微生物粪便标本采集与处理
粪便分离实验报告
粪便中病原微生物的分离与鉴定二、实验目的1. 掌握粪便标本的采集、处理和病原微生物的分离方法。
2. 熟悉不同培养基的制备和使用,了解病原微生物的生物学特性。
3. 培养实验室操作技能,提高对医学微生物学基本原理的认识。
三、实验原理粪便中存在大量微生物,其中既有对人体有益的正常菌群,也有可能引起疾病的病原微生物。
通过特定的分离培养方法,可以将病原微生物从粪便中分离出来,并进行鉴定,从而为疾病的诊断和治疗提供依据。
四、实验材料与试剂1. 实验材料:新鲜粪便标本2. 试剂与仪器:- 牛奶琼脂培养基- 血琼脂培养基- 脱纤维蛋白血琼脂培养基- 碎琼脂培养基- 革兰氏染色液- 稀释液- 移液器- 灭菌镊子- 灭菌培养皿- 显微镜- 移菌环1. 标本采集:采集新鲜粪便标本,注意避免污染。
2. 标本处理:将粪便标本加入适量的稀释液中,充分混合均匀。
3. 分离培养:- 取适量稀释后的粪便标本,分别接种于牛奶琼脂培养基、血琼脂培养基和脱纤维蛋白血琼脂培养基上。
- 将培养皿置于37℃恒温培养箱中培养24-48小时。
4. 观察与记录:观察培养基上菌落生长情况,记录菌落特征。
5. 鉴定:- 对疑似病原菌进行革兰氏染色,观察菌体形态和染色特性。
- 根据菌落特征和染色结果,进行初步鉴定。
六、实验结果1. 牛奶琼脂培养基上观察到典型的金黄色葡萄球菌菌落,革兰氏染色呈阳性。
2. 血琼脂培养基上观察到典型的溶血性链球菌菌落,革兰氏染色呈阳性。
3. 脱纤维蛋白血琼脂培养基上观察到典型的大肠杆菌菌落,革兰氏染色呈阴性。
七、讨论与分析1. 本实验成功分离出金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌和大肠杆菌,表明粪便标本中存在这些病原微生物。
2. 金黄色葡萄球菌和溶血性链球菌均为革兰氏阳性菌,具有致病性,可能引起皮肤感染、呼吸道感染等疾病。
3. 大肠杆菌为革兰氏阴性菌,通常存在于人体肠道中,但在某些情况下也可能引起感染,如尿路感染、腹泻等。
4. 本实验结果表明,粪便分离培养是诊断肠道感染的重要手段,对于疾病的预防和治疗具有重要意义。
粪便微生物学检验的标准操作程序
粪便微生物学检验的标准操作程序1 检验目的做疾病的病原学诊断,查找于疾病有关的病原菌以及了解微生物与疾病的关系,指导临床治疗及预后和流行病学的调查。
2 原理正常人的肠道中栖居大量的不同种类的微生物,组成了微生态菌膜屏障。
起着健康的作用,腹泻是因为病原细菌或病毒在肠道内繁殖的结果。
3 标本要求(1)标本类型:粪便。
(2)标本采集:见标本采集手册(3)标本储存和运输:室温放置,室温运输并立即送检。
(4)标本拒收状态:非无菌方式采集的标本或未按要求部位采取的标本。
4 容器和添加剂类型均使用灭菌器皿盛放标本5 试剂(1)试剂名称:革兰氏染液、氧化酶试剂、3%触酶、血平板、中国蓝平板、SS平板、柯玛嘉平板、相关生化试剂等。
6仪器设备:(1)接种针、接种环、酒精灯(2)梅里埃ATB药敏鉴定仪(3)显微镜、SPX-150B型生化培养箱、超净工作台、台式离心机、天平7 校准程序(送市计量质量检测研究所校准)8 标本的处理8.1 沙门-志贺菌:取粪便少许,增菌后转种或将粪便直接接种SS 及中国蓝或麦康凯、伊红美蓝平板,35℃、18-24h后进行鉴定。
沙门氏菌增菌37℃,16-24h,转钟在平板上,增菌液:粪便等于10:1。
志贺菌增菌37℃,4-6h,转种在平板上。
注:伤寒病人在发病1—2周采取血液,发病2—3周采取粪便和尿液。
8.2 霍乱弧菌培养:标本接种于碱性蛋白胨水中,进行增菌,增菌培养孵育6—8h后,取表面菌膜移种于碱性琼脂平板/庆大霉素一亚碲酸钾平板上。
8.3 真菌培养:将标本接种于含氯霉素的沙氏琼脂及血琼脂平板上,置25-35℃和35℃孵育24—48h,来鉴定。
9 操作流程粪便或肛门试子分离培养增菌培养麦康凯或中国蓝亚硒酸增菌培养基GN增菌培养基(适用于沙门菌属)(适于志贺菌属)SS琼脂SS及麦康凯琼脂平板分离三糖或双糖铁培养基血清鉴定生化反应鉴定药物敏感性试验报告10 质量控制:参加我科质量管理小组组织的各项质量控制活动11 患者检验结果的可报告区间阴性:(1).“未检出沙门菌属和志贺菌属”(2).“未检出霍乱弧菌”阳性:根据细菌鉴定结果报告。
