甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的影响
小鼠卵母细胞体外成熟过程中热应激对胞质成熟的影响的开题报告
小鼠卵母细胞体外成熟过程中热应激对胞质成熟的
影响的开题报告
热应激是指生物体经历高温环境后所产生的生理反应，这种反应可
以影响细胞的生长、分化和发育。
在小鼠卵母细胞的体外成熟过程中，
热应激是否会影响胞质成熟与卵母细胞的受精能力仍然没有被充分明确。
本研究计划通过观察小鼠卵母细胞在不同高温条件下的体外成熟过程，探究热应激对胞质成熟以及卵母细胞受精能力的影响。
具体的研究
方案如下：
1. 分离并培养小鼠卵母细胞：采用小鼠卵巢切片法分离卵母细胞，
并建立卵母细胞的体外培养。
2. 热应激实验组的建立：设立不同高温（39℃、41℃、43℃）的实验组以模拟热应激。
3. 观测胞质成熟情况：采用荧光探针观测小鼠卵母细胞胞质内钙离
子浓度变化、荧光信号表达情况以及其他胞质成熟指标。
4. 检测卵母细胞受精能力：实验组卵母细胞与精子体外受精并观测
受精率，同时检测卵母细胞粒体功能情况。
通过上述实验设计，可以探究小鼠卵母细胞体外成熟过程中热应激
对胞质成熟以及卵母细胞受精能力的影响。
该研究结果对深入了解热应
激对卵子质量影响并为不育症治疗提供科学依据具有重要意义。
小鼠受精卵体外培养的影响因素
２ ｏ １ ６年 １ ２月 － 下
Ｕ
小鼠受精卵体外培养的影响因素
王 晓 佳
（ 辽宁省抚顺市农业特产学校 ， 辽宁 抚顺市 １ １ ３ １ ２ ３ ）
摘 要 哺 乳动 物 受精 卵在从 合子 发 育到 囊胚 的过程 中对能 量 、 蛋 白质 和其 他物 质所 需要 的量 和 种类都 有 所不 同。 从 受精 卵的成 熟来 看 ， 影响 因素 是 多方
有 研究 显示，３ ９ １ Ｅ时牛受精 卵的成 熟 率明显 高于 ３ ５ ℃、３ ７ ℃和 ４ ｌ ℃。 当温度 达 到４ １ ℃时有明 显危害 。 之后 也有 研究 结果 与其相 似， 发现不同温度下的培养效果差异
很 大， 当牛受精 卵在 ３ ４ 、３ ６ ℃和 ３ ８ ． ５ ℃下 培 养时 ， 效 果随温度 而提 高。 而小鼠体 外培 养 的最适宜温度是 ３ ８ — ３ ９ ℃。
口（ Ｔ Ｇ Ｆ －口） 。 ８激 素
的进展 ， 胚胎 的体外培 养技术显得越 来越重 要。 而在 培 养液 中添 加生 长 因子 、 激素 、 葡
氨基 酸是早 期胚胎培 养的 一种重要物 质， 具 体来说 ， 谷 氨酞胺 是胚胎 代谢的主 要
氮源 ， 可 以促 进胚胎细 胞的早 期分裂 ， 增 强 胚胎 体外发 育能 力；在 乳酸钠 存在的情 况
下。 谷氨酞胺对于 卵母细胞体外成 熟和胚 胎 体外 发育有 明显的促 进作用 ；牛磺酸除 了 能够促进胚胎发育外 ， 还具有 抗氧化 作用和 解毒作用 ： 甘氨 酸可以维持细 胞内渗透压， 增强胚胎对 高离子 浓度环境 的抗逆 能力。
５蛋 白质
胚 胎发育 阻滞和胚 胎基 因组转录都 与 胚胎 内蛋 白质合成有 关， 胚 胎培养液中蛋白 质 含量不足 与过剩都 会对早 期胚胎发育 有
环境激素类农药甲氧滴滴涕研究新进展
环境激素类农药甲氧滴滴涕研究新进展（作者:___________单位: ___________邮编: ___________）作者：李晓珩，沈秀微，庄秀秀，胡国新，葛仁山【关键词】环境激素;甲氧滴滴涕;生殖系统;毒性;综述文献近年来，在食品和饮用水中不断检测到农药的残留，其中一些农药，如有机氯农药已经被证明对人体具有致癌性和干扰内分泌系统的作用。
我国是农药大国，现在使用的农药中有机氯农药占了很大的比例。
经常使用的有机氯农药有DDT、六六六和DDT的类似物甲氧滴滴涕(MXC)、乙滴涕等。
作为DDT的结构类似物， MXC的生物活性范围与DDT大体上相同。
由于其在体内脂肪中积累或分泌到乳汁中的趋向较小，甚至没有，因此逐渐成为DDT的代替物，广泛使用于蔬菜和果树虫害的控制。
但是，近年来发现，MXC半衰期较长(6个月)，降解困难，在环境中有累积效应，对土壤和水域中的非靶标生物比如鱼类和水产品类都有一定的影响。
MXC主要通过食物链进入人体。
MXC急性中毒可以造成典型的有机氯中毒症状：易激惹性，肌肉震颤，随之出现阵发性、强直性抽搐，直至死亡。
长期慢性中毒可造成神经行为改变，乳腺癌，肝脏形态功能损害，以及生殖系统毒性。
所以MXC近年来受到社会各界的广泛关注，逐渐成为研究的主要热点之一。
现将目前国外MXC的毒性研究进展综述如下。
1 MXC的一般理化特性MXC又称甲氧氯，化学名称为l，1，1-三氯-2-2-双(对-甲氧苯基)乙烷[1，1，1-tfichloro-2-2-bis(p-methoxy phony1)ethane]，分子式Cl6Hl5Cl3O2，摩尔质量为345.65。
为无色晶体(原油为灰色粉末)，熔点89 ℃(原油77 ℃)，蒸气压很低，密度1.41(25 ℃)，水中溶解度0.1 mg/L(25 ℃)，醇、氯代烃类、酮类溶剂、植物油和二甲苯中溶解度440 mg/kg(22℃)，对氧化剂和紫外光稳定。
与碱反应，特别是有催化剂条件下反应迅速，失去氯化氢，但比DDT慢，曝光下颜色变成粉红色或棕褐色。
浅谈甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的毒性作用
甲氧滴滴涕曾广 泛应用于农业肥料、 家用作杀虫喷雾剂 、 人体和动物 的杀寄生虫的药物中。 关甲氧滴滴涕的生殖毒性 有 特别是对人和动物卵母 细胞过程 的影响研究报道相对很少。 因 此， 本文通过采用体外模 式培养小 鼠未成熟卵母细胞的方法 ， 了解 甲氧滴滴涕是否直接通过作用于卵母 细胞减数分裂进程
鼠卵母细胞 ； 对照组直接 用Ｈ 培养液培养 ， 组培养 时间均为２ ｈ ２ 激光共聚 焦观 察有丝分 裂纺 锤体 的形成 。 、 ２ 各 ４ 。、 ３ 培养 结束 时 在镜 下观察Ｈ Ｃ Ｘ 对卵丘扩 展的影响。 结论 ： Ｘ 对小 鼠卵母 细胞 的毒性作 用可通过直接作用于 卵母 细胞 。 ＨＣ 使其有 丝分
