍体生物的体细胞）的简略过程，请据图回答：（1）若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已用____ ___________处理，除去了____________；由A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是_____________________________。

融合完成的标志是_______________。

（2）若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用____________技术把D培养成植株。

（3）若A、B是动物细胞，一般取自______________，然后用使其分散开来；由A、B到C的过程中，常用的不同于植物细胞融合的手段是，所形成的D称为，A、B融合为C的过程说明了细胞膜具有。

（4）若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，则A细胞来自于，在获得此细胞之前，小鼠已经被注射了。

注射后小鼠身体发生了相应的免疫反应，生成了_________________，图中B为。

杂种细胞C共有个染色体组。

（5）用单克隆抗体制成“生物导弹”主要利用了抗体的特性。

（6）若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有_____种，用来培养的D细胞应该是_______________。

从中选择出它的方法是_________________培养，获得D后，常用的培养方法是培养液中培养和______________________________________。

⑺杂交瘤细胞在体外培养时与植物组织培养的主要区别是培养基要用培养基。

（物理状态），培养基中除了添加必要的营养物质为还需加入。

（8）若A为人细胞，B为鼠细胞，并分别用红、绿荧光染料标记细胞膜上的蛋白质，在C细胞时，细胞一半发红色荧光，一半发绿色荧光。

到D细胞阶段，两种颜色的荧光均匀分布，请解释原因。

______________________________________。

（二）反馈训练单项选择题1、关于杂交瘤细胞的叙述不正确是（）A．有双亲细胞的遗传物质B．不能无限增殖C.可分泌特异性抗体 D．体外培养条件下可大量增殖2、动物细胞融合技术最重要的用途是（）A.克服远源杂交不亲和B.制各单克隆抗体C.培育新品种D.生产杂种细胞3、科学家用小鼠骨髓瘤细胞与某种细胞融合，得到杂交细胞，经培养可产生大量的单克隆抗体，与骨髓瘤细胞融合的是（）A.经过兔疫的B淋巴细胞B.没经过免疫的T淋巴细胞C.经过免疫的T淋巴细胞D.没经过兔疫的Ｂ淋巴细胞4．只能使动物细胞融合的常用诱导方法是A．PEG B．灭活的病毒C．电刺激 D．离心5．下列是动物细胞的工具酶的是A．限制酶B． DNA连接酶 C．胰蛋白酶 D．果胶酶6.“生物导弹”是指A.单克隆抗体B.杂交瘤细胞C.产生特定抗体的B淋巴细胞D.在单抗上连接抗癌药物7. 运用细胞工程技术获得单克隆抗体时，下列操作不必要的是A．对小动物注射抗原B．融合并筛选杂交瘤细胞C．培养杂交瘤细胞D．将胰蛋白酶注入小动物腹腔8.单克隆抗体与血清抗体相比，优越之处在于 ( )A．单克隆抗体能够制成“生物导弹” B．单克隆抗体可以在体外制备C．单克隆抗体的特异性强、灵敏度高，产量也大大高于血清抗体 D．单克隆抗体的制备过程简单9．生产单克隆抗体时，在培养基中加入某种试剂能筛选出杂交瘤细胞，该试剂的作用是A．能选择性抑制骨髓瘤细胞的DNA复制B．能阻止淋巴细胞的原癌基因被激活C．能抑制淋巴细胞的DNA复制D．能阻止杂交瘤细胞核糖体上所有蛋白质的合成10、英国克隆羊“多利”的产生，番茄-马铃薯的创造，单克隆抗体的制备，依次所属的生物工程技术为A.基因工程、细胞工程、基因工程B.细胞工程、细胞工程、细胞工程C.基因工程、细胞工程、细胞工程D.细胞工程、基因工程、基因工程11.单克隆抗体制备过程中，骨髓瘤细胞和B淋巴细胞诱导融合后，要用特定培养基筛选出杂交瘤细胞。

在这种培养基上不能存活、增殖的细胞是①B淋巴细胞②小鼠骨髓瘤细胞③B淋巴细胞自身融合细胞④小鼠骨髓瘤细胞自身融合细胞⑤杂交瘤细胞A.①②③④B.①③⑤C.②④D.①③12、动物细胞融合和植物体细胞杂交的比较中，正确的是①诱导融合的方法完全相同②所用的技术手段不相同③所采用的原理完全相同④都能形成杂种细胞A.①②B.①③C.②④D.③④13、关于单克隆抗体，下列叙述不正确的是A、可以制成诊断盒．用于疾病的珍断B、可以与药物结合，用于病变细胞的定向治疗C、可以利用基因工程技术生产D、可以在生物体内生产，不能体外生产14、下图是单克隆抗体制备过程示意图，其中1过程注射的物质和A细胞的名称为A、抗体、T淋巴细胞B、抗原、T淋巴细胞C、抗体、B淋巴细胞D、抗原、效应B淋巴细胞多项选择题15、下列关于单克隆抗体的制备和应用的叙述中，正确的是A．B淋巴细胞与骨髓瘤细胞的融合，一般不需要灭活的仙台病毒或聚乙二醇诱导B．融合后形成的杂交瘤细胞既能大量增殖，又能产生单克隆抗体C．体外培养时，一个效应B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖D．单克隆抗体与常规抗体相比，特异性强，灵敏度高，优越性明显16、1975年米尔斯坦和柯勒成功地获得了单克隆抗体。

