血清葡萄糖的测定GODPOD法
血清葡萄糖(GLU)测定—GOD-POD(精)
临床意义
血糖浓度受神经系统和激素的调节而保持相对稳定，当这些调节失去原有的 相对平衡时，则出现高血糖和低血糖。
高血糖： 1.生理性高血糖：见于饭后1~2h；注射葡萄糖后；情绪紧张时分泌肾上腺
素增加或注射肾上腺素后等。 2.病理性高血糖： ①内分泌功能障碍：如糖尿病等 ②颅内压增加刺激血糖中枢而使血糖升高，如颅外伤，颅内出血等。 ③严重脱水：引起血液浓缩而导致血糖升高，如呕吐、腹泻、高热等。 血糖降低.： 1.生理性的低血糖：有饥饿、剧烈运动等。 2.病理性的低血糖： 胰岛素分泌过多：如胰岛β细胞增生或肿瘤。 对抗胰岛素的激素分泌不足：如垂体前叶、肾上腺皮质和甲状腺功能减退等。 血糖来源减少：如长期营养不良，严重的肝病等。
操作步骤：
1、配制酶工作液：
2、按下表操作：
加入物(ml) U
SB
血清
0.03 — —
葡萄糖标准液 — 0.03 —
蒸馏水
— — 0.03
酶工作液
3
33
混匀， 置37℃水浴10min , 比色（ 用分光光度计波长500nm, B管调零），读取各管A值。
结果与参考值
计算及结果报告： 血清葡萄糖mmol/L== A U/A事项
-葡萄糖有ɑ型和ß型之分，在溶液中可互相转 变。新配制的葡萄糖标准液须放置2小时以上 （最好过夜），使两者在溶液中达到平衡。
COD-POD 法初始反应特异性高，而指示反 应特异性较差，干扰往往发生在指示反应。血 液中的一些还原性物质，如维生素C、谷胱甘 肽及左旋多巴可与色原性氧受体竞争H2O2， 使结果出现偏差。
血清葡萄糖（ＧＬＵ）测定—GOD-POD法
实验目的：
⒈掌握GOD-POD法测定血糖的原理及注意事 项。
葡萄糖测定-葡萄糖氧化酶法
葡萄糖氧化酶法测定血清（浆）葡萄糖【原理】葡萄糖氧化酶 (glucose oxidase ， GOD) 利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
过氧化物酶 (peroxidase ， POD) 在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体 4- 氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即 Trinder 反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
【试剂】1 ． 0.1mol/L 磷酸盐缓冲液 (pH7.0) 称取无水磷酸氢二钠 8.67g 及无水磷酸二氢钾 5.3g 溶于蒸馏水 800ml 中，用 1mol/L 氢氧化钠 ( 或 1mol/L 盐酸 ) 调 pH 至 7.0 ，用蒸馏水定容至 1L 。
2 ．酶试剂称取过氧化物酶 1 200U ，葡萄糖氧化酶 1 200U ， 4- 氨基安替比林 10mg ，叠氮钠 100mg ，溶于磷酸盐缓冲液 80ml 中，用 1 mol/L NaOH 调pH 至 7.0 ，用磷酸盐缓冲液定容至 100ml ，置 4 ℃保存，可稳定3 个月。
3 ．酚溶液称取重蒸馏酚 100mg 溶于蒸馏水 100ml 中，用棕色瓶贮存。
4 ．酶酚混合试剂酶试剂及酚溶液等量混合， 4 ℃可以存放 1 个月。
5 ． 12mmol/L 苯甲酸溶液溶解苯甲酸 1.4g 于蒸馏水约 800ml 中，加温助溶，冷却后加蒸馏水定容至 l L 。
6 ． 100mmol/L 葡萄糖标准贮存液称取已干燥恒重的无水葡萄糖 1.802g ，溶于 12mmol/L 苯甲酸溶液约 70ml 中，以 12mmol/L 苯甲酸溶液定容至 100ml 。
2h 以后方可使用。
7 ． 5mmol/L 葡萄糖标准应用液吸取葡萄糖标准贮存液 5.0ml 放于 100ml 容量瓶中，用 12mmol/L 苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
【操作步骤】1 ．自动分析法按仪器说明书的要求进行测定。
葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)试剂盒与己糖激酶法(HK)试剂盒测定血糖比较
葡萄糖氧化酶法（GOD-POD）试剂盒与己糖激酶法（HK）试剂盒测定血糖比较摘要:通过对本实验室常规使用的己糖激酶法试剂盒的比较，分析葡萄糖氧化酶法试剂盒检测血糖的可靠性和应用性。
对本实验室使用的血糖测定参考方法HK法试剂盒与GOD-POD法试剂盒从重复性、试剂稳定性、特异性等方面进行比较。
结果显示GOD-POD法在重复性、试剂稳定性等方面均能满足一般实验室要求，且与HK法相关性良好。
关键词：GOD-POD、HK、血糖测定、方法比较1 引言。
血糖测定是诊断糖尿病的重要依据，血糖的准确测定对诊断和处理高血糖和低血糖症十分重要测定方法主要有化学法和酶法，而酶法有分为葡萄糖氧化酶与过氧化物酶偶联的的GOD-POD法及己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶偶联的HK 法。
