不明原因流产患者丈夫染色体分析
淋巴细胞免疫治疗原因不明复发性流产的护理分析
淋巴细胞免疫治疗原因不明复发性流产的护理分析目的探讨淋巴细胞免疫治疗原因不明复发性流产的护理方法。
方法将全部156例患者随机分为观察组和对照组（各78例），两组均给予淋巴细胞免疫治疗，对照组在治疗的基础上给予一般的常规护理，观察组则给予精心的综合护理。
结果观察组68例妊娠孕妇有61例妊娠成功，妊娠成功率为89.7%，对照组65例妊娠孕妇有45例妊娠成功，妊娠成功率为69.2%，观察组妊娠成功率明显优于对照组，两组比较差异有统计学意义（P＜0.05）。
结论对不明原因复发性流产患者采用免疫疗法进行治疗并给予精心的综合护理能够取得较好的疗效和较高妊娠成功率。
标签：复发性流产；淋巴细胞；免疫治疗复发性流产是指连续2次或2次以上的自然流产的现象，发病率为妊娠总数的1%～5%[1]，该病病因十分复杂，主要有内分泌异常、生殖解剖异常、染色体异常、环境因素、自身免疫和感染等，但是仍有40%～80%的复发性流产患者原因不明，常称为不明原因性复发性流产[2]。
有文献表明，由免疫因素造成的不明原因性复发性流产约占80%[3]。
目前，对于不明原因性复发性流产主要采用免疫疗法进行治疗，而免疫治疗的成功与否和护理干预具有十分密切关系。
2010年1月～2011年5月期间，我院对78例不明原因复发性流产患者采用淋巴细胞免疫疗法进行治疗，并给予精心的综合护理，取得了较好疗效，现报道如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取2010年1月～2011年5月期间我院收治的不明原因复发性流产患者156例，纳入标准：（1）夫妇双方染色体核型分析正常；（2）女方无生殖道畸形及器质性病变；（3）内分泌（如生殖、甲状腺、胰岛素等）激素指标正常；（4）无IgA 缺陷史和过敏史；（5）无TORCH感染及支原体、衣原体等生殖道感染；（6）血清中封闭抗体阴性，抗精子抗体、抗心磷脂抗体、抗子宫内膜抗体和其他免疫抗体无异常；（7）男方精液常规检查正常。
在免疫治疗前对供血者进行肝肾功能、肝炎、梅毒、艾滋病系列等检查，不合格者选取无感染性疾病的男性无关第三方作为供血者；另外，医护人员均与患者夫妇双方进行知情谈话，均签署知情同意书同意接受免疫治疗及参加本研究。
211131305_自然流产及指征引产组织与染色体异常的关系
㊃论著㊃D O I:10.3969/j.i s s n.1672-9455.2023.08.010自然流产及指征引产组织与染色体异常的关系*胡勤,叶强,周子靖,金朝ә四川省自贡市妇幼保健院检验科,四川自贡643000摘要:目的探讨自然流产及指征引产组织与染色体异常的关系㊂方法采用低深度高通量全基因组拷贝数变异测序(C N V-S e q)技术对自然流产组织和指征引产胎儿组织进行染色体检测,其中自然流产标本141例,指征引产标本69例㊂结果自然流产组织141例,指征引产组织69例均检测成功㊂141例自然流产组织中染色体异常65例,检出率为46.10%,其中染色体数目异常46例,意义不明或良性结构异常12例,致病性结构异常7例;69例指征引产组织中染色体异常28例,检出率为40.58%,其中染色体数目异常13例,意义不明或良性结构异常10例,致病性结构异常5例㊂结论染色体异常(数目和结构)是导致自然流产和指征引产的主要原因,采用C N V-S e q技术检测自然流产和指征引产组织有利于查找遗传学病因,对再次生育指导有重要意义㊂关键词:低深度高通量全基因组拷贝数变异测序;稽留流产;指征引产;染色体异常中图法分类号:R715.5;R714.21文献标志码:A文章编号:1672-9455(2023)08-1063-05A n a l y s i s o f c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t i e s i n s p o n t a n e o u s a b o r t i o n a n d r e f e r e n c e a b o r t i o n t i s s u eb y w h o l e g e n o m ec o p y n u m b e r v a r i a t i o n s e q u e n c i n g*HU Q i n,Y E Q i a n g,Z H O U Z i j i n g,J I N Z h a oәD e p a r t m e n t o f C l i n i c a l L a b o r a t o r y,Z i g o n g M a t e r n a l a n d C h i l d H e a l t h C a r eH o s p i t a l,Z i g o n g,S i c h u a n643000,C h i n aA b s t r a c t:O b j e c t i v e T o i n v e s t i g a t e t h e r e l a t i o n s h i p b e t w e e n s p o n t a n e o u s a b o r t i o n t i s s u e,c i t a t i o n a n d c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t i e s.M e t h o d s L o w d e p t h a n d h i g h t h r o u g h p u t c o p y n u m b e r v a r i a t i o n s e q u e n c i n g (C N V-S e q)t e c h n i q u e w a s u s e d t o d e t e c t c h r o m o s o m e s i n s p o n t a n e o u s a b o r t i o n t i s s u e s a n d r e f e r e n c e f e t u s e s, i n c l u d i n g141c a s e s o f s p o n t a n e o u s a b o r t i o n t i s s u e a n d69c a s e s o f i n d u c e d l a b o r t i s s u e.R e s u l t s A t o t a l o f141 c a s e s o f s p o n t a n e o u s a b o r t i o n t i s s u e a n d69c a s e s o f i n d u c e d l a b o r t i s s u e w e r e d e t e c t e d s u c c e s s f u l l y.T h e r e w e r e65c a s e s o f c h r o m o s o m e a b n o r m a l i t y i n s p o n t a n e o u s a b o r t i o n(46.10%),i n c l u d i n g46c a s e s o f c h r o m o-s o m e a b n o r m a l i t y,12c a s e s o f u n k n o w n o r b e n i g n s t r u c t u r a l v a r i a t i o n,7c a s e s o f p a t h o g e n i c s t r u c t u r a l v a r i a-t i o n.A t o t a l o f28c a s e s o f c h r o m o s o m e a b n o r m a l i t y(40.58%)w e r e i d e n t i f i e d,i n c l u d i n g13c a s e s o f c h r o m o-s o m e a b n o r m a l i t y a n d5c a s e s o f p a t h o g e n i c s t r u c t u r a l v a r i a t i o n.C o n c l u s i o n C h r o m o s o m e a b n o r m a l i t y(n u m-b e r a n d s t r u c t u r e)i s t h e m a i n c a u s e o f s p o n t a n e o u s a b o r t i o n a n d i n d u c t i o n o f l a b o r.T h e d e t e c t i o n o f a b o r t i o n a n d i n-d u c t i o n o f l a b o r b y c h r o m o s o m e c o p y n u m b e r v a r