血清葡萄糖GLU己糖激酶HK法测定法
检测方法对HK法血清葡萄糖测定结果的影响
[ J] . 上海医学检验杂志, 2003, 18( 3) : 167-169. ( 收稿日期: 2004-10-30)
三种方法检查阴道霉菌的比较
杨 丽
( 西安一四一医院, 陕西 西安 710089)
参考文献: [ 1] 陈文列, 陈金富, 钟秀容, 等. 阴道毛滴虫粘附、吞噬宿主细胞的超
微结构研究[ J] . 福建医药杂志, 1997, 19: 176. [ 2] A lderet e J F, Garza GE . Specif ic nat ure of Trichomonas vaginal is
[ 关键词] 阴道分泌物; 霉菌; 亚甲蓝 [ 中图分类号] R711. 31 [ 文献标识码] B [ 文章编号] 1671-5098( 2005) 1A-0047-02
阴道 分泌物的实 验室检查 是诊断霉菌 性阴道炎 的常用方
法, 我室采用 常规盐水 法、N aO H 法 和亚甲蓝 溶液法 对 280 例 妇科阴道分泌物进行检查, 结果分析如下。 1 材料与方法 1. 1 标本来源 本院妇科门诊疑诊阴道炎病人的阴道分泌物 标本 280 份。 1. 2 试剂 生理盐水, 10 g/ L N aO H 溶液 1 g / L 亚甲蓝溶液, 50 g / L Na OH 溶液。 1. 3 方法 1. 3. 1 常规盐 水法 取阴道分泌物, 以生理盐水稀释, 涂片镜 检。
( 收稿日期: 2004-10-10)
检测方法对 HK 法血清葡萄糖测定结果的影响
马中伟
( 溧阳市中医医院, 江苏 溧阳 213300)
[ 摘 要] 目的: 探讨己糖激酶( HK ) 法血清葡萄糖测定中, 检测方法 对克服溶血、脂浊、黄疸的干扰。方法: 用 HK 法血糖双试剂, 一点终点法、二点终点法、速率法, 在日立 7060 生化分析仪上测定 溶血、脂浊、黄疸血 清及其对照 血清 的葡萄糖。结果: 两点终点法干扰误差< 4 % , 较一点终点法、速率法小, 结果优于该两法。
血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法
血清葡萄糖测定方法是一种常用的检测血清葡萄糖的方法。
它可以检测血清中的水溶性葡萄糖的含量，从而可以反映机体的糖代谢情况。
血清葡萄糖测定方法有多种，其中最常用的是酶联免疫法（ELISA）和磷酸二氢钾滴定法（HK）。
2、酶联免疫法（ELISA）
酶联免疫法（ELISA）是一种常用的血清葡萄糖测定方法。
ELISA技术利用免疫反应原理，把糖尿病患者血清中的葡萄糖水解酶以抗原或抗体的形式结合起来，然后用抗体识别，经过可见性染料和酶的底物分解，用放大效应得到明显的反应信号，通过测量信号来确定葡萄糖的浓度。
ELISA对葡萄糖的检测灵敏度很高，但是分析时间比较长，且需要有特殊的仪器。
3、磷酸二氢钾滴定法（HK）
磷酸二氢钾滴定法（HK）是另一种检测血清葡萄糖浓度的常用方法。
它是一种血清中葡萄糖的滴定法，用40-50℃的磷酸二氢钾溶液作为比色剂，通过比色分析得到血清中的葡萄糖含量。
这种方法分析速度快，结果准确，但是需要较高的技术要求。
4、结论
血清葡萄糖测定方法是一种常用的检测血清葡萄糖的方法，它可以准确反映机体的糖代谢状况。
目前最常用的血清葡萄糖测定方法有酶联免疫法（ELISA）和磷酸二氢钾滴定法（HK），它们具有自己的优缺点，根据实际情况选择合适的方法。
01 GLU-HK
复星长征体外诊断试剂标准操作规程试剂名称：葡萄糖测定试剂盒（己糖激酶法）上海复星长征医学科学有限公司目录1 试剂盒概况2 方法学原理3 试剂主要组分4 样本准备5 试剂准备6 校准要求7 质量控制8 计算方法9 参数设定10 参考范围11 试剂性能概要12 超出可报告范围的处理13 其他必须说明的内容14 参考文献1 试剂盒概况1．1 货号：1.02.0702/1.02.0704/1.02.0801。
1．2 包装规格：试剂1（R1）：4×50ml ；试剂2（R2）：2×50ml试剂1（R1）：4×50ml ；试剂2（R2）：4×25ml 试剂1（R1）：2×250 测试；试剂2（R2）：1×500 测试1．3 产品注册证号：沪食药监械（准）字2014第2401267号 1．4 产品标准号：YZB/沪 2727-40-2014 1．5 版本号：2014－1 2 方法学原理本试剂所采用的反应式如下：+--+++-−−−→−+--+--−→−+HNADH PG NAD ADPATP PDHG HK 6666磷酸葡萄糖磷酸葡糖糖葡萄糖式中：ATP 为三磷酸腺苷；ADP 为二磷酸腺苷；HK 为己糖激酶；G-6-PDH 为葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；6-PG 为6-磷酸葡萄糖酸上述反应中，NADH 的生成量与样本中葡萄糖的浓度成正比，通过在340nm 处测定吸光度的变化值，即可测得样本中葡萄糖的浓度。
