实验六淀粉酶的专一性和温度pH激动剂抑制剂对酶活性的影响
实验五激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响
实验五激活剂、抑制剂、温度及PH对酶活性的影响一、目的要求通过实验加深对酶性质的认识，了解测定α-淀粉酶活力的方法。
二、实验原理酶是生物体内具有催化作用的蛋白质，通常称为生物催化剂。
酶催化的反应称为酶促反应。
生物催化剂催化生化反应时具有：催化效率好、有高度的专一性、反应条件温和、催化活力与辅基，辅酶，金属离子有关等特点。
能提高酶活力的物质，称为激活剂。
激活剂对酶的作用有一定的选择性，其种类多为无机离子和简单的有机化合物。
使酶的活力中心的化学性质发生变化，导致酶的催化作用受抑制或丧失的物质称为酶抑制剂。
氯离子为唾液淀粉酶的激活剂，铜离子为其抑制剂。
应注意的是激活剂和抑制剂不是绝对的，有些物质在低浓度时为某种酶的激活剂，而在高浓度时则为该酶的抑制剂。
如氯化钠达到约30%浓度时可抑制唾液淀粉酶的活性。
酶促反应中，反应速度达到最大值时的温度和PH值称为某种酶作用时的最适温度和PH值。
温度对酶反应的影响是双重的：一方面随着温度的增加，反应速度也增加，直至最大反应速度为止；另一方面随着温度的不断升高，而使酶逐步变性从而使反应速度降低。
同样，反应中某一PH范围内酶活力可达最高，在最适PH的两侧活性骤然下降，其变化趋势呈钟形曲线变化。
食品级α-淀粉酶是一种由微生物发酵生产而制备的微生物酶制剂，主要由枯草芽孢杆菌、黑曲霉、米曲霉等微生物产生。
但不同菌株产生的酶在耐热性、酶促反应的最适温度、PH、对淀粉的水解程度，以及产物的性质等均有差异。
α-淀粉酶属水解酶，作为生物催化剂可随机作用于直链淀粉分子内部的α-1,4糖苷键，迅速地将直链淀粉分子切割为短链的糊精或寡糖，使淀粉的粘度迅速下降，淀粉与碘的反应逐渐消失，这种作用称为液化作用，生产上又称α-淀粉酶为液化淀粉酶。
α-淀粉酶不能水解淀粉支链的α-1,6糖苷键，因此最终水解产物是麦芽糖、葡萄糖和α-1,6键的寡糖。
本实验通过淀粉遇碘显蓝色，糊精按其分子量的大小遇碘显紫蓝、紫红、红棕色，较小的糊精（少于6个葡萄糖单位）遇碘不显色的呈色反应，来追踪α-淀粉酶作用于淀粉基质的水解过程，从而了解酶的性质以及动力学参数。
实验二_温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响_预习
实验二温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响温度、p H 对酶活性的影响一、实验目的了解温度对酶活性的影响。
了解酶活性的最适pH 及掌握种检测最适pH 的方法。
二、实验原理（请同学们自已补充）三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取 3 支试管，编号后按下表加入试剂试管编号试剂1230.2%淀粉溶液（d） 1.5 1.5 1.5稀释唾液/ml11无煮沸过的稀释唾液/ml无无1摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。
10min 后取出，将 2 号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3 号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
将 2 号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min 后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。
注意事项：唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min 后，使其流入量筒，并稀释到50ml。
2、pH对酶活性的影响取 4 个标有号码的20ml 试管。
用吸管按下表添加0.2mol/L 磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L 柠檬酸溶液以制备pH=5.0~8.0 的 4 种缓冲液试管编号试剂12345.16.07.79.70.2mol/L 磷酸氢二钠/ml55224.8 3.9 2.20.20.1mol/L 柠檬酸/ml5588pH5 5.8 6.88从 4 个试管中各取缓3ml，分别注入 4 支带有号码的试管中，每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml 和稀释唾液2ml。
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。
将各试管内容物混匀，并依次置于37 摄氏度恒温水浴中保温。
第 4 管加入唾液2min 后，每隔1min 由第 2 管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加 1 滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。
待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。
添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第 1 管起，均为1min。
实验6 影响酶活性的因素
2
步骤
取三只试管，按下表加入试剂。
试 管 号 0.1% 硫 酸 铜 1%氯化钠 氯化钠 蒸 馏 水 0.1% 淀 粉 淀粉酶 碘—碘化钾溶液 碘化钾溶液 8 \ 1ml \ 3ml 1ml 2—3d \ \ 3ml 1ml 2—3d 9 1ml 10 \ \ 1ml 3ml 1ml 2—3d
混匀37 保温10—15min冷却。 冷却。 混匀 ℃保温 冷却
六思考题
1. 激动剂和抑制剂有哪几种类型？其作用原理是什么？ 2．温度和pH影响酶活性的原理是什么？ 3．联系实验结果及所学理论，说明pH对酶活性的影响有什么规 律和实际意义？ 4. 酶作为生物催化剂具有哪些特征？ 5. 进行酶学实验必须注意控制哪些条件？为什么？
向各试管中加入淀粉酶的时间尽量保持一致。 向各试管中加入淀粉酶的时间尽量保持一致。将各 试管内容物混匀，并依次置于37 恒温水浴中保温。 37ºC 试管内容物混匀，并依次置于37 C恒温水浴中保温。
2
步骤
第8管加入淀粉酶2min后，每隔1min由第7管 取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1小 滴碘 化钾—碘溶液，检验淀粉的水解程度。待混合 液变为黄色时，向所有试管依次添加1—2滴碘 化钾—碘溶液。添加碘化钾—碘溶液的时间尽 量保持一致.
