马松染色液
Masson染色的操作
贝博Masson染色试剂盒利用不同阴离子染料先后作用完成染色，根据组织不同的渗透 性，选择分子大小不同的阴离子染料进行染色，区分不同组织成分。操作简捷，性能稳定， 显色清晰。
注意事项： 1、 每个染色步骤均要保持玻片湿润。 2、 分色后不需冲洗，直接复染。 3、 镜检观察时若胶原纤维部分蓝色着色太浅，可用复染液复染 2-3 分钟，至颜色合适 为止。复染液染色时间不宜过长，否者颜色过深会造成对比不强烈。 4、 若整体染色效果不佳，可用水浸泡 60-90 分钟，褪色后，再重复染色。
传真：021-60853530
本产品仅供科学研究使用！
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BestBio-贝博
3、水合：蒸馏水中浸泡 2 分钟。 4、漂洗：30-40℃水漂洗两次，每次 30-60 秒。
产品说明书
样本的染色 1、 用蒸馏水润湿玻片 30-60 秒。 2、 核染液染色 60 秒左右，冲洗液冲洗 30 秒。 3、 浆染液染色 30-60 秒，冲洗液冲洗 30 秒。 4、 分色液分色 6-8 分钟。 显微镜下观察，样本中胶原纤维部分褪成淡的粉红色为 宜。如果褪色效果不佳，可适当延长时间。 5、 复染液染色 5 分钟，用无水乙醇冲洗干净。 6、 吹干后，用封固剂封片。 7、 结果观察。染色试剂盒
产品组成：
产品编号 试剂组分 核染液 浆染液 分色液 复染液 冲洗液
403023 20ml * 8
20 ml 20 ml 20 ml 20 ml 20ml * 4
储存条件： 室温保存。
有效期： 一年。
产品简介： Masson染色是用于显示组织中纤维的染色方法之一，是胶原纤维（collagen fiber）染
PH0622 Masson三色染色液(马松染色)使用手册
自备材料
1、固定液：选用甲醛升汞或甲醛盐溶液，亦可选购中性福尔马林试剂； 2、95%乙醇、无水乙醇等系列乙醇； 3、蒸馏水或去离子水；
使用方法
1、切片常规脱蜡至水。 2、用配制好的试剂(A)染色 5～10min。 3、用酸性乙醇分化液分化、水洗。 4、用氨水溶液返蓝、水洗。 5、蒸馏水或者去离子水洗 1min。 6、丽春红品红染色液染色 5～10min。 7、用乙酸溶液洗 1min。 8、磷钼酸溶液洗 1～2min。 9、用乙酸溶液洗 1min。 10、直接放入苯胺蓝染色液中染色 1～2min。 11、乙酸溶液洗 1min。 12、95%乙醇快速脱水。 13、无水乙醇(Ⅰ) 5～10s。 14、无水乙醇(Ⅱ) 5～10s。 15、无水乙醇(Ⅲ) 5～10s。 2
1
试剂(F): 磷钼酸溶液 试剂(G): 苯胺蓝染色液 使用说明书
50ml 50ml
100ml 100ml 1份
RT 避光 RT 避光
主要成分
试剂(A): 主要由苏木素和氯化铁等组成。 试剂(B): 主要由乙醇、酸溶液等组成。 试剂(C): 主要由稀氨水等组成。 试剂(D): 主要由丽春红、品红等组成。 试剂(E): 主要由乙酸等组成。 试剂(F): 主要由磷钼酸等组成。 试剂(G): 主要由苯胺蓝、弱酸等组成。
Phygene Masson 三色染色试剂盒的特点： ①染色稳定； ②分化时间短，1～2s； ③色彩清晰鲜艳； ④适用范围广，适宜于组织的石蜡切片、冰冻切片等染色； ⑤所染切片保存时间长且不易褪色。
试剂存储
常温保存，有效期至少一年
试剂组分
试剂名称 试剂(A) :Weigert 铁苏木素染液 | A1:苏木素染液 试剂(A) :Weigert 铁苏木素染液 | A2:氯化铁溶液 规格：50ml 25ml 25ml 规格：100ml 50ml 50ml 保存 RT 避光 RT 避光
马松三色染色法
马松三色染色法马松三色染色法是一种用于显示组织中纤维的染色技术，特别适用于结缔组织的染色。
该方法使用三种染料：苏木精、酸性品红和丽春红，分别染色细胞核、肌纤维和胶原纤维。
首先，切片需要经过常规脱蜡至水的过程，以确保染色剂能够充分渗透到组织中。
然后，使用配制好的Weigert氏铁苏木素染色液对组织进行染色，以突出显示细胞核。
染色完成后，需要充分水洗，以去除未结合的染料。
接下来是酸性品红染色，用于标记肌纤维。
这个步骤需要在弱酸环境中进行分化处理，以将染色剂与组织中的碱性物质区分开来。