3 试剂主要组分 3．1 试剂1（R1）三磷酸腺苷0.75mmol/L葡萄糖-6-磷酸脱氢酶375U/LNAD15mmol/L哌嗪-N,N ’-双（2-乙磺酸）缓冲液 50 mmol/L 3．2 试剂2（R2）己糖激酶60KU/L哌嗪-N,N’-双（2-乙磺酸）缓冲液50 mmol/L3．3 储存条件3．3 . 1 在2～8℃避光、密封的储存条件下，试剂盒自生产之日起效期12个月。
葡萄糖氧化酶法(GOD-POD)试剂盒与己糖激酶法(HK)试剂盒测定血糖比较
葡萄糖氧化酶法（GOD-POD）试剂盒与己糖激酶法（HK）试剂盒测定血糖比较摘要:通过对本实验室常规使用的己糖激酶法试剂盒的比较，分析葡萄糖氧化酶法试剂盒检测血糖的可靠性和应用性。
对本实验室使用的血糖测定参考方法HK法试剂盒与GOD-POD法试剂盒从重复性、试剂稳定性、特异性等方面进行比较。
结果显示GOD-POD法在重复性、试剂稳定性等方面均能满足一般实验室要求，且与HK法相关性良好。
关键词：GOD-POD、HK、血糖测定、方法比较1 引言。
血糖测定是诊断糖尿病的重要依据，血糖的准确测定对诊断和处理高血糖和低血糖症十分重要测定方法主要有化学法和酶法，而酶法有分为葡萄糖氧化酶与过氧化物酶偶联的的GOD-POD法及己糖激酶与葡萄糖-6-磷酸脱氢酶偶联的HK 法。
酶法中的GOD-POD法，因具有操作简单，无毒、无害，试剂已商品化、易于质控、价格低等优点，现已广泛用于临床。
为此，将GOD-POD法与血糖参考方法HK法从重复性、试剂稳定性、特异性及两种方法的相关性方面作比较，现报告如下：2 材料与方法2.1仪器与试剂己糖激酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号：20110310葡萄糖氧化酶试剂盒四川迈克生物科技有限公司批号：20110310胆红素校准品（430 umol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101120血糖中值质控品（4.80 mmol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101008血糖高值质控品（11.20mmol/l）四川迈克生物科技有限公司批号：20101008日立-7180全自动生化分析仪2.2方法按试剂盒使用说明设置参数和操作。
2.2.1重复性试验取两个血糖浓度的定值质控血清用两种方法分别平行测20次，计算批内误差。
另取两个血糖浓度同一批号定值质控血清用两种方法每天各做两次，累计20个结果，计算天间误差。
2.2.2回收试验取若干健康体检人群血清混合，分装，按9:1的比例分别加入浓度为4.80 mmol/L和11.20 mmol/l的糖标准溶液，用两种方法分别测定，每种方法的每一浓度平行测定三次，分别计算回收率。
葡萄糖试剂盒(己糖激酶法)标准操作程序
葡萄糖试剂盒（己糖激酶法）标准操作程序1. 摘要本试剂盒供医疗机构用于体外定量测定人血清或血浆中葡萄糖的含量。
2. 适用范围程序适用于日立7600自动生化分析仪检测血清或血浆中葡萄糖的含量。
3. 职责使用日立7600自动生化分析仪进行测定葡萄糖浓度的工作人员要严格按照本SOP 程序进行，室负责人监督管理；本SOP 的改动，可由任一使用本SOP 的工作人员提出，并报经生化室负责人、科主任签字批准生效。
4. 检测方法上海科华生物工程股份有限公司生产的葡萄糖试剂盒采用的是己糖激酶法(HK)。
5. 原理葡萄糖在三磷酸腺苷（ATP ）和镁离子存在下被已糖激酶（HK ）磷酸化，产生葡萄糖-6-磷酸（G-6-P ）和二磷酸腺苷（ADP ）。
葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G-6-PDH ）使G-6-P 氧化为6-磷酸葡萄糖，同时使烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）还原为烟酰胺腺嘌呤二核苷酸还原型（NADH ）。
在340/380nm 的吸光度变化与标本中存在的葡萄糖数量成正比。
+++−−−→−+--+--−→−+HNADH ADP P G ADPP G ATP PDH G HK磷酸葡萄糖葡萄糖-66666. 仪器日立7600自动生化分析仪 7. 试剂7.1 试剂来源：上海科华生物工程股份有限公司提供 7.2 试剂瓶内主要成分：R1：Good ’s 缓冲液、G-6-PDH 、ATP ； R2：Good ’s 缓冲液、HK 、NAD +； 校准品：葡萄糖7.3 试剂稳定性：试剂于2℃-8℃避光保存，有效期为一年。
开瓶后存放在生化分析仪试剂仓中可稳定7天。
8.标准品和质量控制8.1校准程序：使用某某公司的校准品对自动分析仪进行校准。
按照公司标准品使用要求，并以9g/L氯化钠溶液或去离子水为空白，经校准测定，仪器自动对标准品通过合适的数学模型绘制校准曲线。
8.2质控品：某某公司提供的生化复合定值质控血清作为室内质控品。
每日在测定前做一次质控。
血清中葡萄糖含量检测的方法研究进展
血清中葡萄糖含量检测的方法研究进展【摘要】血清葡萄糖含量是临床生化检验中重要的指标，其的准确测定对糖尿病等疾病的诊断、治疗都有重大意义。
本文介绍了近几年血清中葡萄糖含量检测的主要方法以及这些方法的一些研究结果。