酶法中的GOD-POD法，因具有操作简单，无毒、无害，试剂已商品化、易于质控、价格低等优点，现已广泛用于临床。
为此，将GOD-POD法与血糖参考方法HK法从重复性、试剂稳定性、特异性及两种方法的相关性方面作比较，现报告如下：2 材料与方法2.1仪器与试剂己糖激酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号：20110310葡萄糖氧化酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号：20110310胆红素校准品（430 umol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101120血糖中值质控品（4.80 mmol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101008血糖高值质控品（11.20mmol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101008日立-7180全自动生化分析仪2.2方法按试剂盒使用说明设置参数和操作。
2.2.1重复性试验取两个血糖浓度的定值质控血清用两种方法分别平行测20次，计算批内误差。
另取两个血糖浓度同一批号定值质控血清用两种方法每天各做两次，累计20个结果，计算天间误差。
2.2.2回收试验取若干健康体检人群血清混合，分装，按9:1的比例分别加入浓度为4.80 mmol/L和11.20 mmol/l的糖标准溶液，用两种方法分别测定，每种方法的每一浓度平行测定三次，分别计算回收率。
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)
试剂(C): Glu 标准(5mmol/L)
1ml
2× 1ml
பைடு நூலகம்-20℃
试剂(D): ddH2O
1ml
2ml
RT
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 样本处理： ①血清、血浆、脑脊液 样本：从待测样本 中分理出的血清 或血浆丌应有溶 血，直接检测， 如超过线性范围(25mmol/L)，用生理盐水稀释后检测。 ②细胞样本： a、取适量的细胞(一般推荐>106 以上)，离心，弃上清，留取沉淀。 b、用 PBS 或生理盐水清洗 1~2 次，离心，弃上清，留取沉淀。 c、加入 200~300μl 的 PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率 300W，每 次 3~5s，间隔 30s，重复 3~5 次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液丌可离心，待用。 d、③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或 PBS(ml)=1：9 的比例， 加入生理盐水或 PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆。离心，取上清待用。
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2、 普通分光光度计(2ml 比色杯)Glu 测定操作: ①按下表依次加入试剂：
ddH2O(μl) Glu 标准(5mmol/L)(μl) 待测样本(μl) GOD-POD 工作液(ml)
空白管 20
2.0
标准管 20 2.0
待测管
20 2.0
注意事项：
1、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。 2、 本法可直接用于检测脑脊液中的葡萄糖含量，但丌能直接检测尿液中的葡萄糖含量，
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因为未经处理的尿液中含有还原性物质，影响过氧化物酶反应。 3、 待测样本如丌能及时测定，应置于 2~8℃保存，3 天内稳定。 4、 本法线性范围可达 25mmol/L，如果样本葡萄糖浓度过高，结果可能呈假性降低。应
2023年为什么GOD-POD是临床常规方法？
为什么GOD-POD是临床常规方法？
god-pod法即葡萄糖氧化酶法，可以用来测测定血清（浆）葡萄糖，是临床常规方法。
葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体god-pod法即葡萄糖氧化酶法，可以用来测测定血清（浆）葡萄糖，是临床常规方法。
葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
血清葡萄糖浓度的测定ppt课件
10
计算公式
血清葡萄糖浓度 =
A 测定 A 标准
葡萄糖标准液 5 mmol/L
X 5 mmol/L
参考值：
空腹血清葡萄糖浓度：3.89 ~ 6.11 mmol/L
11
注意事项
• 1、葡萄糖氧化酶法可直接测定脑脊液葡萄糖含量，但不
能直接测定尿酸葡萄糖含量。（因为尿液中等等尿酸等干扰性物