弱酸还能帮助酸性品红更好地渗透到组织中。
最后，使用丽春红品红染色液对胶原纤维进行染色。
在这个步骤中，需要使用弱酸工作液来洗去未结合的染料。
在整个染色过程中，组织固定起着非常重要的作用。
不同的固定液会影响染色时间，因此需要根据具体情况进行调整。
在完成染色后，需要进行常规脱水、透明和封固处理，以便在显微镜下观察。
马松三色染色法的优点在于它能够清晰地显示结缔组织中的胶原纤维和肌纤维，特别是在病理情况下，如器官硬化性疾病和瘢痕组织的鉴别诊断中，该方法能够提供有价值的信息。
此外，该方法具有较高的特异性和灵敏度，能够检测出病理变化中较小的差异。
然而，该方法也有一些局限性。
首先，该方法需要使用多种染料和化学试剂，这使得操作过程相对复杂。
其次，某些组织可能需要特定的处理步骤，例如脱蜡、脱水和固定等。
这需要技术人员具备一定的经验和技术水平。
尽管存在这些局限性，马松三色染色法仍是一种非常重要的病理学技术。
它可以提供关于组织结构和功能的重要信息，有助于病理医生做出准确的诊断和制定治疗方案。
Masson三色染色液G1006
Masson 三色染色液30ml+20ml*5RT产品简介：由Mallory 三色染色改造，利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。
包装内容：产品货号产品名称规格G1006-1重铬酸钾媒染剂30ml G1006-2Weigert 铁苏木素A 液20ml G1006-3Weigert 铁苏木素B 液20ml G1006-4丽春红酸性品红染液20ml G1006-5磷钼酸溶液20ml G1006-6苯胺蓝染液20ml保存条件：室温保存，有效期1年。
操作说明：1、石蜡切片脱蜡至水：依次将切片放入二甲苯Ⅰ20min-二甲苯Ⅱ20min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ5min-75%酒精5min ，自来水洗。
2、重铬酸钾染色：切片入重铬酸钾浸泡过夜，自来水洗。
3、铁苏木素染色：铁苏木素A 液与B 液等比混合成铁苏木素染液，切片入铁苏木素3min ，自来水洗，盐酸酒精溶液分化，自来水冲洗。
4、丽春红酸性品红染色：切片入丽春红酸性品红浸染5-10min ，自来水漂洗。
5、磷钼酸染色：磷钼酸水溶液浸染1-3min 。
6、苯胺蓝染色：磷钼酸之后不用水洗，直接入苯胺蓝染液染3-6min 。
7、分化：切片用1%冰醋酸分化，两缸无水乙醇脱水。
8、透明封片：切片放入第三缸无水乙醇5min ，二甲苯5min 透明，中性树胶封片。
9、显微镜镜检，图像采集分析。
染色结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色。
弹力纤维呈棕色。
肌纤维、纤维素和红细胞染红色。
细胞核染蓝黑色。
G 1006注意事项：1、Weigert铁苏木素分A、B两液，临用前将两液等比例混合使用。
不宜预先混合，否则容易氧化沉淀而失去染色力。
2、重铬酸钾染完后水洗要稍快，切片洗干净即可。
3、根据切片的数量对铁苏木素染液进行更换，也可以现配现用；4、丽春红的染色程度要控制好，胶原部分不能是红色或者太红，会影响后续苯胺蓝的着色；5、冰醋酸分化苯胺蓝的过程中，若是分化过度，胶原蓝色太浅，若分化不足，易与丽春红的颜色叠加呈紫蓝色。
masson染色步骤(临床医学研究中心总结)
试剂名：改良 Masson 三色染色液货号：G1345 品牌：索莱宝1、石蜡切片65℃烘烤1h（使组织更贴合玻片，并溶解石蜡。
如果是刚切好的切片，则烘烤2-3h），立即放入脱蜡剂中脱蜡；2、脱蜡：脱蜡剂Ⅰ（15min）、脱蜡剂Ⅱ（15min）水化：无水乙醇I（5min）、无水乙醇 II（5min）、95%乙醇I（5min）、95%乙醇II （5min）、85%乙醇（5min）、75%乙醇（5min）脱蜡处理，蒸馏水3min3、将 Bouin 液滴在组织上，于室温作用一晚或置入 37℃的温箱内 2h 进行媒染，然后流水冲洗至切片组织上的黄色消失。
4、天青石蓝染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
5、Mayer 苏木素染色液滴染3min，稍水洗玻片上无染料即可。
（显微镜下观察，细胞核呈现深蓝色，细胞质有蓝色）6、酸性乙醇分化液分化3-5s，流水冲洗 10min返蓝。