混匀，37℃保温15min. ℃
Benedict 2ml 2ml
混匀，沸水浴中煮2 3min。观察有无黄色沉淀产生。 黄色沉淀产生 混匀，沸水浴中煮2—3min。观察有无黄色沉淀产生。
二 温度对酶活力的影响
1 原理
酶的催化作用受温度的影响，在最适温度下，酶的 反应速度最高。大多数动物酶的最适温度37—40℃ ，植 物酶的最适温度为50—60℃ 。酶对温度的稳定性与其存 在形式有关。有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃ ，其活 性并无明显变化，但在100℃的溶液中却容易失活。低温 能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。
温度、pH、活化剂和抑制剂对酶活性的影响
实验题目：温度、pH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响实验原理：1.唾液淀粉酶作用的底物--淀粉，可以被分解成各种糊精、麦芽糖等水解产物。
2.淀粉被酶水解速度的变化，可以利用其产物遇碘呈不同颜色来观察。
3.淀粉遇碘呈蓝色；糊精按分子从大到小的顺序，遇碘可呈蓝色、紫色、暗褐色和红色；最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈颜色反应（棕黄色）。
实验步骤：⒈收集唾液：用少量蒸馏水漱口。
取小漏斗一支，垫以小块脱脂棉，过滤唾液，收集约2毫升，用蒸馏水稀释 10 倍左右，混合后备用。
⒉取试管2支，各加稀释唾液约3毫升，一管直接加热煮沸，另一管置冷浴中预冷10分钟。
⒊另取试管4支编号按下表操作：步骤、编号 1 2 3 4一1%淀粉20滴1%淀粉20滴1%淀粉20滴1%淀粉20滴二置于0-4℃冰浴5分钟置于0-4℃冰浴5分钟置于37℃水浴5分钟置于37℃水浴5分钟三遇冷唾液10滴，混匀遇冷唾液10滴，混匀唾液10滴，混匀煮沸唾液10滴，混匀四置于0-4℃冰浴10分钟置于0-4℃冰浴5分钟移至37℃水浴5分钟置于37℃水浴10分钟置于37℃水浴10分钟五碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀碘液2滴摇匀比较各管溶液的颜色，判断淀粉被唾液淀粉酶水解的程度，并说明温度对唾液淀粉酶活性的影响。
4.取试管3支编号，按下表操作：编号 1 2 3磷酸盐缓冲液(ml)2（pH5.0）2(pH6.8) 2(pH8.0)1%淀粉液(ml)2 2 2稀释的唾液(滴)10 10 105. 将各管混合，取瓷比色皿一个，预先在各比色池分别加入1-2滴碘液，每隔 30 秒从第二管吸取水解液一滴加到已有碘液的比色皿小池中，检验淀粉的水解程度，直至此管不与碘液呈色（即只显碘液本身的浅棕色）时，立即向各管加碘液2滴摇匀观察。
比较各管溶液颜色，说明 pH 对唾液淀粉酶活性的影响。
6. 取清洁试管4支，编号，按下表操作：编号 1 2 3 41%淀粉液（滴）20 20 20 201%NaCl（滴） 2 0 0 01%CuSO4（滴）0 2 0 01%Na2SO4（滴）0 0 2 0蒸馏水（滴）0 0 0 2稀释唾液（滴）10 10 10 107. 将各管混合，取瓷比色皿一个，预先在各比色池分别加入1-2滴碘液，每隔 30秒从第一管吸取水解液一滴加到比色皿中，检验淀粉的水解程度，直至第一管不与碘液呈色（即只显碘的浅棕色）时，立即向各管加碘液2滴摇匀观察。
实验六酶活性影响因素的测定-温度、pH对酶活性的影响-精品文档
以1分钟的间隔,依次向第1至第8号试管 中加入稀释100倍的唾液2毫升,摇匀,并以1 分钟的间隔依次将8支试管放入37℃恒温水 浴中保温.然后,按照第9 号试管的保温时间, 依次将各管迅速取出,并立即加入碘化钾-碘 溶液2滴,充分摇匀.观察各管呈现的颜色,判 断在不同pH值下淀粉被水解的程度,可以看 出PH对唾液淀粉酶活性的影响,并确定其最 适pH.
本实验分别以不同温度及不同pH条件下让淀粉 酶作用于淀粉，并用碘液检查酶促淀粉的水解程度， 来说明温度及pH对酶活力的影响。 实验中以稀释的唾液作为淀粉酶液。唾液内的 淀粉酶可将淀粉逐步水解成各种不同大小的糊精分 子，最终产物为麦芽糖ห้องสมุดไป่ตู้少量的葡萄糖。它们遇碘 呈不同的颜色。直链淀粉（即可溶性淀粉）遇碘呈 蓝色；糊精按分子从大到小的顺序，遇碘可呈蓝色、 紫色、暗褐色和红色，最小的糊精和麦芽糖遇碘不 显颜色。由于在不同温度，不同pH条件下唾液淀粉 酶的活性高低不同，则淀粉被水解的程度不同，所 以，可由酶反应混合物遇碘所呈现的颜色来判断上 述诸因素对酶活性的影响。
操作步骤
1.稀释的新鲜唾液：
取唾液适量，量取 倍。 一定体积，用蒸馏水稀释20
2. 温度对酶活力的影响
取3支试管，编号后各加入淀粉溶液2毫升。将第 1，2号试管放入37℃恒温水浴中保温，第3号试管放 入冰水中冷却，5分钟后，向第1号试管中加入煮沸5 －15分钟的稀释唾液1毫升，向第2，3号试管加稀释 唾液各1毫升。摇匀，20分钟后取出3支试管，各加 碘化钾－碘溶液2滴，混匀，比较各管溶液的颜色。 判断淀粉被唾液酶水解的程度，并说明温度对唾液 酶活性的影响。
思考题：将乳清蛋白、淀粉、胃蛋白酶、唾液淀粉酶和适量 水混合装入一个容器内，调整pH至2.0 ，保存于37℃的水溶 锅中，过一段时间后，容器内剩余的物质是什么？为什么？