【关键词】血清；葡萄糖；检测方法血清中葡萄糖是人体内各组织细胞活动所需的物质。
人体内的血糖必须保持一定的水平才能维持体内各器官和组织的需要。
正常人在空腹血糖浓度为3.9～6.0mmol/L。
空腹血糖浓度超过6.0mmol/L称为高血糖而血糖浓度低于3.9mmol/L 称为低血糖。
血清中葡萄糖是临床生化检验中的重要指标，可以为糖尿病、高血压以及心脑血管系统等疾病的诊断、治疗用药、病情监测以及疾病预防等方面提供客观依据。
因此，对其进行准确的测定具有极其重要的意义。
1血清中葡萄糖的主要检测方法目前，血清中葡萄糖的检测方法主要有：葡萄糖氧化酶（GOD-POD）法、己糖激酶法（HK法）、葡萄糖脱氢酶法（GDH法）、气相色谱-同位素稀释质谱法（GC-IDMS法）以及无创血糖测量法等。
下面就对以上方法进行简要的介绍。
1.1葡萄糖氧化酶（GOD-POD）法葡萄糖氧化酶(glucose oxidase，GOD)将葡萄糖氧化成葡萄糖酸，同时释放过氧化氢。
过氧化物酶(peroxidase，POD)在色原性氧受体存在时将过氧化氢分解为水和氧，并使色原性氧受体4-氨基安替比林和酚去氢缩合为红色醌类化合物，即Trinder反应。
红色醌类化合物的生成量与葡萄糖含量成正比。
通过测定吸光度就能计算出血液中葡萄糖的含量。
该法的优点有：操作简便，用血量少，成本低，多见于便携式血糖仪，是我国卫生部推荐的血糖测定的常规方法。
但缺点是：过氧化酶的特异性较差，尿酸、维生素C、胆红素等可与色原性物质竞争过氧化氢而抑制反应，引起结果偏低。
且该法线性范围较窄（0.1~20.0mmol/L）。
同时，葡萄糖氧化酶对β-D-葡萄糖高度敏感，而新配制的葡萄糖标准溶液主要为α-D-葡萄糖，为使检测结果准确，需静置溶液2h以上（最好过夜）待其完全转化为β-D-葡萄糖再使用。
临床生化检验 第三章 葡萄糖的测定
糖代谢紊乱－－高血糖和糖尿 脂类代谢紊乱－－高血脂、酮症酸中毒 体重减轻和生长迟缓 微血管、神经病变和白内障的发生
糖尿病的诊断
临床症状
糖尿病的诊断
生化诊断
血糖的测定 尿糖的测定 葡萄糖耐量试验
一、血糖的测定
1．出现糖病症状加上随机血糖浓度≥11.1mmol/L。 2．空腹血糖≥7.0mmol/L。空腹指至少8h内无含热量食 物的摄入。 3．口服葡萄糖耐量试验（OGTT） ，2h血糖浓度 ≥11.1mmol/L。
空白管（B） 标准管（S） 测定管（U）
－
－
0.1
－
0.1
－
0.1
－
－
3.0
3.0
3.0
混匀，置沸水中煮沸10min，取出置冷水中冷却5min， 在630nm处比色，以空白管调零，读取各管吸光度。
计算
血清葡萄糖 (mmol/L)
测定管吸光度 标准管吸光度
5
参考值
临床意义
评价
回收率98.6%～99.6%，线性范围可达30.8mmol/L， 日 内CV2%左右，日间CV不大于4%。特异性强，但不及氧化 酶法。
第一节 体液葡萄糖测定 一、己糖激酶法（ＨＫ法）（理解） 原理：
葡萄糖＋ATP ＨＫ 葡萄糖-６-磷酸＋ADP 葡萄糖-6-磷酸＋NADP＋ G-6-PD ６-磷酸葡萄糖内酯 +NADPH
NADPH在340nm有吸收峰
评价：
本法特异性高，灵敏度高，干扰因素少，适用于自动化 分析，为葡萄糖测定的参考方法，但是试剂较贵。
生理性：饥饿和剧烈运动
低血糖
病理性:药源性、肝源性、胰岛素瘤等
三、邻邻甲苯胺法（理解）
原理：
葡萄糖测定试剂盒(己糖激酶法)产品技术要求haifeng
葡萄糖测定试剂盒（己糖激酶法）
适用范围：本产品适用于定量测定人血清中葡萄糖的含量。
1.1 产品规格
1.2 主要组成成分
2.1 外观
2.1.1试剂盒标签标识清晰，外包装完整无损；
2.1.2试剂1为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物；
2.1.3试剂2为无色澄清液体，目测不得有任何沉淀及絮状悬浮物。
2.2 净含量
试剂的净含量不低于标示值。
2.3 空白吸光度
测定待检试剂在主波长340nm、副波长405nm、37℃条件下： A≤0.6。
2.4 线性范围
[2，30]mmol/L，相关系数r≥0.990；
[2，5.0]mmol/L范围内，绝对偏差不超过±0.5mmol/L；
(5，30]mmol/L范围内，相对偏差不超过±10%。
2.5 分析灵敏度
测定浓度为5.55mmol/L校准血清，吸光度变化不小于0.001。
2.6 精密度
2.6.1批内重复性
CV≤5%。
2.6.2 批间差
相对偏差R≤10%。
2.7 准确度
测定参考物质GBW(E)090545，相对偏差不超过±10%。
2.8 稳定性
未开封试剂2℃～8℃储存，可稳定12个月。
取到效期后2个月内产品进行检测，检测结果应满足2.1、2.3、2.4、2.5、2.6.1和2.7的规定。
己糖激酶法测定血清葡萄糖假性偏低原因探讨
到与临床表现不 符且 反应 曲线异常 的低血糖标本 ， 称为假性 低血糖 。本实验室分析 了 ２ ０ ０ ９年 ８月至 ２ ０ １ ２年 ２月以来所 监测到的假性低血糖 标本 ｌ ８ 例， 分析 了患者 的病种及原 因 ， 并根据测定 方法的理论 基础对反 映参数 的读点时 间作 了调 整， 按规定校准仪器 。将异常低血糖组 、 健康对照组 、 高血糖