ｔ ａ ｎ ｎ ｎ ｅ ｄ ｓ ｏ ｉ ｂ ｅ ｖ ｔｏ ＸＣ ｏ ｕ ｒ ｉｉ ｇ ｉ ｎ ｏ ｃ ｐ ｃ ｏ ｓｒ ａｉ ｎ Ｍ ｎ ｃ ｍｕ ｕ ｘ ａ ｓｏ ｆｅ ｔ Ｃｏ ｃｕ ｉ ｎ：Ｍ Ｘ Ｃ ｏ ｍｏ ｓ ｏ ｙ ｅ ｔ ｘ ｃ ｔ ｌ ｓ ｅ ｐ ｎ ｉｎ ｅｆ ｃ ． ｎ ｌｓｏ ｎ ｕ ｅ ｏ ｃ ｔ ｏ ｉ ｉ ｙ
ｅ ｅ ｔｃ ｎ ｂ ｂ ａｎ ｄ ｂ ｉｅ ｔｒ ｌ ｎ ｔ ｏ ｙ ｅ ｈｅ ｍｉｏ ｉ ｐ ｎ ｌ ｏ ｍａ ｉｎ ｏ ｂ ｏ ｍａ ， ｔ ｅ ｅ ｎ ｂ ｔｎ ｆ ｃ ａ ｅ ｏ ｔ ｉｅ ｙ ａ ｄｒｃ ｏｅ ｉ ｈｅ ｏ ｃ ｔ ，ｔ ｔ ｔ ｓ ｉ ｄｅ ｆ ｒ ｔｏ ｆａ ｎ ｒ ｌ ｈ ｒｂｙ ｉｈｉｉｉ ｇ ｃ
ｏ ｏ ｙ ｅ ｑ ａｉ ｙ， ｔ ｎ ｉ ｆｕ ｎ ｅ ｓ ｂ ｅ ｕ ｎ ｍ ｂ ｙ ｅ ｅ ｏ ｍｅ ｔ ｃ ｕ ｉ ｇ ａ ｆ ｏ ｃ ｔ ｕ ｌｔ ｈｅ ｎ ｌ ｅ ｃ ｕ ｓ ｑ ｅ ｔ ｅ ｒ ｏ ｄ ｖ ｌ ｐ ｎ ， ａ ｓ ｎ ｍｉ ａ ｒ ａ ｅ ｃ ｓ ｒ ｉｇ ．
不同培养基对小鼠卵母细胞体外成熟质量及发育潜能的影响
不同培养基对小鼠卵母细胞体外成熟质量及发育潜能的影响田银;赵艳华;黄国宁;李竞宇【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2024(28)13【摘要】背景:近年,未成熟卵母细胞体外成熟技术的需求逐渐增加。
卵母细胞成熟受多种因素影响,其中培养基的选择尤为重要,目前尚无统一方案。
目的:用不同成熟培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,研究其对卵母细胞质量及发育潜能的影响。
方法:用G-1^(TM)PLUS培养基、CZB培养基和M16培养基对生发泡期卵母细胞体外成熟,并以体内成熟卵母细胞为对照组,比较各组间的体外受精和早期胚胎发育能力。
对于各组成熟后卵母细胞,采用免疫荧光方法评估线粒体功能,共聚焦显微镜实时成像系统检测钙震荡情况。
结果与结论:①3组之间第一极体排出率无明显差异(P>0.05);②G-1^(TM)PLUS组体外受精率(52.86±11.24)%高于M16组(37.76±6.70)%和CZB组(30.62±5.51)%;CZB组的囊胚率(36.23±6.63)%低于对照组(78.16±4.17)%、G-1^(TM)PLUS组(55.75±7.63)%和M16组(53.36±6.33)%;③与对照组相比,仅CZB组的纺锤体长宽比增加;④CZB组线粒体功能差于对照组、G-1^(TM)PLUS组及M16组,并出现CZB组线粒体异常凝集现象;⑤受精后CZB组及M16组的钙震动频率显著高于G1组和对照组。
综上所述,在小鼠卵母细胞体外成熟过程中,G-1^(TM)PLUS、CZB及M16培养基的体外成熟率无差异,但G-1^(TM)PLUS培养基有更高的受精率和囊胚形成率。
【总页数】6页(P2024-2029)【作者】田银;赵艳华;黄国宁;李竞宇【作者单位】重庆市妇幼保健院、重庆医科大学附属妇女儿童医院生殖医学中心;哈尔滨医科大学【正文语种】中文【中图分类】R459.9;R318;R394.1【相关文献】1.不同体外成熟时间对猪体外成熟卵母细胞孤雌胚胎发育的影响2.抗氧化剂半胱氨酸对小鼠卵母细胞体外成熟及发育潜能的影响3.激活素-抑制素-卵泡抑素系统对小鼠卵母细胞体外成熟及早期胚胎发育潜能的影响机制4.干细胞条件培养液对小鼠体外成熟卵母细胞发育潜能的影响5.不同浓度雷帕霉素对小鼠卵母细胞体外成熟及发育潜能的影响因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
甲氧滴滴涕对孕鼠生殖及其胎鼠发育的影响
甲氧滴滴涕对孕鼠生殖及其胎鼠发育的影响作者：王晓蓉，陈必良，马向东，常飞，生殖激素【关键词】甲氧滴滴涕；，生殖毒性；，发育毒性；Reproductive and developmental toxicity of raethoxychlor inpregnant mice and their foetuses【Abstract】 AIM: To explore the effects of methoxychlor (MXC)on reproduction and development in mice. METHODS: The pregnant micewere administered by oral gavage with MXC at different doses of 0，20， 100 and 200 mg/kg during day 12-17 of pregnancy. Meanwhile, other pregnant mice as a control group were gavaged sesame oil solvent inthe same manner. The changes in body mass and number of corpora luteaof the pregnant mice were observed; and the body mass and anogenital distance (AGD) of their Fl foetuses were recorded, too. Theconcentrations of estradiol (E2 ) and progesterone (P) in sera of the pregnant mice were determined using radioimmunoassay. RESULTS: Reproductive toxicity: with the increase of the administered MXC dose,the nidation quantity decreased, the AGD in the male foetusesexhibited shorter than that in the controls, and the concentrationsof E2 and P in sera went up. Significant differences in these indexeswere found between the MXC treated groups and the control group(P<0. 