温度、PH、激活剂和抑制剂对酶活性的影响
（一）、温度、PH对酶活性的影响【1】一、实验目的了解温度对酶活性的影响。
了解酶活性的最适PH及掌握一种检测最适PH的方法。
二、实验原理三、实验步骤1、温度对酶活性的影响取3支试管，编号后按下表加入试剂试剂试管编号1 2 30.2%淀粉溶液 1.5 1.5 1.5稀释唾液/ml 1 1 无煮沸过的稀释唾液/ml 无无 1摇匀后，将1、3号两试管放入37摄氏度恒温水浴中，2号试管放入冰水中。
10min后取出，将2号试管内的液体分为两半，用碘化钾-碘溶液来检验1、2、3号试管内淀粉被唾液淀粉酶水解的程度。
将2号试管剩下的一半溶液放入37摄氏度水浴中继续保温10min 后，再用碘液检验，结果如何？记录并解释结果。
注意事项：1、唾液制备时，先用蒸馏水漱口，以清除食物残渣，再含一小口蒸馏水，0.5~1min后，使其流入量筒，并稀释到50ml。
2、PH对酶活性的影响取4个标有号码的20ml试管。
用吸管按下表添加0.2mol/L磷酸氢二钠溶液和0.1mol/L柠檬酸溶液以制备PH=5.0~8.0的4种缓冲液。
试剂试管编号1 2 3 40.2mol/L磷酸氢二钠/ml 5.15 6.05 7.72 9.720.1mol/L柠檬酸/ml 4.85 3.95 2.28 0.28PH 5 5.8 6.8 8 从4个试管中各取缓冲液3ml，分别注入到4支带有号码的试管中，随后于每个试管中添加0.5%淀粉溶液2ml和稀释唾液2ml。
向各试管中加入稀释唾液的时间间隔分别为1min。
将各试管内容物混匀，并依次置于37摄氏度恒温水浴中保温。
第四管加入唾液2min后，每隔1min由第二管取出一滴混合液，置于白瓷板上，加1滴碘化钾-碘溶液，检验淀粉的水解程度。
待混合液变为棕黄色时，向所有试管中依次添加1或2滴碘化钾-碘溶液。
添加碘化钾-碘溶液的时间间隔从第一管起，均为1min。
观察各试管内容物呈现的颜色，分析PH对唾液淀粉酶活性的影响。
酶的特化实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的通过本实验，深入了解酶的特化现象，包括酶的专一性、温度和pH对酶活性的影响、激活剂和抑制剂对酶活性的影响，从而掌握酶催化反应的特化规律，为进一步研究酶在生物体内的作用和调控提供理论基础。
二、实验原理酶是一种生物催化剂，具有高效、专一、温和等特性。
酶的专一性是指酶只能催化特定的底物进行反应，而其他底物则不能被催化。
温度和pH是影响酶活性的重要因素，适宜的温度和pH值能提高酶的活性，而过高的温度和pH值会破坏酶的空间结构，导致酶失活。
激活剂能提高酶的活性，而抑制剂则能降低酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 唾液淀粉酶- 淀粉溶液- 蔗糖溶液- 碱性硫酸铜溶液（班氏试剂）- 磷酸氢二钠溶液- 磷酸二氢钠溶液- 硫酸铜溶液- 氢氧化钠溶液- 酒石酸钾钠溶液- 氯化铁溶液- 过氧化氢溶液- 新鲜肝脏研磨液2. 实验仪器：- 恒温水浴箱- 滴定管- 烧杯- 试管- 试管架- 移液器- 移液管- 秒表- 移液针- 玻璃棒四、实验步骤1. 酶的专一性实验：- 取两支试管，分别加入2%淀粉溶液和2%蔗糖溶液。
- 向两支试管中分别加入等量的唾液淀粉酶。
- 将两支试管放入恒温水浴箱中，在适宜的温度下保温一段时间。
- 取出试管，向其中加入适量的碱性硫酸铜溶液，观察现象。
2. 温度对酶活性的影响实验：- 取三支试管，分别加入2%淀粉溶液。
- 向三支试管中分别加入等量的唾液淀粉酶。
- 将三支试管分别放入不同温度的恒温水浴箱中保温一段时间。
- 取出试管，向其中加入适量的碱性硫酸铜溶液，观察现象。
3. pH对酶活性的影响实验：- 取三支试管，分别加入2%淀粉溶液。
- 向三支试管中分别加入等量的唾液淀粉酶。
- 将三支试管分别放入不同pH值的磷酸缓冲溶液中保温一段时间。
- 取出试管，向其中加入适量的碱性硫酸铜溶液，观察现象。
4. 激活剂和抑制剂对酶活性的影响实验：- 取两支试管，分别加入2%淀粉溶液。
酶的定性实验报告
摘要：本实验旨在通过一系列定性实验，探究不同酶的特性，包括酶的专一性、温度和pH值对酶活性的影响，以及酶的激活和抑制现象。
实验采用淀粉酶、蛋白酶和过氧化氢酶作为研究对象，通过观察反应产物的变化，对酶的特性进行定性分析。
关键词：酶，定性实验，专一性，温度，pH值，激活，抑制一、实验目的：1. 了解酶的专一性。
2. 探究温度和pH值对酶活性的影响。
3. 研究酶的激活和抑制现象。
二、实验原理：酶是一种生物催化剂，具有高效性、专一性和可调节性等特点。
酶的活性受温度、pH值、激活剂和抑制剂等因素的影响。
本实验通过观察不同酶在不同条件下的反应产物，对酶的特性进行定性分析。
三、实验材料与仪器：1. 实验材料：- 淀粉酶- 蛋白酶- 过氧化氢酶- 淀粉- 蛋白质- 过氧化氢- 碘液- 硫酸铜溶液- 碱性酒石酸钾钠溶液- 酚酞指示剂- 恒温水浴锅- 移液管- 试管- 试管架2. 实验仪器：四、实验步骤：1. 酶的专一性实验：- 取两个试管，分别加入淀粉和蛋白质溶液。
- 向每个试管中加入等量的淀粉酶和蛋白酶。
- 将试管放入恒温水浴锅中，保持一定温度。