江苏省张 家港市中医医院（ ２ １ ５ ６ ｏ ｏ ） 随着生活水平 的提高 ，人们 的饮食结构和种类都发生 了 杨天平 杨
果
萍
王
芳
２ 结
很大的变化 ， 使糖尿病 的发病率逐年增加 。高血糖 的患者在 门急诊 常常遇到 ， 但是低血糖 （ 血糖＜ ２ ． ８ ｅ ｒ ｏ ｔ ｏ ｌ ／ Ｌ ） 的患者也不
后 根据假性低 血糖组反应 曲线异 常的特点将参 数 中的读点
时间调整为 Ｆ ＩＲ Ｓ Ｔ Ｐ Ｏ Ｉ Ｎ Ｔ １ ０ ～ １ ５ ， 其他不变 。 血糖标本为早晨
空腹用含 有分离胶 的生化真 空管抽 取静脉 血 ５ ｍ Ｌ ， 标本 放 ３ ７℃水 浴箱 ３ ０ ｍ ｉ ｎ ， 后以 ３ ０ ０ ０ ｒ ／ ｍｉ ｎ的转速离心 １ ０ ａ ｒ ｉ ｎ ， 将
・
７ ５ ６・
堕堇 查
堡！ 旦筮 ２ ｏ 鲞箜！ 朔 』 ｏ １ ｌ ｍ
ｒ ａ ｃ ａ ｌ Ｍ ｅ ｄ ｉ ｃ ａ ｌ Ｔ ｅ ｃ ｈ ｎ ｉ ｑ ｕ ｅ ｓ ， Ｊ ｕ ｌ ｖ ２ ０ １ ３ ， ｖ ０ １ ． ２ ０ ， Ｎ ｏ ． ７
・
医学检 验 ・
己糖激酶法测定血清葡萄糖假性偏低原因探讨
葡萄糖检测作业指导书
葡萄糖检测作业指导书1 检验目的规范葡萄糖（GLU）检测试验，确保检测结果准确性和重复性。
2 测定方法己糖激酶法。
3 检测原理在有三磷酸腺苷 (ATP) 和镁离子存在的情况下，葡萄糖被己糖激酶 (HK) 磷酸化，产生 6-磷酸葡萄糖和二磷酸腺苷 (ADP)。
6-磷酸葡萄糖脱氢酶(G6P-DH) 特异性地氧化6-磷酸葡萄糖为 6-磷酸葡糖酸，同时 NAD+ 被还原为NADH。
吸光度在 340nm 处的增加与样本中的葡萄糖浓度成正比。
反应原理：4 样本血清、肝素或EDTA抗凝血浆，处理方法见生化标本采集程序。
稳定性：2～ 8℃稳定1天。
5 仪器和试剂5.1 仪器：美国贝克曼-库尔特DXC800、AU5811全自动生化仪、迈瑞BS800M生化分析仪。
5.2 试剂：由武汉元景商贸公司提供原装贝克曼-库尔特试剂及迈瑞公司提供的生化试剂（详见试剂说明书），超过失效期的试剂不能使用。
5.3 校准物：Rodan混合校准品，符合WHO标准，贮存、准备严格遵照其说明书。
5.4 质控物：Rodan正常值及病理值质控品，符合WHO 标准，贮存、准备严格遵照说明书。
6 校准6.1 仪器校准：每年由该仪器维修工程师参照厂方的技术规范对仪器进行一次校准。
6.2 项目校准：试剂盒在仪器上放置稳定期后；试剂批号更换后；由质控结果随时决定。
7 操作步骤上机操作，操作程序、质量控制程序见相应生化仪操作程序。
8 参考范围3.8～6.1mmol/L。
9 警告/危急值≤2.8 mmol/L或≥30 mmol/L。
10 性能指标10.1 线形上限：28mmol/L。
10.2 精密度：≤5%。
10.3 准确度:不准确度≤5%。
10.4 空白吸光度:在546nm处，应小于0.2。
10.5 试剂贮存:本试剂2～8℃密闭、避光贮存可稳定12个月；启用后于2～8℃可稳定一个月。
11 干扰因素及变异的潜在来源11.1溶血对本法有干扰作用，样本为了避免溶血，抽血后，应迅速将血清或血浆与红细胞分离，以避免糖酵解。
葡萄糖(GLU-HK)测定试剂盒(己糖激酶法)产品技术要求百奥泰康
葡萄糖(GLU-HK)测定试剂盒（己糖激酶法）适用范围：该产品用于体外定量测定人血清中葡萄糖的浓度。
1.1 产品规格1.2组成成分1.2.1试剂组成1.2.2校准品的组成单水平的液体校准品，在50mM PH=7.0的磷酸盐缓冲液中添加葡萄糖，稳定剂<0.1%；定值范围(5.00-6.5)mmol/L。
2.1 外观液体双试剂：试剂1为无色至淡黄色澄清液体，试剂2为无色至淡黄色澄清液体。
校准品：无色至浅黄色澄清液体。
2.2 净含量液体试剂的净含量不得低于标示体积。
2.3 空白吸光度试剂空白吸光度应≤0.3 。
2.4 分析灵敏度浓度为5.55mmol/L时，吸光度变化应≥0.2。
2.5 线性在(0,38.9]mmol/L线性范围内，线性相关系数r≥0.996。
在(0,5]mmol/L 范围内绝对偏差不超过0.5mmol/L，在（5, 38.9]mmol/L范围内的相对偏差不超过±10%。
2.6 精密度变异系数CV应≤5%。
2.7 批间差不同批号之间测定结果的相对极差应≤6 %。
2.8 准确度相对偏差：用参考物质作为样本进行检测，测量结果与参考物质靶值的相对偏差应不超过±10%。
2.9校准品溯源性要求根据GB/T21415-2008《体外诊断医疗器械生物样品中量的测量校准品控制物质赋值的计量学溯源性》及有关规定提供葡萄糖校准品的来源、赋值过程以及测量不确定度等内容。
校准品溯源至有证参考物质（SRM909C，NIST）。
2.10 稳定性原包装试剂（含校准品），试剂盒在2℃～8℃下有效期为18个月，取失效期的试剂盒检测其试剂空白、分析灵敏度、线性、精密度、准确度应分别符合2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。
