微生物标本的采集方法.

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微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项正确采集临床微生物标本,直接影响到微生物培养鉴定结果。

可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的感染控制提供依据,是正确、合理使用抗菌药物,延缓细菌耐药,减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步,也是最重要的一步。

为此应正确采集各种细菌学标本。

一、血液标本的采集1、采集方法(1)75%酒精清洁局部皮肤。

(2)待皮肤干后,再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒,范围不应小于5cm(直径),且不能用手指触摸消毒后的皮肤。

(3)皮肤碘酒干后(约1min),穿刺采集血液,采血量成人5-10ml,婴幼儿1-5ml。

(4)采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。

2、注意事项(1)怀疑菌血症应尽早采血,体温上升(38.5℃)采血可提高阳性率,但也要防止因等待而延误时机。

(2)对已经使用抗菌药物,而又不能停药者,也应在下次用药前采血。

切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本,也不能从静脉导管及动脉插管中取血。

(3)培养基与血液之比以10:1为宜,以稀释血液中的抗生素,抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人,培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。

(4)近年研究表明,将血液注入血培养基前,更换针头反而易导致污染。

(5)每例至少采血两次,间隔0.5-1h,以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。

(6)疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人,以肘动脉或股动脉采血为宜,除在发热期采血外,并要多次采血(24h 3-4次)和增加采血量(可增加10ml)。