- 观察并记录反应产物（如淀粉被水解生成葡萄糖，蛋白质被水解生成氨基酸）。
2. 温度对酶活性的影响实验：- 取三个试管，分别加入淀粉酶、蛋白酶和过氧化氢酶。
- 向每个试管中加入等量的淀粉、蛋白质和过氧化氢。
- 将三个试管分别放入不同温度的水浴锅中。
- 观察并记录反应产物的变化。
3. pH值对酶活性的影响实验：- 取三个试管，分别加入淀粉酶、蛋白酶和过氧化氢酶。
- 向每个试管中加入等量的淀粉、蛋白质和过氧化氢。
- 分别用酚酞指示剂调整三个试管的pH值。
- 观察并记录反应产物的变化。
4. 酶的激活和抑制实验：- 取两个试管，分别加入淀粉酶和蛋白酶。
- 向每个试管中加入等量的淀粉和蛋白质。
- 向其中一个试管中加入适量的激活剂（如金属离子），向另一个试管中加入适量的抑制剂（如氟化钠）。
实验教案-温度pH值激活剂和抑制剂对酶活性的影响
实验三温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活性的影响一、目的验证温度、pH值、激活剂和抑制剂对酶活性的影响二、原理酶的化学本质是蛋白质，凡是能够影响蛋白质变性的因素，都可以使酶失活。
此外，温度、pH、激活剂和抑制剂对酶的活性均有显著影响。
酶的活性通常是通过测定酶所作用的底物在作用前后的变化来研究的。
本实验是唾液淀粉酶作用的底物-淀粉，被唾液淀粉酶分解成糊精、麦芽糖等产物的变化来观察该酶在各种环境(温度、pH值、激活剂和抑制剂)条件下的活性.淀粉被酶水解的变化，可以借遇碘呈不同颜色来观察，淀粉遇碘呈蓝色；糊精按分子从大到小的顺序，遇碘呈蓝、紫、红等不同颜色；最小的糊精和麦芽糖遇碘不呈现颜色反应。
三、主要仪器、材料和试剂器材电热恒温水浴锅、电炉、比色盘、吸管、试管、漏斗、烧杯等试剂0.5%淀粉溶液、碘化钾-碘溶液、1%CuSO4、0.5%NaCl溶液、pH5缓冲液、pH6.8缓冲液、pH8缓冲液、四、操作步骤（一）制备唾液淀粉酶每人用自来水漱口3次，然后取20ml蒸馏水你含于口中，半分钟后吐入烧杯内，4层纱布过滤。
以此酶液作如下实验（二）温度对酶活性的影响1.取3支试管，编号后按下表操作：2. 各管加入0.5%淀粉溶液后，放入各自温度的水浴，待管内温度一致时，3支试管同时迅速加入酶液，摇匀及时放回水浴中。
3. 在比色盘中，各孔中置碘液2滴，每隔1分钟从2号管中取反应液1滴与比色盘中的碘液混合，观察颜色变化。
4.待第二管反应液遇碘不发生颜色变化（即只有碘液的颜色）时，从水浴中取出各管，向管中加入1-2滴碘液，摇匀后，观察各管颜色，说明温度对酶活性的影响。
三、pH对酶活性的影响1.取3支试管，编号后按下表操作：2.将以上3支试管摇匀，放入37℃水浴中保温。
每隔1分钟从2号管中取1滴反应液与碘液混合观察，待遇碘不发生颜色变化时，向各管中加入碘液1-2滴，充分混匀，观察并记录各管颜色，解释pH对酶活性的影响。
四、激活剂和抑制剂对酶活性的影响1.取3支试管，编号后按下表操作：2.将以上3支试管摇匀，放入37℃水浴中，每隔1-2分钟在比色盘上用碘液检查2号管，待碘液不变色时，再向各管内加入碘液1-2滴，观察、记录结果，并解释原因。
温度、激活剂和抑制剂对酶活力的影响
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（二）激活剂和抑制剂对酶反应的影响
酶活力常受到有些物质的影响,有些物质
剂
能使酶活力增i] 强,称为酶的激活剂； 另一些物 质则能使酶活力降低，称为酶的抑制剂。
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三、试剂和器材
1、实验器材 (1)恒温水浴锅 (2)试管 (3)烧杯 (4)量筒 (5)玻璃 棒 (6)白磁板 (7)铁三角架 (8)酒精灯 (10 )试 管夹 (11)试管架 (12)秒表
因此大多数酶都有一个最适 温度(即酶促反应速度最快 时的环境温度)
酶的最适温度不是一个常数， 它与作用时间长短有关。
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人唾液中淀粉酶为α-为淀粉酶，在唾液腺细 胞内合成。在唾液淀粉酶的作用下，淀粉被 水解，经过一系列被称为糊精的中间产物， 最后生成麦芽糖。不同阶段的糊精遇碘有 不同颜色反应，分别呈现为：
思考题
1、 高温导致酶活性丧失的分子机理是什么？如何在酶 的分离纯化中克服这种影响？
2、 哪些因素可以导致酶活医性学pp的t 降低？
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实验二 温度、激活剂和抑制剂对 酶活力的影响
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一、实验目的
1、了解温度对酶活性的影响，学会检测酶最 适温度的方法。
2、了解激活剂和抑制剂对酶活性的影响。 3、学习检测激活剂和抑制剂影响酶促反应速
度的原理和方法。
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二、实验原理 （一）温度对酶活性的影响
一方面是温度升高,酶促反 应速度加快。 另一方面,温度升高,也将导 致酶活性降低甚至丧失。
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管号