质浓度过高，可干扰过氧化物酶反应，而造成结果假性偏低。）
9
操作步骤
先取3支试管，然后按表格操作
试剂/mL 血清 葡萄糖标准液 蒸馏水 酶酚混合试剂
空白管 -----
0.020 3.00
标准管 ---
0.020 --3.00
测定管 0.020
----3.00
混匀，置于37℃水浴中，保温25min，在波长510nm处比色， 以空白管调零，读取标准管及测定管的吸管度
以脱氢酶作指示酶系统： （略）
实验原理
葡萄糖氧化酶（GOD）
葡萄糖
O2
H2O
葡萄糖 酸Байду номын сангаас
7
2 H2O2
过氧化物酶（POD）
红色醌类化合物
4-氨基安替比林
H2O2氧化色素原
苯酚
8
实验器材与试剂
器材： 5mL移液管，微量可调式移液器，721E分光光度计，37℃恒温水浴。
试剂： 1、0.1mol/L磷酸盐缓冲液（pH7.0） 2、酶试剂 4℃保存 3、酚溶液 用棕色瓶贮存 4、酶酚混合试剂 酶试剂与酚溶液等量混合 5、苯甲酸钠溶液（12mmol/L） 6、葡萄糖标准储存液（100mmol/L） 7、葡萄糖标准工作液（5mmol/L）
• 2、血液样品需及时分离血细胞。（因为红细胞的酵解将导致测
血清中葡萄糖含量检测的方法研究进展
光学法检测以方便、无痛、高速、高精度成为最具有前景 的检测手段。 光学检测法包括光声光谱法、拉曼光谱法、荧光 法、近红外光谱法等。 这些方法主要利用近红外激光脉冲与 组织的相互作用，使检测器检测出光声信号，光声信号的幅 度与吸收系数之间的关系，检测出组织内部的血糖含量。 但 还是需要降低其他物质的干扰， 以及提高重复性和灵敏度。 且还需考虑人体组织的复杂性、个体差异等问题。
［责任编辑：王迎迎］
308 科技视界 SCIENCE & TECHNOLOGY VISION
血清中葡萄糖是人体内各组织细胞活动所需的物质。 人 体内的血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组 织的需要。 正常人在空腹血糖浓度为 3.9～6.0mmol/L。 空腹血糖 浓度超过 6.0mmol/L 称为高血糖而血糖浓度低于 3.9mmol/L 称 为低血糖。 血清中葡萄糖是临床生化检验中的重要指标，可 以为糖尿病、高血压以及心脑血管系统等疾病的诊断、治疗 用药、病情监测以及疾病预防等方面提供客观依据。 因此，对 其进行准确的测定具有极其重要的意义。
葡 萄 糖 氧 化 酶(glucose oxidase，GOD)将 葡 萄 糖 氧 化 成 葡 萄糖酸，同时释放过氧化氢。 过氧 化 物 酶(peroxidase，POD)在 色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性 氧受体 4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即 Trinder 反 应 。 红 色 醌 类 化 合 物 的 生 成 量 与 葡 萄 糖 含 量 成 正 比。 通过测定吸光度就能计算出血液中葡萄糖的含量。
非 光 学 检 测 法 大 多 使 用 将 葡 萄 糖 在 GOD 催 化 下 生 成 H2O2，H2O2 在过氧化物酶催化下降还原态电介质 Os2+，氧化成 Os3+，而 Os3+在 较 低 工 作 电 压 下 呗 还 原 ，产 生 还 原 电 流 与 被 测 葡萄糖浓度成线性关系，通过检测还原电流即可得出葡萄糖 浓度。 根据研究报道显示，选取适当的电极材料，使用该法有 成本低、灵敏度高、稳定性较好等方面的优点，有很好的应用 前景。
godpod法测血糖实验报告
godpod法测血糖实验报告一、实验目的本实验旨在探究 godpod 法在血糖检测中的准确性、可靠性以及操作便利性，为临床血糖监测和糖尿病患者的自我管理提供有效的检测方法参考。
二、实验原理Godpod 法是一种基于葡萄糖氧化酶（GOD）和过氧化物酶（POD）的酶促反应来测定血糖浓度的方法。
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的催化下与显色剂发生反应，生成有颜色的化合物，通过比色测定吸光度，从而计算出血糖浓度。
三、实验材料与设备1、血糖仪及配套的 godpod 法血糖测试条。
2、采血针。
3、消毒棉片。
4、标准葡萄糖溶液（不同浓度）。
5、移液器及配套枪头。
6、离心机。
7、分光光度计。
四、实验方法1、血糖仪校准使用血糖仪配套的校准液对血糖仪进行校准，确保血糖仪的准确性。
2、样本采集选取健康志愿者和糖尿病患者作为研究对象。
使用采血针在手指末梢采集血液样本，将血液滴在血糖测试条上，按照血糖仪的操作说明进行检测，记录血糖值。
3、标准曲线绘制配制不同浓度的标准葡萄糖溶液，使用分光光度计在特定波长下测定吸光度，绘制标准曲线。
4、准确性验证将采集的血液样本离心分离出血浆，使用实验室生化分析仪测定血糖浓度作为参考值，与 godpod 法血糖仪测定的血糖值进行比较，计算偏差。
5、重复性实验对同一血液样本进行多次 godpod 法测定，计算测定结果的变异系数，评估方法的重复性。