05). Developmental toxicity: with the increase of theadministered MXC dose, the gained weights of pregnant mice reduced,the quantity of live fetuses decreased， and the incidence of adverse pregnancy outcome (fetal death, absorption) went up. The differenceamong the differentdose MXC groups and the control group weresignificant difference (P<0. 05). CONCLUSION: MXC can disruptreproductive function, thereby resulting in dysgenesis andmaldevelopment in mice.[Keywords ] methoxychlor; reproductive toxicity; developmental toxicity; reproductive hormone【摘要】目的：研究甲氧滴滴涕(敗0染毒对孕小鼠生殖和胎鼠发育的影响.方法：将交配成功的雌鼠于孕12〜17 d每日给予不同剂量的MXC(0, 20, 100，200 0^八3灌胃，并设芝麻油溶剂为对照组，观察各组孕鼠体质量和黄体等计数测定，同时观察各组？1子代仔鼠的体质量和肛门生殖器距离等，采用放射免疫法检测孕鼠血清雌二醇伍2)和孕酮卬)含量.结果：生殖影响：随染毒剂量增加，母鼠子宫着床数减少，雄性胎鼠肛殖距（AGD) 缩短，孕鼠血清中E2 和？水平升高，呈不同剂量间差异，具有统计学意义$〈0.05).发育影响：随染毒剂量增加孕鼠体质量增长减少，活胎数下降，不良妊娠结局(死胎、吸收胎数）增多，呈不同剂量间差异,具有统计学意义(?<0.05).结论：似0可干扰孕小鼠的生殖功能，导致生殖和胎仔发育毒性.【关键词】甲氧滴滴涕；生殖毒性；发育毒性；生殖激素0引言环境污染对人类健康的影响一直是科学界所关注的问题.甲氧滴滴涕(methoxychlor, ^^0作为一种替代滴滴涕的有机氯杀虫剂，其杀虫效果明显，而生物毒性相对较低，因而在全球范围内得到广泛应用.但近年来的研究发现，肘扣仍然具有诸多方面的毒性作用[1-2]，尤其以生殖毒性引人注目，并发现肘乂0及其代谢产物在体内外具有雌激素样怍用和抗雄激素活性作用[3-4]，文建国等[5-6]也报道^«0对雄性生殖系统有一定的损害.而\«0对人类胚胎发育效应的研究报道较少.我们采用MXC染毒并分组观测孕小鼠的各项生理指标，旨在探讨MXC对孕小鼠生殖和胎鼠发育方面的影响.1材料和方法1. 1材料成年雄性昆明小鼠12只，成年雌性昆明小鼠24只，体质量均(28±3) ^由第四军医大学实验动物中心提供，自由采食，饮水，室温20〜22°C，昼夜交替为皿公司（纯度：99%,批号：49054)；芝14/10 h. ^0^标准品购自美国31§麻油为市售的纯正芝麻油；雌二醇(65廿3七01，E2 )和孕酮&1^§65丨610仙，P) 放射免疫试剂盒购于北京北免东雅生物研究所；放免丫计数仪，西安二六二厂生产，型号:2003?5;台式低温高速离心机，德国kendro公司，型号：D37520；电子分析天平，瑞士^^七化匸丁016<10公司生产，型号：AG135.1.2方法1. 2. 1动物分组及染毒雄鼠与处于动情前期的雌小鼠按1:2比例合笼交配，于次日清晨对雌鼠阴道涂片检查精子，以发现阴栓和查到精子为孕0 d.并按孕0 (1体质量随机分为对照组（芝麻油组），低剂量组（20 mg/ kg)，中剂量组（100 mg/ kg)和高剂量组（200 mg/ kg) 4个组，每组动物均为6只.将^«(：溶于芝麻油中，参照文献[7]的方法确定给药剂量，自妊娠第12日起每天灌胃染毒，灌胃量为0. 8 mL.对照组只给相当量的芝麻油.至妊娠第17日下午（染毒后 6 d)称重并处死孕鼠.1. 2. 2孕鼠生理指标及妊娠结局观察①体质量及增加的体质量变化：自孕0 d开始直至处死之日，每天称小鼠体质量，并观察记录生长状况.增加的体质量是指孕12，15和17(1孕小鼠的体质量与孕0 4体质量的差比较.②黄体数，着床数等计数及妊娠结局：于妊娠第17 ^剖腹统计胚胎着床数并在解剖镜下检测双侧卵巢黄体数目，记录活胎、死胎、吸收胎数及内脏外观畸形数，结果进行统计学处理.1. 2. 3出生后各组n子代生理及生殖指标检测记录每窝胎仔数，并测量每窝胎鼠的体质量、身长、尾长、肛殖距（肛门与生殖器之间的距离）及性别比.肛门与生殖器间距离（anogenital distance,AGD)目前己广泛用于评价男性化/男性体征消失指标的检测标准[8].1.2.4激素放免测定将各组小鼠眼球摘除取血，37。
不同抗氧化剂对小鼠体外受精胚胎发育的影响的开题报告
不同抗氧化剂对小鼠体外受精胚胎发育的影响的开题报告
研究背景：
抗氧化剂是指能够减少或阻止氧化反应的化学物质。
氧化反应是指物质与氧气接触时发生的化学反应，可能导致细胞和组织的损伤。
由于氧气在代谢中起着至关重要的作用，因此氧化反应在正常代谢过程中是难以避免的。
然而，氧气的氧化作用也可能导致生物体遭受损伤，因此抗氧化剂在保护细胞和组织免受氧化性损害方面具有天然的优势。
受精胚胎是指人或动物体中受精卵发育成为胚胎的初期阶段。
体外受精技术已经广泛应用于医学临床和动物繁殖中。
然而，在体外受精和胚胎培养的过程中，可能会因为氧化反应的影响而导致受精胚胎的发育受阻。
因此，研究不同抗氧化剂对受精胚胎发育的影响具有重要意义。
研究问题：
不同抗氧化剂对小鼠体外受精胚胎发育的影响是什么？
研究方法：
- 采用小鼠体外受精模型来研究不同抗氧化剂对胚胎的发育影响。