(7)采血后立即送检,如不能立即送检可置室温,而不能放置冰箱。

(8)如临床表现很似败血症,而血培养多次阴性者,提示考虑厌氧菌和真菌感染的可能。

二、骨髓的采集1、采集方法在病灶部位或髂前(后)上脊处严格消毒后抽取骨髓1ml,注入血培养瓶内。

2、注意事项(1)骨髓内含有大量的单核巨噬细胞系统的细胞,因而骨髓培养对伤寒病人的诊断较血培养优越。

微生物标本的正确采集

微生物标本的正确采集

微生物标本的正确采集正确采集微生物标本是进行病原学检查的关键步骤,因为只有采集到合适的标本,才能够准确、客观地检测出病原菌,为诊断和治疗提供科学依据。

以下是一些采集微生物标本的正确方法:一、注意清洁和消毒在采集标本前,必须对手部进行清洁和消毒,以减少污染的可能性。

使用肥皂和水清洁手部,或者使用酒精消毒剂消毒手部。

同时,还需要对采集标本所使用的器械进行消毒,确保无菌操作。

二、选择正确的标本类型不同的微生物感染会有不同的症状和体征,因此需要根据患者的具体情况选择正确的标本类型。

例如,对于呼吸道感染,可以使用鼻咽拭子、痰液等;对于胃肠道感染,可以使用大便标本等。

三、正确采集标本1.采集前准备:了解患者的病史和症状,确定需要采集的标本类型,准备好采集所需的器械和消毒用品。

2.采集方法:根据不同的标本类型,采用正确的采集方法。

例如,对于痰液标本,需要让患者用力咳嗽,将痰液咳出并放入收集器中;对于大便标本,需要让患者取适量的大便放入收集器中。

3.采集量:采集的标本量应该足够,以便进行实验室检测和分析。

一般来说,采集的标本量应该不少于检测所需量的两倍。

4.采集时间:采集标本的时间也有讲究。

例如,对于呼吸道病毒的检测,最好在患者发病的早期采集标本;对于肠道病毒的检测,最好在患者发病后一周内采集标本。

5.保存方式:采集完标本后,需要妥善保存。

一般来说,应该将标本保存在适当的介质中,如保存液或培养基中,以保持标本的活性和完整性。

同时,还需要注意温度和湿度等环境因素对标本的影响。

四、避免污染和交叉感染在采集标本的过程中,必须严格遵守无菌操作原则,避免污染和交叉感染。

例如,在采集痰液标本时,应该让患者先用清水漱口,再用无菌棉签擦拭咽部,以减少口腔和咽部的细菌污染。

同时,还需要注意实验室内的清洁卫生和消毒工作,确保实验室内的空气和环境符合要求。

五、及时送检采集完标本后,需要及时送检。

一般来说,应该将标本尽快送到实验室进行检测和分析。

临床微生物标本采集方法

临床微生物标本采集方法

一、采样前准备
1、当日术毕,按常规对手术间所有物表 及地面进行湿式清洁和擦拭。
2、检查净化空调系统运作是否正常,当 日完成手术间清洁后,调节空调系统处 于待机状态,次晨打开系统运行30min。 自净后采样。
二、采用平板沉降法 1、采样时间: 在净化空调开启30min进行采样,采样时洁净 手术室大门应保持关闭,以维持手术室正压 状态和洁净度。 2、采样护士准备: 在采样前应洗手(或手消毒)
采样时平板应从科室最靠内的房间放置, 依次向外布放,每个手术间也是从最靠 里的位置放置平板,最后放置最靠门的 采样点。采样点分布均匀,收取平板顺 序相反。
5、布点要求: 百级手术间,手术区(手术台两侧0.9m以内,两 端0.4m内)呈对角线,东南西北中5点,周边区 (距墙1m,每边2个)8点,共需13个培养皿;千 级手术间,手术区(手术台两侧0.6m以内,两端 0.4m以内)呈单角线3点,周边区(距1机,长边 2个,短边1个)6点,共需9个培养皿;万级手术 间:手术区(手术台4边,0.4m以内)呈对角线3点, 周边区(距离1m每边1个)4点,共需7个培养皿。 检测时可做一次空白对照和模拟操作。模拟操作 将一个对照皿打开后立即封盖,两个对照结果必 须为阴性,整个操作过程应符合无菌要求。
将用于革兰染色的标本置于无菌标本杯中
将用于培养的标本置于需氧运送培养基中, 密闭保存
分别标注患者及标本信息,30min内送检,否则置4℃冰 箱冷藏,24h内送检
四、使用中紫外线灯辐照度值测定法
方法:紫外线强度照射指示卡测定法
物品准备:标尺、紫外线强度照射指示卡
放好标尺,开启紫外线灯
开启紫外线灯5min后,将指示卡置于紫外线灯下垂直距离1m处, 有图案一面朝上
临床微生物标本采集方法

微生物学标本采集与处理程序

微生物学标本采集与处理程序

微生物学标本采集与处理程序1. 引言微生物学标本的采集和处理是微生物学研究中至关重要的一环。

正确的采集和处理程序能够保证标本的质量和准确性,从而确保后续的实验和分析的可靠性。

本文档旨在介绍一套标准的微生物学标本采集与处理程序,以帮助研究人员在实验室中进行规范的操作。

2. 标本采集2.1 选择合适的采集根据所研究的微生物类型和标本特点,选择合适的采集。

常用的采集包括离心管、培养皿、尿液收集等。

确保采集清洁无污染,并在使用前进行灭菌处理。

2.2 标本采集技巧在采集标本前,确保双手清洁并穿戴好防护手套。

根据标本类型,采取适当的采集方法,例如:- 血液标本:通过静脉采血或采用穿刺器采集足跟血。

- 粪便标本:采用干燥的收集新鲜便样,并确保不混入尿液、水或其他污染物。

- 尿液标本:清洁外阴部,使用无菌尿杯收集中段尿液。

- 喉拭子标本:使用标本采集棒轻轻刮取喉部后壁表面。

- 污水标本:根据采样点不同,采用合适的和采集方法。

2.3 标本标识标本采集完成后,将标本上贴上标识标签,标明采集日期、采集者姓名、标本类型等关键信息。

确保标识清晰、不易脱落。

3. 标本处理3.1 标本转运采集完成后,及时将标本转运至实验室。

对于需要特殊处理的标本,应按照相应的要求进行转运,确保样本稳定和安全。

3.2 标本处理前的准备在处理标本前,仔细阅读实验操作指南,准备必要的试剂和材料。

同时,确保实验室工作台面清洁无菌。

3.3 标本处理步骤根据实验要求,进行标本处理的步骤。

可能的步骤包括标本培养、PCR扩增、生物化学检测等。

根据具体情况,确保每一步骤的操作规范和无菌。

3.4 标本处理后的处理标本处理完成后,将废弃物正确处理,如进行灭菌消毒或遵守实验室废物管理规定。

4. 结论微生物学标本采集和处理程序的规范操作对于研究可靠性和实验结果的准确性至关重要。

研究人员应遵循本文档中的程序和指南,确保标本采集和处理的质量和准确性,从而提升微生物学研究的可信度和可靠性。

微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项正确采集临床微生物标本,直接影响到微生物培养鉴定结果。