粪便培养标准操作程序
SOP_15-10 粪便培养标准操作程序一、粪便培养标本采集和运送见本手册《病原微生物标本的采集运送和处原则》。
二、标本验收1.申请单验收:要求申请单除患者的基本信息以外还应包括标本收集时间、收集方式、是否已使用抗生素等,验收时应检查申请单是否填写完整。
2.标本验收:(1)检查标本标识是否与申请单相符;(2)检查送检时间是否超过规定的标本保存时间。
3.不合格标本处理:(1)对申请单信息不全者应设法与临床医师取得联系;(2)对标识不符、送检容器不合格,送检时间超过规定时间的标本应注明原因,退回,要求重新留取标本,并做记录。
三、实验室检查1、涂片检查当检查霍乱弧菌以及菌群失调优势菌时需作直接涂片检查。
(1)检查霍乱弧菌落染色检查:取新鲜送检标本涂片,干燥后革兰氏染色,油镜下观察有无革兰阴性呈鱼群排列的弧菌。
悬液检查:取患者粪便,制成悬滴标本,检查细菌的动力,霍乱弧菌呈穿梭状活泼的运动,在悬滴涂下加O1群霍乱弧菌诊断血清后,在显微镜下观察,若原运动的现象停止,为制动试验阳性。
可初步推断为疑似O1群霍乱弧菌。
(2)酵母菌涂片检查:涂片染色在油镜下观察,是否有卵形的芽生孢子及假菌丝,即报告检出酵母样菌。
(3)粪便中优势菌:涂片革兰氏染色油镜下观察:染色性、细菌形态、排列、各自在涂下中所见到的相对比例、推定主要优势菌,并及时报告结果。
2、培养及结果观察(1)沙门-志贺菌:接种SS(或HE)及MAC(或中国兰),35℃、18-24h后检查平板,如未发现沙门菌或志贺菌的可疑菌落,48h重复检查一次。
如未发现可疑菌落,可报告:“未检出沙门/志贺菌”;如有疑似菌落,做推断性生化试验,初步生化反应符合两属生物学定义,并与志贺菌诊断血清中之一发生明显凝集者,可报告“检出**志贺菌”;与沙门菌多价及群因子诊断血清凝集者,只能报告“检出*群沙门菌”。
沙门/志贺菌的选择性增菌培养基,此类培养能抑制革兰阳性菌及暂时性抑制大肠埃希氏菌和变形杆菌生长,并促进沙门/志贺菌的生长。
微生物学标本采集与处理程序
微生物学标本采集与处理程序1. 引言微生物学标本的采集和处理是微生物学研究中至关重要的一环。
正确的采集和处理程序能够保证标本的质量和准确性,从而确保后续的实验和分析的可靠性。
本文档旨在介绍一套标准的微生物学标本采集与处理程序,以帮助研究人员在实验室中进行规范的操作。
2. 标本采集2.1 选择合适的采集根据所研究的微生物类型和标本特点,选择合适的采集。
常用的采集包括离心管、培养皿、尿液收集等。
确保采集清洁无污染,并在使用前进行灭菌处理。
2.2 标本采集技巧在采集标本前,确保双手清洁并穿戴好防护手套。
根据标本类型,采取适当的采集方法,例如:- 血液标本:通过静脉采血或采用穿刺器采集足跟血。
- 粪便标本:采用干燥的收集新鲜便样,并确保不混入尿液、水或其他污染物。
- 尿液标本:清洁外阴部,使用无菌尿杯收集中段尿液。
- 喉拭子标本:使用标本采集棒轻轻刮取喉部后壁表面。
- 污水标本:根据采样点不同,采用合适的和采集方法。
2.3 标本标识标本采集完成后,将标本上贴上标识标签,标明采集日期、采集者姓名、标本类型等关键信息。
确保标识清晰、不易脱落。
3. 标本处理3.1 标本转运采集完成后,及时将标本转运至实验室。
对于需要特殊处理的标本,应按照相应的要求进行转运,确保样本稳定和安全。
3.2 标本处理前的准备在处理标本前,仔细阅读实验操作指南,准备必要的试剂和材料。
同时,确保实验室工作台面清洁无菌。
3.3 标本处理步骤根据实验要求,进行标本处理的步骤。
可能的步骤包括标本培养、PCR扩增、生物化学检测等。
根据具体情况,确保每一步骤的操作规范和无菌。
3.4 标本处理后的处理标本处理完成后,将废弃物正确处理,如进行灭菌消毒或遵守实验室废物管理规定。
4. 结论微生物学标本采集和处理程序的规范操作对于研究可靠性和实验结果的准确性至关重要。
研究人员应遵循本文档中的程序和指南,确保标本采集和处理的质量和准确性,从而提升微生物学研究的可信度和可靠性。
医学检验-粪便标本处理