i a t i o n s e q u e n c i n g t e c h n o l o g y i s h e l p f u l t o f i n d t h e g e n e t i c c a u s e, w h i c h i s o f g r e a t s i g n i f i c a n c e f o r f e r t i l i t y g u i d a n c e a g a i n.K e y w o r d s:h i g h-t h r o u g h p u t w h o l e g e n o m e c o p y n u m b e r v a r i a t i o n s e q u e n c i n g; d e l a y e d a b o r t i o n;r e-f e r s t o t h e i n d u c t i o n o f l a b o r;c h r o m o s o m a l a b n o r m a l i t y自然流产指非人为目的造成的流产,在所有临床妊娠中,大约15%会发生自然流产[1]㊂近年来有研究表明,高龄㊁生殖器官异常㊁黄体功能不全㊁配偶精子异常㊁妊娠感染㊁初产妇㊁自然流产史及不良生活习惯等均是自然流产的主要危险因素[2]㊂从遗传学角度分析,染色体异常可导致自然流产,并且可增加后续妊娠失败和其他并发症的发生率㊂国外有研究表明, 50%的自然流产存在染色体异常,包括嵌合体㊁结构和数目异常,如三体㊁单体㊁多倍体和X单体[3]㊂因此,分析流产组织中的染色体有助于了解终止妊娠的病因,以及改善自然流产患者后续妊娠的管理㊂在所有孕妇中,胎儿结构异常占3%,几十年来,基于超声波的筛查一直是常规产前检查的组成部分,可发现明显的结构异常,临床推荐引产并查找畸形原因[4]㊂大约一半的主要结构异常可以在妊娠前3个月检测到,包括颅内/无脑畸形㊁腹壁缺陷㊁前脑无裂畸形和囊性水瘤等㊂然而,由于有些器官㊁系统的持续发展,部分异常直到怀孕后期才会显现出来㊂随着检查能力及经㊃3601㊃检验医学与临床2023年4月第20卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2023,V o l.20,N o.8*基金项目:四川省自贡市科学技术局重点项目(2019Y L S F35)㊂作者简介:胡勤,女,主管技师,主要从事产前诊断的分子遗传学及新生儿遗传代谢性疾病方面的研究㊂ә通信作者,E-m a i l: 452672995@q q.c o m㊂Copyright©博看网. All Rights Reserved.验的增加,让中枢神经系统和心血管系统的详细检查成为可能,目前在有产前诊断资质的机构广泛进行胎儿神经超声图和胎儿超声心动图等专门检查㊂当产前检查发现重大结构异常时,建议使用染色体芯片或者全基因组拷贝数变异测序技术进行基因检测,因为它具有更高的基因组分辨率[5]㊂本研究选取自然流产组织和指征引产胎儿组织,采用低深度高通量全基因组拷贝数变异测序(C N V-S e q)技术检测其染色体,并分析染色体与自然流产组织及指征引产胎儿组织的关系,现报道如下㊂1资料与方法1.1一般资料选取2019年1月至2020年12月于本院就诊孕妇的141例流产组织和69例胎儿组织作为研究对象,临床诊断为自然流产排出的绒毛组织㊁稽留流产行清宫术后留取的标本及有临床指征需要引产的胎儿组织㊂其中自然流产标本141例,指征引产标本69例㊂自然流产组织孕妇平均年龄(29.89ʃ4.45)岁,受检时平均孕周(9.50ʃ1.52)周,平均自然流产次数(1.29ʃ0.94)次;指征引产组织孕妇平均年龄(27.28ʃ3.88)岁,受检时平均孕周(20.52ʃ5.82)周㊂所有患者均知情同意并签署知情同意书,本研究经本院伦理委员会审核批准㊂1.2方法1.2.1取样自然流产组织为小孕周时,取约10 m g新鲜绒毛组织;可见胎儿组织时,取1c mˑ1c m 胎儿组织标本㊂使用生理盐水多次漂洗,除去血液㊁污物后剪碎㊂1.2.2基因组D N A提取采用博奥生物集团试剂盒提取基因组D N A,裂解液和蛋白酶K消化组织过夜,后续纯化和收集D N A,用于高通量测序检测; N a n o D r o p2000(美国T h e r m o F i s h e r s c i e n t i f i c I N C)测定D N A浓度,保证建库用量大于600n g,A260/A280为1.8~2.0,置于-70ħ冰箱储存备用,避免标本D N A反复冻融㊂1.2.3基因组建库将600n g基因组D N A通过片段化酶消化为片段,将末端修复,加上特异序列标签后扩增短片段,采用S Y B G r e e n实时荧光定量技术检测,为测序做准备㊂1.2.4测序检测及结果判读采用博奥生物集团I o n T o r r e n t测序平台对标本进行检测,严格按照实验室标准操作规程进行,设置检测400个F l o w s㊂芯片质控I S P L o a d i n g>75%,P o l y c l o n a l<35%,L o w Q u a l i t y<10%,T o t a l R e a d s>75M b,每个标本数据量>3.5M b㊂对染色体非整倍体及ȡ5M b的微缺失和微重复进行分析㊂通过人类染色体不平衡和表型数据库D E C I P H E R(h t t p s://d e c i p h e r.s a n g e r.a c. u k/i n d e x)㊁C l i n G e n(h t t p s://w w w.c l i n i c a l g e n o m e. o r g)㊁在线人类孟德尔遗传数据库(OM I M,h t t p s:// w w w.o m i m.o r g)和基因组变异数据库(D G V,h t-t p://d g v.t c a g.c a/d g v/a p p/h o m e)等公共数据库进行比对分析,判断所检出C N V的性质,进行结果判读㊂参照美国医学遗传学与基因组学学会遗传变异分类标准与指南[6],将检测标本中发现的C N V s分为以下5个级别:明确致病性C N V㊁可能致病C N V㊁良性C N V㊁可能良性C N V㊁临床意义不明C N V㊂2结果2.1自然流产组织和指征引产组织检出率及染色体异常结果比较纳入本研究的141例自然流产组织和69例指征引产组织均检测成功,数据达到质控标准㊂染色体异常93例,检出率为44.29%(93/210)㊂141例自然流产组织中染色体异常65例,检出率46.10%,其中染色体数目异常46例,致病性结构异常7例,意义不明或良性结构异常12例㊂69例指征引产组织中染色体异常28例,检出率40.58%,其中染色体数目异常13例,致病性结构异常5例,意义不明或良性结构异常10例㊂2.2染色体数目异常分析(1)65例自然流产组织染色体异常中染色体数目异常46例,占异常染色体的70.77%,其中三体型33例,单体型11例(T u r n e r 综合征10例,21号染色体单体1例),三倍体2例(多重S T R位点分析验证一致)㊂(2)28例指征引产组织染色体异常中染色体数目异常13例,占异常染色体的46.43%,其中三体型9例,单体型4例,均为T u r n e r综合征㊂9例三体中有7例为18号染色体三体,均因为B超检查提示异常而进一步进行诊断,其中4例胎儿水肿合并淋巴水囊瘤,2例胎儿多发畸形, 1例胎儿为足内翻;另外2例三体分别为13号染色体三体和21号染色体三体,表现为胎儿唇裂㊁全身水肿和先天性心脏病㊂4例T u r n e r综合征均表现为水肿㊁淋巴水囊瘤㊂见表1㊂表1 C N V-S e q技术检测流产组织染色体数目异常结果[n(%)]检测结果描述自然流产组织数目异常(n=46)指征引产组织数目异常(n=13)S e q(2)ˑ32号染色体三体1(2.17)0(0.00)S e q(5)ˑ35号染色体三体1(2.17)0(0.00)S e q(6)ˑ36号染色体三体1(2.17)0(0.00)S e q(7)ˑ37号染色体三体2(4.35)0(0.00)S e q(8)ˑ38号染色体三体1(2.17)0(0.00)S e q(9)ˑ39号染色体三体6(13.04)0(0.00)㊃4601㊃检验医学与临床2023年4月第20卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2023,V o l.20,N o.8Copyright©博看网. All Rights Reserved.