据相关统计:微生物标本的检测误差来源:80%来源于分析前20%来源于分析中和分析后其它检验样本的检测误差来源:45%分析前10%分析中(仪器))45%分析后.检验标本采集质量控制的重要性,分析前的误差来源所占比例的这个数据是惊人的,在我们的大型医院都存在这个问题,而在我们医院应该不会低于这个数据。

可靠的检验结果可以指导临床诊断治疗,为临床科学用药和成功的感染控制提供依据,是正确、合理使用抗菌药物,延缓细菌耐药,减少抗菌药物滥用和监测医院感染的第一步,也是最重要的一步。

为此应正确采集各种细菌学标本。

一、血液标本的采集1、采集方法(1)75%酒精清洁局部皮肤。

(2)待皮肤干后,再用2%—2.5%碘酒从穿刺点中心部位开始消毒,范围不应小于5cm (直径),且不能用手指触摸消毒后的皮肤。

(3)皮肤碘酒干后(约1min),穿刺采集血液,采血量成人5-10ml,婴幼儿1-5ml。

(4)采血后立即在床旁接种培养瓶,并迅速轻摇,充分混匀防止凝固,但又不可剧震以防溶血。

2、注意事项(1)怀疑菌血症应尽早采血,体温上升(38.5℃)采血可提高阳性率,但也要防止因等待而延误时机。

(2)对已经使用抗菌药物,而又不能停药者,应在抗菌药物浓度最低时采集也即在下次用药前采血。

切忌不要在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本,也不能从静脉导管及动脉插管中取血。

(3)培养基与血液之比以10:1为宜,以稀释血液中的抗生素,抗体等杀菌物质;有人主张对接受抗菌药物治疗的病人,培养基与采血量之比可为20:1或大于这个比例。

(4)近年研究表明,将血液注入血培养基前,更换针头反而易导致污染。

(5)每例至少采血两次,间隔0.5-1h,以利于提高阳性率和区分感染菌与污染菌。

(6)疑为细菌性心内膜炎及布鲁氏病的病人,以肘动脉或股动脉采血为宜,除在发热期采血外,并要多次采血(24h 3-4次)和增加采血量(可增加10ml)。

实验动物病原微生物检测中的标本采集技术

实验动物病原微生物检测中的标本采集技术

实验动物病原微生物检测中的标本采集技术实验动物的病原菌和寄生虫多定植于身体的特定部位,检测时需从相应部位采样以提高检出率,因此实验动物的细菌学、真菌学和寄生虫学检测涉及的标本种类众多,且采样方法和样品的制备各不相同。

一、细菌和真菌检测时的标本采集(一)皮毛、鳞屑标本将动物进行吸入麻醉(乙醚等)后适当保定,待检部位用75%乙醇消毒,直接用灭菌接种刀、镊刮取皮毛、鳞屑少许。

(二)呼吸道分泌物标本将动物麻醉后仰卧保定,并使四肢舒展固定。

用75%乙醇从腹股沟到颈部进行逆毛涂刷消毒,沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤,使腹部、胸部以及颈部肌肉全部暴露,无菌分离颈部肌肉暴露气管,于咽部以下5mm左右气管上剪一“V”形口,插入无菌接种针由下至上直达咽部轻轻转动数下,沾取气管分泌物。

如分泌物过少,可将咽部及部分气管剪下增菌培养。

(三)回盲部内容物标本将动物麻醉后仰卧保定,并使四肢舒展固定。

用75%乙醇从腹股沟到颈部进行逆毛涂刷消毒,沿腹正中线从腹部以下至下颌剪开皮肤,使腹部、胸部以及颈部肌肉全部暴露,无菌剪开腹部肌肉暴露回盲部,在回盲部剪一小口,用接种环伸入直接挑取适量内容物。