葡萄糖测定
葡萄糖测定摘要】体液中葡萄糖含量的高低是标志着人体健康状况的重要指标，尤其是糖尿病人的血液葡萄糖监控。
葡萄糖浓度的突然升高与降低都预示着一种异常情况的发生。
许多葡萄糖测定的电化学和光化学方法已经被报道并应用于不同样品的分析。
【关键词】葡萄糖采血管检验(一)葡萄糖氧化酶法1.原理葡萄糖氧化酶(GOD)能催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生一分子过氧化氢。
在过氧化物酶(POD)和色原性氧受体(如联大茴香胺，4-氨基安替比林偶联酚)的存在下，过氧化氢分解，释放出初生态氧，氧化色素原，生成有色化合物。
2.试剂推荐使用有批准文号的优质市售试剂盒。
配制方法如下(仅供参考)：(1)0.1 mol／L(pH 7.0)磷酸盐缓冲液：溶解无水磷酸氢二钠8.67 g及无水磷酸二氢钾5.3 g于800 ml蒸馏水中，用1 mol／L氢氧化钠或盐酸调节pH至7.0，然后用蒸馏水稀释至1 L。
(2)酶试剂：取葡萄糖氧化酶l 200 U、过氧化物酶1 200 U、4-氨基安替比林10 mg、叠氮钠100 mg，加上述磷酸盐缓冲液至80 ml左右，调节pH至7.0，加磷酸缓冲液至100 ml。
置冰箱保存，至少可稳定3个月。
(3)酚试剂：重蒸馏酚100 mg溶于100 ml蒸馏水中(酚在空气中氧化成红色，可先配成500 g／L的溶液，用时稀释)。
贮存于棕色瓶中。
(4)酶酚混合试剂：酶试剂及酚试剂等量混合，在冰箱内可以存放1个月。
(5)葡萄糖标准贮存液(100 mmol／L)：无水葡萄糖(预先置80℃烤箱内干燥恒重，移置于干燥器内保存)。
称取1.802 g，以12 mmol／L苯甲酸溶液溶解并移入100 ml容量瓶内，再以12 mmol／L苯甲酸溶液稀释至100 ml刻度处，放置2小时后方可应用。
(6)葡萄糖标准应用液(5 mmol／L)：吸取葡萄糖标准贮存液5 ml，于100 ml容量瓶中，用12 mmol／L苯甲酸溶液稀释至刻度，混匀。
葡萄糖(GLU) 己糖激酶终点法
项目方法葡萄糖（GLU）己糖激酶终点法目录1.检测原理2.标本采集与处理2.1受检者的准备2.2静脉采血2.3抗凝剂2.4标本处理3.试剂3.1试剂3.2校准血清3.3试剂与校准血清的稳定性4.仪器5.操作6.计算7.操作性能7.1精密度7.2准确度7.3灵敏度7.4可报告范围7.5特异性7.6干扰8.参考值9.临床意义附录A:参数1.检测原理在己糖激酶的作用下，葡萄糖与ATP反应生成ADP和葡萄糖-6-磷酸。
在葡萄糖-6-磷酸脱氢酶催化下，葡萄糖-6-磷酸与NAD反应生成NADH和6-磷酸葡萄糖。
NADH在340nm处有最大吸收，通过测定NADH的生成量与同样处理的葡萄糖标准比较，可计算出血清中葡萄糖的含量。
HK葡萄糖+ATP---------ADP+D-葡萄糖-6-磷酸G6PDH葡萄糖-6-磷酸+NAD---------------6-磷酸葡萄糖酸+NADH2．标本采集与处理2.1受检者的准备：病人空腹12h，不饮酒24h后采集血样。
体检对象抽血前应有两周的的正常状况记录。
注意有无应用影响测试项目的药物。
此外，对于体检者，采血的季节都应做相关记录，因为样本中各项目的含量有季节性变动，为了前后比较应在每年同一季节检验。
应嘱体检对象在抽血前24小时内不做剧烈运动。
有些药物长期应用，可使患者糖代谢发生障碍，引起血糖增高，因而应当在使用这些药物期间定期监测血糖，避免引起高血糖。
常用药物中可致血糖增高的有以下几类。
糖皮质激素：糖皮质激素药物如强的松、氢化可的松、抗炎松等，临床应用广泛。
糖皮质激素可通过三条途径影响糖代谢：（1）增强糖元分解；（2）使糖异生途径活动；（3）减少外周组织对葡萄糖的作用，因而血糖升高。
如果大剂量或长期使用糖皮质激素治疗，应密切监测血糖，根据情况适当减少剂量或配合降糖药物应用。
甲状腺制剂：甲状腺激素（甲碘胺、甲状腺素、甲状腺球蛋白），可以促进葡萄糖的吸收，加速糖元分解及糖异生，使血糖增高。
24葡萄糖(Glu)测定己糖激酶法
[ 4 ] [ 200 ] [ 0 ] [ 0 ]
SENSITIVITY LIMIT(HIGH) S1 [ -32000 ] S1 [ 32000 ]
东莞常平医院 生化实验室
文件编号： DGCPH-BC-SOP-04-24
版序：2005-1
葡萄糖（Glu）测定己糖激酶法
Glu 参数设置表 TEST NAME TEST CORD ASSAY REACTION TIME Measurement POINT(1) POINT(2) POINT(3) POINT(4) WAVELENGTH(PRIMARY) SECONDARY S.VOLUME(NORMAL) S.VOLUME(DECREASE) [ 14/7/140 ] S.VOLUME(INCREASE) R.VOLUME(R1) R.VOLUME(R2) R.VOLUME(R3) [ GLU ] [ 525 ] [ 1 POINT ] [ 10 ] [ 34 ] [ 0 ] [ 0 ] [ 0 ] [ 505 ] [ 700 ] [ 2 ] R.VOLUME(R4)