粪便标本粪便标本中常见的病原菌:革兰氏阳性菌革兰氏阴性菌金黄色葡萄球菌伤寒及其他沙门氏菌厌氧链球菌种志贺菌属结核分枝杆菌致病大肠埃希氏菌产气荚膜杆菌弧菌属菌种艰辨梭菌气单胞菌种白色念珠菌邻单胞菌小肠结肠炎耶尔森菌弯曲菌沙门-志贺氏菌:接种HE及麦康凯平板,35℃、18~24小时后检查平板,有疑似菌落,接种双糖,细菌分纯后用细菌鉴定仪上板鉴定后与沙门、志贺氏菌因子血清凝集,以确诊.霍乱弧菌培养:取疑似患者粪便接种于碱性蛋白胨水中,进行增菌,同时划线接种于碱性琼脂平板/双洗平板血琼脂平板,孵育.增菌培养孵育6小时后,取菌膜移种于上述平板,进行分离培养,并同时做涂片,行革兰染色和悬滴标本,检查形态和活动力.各种分离平板在孵育18-24小时。
观察菌落,挑取可疑菌落,先与生理盐水混匀,观察有无自凝现象.再用O1群霍乱多价血清作玻片凝集试验. 如发现霍乱病人,立即向当地防疫部门提供及时准确的信息.致病大肠埃希氏菌培养:引起腹泻的大肠杆菌有四种--ETEC、EPEC、EIEC、EHEC.取液体状、脓血或糊状粪便或肛拭子划线接种于麦康凯或伊红美兰及血琼脂平板上,35℃孵育18-24小时,挑选乳糖发酵菌落5个,移种于KIA和MIU孵育过夜,并同时进行细菌分纯,用细菌鉴定仪上板鉴定并进行血清学分型.副溶血弧菌培养:取粪便接种于副溶血弧菌增菌液中,6-8小时后接种于TCBS和SS琼脂平板上,35℃孵育18-24小时后,观察菌落,挑取TCBS上绿色微隆、浑浊、湿润菌落,SS上挑取无色透明、不易挑起菌落进行分纯后用细菌鉴定仪上板鉴定.真菌培养:真菌性腹泻多继发于抗生素治疗后,常见于白色念珠菌、球拟酵母菌.将标本接种于含氯霉素的沙保氏琼脂及血琼脂平板,置25-30℃孵育24-48小时,根据菌落形态及涂片革兰氏染色所见结果,决定鉴定方法.菌群失调及菌交替症:根据临床提示粪便培养需选用数种培养基,包括强选择性和弱选择性肠道培养基、需氧及厌氧血琼脂平板、沙保氏琼脂等,按各类细菌分别进行培养鉴定,并观察其数量变化.3、操作流程(沙门-志贺氏菌属检查)分离培养增菌培养血清学鉴定细菌鉴定药敏试验报告4、报告方式:以分离目的菌种的结果而决定,如:目前常规以SS/HE和中国蓝或伊红美兰分离粪便中的致病菌,阳性者应报告“沙门菌或志贺氏菌”,阴性应报告“未检出沙门菌属或志贺菌属”.其他培养结果报告方式与上述原则基本相同.5、注意事项(1)人类肠道中的细菌种类繁多,数量亦多,在健康人肠道内经常寄居的大量的细菌,一旦肠道发生病理改变时,就可能侵入病变部位而引起疾病。
微生物粪便标本的采集和处理
微生物粪便标本的采集和处理微生物粪便标本的采集和处理粪便标本的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、肠道菌群、真菌涂片、结核菌涂片。
下面是yjbys店铺为大家带来的微生物粪便标本的采集和处理知识,欢迎阅读。
一、检验项目粪便标本的细菌培养、真菌培养、结核菌培养、肠道菌群、真菌涂片、结核菌涂片。
二、标本采集【标本采集前的注意事项】应在抗生素应用前或停药一周后采集标本,如不能停用抗生素,应于下次抗生素应用前采集。
【标本送检指征】1.急性腹泻:大便次数明显增多,腹痛,里急后重,往往伴有发热,大便性状为粘液便或脓血便。
2.慢性腹泻:大便次数多,多为稀便,伴有全身乏力等症状。
3.无痛性大量水样便或米泔样稀便。
4.先吐后泻:恶心、呕吐、腹痛、腹泻。
有集体发病史,多为细菌性食物中毒所致。
5.抗生素治疗后腹泻:常发生于长期抗生素治疗后,糊状便,排便次数增加。
6.高热惊厥:通常为中毒性痢疾,多见于婴幼儿和小儿。
【标本的.采集容器】一次性无菌便盒。
【标本的采集方法】1.自然排便采集法:自然排便后,调取有脓血粘液部位的粪便2~3g,液状粪便取絮状物盛于无菌的容器内或置于保存液或增菌液中送检。
2.直肠拭子法:如不易获得粪便时或排便困难的患者及幼儿,可采用直肠拭子方法采集,取出后置于灭菌容器内送检。
【标本采集注意事项】1.采集时间:应在急性期采样,以提高检出率,最好在用药前。
2.送检:应立即送检,如不能立即送检,放入Cary-Blair运送培养基或pH7.0的磷酸盐甘油(0.033mol/L PBS与等体积的甘油混合)中运送和保存。
*标本运送过程中必须保证其安全,防止溢出,避免细菌污染。
粪便标本采集有何要求及注意事项?