如内容物过少,可剪下包括回盲部在内的一段肠组织适当剪碎后作增菌培养。

(四)粪便标本将粪便前段弃去,取中段粪便,加适量PBS或培养液匀浆后接种,如为稀软便可直接接种。

(五)肛拭标本将灭菌棉签用生理盐水或培养液浸润后,轻轻插入动物肛门深处3~4cm,缓缓转动后取出。

(六)病灶组织分泌物及浓汁标本标本用于直接接种时,保定动物并对病灶周围用75%乙醇消毒,用接种环直接沾取分泌物或脓汁进行接种,或取下少量病变组织(对已死亡动物)于培养基表面接触后再划线接种;标本用于制备涂片时,可于载玻片上滴加适量灭菌生理盐水,挑取少量脓汁与之混匀且风干,火焰上固定,或取适量病灶分泌物与生理盐水混匀涂抹成相对较浓的涂片。

二、检测体内寄生虫的标本采集和制备体内寄生虫寄生于肠道、血液和组织内,检测时须根据不同的寄生部位采集相应标本。

微生物标本采集

微生物标本采集

微生物标本采集在医学和生物学领域,微生物标本采集是一项至关重要的工作。

它是准确诊断疾病、开展科学研究以及监测环境微生物状况的基础。

正确的标本采集方法和流程能够确保所采集的样本具有代表性和可靠性,从而为后续的检验和分析提供有力的支持。

微生物标本的种类繁多,包括血液、尿液、痰液、粪便、脑脊液、脓液、拭子等。

不同类型的标本采集方法和注意事项各有不同。

首先,我们来谈谈血液标本的采集。

这通常需要在严格的无菌条件下进行。

采血部位一般选择肘正中静脉,采血前要对皮肤进行彻底的消毒。

采血过程中,要注意避免溶血,因为溶血可能会影响检测结果的准确性。

采血的量也需要根据具体的检测项目来确定。

比如,进行血常规检查时,通常采集 2 毫升左右的血液;而进行血培养时,则需要采集更多的血液,一般为 10 毫升左右。

尿液标本的采集也有讲究。

对于常规的尿液检查,一般采用中段尿采集法。

患者需要先清洁尿道口周围的皮肤,然后开始排尿,将前段尿弃去,收集中段尿。

如果是进行 24 小时尿蛋白定量检测,则需要患者在规定的 24 小时内将所有尿液收集到一个干净的容器中,并加入防腐剂。

痰液标本对于呼吸系统疾病的诊断具有重要意义。

患者需要在清晨起床后,先用清水漱口,然后用力咳出深部的痰液,避免混入唾液。

对于无法自主咳痰的患者,可以通过吸痰的方式获取痰液标本。

粪便标本的采集相对简单,但也需要注意一些细节。

患者应尽量选取含有黏液、脓血或异常部分的粪便,如果进行寄生虫卵检查,需要在不同部位多点取样。

脑脊液标本的采集则是一项较为复杂和危险的操作,通常需要由专业的医生在严格的无菌条件下进行腰椎穿刺来获取。

脓液标本采集时,要先对局部皮肤进行消毒,然后用无菌注射器抽取脓液。

在进行微生物标本采集时,有一些通用的原则和注意事项。

首先,采集的时间要恰当。

例如,对于发热患者,在发热初期或发热高峰时采集血液标本,更容易检测到病原体。

其次,采集的部位要准确。

要根据感染的可能部位和疾病的特点选择合适的采集部位,以提高检测的阳性率。

微生物标本的采集

微生物标本的采集

伤口微生物标本采集法(一)——表面伤口微生物标本的采集
慢创中心吴帅
在压疮的整个治疗中,创面分泌物的培养是其中不可或缺的一个环节,下面具体介绍分泌物培养的留取方法及注意事项。

采集方法:
(1)用无菌生理盐水充分冲洗,以去除表面的渗出物、坏死组织和残留的敷料纤维,确保伤口是干净的。

(2)用无菌棉拭子擦涂创面的边缘和基底,应用10点取材法沿数字走“之”字形涂抹,拭子要不停转动,并以一定压力擦拭创面,确保拭子吸收足够的伤口渗液。

(3)拭子放在运送培养基中立即送检。

注意事项:
(1)采样时为了减少定植菌的混入,建议先轻轻擦去创面处皮肤表面的脓液,擦拭时如使用棉球容易使棉絮遗留在伤口内,因此建议使用完整的无菌方纱。

(2)为了不混入消毒液影响细菌生长,应该采用无菌生理盐水充分冲洗,避免使用消毒液擦拭伤口表面。

(3)焦痂不应用于细菌培养,要去除坏死和失活的组织,再做培养,因为细菌最多在坏死和正常组织之间。

(4)采集压疮边缘的脓性分泌物,不要采集创口周围的渗液。

(5)如果渗液较多,能抽出液体来,就尽量使用穿刺的方法采集标本,棉拭子对细菌有一定的抑菌作用。

微生物标本的采集方法(共52张PPT)