（细胞核呈现灰蓝色，细胞质应相对透明无色）7、丽春红品红染色液染 2-5min，稍水洗玻片上无染料即可。
（容易造成深红或紫红色，基本看不清细胞核。
建议先染色30s-1min，显微镜下观察，适当增加时间）8、磷钼酸溶液浸泡10min，倾去上液，切片不用水洗，直接滴入苯胺蓝染色液染 5-10min。
（如果丽春红染色过深，苯胺蓝也应该适当染久一些，最终应该是红蓝色分明，能明显分辨出胶原显微）9、弱酸溶液处理 2min。
10、透明：切片直接依次放入无水乙醇 I（5min）-无水乙醇 II（5min）- 脱蜡剂Ⅰ（5min）- 脱蜡剂Ⅱ（5min）。
然后用纸巾擦干玻片上残余脱蜡剂，或直接铺平玻片在通风橱内，干燥脱蜡剂。
使用中性树脂封片。
注：masson染色不像HE可以把颜色洗脱再重复步骤，建议使用同一批切片，先摸索染色时间。
Masson三色染色操作规程
Masson染色,操作规程实验目的： Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一实验原理：Masson氏染色时胶原纤维呈蓝色(被苯胺蓝所染),肌纤维呈红色(被酸性品红和丽春红所染),这与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
不同的组织和细胞成分,它们的孔隙大小是不同的。
孔隙的大小,决定了组织的渗透性。
如孔隙小,组织结构致密,渗透性低；孔隙宽,组织结构疏松,渗透性高。
如已固定的组织用一系列阴离子水溶性染料先后或混合染色,则可发现红细胞被最小分子的阴离子染料着染.肌纤维与胞质被中等大小的阴离子染料着染,而胶原纤维则被大分子的阴离子染料着染。
由此说明了红细胞对阴离子染料的渗透性最小,肌纤维与胞质次之,而胶原纤维具有最大的渗透性。
根据组织不同的渗透性能,选择分子大小不同的阴离子染料进行染色,便可把不同组织成分显示出来.而染料分子的大小,主要由其分子量来体现。
小分子量者易于穿透结构致密、渗透性低的组织,而大分子最者则只能进入结构疏松,渗透性高的组织。
一般来说,结构疏松,渗透性高的组织多选择大分子染料,而结构致密,渗透性低的组织多选择小分子染料。
试剂仪器：Harris 氏苏木精：苏木精0.4g，硫酸铝钾6g，黄色氧化汞0.16g，蒸馏水80ml。
将蒸馏水预热,预热过程中加入硫酸铝钾，沸腾后拔下电源，加入苏木精，接通电源再度沸腾后，拔掉电源，缓慢加入氧化汞，搅拌混匀，冷却后第二天加入5%比例的冰醋酸即可用。
透明玻璃瓶装缓慢氧化可省略冰醋酸，长期有效。
Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。
1%冰醋酸水溶液：冰醋酸1 ml，蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。
1%苯胺蓝水溶液：苯胺蓝1g，蒸馏水100 ml，冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液：光绿 1g，蒸馏水100 ml实验操作程序：1、石蜡切片脱蜡至水。
2、铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。
改良Gomori三色染色液使用说明书
改良Gomori三色染色液使用说明书货号：G3510规格：4×50ml/4×100ml保存：RT避光，6个月有效。
产品内容：名称4×50ml4×100ml Storage试剂(A):Weigert铁苏木素A1:Weigert染液A25ml50ml RT避光A2:Weigert染液B25ml50ml RT避光临用前，取A1、A2等量混合即为Weigert铁苏木素染色液，不宜提前配制。
试剂(B):酸性分化液50ml100ml RT试剂(C):Gomori染色液50ml100ml RT避光试剂(D):Gomori分化液50ml100ml RT产品简介：Masson三色染色又称马松染色，是结缔组织染色中最经典的一种方法，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织。
Gomori染色液采用媒染剂和促染剂同时染色，可使结缔组织中的多种成分着色。
改良Gomori三色染色液可将胶原纤维染成绿色，肌纤维染成红色，细胞核染成蓝色。