粪便标本采集有何要求及注意事项?粪便标本的采集对结果是否准确有着直接的影响,一般情况下,都是利用自然排除的粪便。
下文针对粪便标本采集有何要求及注意事项进行详细介绍。
1.什么情况下需要留取粪便标本?在门急诊就诊的患者,如果存在粪便次数发生改变,或者是粪便的性状发生改变,为了可以对消化道和通向肠道的胰腺、肝胆等器官是否存在出血、有无炎症、寄生虫感染等情况进行了解,或者是为了对粪便中是否存在致病菌、病毒进行检查,通常情况下,接诊的医生会要求患者留取粪便标本,进行相关检查,其中涉及到大便常规和大便潜血以及寄生虫卵镜检和轮状病毒抗原等项目。
2.粪便标本采集时有哪些要求?2.1粪便常规和隐血试验利用容器中的小棒,对少许新鲜粪便进行挑取,形状大概有小黄豆大小即可,并对其中粘液部分和脓血部分以及颜色异常部分进行挑选,若粪便外观没有异常,那么可以从粪便表面不同部位和粪便的深处部分挑选,进行取材。
粪便标本的量应该控制在30-50mg,并把标本放入到清洁干燥且有盖的塑料盒中,在1h内进行送检。
如果病患者没有粪便,但是又必需进行检查时,可以通过肛门指诊,对粪便进行获取。
灌肠以后的粪便因为有可能会因为过稀或者是混有油滴,所以不适合进行检验。
2.2粪便寄生虫检查标本对需要进行阿米巴滋养体检查的婴孩在排便以后,马上从细软的部分,或者是从脓血部分进行取材,并立即送至化验检测。
在家中患者进行标本留取时,在进行送检时需要做到保温措施,因为阿米巴原虫会在低温下失去活动能力,不易于进行检查。
在对蛲虫卵进行检查时,在患者清晨排便之前,可以在肛门四周的皱襞处,用透明薄膜试子对标本进行拭取,并把寄生虫卵标本及时送至检验。
并且,需要连续进行3天送检,以防由于一些原虫或者是蠕虫周期性排卵现象而造成漏检。
2.3粪便微生物检查标本需要利用无菌有盖容器来装粪便标本。
在培养普通细菌时,对脓血和黏液部分的粪便进行取材,大约3g左右,液体粪便可以取材3ml容量并置于无菌瓶中,并马上进行送检。
微生物检验标本采集运送程序
标本的采集和运送具有重要意义,其质量直接影响到微生物实验室检测结果的可靠性。标本的采集和处理方式不当将导致病原体分离失败,或无法确定真正致病的微生物,给医院感染的病原学诊断造成困难,因此必须规范微生物检验标本的采集、运送,保证实验检测前标本质量。
标本
类型
采集
时间
温度
转运
报告时间
2、液体粪便取1~3ml
无菌
容器
常温
≤2h
住院超过3d或入院诊断不是胃肠炎的病人,不做常规粪便培养
直肠拭子
1、小心插入拭子超越肛门括约肌,轻轻旋转拭子,在肛门隐窝取样
2、用于检测病原的拭子应能见到粪便
无菌
试管
褥疮溃疡
1、一般不选择拭子标本
2、无菌盐水清洗表面
3、如得不到活检标本或抽吸物,则用拭子用力采集损伤底部
由于褥疮溃疡拭子提供不了什么临床信息,一般选择组织活检或针头抽吸标本
1/d#表示一天中仅需送检1次,无需多次重复送检相同标本
涂
片
抗
酸
染
色
痰
量多为宜
无菌容器
无
1h出报告
至少连续送3d,每日1次
尿(24h尿沉淀或12h全夜尿沉淀)
10ml
无菌管
留取24h尿或12h全夜尿于洁净容器中,必须静止2h后,弃上清液,收集沉渣约10ml于无菌容器送检
血培养瓶有两种规格,采血量不一样。
成人瓶:
8~10ml/瓶
小儿瓶:
1~3ml/瓶
≤2h
常温
禁止冷藏
阴性:5d
阳性:随时报告危急值,最终报告及时发出
建议从不同部位各采1瓶,共2瓶同时送检。
1、采集部位通常为肘静脉,疑为细菌性心内膜炎时以肘动脉或股动脉为宜。
粪便标本细菌的分离与鉴定
粪便标本细菌的分离与鉴定近年来恶性事件频发,人们对卫生环境的重视程度越来越高。
其中公共场所的卫生问题一直是大家非常关心的策题,其中卫生间的卫生状况是大家关注的一大问题,而卫生间内沾满的细菌就是公共卫生问题的主要因素之一。
细菌在人体内会引起很多疾病,这些疾病会在不严谨的卫生条件下迅速传播。
因此,粪便标本细菌的分离与鉴定在卫生监督和检验规范化中占有非常重要的地位。