东莞常平医院 生化实验室
文件编号： DGCPH-BC-SOP-04-24
版序：2005-1
葡萄糖（Glu）测定己糖激酶法
页码：第 2 页，共 4 页
贮存条件：置 2-8℃冰箱至有效期。 准备：直接使用。 质控间隔时间及限制： 应视不同地区及各自实验室情况而定。 质控结果应在 限定的范围之内，如果超出范围，实验室应根据情况采取措施。 5 仪器 ROCHE MODULAR P 或日立 7060 生化分析仪。 6 上机操作 见仪器作业指导书，参数设置见附表。 7 参考范围 7.1 血：55-115mg/dl(3.05-5.83mmol/l) 7.2 尿：晨尿：6-20mg/dl(0.3-1.1mmol/l) 24 小时尿液：20-90mg/24h(0.11-0.50mmol/24h) 7.3 CSF：儿童：60 –80mg/dl(3.33-4.44mmol/l) 成人: 40-70mg/dl(2.22-3.89mmol/l) 8 性能指标 本法线性范围为 2-750mg/dl（0.11-41.6mmol/l） ，不准确度允许范围 X ± 10%，不精密度血液：CV=1.7%，尿液：CV=2.9%，灵敏度 2mg/dl。 9 注意事项 9.1 试剂中含迭氮钠，不要吞咽，避免与皮肤及粘膜接触。 9.2 血清标本出现溶血、脂血或黄疸的干扰情况参见抗干扰能力。 9.3 换算公式：mg/dL × 0.0555 = mmol/L 9.4 仅应用于体外诊断。 9.5 扔弃废物应符合当地的法规。 10 抗干扰能力： 10.1 标准：回收率在 90％－110％之间。 10.2 黄疸：黄胆指数达到 60 时不会有明显干扰。 （直接和间接胆红素浓度约为 60mg/dl） 10.3 溶血：溶血指数达到 1000 时不会有明显干扰。 （血红素浓度约为 1000mg/dl） 10.4 脂血：乳糜指数达到 1000 明显干扰。 （甘油三酯浓度约为 2000mg/dl） 11 临床意义 机体从碳水化合物的代谢中获得血糖。葡萄糖是人体血液中最重要的单糖； 餐后血糖浓度大约为 5mmol/l。血糖是维持细胞的功能的能量供体。葡萄糖以糖 酵解的形式降解。检测葡萄糖的浓度用于对糖代谢紊乱（糖尿病、婴儿性低糖血 症、 自发性低糖血症以及胰岛细胞癌)的诊断及治疗。 GOD－PAP 法是建立在 1969 年出现的 Trinder 法基础之上的。
生化内分泌检查
＋
＋
＋
Ag 非标记 抗原
Ag-Ab Ag非标记抗原抗体 复合物
Ag ＋ 游离非标记 抗原
操作步骤： 操作步骤：
常用的检测方法
要求：灵敏度高、特异性强、紧密度好、 要求：灵敏度高、特异性强、紧密度好、 准确快速、操作简便、成本低廉、 准确快速、操作简便、成本低廉、便于自 动化操作。 动化操作。 方法：1.放射免疫分析法 方法：1.放射免疫分析法 2.酶联免疫分析法 2.酶联免疫分析法 3.化学发光免疫分析法 3.化学发光免疫分析法 4.电化学发光免疫分析法 4.电化学发光免疫分析法 5.时间分辨荧光免疫分析法 5.时间分辨荧光免疫分析法
糖尿病： 糖尿病：
糖尿病：胰岛素分泌不足或（和）胰 糖尿病：胰岛素分泌不足或（ 岛素作用低下而引起的内分泌代谢性 疾病称为糖尿病 特征： 特征：高血糖症 并发症: 心血管系统、神经系统、 并发症: 心血管系统、神经系统、视 神经病变 糖尿病有一定家族遗传性
糖尿病类型： 糖尿病类型：
四大类型: 大类型: 1型糖尿病、2型糖尿病、其它特殊类型糖尿 型糖尿病、 型糖尿病、 病和妊娠期糖尿病。 病和妊娠期糖尿病。 1型糖尿病: 始发于青少年，与遗传有关， 型糖尿病: 始发于青少年，与遗传有关， HLA基因有关 胰岛素绝对不足。 基因有关， 与HLA基因有关，胰岛素绝对不足。病人有 三多一少症状。 三多一少症状。 2型糖尿病：常见肥胖中的中老年人，多基 型糖尿病：常见肥胖中的中老年人， 因遗传和环境因素是临床病变发生的重要因 胰岛素抵抗，胰岛β 素。胰岛素抵抗，胰岛β细胞的功能减退是 发病的关键。 发病的关键。
葡萄糖测定实验
葡萄糖酸+H2O2
POD
2 H2O2+4-氨基安替吡林啉+酚
醌亚胺+4H2O
试剂主要成分与浓度:
试剂 主要成分 葡萄糖氧化酶（ＧＯＤ） R1 过氧化物酶（ＰＯＤ） 磷酸缓冲液（ＰＨ７.０） R2 酚 4-氨基安替吡林啉 11mmol/l 0.77mmol/l 900U/L 100mmol/L 实验浓度 13000U/L
２.如果x、y之间呈直线关系，即可用经典 的直线回归分析法作统计处理，其结果 可以显示候选方法的测定结果有无系统 误差存在 直线回归方程y=a+bx，a为回归直线 的截距，代表恒定误差的大小；b回归系 数，即直线的斜率，代表比例误差的大 小
3.作相关分析 在方法比较试验中，相关系数可作 为被评价方法可否被接受的一项统计学 指标． 对求出的相关系数还应作相关系数 的t检验
方法学比对概念
• 用两种方法同时测定一批标本计算出两 种方法间检测的差值,以此来估计被评价 方法在实际测定病人标本时可能引入的 总系统误差的水平.