操作步骤(仅供参考)：1、新鲜肌肉组织取材后立即进行冰冻切片，切片厚度为10-15µm。
2、用配制好的Weigert铁苏木素染色5-10min。
水洗。
3、流水冲洗5-10min，镜下观察。
如果染色过深，可用酸性分化液分化数秒（镜下观察）。
4、水洗返蓝，蒸馏水洗2-3次。
5、加入Gomori染色液染色20-40min，流水冲洗。
6、在上述操作过程中按蒸馏水：Gomori分化液=4:1比例配制Gomori分化工作液。
7、用Gomori分化工作液洗30s-90s，以镜下观察适当为宜，流水冲洗。
8、95%乙醇快速脱水，无水乙醇脱水3次，每次5-10s。
马松三色染色原理masson1
马松三色染色原理masson.Masson染色(2010-09-02 14:43:20转载标签:杂谈分类:实验日志masson 染色原理Masson三色法(根据Masson,1929试剂配制(一 Weigert氏铁苏木素液(见苦味酸——酸性品红法(二丽春红酸性品红液丽春红(Ponceau 2R 0.7g酸性品红(acid fuchsin 0.3g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml(三 1%磷钼酸水溶液磷钼酸(phosphomolybdic acid 1g蒸馏水加至 100ml(四 2%苯胺蓝液苯胺蓝(aniline blue 2g冰醋酸(glacial acetic acid 2ml蒸馏水加至 100ml(五亮绿液亮绿(light green 1g蒸馏水 99ml冰醋酸(glacial acetic acid 1ml操作方法1. 组织固定于Bouin氏液或Zenker氏液,流水冲洗一晚,常规脱水包埋。
2. 切片脱蜡至水。
如用Zenker氏液固定者,应进行除汞处理,其步骤如下:(1 切片脱蜡后于0.5%碘酒精作用10分钟。
(2 稍水洗(3 5%硫代硫酸钠作用5分钟。
(4 流水冲洗10分钟3. Weiger氏铁苏木素染5-10分钟。
4. 流水稍洗。
5. 1%盐酸酒精分化。
6. 流水冲洗数分钟。
7. 丽春红酸性品红液染5-10分钟。
8. 蒸馏水稍冲洗。
9. 1%磷钼酸水溶液处理约5分钟。
10.不用水洗,直接用苯胺蓝液或绿液复染5分钟。
11.1%冰醋酸处理1分钟。
12.95%酒精脱水多次。
13.无水酒精脱水,二甲苯透明,中性树胶封固结果:胶原纤维虽蓝色(用苯胶蓝液复染或绿色(用亮绿复染。
胞质、肌纤维和红细胞红色。
胞核蓝褐色。
注意事项:1.组织用Bouin氏液或Zenker氏液固定为佳。
如已用10%甲酸液固定,切片可在脱蜡至水后.再放入Bouin氏液作用一晚或置37。
C温箱内1-2小时,然后流水冲洗切片至黄色消失再进行染色。
Masson染色
Masson染色Masson染色,用于显示组织中纤维的染色方法之一。
试剂：Regaud 氏苏木精：苏木精1g，95%酒精10ml，甘油10ml，蒸馏水80ml。
将苏木精加入蒸馏水内加温溶解,冷却后加入酒精和甘油,放数日后即可应用。
Masson丽春红酸性复红液：丽春红0.7g，酸性复红0.3g，蒸馏水99ml，冰醋酸1ml。
0.2%冰醋酸水溶液：冰醋酸0.2 ml，蒸馏水100 ml。
1%磷钼酸水溶液：磷钼酸1g，蒸馏水100 ml。
苯胺蓝水溶液：苯胺蓝2g，蒸馏水98 ml，冰醋酸2 ml。
1%光绿水溶液：光绿 1g，蒸馏水100 ml。
Masson三色法步骤1、石蜡切片脱蜡至水。
2、铬化处理或去汞盐沉淀（甲醛固定的组织此步可略）。
3、依次自来水和蒸馏水洗。
4、用Regaud苏木精染液或Weigert苏木精液染核5-10min。
5、充分水洗,如过染可盐酸酒精分化。
6、蒸馏水洗。
7、用Masson 丽春红酸性复红液5-10min。
8、以2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
9、1%磷钼酸水溶液分化3-5min。
10、不经水洗,直接用苯胺蓝或光绿液染5min。
11、以0.2%冰醋酸水溶液浸洗片刻。
12、95%酒精、无水酒精、二甲苯透明、中性树胶封固。
结果：胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色(如光绿液染色为绿色)，胞浆、肌肉、纤维素、神经胶质呈红色，胞核黑蓝色。