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温度、pH、激活剂与抑制剂对酶促作用的影响
温度、pH、激活剂与抑制剂对酶促作用的影响【目的】通过本实验，观察影响酶促作用的一些因素。
【原理】唾液淀粉酶可催化淀粉逐步水解，生成分子大小不同的糊精及最后水解成麦芽糖。
淀粉及糊精遇碘各呈不同的颜色反应。
直链淀粉(即可溶性淀粉)遇碘呈蓝色，糊精按分子的大小遇碘可呈蓝色、紫色，睛褐色和红色。
最小的糊精和麦芽糖遇碘不显色。
根据颜色反应，可以了解淀粉被水解的程度。
由于在不同温度、不同酸碱度下，唾液淀粉酶的活性高低不同，所以淀粉被水解的程度也不一样。
另外，有些物质可作为激活剂，能提高酶活性，有些物质可作为抑制剂，能降低酶活性，也能影响淀粉被水解的程度。
因此、通过与碘产生的颜色反应判断淀粉被水解的程度，了解温度、pH，激活剂和抑制剂对酶促作用的影响。
【试剂】1、1％淀粉溶液配制取可溶性淀粉1克，加5毫升蒸馏水，调成糊状，再加蒸馏水80毫升，加热，使其溶解，最后用蒸馏水稀释至100毫升。
2、稀释唾液制备将痰咳尽，用水漱口，再含蒸馏水30毫升，作咀嚼运动，2分钟后吐入烧杯中，再用滤纸过滤后待用。
3、不同PH缓冲液（1）PH6.8缓冲液用0.2M磷酸二氢钠溶液772毫升，0.1M柠檬酸溶液485亳升，混合即得。
（2）pH5.0缓冲液取0.2M磷酸氢二钠溶液515毫升，0.1M柠檬酸溶液485毫升，混合即成。
（3）pH8.0缓冲液取0.2M磷酸氢二钠溶液972毫升，0.1M柠檬酸溶液28毫升，混合即成。
4、0.9％NaCl溶液。
5、0.1％CuSO4溶液。
6、0.1％Na2SO4溶液。
【器材】10×100毫米试管、恒温水浴、沸水浴、水浴、蜡笔。
【操作】一、温度对酶促作用的影响1、取试管三支，用蜡笔编号，每管各加入pH6.8缓冲液20滴，1％淀粉10滴。
2、将第一管放入37℃恒温水浴，将第二管放入沸水浴，将第三管放入冰浴。
3、放置5分钟后，分别向各管加入稀唾液5滴，再放回原处。
4、10分钟后，分别向各管滴加碘液1滴，观察三管中颜色的区别，说明温度对酶促作用的影响。
生物化学--实验六淀粉酶的专一性和温度pH激动剂抑制剂对酶活性的影响
实验六淀粉酶的专一性和温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性的影响【目的要求】1.通过本实验观察、验证酶的专一性和温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性的影响。
2.熟悉淀粉及其酶解产物的特殊显色方法；电热恒温水浴的使用。
3.了解唾液淀粉酶的收集与预处理。
【实验原理】酶具有高度专一性，一种酶只能催化一种或一类底物发生反应，如淀粉酶只能水解淀粉，不能水解蔗糖。
当淀粉被淀粉酶彻底水解为还原性麦芽糖和葡萄糖时，能使班氏试剂的Cu2+还原成Cu1+，生成砖红色Cu2O沉淀。
淀粉酶的活性受温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素影响，因而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精。
不同程度的水解糊精可与碘反应生成紫色、棕色或红色络合物。
通过上述特征性反应，并以蔗糖等作对照，便可观察、验证淀粉酶是否具有专一性以及它的催化活性是否受到影响。
【实验准备】一、器材1.滴管、烧杯、试管（架）及试管夹。
2.恒温水浴箱与水浴锅。
3.脱脂棉、漏斗及纱布。
4.白瓷反应盘二、试剂1.1％淀粉称取淀粉1g，加少量水调成糊状，加入煮沸的0.3％NaCl溶液至100m1。
2.1％蔗糖溶液3.班氏试剂 A液：取柠檬酸钠173ｇ，无水碳酸钠100ｇ，加水600ml，加热溶解，冷却后稀释至850ml；B液：取结晶硫酸铜（CuSO4·5H2O）17.3ｇ溶于100ml预热的蒸馏水中，冷却后加水至150ml。
将A液缓慢倒入B液中混匀置试剂瓶备用。
4.碘液：称取碘4g、碘化钾6g溶于l000ml蒸馏水中，置棕色瓶内贮存备用。
5.各种pH缓冲液⑴pH6.8缓冲液：取0.2mol/LNa2HPO4溶液772ml，0.1mol/L柠檬酸溶液228ml混合即成。
⑵ pH4.0缓冲液：取0.2mol/LNa2HPO4溶液385.5ml，0.1mol/L柠檬酸溶液614.5ml混合即成。
⑶ pH8.0缓冲液：取0.2mol/LNa2HPO4溶液972ml，0.1mol/L柠檬酸溶液28ml混合即成。
探究温度、pH、激活剂及抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响说课课件
称取无水CuSO41g,,将之溶解后用蒸馏水定容至100ml。 5.5%NaOH溶液
称取NaOH5g，将之溶解后用蒸馏水定容至100ml。
五、教学过程分析ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
（四）观察实验现象，记录实验结果
五、教学过程分析
（四）观察实验现象，记录实验结果
学生对实验课的兴趣一直都 很高涨，有着强烈地探索欲望， 但是教师要注意在保护学生兴趣 的同时，也应适时培养学生客观 严谨的实验态度。