续表1 C N V-S e q技术检测流产组织染色体数目异常结果[n(%)]检测结果描述自然流产组织数目异常(n=46)指征引产组织数目异常(n=13) S e q(12)ˑ312号染色体三体3(6.52)0(0.00)S e q(13)ˑ313号染色体三体4(8.70)1(7.69)S e q(15)ˑ315号染色体三体1(2.17)0(0.00)S e q(16)ˑ316号染色体三体8(17.39)0(0.00)S e q(17)ˑ317号染色体三体1(2.17)0(0.00)S e q(18)ˑ318号染色体三体1(2.17)7(53.85)S e q(20)ˑ320号染色体三体1(2.17)0(0.00)S e q(21)ˑ121号染色体单体1(2.17)0(0.00)S e q(21)ˑ321号染色体三体1(2.17)1(7.69)S e q(22)ˑ322号染色体三体1(2.17)0(0.00)S e q(x o)ˑ1T u r n e r综合征10(21.74)4(30.77)三倍体69,X X Y三倍体2(4.35)0(0.00)2.3染色体致病性结构异常组织分析自然流产组织染色体结构异常19例,其中致病性结构异常7例;指征引产组织染色体结构异常15例,其中致病性结构异常5例㊂见表2㊂表2 C N V-S e q技术检出的致病性结构异常组织分析致病性结构异常组织结果描述自然流产组织1S e q[h g19]3q29(193.04~197.84M b)ˑ3,S e q[h g19]5q35.2q35.3(174.70~180.72M b)ˑ1, S e q[h g19]22q11.1q11.2(17.06~18.62M b)ˑ33号染色体q29(193.04~197.84M b)位置存在约4.80M b的拷贝数重复;5号染色体q35.2q35.3(174.70~180.72M b)位置存在约6.02M b的拷贝数缺失; 22号染色体q11.1q11.21(17.06~18.62M b)位置存在约1.56M b的拷贝数重复㊂根据C N V评判标准,综合认定这3个位置的变异均为致病性C N V㊂自然流产组织2S e q[h g19]d e l(8)(p23.3p11.23), S e q[h g19]d u p(8)(q12.1q24.3)m o s 8号染色体p23.3p11.23(0.16~38.30M b)位置存在约38.14M b的拷贝数缺失;同时8号染色体q12.1q24.3(61.50~146.30M b)位置存在约84.80M b的拷贝数重复(拷贝数为2.6)㊂根据C N V评判标准,综合认定这2个位置的变异均为致病性C N V自然流产组织3S e q[h g19]X q25(122.90~123.18M b)ˑ1X染色体q25(122.90~123.18M b)位置存在约0.28M b的拷贝数缺失,临床表型特征为:X-连锁淋巴增生综合征2型自然流产组织4S e q[h g19]d e l(11)(q13.3q14.1)11号染色体q13.3q14.1(69.30~82.90M b)位置存在约13.60M b的拷贝数缺失,常见特征包括发育迟缓㊁智力障碍㊁行为问题和独特的面部特征自然流产组织5S e q[h g19]2p25.3(0.02~3.04M b)ˑ3,S e q[h g19]13q21.2q34(61.58~115.10M b)ˑ12号染色体p25.3(0.02~3.04M b)位置存在约3.02M b的拷贝数重复,为临床意义不明确C N V;13号染色体q21.2q34(61.58~115.10M b)位置存在约53.52M b的拷贝数缺失,为致病性C N V自然流产组织6S e q[h g19]3q29(195.66~197.34M b)ˑ13号染色体q29(195.66~197.34M b)位置存在约1.68M b的拷贝数缺失,为致病性C N V自然流产组织7S e q[h g19]6p25.3p24.3(0.14~9.40M b)ˑ1, S e q[h g19]6q13q27(71.50~170.92M b)ˑ3[50%]6号染色体p25.3p24.3(0.14~9.40M b)位置存在约9.26M b的拷贝数缺失;同时6号染色体q13q27(71.50~170.92M b)位置存在约99.42M b拷贝数嵌合重复,嵌合比例约为50%㊂根据C N V评判标准,综合认定这2个位置的变异均为致病性C N V指征引产组织1S e q[h g19]3q22.3q25.1(138.08~151.16M b)ˑ13号染色体q22.3q25.1(138.08~151.16M b)位置存在约13.08M b的拷贝数缺失,为致病性C N V指征引产组织2S e q[h g19]10q23.2q26.3(88.70~135.44M b)ˑ310号染色体q23.2q26.3(88.70~135.44M b)位置存在约46.74M b的拷贝数重复,为致病性C N V指征引产组织3S e q[h g19]11q24.2q25(124.30~134.94M b)ˑ111号染色体q24.2q25(124.30~134.94M b)位置存在约10.64M b的拷贝数缺失,为致病性C N V指征引产组织4S e q[h g19]8p23.2(2.34~2.78M b)ˑ3,S e q[h g19]17p13.3p13.2(2.48~3.80M b)ˑ18号染色体p23.2(2.34~2.78M b)位置存在约0.44M b的拷贝数重复,为临床意义不明确C N V;常染色体17号染色体p13.3p13.2(2.48~3.80M b)位置存在片段大小约1.32M b的拷贝数缺失,为致病性C N V指征引产组织5S e q[h g19]d u p(10)(q23.2q26.3)10号染色体q23.2q26.3(88.70~135.44M b)位置存在约46.74M b的拷贝数重复,为致病性C N V㊃5601㊃检验医学与临床2023年4月第20卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2023,V o l.20,N o.8Copyright©博看网. All Rights Reserved.3讨论染色体病是由于先天性染色体数目异常或结构异常导致的具有多发畸形㊁发育迟缓等一系列临床症状的疾病[7]㊂不明原因流产及指征引产主要原因为染色体数目异常,这与本研究结果一致,不明原因流产组织中32.62%是由于染色体数目异常导致的,指征引产组织中18.84%是因为染色体数目异常引起的[7]㊂C N V-s e q技术除了能检测染色体非整倍体问题外,还可以检测>5M b的染色体微小拷贝数变异,目前,C N V-s e q技术被应用于生长发育迟缓㊁多发畸形㊁智力障碍等表现的儿童㊁成人罕见病或者自然流产物㊁指征引产物原因分析,可对产前诊断中核型结果异常进行分析,但无法对异常片段的来源进行D N A水平分析,还可对产前超声检查异常而染色体核型分析结果正常的胎儿进行进一步遗传学检测等[8-9]㊂本研究结果显示,自然流产组织染色体数目异常46例,占异常染色体的70.77%(46/65),其中三体型33例,单体型11例(T u r n e r综合征10例,21号染色体单体1例),三倍体2例㊂不明原因自然流产高发原因核型分别为X O㊁T16㊁T9等,这些三体或单体核型还存在不同程度的嵌合,46例染色体数目异常标本中13例为嵌合体㊂指征引产组织染色体数目异常13例,占异常染色体的46.43%(13/28),其中三体型9例;单体型4例,均为T u r n e r综合征㊂9例三体中有7例为18号染色体三体,均因为B超检查提示异常而进一步进行诊断,其中4例胎儿水肿合并淋巴水囊瘤,2例胎儿多发畸形,1例胎儿为足内翻;另外2例三体分别为13号染色体三体和21号染色体三体,表现为胎儿唇裂㊁全身水肿和先天性心脏病㊂4例T u r n e r综合征均表现为水肿㊁淋巴水囊瘤㊂除染色体数目异常外,本研究还发现染色体结构异常,结构异常会表现出较为严重的临床症状㊂自然流产组织染色体结构异常19例,其中致病性结构异常7例㊂有1例自然流产组织受检原因为孕妇反复稽留流产3次,孕妇35岁,第4次怀孕同样不明原因流产,检测结果有3个染色体片段异常:(1)3号染色体q29(193.04~197.84M b)位置存在约4.80M b的拷贝数重复,q29区域共涉及41个蛋白编码基因,包含10个已知的M o r b i d基因,该区域重复完全覆盖 3q29微重复综合征 (3:195726835-197344663,约1.61M b;OM I M611936),大部分由父母一方遗传,少数为新发突变㊂个体间临床表型存在差异,该重复为致病性结构变异㊂(2)5号染色体q35.2q35.3 (174.70~180.72M b)位置存在约6.02M b的拷贝数缺失,5号染色体q35.2q35.3区域完全覆盖 5q35复发(S o t o s综合征)区域(包括N S D1) (c h r5:175,728,979-177,047,793),C l i n G e n数据库单倍剂量不足,评分为3分,目前有足够证据表明其发生一个拷贝数的缺失可以导致疾病,单倍剂量不足关联 S o t o s 综合征 ,又称小儿巨脑畸形综合征,主要临床表型特征包括特殊面容㊁学习障碍㊁过度生长等[10],为致病性C N V㊂(3)22号染色体q11.1q11.2(17.06~18.62 M b)位置存在约1.56M b的拷贝数重复,22号染色体q11.1q11.2区域完全覆盖 22q11.2复发(猫眼综合征)区域(包括C E C R2) (c h r22:17,392,953-18, 591,860),C l