6、干扰实验在血液样本中加入常见的干扰物质，如维生素 C、胆红素、甘油三酯等，测定血糖浓度，观察干扰物质对 godpod 法测定结果的影响。
五、实验结果1、血糖仪校准结果血糖仪校准成功，显示值与校准液的标准值相符。
2、样本采集情况共采集了健康志愿者 20 例和糖尿病患者 30 例的血液样本，样本采集过程顺利，无明显不良反应。
3、标准曲线绘制的标准曲线线性良好，相关系数 R²达到 099 以上。
4、准确性验证与实验室生化分析仪测定的参考值相比，godpod 法血糖仪测定的血糖值偏差在允许范围内，平均偏差为具体偏差值%。
葡萄糖测定标准操作规程
葡萄糖测定标准操作规程1.检验原理：（葡萄糖氧化酶法）葡萄糖氧化酶（GOD ）利用氧和水将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，并释放出过氧化氢。
过氧化物酶（POD ）在色原性氧受体4-氨基安替比啉（4-AA ）和对羟基苯甲酸钠去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder 反应。
红色醌类化合物的生成量成正比。
D-葡萄糖+2O +O H 2−−→−GOD 葡萄糖酸+22O H222O H +4-AA+对羟基苯甲酸钠−−→−POD 红色醌类物质+4O H 2 2.试剂组成成分3.样本要求：新鲜无溶血血清或用草酸钾-氟化钠抗凝的血浆。
在22～25℃保存8小时，2～8℃保48小时，-20℃保存7天，样本不可反复冻融！4.检验方法：仪器法（详见DF-603/DI-600标准操作规程）5.参考范围：6.检验结果的解释：6.1在给定的样本/试剂比例和条件测定时，本试剂线性范围可达25mmol/L。
样本含量超出线性范围时，建议用0.9%（W/V）的氯化钠溶液稀释样本，最大稀释倍数为10.6.2.单位换算：mg/dl=mmol/L×187.检验方法的局限性7.1结果的准确性依赖于仪器的校正和测定温度、时间的控制。
7.2若试剂浑浊或以水空白在500nm处吸光度大于0.200时不能使用。
8.试剂性能指标8.1试剂外观：R1：无色或淡红色透明液体，无悬浮物及沉淀；R2无色透明液体，无悬浮物及沉淀。
8.2装量：不低于标识值。
8.3空白吸光度：在500nm处，光径1cm时，空白吸光度A≤0.2008.4线性范围：试剂的线性区间为[2.2-25]mmol/L，在此线性区间内：a）线性相关系数r应不小于0.9900；b)[2.2-4.7]mmol/L区间内，线性绝对偏差不超过±10U/L；（4.7-25）mmol/L区间内，线性相对偏差不超过±10%。
8.5准确度：使用参考物质测定时，当浓度≤4.16mmol/L，实测值与标识值偏差应不超过±0.833mmol/L，当浓度＞4.16mmol/L，实测值与标识值偏差应在±20%范围内。
实验三 GOD-POD法测定葡萄糖的回收和干扰试验1
4、消除干扰的方法有
1）空白对照 包括试剂空白和标本空白。 2）物理、化学方法去除干扰（可能会引入新的干扰） 3）只使用对干扰物的敏感度不高的方法。如：己糖激酶法 测定GLU，酶法测定肌酐等 4）以两点法或双波长法消除部分干扰，可以设计双试剂法 消除内源性干扰
2．纯标准品溶液的加入体积不得超过血清样 品的10%，避免将血清稀释过度，引起误差 的改变。
3．准确加量是最主要的技术关键。
注意事项(干扰试验)
1、加入可疑干扰物的浓度应明显高于通常所 见浓度的上限，有可能时应达到病理标本 的最高值。
2、凡可疑干扰物都应做，这里仅是举例示范。 3、适当增加测定次数以减少实验的随机误差。
样本测定
37 ℃水浴，10分钟，500nm比色。
结果计算-回收率
加入浓度= 标准液浓度* 标准液量ml 血清量(ml) 标准液量(ml) 生理盐水量(ml)
回收浓度 = 分析样品测得浓度 – 基础样品测得浓度
回收率（%）=
回收浓度 加入浓度
100％
一般要求回收率95-105%
干扰值计算
试剂与器材
1、试剂组成：R1：苯酚10mmol/L，POD>1000U/L，抗VIC氧化 酶； R2： GOD>1600U/L, 4-AAP2mmol/L
2、试剂包装：R1及R2，标准液浓度5.55 mmol/L 3、工作试剂配制：本试剂盒为液态双试剂，加双试剂的仪器
可直接应用，试剂更稳定，加单一试剂的仪器临用时缓冲 液和酶溶液以R1：R2=3:1的比例混合。
干扰物加入浓度= 干扰物浓度*
干扰物溶液量 ml
血清量 (ml ) 干扰物溶液量 (ml ) 生理盐水量(ml )
干扰值＝加入干扰物后的测定值－基础测定值
生物化学：葡萄糖测定(酶法)
葡萄糖氧化酶法
1
【实验要求】
1. 掌 握 掌 握 血 糖 测 定 葡 萄 糖 氧 化 酶 法 （ GODPOD法）的原理，操作方法 2.熟悉葡萄糖测定的临床意义； 3.巩固分光光度计的使用。
2
【实验原理】
葡萄糖氧化酶（GOD）催化葡萄糖氧化成葡萄糖 酸，并产生过氧化氢。在过氧化氢酶（POD）及色原性 受体4-氨基安替比林（4-AAP）的存在下，过氧化氢释 放氧使色素原氧化生成红色醌类化合物。醌的生成量与 葡萄糖成正比，在波长520nm处比色，求得葡萄糖含量。