体会与说明：1、控制好染色步骤。
2、组织固定起着很重要的作用，根据不同的固定液可延长或缩短染色时间。
3、0.2%冰醋酸水溶液洗，可使色调清晰鲜艳。
4、磷钼酸水溶液对丽春红、酸性复红有分化作用，分化时镜下控制，肌纤维和纤维素呈红色，胶原纤维呈淡粉红色即可。
masson染色方法
masson染色方法
Masson染色方法是一种常用的组织学染色技术，用于观察胶原和纤维组织在组织中的分布和形态。
该方法主要包括以下步骤：
1. 取组织标本后，用4%的中性缓冲福尔马林固定，可使组织保持其原有的形态和构造。
2. 将固定后的标本处理至透明化，可用xylene或其他透明剂进行处理。
3. 在脱水过程中，将标本浸泡于不同浓度的乙醇中，逐渐升高浓度，使标本脱水。
4. 将标本置于蜡质中，使其渗透蜡质。
5. 将蜡块切成5-8μm的切片，然后将切片贴于载玻片上。
6. 取一个玻片，将切片加热，使其蜡质熔化，然后用xylene或其他透明剂进行除蜡。
7. 将标本在不同浓度的乙醇中进行脱水，然后再用水洗涤。
8. 将标本浸泡在Weigert铁铵液中，使其染色。
9. 在洗涤过程中，将标本浸泡在不同浓度的乙醇中进行脱水。
10. 将标本浸泡在天蓝色溶液中，进行底色染色。
11. 用Ponceau fuchsin液进行胶原纤维染色。
12. 将标本在不同浓度的乙醇中进行脱水，然后再用xylene或其他透明剂进行透明化。
13. 最后，将标本覆盖玻片，用封边剂进行封边。
Masson染色方法可以同时染色胶原和细胞核等组织结构，能够
清晰显现组织结构的形态和分布情况。
该方法简单易行，经济实用，广泛应用于医学、生物学、农学等领域的组织学研究中。
PH1427-PhyEasy马松染色手册
Quality |Reliable |Perfect1PH1427|PhyEasy™Masson Staining KitCatalog No ：PH1427Size ： 4x10mL Storage ：Store@RT ，一年有效简介Masson 染色液是用于显示组织中纤维的染色方法之一，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法。
主要适用于胶原蛋白和平滑肌的鉴别分析。
广泛用于结缔组织、肌肉组织和胶原蛋白的研究等。
Masson 染色液是利用两种或三种阴离子染料混合一起或先后作用完成染色，与阴离子染料分子的大小和组织的渗透性有关。
根据组织不同的渗透性能，选择分子大小不同的阴离子的染料进行染色，便可把不同组织成分显示出来。
PhyEasy™Masson 染色液根据特有配方与传统Masson 染色相比效果更好，步骤更为简单。
组分试剂(A):核染液----10mL试剂(B):浆染液----10mL试剂(C):分色液----10mL试剂(D):复染液----10mL说明1.切片脱蜡。
2.蒸馏水洗3次，每次2min。
3.核染液染2min。
4.蒸馏水洗。
5.1%盐酸酒精（75%酒精：浓盐酸=99：1）分化1s，自来水返蓝。
6.浆染液染色5-8min。
7.蒸馏水洗3次，每次2min。
8.分色液分色1-3min。
9.复染液染色5min。
10.蒸馏水洗。
11.脱水透明，封片。
注意事项1.不同的固定液或固定时间以及不一样的组织，染色效果可有差异，要根据显微镜下观察来掌握染色或分化时间。
2.染色液必须充分淹盖组织。
3.每次染色宜用阳性切片作为对照。
masson染色阅读方法
masson染色阅读方法
马松染色解读法
马松染色是一种组织学染色技术，用于区分结缔组织中的不同成分。
该技术通过利用胶原蛋白和肌纤维的高亲和力，使用酸性染料和碱性染料的组合对组织切片进行染色。
具体步骤：
1. 组织固定：将组织样品置于甲醛或福尔马林等固定液中，以保存组织结构。
2. 石蜡包埋：固定后的组织脱水并浸入石蜡中，形成石蜡包埋块，以便进行切片。
3. 切片：使用微切机将石蜡包埋块切成薄切片（通常为 4-6 微米厚）。
4. 脱蜡：将切片放置在溶剂（例如二甲苯）中，以去除石蜡。
5. 水化：将脱蜡切片逐步浸入一系列乙醇溶液（从 100% 到70%）中，以使切片复水。
6. 核染色：使用苏木精（一种碱性染料）对切片进行染色，以突出细胞核。
7. 酸性福红染色：使用酸性福红（一种酸性染料）对切片进行染色，以染色胶原蛋白和肌纤维。