i n G e n数据库三倍剂量敏感评分为3分,敏感关联的表型为 猫眼综合征 (OM I M115470)[11]㊂ 猫眼综合征 是一种罕见的染色体疾病,具有高度可变的临床表现,主要临床特征:虹膜缺损和肛门闭锁合并瘘管,下斜睑裂,耳前皮赘和/或凹陷,心脏畸形和肾畸形频发,精神发育正常或接近正常[11],该重复为致病性C N V㊂综合3个位置的染色体结构异常,评估该标本的异常可能源自父母染色体易位,存在一定再发风险㊂经过与产前诊断中心和生殖中心沟通,建议该对夫妇进行胚胎移植前诊断技术(第3代试管婴儿)㊂指征引产组织染色体结构异常15例,其中致病性结构异常5例,1例因B超检查显示胎儿颅内结构发育异常引产,分子诊断为S e q[h g19]8p23.2(2.34~ 2.78M b)ˑ3,S e q[h g19]17p13.3p13.2(2.48~3.80 M b)ˑ1,8号染色体约0.44M b的拷贝数重复,17号染色体约1.32M b的拷贝数缺失㊂8号染色体p23.2区域不涉及蛋白编码基因,不包含已知的M o r b i d基因,为临床意义不明确C N V;17号染色体p13.3p13.2区域共涉及17个蛋白编码基因,包含5个已知的M o r b i d基因:其中P A F A H1B1基因的单倍剂量不足,评分为3分,有足够证据表明其发生一个拷贝的缺失可以导致疾病,单倍剂量不足关联 经典无脑畸形 (MO N D O:0015146),为致病性C N V,所以该胎儿B超检查显示颅内结构异常的原因可能是17号染色体发生缺失引起的㊂染色体微小的结构异常涉及重要基因同样导致严重的疾病及表型,当然C N V-S e q技术只能检测到染色体>5M b的非整倍体问题,对于整倍体和平衡性易位等问题导致的流产会漏检,所以临床常推荐C N V-s e q技术与染色体核型分析联合应用,虽然染色体核型分辨率较C N V-S e q技术差,但能检测整倍体和平衡性易位等染色体异常,两种技术互补应该可以提高检出率㊂染色体微阵列分析技术是胎儿超声影像检查异常时的首选推荐检测方法,是利用涵盖大量染色体重要片段的高密度D N A探针与经荧光标记的样品D N A特异性杂交,从而获得样品分子的序列和数量等信息,除了检测拷贝数变异外,该方法还可以查出单亲二倍体㊁杂合性缺失㊁三倍体或多倍体,但因㊃6601㊃检验医学与临床2023年4月第20卷第8期 L a b M e d C l i n,A p r i l2023,V o l.20,N o.8Copyright©博看网. All Rights Reserved.芯片上探针有限,范围不如C N V-S e q技术广㊂每种技术均有其优势与局限性,各种技术联合检测是最理想的状态,但现实是患者会根据自己的经济情况只选择其一,这也是本研究的局限性,没有完全统计各种检测技术的检出率及漏检情况㊂通过累计更多的检测数据,希望可以进一步完善该研究㊂产前诊断方法多样化可以避免因检测方法局限而漏诊,完善出生缺陷二级预防㊂综上所述,染色体异常(数目和结构)是造成自然流产和指征引产的主要原因,C N V-s e q作为新的分子检测技术,通过对染色体非整倍体问题及>5M b的染色体微小拷贝数变异进行分析,可快速㊁有效地检测流产和引产组织的遗传学病因,对再次生育指导具有重要意义㊂参考文献[1]B I Y I K I,A L B A Y R A K M,K E S K I N F.P l a t e l e t t o l y m-p h o c y t e r a t i o a n d n e u t r o p h i l t o l y m p h o c y t e r a t i o i n m i s s e d a b o r t i o n[J].R e v B r a s G i n e c o l O b s t e t,2020,42(5):235-239.[2]G O N G G F,Y I N C X,HU A N G Y Q.A s u r v e y o f i n f l u-e n c i n gf a c t o r s o f m i s s e d a b o r t i o n d u r i ng th e t w o-c hi l d p e a k p e r i o d[J].J O b s t e t G y n a e c o l,2021,41(6):977-980.[3]L I F X,X I E M J,Q U S F,e t a l.D e t e c t i o n o f c h r o m o s o m a la b n o r m a l i t i e s i n s p o n t a n e o u s m i s c a r r i a g e b y l o w c o v e r a g e n e x t g e n e r a 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112例自然流产夫妇染色体核型分析
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７ ８７ ・
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临 床检 验研 究论 著 ・
１ １ ２ 例 自然 流产 夫 妇 染 色体 核 型 分 析
ｎ ａ ｌ ｙ ｓ ｉ ｓ ｏ ｎ ｃ ｏ ｕ ｐ ｌ ｅ ｓ ． Ｍｅ ｔ ｈ ｏ ｄ ｓ １ １ ２ ｃ ａ ｓ ｅ ｓ （ ｔ ｏ ｔ ａ ｌ ５ ６ ｃ ｏ ｕ ｐ ｌ ｅ ｓ ）ｗｈ ｏ ｅ ｘ ｐ ｅ ｒ ｉ ｅ ｎ ｃ ｅ ｄ ｓ ｐ ｏ ｎ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ ａ ｂ ｏ ｒ ｔ ｉ ｏ ｎ ｗｅ ｒ ｅ ｒ ｅ ｃ ｒ ｕ ｉ ｔ ｅ ｄ ｆ ｒ ｏ ｍ ｔ ｈ ｅ Ａｆ ｆ ｉ ｌ ｉ ａ ｔ ｅ ｄ
Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ Ｍｅ ｄｉ ｃ ａ ｌ Ｃ ｏ ｌ ｌ ｅ ｇｅ ， Ｎａ ｎ ｃ ｈ ｏ ｎ ｇ， Ｓ ｉ ｃ ｈ ｕ ａ ｎ ６ ３ ７ ０ ０ ０， Ｃ ｈ ｉ ｎ ａ ）
Ａｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ ： Ｏｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔｏ ｅ ｘ ｐ ｌ ｏ ｒ ｅ ｔ ｈ ｅ ｃ ｏ ｒ ｒ ｅ ｌ ａ ｔ ｅ ｂ ｅ ｔ ｗｅ ｅ ｎ ｓ ｐ ｏ ｎ ｔ ａ ｎ ｅ ｏ ｕ ｓ ａ ｂ ｏ ｒ ｔ ｉ ｏ ｎ ａ ｎ ｄ ｃ ｈ ｒ ｏ ｍｏ ｓ ｏ ｍｅ ｄ ｙ ｓ ｆ ｕ ｎ ｃ ｔ ｉ ｏ ｎ ｔ ｈ ｒ ｏ ｕ ｇ ｈ ｋ ａ ｒ ｙ ｏ ｔ ｙ ｐ ｅ ａ —
．
张 春 ， 蒋 红 ， 何 城。 ”， 刘 青松 ， 张 国元。 ”， 唐 中。 ”， 蔡 燕。 “ △
３ ． 检 验科 ， 四川 南充 ６ ３ ７ ０ ０ ０ ； ４ ． 川 北 医学 院检 验 系， 四川 南充 ６ ３ ７ ０ ０ ０ ）
不明原因反复自然流产与PAI—I基因4G
不明原因反复自然流产与PAI—I基因4G/5G多态性的关系潍坊市人民医院产二科付锦华自然流产是妊娠期常见的并发症之一，其发病率为10%—18%，原因不明的反复自然流产患者占其中的40—60%，近年来，提出遗传性易栓症与流产的概念，纤溶酶原激活剂抑制物—I（PAI—I）水平升高与血栓性疾病密切相关，且两者间存在基因多态性依赖关系[1，2] ，PAI—I基因启动因子区4G/5G多态性与早产、流产、死胎等妊娠并发症有关[3]，我们对PAI—I基因4G/5G多态性与反复自然流产的关系进行了研究，现报道如下：一、对象与方法1、对象：（1、）反复自然流产组：自2004年1月—2005年12 月来我院产科就诊，并经临床诊断的反复流产患者72例，平均年龄为29±4岁，所有患者既往有自然流产史（1—6次不等），本次妊娠出现先兆流产或B超诊断为宫内死胎，孕期均在3个月内，排除内分泌失调、感染、血型不合、生殖道异常等因素，夫妇双方外周血染色体检查核型正常，男方无精子畸形。
（2）、正常妊娠对照组，随机选择正常妊娠妇女74例，年龄23—28岁，孕周26—41周。
2、方法：（1）基因组DNA抽取采用酚/氯仿法。
（2）PAI-I 基因扩增：引物位于5ˊ端启动子区，序列参照文献[2]的方法设计，由sangon公司合成。
上游引物为；5，CACAGAGTCTGGCCACGT3，（C为非配对碱基）：下游引物为：CAGCCACGTGA TTGTCA TGGT3，。
潍坊市人民医院产二科（261041）PCR反应体系为25ul，含基因组DNA100ng，10×PCR缓冲液2.5ul，mgcl21.3mmol；dNTP s各0.2mmol，引物各0.3umol，TagDNA聚合1.0U。
PTC-100型扩增仪（美国MJ公司生产），循环参数：94℃30s、57℃30s、72℃30s35个循环，最后72℃延伸10min。