- 实验分为三组。
每组均设有对照组和实验组。
- 分别加入不同抗氧化剂（如维生素C、维生素E、葡萄籽提取物等）到培养基中，观察其对受精胚胎的发育是否有影响。
- 通过观察胚胎的形态和数量，以及相关基因和蛋白的表达变化来评估各组的受精胚胎发育情况。
研究意义：
- 研究不同抗氧化剂对受精胚胎发育的影响，可为体外受精和胚胎培养技术的改进提供理论依据。
- 在医学临床和动物繁殖中，应用抗氧化剂可降低氧化反应对胚胎的影响，提高成功率，对促进人类和动物生殖健康具有一定的现实意义。
小鼠卵母细胞体外成熟、体外受精的效果观察
小鼠卵母细胞体外成熟、体外受精的效果观察乌日琴;邓新燕;陈颖青;都同功;陈系古【期刊名称】《中国实验动物学报》【年(卷),期】1999(7)2【摘要】目的研究不同培养条件对小鼠卵母细胞体外成熟及体外受精率的影响.方法小鼠卵母细胞分别在含有FSH、BSA和胰岛素的培养液中体外成熟,在Whitten 氏液中体外受精,比较体外成熟率、体外受精率. 结果 1.裸卵(DO)的体外成熟率、体外受精率(81.4%,31.0%)均高于卵丘卵母细胞复合体(COC)(48.6%,27.1%).2.在培养液中添加FSH、胰岛素和BSA,卵母细胞的体外成熟率为77.9%,82.3%、60.7%;体外受精率为77.2%、72.6%、26.7%;2-细胞率为49.2%、34.2%、10.0%.胰岛素组的卵母细胞IVM率最高,但IVF率、2-细胞率低于FSH组.3.添加BSA的两组的体外受精率只有26.7%、25.8%,显著低于其他组,其体外成熟率也较添加FSH和胰岛素的组成.4.排出第一极体(PbI)的卵母细胞的体外受精率和2-细胞率(85.9%,22.4%)均高于GV期卵母细胞(71.1%,12.9%). 结论 1.卵丘卵母细胞(COC)较裸卵(DO)的体外成熟率、体外受精率都低,差异显著(P成熟＜0.01;P受精＜0.05).2.FSH和胰岛素均能提高小鼠卵母细胞的体外成熟率、体外受精率.3.BSA 可以降低小鼠卵母细胞体外受精率,差异极显著.4.GV期卵母细胞的体外受精率显著低于体外培养的排出第一极体的卵母细胞(P2-cell＜0.05,P受精＜0.05).【总页数】5页(P81-85)【作者】乌日琴;邓新燕;陈颖青;都同功;陈系古【作者单位】佛山科学技术学院农牧分院动医系组织胚胎教研室;中山医科大学实验动物中心，广州510089【正文语种】中文【中图分类】Q95【相关文献】1.C-ERBB2促小鼠卵母细胞成熟及在表皮生长因子调控小鼠卵母细胞体外成熟中的作用 [J], 郑莉萍;汪小浪;吴磊;郑月慧;高凤兰;肖秋香;李芳2.卵巢运输温度及卵母细胞促成熟因子对山羊卵母细胞体外成熟和体外受精的影响[J], 孙新明;戴彩华;罗婷3.LIF对小鼠卵母细胞体外成熟和体外受精效果的影响 [J], 周敏敏;丁海雷;钱红娟;赵振华;王杏龙4.小鼠腔前卵泡卵母细胞的体外培养、体外成熟和体外受精研究 [J], 李朝军;王斌;范必勤;刘智慧;阮金度5.影响小鼠卵母细胞体外成熟和体外受精效果的因素分析 [J], 乌日琴;邓新燕;陈颖青;都同功;陈系古因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
促性腺激素诱导小鼠卵母细胞体外成熟机制的研究的开题报告
促性腺激素诱导小鼠卵母细胞体外成熟机制的研究的开题报告标题：促性腺激素诱导小鼠卵母细胞体外成熟机制的研究摘要：卵母细胞的成熟是实现生殖的关键步骤之一，其异常会导致不孕症等疾病的发生。
因此，研究卵母细胞成熟机制对于生殖医学的发展具有重要意义。
促性腺激素（gonadotropin，GtH）作为调节卵母细胞发育过程的重要激素之一，因其具有高效、安全、便捷等特点，被广泛应用于卵母细胞体外培养的研究中。
然而，目前关于GtH诱导卵母细胞体外成熟机制的研究还不够深入。
本研究将通过体外培养小鼠卵母细胞并使用GtH进行诱导，探究GtH对卵母细胞成熟过程的影响及其可能的机制。
具体研究内容和方法：1. 小鼠卵巢组织的收获与处理：选取健康成年雌性小鼠，取出其卵巢组织，将其浸泡在PBS中，割去脂肪和结缔组织，用组织破碎机打碎，制备单细胞悬液用于后续培养。
2. 小鼠卵母细胞的体外培养：将小鼠卵母细胞悬液加入培养基中进行培养，分为实验组和对照组，实验组加入不同浓度的GtH。
观察卵母细胞的形态变化和发育情况。
3. 细胞活力和凋亡率的检测：通过荧光素酶法和流式细胞计数法检测卵母细胞的活力和凋亡情况，以评价GtH对卵母细胞成熟的影响。
4. 卵母细胞染色体分离和孢子形成的检测：在卵母细胞体外培养后，对卵母细胞进行染色体分离，进一步观察卵母细胞成熟的情况。
并通过荧光显微镜观察孢子的形成情况。
预期结果：通过对小鼠卵母细胞体外培养的实验和数据分析，研究将得出GtH对卵母细胞成熟的影响，以及其可能的机制。
这些成果将有助于增进人们对卵母细胞成熟机制的理解，为相关的临床研究提供理论和实验依据。
H3K4me3对猪卵母细胞体外成熟和早期胚胎发育的影响
曾毅仁, 张彩玉, 侯晗琦, 恽雪丹, 李湘萍
亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室,广西大学,南宁 530004
摘要:哺乳动物卵母细胞的成熟与组蛋白甲基化修饰密切相关.CPI-455是一种组蛋白去甲基化酶 抑 制 剂,可 特 异
性抑制组蛋白去甲基转移酶 KDM5A/B 的活性,提高 H3K4me3(组 蛋 白 H3 第 4 位 赖 氨 酸 三 甲 基 化)的 表 达 水 平.
本实验在猪卵母细胞体外成熟过程中添加 CPI-455,探究 H3K4me3组蛋白甲基化对猪卵母细胞体外 成 熟 和 早 期 胚
胎发育的影响.首先,用不同浓度 CPI-455在不同时间处理猪卵母细胞,发现在0~22h添加5μmolCPI-455的 处
理方法效果最佳,卵母细胞成熟率与囊胚形成率均显著高于未处理组(p<0.05).0~22h 添 加 5μmolCPI-455 处
卵母细胞中相关基因的表达,上调囊胚中多能性基因的表达,调控 H3K4me3的甲基化水平,从而促 进 猪 卵 母 细 胞
体外成熟和早期胚胎发育.