7
【临床意义】
3.生理性或暂时性低血糖 见于饥饿、剧烈运动、注射胰岛 素后、妊娠和服用降糖药后。 4.病理性低血糖 见于(1)胰岛β细胞增生瘤等，使胰岛素分 泌过多；(2)对抗胰岛素的激素分泌不足，如垂体前叶功能 减退，肾上腺皮质功能减退和甲状腺功能减退而使生长素、 肾上腺皮质激素分泌减小；(3)严重肝病患者，由于肝脏储 存糖原及糖异生等功能低下，肝脏不能有效地调节血糖。
8
【注意事项】
1、注意准确的加入所需要的液体量。 2、注意胆红素、谷胱甘肽、尿酸和维生素C等一些还 原性物质将使结果受到干扰。
9
【打扫卫生】
1、实验结束后对自己用过的试管、移液管等物 品进行清洗。 2、打扫桌面与地面卫生。 3、带齐本人物品，离开实验室。
10
谢 谢！
11
【计算】
血清葡萄糖（mmol/L）＝ Au Cs As
Au:测定管吸光度 As:标准管吸光度 Cs:标准管浓度
5
【参考范围】
血清葡萄糖：3.89～6.11 mmol/L
6
【临床意义】
1.生理性高血糖 见于饭后1～2h，注射葡萄糖或摄入高糖 食物后、情绪紧张肾上腺素分泌增加时，但不应超过 10mmol/L。 2.病理性高血糖 见于(1)内分泌腺功能障碍能引起高血糖， 如胰腺β细胞损害导致胰岛素分泌缺乏，血糖可超过正常， 临床上称为糖尿病。其他内分泌疾病引起的各种对抗胰岛 素的激素分泌增加也会出现高血糖；(2)颅内压增高：颅内 压增高刺激血糖中枢，如颅外伤、颅内出血、脑膜炎等； (3)由于脱水引起的高血糖：如呕吐、腹泻和高热等可使血 糖轻度增高。
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)
②充分混匀，水浴中孵育。 ③分光光度计测定 505nm 波长处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。
3、 分光光度计(1ml 比色杯)、半自动生化分析仪 Glu 测定操作:
①按下表依次加入试剂：
空白管
标准管
待测管
ddH2O(μl) Glu 标准(5mmol/L)(μl)
10 10
待测样本(μl)
注意事项：
1、 上述低温试剂避免反复冻融，以免失效或效率下降。
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2、 本法可直接用于检测脑脊液中的葡萄糖含量，但丌能直接检测尿液中的葡萄糖含量， 因为未经处理的尿液中含有还原性物质，影响过氧化物酶反应。
3、 待测样本如丌能及时测定，应置于 2~8℃保存，3 天内稳定。 4、 本法线性范围可达 25mmol/L，如果样本葡萄糖浓度过高，结果可能呈假性降低。应
3
3
3
300
300
300
②充分混匀，水浴中孵育。 ③酶标仪测定 505nm 波长处吸光度。以空白管调零，读取标准管和各待测管的吸光度。 5、 全自动生化分析仪 Glu 测定操作: ①按下表依次加入试剂：
空白管
标准管
待测管
ddH2O(μl) Glu 标准(5mmol/L)(μl)
3 3
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试剂(C): Glu 标准(5mmol/L)
1ml
1ml
-20℃
试剂(D): ddH2O
1ml
1ml
RT
使用说明书
1份
操作步骤(仅供参考)：
1、 样本处理： ①血清、血浆、脑脊液 样本：从待测样本 中分理出的血清 或血浆丌应有溶 血，直接检测， 如超过线性范围(25mmol/L)，用生理盐水稀释后检测。 ②细胞样本： a、取适量的细胞(一般推荐>106 以上)，1000g 离心 10min，弃上清，留取沉淀。 b、用 PBS 或生理盐水清洗 1~2 次，1000g 离心 10min，弃上清，留取沉淀。 c、加入 200~300μl 的 PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率 300W，每 次 3~5s，间隔 30s，重复 3~5 次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液丌可离心，待用。 d、③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或 PBS(ml)=1：9 的比例， 加入生理盐水或 PBS，冰浴条件下手动或机械匀浆。离心，取上清待用。
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)简介：葡萄糖(Glucose, Dextrose，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C6H12O6，分子量为180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛。
用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法，最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。