经2.5%琼脂糖凝胶电泳，EB 染色检测PCR产物。
妻子自然流产或有丈夫原因
妻子自然流产或有丈夫原因作者：王庆相来源：《健康博览》 2011年第8期□文/ 王庆相杭州市红十字会医院生殖医学中心有些夫妻婚后妻子反复发生自然流产，不能正常生育，一般会认为这是女方的原因，可实际上有时原因是在丈夫身上，作为提供胚胎半数基因的男方，也需要进行必要的检查以发现可能存在的相关因素。
反复自然流产（RSA）是指连续发生3 次或3 次以上的自然流产，多发生于孕期的前20~28 周，发生率约为0.5%，病因十分复杂多样。
反复流产的男方因素主要是体细胞和生殖细胞基因异常。
体细胞染色体异常多导致高流产率、低生育或不育率。
精子染色体数目或结构异常可导致流产风险的增加，主要影响因素有年龄、环境、疾病及医源因素等。
精子形态学或功能异常、DNA 的损伤等均与流产相关，其他损伤精子DNA 完整性的因素也可导致高流产率。
基因突变、高龄、感染和任何影响胎盘的父系基因异常都会有流产风险。
男方因素可影响怀孕生育的各种环节，包括胚胎发生、植入、流产和出生缺陷。
尽管很多研究还只是初步的，但已表明导致高流产率男性因素的重要性，有些情况下进行必要的预防、干预对减少男性因素引起的流产有积极作用。
研究发现的主要因素有下列：一、染色体不正常或基因原因染色体是人体细胞内具有遗传性质的物体，是基因的载体。
染色体异常有多种情况，可分别引起不同情况的生育异常。
染色体数目异常染色体整倍体性异常多发生自发性流产，少有存活胎儿。
非整倍体异常包括单体型、三体型和多体型，存活的子代多有明显异常的临床表现，常见的包括：三体综合症、克氏综合征等。
这些男性多合并低生育力或不育，并可导致50%或以上的高流产率。
双亲之一性染色体嵌合体，由于性染色体不分离或分离后期迟滞产生单体、三体或不能存活的非整倍体，因而其携带者也与反复自然流产发生有关。
研究发现，反复流产的发生只受性染色体影响，常染色体二倍及二倍体发生频次与普通人群并无差异。
与正常人群或对照生育组相比，妻子不明原因流产的男性精子的非整倍体性和二倍体性概率高于正常男性。
精液质量、精子DNA碎片指数与不明原因性自然流产风险的相关性分析
·89JOURNAL OF RARE AND UNCOMMON DISEASES, JUN. 2023,Vol.30, No.6, Total No.167【第一作者】王 楠，女，初级检验师，主要研究方向:检验。
E-mail：****************【通讯作者】王 楠·论著·精液质量、精子DNA碎片指数与不明原因性自然流产风险的相关性分析王 楠*河南省南阳市第一人民医院 (河南 南阳 473000)【摘要】目的 分析精液质量、精子DNA碎片指数与不明原因性自然流产的相关性。
方法 选取2020年1月至2021年12月在我院门诊就诊的配偶患有不明原因自然流产的男性101例作为病例组，选取同时期在我院进行健康体检的正常生育的男性80例作为对照组，比较两组研究对象的一般资料(包括年龄、吸烟、饮酒)、精液质量相关指标(包括：精子浓度、精子活率、精子畸形率)、精子DNA碎片指数，采用相关性分析法分析病例组中女方流产次数与年龄、吸烟、饮酒、精子浓度、精子活率、精子畸形率、精子DNA碎片指数的相关性。
结果 病例组男性的年龄显著高于对照组(P <0.05)，病例组男性的吸烟率、饮酒率显著高于对照组(P <0.05)，两组研究对象的精子浓度、精子活率、精子畸形率差异不显著(P >0.05)，病例组男性的精子DNA碎片指数更高(P <0.05)，相关性分析结果为：病例组中女性自然流产次数与男性年龄、吸烟量、饮酒量、精子DNA碎片指数呈正相关(P <0.05)，病例组中女性自然流产次数与男性精子浓度、精子活率、精子畸形率无相关性(P >0.05)。
结论 男性年龄、吸烟、饮酒、精子DNA碎片指数是导致不明原因性自然流产的风险因素，精液常规质量指标与不明原因性自然流产之间无相关性。
【关键词】精液质量、精子；不明原因性自然流产【中图分类号】R714.21【文献标识码】ADOI:10.3969/j.issn.1009-3257.2023.06.036Correlation Analysis of Semen Quality, Sperm DNA Fragmentation Index and Risk of Unexplained Spontaneous AbortionWang nan *.The First People's hospital of nanyang City, henan Province, nanyang 473000, henan Province, Chinaabstract: objective T o analyze the correlation between semen quality, sperm Dna fragmentation index and unexplained spontaneous abortion. Methods FromJanuary 2020 to December 2021, 101 male cases of unexplained spontaneous abortion with their spouses who visited the outpatient department of our hospital from January 2020 to December 2021 were selected as the case group,80 normal reproductive male cases who had undergone physical examination in our hospital during the same period were selected as the case group. in the control group, the general data (including age, smoking, drinking), semen quality-related indicators (including: semen density, sperm motility rate, sperm abnormality rate), sperm Dna fragmentation index were compared between the two groups, and the correlation analysis method was used to analyze The correlation between the number of women's abortion and age, smoking, drinking, semen density, sperm motility rate, sperm deformity rate and sperm Dna fragmentation index in the case group. Results The age of males in the case group was significantly higher (P <0.05), the smoking rate and drinking rate of males in the case group were significantly higher than those in the control group (P <0.05). There was no significant difference in sperm abnormality rate (P >0.05), and the sperm Dna fragmentation index of males in the case group was higher(P<0.05). Smoking, drinking, and sperm Dna fragmentation index were positively correlated (P <0.05). in the case group, there was no correlation between the number of spontaneous abortions in women and the semen density, sperm motility rate, and sperm abnormality rate in the case group (P >0.05). Conclusion Male age, smoking, drinking, and sperm Dna fragmentation index are risk factors for unexplained spontaneous abortion. There is no correlation between semen routine quality indexes and unexplained spontaneous abortion.Keywords : Semen Quality; Sperm; Unexplained Spontaneous Abortion 根据现有的医学科技水平有将近40%的复发性流产无法找到确切的病因，这一类的复发性流产被命名为不明原因性自然流产[1]。