下列细胞中与单克隆抗体的制备有关的是A.效应B细胞 B．T淋巴细胞 C.骨髓瘤细胞D．杂交瘤细胞17.将小鼠骨髓瘤细胞与一种B淋巴细胞融合，可使融合的细胞经培养产生单克隆抗体，其依据是A.B淋巴细胞可以产生抗体，但不能无限增殖B.B淋巴细胞只有与骨髓瘤细胞融合后才能产生抗体C.骨髓瘤细胞可以无限增殖，但不能产生抗体D.骨髓瘤细胞可以产生抗体，但不能增殖18．关于细胞全能性的理解正确的是A. 大量的科学事实证明，高度分化的植物体细胞仍具有全能性B. 细胞内含有个体发育所需全部基因是细胞具有全能性的内在条件C. 通过植物组织培养得到的试管苗或人工种子，是植物细胞在一定条件下表现全能性的结果D. 通过动物细胞培养获得细胞株或细胞系，表明了动物体细胞也具有全能性19、下列用动物细胞工程技术获取单克隆抗体的实验步骤中，正确的是A．将抗原注人小鼠体内，获得能产生抗体的B淋巴细胞B．用纤维素酶处理B淋巴细胞和小鼠骨髓瘤细胞C．用灭活的仙台病毒作诱导剂，促使B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞融合D．筛选杂交瘤细胞，并从中选出能产生所需抗体的细胞群，培养后提取单克隆抗体简答题20、图是某种淋巴细胞，膜外颗粒状物质为抗体。

据图回答：（1）这是细胞，它是由分化而来的。

（2）抗体从开始合成到分泌出细胞，经过的细胞结构顺序是（填标号）。

抗体的分泌说明细胞的各种生物膜在结构上具有，并以〔〕的形式转变。

（3）在分泌抗体时要消耗由〔〕提供的能量。

（4）抗体的化学本质是，它能与发生特异性结合，发挥免疫效应，该过程属于免疫。

（5）若该抗体是单克隆抗体，则该细胞名称为。

在制备单克隆抗体的过程中，要应用的动物细胞工程的技术手段是。

21.右图是制备分泌抗X抗体的过程，根据图解回答问题：⑴给小鼠注射抗原的目的是__ ___。

⑵在单克隆抗体制备过程中之所以选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞，是因为它们融合后的杂交瘤细胞具有____ 的特性。

⑶由图中可看出，单克隆抗体制备过程运用了________和______________的动物细胞工程技术手段，前者常用的诱导剂与植物原生质体融合不同的是可用_____________。

⑷动物细胞培养液的配方通常含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等，与植物细胞培养基有所不同的是，还含有____________。

⑸在动物细胞融合过程中，需要将所选取的组织细胞离散开，以利于细胞融合，可用___________处理离体组织细胞使之分散开。

⑹图中有两次筛选过程，其中步骤④的目的是筛选出__________________，步骤⑤⑥的目的是筛选出_________ _________。

22、两场筹备了10年的“太空结合”首次在神舟八号飞船上举行了，“新人”之一是小白鼠B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞，新人在“产房”——电融合仪内孕育新生命。

160min 后，中国首批“太空娃娃”终于顺利诞生。

“太空娃娃”诞生和地面实验如图所示。

回答下列问题：（1）小白鼠B 淋巴细胞和骨髓瘤细胞能融合在一起，体现了细胞膜具有 的特点。

（2）若用于SARS 的预防上，则宜采用细胞。

科学工作者正在研究治疗癌症使用的生物导弹是 。

（3）B 淋巴细胞和T 淋巴细胞都是由________________细胞形成的。

这种相同细胞的后代，在形态、结构和生理功能上产生稳定差异的过程，叫做 。

（4）鼠的淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合后,在培养时通过_______________（有丝/减数）分裂方式大量繁殖。

细胞中染色体数目与淋巴细胞相比有何特点？____________；要清晰地观察融合后的细胞中的染色体形态、数目，可用一定浓度的 处理。

（5）融合的细胞具有两种细胞的特性，即 和________________。

（6）制备单克隆抗体的B 淋巴细胞一般从 （器官）中采集。

从右表看，用于筛选杂交瘤细胞的是特定的 培养基，其选择的机理是 。

7）大量制备单克隆抗体的方法主要有两种：①体外培养法，可获得10μg/mL 的抗体；②动物体内诱生法可获得5-20mg/mL 的抗体。