关 键 词:猪;卵母细胞;CPI-455;H3K4me3;体外成熟
中 图 分 类 号 :S828
文 献 标 志 码 :A
文章编号:1673 9868(2021)07 0045 07
收集不同时期的猪卵母细胞和孤雌囊胚,清洗干净后移入装有细胞裂解液的 EP 管中并于-80 ℃冰箱 保存.微量反转录按照试剂盒说明书进行操作,反转录得到的样品存放于-20 ℃备用.将反转录得到的产 物作为模板,进行qRT-PCR 检测,观察不同处理组基因的表达情况(表1).反应程序为:95 ℃进行5min, 95 ℃进行30s,60 ℃进行1min,共40个循环.猪的18S 作为内参基因,目的基因的相对表达量用2-ΔΔCT 法 计 算 ,引 物 设 计 和 试 验 方 法 参 考 文 献 [1]和 文 献 [5]. 1.3 统计与分析
《D4Mil1e调控小鼠雌性配子成熟及早期胚胎发育的机理研究》范文
《D4Mil1e调控小鼠雌性配子成熟及早期胚胎发育的机理研究》篇一一、引言在哺乳动物生殖生物学中，配子的成熟与早期胚胎发育是生殖过程中至关重要的环节。
D4Mil1e作为一种新近发现的生长因子，其在雌性生殖过程中的作用日益受到研究者的关注。
本研究旨在探究D4Mil1e调控小鼠雌性配子成熟及早期胚胎发育的机理，为深入理解其生殖调控机制提供理论基础。
二、材料与方法1. 材料实验采用小鼠为模型，所需试剂包括D4Mil1e蛋白、各类生长因子、相关酶等均采购自专业供应商。
2. 方法（1）配子成熟实验：通过体外培养法，观察D4Mil1e对小鼠卵母细胞成熟的影响。
（2）早期胚胎发育实验：通过显微操作技术，观察D4Mil1e 对小鼠受精卵早期发育的影响。
（3）分子生物学技术：运用PCR、Western Blot等技术，分析D4Mil1e基因在小鼠生殖过程中的表达情况及调控机制。
三、实验结果1. 配子成熟实验结果实验结果显示，D4Mil1e能够显著促进小鼠卵母细胞的成熟。
在体外培养条件下，添加D4Mil1e的卵母细胞成熟率明显高于对照组，卵母细胞质量也有所提高。
2. 早期胚胎发育实验结果在显微操作实验中，我们发现D4Mil1e对小鼠受精卵早期发育具有显著的促进作用。
添加D4Mil1e的受精卵发育至囊胚阶段的比例明显高于对照组，且胚胎质量较好。
3. 分子生物学实验结果通过PCR和Western Blot等技术，我们发现在小鼠生殖过程中，D4Mil1e基因的表达水平与配子成熟及早期胚胎发育密切相关。
D4Mil1e的表达水平在配子成熟和早期胚胎发育的关键时期显著上升，表明其在生殖过程中的重要作用。
四、讨论本研究表明，D4Mil1e在小鼠雌性配子成熟及早期胚胎发育过程中发挥重要作用。
通过体外实验，我们观察到D4Mil1e能够显著促进卵母细胞的成熟和受精卵的早期发育，提高胚胎质量。
此外，分子生物学实验结果显示，D4Mil1e基因在小鼠生殖过程中的表达水平与配子成熟及早期胚胎发育密切相关，表明D4Mil1e在生殖调控中具有重要地位。
甲氧滴滴涕对小鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响
ＡＢＳ ＴＲＡＣＴ Ｏｂｅ ｔ ｅ ：Ｔｏ ｏ ｓ ｒ ｅｔ ｅｅｆｃ ｆ ｔｏ ｙ ｈｏ ＭＸＣ）ｏ ｒ ｌ ｅ ａｉｎ ａ ｄａ ｏ ｔｓｓ ｊｃ ｉ ｖ ｂ ｅ ｖ ｈ ｆｅ ｔｏ ｈ ｘ ｃ ｌｒ（ ｍｅ ｎ ｐ ｏｉ ｒ ｔｏ ｎ ｐ ｐ ｏ ｉ ｆ
ｏｆｍ ｏ ｅ ｒ ｎｕｌ ｅ ｃ ｌｓ Ｍ ｅ ｈｏ ｕｓ ｓ ｇ ａ ｏｓ ｅｌ ． ｔ ｄｓ ：Ｔｈｅ ｅ ｆ ｃ ｆ Ｍ ＸＣ ｎ ｒ ｌｆ ｒ ｔｏ ｎｄ ａ ｏｐｔ ｓｓ ｏｆｇｒ ｎｕｌ ｅ ｃ ｌ ｗａｓ ｆｅ ｔ ｏ ｏ ｐ ｏ ｉｅ ａ ｉ ｎ ａ ｐ ｏ ｉ ａ ｏｓ ｅｌｓ
ｅｅ ｔｏ ｃｏ ｃ ｐ ｏ ｏ ｓ ｒ ｅ ｔ ｅｍｏ ｐ ｏｏ ｉａ ｈ ｎ ｅ ｆｅ ｈ ｃｉｎ ｏ ｌｃｒ ｎ ｍｉｒ ｓ ｏ ｙ ｔ ｂ ｅ ｖ ｈ ｒ ｈ １ｇｃ １ｃ ａ ｇ ｓａｔｒｔ ｅ ａ ｔ ｆＭＸＣ． ｓ ｌｓ ：① ＭＴＴ ｈ ｗｅ ｏ Ｒｅ ｕ ｔ ｓｏ ｄ ｔ ａ ｔ ｉ ｈ ａ ｇ ｆ（ ．５ １ ．０ ｖ ／ ，ＭＸＣ ｏ ｖｏ ｓｙ ｉｈｂ ｔｄｔ ｅ ｐ ｏｉ ｒ ｔ ｎ ｏ ｒ ｎ ｌｓ ｅｌ ｎ ａ ｈ ｔｗｉｈｎ ｔ ｅｒ ｎ ｅｏ ２ ～ ０ ） ｇ ｍｌ ｂ ｉｕ ｌ ｎ ｉｉ ｈ ｒ ｌ ｅ ａｉ ｆｇ ａ ｕｏ ｅｃ ｌ ｉ ｅ ｆ ｏ ｓ
示 ５ ，１ ．Ｏ ｇ ｍｌ Ｘ 处 理 组 卵 巢 颗 粒 细 胞 的 凋 亡 率 分 别 为 ２ ． 和 ４ ． ， 显 高 于 对 ．０ ０ ￣ ／ Ｃ Ｍ ７８ １７ 明
照组 的 ９ ９ （ ． Ｐ＜０ ５ ； 电镜 下 可见 卵巢颗 粒 细胞 呈典 型 凋亡样 改 变。结论 ： Ｃ 能明显抑 ．０ ） ⑧ ＭＸ
ｄ ｓ—ｅｅ ｄｎ ｎ ｅ ， ｎ ０ ０ ｇ ｍｌ Ｃ ｗｈｃ ｆ ｃｅ ｒｎ ｌｓ ｅ ｓ ｏ ６ｈｈ ｄｔｅｌｗｅｔ ｖｌｅ② ｏｅｄｐ ｎ ｅ ｔ ｍａ ｎ ｒ ａｄ１ ． ￣ ／ ＭＸ ｉ ａ ｅ ｔ ｇａ ｕｏｅｃｌ ｒ３ ａ ｈ ｈ ｆ ｄ ｌｆ ｏ ｓ Ａ ａｕ ；
重金属耦合剂和抗氧化剂在小鼠卵母细胞体外成熟前老化中的保护作用
重金属耦合剂和抗氧化剂在小鼠卵母细胞体外成熟前老化中的保护作用第一部分小鼠卵母细胞体外成熟前老化的染色体及线粒体分布变化研究背景近年来,临床生殖医学技术得到了飞速的发展,为无数不孕不育夫妻解决了生育小孩的问题。
而由于工作压力及生活等各种因素,许多妇女常常只能大龄生育。
然而,在绝经期来临之前,女性生殖力明显呈现出与年龄相关的下降趋势。
随着年龄的增长,尤其是超过35岁,卵子数量和卵母细胞的质量逐渐下降,从而导致越来越多不孕的问题。
因此,卵母细胞衰老的问题受到越来多的关注。
由于胚胎细胞质几乎直接来源于卵母细胞,因此卵母细胞的质量直接影响胚胎的后续发育能力。
在辅助生殖技术(ART)中,患者进行控制性促排卵(COH)治疗时,由于临床上促排卵方案种类繁多,需要根据患者个体化进行选择,因此每个患者在HCG刺激排卵前所用的促排卵的方案及所用时间各有不同。
然而,当不同卵母细胞在不同卵泡中刺激发育时并不完全是同步的,有些卵子在卵泡中发育得比较快,而有些卵子发育得较慢,这些不同步发育的卵子在HCG同一时间进行刺激排卵时,就会出现较早开始发育的卵子就有可能在HCG排出前在GV期就老化了,而有些卵子仍然处于年轻的阶段。
我们把这种在促性腺激素刺激排卵前卵子在GV期就发生老化的过程称为“卵子成熟前老化”。
这种情况在ART的患者中很常见,也会在高龄妇女或PCOS 患者中常常发生,这也可能是这些患者卵子质量低下胚胎发育不良的原因之一。
同时,这也可能是ART中患者取出的卵子数量很多,而最后形成正常胚胎进行移植的数量很少的原因之一,因为未成熟的卵子在成熟前就发生老化,会改变卵子的受精结局,非整倍体或染色体异常经常被认为是导致卵子不能受精或受精后形成染色体异常的胚胎,从而导致移植失败的重要原因之一。