上述酶学法特点是：1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适用于自动分析仪。
Leagene葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD微板法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法等，其检测原理是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同时消耗溶液中的氧，产生过氧化氢，过氧化氢与氧化色原物质反应生成有色化合物，初始反应中过氧化氢的生成量与葡萄糖浓度成正比，酶标仪进行比色测定。
本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定，但不宜直接检测尿液中的葡萄糖含量，其中Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、生理盐水或PBS2、96孔板或离心管、小试管3、水浴锅或恒温箱4、酶标仪或分光光度计5、全自动或半自动生化分析仪操作步骤(仅供参考)：编号名称TC0711200TTC0711500TStorage试剂(A): 酚试剂30ml75ml RT 避光试剂(B): 酶试剂磷酸盐缓冲液(pH7.0)30ml75ml -20℃避光4-氨基安替比林葡萄糖氧化酶过氧化物酶临用前，按酚试剂：酶试剂混匀，即GOD-POD工作液，4℃保存。
试剂(C): Glu标准(5mmol/L) 1ml1ml -20℃试剂(D): ddH2O 1ml1ml RT 使用说明书1份1、样本处理：①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围(25mmol/L)，用生理盐水稀释后检测。
实验四 葡萄糖的测定
实验四葡萄糖的测定（POD-GOP法）一．实验目的1. 掌握葡萄糖氧化酶—过氧化物酶法测定血糖；2. 学习使用分光光度计；3. 学习微量移液器的使用二．实验原理葡萄糖氧化酶(GOD)葡萄糖+O2 葡萄糖酸+ H2O2过氧化物酶(POD)H2O2 + 酚+ 4-氨基安替比林醌+ H2O+O2红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比，在505nm有吸收峰三．试剂1. 试剂1：磷酸盐缓冲液70mmol/L酚10.6mmol/L pH 7.02. 试剂2：磷酸盐缓冲液70mmol/L4-氨基安替比林0.8mmol/L葡萄糖氧化酶>10U/ml过氧化物酶> 1U/ml pH 7.03. 标准葡萄糖溶液 5.55mmol/L4. 兔子血清四．操作步骤1.配制工作液：取等量试剂1和试剂2混合均匀2.按下表加入有关试剂3. 充分混匀，置于37℃水浴15分钟，显色后，在波长505nm处，以空白调零，读取标准管和样品管的吸光值A4. 实验结果计算：葡萄糖（mmol/L）=[样品管吸光度（A样）/标准管的吸光度（A标）]×标准液浓度五．实验数据及结果1.数据记录2.计算结果葡萄糖=0.489/0.237*5.55mmol/L=11.45mmol/L=206.35mg/dl思考题哪些方法可增加血糖测定的准确性？答：1.增加测定的重复次数2.加样的准确，如在使用微量移液器量取液体时要称量准确，向试管中加液的顺序要正确3.可根据所得数据绘制标准曲线，并通过标准曲线求出浓度4.在使用分光光度计时注意操作准确以上的这些方法都可以增加血糖测量的准确性。
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)
葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)简介：葡萄糖(Glucose, Dextrose，Glu)又称玉米葡糖，简称葡糖，化学式C6H12O6，分子量为180.16，是自然界分布最广、最重要的一种单糖，属于多羟基醛。
用酶学方法测定葡萄糖是生化检测中的常用方法，最常用的有葡萄糖氧化酶法、己糖激酶法。
上述酶学法特点是：1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适用于自动分析仪。
Leagene葡萄糖检测试剂盒(GOD-POD比色法)又称葡萄糖氧化酶法或葡萄糖氧化酶-过氧化物酶偶联法等，其检测原理是在葡萄糖氧化酶的催化下，葡萄糖被氧化成葡萄糖酸，同时消耗溶液中的氧，产生过氧化氢，过氧化氢与氧化色原物质反应生成有色化合物，初始反应中过氧化氢的生成量与葡萄糖浓度成正比，分光光度计进行比色测定。
本试剂盒专门用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的葡萄糖含量定量测定，但不宜直接检测尿液中的葡萄糖含量，其中Glu标准(5mmol/L)=90mg/dl。