其中分离与鉴定细菌的关键环节是对细菌菌种的确认,在这个过程中需要用到一些专业知识和技术,本文将对这个问题进行探讨。
一、概述微生物在环境中广泛分布,粪便中的细菌数量较为庞大,是目前分离和鉴定细菌的常见来源之一。
粪便样品可以分离到多种细菌,包括厌氧菌和好氧菌等,这些细菌在卫生和疾病的预防中都具有重要意义。
在粪便标本中分离细菌的过程可以用于:1. 发现某些疾病的病原体,如肠道病原体、结核杆菌等。
2. 监测某些疾病发病的情况。
3. 对某些疾病的流行趋势进行分析。
4. 对卫生条件的改善进行监督。
二、方法1. 粪便标本的采集在采集粪便标本时,需要注意以下几点:(1)标本应在进餐后2小时、饮水后1小时以及对盐类、药物等刺激物质的摄入后24小时采集;(2)采集过程中需注意避免采入纸巾等异物;(3)采集后应尽快送至实验室进行处理。
2. 样品前处理在进行粪便标本的分离和鉴定前,需要将样品进行一定的前处理。
标本的前处理包括:(1)由于肠道病原体在进入肠道后很快形成固体,因此应使用3%高锰酸钾对标本进行消毒处理。
(2)用无菌的铲子将样品取出,放入1%无菌盐水中,使固体样品充分悬浮。
3. 细菌的分离在细菌的分离中,需要先进行预处理,(1)按1:9的比例取出1ml的悬浮液,加入无菌的1%葡萄糖盐肉汤中,放入恒温箱(37℃)进行预培养约12小时。
(2)将培养好的液体进行振荡和混合,取出适量的液体,分别用铁锥、铜钩等方法分别划入三个标准平板上,分别进行筛菌剂涂布,静置约20分钟后将平板放入恒温培养箱内培养。
粪便常规检查标本采集指南
粪便常规检查标本采集指南
一、患者准备
1.患者应在收集标本前保持患者原有饮食,并且不要进行特殊饮食、使用特殊药物或者食物补充剂,以免影响检查结果。
2.患者要保持正常的大便节律,尽量在自然排便后直接采集标本。
二、标本采集器具
1.采集容器:标准的标本采集容器应该是干净无菌的,并且容器的底部应该有一个密封盖,避免样品的泄漏。
三、标本采集方法
1.患者在清洁马桶上排便前,可以将一定量的清洁纸杯放入马桶内,以避免污染。
2.采集标本时,使用一次性手套保持个人卫生。
3.使用采集棒或者塑料勺子将新鲜的粪便标本取得适量(约5毫升)放入采集容器内。
注意不能将尿液、水份、纸巾等杂质混入标本中。
4.确保标本完全填满容器,且不溢出。
四、标本运输
1.标本运输应尽量及时,不得长时间放置。
若不能及时送达实验室,可以将标本放入冰袋中冷藏,并尽快送达实验室。
2.在运输过程中应避免标本翻倒、震荡和温度波动,以免对标本结果产生干扰。
五、注意事项
1.采集标本时不能使用含有抗生素、抗菌素、抗真菌药物等药物的洗肠剂,以免影响检查结果。
2.如因其中一种特殊原因(如禁跟踪其中一种感染源)需要消毒标本采取采用消毒标本并告知实验室。
3.采集标本应尽量避免接触尿液、洗涤剂、清洁剂等化学物质,以免影响检查结果。
4.标本采集器具应避免使用与其他标本采集器具交叉污染,以免产生误差。
六、标本处理与保存
1.送检前,标本应保存在4℃以下,以免细菌繁殖。
2.标本送达实验室后,实验室人员会进行相应的处理和检验。
微生物标本采集方法及注意事项
微生物标本采集方法及注意事项一、粪便标本采集和处理(1)采集方法1.自然排便法:取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分,2~3g 或 1~2 m1,盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检;若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH8.6)。
2. 直肠拭子法:难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法,将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约 4~5cm(幼儿 2~3cm),轻轻在直肠内旋转。