三、教学目标及教学重难点
（一）教学目标
知识与能力
明确温度、pH、激活剂及抑制剂对酶活性的影响 进行有关的实验，学会控制自变量，观察和检测因变量的变化
过程与方法
让学生进行有关的实验，学会控制自变量，观察和检测因变量的 变化，以及设置对照组和重复实验
二学情分析明确温度ph激活剂及抑制剂对酶活性的影响进行有关的实验学会控制自变量观察和检测因变量的变化知识与能力让学生进行有关的实验学会控制自变量观察和检测因变量的变化以及设置对照组和重复实验过程与方法培养学生的探索意识以及尊重实验结果的思想情感态度与价值观一教学目标二教学重难点二教学重难点教学重点明确温度明确温度phph激活剂及抑制剂对酶活性的影响激活剂及抑制剂对酶活性的影响进行有关的实验学会控制自变量观察和检测因变量的进行有关的实验学会控制自变量观察和检测因变量的变化以及设置对照组和重复实验变化以及设置对照组和重复实验教学难点进行有关的实验学会控制自变量观察和检测因变量的进行有关的实验学会控制自变量观察和检测因变量的变化以及设置对照组和重复实验变化以及设置对照组和重复实验学法教法自主设计合作探究表达交流问题教学法任务驱动法课后反思导入新课导入新课实验设计分析结果实验准备实验操作五教学过程分析提出问题导入新课为什么发烧的病人吃饭不香浑身无力呢
影响淀粉酶活性的因素的实验报告
影响淀粉酶活性的因素的实验报告实验报告-不同因素对酶的影响实验报告课程名称：生物化学实验（甲）指导老师：成绩：实验名称：酶的基本性质实验——底物专一性剂、激活剂和抑制、最适温度实验类型：分离鉴定实验同组学生姓名：一、实验目的和要求（必填）三、主要仪器设备（必填）五、实验数据记录和处理七、讨论、心得二、实验内容和原理（必填）四、操作方法和实验步骤六、实验结果与分析（必填）Ⅰ.酶的基本性质——底物专一性一、实验目的和要求1. 了解酶的专一性。
2. 掌握验证酶的专一性的基本原理及方法。
3. 学会排除干扰因素，设计酶学实验。
二、实验基本原理酶是一种具有催化功能的蛋白质。
酶蛋白结构决定了酶的功能——酶的高效性，酶催化的反应（酶促反应）要比相应的没有催化剂的反应快103-1017 倍。
酶催化作用的一个重要特点是具有高度的底物专一性，即一种酶只能对某一种底物或一类底物起催化作用，对其他底物无催化反应。
根据各种酶对底物的选择程度不同，它们的专一性可以分为下列几种：1.相对专一性一种酶能够催化一类具有相同化学键或基团的物质进行某种类型的反应。
2.绝对专一性：有些酶对底物的要求非常严格只作用于一种底物，而不作用于任何其他物质。
如脲酶只能催化尿素进行水解而生成二氧化碳和氨。
如麦芽糖酶只作用于麦芽糖而不作用其它双糖，淀粉酶只作用于淀粉，而不作用于纤维素。
3.立体异构专一性有些酶只有作用于底物的立体异构物中的一种，而对另一种则全无作用。
如酵母中的糖酶类只作用于D-型糖而不能作用于L-型的糖。
本实验以唾液淀粉酶、蔗糖酶对淀粉、蔗糖水解反应的催化作用来观察酶的专一性。
采用Benedict 试剂检测反应产物。
Benedict试剂是碱性硫酸铜溶液，具有一定的氧化能力，能与还原性糖的半缩醛羟基发生氧化还原反应，生成砖红色氧化亚铜沉淀。
Na2CO3+ 2H2O2NaOH + H2CO3 CuSO4+2+ Na2SO4 还原糖(—CHO or —C=O)+ 2Cu(OH)2 Cu2O(砖红色或黄色) + 2H2与Benedict试剂无呈色反应。
pH、激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响
根据水解液和碘反应的颜色，可以判断 水解是否已完全，观察底物、温度、pH及 激活剂与抑制剂对唾液淀粉酶活性的影响。
淀粉和蔗糖都无还原性，但淀粉水 解产物为葡萄糖，蔗糖水解产物为 果糖和葡萄糖，均为还原性糖，糖 类的醛基或酮基能与Benedict试剂反 应，生成砖红色的氧化亚铜沉淀
试剂和器材
1. 试剂
新鲜唾液稀释液、2%蔗糖溶液、Benedict试剂、 0.5%淀粉、0.5%淀粉溶液（含0.3%NaCl）、 1％氯化钠溶液、0.1％硫酸铜溶液、碘液、 0.2 mol/L磷酸氢二钠溶液、0.1 mol/L柠檬酸溶液
2. 器材
恒温水浴锅、4度冰箱、电磁炉(沸水锅) 纸杯、试管、试管架、锥形瓶，pH试纸
四、激活剂与抑制剂对酶的影响
实验目的 了解激活剂和抑制剂对酶活力的影响。 实验原理 酶的活性受某些物质的影响，能使酶活性增 加的称为激活剂，能使酶活性降低的称为抑制 剂。很少量的激活剂和抑制剂就会影响酶的活 性，而且常具有特异性，但激活剂和抑制剂不 是绝对的，浓度的改变可能使激活剂变成抑制 剂。
操作步骤
3. 淀粉酶的专一性实验
试管编号
（取2只试管，按下表操作）
#1 1 3
#2 1 －
试剂处理
已稀释的唾液溶液（mL） 含0.3％NaCl的0.5%淀粉溶液 （mL） 2%蔗糖溶液（mL） Benedict试剂（mL） 记录观察结果
—
2
3
2
摇匀，置37℃水浴保温15min 摇匀，沸水浴煮沸2min
二、pH对淀粉酶活性的影响
操作步骤 1. 取3个锥形瓶，按下表比例移取磷酸氢二钠溶 液和柠檬酸钠溶液，制备 pH 为 5.0 、 6.8 、 8.0 的 三种缓冲溶液。
酶的专一性和影响酶作用的因素20130408
（二）温度对酶活性的影响
【操作步骤】
试管号 0.5%淀粉溶液(滴) pH6.8缓冲液(滴) 0.3%NaCI溶液(滴) 浴温5分钟 稀唾液（滴） 浴温5分钟