而线粒体作为细胞中的主要产能场所,其分布及功能的变化也会极大的影响着细胞内各种生理活动的正常运转。
很少有人在这些成熟前就发生老化的未成熟的卵子上面进行研究,老化的卵子的染色体情况及其线粒体分布的变化目前仍然未知。
促性腺激素诱导大、小鼠卵母细胞体外成熟的差异
分类号：单位代码：10019 密级：学号：s01342硕士学位论文促性腺激素诱导大、小鼠卵母细胞体外成熟的差异Different Effects of Gonadotropins on Rat and MouseOocyte Maturation in vitro研究生：陈秀芬指导教师：夏国良教授申请学位门类级别：理学硕士专业名称：生理学研究方向：生殖内分泌所在学院：生物学院二零零四年六月独 创 性 声 明本人声明所呈交的论文是我个人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。
尽我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得中国农业大学或其它教育机构的学位或证书而使用过的材料。
与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示了谢意。
研究生签名：时间：年月日关于论文使用授权的说明本人完全了解中国农业大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅，可以采用影印、缩印或扫描等复制手段保存、汇编学位论文。
同意中国农业大学可以用不同方式在不同媒体上发表、传播学位论文的全部或部分内容。
(保密的学位论文在解密后应遵守此协议)研究生签名：时间：年月日导师签名：时间：年月日目录缩略词表 (I)摘要 (II)Abstract (III)第一章文献综述 (1)引言 (1)第一节哺乳动物卵母细胞的发育和成熟 (2)1.1 卵母细胞的生长发育 (2)1.2 卵母细胞成熟 (2)1.3 卵泡的生长发育 (2)第二节卵母细胞第一次减数分裂阻滞和恢复 (4)2.1卵母细胞第一次减数分裂阻滞 (4)2.2 第一次减数分裂恢复 (7)第三节卵母细胞发育和成熟的体外研究模型 (15)3.1 卵泡培养模型 (15)3.2 卵母细胞培养模型 (15)第二篇实验部分 (16)第一部分大鼠、小鼠卵母细胞体外自发成熟和促性腺激素诱导成熟的比较研究 (16)1.1 材料与方法 (17)1.2实验处理及结果 (20)1.3 讨论 (28)第二部分 CYP51蛋白在大鼠卵巢中的表达以及RS-21607对大鼠卵母细胞自发成熟的影响 (31)2.1 材料与方法 (31)2.2 实验结果 (35)2.3 讨论 (36)结论 (38)参考文献 (39)致谢 (46)作者简历 (47)缩略词表（Abbreviations）Monophosphate 环一磷酸腺苷AdenosinecAMP CyclicCEO Cumulus Enclosed Oocyte 卵丘包被的卵母细胞DAB 3,3’-diaminobenzidine 对氨基联苯Oocyte 去卵丘卵母细胞DO DenudedHormone 促卵泡激素FSH Follicle-StimulatingOocyte 卵泡包被的卵母细胞FEO Follicle-enclosedBreakdown 生发泡破裂VesicleGVBD GerminalGnRH Gonadotrophin Releasing Hormone 促性腺激素释放激素hCG Human Chorionic Gonadotropin 人绒毛膜促性腺激素HX Hypoxanthine 次黄嘌呤IBMX 3-Isobutyl-methylxanthine异丁基甲基黄嘌呤Hormone 黄体生成素LH LuteinizingMAPK Mitogen-Activating Protein Kinase 丝裂原蛋白激酶Sterols 促减数分裂甾醇ActivatingMAS MeiosisFactor 成熟促进因子MPF MaturationPromotingPB1 Polar Body 1 第一极体A 蛋白激酶AKinasePKA ProteinPKC Protein Kinase C 蛋白激酶CPMSG Pregnant Mare’s Serum Gonadotropin 孕马血清促性腺激素摘要卵母细胞体外成熟调控机理的研究对于开发卵巢中大量卵母细胞的资源，促进辅助生殖技术的提高具有重要的理论意义和应用价值。
不同化学激活方法对小鼠卵母细胞孤雌激活效果的影响
作 用 ， 以更 好地 了解 精 卵结 合 过程 中卵母 细 胞 内 可 信 号偶联过 程 、 活动力学 、 激 细胞周期 阻滞 的恢复 等
生理 机制 ． １ 材Biblioteka 料 和 方法 １ １ 材料 ．
卵母细胞 的孤雌 激活主要 有物理 方法 和化学方
法 ， 中化学激 活方法 中常用 的激活剂有 乙醇 、 其 离子 霉 素 、ｒＩ、 ＳＣ：钙离 子 载 体 、 白合 成 抑制 剂 等． 学 蛋 化
山羊等动物卵母细胞激活上得到了良好效果
．
尽 管对小 鼠卵母细胞 孤雌 激活 的研究 已有 一些 研究 ， 但对不 同化 学激 活 方 法激 活 小 鼠卵母 细 胞 的
效果 尚缺乏 系统性 的 比较 ， 试验 旨在 系统 地 探讨 本
１２ １ 卵母 细胞 的采 集和 体 外 成 熟培 养 ．．
收 稿 日期 ： ０９— ６— ６ ２０ ０ ２
基 金项 目：国家 自然科学基金资助项 目（０ ７７ ４ ３ ３０ ２ ）
作者简介 ： 张玉影（ ９２ ） 女 ， １ ８一 ， 安徽蒙城人 ， 华南师范大学 ２ ０ 级硕士研究生 ， ｍ ｉ ｓｎｙ３ ３ ６ ．ｏ ； ０４ Ｅ ａ ： ｕｎ３ １＠１３ ｃｍ 李雪 峰（ ９５ ） 男 ， ｌ １６一 ， 内蒙古乌
雌性 小
鼠腹腔注射 Ｐ Ｓ （ ． Ｕ 只）４ Ｍ Ｇ ７５Ｉ／ ，８ｈ后腹腔注射
ｈ Ｇ （０Ｉ／ ）进行超 排处理 ． Ｃ １ 只 Ｕ 注射 ｈ Ｇ后不 同时 Ｃ 间脱 颈椎 法处死 小 鼠 ， 出输 卵管 ， 取 划破 输卵管壶 腹
不 同的化学激 活条件 对小 鼠卵母细胞 孤雌激 活及体
饮水 ．
除孕马血清促性腺激素 （ Ｍ Ｇ， Ｐ Ｓ 宁波市激素制品
LIF对小鼠卵母细胞体外成熟和体外受精效果的影响
１ ３ 体 外成 熟 ．
将获 得 的 Ｃ Ｃ 和 Ｄ 分 别 在 上 述 的 培 养 液 中 洗 ２ Ｏ Ｏ ～３ 次 ， 入 预 先 平衡 ２ｈ的 培养 液 中 ， 于 ３ ℃ ， ％ Ｃ 饱 和 移 置 ７ ５ Ｏ， 湿 度 的 Ｃ 养箱 培 养 ， ０ 培 每隔 １ｈ观 察 结 果 ， 以排 出第 一 极
果提 供 参 考依 据 。
２ ２ 不 同浓度 Ｌ Ｆ对 卵母 细胞体 外成熟 、 外受精 ． Ｉ 体
的 影 响