意义
• 将候选方法与准确度已知的方法(如参考 方法)作对比分析,以评价候选方法的准确 度,是考核候选方法是否可被采用的重要 试验.方法比较试验是用于检测候选方法 系统误差的大小包括恒定误差和比例误 差,如对适当的数据进行分析,也可以提供 误差的性质.本实验以己糖激酶法为参考 方法，用来评价葡萄糖氧化酶法的总系 统误差
葡萄糖校准液:5.55mmol/l
• 将１０ mlR1 与９０ ml Ｒ２混合均匀，即 为工作液． • 样品： 新鲜无溶血血清（１-15号样本）
操作步骤：
空白管 工作液 蒸馏水 校准 样品 3.0ml ０.０2ml ０.０2ml ０.０2ml 校准管 3.0ml 样品管 3.0ml
己糖激酶法血糖标准(一)
己糖激酶法血糖标准(一)己糖激酶法血糖标准是什么己糖激酶法是测量血液中葡萄糖（血糖）浓度的常用方法之一，通过测量血液中己糖和葡萄糖间的酶促反应来确定血糖浓度。
己糖激酶法需要血液样本，并且已被证明是一种准确可靠的测试方法。
血糖标准己糖激酶法可以精确地测量血糖水平，这是诊断和监测许多疾病、特别是糖尿病所必需的。
对于大多数人来说，血糖最好保持在以下范围内： - 餐后2小时血糖小于7.8mmol/L - 空腹血糖小于6.1mmol/L糖尿病患者的血糖标准对于糖尿病患者来说，血糖标准略有不同。
他们需要密切监测血糖水平，以确定是否需要调整药物或饮食。
以下是糖尿病患者的血糖标准：- 餐后2小时血糖小于10.0mmol/L - 空腹血糖小于7.0mmol/L如何测量血糖要获得准确的血糖测量结果，请按照以下步骤操作： 1. 洗手并准备好所有必需的测试材料。
2. 用消毒棉球消毒手指。
3. 使用血糖仪器采集血液样本。
4. 将血液样本放入血糖仪器中。
5. 等待几秒钟，直到血糖仪器显示出血糖浓度。
结论己糖激酶法是一种可靠的血糖测量方法，可以帮助人们诊断和监测糖尿病及其他相关疾病。
了解血糖标准并定期检查血糖水平可以帮助人们更好地管理自己的健康。
如何控制血糖除了定期测量血糖之外，以下方法可以帮助人们控制血糖： - 控制饮食，特别是限制碳水化合物和糖分摄入。
- 多进行身体活动，例如散步、跑步、游泳等。
- 定期服用药物，如胰岛素或口服降糖药。
-减轻压力，例如吸烟、饮酒或冥想等。
- 在医生的指导下监测和调整治疗方案。
注意事项在进行己糖激酶法血糖测试时，请注意以下事项： - 准确使用血糖仪，遵守使用说明。
- 每次测试时使用新的血糖测试条。
- 清洁测试区域并使用消毒棉球消毒手指。
- 在低血糖症状出现时及时应对，并在必要时咨询医生。
- 定期检查自己的血糖水平，并及时咨询专业人士。
结语己糖激酶法血糖标准的了解和掌握对于人们的健康非常重要，特别是对于糖尿病患者来说。
血清葡萄糖GLU己糖激酶HK法测定法
血清葡萄糖GLU己糖激酶HK法测定法1.实验原理己糖激酶紫外比色测定法。
HK葡萄糖+ ATP ------------ > G-6-P+ ADPMg2+G6PDHG-6-P + NAD +------------ > 6-磷酸葡萄糖+NADH+ H +2.标本：2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2类型：血清或血浆（EDTA肝素或氟化钠），标本最好不要溶血。
迅速分离血清或血浆，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。
随机收集尿样。
3.标本存放：血清、血浆应在血液采集1小时内，尽早分离。
加入糖分解抑制剂（NaF, KF）后的稳定性：15〜25 C保存可稳定1天,4〜8 C保存可稳定7天。
血清中的葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25 C下可稳定8个小时，在4C下可稳定72小时。
尿样应保存在2〜8 C下并尽快进行分析。
脑脊髓液如果避免蒸发可在2〜8 C下稳定至少5天，5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20 C的条件下。
4.标本运输：常温条件下保存运输。
5.标本拒收标准：细菌污染、超时送检的的标本。
6.实验材料6.1试剂威特曼血糖测定试剂盒试剂1 +试剂26.1.1试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2试剂稳定性与贮存：试剂保存于2〜8 C ,若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.3变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.4注意事项：此试剂为体外诊断用。
不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的叠氮钠，如排向下水道请用大量的水冲洗。
6.2校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7.仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪8.操作步骤8.1项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件9.检验结果的判断与分析10.质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
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血清葡萄糖GLU己糖激酶HK法测定法
1.实验原理
己糖激酶紫外比色测定法。
HK
葡萄糖+ ATP -------------﹥G-6-P+ ADP
Mg2+
G6PDH
G-6-P + NAD+-------------﹥6-磷酸葡萄糖+NADH + H+
2. 标本：
2.1 病人准备：12小时禁食。
2.2 类型：血清或血浆（EDTA，肝素或氟化钠），标本最好不要溶血。
迅速分离血清或血浆，减少红细胞糖酵解时葡萄糖的损失。
随机收集尿样。
3. 标本存放：血清、血浆应在血液采集1小时内，尽早分离。
加入糖分解抑制剂（NaF，KF）后的稳定性：15～25℃保存可稳定1天,4～8℃保存可稳定7天。