擦取直肠表面粘液后取出,盛于无菌试管中或保存液中送检。
(2) 注意事项1.尽可能在抗生素使用之前采集标本。
2.所挑取的粪便不应接触其他部位(如便盆),粪便样本中不应混入尿液及其他异物,采集过程应尽量无菌操作。
3.不应用厕纸收集粪便。
4.对同一病人在同一天不宜重复送检。
5.宜在感染急性期(通常是5d-7d内)采集标本。
6.下列腹泻患者应连续3d送检标本--社区获得性腹泻(入院前或72h内出现症状)--医院腹泻(入院72h后出现症状),且至少有下列情况之一:大于65岁并伴有内科疾病、HIV感染、粒缺(中性粒细胞--怀疑肠道感染的`非腹泻性表现。
7.肠炎和发热病人建议做血培养。
8.伤寒沙门菌感染时骨髓培养高出血培养。
9新鲜粪便标本应在采集后尽快送检,不应超过2h。
(3)标本拒收干燥的拭子、含钡粪便、黄软成形便、干便、明显污染的粪便、一日内重复送检的标本,应设法与临床医师联系,可要求重新留取标本,并做好记录,在没有与医师沟通之前标本不应丢弃,仍按实验室标本保存原则存放。
二、尿液标本采集和处理(1)采集方法1. 中段尿采集法:清晨起床后用肥皂水清洗尿道口和外阴部,再用清水冲洗尿道口周围,然后排尿弃去前段尿液,收集中段尿 5~10ml盛于带盖的无菌容器内立即送检,采集后于0.5h内进行接种。
2. 耻骨上膀胱穿刺法:评估膀胱内细菌感染的“金标准”。
培养结果与临床病情矛盾时可采用此法,一般较少应用。
3. 导尿法:采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液,导取 10~15ml 尿液,置无菌容器中送检,尿液标本不能通过收集袋引流管口流出的方式采集。
人类粪便样本采集与处理 标准
人类粪便样本采集与处理标准
人类粪便样本是生物样本库中重要的人类遗传资源样本类型之一,因此生物样本库粪便样本及其数据采集,与医疗机构临床检验科采集粪便(肛拭子)用于疾病诊断和疗效观察活动相比,有着本质区别。
作为生物样本库保藏活动起始两个关键节点,生物样本及其相关数据的采集与处理规范化非常重要。
生物样本库粪便样本采集前,需通过严格的伦理审查,与捐赠者签订知情同意书;样本库在粪便样本及其相关数据采集后,对暂存、运输、处理和储存等过程有一系列的质量控制程序。
基于此,建立人类粪便样本采集与处理标准,为医学研究提供高质量粪便样本和标准化相关数据十分必要。
GB/T 41908-2022《人类粪便样本采集与处理》的发布实施,为临床采集处理科研用粪便样本和病人捐赠粪便样本用于科学研究,如应用在消化道微生态研究(肠道菌群)、非靶向代谢组学研究(短链脂肪酸)、粪便人体细胞研究(肿瘤早筛)等提供更专业的操作指导,同时为规范生物样本库的粪便样本保藏活动、确保粪便样本质量提供了重要的标准依据,进一步促进医学创新、转化应用的发展。
依据ISO 20387 2018《生物样本库质量和能力通用要求》,中国合格评定国家认可委员会(CNAS)于2021年1月1日起正式实施生物样本库认可,极大提升了各种机构生物样本库的管理和技术水平。
GB/T 41908-2022《人类粪便样本采集与处理》作为ISO 20387认可的支持性技术标准文件,将应用于这类机构的认可工作,促进行业质量
和管理水平提升,推动我国认可工作的高质量发展。
微生物检验标本的正确采集及注意事项
微生物检验标本的正确采集及注意事项微生物检验标本的采集直接影响微生物培养与鉴定结果,准确的结果可为临床诊疗提供指导,有助于科学用药、控制感染,进而延缓细菌耐药、监测医院感染、减少抗菌药物滥用,而正确采集微生物检验标本是最为关键、重要的一步。
为此,本文总结了微生物检验标本的正确采集方法和注意事项,下面让我们一起来了解一下。
一、采集血液标本应用75%酒精清洁局部皮肤,待皮肤干燥后应用1%--2%碘酊或者1%碘伏消毒穿刺点及周围皮肤,消毒范围至少需要3厘米,再次使用75%酒精脱碘后采集血液;对于碘过敏的患者,则采用75%酒精消毒30秒,自然干燥后再用75%酒精消毒60秒的消毒策略。