在培 养 液 中 添 加 Ｌ Ｆ可 以促 进 小 鼠卵 母 细 胞 的体 外 成 Ｉ 熟 。但 卵母 细 胞 的成 熟 率 并 不 是 随 Ｌ Ｆ浓度 的 升高 而 升 高 ， Ｉ 添 加 ２ ｇｍｌ Ｌ Ｆ能 显 著 提 高 小 鼠 卵母 细胞 的体 外 成 ～６ｎ ／ 的 Ｉ 熟 率 、 外受 精 率 ， 中 添 加 ６ｎ ／ 的 ＬＦ效 果 最 好 ， 并 体 其 ｇ ｍｌ Ｉ 但 不 是 添 加越 多效 果 越 好 ， 当达 到 或 者 超 过 ８ｎ ／ 时 ， 鼠卵 ｇｍｌ 小 母 细 胞 的 成熟 率 随 Ｌ Ｆ浓 度 的 升高 反 而 有 所 下 降 。 Ｉ
收 集 卵丘 卵 母 细 胞复 合 体 （ ＯＣ 和有 生 发泡 的裸 卵 （ Ｏ）采 Ｃ ） Ｄ ， 卵 过 程控 制 在 ３ ｎ之 内。 ０ｍｉ １ ２ 培 养 液 ． Ｄ Ｍ 培养 液 （ 糖 ） ５ ＭＥ 低 加 ％胎 牛 血 清 （ 州 四 季 青 公 司 杭 产 品 ） 青 霉 素 １ Ｕ／ ｌ链 霉 素 １ Ｕ／ ，Ｆ Ｈ １ Ｕ／ ｌ 、 ０Ｉ ｍ 、 ０ Ｉ ｍｌ Ｓ ０ Ｉ ｍ （ 波 第 二 激 素 厂 产 品 ） 分 别 加 入 ０ ２ ４ ６ ８ １ 、０ｎ ／ ｌ 宁 、 、 、 、 、 、０ ２ ｇ ｍ 的 Ｌ Ｆ ｓ ｍ 公 司 产 品 ） 自配 改 进 的 Ｗ ｈｔ ｎ ｓ Ｉ（ｇ ａ ｉ 。 ｉ ｅ ’ 受精 液 ］ ｔ 。
甲氧滴滴涕对雄性小鼠生殖细胞周期的影响
甲氧滴滴涕对雄性小鼠生殖细胞周期的影响文建国;赵国军;唐国华;杨静【期刊名称】《医学临床研究》【年(卷),期】2004(021)012【摘要】[目的]探讨甲氧滴滴涕(MXC)对雄性小鼠生殖细胞周期的影响及其可能机制.[方法]50只成年雄性昆明小鼠随机分为5组,其中3组喂服MXC分别为7 d、14 d和21 d,1组同时喂服MXC和VitE 21 d,1组为正常对照组.应用免疫组化SABC法检测生精小管增殖细胞核抗原(PCNA)的表达情况,采用流式细胞术检测生精细胞周期的变化.[结果]PCNA阳性细胞位于生精小管基底部,PCNA的表达受到MXC的影响,各处理组PCNA的阳性细胞数皆较对照组明显减少,阳性细胞排列不连续.随作用时间延长,阳性细胞更少(P<0.05),流式细胞术测定G0/G1期细胞和S 期细胞的构成比下降(P<0.05),G2/M期的细胞在MXC喂服各组均明显增高(P<0.01),上述情况尤以21 d组为最(P<0.001).无论是PCNA反应还是流式细胞计数,VitE组的受损程度皆较染毒时间相同的21 d组要明显轻微.[结论]MXC可抑制生精细胞的DNA复制,干扰细胞周期,产生生殖毒性作用,且作用强度随染毒时间延长而增加,但其毒性程度可被VitE减轻.【总页数】4页(P1348-1351)【作者】文建国;赵国军;唐国华;杨静【作者单位】中南大学湘雅医学院组织学与胚胎学教研室,湖南,长沙,410013;中南大学湘雅医学院组织学与胚胎学教研室,湖南,长沙,410013;南华大学医学院,湖南,衡阳,421001;中南大学湘雅医学院组织学与胚胎学教研室,湖南,长沙,410013【正文语种】中文【中图分类】R321.1【相关文献】1.甲氧滴滴涕的生殖毒性及研究进展 [J], 侯蕾;陈必良2.甲氧滴滴涕对雄性小鼠生精细胞p34cdc2和cyclinB1的影响 [J], 杨静;文建国;赵国军;张彬;黄河;陈庆林3.甲氧滴滴涕对孕鼠生殖及其胎鼠发育的影响 [J], 王晓蓉;陈必良;马向东;常飞4.甲氧滴滴涕对雄性大鼠生精细胞的细胞周期影响 [J], 唐国华;贺修胜;何淑雅;唐新民5.甲氧滴滴涕对雄性大鼠生殖细胞毒性的影响 [J], 唐国华;唐朝克;贺修胜;何淑雅因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
甲氧滴滴涕对小鼠颗粒细胞的毒性损伤及其卵巢组织线粒体的氧化应激机制
甲氧滴滴涕对小鼠颗粒细胞的毒性损伤及其卵巢组织线粒体的氧化应激机制王博;陈必良;马向东;马佳佳【期刊名称】《第四军医大学学报》【年(卷),期】2008(029)006【摘要】目的: 观察甲氧滴滴涕(MXC)对雌性小鼠颗粒细胞的毒性损伤及其卵巢组织的氧化应激机制.方法: 将40只雌性昆明小鼠随机分为16,32,64mg/(kg·d)组及溶剂芝麻油组(对照组),连续20天经腹腔注射染毒MXC,末次注射MXC24 h 内处死小鼠,TUNEL法、透射电镜观察卵巢颗粒细胞凋亡情况;激光共聚焦显微镜检测小鼠卵巢线粒体活性氧簇(ROS)、线粒体膜电势,紫外分光光度法检测线粒体呼吸链复合物Ⅰ活性变化.结果: TUNEL法显示32,64 mg/kg组凋亡细胞数(40.87±3.31),(47.12±7.20 )较16 mg/kg组(14.00±1.85) 及对照组(13.25±1.67)增加,电镜下见凋亡小体等典型凋亡形态学改变,卵巢组织线粒体膜电势,呼吸链复合物Ⅰ活性在32,64 mg/(kg·d)组低于对照组(P<0.01),线粒体ROS水平则较对照组增高(P<0.01).结论: MXC可以通过引起卵巢组织的氧化应激诱导颗粒细胞凋亡发挥其促进卵泡闭锁的毒性作用.【总页数】4页(P542-545)【作者】王博;陈必良;马向东;马佳佳【作者单位】第四军医大学西京医院妇产科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院妇产科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院妇产科,陕西,西安,710033;第四军医大学西京医院妇产科,陕西,西安,710033【正文语种】中文【中图分类】R321.1【相关文献】1.甲氧滴滴涕对卵巢组织及子代发育的影响 [J], 王博;陈必良2.甲氧滴滴涕对雌性大鼠性腺毒性作用及其机制研究 [J], 常飞;汪惠文;陈必良;马向东3.甲氧滴滴涕对小鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响 [J], 王宝平;马向东;马佳佳;陈必良4.浅谈甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的毒性作用 [J], 高苗5.浅谈甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的毒性作用 [J], 高苗因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
甲氧滴滴涕对小鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响