8. 脱水：将染色切片再次逐步浸入一系列乙醇溶液（从 70% 到 100%）中，以脱水。
9. 透明：将脱水切片置于二甲苯等透明剂中，使其透明。
10. 安装：将透明切片安装在载玻片上，使用永久安装剂（例如加拿大树胶）覆盖。
解读结果：
马松染色后，胶原蛋白和肌纤维呈现红色，而细胞核呈现蓝色或紫色：
胶原蛋白：红色或粉红色
肌纤维：红色
细胞核：蓝色或紫色
马松染色可用于评估结缔组织的分布、结构和量化。
它广泛应用于病理学、组织学和组织工程等领域。
masson染色详细原理
masson染色详细原理Masson染色是一种常用的组织学染色方法，用于观察和研究组织和细胞的形态结构。
它是由法国病理学家Masson于1923年提出并改进的，在组织学研究中得到广泛应用。
Masson染色主要用于染色胶原纤维和肌纤维，使其显色，从而更好地观察和研究组织的结构和性质。
Masson染色的原理是利用染色剂对组织中的不同成分具有选择性染色作用。
其核心原理是根据不同的成分对染色剂的亲和力不同，从而实现对组织结构的染色。
Masson染色的主要步骤包括固定、去脂、脱水、浸透、包埋、切片和染色。
组织标本需要进行固定处理，常用的固定剂有福尔马林和乙醛等。
固定可以保持组织的形态结构，防止其变性和腐败。
然后，固定的组织标本需要去除其中的脂肪物质，以便更好地观察其他组织成分。
脱脂的方法主要是使用有机溶剂，如乙醚或苯等，将脂肪溶解并去除。
接下来，需要对标本进行脱水处理，以便将其转变为透明的状态，便于浸透和包埋。
脱水常用的方法是使用酒精和醋酸酯等有机溶剂，逐渐浓度递增地进行脱水处理。
脱水后，组织标本需要进行浸透处理，即将其浸泡在合适的浸透剂中，使其渗透和渗透固化。
常用的浸透剂有蜡和树脂等，浸透剂的选择取决于具体的研究目的和标本类型。
浸透完成后，需要将组织标本进行包埋，即将其嵌入到固化剂中，以便进行切片。
常用的固化剂是石蜡，可以使组织标本坚固并保持其形状。
在包埋完成后，可以使用切片机将固化的组织标本切成薄片，以便于后续的染色和观察。
切片的厚度通常为5-10微米，取决于具体的研究需求。
对组织标本进行染色。
Masson染色的染色剂主要有酸性双染剂和嗜酸性染料组成，如苏木素、伊红、天青和酸性绿等。
这些染料对不同的组织成分具有选择性染色作用，使得胶原纤维显色为蓝色，肌纤维显色为红色，细胞核显色为深紫色。
通过Masson染色，可以清晰地观察和研究组织中的胶原纤维和肌纤维，了解其形态、分布和性质。
同时，Masson染色还可以与其他染色方法结合使用，如免疫组织化学染色和原位杂交等，以实现更全面和深入的组织学研究。
常用染色步骤HE,马松,糖原
常用染色步骤HE,马松,糖原联系人:周昌斌137******** 133********苏木素伊红染色液一.苏木素伊红染色液套装组合:Harris苏木素染色液50ml水溶性伊红染色液50ml苏木素染色分化液50ml苏木素染色返兰液50ml概述:苏木素伊红染色是组织病理学经典的常规染色方法,历经上百年的应用历史至今仍无可替代。
因此,苏木素伊红染色是病理切片制作中极为重要的技术环节。
二.染色方法:1. 切片脱蜡二甲苯I 5分钟,2. 切片脱蜡二甲苯II 5分钟,3. 100%1、100%2、95%1、95%2、70%梯度乙醇各30,秒钟,4. 自来水流水冲洗1分钟,5. 苏木素染色5—8分钟(依染液新旧调整染色时间),6. 自来水流水冲洗1分钟,7. 进入分化液分化数秒钟,8. 自来水流水冲洗1分钟,9. 进入返兰液处理5—10秒钟,10. 自来水流水冲洗2分钟,11. 进入伊红染色液1-3分钟,12. 自来水冲洗30—60秒钟,13. 75%I、75%II乙醇脱水分色各10秒钟,14. 95%乙醇1、95%乙醇2各脱水10秒钟,15. 100%乙醇1、100%2脱水30-60秒钟,16. 二甲苯1、二甲苯2透明各1分钟,17. 中性树胶封固。
三.染色技术要点:苏木素染色液在静止由于时染液表面于空气中的氧分子接触极液体代表面水分蒸发会产生氧化作用并形成氧化膜。
因此,在使用前应使用滤纸吸附去除氧化膜以免污染切片。
一般情况下应建立良好的使用习惯,每隔2~3天将苏木素染液彻底过滤一次。
为保证HE切片的恒定染色质量建议每500ml苏木素染色液染1200~1500张切片为宜。