女性染色体平衡易位携带者如何硬解生育难题
女性染色体平衡易位携带者如何硬解生育难题作者：罗勤来源：《家庭医学·下半月》2018年第08期2016年11月，武汉谢女士因多次不明原因流产，慕名来到华中科技大学附属同济医院生殖中心就诊。
经遗传学诊断，男方染色体正常，女方是一位染色体平衡易位携带者。
染色体平衡易位携带是复发性流产的主要遗传学因素。
生殖中心的医生决定采用最新的胚胎植入前遗传学诊断，即MaReCs技术，帮助谢女士实现生育愿望。
在实施过程中，患者的整个促排卵治疗比较顺利，经过前期体重控制和内分泌调理，促排卵后获得7枚卵子，体外受精胚胎培养第5天得到7枚囊胚，并进行激光活检滋养外胚层细胞。
通过MaReCs技术对7枚囊胚进行检测，结果显示有5枚囊胚为非整倍体囊胚，不能用于移植；l枚囊胚为平衡易位携带胚胎，不建议移植；仅1枚囊胚为整倍体（即正常核型）囊胚，可供移植。
对这枚正常胚胎进行高通量测序全基因组筛查，结果显示胚胎全基因组范围未见致病性微重复、微缺失。
幸运的是，这枚珍贵的胚胎被顺利移植进患者子宫，并成功妊娠。
在患者孕18周时，经羊水穿刺检查，结果显示胎儿染色体完全正常。
最终，在孕38周时，即2018年3月15日，成功分娩一健康女婴，实现了这对夫妇多年的求子夙愿。
最可喜的是，他们的女儿未来到了生育年龄，再也不会像妈妈一样承受反复流产的痛苦。
至此，湖北省首例运用MaReCs技术阻止染色体平衡易位遗传的患者成功受孕。
染色体平衡易位，主要难题是生育在生殖医学领域，染色体结构异常有多种，最常见的类型是染色体平衡易位，在新生婴儿中的发生率为111 000～1/500。
什么是染色体平衡易位呢？我们知道，正常人类的细胞中有23对（即46条）染色体，染色体的数量、结构是相对恒定的，不能随便多一点或少一点，否则就会出问题。
当某一条染色体上有一段“搬”到另一段染色体上，就称为染色体平衡易位（如下图所示）。
染色体平衡易位实际上是染色体遗传物质的“内部搬家”。
1558对复发性流产夫妇的细胞遗传学研究
1558对复发性流产夫妇的细胞遗传学研究赵静，郑梅玲，张桂林，卫小静，曹美婷(山西医科大学第一医院计划生育研究室，太原030001)摘要:目的通过对复发性流产夫妇的染色体核型分析，进一步了解染色体核型异常对复发性流产的影响。
方法对1998年5月—2009年4月11年间来我院的1558对(3116例)复发性流产夫妇进行外周血染色体核型分析。
结果检出异常核型178例，总异常率: 5.7%(178/3116)。
女性异常49例，其中数目异常1例，结构异常39例，染色体多态性9例。
男性异常129例，其中数目异常1例，结构异常19例，染色体多态性109例。
结论染色体异常是复发性流产的主要原因，在流产夫妇中行染色体检查对指导再次妊娠有重要意义。
关键词:复发性流产;染色体;核型异常中图分类号:R714.21文献标识码:B文章编号:1006－9534(2011)02－0050－02复发性流产(recurrent spontaneous abortion，RSA)是指连续2次或2次以上的自然流产。
发生率约占总妊娠数的1%，占自然流产数的15%。
RSA的原因非常复杂，染色体异常是导致RSA最主要的原因之一。
资料与方法1．研究对象:本文收集的1558对(3116例)夫妇均来自1998年5月—2009年4月到山西医科大学第一临床医学院遗传咨询门诊就诊的不明原因的RSA病人，女性年龄在22－41岁，男性年龄在22－46岁，流产次数≥2，夫妇双方均表型正常，身体健康。
2．染色体检查方法:抽取夫妇双方的静脉血各2ml，1640培养基37ħ培养72h，在培养结束前3h加入浓度为20μg/ml 秋水仙素8．5μl，常规收获制片，G显带，显微镜下计数形态、分散较好的中期分裂相30个，分析4个染色体核型，异常者核型分析及计数加倍。
结果1558对夫妇外周血染色体核型分析结果为:检出异常核型:174例，占受检者的5．6%(174/3116)。
自然流产夫妇262例染色体核型分析
Ｃ ｉ Ｃｉｉ ａｓＥｅｔ ｎｃＥ ｉｏ ）Ｆ ｂｕｒ ， １ 。 ０． ． ｏ３ ｈｎＪ ｌ ｃ ｎ（ ｌｃ ｏｉ ｄｔ ｎ 。ｅｒａｙ１２ １ ｖ １５ Ｎ ． ｎｉ ｒ ｉ ０
关 系 。 在 本 组 ２ ２例 自 然 流 产 夫 妇 中 多 态 性 染 色 体 检 出 １ ６ ５
例， 常染色体 ９例 ， 性染 色体 ６例 ， 及 １９ １ 、５ １ 、 １号 涉 、 、３ １ 、６ ２ 染色体 和 Ｙ染色体 ， 括次缢 痕的增 长及短 臂增 长 ， 出率 包 检
为 ５７ ， ． ％ 高于普通人群 ， 提示多 态性 染色体与 自然流产存 在
相 关 性 。其 原 因 可 能 为 结 构 性 异 染 色 质 并 非 毫 无 功 能 ， 在 其
维持染色体 结构 的 稳定 、 保护 常 染色 质 方 面可 能有 一 定作
用 。 异 染 色 质 的变 异 ， 可 能 影 响 细 胞 的 分 裂 ， 成 染 色 有 造
型总数 的 ７ ％ （４ ２ ） 高于女性的 ３ ％（ ／ ０ ； ０ １／ ０ ， ０ ６２ ） 常染 色体异常 比例与 性染色体 异常 比例均 为 ５ ％ ０ （０ ２ ） １／ ０ 。常染色体异常 ： 衡易位 ５例 ， 平 倒位 ５例 ； 性染 色体异 常 ： Ｙ ３例 ， 小 次缢痕增 长 ４例 ， 倒位
夫 妇 ， 出 ２ 异 常核 型 ， 常 核 型 比例 为 ７ ６ （０ ２ ２ ， 一 例 夫 妇 同 时 存 在 异 常 核 型 。 检 出 染 检 Ｏ例 异 ．％ ２ ／ ６ ） 无
论296例自然流产夫妇染色体核型分析
ｕ Ｈ
Ｉ ｕ Ｙ
上 Ｎｃ Ｅ日 医
Ｃ ＝ Ｈ 工ＮＡ Ｅ Ａ ＬＴ 工ＮＤｌ 刍 ３ － 日 Ｙ
论２ ９ ６ 槐当然 流产 夫妇染惫体棱型分析
郭伊 荃
长春 市 妇 产 医院 ， 吉 林 长春 １ ３ ０ ０ ０ ０
染 色 体 异 常 在 医学 临 床上 一直 是 人 们 十分 关 注 的 病 症 。 造 成 ２ ． ２ 染色体 核 型的异常 率 妇 女 自然 流 产 的常 见 因素 有 染 色体 异 常 ， 一 旦检 查 属 于染 色 体 异 全 部 患 者 自然流 产 １ 次至６ 次 的染 色 体 核 型 异常 检 出率 分 别 为 常的情况， 那 么轻 者 会 令 妇 女 自然 流 产， 严 重 的还 可 能生 出智力 低 ２ ． ６ ３ ％、 ３ ． ５ ７ ％、 ７ ． ３ ５ ％、 １ １ ． １ １ ％、 １ ０ ％、 ｌ ２ ． ５ ％， 在 患 者 自然 流产 ３ 次 下后者是先天畸形的胎儿” 】 。 所以， 近 年来 ， 生 殖技 术 水平 有 所 提 以 上 时 ， 其 染 色 体 核 型 异 常 的 检 出率 存 在 明显 增 加 （ Ｘ ２ ＝ １ ８ ． ０ ３ ５ ， Ｏ ． ０ ０ ５ ） ， 显示存 在着 非常显著差 异， 具 有统计 学意义 ， 见 表 高， 基 本 实 现 了能 够 通 过 胚 胎 植 入 等 医学 方 式 来 预 防 或 诊 断 。 已 Ｐ＜ 经 自然 流 产 过 的 夫 妇 在 生 育之 前 应 该 做 好 染 色体 的检 查工 作 ， 这 １ 。 并 且在 染 色体 核 型 中， 通 过 相 关 分 析 和 线 性 回归 分 析 ， 结 果 显
２ ８ 岁。
染色体是检查什么？染色体检查的作用【医学养生常识】
染色体是检查什么？染色体检查的作用
文章导读
染色体检查需要进行抽血检查，它能够帮助患者查出患者是否患有不育症以及习惯性流产，也能够帮助筛查某些遗传病以及胎儿是否会存在畸形。
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染色体是检查什么
染色体检查是抽血，具体说是取静脉血0.5ml，接种于特定的培养基中，68—72小时后收获细胞，经显带染色，在镜下放大1000倍，计数并分析核型。
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染色体的存在意义
精子和卵子的染色体上分别携带着父亲、母亲的遗传基因，上面记录着父母传给子女的遗传信息。
同样，当性染色体异常时，就可形成遗传性疾病。
染色体异常可致少精子症和无精子症，2%～21%男性不育症由此引起。
中西医结合治疗原因不明反复自然流产51例
应尽早拔除气管插管 ， 拔管后密切监 视患儿是否发 生通气不 足
和 缺 氧 ， 有 发 生 ， 及 时 二次 插 管 。 如 须 出入 量 的 调 整 也是 围术 期
处理的重点。 术后严格单位时间内的液体 出入量 ， 在术后早期 ，
原 因。 ２ 治疗 方 法
中药 ： 以补肾益气 ， 同摄 冲任方法 ， 自拟加 味寿胎饮 ： 菟丝
子、 黄芪各 ３ ， ０ｇ桑寄生 、 川断 、 杜仲各 １ ， ５ｇ熟地 ２ ， ４ｇ 白术 、 陈