本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、生理盐水或PBS2、离心管、小试管或96孔板3、水浴锅或恒温箱4、分光光度计或酶标仪5、全自动或半自动生化分析仪操作步骤(仅供参考)：编号名称TC0713100TTC0713200TStorage试剂(A): 酚试剂50ml2×50ml RT 避光试剂(B): 酶试剂磷酸盐缓冲液(pH7.0)50ml2×50ml -20℃避光4-氨基安替比林葡萄糖氧化酶过氧化物酶临用前，按酚试剂：酶试剂混匀，即GOD-POD工作液，4℃保存。
试剂(C): Glu标准(5mmol/L) 1ml2×1ml -20℃试剂(D): ddH2O 1ml2ml RT 使用说明书1份1、样本处理：①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围(25mmol/L)，用生理盐水稀释后检测。
godpod法测血糖实验报告
godpod法测血糖实验报告一、实验目的本次实验旨在探究 godpod 法在血糖检测中的准确性、可靠性以及操作的便捷性，为临床血糖监测和糖尿病的诊断与管理提供参考依据。
二、实验原理Godpod 法是一种基于葡萄糖氧化酶（GOD）和过氧化物酶（POD）的酶促反应来测定血糖浓度的方法。
葡萄糖在葡萄糖氧化酶的作用下生成葡萄糖酸和过氧化氢，过氧化氢在过氧化物酶的作用下与显色剂发生反应，产生可测量的颜色变化，通过比色法测定吸光度，进而计算出血糖浓度。
三、实验材料与设备1、实验试剂葡萄糖标准液（浓度分别为 28mmol/L、61mmol/L、111mmol/L）葡萄糖氧化酶试剂过氧化物酶试剂显色剂2、实验仪器分光光度计移液器恒温箱离心机试管、刻度吸管等四、实验步骤1、样本采集采集空腹静脉血 3ml，注入含有抗凝剂的试管中，轻轻混匀。
以 3000r/min 离心 10 分钟，分离血浆备用。
2、标准曲线绘制分别取不同浓度的葡萄糖标准液 01ml，加入到试管中，然后加入30ml 葡萄糖氧化酶试剂和 03ml 过氧化物酶试剂，充分混匀。
将试管置于 37℃恒温箱中孵育 15 分钟。
取出试管，在分光光度计上于 505nm 波长处，以空白管调零，测定各标准管的吸光度。
以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3、样本测定取01ml 待测血浆样本，按照与标准曲线绘制相同的步骤进行操作，测定吸光度。
4、计算结果根据样本的吸光度，在标准曲线上查出对应的葡萄糖浓度。
五、实验结果1、标准曲线绘制的标准曲线呈现良好的线性关系，相关系数 r 为 0998。
2、样本测定结果对 10 份血浆样本进行测定，结果如下（单位：mmol/L）：｜样本编号|测定值|｜｜｜｜1|52|｜2|68|｜3|49|｜4|75|｜5|58|｜6|82|｜7|46|｜8|63|｜9|71|｜10|55|六、结果分析1、准确性将测定结果与已知的血糖参考值进行比较，发现大部分样本的测定值与参考值偏差在允许范围内，表明 godpod 法具有较高的准确性。
血清葡萄糖的测定GODPOD法
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实验试剂
12mmol苯甲酸钠溶液 称取苯甲酸钠1.6g，于800ml蒸馏水中加温助溶，冷却后加蒸馏水定容 至1L。 葡萄糖标准储存液（100mmol/L） 称取已干燥至恒重的无水葡萄糖1.082g，溶入约70ml 12mmol/L苯甲酸 钠溶液中定容至100ml。2h以后方可使用。 葡萄糖标准工作液（5mmol/L） 吸取葡萄糖标准储存液5.00ml，置入100ml容量瓶中，用12mmol/L，苯 甲酸钠溶液稀释至刻度，混匀。
3. 严重黄疸，溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液， 然后在进行测定。
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临床意义
生理性高血糖：可见于摄入高糖食物后，或紧张情绪肾上腺素分泌增加时。
病理学高血糖：1.糖尿病:病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患 者。2.内分泌腺功能障碍：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质功能及髓质功能亢进， 引起各种对抗胰岛素的激素分泌过多，或升高血糖的激素增多引起的高血糖，现 已归入特异性糖尿病中。3.颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤，颅内出血，脑 膜炎等，引起血糖增高。4.脱水引起的高血糖：如呕吐，腹泻和高热等也可使血 糖轻度增高。
葡萄糖
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GOD
POD 红色醌类化合物
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实验试剂
器材
5ml移液管，50或100ul微量可调式移液管,721E型分光光度计，1比色皿， 37度恒温水 浴锅。