苏木素染色液在用于免疫组织化学染色的的复染时应注意调控染色时间,核染色过浅不易辨识组织结构而核染色过深则喧宾夺主,一般复染的时间应控在10-30秒以内。
此外,复染后的分化和返兰步骤不应省略否则将造成整张切片呈淡蓝色,使DAB呈现土黄色。
分化和返兰步骤是HE染色关键点,应在染色实践中依据分化液和返兰液的新旧调整分化和返兰的处理时间。
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用
Masson染色在辅助诊断肝纤维化中应用1. 引言1.1 Masson染色简介Masson染色是一种常用的组织染色方法，用于检测胶原蛋白和纤维组织。
该染色方法以法国病理学家皮埃尔·马松（Pierre Masson）命名，最初用于研究纤维组织的形态结构。
Masson染色主要通过梵斯基与苏木精染液染色，使得胶原纤维呈蓝色，肌肉纤维和胶原纤维上的细胞核呈黑色或蓝色，而细胞质和胶原纤维之外的结缔组织呈红色或紫红色，从而能够清晰地区分不同类型的组织结构。
在肝纤维化的辅助诊断中，Masson染色被广泛应用于观察肝组织中的纤维化程度和类型。
通过Masson染色，医生可以清晰地看到肝组织中纤维组织的分布情况、密度和形态，从而帮助判断肝纤维化的严重程度和发展趋势。
Masson染色还可以帮助鉴别不同类型的纤维化组织，例如胶原纤维和弹性纤维，有助于提高对肝组织结构的准确理解。
Masson染色是一种简单而有效的组织染色方法，在辅助诊断肝纤维化中具有重要意义。
它的应用可以为医生提供更直观、全面的肝组织信息，有助于制定更精准的治疗方案和预后评估。
Masson染色在肝纤维化诊断中的重要性将在后续内容中进一步探讨。
1.2 肝纤维化的诊断意义肝纤维化是一种常见的肝脏疾病，它是由于长期的肝脏损伤导致肝脏组织纤维化增生而引起的。
肝纤维化的诊断在临床上具有重要的意义，因为它往往是其他肝病发展到晚期的先兆。
通过及时的诊断和治疗，可以有效预防肝纤维化进一步发展成为肝硬化甚至肝癌等严重疾病。
2. 正文2.1 Masson染色原理Masson染色是一种常用的组织染色方法，主要用于观察和分析胶原和纤维蛋白等胶原纤维的存在和分布情况。
它是通过同时染色细胞核、胶原和肌纤维蛋白，使之呈现不同的颜色，从而能够清晰地区分不同的细胞和组织结构。
Masson染色的原理主要是基于组织成分对染色剂的亲和性不同所导致的颜色差异。
具体来说，Masson染色是将织片浸入酸性酒红O染色液中，再经过苏木红和亚甲蓝的染色，最后脱水、透明和封片，使细胞核呈蓝色，胶原呈蓝色（富含胶原的纤维呈绿色），而肌纤维蛋白则呈红色。
马松三色染色在儿童狼疮性肾炎中的应用比较
马松三色染色在儿童狼疮性肾炎中的应用比较儿童SLE是儿童常见的肾脏病，其病理诊断及其分型对患儿的治疗，预后有着重要意义。
本文通过介绍三种masson染色方法，病在肾穿标本中进行试验摸索，发现加入Bouin 后固定液可显著改善标本的染色效果，而用丽春红，酸性品红混合液染色的标本免疫复合物显示效果较好，但层次稍弱，而用变色酸2R染色的标本，颜色鲜艳，免疫复合物显示清晰，层次分明，是一种效果相对较好的方法，可能更加有助于对狼疮性肾炎的诊断。
标签：儿童肾活检；Masson三色染色；狼疮性肾炎系统性红斑狼疮（systemic lupus erythematosus，SLE）是一种全身性自身免疫性疾病，是一种常见的结缔组织病，累及肾脏则称为狼疮性肾炎（lupus nephritis，LN）。
儿童肾脏累及率明显高于成人，为40%-90%[1]。
儿童SLE起病大多以肾脏症状为首发表现，临床表现以肾炎肾病为主，病理类型以Ⅳ型最多[2]。
肾穿刺活检组织常规特殊染色有3种染色：过碘酸雪夫反应（PAS）、高碘酸-乌洛托品银（PASM）、Masson染色。
其中M asson三色染色主要是用来观察肾小球嗜复红蛋白沉积物（免疫复合物）及肾脏内胶原纤维增生等，对狼疮性肾炎（LN）的诊断具有重要作用。
我们意识到传统的masson三色染色法[3]操作较繁琐，时间长，对肾小球内免疫复合物显色颜色浅淡，基底膜、系膜、胶原纤维及胞质、红细胞颜色对比不鲜艳。
许多学者也对Masson三色染色法进行了各种各样的探索和改良。
但由于各实验室条件及操作者的水平存在差异，因此改善的方法得不到广泛的认可和推广。