妊娠黄体 ， 而且可抑 制子宫平滑肌收缩 ， 同时也可调整免疫 系 统， 减少孕后母儿双方由免疫不适应而致的反复 自然流产。 现代医学认为反复流产的原因以遗传 因素为最 ， 其次是母
兴 奋 增 强 下 丘脑 一垂 体 促 黄体 功 能 ， 进 卵 巢 黄 体 形 成 ， 持 促 维
５ 例均系住院保胎的反复 自然流产患者，年龄最小 ２ ｌ ５岁 ，
最大 ３ ４岁 。 既往 流 产 胎 次 ： ２胎 ２ ４例 ， ３胎 １ ５例 ， ４胎 ７例 ，
５胎 ４例 ， １ 停经月份， ６胎 例； 最短 ６ ， 周 最长 ２ 周 。 ８ 所有患者均
经尿 Ｔ 试验或 Ｂ超检查证实胚胎尚存活 ， ｒ 部分行妇科检查 ， 临
床均有少量阴道 流血 和腰腹下 坠感等症状 。既往有流产 、 早产
或 胎 死 腹 中 ２次 以上 ，绝 大部 分 反 复 自然 流 产 曾 行 Ｂ超 检 查 、
激素水平测定 以及夫妇染色体核型分析 ， 未找到确切 的流产 仍
示 胚 胎 或 胎 芽 尚存 活 ， 可 采 用 中西 医结 合 保 胎 ， 采 用 加 味 就 在
203对不良妊娠夫妇染色体核型分析
203对不良妊娠夫妇染色体核型分析100005辽宁省妇幼保健院遗传室不良妊娠包括反复流产、胚胎停育、死胎、死产、畸形儿妊娠史、生育史。
本研究对203例不良妊娠夫妇进行染色体核型分析，探讨染色体异常与不良妊娠的关系。
资料与方法一般资料：2006年1月～2010年6月收治203对不良妊娠夫妇。
患者年龄22～43岁，平均29.6岁。
染色体检查与分析：抽取静脉血2ml，常规外周血淋巴细胞培养72小时，制备染色体标本，G显带，吉姆萨染色，镜下计数30个中期分裂相，分析4个核型，嵌合体计数100个中期分裂相，以获得核型比例。
结果203对不良妊娠夫妇，染色体畸变21例（5.17%），染色体变异32例（7.88%）。
其中两对夫妇双方均有染色體核型变异，分别为46,XX,22s+、46,XY,21s+，流产2次；46,XX,1qh+、46,XY,21s+，流产3次。
结果见表1。
讨论染色体异常包括染色体畸变和染色体变异。
一般人群中有0.3%～4%的染色体异常发生率【sup】［1］【/sup】。
本研究染色体异常核型发生率13.05%，明显高于一般人群，提示不良妊娠的发生与染色体异常密切相关。
染色体畸变与不良妊娠：染色体畸变包括染色体数目异常和结构异常。
本研究染色体数目异常1例，占染色体畸变的4.76%，核型46,XX/47,XXX，自然流产3次，常为新发生的畸变，患者因月经异常可能不孕，若能生育其后代将有50%染色体核型畸变，导致流产机率增大。
染色体结构异常20例，占染色体畸变的95.24%，均为平衡易位携带者，显示平衡易位是不良妊娠夫妇最常见的染色体畸变。
因只发生染色体片段位置的改变而无遗传物质的缺失，故表型正常，但这种结构异常在生殖细胞减数分裂过程中可以产生不平衡配子，破坏了基因平衡导致不良妊娠结局。
女性（15例）多于男性（5例），这是因为平衡易位男性产生的异常精子常被选择性淘汰，受精能力也明显减弱，故一般不良妊娠患者女性平衡易位携带者多于男性。
精子染色质结构分析
精子染色质结构分析董语可153******** 1980年，精子染色质结构分析(Sperm Chromatin Structure Assay,SCSA)首次在Science(240:1131)上提出，精子染色后呈现红色或绿色荧光的显微照片被用作这一期杂志封面。
这一项生物技术发展至今，已被广泛应用于检测精子亚临床损伤、评估男性生育力和预测体外受精胚胎移植的成功率。
一、技术原理精子染色质分析利用吖啶橙的异染性与专用软件计算机界面的流式细胞仪相结合，快速识别带有不正常染色质结构的精子。
[6]哺乳动物精子DNA是遗传信息的载体，对繁衍后代具有重要意义。
这一特殊使命要求精子的染色质具有特殊结构。
与其他细胞不同，精子的染色质形成经过了加倍浓缩与组装。
在精子发生过程中，与DNA结合的核蛋白发生了从组蛋白→过渡蛋白→精核蛋白的组型转换。
早期精子形成阶段，圆形精子细胞伸长，合成的过渡蛋白取代了染色质内的组蛋白；晚期精子形成阶段，过渡蛋白又被精核蛋白取代，精子头部凝缩，精子核外形形成。
精核蛋白的体积仅有组蛋白的一半。
精子双链DNA围绕这些体积较小的精核蛋白形成染色质基本结构，而后通过精核蛋白分子内外的二硫键交联进一步浓缩，从而使染色体更为稳定。
在前列腺液Zn+作用下，余下的精子染色体形成过程（图片来源：/virtue/woocommerce/mammalian-protamines/）Science封面：精子染色后的荧光显微照片(v.240,p.1131,1980)游离巯基间形成共价键，精子核成熟。
这样的成熟精子遇酸能维持双链结构的稳定。
而对于受到损伤的不成熟精子，其精核蛋白中不具备二硫键，形成松散结构的染色质，DNA 在酸的作用下则会变性成单链。
吖啶橙(Scridine Orange,AO)可与双链DN A 结合呈单体形式发出绿色荧光,与单链DNA 结合呈聚合物形式发出红色荧光。
红荧光在总荧光中所占的比例反映了精子染色质结构的缩合水平,可通过各计算机界面流式细胞仪来评价。
男性染色体检查报告
男性染色体检查报告
检查对象：XXX（化名），男性，年龄28岁。
检查时间：2021年5月1日
检查结果：
经过本次男性染色体检查，我们检测到XXX携带了一个Y染色体和一个X染色体，属于正常男性染色体。
说明：
男性染色体检查是一种特殊的检查方法，可以确定某个男性个体是否存在性染色体异常。
在人类的性染色体系统中，男性的染色体组成为XY，女性的染色体组成为XX。
因此，男性染色体检查通常是针对是否存在Y染色体的检测。
本次检测结果表明，XXX的染色体组成为XY，不存在性染色体异常。
这对于了解个体的遗传状况、预防性别相关的疾病以及诊断某些不孕不育症状都有重要意义。
总结：
男性染色体检查是一种简单、快捷、可靠、无创伤的检查方法，可以对个体的遗传状况进行快速准确的分析，为人类的健康与疾
病防控提供有力支持。
不明原因复发性流产与精子DNA完整性的相关性研究探讨
付晓君 门波 孙自学 付澎丽 冯俊丽 梁卓△ 河南省中医医院生殖医学科，郑州 ４５０００２
【摘 要】 目的：分析与探讨不明原因复发性流产与精子 ＤＮＡ完整性的相互关系。方法：精子 ＤＮＡ 完整性的检验选用精子染色质扩散实验（ｓｐｅｒｍｃｈｒｏｍａｔｉｎｄｉｓｐｅｒｓｉｏｎ，ＳＣＤ），以精子 ＤＮＡ碎片指数（ＤＮＡｆｒａｇ ｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ，ＤＦＩ）表示。将符合条件的 ６５例男性患者作为实验组，随机选取配偶有正常妊娠史且无流产 史的 ６５例男性患者作为对照组，并分别测定两组男性精液相关参数和精子 ＤＦＩ。结果：实验组与对照组比 较，在年龄、禁欲时间、精液量、精子活率、精子密度差异无统计学意义（Ｐ＞００５）。实验组的 ＤＦＩ为（４０８９ ±１４５０），对照组的 ＤＦＩ为（２２８９±６９４），差异具有统计学意义（Ｐ＜００１）。结论：不明原因复发性流产与 精子 ＤＮＡ损伤存在一定的关系。
·１ ３２·
中国性科学 ２０１８年 ３月 第 ２７卷第 ３期 ＴｈｅＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌｏｆＨｕｍａｎＳｅｘｕａｌｉｔｙ Ｍａｒｃｈ，２０１８ Ｖｏｌ．２７Ｎｏ．３
·生殖健康·
ＤＯＩ：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１６７２－１９９３．２０１８．０３．０４２
不明原因复发性流产与精子 ＤＮＡ完整性的 相 关 性 研 究探讨
【第一作者简介】付晓君（１９８９—），女，在读硕士研究生，主要研究方向 为中医生殖。 △ 【通讯作者】梁卓，医师、硕士，Ｅｍａｉｌ：１２７２０７０１２９＠ｑｑｃｏｍ
ＤＮＡ碎 片 指 数，分 析 不 明 原 因 复 发 性 流 产 与 男 性 因 素 精 子 活 率、密度及精子 ＤＮＡ完整性的相关性。 材料与方法 １１ 一般资料