取试管3支，标号，按下表所列的次序操作：
1 10 3 3 100 ℃ 3 100 ℃
（一）酶作用的特异性
【操作步骤】
试管号 0.5%淀粉溶液(滴) 0.3%NaCI溶液(滴) 0.5%蔗糖溶液(滴) 稀唾液（滴） 蔗糖酶溶液（滴） 蒸馏水（滴） 1 16 3 16 取试管6支，标号，按下表所列的次序操作：
2 16 3 16 -
3 16 3 16
4 16 16 -
5
6
16 16 -
（一）酶作用的特异性
【操作步骤】
（2）制备蔗糖酶溶液。
取活性干酵母1.0g，置于研钵中，加少 量蒸馏水及石英砂研磨提取约5min，再 加蒸馏水至总体积约为20ml，过滤，取 滤液备用。
15
5
5
15
5
15 5
15 5
15 5
15 5
各管混匀后，同时置于37～40℃水浴中保温5分钟，加1滴碘 记录观察结果
（三）pH、激活剂、抑制剂 对酶活性的影响
1
2
3
4
5
6
7
（三）pH、激活剂、抑制剂 对酶活性的影响
1
2
3
4
5
6
7
思考题
1.什么是酶的特异性？本实验如何验证了酶的特异性？ 2.若将淀粉酶和蔗糖酶煮沸1min，其实验结果会发生什么 样的变化？ 3.唾液淀粉酶的最适温度是多少? 4.低温对酶有什么影响? 5.在第二个实验中，为什么以第3管作碘反应，观察颜色？有 何意义？ 6.在第二个实验中，为什么要作CuSO4、Na2SO4的对照实 验？
酶的专一性及影响酶促反应的因素
酶的专一性及影响酶促反应的因素一实验目的通过本实验，证明酶对底物催化的专一性，以及PH、温度、激活剂、抵制剂对酶促反应速度的影响。
二实验原理唾液淀粉酶能专一的催化淀粉水解，生成一系列水解产物，即糊精、麦芽糖、葡萄糖等。
麦芽糖或葡萄糖都属于还原糖，能使班氏试剂中的二价铜离子还原成亚铜，并生成砖红色的氧化亚铜。
淀粉酶不能催化蔗糖水解，且蔗糖本身不是还原糖，所以不能与班氏试剂作用呈色。
以此证明酶催化底物的专一性。
淀粉或淀粉的水解产物遇碘会呈现不同的颜色，淀粉遇碘变蓝色；糊精遇碘则根据其分子量的大小依次呈现紫色、褐色、红色；而麦芽糖、葡萄糖遇碘不呈色。
通过颜色变化可以了解淀粉的程度，以观察PH、温度激活剂、抑制剂对酶促反应速度的影响。
三药品器材试管、试管夹、样品杯、滴瓶、温度计、恒温水浴箱，冰箱等。
1.1%淀粉溶液称取可溶性淀粉1g，加5ml蒸馏水调成糊状，徐徐倒入80ml煮沸的蒸馏水中，不断搅拌，待其溶解后，加蒸馏水至100ml。
此液应新鲜配制，防止细菌污染。
2．1%蔗糖溶液称1g蔗糖，加蒸馏水至100ml溶解。
3．PH6.8缓冲液取0.2mol/L磷酸氢二钠溶液154.5ml，0.1mol/L柠檬酸溶液45.5ml混合即可。
4．PH4.8缓冲液取0.2mol/L磷酸氢二钠溶液98.6ml，0.1mol/L柠檬酸溶液101.4ml混合即可。
5．PH8.0缓冲液取0.2mol/L磷酸氢二钠溶液194.5ml，0.1mol/L柠檬酸溶液5.5ml混合即可。
6．班氏试剂溶解结晶硫酸铜17.3g于100ml热的蒸馏水中，冷却后加水至150ml 为A液。
取柠檬酸钠173g和无水碳酸钠100g，加蒸馏水600ml ,加热溶解，冷却后加水至850ml为B液。
将A液缓慢倒入B液中，混合即可。
7．稀碘液称取碘1g，碘化钾2g ,溶于300ml蒸馏水中。
8．0．9%NaCl溶液。
9．0．9%CuSO4溶液。
10．0．1%Na2SO4溶液。
实验六 温度对酶活影响及酶的专一性
实验六酶作用的专一性一、目的：了解酶的一种催化特性―对底物的选择性及检查酶的专一性原理与方法。
二、原理酶作用的专一住是酶与一般催化剂的主要区别之一，所谓酶作用的专一性，即酶仅与一种或一类相似的物质起一定的催化作用，而对其它物质则不能起催化作用。
本实验以蔗糖酶（来源于酵母）及枯草杆菌α ―淀粉酶对淀粉和蔗糖的作用为例，来说明酶作用的专一性。
淀粉和蔗糖缺乏自由醛基（苷羟基），无还原性，但在α ―淀粉酶的作用下，淀粉很容易水解成为糊精及少量麦芽糖，葡萄糖，使之具有还原性。
在同祥的条件下，α ―淀粉酶不能催化蔗糖的水解，蔗糖酶能催化水解蔗糖生成具有还原性的葡萄糖和果糖，但不能催化淀粉水解．本实验采用本尼迪克特（Benedict）试剂检测还原糖。
三、试剂与器材试剂：1. 2% 蔗糖溶液。
2. 1%可溶性淀粉淀液。
称取可溶性淀粉1克，加水10 ml搅成糊状，倾入90 ml预先煮沸的蒸馏水中，搅拌均匀，再煮沸2～3分钟,冷却后定容至100 ml此溶液需新鲜配制。
3．枯草杆菌。
α ―淀粉酶的稀释液。
4. 蔗糖酶液：取适量干酵母100 克，置于研钵内，加少量细砂及50 ml蒸馏水，用力研磨提取约l 小时，再加蒸馏水使总体积为500 ml左右，过滤。
滤液保存于冰箱内备用。
5．本尼迪克特（Benedict）试剂：将17.3克硫酸铜溶于约50 ml蒸馏水中，另将173 克柠檬酸钠及100克碳酸钠加于约800 ml蒸馏水中，加热，搅拌使之溶解，冷却后将上述碳酸铜溶液缓缓倾入柠檬酸一碳酸钠溶液中，混匀，并稀释到100 ml。
此试剂可长期保存。
器材：1．试管及试管架2．恒温水浴锅3．吸管5 ml 3支l ml 2支2 ml 1支四、操作1. 取2 支试管，各加入本氏试剂2 ml,分别加入l %可溶性淀粉溶液和2 %蔗糖溶液各4滴，混合均匀后，放在沸水浴中煮2～3分钟，观察有无红黄沉淀发生，纯净的淀粉和蔗糖应无红黄色沉淀产生。