微生物标本的采集方法(共52张PPT)
室内面积>30㎡设4角及中央5点均距墙壁1米
用2%碘酒从穿能刺点。向外除画圆非消无毒,法至消作毒区静域直脉径达穿5cm刺以上取,涂血擦穿,刺否皮肤则2遍,不待干应从留置导管内取血。
1、采样时间:消毒处理后4小时内进行采样
1◎、经日人常工记气录道:吸使引⑤用分后泌抽进物血行消前毒时应间累将积,标使签用超贴过1于000小血时培的应养加强瓶监测颈或更上换,建立标紫外签线消内毒使容用包登记括本,病每周人用7基5%本酒精信擦拭息灯管、并记录 其他使用中消采毒液血染菌时量:间≤1、00cf采u/m血l 部位。注意不要把标签贴在培养瓶条形码上,否则
无1、关采物样品时不间得段进:入在手消术毒室处,理洁后净,区操的作物前品进需行经采清样洁消毒处理方可进入
※ 抽血后未及时混匀血液凝固 不得检出致病性微生物
☂ Ⅰ类环境:洁净手术室Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ级:
手术用房各种物体表面在每日术前和术后湿式擦拭清洁、消毒;
☂手术器械、穿刺针等:无菌生长 ☂血培养次数和采血时间 四、对可疑中心静脉导管相关血流感染 经支气管镜直接吸引 无痰可用3%---5%NaCI 5ml雾吸约5min导痰
※ 储存环境标本来源4℃冰箱----痰、尿液、粪便、活检组织、 气枪冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等
※ 室温(25℃)---血液培养、脑脊液、泌尿生殖道、眼、耳、 鼻、喉、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。
美国的理念
1970年以前,美国的医院定期对空气和环境表面(如地面、墙壁、台
面)进行培养。到了1970年,CDC和美国医院协会(AHA)主张 停止对环境的常规培养,因为医院感染发生率与空气或环境表 面中总的微生物污染水平不相关。且环境表面或空气中微生物 含量的允许水平也没有有意义的标准。1970---1975年,美国有 25%的医院减少了这种常规的环境培养工作--------一个已经持续 的趋势。

微生物取样方法大全

微生物取样方法大全

微⽣物取样⽅法⼤全随着⾼通量技术的发展,我们对微⽣物的认识逐步深⼊,微⽣物在临床以及科研上的应⽤越来越多,⽽微⽣物采样的正确与否直接关系到微⽣物数据的准确性。

因此,微⽣物的采样⽅法就显得格外重要。

⾸先,我们需要在取样的过程中,注意以下⼏个⽅⾯:(1) 所有实验⽤到的取样⽤具必须是经过灭菌的(如样品袋、取样器、采⾎管、试管、铲⼦、匙、⼑类⼯具等)。

(2) 收集样品信息,取样前或取样后应在盛装样品的容器或样品袋上⽴即贴上标签,每件样品必须标记清楚(例如品名、来源、数量、取样地点、取样⼈及取样⽇期等)。

(3) 请尽量将样本分装 3-5 份备份;建议每组取 6 个及以上重复较为合适,⾄少 3 个重复。

(4) ⽤到⾕⽲取样管的实验样品,可以常温运输;如果不⽤取样管,则必须低温-80℃保存,保存期间切忌反复冻融;低温寄送时请将样品置于泡沫箱中,⽤⼲冰寄送。

然⽽样品种类繁多,不同的样品取样有不同的⽅案,下⾯详细介绍每类样品对应的取样⽅案。

环境微⽣物普通⼟壤(1) 去除表⾯浮⼟、凋落物等,根据⼟壤情况,选择是否过2mm筛⽹,每个样品从3个及以上采样点采集并混合⽽成,建议将样本分装 3-5 份备份;注:采样时需注意每个采样点的取⼟深度及采样量应均匀⼀致,⼟样上层与下层的⽐例要相同。