血清中的
葡萄糖，无溶血，无细菌污染，没有添加的防腐剂，在25℃下可稳定8个小时，在4℃下可稳定72小时。
尿样应保存在2～8℃下并尽快进行分析。
脑脊髓液如果避免蒸发可在2～8℃下稳定至少5天，5天内不检验的标本应在收集后立即储存在-20℃的条件下。
4. 标本运输：常温条件下保存运输。
5. 标本拒收标准：细菌污染、超时送检的的标本。
6. 实验材料
6.1 试剂威特曼血糖测定试剂盒试剂1 ＋试剂2 6.1.1 试剂准备：试剂为即用式。
6.1.2 试剂稳定性与贮存：试剂保存于2～8℃，若无污染，可稳定至失效期。
试剂不可冰冻。
6.1.3 变质指示：当试剂有看得见的微生物生长，有浊度，或者未开盖的液体有沉淀时，表明试剂已变质，不能继续使用。
6.1.4 注意事项：此试剂为体外诊断用。
不要入口，吞下有害。
保护剂为叠氮钠，避免接触皮肤及粘膜，与下水管中的铅反应形成爆炸性化合物，即使只含有少量的
叠氮钠，如排向下水道请用大量的水冲洗。
6.2 校准品：使用奥林巴斯公司提供的校准品对自动分析仪进行校准，具体参见生化检验校准品和质控品.SOP 文件。
6.3 质控品：具体参见生化检验校准品和质控品.SOP文件。
7. 仪器：奥林巴斯AU2700生化分析仪
8. 操作步骤
8.1 项目基本参数：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪项目测定参数.SOP文件
8.2 仪器操作步骤：参见生化检验奥林巴斯AU2700生化分析仪操作规程.SOP文件
9. 检验结果的判断与分析
10. 质量控制：在每一批标本中都应把非定值血清水平I 与II质控做为未知标本进行分析，以2S为质控警告限，3S为失控限，绘制质控图，判断是否在控。
质控规则参见生化室室内质控操作规程.SOP文件。
11. 计算方法：以TruCal U复合校准品血糖校准值校准
仪器后，在病人结果可报告范围内，仪器直接报告可靠的检测结果，以mmol/L报告。
手工测定计算方法为：
Au
葡萄糖浓度（mmol/L）＝×校准液浓度
As
12. 参考值范围：（mmol/L）
新生儿
脐带血 3.5～8.8
1小时 2.0～5.5
2小时 2.2～4.9
5～14小时 1.9～4.3
10～28小时 2.6～4.5
44～52小时 2.7～4.4
儿童（空腹）
1～6岁 4.1～7.0
7～19岁 3.9～5.9
成人（空腹） 3.9～6.4
参考值因性别、年龄、饮食和地域的不同而有所差
别。
根据好的实验室经验，每个实验室应建立自己的参考值。
13. 临床意义：检测血清或血浆中葡萄糖主要用于糖尿病的诊断和治疗监视，还可用于检出新生儿低血糖症、排除胰岛细胞癌以及评估各种疾病碳水化合物代谢状况。
血清葡萄糖水平可能会异常高（高血糖）或异常低（低血糖）。
葡萄糖测量用于诊断和治疗碳水化合物代谢紊乱，包括糖尿病，新生儿低血糖，自发性低血糖，郎格罕氏岛细胞癌等。
葡糖尿（存在葡萄糖化尿）在健康，怀孕的妇女中很常见。
妊娠葡糖尿的最主要的特征就是每天之间或一天之中有一个显著的变化。
脑脊髓液（CSF）葡萄糖的测定帮助区别病毒性脑膜炎与细菌性脑膜炎；细菌性脑膜炎和结核性脑膜炎中的葡萄糖值通常很低（不到的40%至50%血清葡萄糖），病毒性脑膜炎中的葡萄糖值通常是正常的。
癌性脑膜炎（肿瘤细胞在脑膜中广泛渗透）也使CSF葡萄糖值在正常值以下。
14. 操作性能
14.1 线性范围：0.1～28mmol/L
14.2 精密度：精密度的评估是根据NCCLS推荐的标准方法，AU2700批内精密度小于3%，总精密度小于3%。
用于分析的质控血清和数据处理符合以上的NCCLS的规则。
批内精密
度
n=20
x
(mmol/L
)
s
(mmol/L
)
CV
(%)
批间精密
度
n=20
x
(mmol/
L)
s
(mmol/L
)
CV
(%)
样品1 5.05 0.047 0.94 样品1 3.65 0.077 2.11 样品2 6.50 0.059 0.91 样品2 6.72 0.142 2.11 样品316.10 0.127 0.79 样品316.54 0.296 1.79
14.3 方法学比较：本公司的试剂盒(y)与某商品化试剂
盒(x)，同时对76个样品进行GLU检测，将检测结果作
方法学比较，其统计结果如下：y=1.00x+0.00mmol/L；
r=0.998。
14.4 灵敏度：本试剂的检测限为0.1mmol/L。
14.5 病人结果可报告范围：0.1～28mmol/L
15. 超出范围结果处理：本法线性上限为28mmol/L。
如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:10稀释，重新测定，结果乘以11。
16. 病危报警值的处理：女性及婴儿的血糖测定值<2.2mmo/L或者>22.2mmol/L；男性的血糖测定值<2.7mmo/L或>22.2mmol/L；新生儿的血糖测定值<1.6mmo/L或>16.6mmol/L时，在经过复查等确认手段处理后应及时向临床主管医生汇报。
17. 方法局限性
17.1 本法线性上限为28mmol/L。
如样品测定值超过上限时，应将样品用0.9%氯化钠溶液作1:10稀释，重新测定，结果乘以11。
17.2 干扰物质：使用试剂起始法，当样品中抗坏血酸浓度≤1704μmol/L，胆红素浓度≤684μmol/L，血红蛋白浓度≤5.00g/L，甘油三酯浓度≤22.6mmol/L时没有观察到干扰。
18. 补救措施：当仪器发生故障时，迅速联系仪器厂家
进行维修。
19. 参考文献
1. Thomas L. Clinical Laboratory Diagnostics. 1st ed. Frankfurt: TH-Books Verlagsgesellschaft; 1998.p.131-7.
2. Sacks DB. Carbohydrates. In: Burtis CA, Ashwood ER. editors. Tietz Textbook of Clinical Chemistry. 3r d ed. Philadelphia: W. B. Saunders Company; 1999. p. 750-808.
20. 其他：仪器测定后的废液及难降解的材料集中收集后按《检验科废物处置管理规定》执行。