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实验六淀粉酶的专一性和温度、pH、激活剂
及抑制剂对酶活性的影响
实验类型：验证型
目的和要求
1.通过本实验观察、验证酶的专一性和温度、pH、激动剂及抑制剂对酶活性的影响。
2.熟悉淀粉及其酶解产物的特殊显色方法；电热恒温水浴的使用。
3.了解唾液淀粉酶的收集与预处理。
原理
酶具有高度专一性，一种酶只能催化一种或一类底物发生反应，如淀粉酶只能水解淀粉，不能水解蔗糖。
当淀粉被淀粉酶彻底水解为还原性麦芽糖和葡萄糖时，能使班氏试剂的Cu2+还原成Cu1+，生成砖红色Cu2O沉淀。
淀粉酶的活性受温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓度以及作用时间等多种因素影响，因而水解淀粉生成一系列分子大小不同的糊精。
不同程度的水解糊精可与碘反应生成紫色、棕色或红色络合物。
通过上述特征性反应，并以蔗糖等作对照，便可观察、验证淀粉酶是否具有专一性以及它的催化活性是否受到影响。
操作方法
一、唾液淀粉酶的收集与处理
1.制备唾液
实验者先将痰咳尽，用自来水漱口，以清除口腔内食物残渣，再在口腔内含蒸馏水约15ml，并作咀嚼咕漱运动，3分钟后吐入垫有两层经润湿处理的脱脂纱布的漏斗内，过滤于小烧杯中备用，为与下面稀释唾液相区别，此称制备唾液。
2.煮沸唾液
取上述唾液约2ml，盛入1中号试管中,置沸水浴煮沸5分钟备用。
3.稀释唾液
调整唾液淀粉酶活性，使之在、37℃和既无激动剂又无抑制剂条件下，作用5min，水解淀粉至红色糊精为宜。
具体做法是取12凹白瓷反应板一块，按下列步骤操作：
①第1排每凹各加1滴制备唾液，12、13、14凹分别加生理盐水1、2、3滴，用滴管采用抽吸法，由稀到浓（14→12）小心混匀各凹，勿使溅入相邻凹中。
每混匀一凹便取其1滴放入同列的2排凹中，剩余稀释唾液应全部放回原凹中。
②在盛有不同稀释度唾液的第2排各凹中，均加入4滴缓冲液（），2滴1%的淀粉液和2滴蒸馏水，用①混匀法充分混匀，置37℃下5min。
③在第2排各凹中加I液一滴，混匀，观察比较各凹颜色，以浅棕-红色对应的稀释倍数，用生理盐水稀释3ml制备唾液备用。
二、唾液淀粉酶的专一性以及温度、pH、激活剂和抑制剂对唾液淀粉酶活性影响的观察
（一）取试管3支编号，按下表1操作
表1 唾液淀粉酶专一性的实验观察
试
剂试管
缓冲液
1％淀粉溶
液
1％蔗糖
溶液
制备唾
液
煮沸唾液
1 20滴10滴－5滴－
2 20滴10滴－－5滴
3 20滴－10滴5滴－
将上述各管混匀后，置37℃水浴中保温10分钟，然后每管加入班氏试剂20滴，再放入沸水浴中煮沸约15分钟，观察各管颜色反应，并说明原因。
（二）温度影响酶促反应的实验观察
1.取试管3支编号，按下表2操作：
表2温度影响酶促反应的实验观察
2.将一、二管移入冰水浴中，待各管温度一致后速向各管加入碘液1滴，混匀后观察各管颜色的区别，并说明温度对酶促反应的影响。
四、pH影响酶促反应的实验观察
1. 取试管3支编号，按下表3操作：
表3 pH影响酶促反应的实验观察
缓冲液缓冲液缓冲液1％淀粉溶
液
稀释唾液试管120滴－－10滴5滴
试管2－20滴－10滴5滴
试管3－－20滴10滴5滴
2.将上述各管混匀后，置37℃水浴中保温10分钟，然后每管加入碘液1滴，混匀后观察各管颜色的区别，并说明pH对酶促反应的影响。
五、激动剂和抑制剂影响酶活性的实验观察
1. 取试管4支编号，按下操作：
表4激动剂和抑制剂影响酶活性的实验观察
pH
缓冲液1％淀粉
溶液
蒸馏水％NaCl1％
CuSO4
1％
Na2SO4
稀释唾
液
120滴10滴10滴－－－5滴220滴10滴－10滴－－5滴320滴10滴－－10滴－5滴
2. 将上述各管放入37℃水浴中保温10分钟，然后每管加入碘液1滴，混匀后观各管颜色的区别，并说明激动剂和抑制剂对酶促反应的影响。
注意事项
1.反应试管应清洗干净，不同酶液、试剂及其滴管不能交叉混用；
2.使用混合唾液，或通过预试选出合适的唾液稀释度，效果更为显著。
试剂和器材
一、器材
1.滴管、烧杯、试管（架）及试管夹。
2.恒温水浴箱与水浴锅。
3.脱脂棉、漏斗及纱布。
4.白瓷反应盘
二、试剂
％淀粉称取淀粉1g，加少量水调成糊状，加入煮沸的％NaCl溶液至100m1。
％蔗糖溶液
3.班氏试剂 A液：取柠檬酸钠173ｇ，无水碳酸钠100ｇ，加水600ml，加热溶解，冷却后稀释至850ml；B液：取结晶硫酸铜（CuSO4·5H2O）ｇ溶于100ml预热的蒸馏水中，冷却后加水至150ml。
将A液缓慢倒入B液中混匀置试剂瓶备用。
4.碘液：称取碘4g、碘化钾6g溶于l000ml蒸馏水中，置棕色瓶内贮存备用。
5.各种pH缓冲液
⑴缓冲液：取LNa2HPO4溶液772ml，L柠檬酸溶液228ml混合即成。
⑵缓冲液：取LNa2HPO4溶液，L柠檬酸溶液混合即成。
⑶缓冲液：取LNa2HPO4溶液972ml，L柠檬酸溶液28ml混合即成。
6.0.9％ NaCl 溶液
％CuSO4溶液
％Na2SO4溶液
思考题
1.简述温度、pH、激动剂及抑制剂、酶浓度等因素影响对淀粉酶活性的影响。
2.简述淀粉酶活性测定的原理及注意事项。