甲氧滴滴涕对小鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响王宝平;马向东;马佳佳;陈必良【期刊名称】《陕西医学杂志》【年(卷),期】2008(37)4【摘要】目的:探讨甲氧滴滴涕(MXC)对小鼠卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响.方法:MTT法测定卵巢颗粒细胞在MXC作用后的细胞活力(A值);流式细胞技术检测细胞凋亡变化;电镜观察细胞的形态学改变等;综合评价MXC对卵巢颗粒细胞增殖和凋亡的影响.结果:①MTT法测得MXC在(2.5～10.O)μg/ml浓度范围内能明显抑制卵巢颗粒细胞的增殖,并具有浓度依赖性,10.0μg/ml MXC作用36 h的卵巢颗粒细胞A值最低;②流式细胞仪检测结果显示5.0,10.0μg/ml MXC处理组卵巢颗粒细胞的凋亡率分别为27.8%和41.7%,明显高于对照组的9.9%(P＜0.05);③电镜下可见卵巢颗粒细胞呈典型凋亡样改变.结论:MXC能明显抑制小鼠卵巢颗粒细胞增殖,并具有显著促进颗粒细胞凋亡的作用.【总页数】3页(P415-417)【作者】王宝平;马向东;马佳佳;陈必良【作者单位】第四军医大学西京医院妇产科,西安,710033;第四军医大学西京医院妇产科,西安,710033;第四军医大学西京医院妇产科,西安,710033;第四军医大学西京医院妇产科,西安,710033【正文语种】中文【中图分类】R9【相关文献】1.甲氧滴滴涕对雄性小鼠生精细胞p34cdc2和cyclinB1的影响 [J], 杨静;文建国;赵国军;张彬;黄河;陈庆林2.甲氧滴滴涕对雄性小鼠生殖细胞周期的影响 [J], 文建国;赵国军;唐国华;杨静3.甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的影响 [J], 高苗;陈必良;马向东4.低浓度 p，p′-滴滴涕对大肠腺癌 SW620细胞增殖和凋亡的影响 [J], 刘建新;赵君宇;晋小婷;李卓玉;宋莉5.小鼠胚胎植入前暴露甲氧滴滴涕和雌二醇影响出生后发育 [J], 苑洪菲;王晓蓉;于波;张树林;施宏宇;陈必良因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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甲氧滴滴涕对小鼠卵母细胞体外成熟的影响【摘要】目的：观察甲氧滴滴涕(MXC)对小鼠卵母细胞体外成熟的影响. 方法：实验组小鼠未成熟卵用7.25, 14.5，29 mg/L MXC 不同浓度培养液培养；对照组小鼠未成熟卵直接用合成人输卵管培养液培养，两组培养时间均为24 h. 观察各组生发卵泡破裂(GVBD)和第一极体(PB1) 的形成, 出现PB1的卵母细胞视为核成熟. 结果：培养24 h时，卵母细胞GVBD发生率7.25 mg/L MXC组为80.4%，14.5 mg/L MXC组为78.8%，29 mg/L MXC组为78.4%，与对照组的86%相比较并没有明显改变. 培养过程中不同浓度MXC试验组GVBD发生较同期对照组相比较也没有明显延迟. 但在培养液培养24 h时PB1的排出率7.25 mg/L MXC组为52.8%，14.5 mg/L MXC组为44.4%，29 mg/L MXC组为22%，明显低于对照组的71.2%，差异具有统计学意义(P<0.05). 结论： MXC对体外培养的小鼠卵母细胞GVBD发生没有影响，但能抑制其卵母细胞的核成熟.
【关键词】甲氧氯；卵母细胞；体外研究; 细胞培养技术
【Abstract】AIM: To investigate the effect of Methoxychlor (MXC) on in vitro maturation of mouse oocytes. METHODS： The oocytes in experimental groups were cultured in hunan tubal fluid(HTF) medium supplemented with 7.25，14.5，29 mg/L MXC and the oocytes in the unexposed control group were
cultured in HTF medium for 24 h. Germinal vesicle breakdown (GVBD) and the first polar body (PB1) extrusion were observed in all groups. RESULTS: After 24 h of culture, the incidence of GVBD in experimental group(7.25 mg/L, 14.5 mg/L and 29 mg/L MXC) was 80.4%, 78.8% and 78.4% respectively, which was on obvious varience compared to the unexposed control. the process of GVBD occured without any significant delay. The first polar body extrusion of mouse oocytes after 24 h of incubation in the presence of MXC (7.25 mg/L: 52.8%; 14.5 mg/L:44.4%;29 mg/L:22%) was significantly lower than than in the unexposed comtrol group (71.2%). CONCLUSION: MXC could decrease the rate of normal nuclear maturation of mouse oocytes in vitro but exert little impact on the GVBD was seen.
【Keywords】 methoxychlor；oocytes；in vitro; cell culture techniques
0引言
甲氧滴滴涕(methoxychlor, MXC)是一种替代滴滴涕的有机氯杀虫剂，因其杀虫效果明显，生物毒性相对较低，在许多国家得到广泛应用. 常飞等［1-2］通过大鼠染毒实验发现雌性生殖系统对MXC
非常敏感，MXC可导致早期流产、出生呼吸窘迫、生长发育迟缓和青春期性发育异常；可干扰孕小鼠的生殖功能, 导致生殖和胎仔发育毒性［3］；能改变小鼠的受孕和妊娠的维持［4］等. 而目前有关MXC 对体外卵母细胞成熟和受精及胚胎发育的影响的报道却很少. 我们采用MXC体外培养小鼠未成熟卵母细胞，观察MXC对体外成熟时生发泡破裂(germinal vesicle breakdown，GVBD)和第一极体(the first polar body, PB1)形成的影响，为进一步研究MXC对小鼠卵母细胞发育能力的影响提供依据.
1材料和方法
1.1材料
未成熟卵母细胞取自8~12周龄雌性昆明白小鼠，体质量20~25 g (由第四军医大学实验动物中心提供)；MXC(美国SIGMA公司)；孕马血清促性腺激素(PMSG，杭州第二激素制品厂)；合成人输卵管培养液(HTF，第四军医大学西京医院妇产科实验室提供)；二甲基亚砜(DMSO，美国Amresco公司).
1.2方法
1.2.1卵母细胞培养液的配制将MXC完全溶解于DMSO，-70℃。