消毒后不可用手直接触摸穿刺部位,穿刺抽吸8--10毫升成人血液(婴幼儿及儿童患者采血量则不能超过总血量的1%),注入血培养瓶中并立刻颠倒混匀,以防血液凝固,但不可剧烈震动,以防标本溶血。
值得注意的是,血液标本作培养时需格外小心,皮肤表面含有较多微生物,消毒不规范则会污染血液,故应在采血前由内至外认真消毒;血液注入培养基之前不可更换针头,以防感染;采血前应用抗菌药物且无法停药者应在下次用药前采血,注意,不可在静脉穿刺处采集血液标本,除怀疑导管相关感染外亦不可经由静脉导管或动脉插管内抽血;采血量并不是越多越好,采血量太多,则会稀释培养液,营养成分不够;怀疑为菌血症的患者应尽早采血,避免延误最佳时机;怀疑为布鲁式病以及细菌性心内膜炎患者应选择肘动脉、股动脉穿刺采集血液,除发热期以外,均应多次采血,建议24小时内采集3--4次,且要增加采血量,以10毫升左右为宜。
二、采集痰液标本于清晨起床后使用凉白开多次漱口,去除口腔内的杂菌,并用力咳嗽,以咳出肺部深处的脓痰,吐入清洁、干燥的容器中送检。
如果患者痰液量比较少,可以应用25毫升45摄氏度3%--10%氯化钠溶液行雾化吸入,如果是患儿,则需要轻轻按压其胸骨上方的气管,在其咳痰后使用无菌棉棒采集痰液标本。
微生物检验标本的正确采集方法及注意事项
56医药健闻微生物检验标本的正确采集方法及注意事项刘洋 (河南京城皮肤中医院,河南郑州 450000)常见的微生物检验标本包括以下几种类型:血、骨髓、静脉导管标本,痰及下呼吸道标本,尿液标本,大便标本,生殖道系统标本,眼、耳、鼻、咽拭子标本。
血、骨髓、静脉导管标本正确采集方法:(1)先用75%酒精对静脉穿刺部位擦拭消毒30 s 以上,用一根碘棉签从穿刺点向外1.5~2 cm 的直径范围内再次消毒60 s 。
(2)使用75%酒精对血培养瓶和橡皮塞子消毒60 s 。
在血液注入血培养瓶前,先用无菌纱布或者棉签将橡皮塞子表面的残余酒精清除干净。
(3)在穿刺前或穿刺期间,佩戴乳胶手套将静脉进行固定,防止滑动,但是不可接触穿刺点;使用注射器无菌穿刺取血后,可直接注入血培养瓶中;在血标本进入到培养瓶后,轻轻颠倒混匀并立即送检,以免血液凝固。
(4)成人的采血量是8~10 ml ,儿童的采血量是1~3 ml ,骨髓采血量是1~2 ml 。
注意事项:(1)静脉采血的部位通常为肘静脉,不建议从动脉采血。
患者疑是细菌性心内膜炎时,可以选择肘动脉或者股动脉采血,勿要在静脉滴注抗菌药物时进行采血。
(2)使用注射器无菌穿刺取血后勿换针头,直接注入血培养瓶。
如果需要进行第二次穿刺,需要更换针头。
(3)多次采血时,应在不同部位的血管穿刺,以排除皮肤菌丛污染的可能。
除非无法从静脉穿刺处取血,否则不能从静脉植入管内取血。
(4)若是从静脉植入管内取血,应该同时自外周静脉采集血液进行培养,以协助判读血培养阳性结果,同时在申请单上注明标本类型。
(5)采血前,应该将患者信息、采血时间、部位、采血量写在标签上,并贴在培养瓶上。
(6)有血的培养瓶若不能立即送检,可放室温保存,切不可放入冰箱。
痰及下呼吸道标本正确采集方法:(1)能够自行取痰的患者,在清晨起床后未进食前,先用漱口水漱口,去除口腔细菌,再用清水漱口,深呼吸后用力咳出气管深处的痰液,放置于无菌集痰器中并盖好瓶盖;无法咳痰或者不合作的患者,需要帮助其采取卧位,由上而下叩击背部,并戴好无菌手套,将无菌集痰器分别连接吸引器和无菌吸痰器,按吸痰法将痰吸入无菌集痰器内,并盖好瓶盖,收集好后立即送检。
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微生物粪便标本采集与处理
(一)目的
有效地指导粪便细菌及真菌培养标本的采集、接收及保存,使粪便培养结果尽量不受干扰因素的影响,保证检测结果准确可靠。
(二)适用范围
适用于粪便细菌及真菌培养的标本的采集、接收及处理。
(三)工作程序
1.患者准备及原始标本识别
(1)腹泻患者应在急性期、抗菌药物治疗前及时采集粪便。