【Ａｂｓｔｒａｃｔ】 Ｏｂｊｅｃｔｉｖｅｓ：ＴｏａｎａｌｙｚｅａｎｄｄｉｓｃｕｓｓｔｈｅｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡａｎｄｕｎ ｅｘｐｌａｉｎｅｄｒｅｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎ（ＵＲＳＡ）．Ｍｅｔｈｏｄｓ：Ｓｐｅｒｍ ｃｈｒｏｍａｔｉｎｄｉｆｆｕｓｉｏｎｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔｗａｓｕｓｅｄｔｏ ｔｅｓｔｔｈｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙｏｆｓｐｅｒｍ ＤＮＡ，ｗｈｉｃｈｗａｓｅｘｐｒｅｓｓｅｄｂｙｓｐｅｒｍ ＤＮＡｆｒａｇｍｅｎｔａｔｉｏｎｉｎｄｅｘ．６５ｍａｌｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈ ＵＲＳＡｗｅｒｅｓｅｌｅｃｔｅｄａｓｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐ，ａｎｄ６５ｍａｌｅｐａｔｉｅｎｔｓｗｉｔｈｎｏｒｍａｌｐｒｅｇｎａｎｃｙｈｉｓｔｏｒｙｏｆｓｐｏｕｓｅｓａｎｄ ｎｏａｂｏｒｔｉｏｎｈｉｓｔｏｒｙｗｅｒｅｃｈｏｓｅｎａｓｔｈｅｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐ．Ｔｈｅｓｅｍｅｎｐａｒａｍｅｔｅｒｓａｎｄｓｐｅｒｍ ＤＦＩｏｆｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓｗｅｒｅ ｍｅａｓｕｒｅｄ．Ｒｅｓｕｌｔｓ：Ｔｈｅｒｅｗａｓｎｏｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅｉｎａｇｅ，ａｂｓｔｉｎｅｎｃｅｔｉｍｅ，ｓｐｅｒｍ ｃｏｕｎｔ，ｓｐｅｒｍ ｍｏｔｉｌｉｔｙａｎｄ ｓｐｅｒｍｄｅｎｓｉｔｙｂｅｔｗｅｅｎｔｈｅｔｗｏｇｒｏｕｐｓ（Ｐ＞００５）．ＴｈｅＤＦＩｏｆｔｈｅｅｘｐｅｒｉｍｅｎｔａｌｇｒｏｕｐｗａｓ（４０８９±１４．５０）ａｎｄ ｔｈｅＤＦＩｏｆｃｏｎｔｒｏｌｇｒｏｕｐｗａｓ（２２．８９±６．９４），ｗｉｔｈｓｔａｔｉｓｔｉｃａｌｌｙｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｄｉｆｆｅｒｅｎｃｅ（Ｐ＜００１）．Ｃｏｎｃｌｕｓｉｏｎ： ＴｈｅｒｅｉｓａｃｅｒｔａｉｎｒｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｂｅｔｗｅｅｎｕｎｅｘｐｌａｉｎｅｄｒｅｃｕｒｒｅｎｔｓｐｏｎｔａｎｅｏｕｓａｂｏｒｔｉｏｎａｎｄｔｈｅｉｎｔｅｇｒｉｔｙｏｆｓｐｅｒｍＤＮＡ．
40例男性性染色体异常核型分析
40例男性性染色体异常核型分析
吕军华;刘菲予;俞剑飞
【期刊名称】《中华医学遗传学杂志》
【年(卷),期】2006(023)006
【摘要】1．1 对象对来自妇产科门诊及遗传咨询门诊的40例男性患者进行染色体分析，主要为不育、无精子、小睾丸、生育异常儿、其妻习惯性流产等。
【总页数】1页(P703)
【作者】吕军华;刘菲予;俞剑飞
【作者单位】341000,江西省赣州市赣南医学院显微实验室;341000,江西省赣州市赣南医学院显微实验室;341000,江西省赣州市赣南医学院显微实验室
【正文语种】中文
【中图分类】Q3
【相关文献】
1.35例女性不孕患者性染色体异常核型分析及临床疗效
2.856例不育男性染色体核型分析
3.外周血淋巴细胞染色体核型分析在男性染色体异常诊断中的作用
4.512例少、无精子症患者及配偶不良孕产史的男性染色体核型分析
5.99例男性染色体异常核型分析
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3 讨论 染色体异常是引起流产的常见病因。对不明原因
作者单位: 河南省南阳市人口和计划生育指导中心 473000
料以 x s 表示, 组间比较采用 t 检验和 2 检验, P < 0. 05, 差异有统计学意义。
2 结果 两组染色体核型异常率差异有统计学意义( P <
0. 05) , 流产组中发现有 8 例异常核型, 其中 2 例染色 体易位, 1 例核型为 46, X Y , t ( 3; 15) ( p13 ; q22 ) , 另 1 例 核型为 46, X Y , t ( 10; 22) ( q25 ; q13 ) ; 2 例 lnv( 9) , 1 例核 型为 46, XY , lnv ( 9) ( p11 ; q13 ) , 另 1 例核型为 46, X Y, lnv ( 9) ( p11 ; q12 ) ; 2 例次缢痕延长, 核型均为 46, XY , 1 ( qh + ) ; 1 例 D、G 组 随 体 变 异, 核 型 为 46, XY ( 21pss) , 1 例大 Y, 核型为 46, XY( y> 18) 。
患者的丈夫作为流产组检查, 以 100 例生育男性为对照 研究。结 果 流 产组染 色体核 型异常率 、Y 染色体 微缺失
率与正常对照组相比差异有统计学意义( P< 0. 05) 。结 论 染色体核型异常、Y 染色体微缺失可能导致女方流产。
主题词 流产/ 遗传学; 染色体
中图分类号 R714. 21
提取外周血 DNA: 抽取患者外周血 2 ml, EDT A 抗凝, 用酚- 氯仿抽提 法常规 提取全 血基因 组 DNA。 PCR 扩增及电泳分析: 设置正常男性 阳性对照、女性 阴性对照、水为空白对照。PCR 总反应体系 10 l, 在 Amplitro n II P CR 仪 ( AM PL IT RON 公 司) 上 完 成 PCR 扩增反应。反应条件是: 预变性 94 6 min, 变 性 94 40 s, 55 45 s, 72 60 s, 35 个循环; 72 最后延伸 6 m in。PCR 反应结束后, 取出 P CR 产物, 加 6 上样缓冲液 1~ 2 l。混匀后点样于 1. 5% 琼脂 糖凝胶( 0. 5 g/ m l EB) , 80 v 电泳 35 min。紫外透射 仪观察结果, 记录电泳结果并拍照。 1. 3 统计学处理 采用 SPSS 14. 0 进行数据处理, 资
慢性病学杂志 2010 年 8 月第 12 卷第 8 期 Ch ronic Pat hemat ology Journal, A ugu st 2010 V ol 12 N o析
孟小波
摘要 目的 分析不明原因流产的男性因素。方法 利用染色体核型分析 , 以 98 例不明原因 流产 1~ 3 次
流产患者丈夫染色体核型分析, 发现染色体核型异常 率 8. 16% ( 8/ 98) , 与对照组 1% ( 1/ 100) 相比, 有统计 学意义( P < 0. 05) , 8 例中发现 2 例染色体易位, 其中 1 例染色体核型为 46, X Y , t ( 3; 15) ( p13 ; q22 ) , 临床表 现为其妻流产 2 次; 另 1 例染色 体核型为 46, XY, t ( 10; 22) ( q25 ; q13 ) , 临床表现其妻流产 2 次。染色体多 态性主要表现为异染色质变异, 特别是含有高度重复 DNA 结构异染色质, 分别位于人类染色体 1、9、16 和 Y 染色体异染色质区和每条染色体着丝粒区。本文发 现染色体多态 核型 6 例, 主要涉 及次缢痕延长 2 例、 inv( 9) 2 例、D、G 组随体变异 1 例, 大 Y 1 例。本资料 提示不明原因流产不仅与患者丈夫染色体异常有关, 且与染色体多态性也有一定关联。
近年研究证实: Y 染色体上的微小缺失可以造成 生精障碍, 导致无精子症或严重少精子症。文献[ 2] 报
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慢性病学杂志 2010 年 8 月第 12 卷第 8 期 Chronic Path emat ology J ou rnal, A ugust 2010 V ol 12 N o. 8
无精子症患者和 5% ~ 10% 严重少精子症患者存在 Y 染色体微缺失[ 3] 。然而对 Y 染色体微缺失与流产的 相关性研究甚少, D ew an 等[ 4] 研究发现 85% ( 14/ 17) 反复流产者的配偶存在 AZF c 区缺失, 认为 AZFc 缺 失与习惯性流产相关。本文对不明原因流产患者丈夫 进行 Y 染色体微缺失检测, 发现流产患者组有 6 例存 在 Y 染色体微缺失, 其中 2 例 sY255 位点缺失, 4 例 sY254, sY255 位点缺失, 这两个位点均位于 AZF c 区。 提示 Y 染色体 AZFc 区微缺失与流产有关。
文献标识码 A
文章编号 1674- 8166( 2010) 08- 0811-02
导致流产的病因很多, 本文对不明原因的流产患 者丈夫及正常生育男性进行了染色体核型分析, 比较 染色体核型异常率的差异, 探讨不明原因流产的男性 因素。
1 资料与方法 1. 1 一般资料 收集 2007- 01- 2009- 07 来自南阳市 计生中心不孕症门诊及妇科门诊, 以不明原因流产 1 ~ 4 次就诊的 98 例患者的丈夫作为流产组, 平均年龄 31 岁。随机选择 100 例有正常生育的男性志愿者为 对照组, 平均年龄 28 岁。 1. 2 方法 1. 2. 1 染色体核型检查 取外周血进行淋巴细胞培 养后, 常规制备染色体标本, G 显带分析计数 30 个中 期分裂相, 分析 3~ 5 个核型, 异常者加倍计数、分析, 结果按人类细胞遗传学国际命名体制( 1SCN, 1985) 进 行表述。 1. 2. 2 Y 染色体微缺失检测 引物设计: 9 对检测位 点为: sY 84, sY 86, sY 127, sY 134, sY 143, sY 157, sY 254, sY 255, sY 152。ZF X/ ZF Y 为 内控引 物。9 对引物和内控引物设计同文献[ 1] 。引物均由上海生工 物生工程技术服务有限公司合成。