试剂
0.1磷酸盐缓冲液（Ph=7.0） 称取无水磷酸二氢钾5.3g，溶于蒸馏水800ml中，调节pH=7.0,定容至1L 酶试剂 取过氧化物酶1200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮化钠100mg，溶入磷酸 盐缓冲液80ml中，调节pH值至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置于4度 保存，可稳定存在3个月。 酚溶液 称取重蒸馏酚100mg，溶入蒸馏水100ml中，用棕色瓶储存。 酶-酚混合试剂 将酶试剂及酚溶液等量混合，4度可放一个月。
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实验操作
试剂 血清/μL 葡萄糖标准液/μL 蒸馏水/μL 酶酚混合试剂/μL
空白管 -
0.02 3.00
标准管 -
0.02 -
3.00
测定管 0.02 3.00
混匀，置于37°C水浴中，保温25min，在波长510nm处比色，以空白管 调零，读取标准管和测定管的吸光度。
血清葡萄糖的含量=
血清葡萄糖的测定（GOD-POD法）
血清测定是临床生物化学检验中的常规检测项目之一。
实验分为以下部分
• 实验目的 • 实验原理 • 实验试剂 • 实验操作 • 数据分析 • 注意事项 • 临床意义
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实验目的
掌握酶法血清葡萄糖浓度的原理 掌握血糖变化的临床意义
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葡萄糖
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GOD
POD 红色醌类化合物
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实验试剂
器材
5ml移液管，50或100ul微量可调式移液管,721E型分光光度计，1比色皿， 37度恒温水 浴锅。
试剂
0.1磷酸盐缓冲液（Ph=7.0） 称取无水磷酸二氢钾5.3g，溶于蒸馏水800ml中，调节pH=7.0,定容至1L 酶试剂 取过氧化物酶1200U，4-氨基安替比林10mg，叠氮化钠100mg，溶入磷酸 盐缓冲液80ml中，调节pH值至7.0，用磷酸盐缓冲液定容至100ml，置于4度 保存，可稳定存在3个月。 酚溶液 称取重蒸馏酚100mg，溶入蒸馏水100ml中，用棕色瓶储存。 酶-酚混合试剂 将酶试剂及酚溶液等量混合，4度可放一个月。
ⅹ5mmol/dL
参考值：3.89-6.11mmol/L
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注意事项
1. 葡萄糖氧化酶法可直接用于测定脑脊液葡萄糖含量，但 不能直接测定尿液葡萄糖含量。因为尿液中尿酸等干扰 性物质浓度过高，可干扰氧化酶反应，造成结果假性偏 低。
2. 因红细胞的酵解将导致测定结果偏低，建议测定样品以 草酸钾-氟化钠为抗凝剂以抑制糖酵解。
实验原理
血清葡萄糖是用以过氧化物酶的偶联酶反应定量法测定的。 葡萄糖氧化酶（GOD）利用氧将葡萄糖氧化为葡萄糖酸，同时释放过氧 化氢。过氧化物酶（POD）催化过氧化氢氧化色素原（如4-氨基安替比 林和苯酚），并使色素原氧化成色素，即Trinder反应。红色醌类化合物 的生成量与葡萄糖的含量成正比。
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202取苯甲酸钠1.6g，于800ml蒸馏水中加温助溶，冷却后加蒸馏水定容 至1L。 葡萄糖标准储存液（100mmol/L） 称取已干燥至恒重的无水葡萄糖1.082g，溶入约70ml 12mmol/L苯甲酸 钠溶液中定容至100ml。2h以后方可使用。 葡萄糖标准工作液（5mmol/L） 吸取葡萄糖标准储存液5.00ml，置入100ml容量瓶中，用12mmol/L，苯 甲酸钠溶液稀释至刻度，混匀。
3. 严重黄疸，溶血及乳糜样血清应先制备无蛋白血滤液， 然后在进行测定。
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临床意义
生理性高血糖：可见于摄入高糖食物后，或紧张情绪肾上腺素分泌增加时。
病理学高血糖：1.糖尿病:病理性高血糖常见于胰岛素绝对或相对不足的糖尿病患 者。2.内分泌腺功能障碍：甲状腺功能亢进，肾上腺皮质功能及髓质功能亢进， 引起各种对抗胰岛素的激素分泌过多，或升高血糖的激素增多引起的高血糖，现 已归入特异性糖尿病中。3.颅内压增高刺激血糖中枢，如颅外伤，颅内出血，脑 膜炎等，引起血糖增高。4.脱水引起的高血糖：如呕吐，腹泻和高热等也可使血 糖轻度增高。
生理性低血糖：见于饥饿和剧烈运动时
病理性低血糖：特发性功能性低血糖最多见，依次是药源性，肝源性和胰岛素瘤 等。
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