现收集目前常用的几种Masson染色法及改良后的效果进行比较，对各实验条件及可行性进行分析比较，摸索找出一种效果显著又适合推广的方法，希望对儿童肾活检狼疮性肾炎诊断提供更好的诊断素材。
1 材料与方法1.1 材料收集南京市儿童医院临床住院患儿肾活检组织，经10% 福尔马林固定，常规脱水、透明、包埋，选取20例已明确诊断为Ⅲ型和Ⅳ型狼疮性肾炎的患儿肾穿刺标本病理诊断剩下的石蜡块，每块连续切2 μm 切片3张，分别采用三种不同方法进行Masson三色染色。
马松三色原理
马松三色原理
马松三色染色，也被称为Masson染色，是一种结缔组织染色中的经典方法，主要用于显示胶原纤维和肌纤维。
该原理主要基于阴离子染料分子的大小和组织的渗透性。
染料的分子大小由分子量来体现。
小分子量染料易穿透结构致密、渗透性低的组织，而大分子量染料则只能进入结构疏松、渗透性高的组织。
在马松三色染色中，肌纤维会被苯胺蓝染成红色，而胶原纤维则会被苯胺蓝染成绿色或蓝色。
这种染色方法能够有效地区分胶原纤维和肌纤维，因此被广泛应用于生物学和医学研究。
以上内容仅供参考，如需更多信息，建议查阅生物学专业书籍或咨询专业人士。
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Masson三色染色液说明书
【产品名称】
Masson三色染色液
【包装规格】
货号：DC0032
套组包装规格：8×20ml/盒、8×100ml/盒、8×250ml/盒
【预期用途】
主要用于组织中结缔组织、肌肉和胶原纤维的组织细胞学染色。
【检验原理】
Masson三色染色又称马松染色，是胶原纤维染色权威而经典的技术方法，所谓三色染色通常是指染胞核和能选择性的显示胶原纤维和肌纤维。
该法染色原理与阴离子染料分子的大小和组织的渗透有关：分子的大小由分子量来体现，小分子量易穿透结构致密、渗透性低的组织；而大分子量则只能进入结构疏松的、渗透性高的组织，苯胺蓝的分子量很大，染色后肌纤维呈红色，胶原纤维呈蓝色，主要用于区分胶原纤维和肌纤维。
【主要组成成分】
试剂组成主要成分
1、Weigert铁苏木素A液苏木素
2、Weigert铁苏木素B液三氯化铁
3、酸性乙醇分化液乙醇
4、蓝化液碳酸盐
5、丽春红品红染色液丽春红、品红
6、乙酸溶液乙酸
7、磷钼酸溶液磷钼酸
8、苯胺蓝染色液苯胺蓝
【储存条件及有效期】
5℃～35℃保存，原包装未开封染色液的有效期为l8个月，在有效期内的已开封染色液建议在开封后6个月内使用完，每次用后应及时拧紧瓶盖，以免挥发或变质。
【样本要求】
组织片充分固定和脱蜡。
【检验方法】
1、组织固定于Bouin氏固定液(另购)或Zenker氏固定液(另购)或10%中性福尔马林固定液(另购)等，流水冲洗，常规脱水包埋；
2、切片常规脱蜡至水；
3、取适量的Weigert铁苏木素A液和Weigert铁苏木素B液等量混合,即为Weigert铁苏木素染色液，用Weigert铁苏木素染色液染色，流水稍洗；
4、酸性乙醇分化液分化数秒，流水冲洗数分钟；
5、蓝化液返蓝数秒，流水冲洗数分钟；
6、丽春红品红染色液染色数分钟，流水稍冲洗；
7、将蒸馏水:乙酸溶液按一定的比例配制乙酸工作液，用乙酸工作液洗切片；
8、磷钼酸溶液处理后，倾去玻片上磷钼酸溶液(不用水洗)；
9、苯胺蓝染色液复染，倾去玻片上染色液(不用水洗)；
10、用乙酸工作液处理切片，至切片无蓝色脱出(必要时镜下控制)；
11、95%乙醇迅速脱水，无水乙醇脱水数次后，二甲苯透明，中性树胶封固。
【检验结果的解释】
胶原纤维、粘液、软骨呈蓝色，肌纤维、纤维素和红细胞呈红色，细胞核呈蓝黑色。
【检验方法的局限性】
仅限于病理组织内容物染色观察。
【注意事项】
1、酸性乙醇分化液分化时间应根据切片厚薄、组织的类别和新旧而定。
2、如蓝化液使用量较大，可自行配制Scott促蓝液或0.1～1%碳酸锂水溶液予以替代。
3、磷钼酸处理时最好在镜下控制，分化到胶原纤维呈淡红色、纤维呈红色即可，分化时间根据染色深浅而定。
4、部分组织脱水时容易造成脱色过度，应注意肉眼控制。
5、本产品仅用于体外诊断，应由专业人士使用及进行结果的判读。
6、使用前应详细阅读说明书，并做好个人卫生防护，在有效期内使用，生产日期、生产批号和失效日期见包装。
7、用后应按医院或环保部门要求处置废弃物。
【基本信息】
备案人/生产企业名称：安徽雷根生物技术有限公司
住所：淮北凤凰山经济开发区凤冠路三期标准化厂房三号厂房。