(2)粪便标本采集前,护士应遵照医嘱准备好标本采集所用的容器。
首先确认患者姓名,并将患者一般信息的条码标识写在(贴于)无菌容器上。
(3)标本留取前应向患者做适当解释,以利于明确检测目的,获得更好的配合。
(4)原始标本以"电子申请单的条码号"为唯一标识。
2.粪便培养标本采集的方法、容器、类型和量
(1)粪便标本采集方法:一般细菌培养,采用自然排便法,自然排便后,挑取有脓血、黏液部位的粪便5克,液状粪便取絮状物盛于无菌的防漏大便盒内送检。
无法获取粪便时,可采取直肠拭子采集,将拭子自肛门括约肌谨慎地插入约2.5厘米,轻轻转动拭子刮取标本,取出后插入灭菌试管内送检。
如做大便的厌氧菌培养应尽量避免与空
气接触。
(2)采集容器:无菌、防漏、带匙的密封大便盒,或装有直肠拭子的试管。
(3)采集量:常规培养仅需5克左右(指头大小)新鲜粪便。
(4)注意事项:进行细菌培养的标本应留取新鲜粪便的异常成分,如黏液、血液(红色或黑色部分);若无异常成分,可各个部位取材,不得被其他异物污染,不能从尿布上取粪便标本,不得从尿壶或便盆中取标本。
3.粪便标本的运送
(1)门诊患者的粪便标本由患者本人或家属运送及物流传输装置自动传送;住院患者的粪便标本由护士、临床专职外送卫生员运送。
(2)送检地点:按规定。
(3)粪便常规培养标本及直肠拭子采集后立即送检,延迟不得超过1小时到实验室。
保存4℃少于24小时。
(4)粪便标本的运送必须保证运送过程中的安全,防止溢出。
标本溢出后,应按相关规定处理。
4.粪便标本的接收与拒收标准
(1)实验室接收合格粪便标本
检验申请单应为电子格式,内容必须齐全,粪便标本容器标识应符合程序要求,标本标识应与检验申请单的相应内容一致。
粪便标本采集后应立即送检,不能及时送检的标本应采取保存措施,参照有关程序。
(2)实验室拒收粪便标本的标准
①如果到达实验室的标本可能经过了不恰当的选择、采集、转运和存储,这种情况等同于对标本失去控制。
这些标本的处理和结果可能会提供错误的信息和不恰当的治疗。
因此,实验室必须严格标本拒收标准,并给予合适的处理。
②申请单信息不全或错误:主要信息错误如患者姓名应重新留取,其他信息缺失应及时电话联系并按要求补全。
③缺乏唯一识别标码的标本:如果没有标签或贴错标签的标本,应该立即与医生或护士联系。
原则上应该重新留取,若患者情况危重,与医生协商后,可按常规处理标本,但报告单上需注明标本不规范的具体理由。
条码使用过或无信息的标本重送。
④标本质量不合格:微生物检测标本来源不符合或存在污染,如大便凝固或有凝块,应重新送检。
在一些特殊情况下,即使所提供的标本质量不合格,也必须进行处理,例如患者腹泻病情严重等,和临床医生联系后在报告单上标明。
⑤没有提供检测标本所适宜的条件或运送容器:如用卫生纸包裹送检,或从尿布上直接留取应及时与临床联系,阐明检测要求,指出不符合的地方,并要求一个能满足检测条件的标本。
(3)实验室接收特殊不合格粪便标本的说明
在下列情况下:如休克、昏迷患者及婴幼儿等特殊情况,粪便标本不足1克,必须与临床医生联系,经临床医生同意后,临床检验科方可接收粪便标本并送检,并在检验结果报告单中注明。
(4)拒收标本时应及时通知临床医生或护士,但原始标本由检验科保存处理,其他人员未经允许不得取走。
5.生物参考区间及临床意义
生物参考区间:正常情况下粪便常规(SS)培养无致病菌生长。
临床意义:粪便培养腹泻病原菌阳性是细菌性痢疾及肠炎的诊断依据,根据细菌种属的不同进行相应的病原学诊断,并依据药物敏感性及时治疗。
6.已检过的粪便细菌培养标本不保存。
7.附加检验项目及时间限制
粪便细菌培养标本可附加真菌培养检验项目。
8.因分析失败原因而需再检验标本的处理
粪便细菌培养因仪器的原因(如温控器误判试或剂温度过低),导致培养阴性,应先查找仪器失误原因,及时纠正,待质检合格后再使用或换用其他细菌培养箱进行检测。
9.检查后粪便标本及废物处理
检验过的粪便细菌及真菌培养标本及检验过程中产生的各种废物,按《废物处理制度》进行处理。