(2) 保存于⽆菌离⼼管中,置于泡沫箱(冰袋或⼲冰)中,0°C以下运回实验室;(3) 如果条件不允许⽴即提DNA,可将样品置于-80°C冰箱中保存,并通过⼲冰寄送⾄公司后提取样品总 DNA。

根际⼟壤根际,是指受植物根系活动影响,在物理、化学和⽣物学性质上不同于⼟体的那部分微域环境。

部分研究是针对⼟壤微⽣物与植物之间的相互关系,因此需要对根际⼟进⾏取样。

(1) 采集植株,去除根周较松散的⼟,仍附着在根系表⾯的视为根际⼟。

将植物置于装有冰袋或⼲冰的保温箱中,避光条件,0℃以下运回实验室;(2) 准备⽆菌容器,将植物根系部分置于缓冲液(PBS或⽣理盐⽔)中震荡,震荡时间和强度依据样本实际情况调整,洗下根际⼟;(3) 将洗涤液进⾏⾼速离⼼,收集⼟壤沉淀,若沉淀较少,也可过滤膜,同⼀样⽅取样的样本进⾏多点等量混合;(4) 将样本分装⾄离⼼管中,密封,标记样本信息后液氮速冻,置于-80℃冰箱保存,⼲冰寄送。

微生物标本采集

微生物标本采集

微生物标本采集微生物标本采集是一项基础且重要的工作,对于临床诊断、疾病防控以及科学研究都具有至关重要的作用。

本文将详细介绍微生物标本采集的基本原则、采集方法、注意事项以及标本的保存与运送。

一、微生物标本采集的基本原则1.及时性:微生物标本采集应在患者出现症状或怀疑感染微生物时尽快进行,以便获取具有代表性的标本。

2.无菌操作:采集微生物标本时,必须遵循无菌操作原则,避免污染标本,确保检测结果的准确性。

3.适量:采集的微生物标本应足够进行所需检测,同时避免过量采集,减少对患者造成的不适。

4.适宜的标本类型:根据微生物的生长特性、感染部位以及检测目的,选择适宜的标本类型。

5.标本标识:采集的微生物标本应进行清晰、准确的标识,包括患者姓名、标本类型、采集时间等信息。

二、微生物标本采集方法1.皮肤、黏膜表面:使用无菌棉签或无菌注射器,轻轻擦拭或抽取皮肤、黏膜表面的分泌物。

2.血液:采用无菌注射器抽取静脉血,避免皮肤消毒剂污染。

3.呼吸道标本:采用无菌吸痰管或纤维支气管镜采集呼吸道分泌物;咳痰患者应采集清晨第一口痰。

4.尿液:采集清洁中段尿,必要时可采用导尿术。

5.粪便:采集粪便标本时,应避免粪便与尿液混合,采用无菌容器。

6.生殖道分泌物:男性患者采用无菌拭子采集尿道口分泌物;女性患者采集宫颈分泌物。

7.组织标本:在无菌条件下,切取感染部位的组织,放入无菌容器。

三、微生物标本采集注意事项1.采集前准备:了解患者的病情、用药情况以及采集部位,确保采集时机适宜。

2.消毒:采集部位应进行充分消毒,避免污染标本。

3.避免污染:采集过程中,避免触及非无菌部位,确保无菌操作。

4.采集量:根据检测需求,采集适量的标本。

5.标本保存:采集后的微生物标本应尽快送检,无法及时送检的标本应妥善保存。

四、微生物标本保存与运送1.温度:根据微生物的生长特性,选择适宜的保存温度。

一般而言,细菌标本应在4℃保存,病毒标本应在-70℃保存。

常见微生物标本采集方法

常见微生物标本采集方法

常见微生物标本采集方法一、基本原则1、发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查,二、三级医院微生物标本送检率不应低于70%。

2、尽量在抗菌药物使用前采集标本。

3、标本采集时应严格执行无菌操作,减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。

4、标本采集后应立即送至实验室。

床边接种可提高病原菌检出率。

5、以棉拭子采集的标本如咽拭、肛拭或伤口拭子,宜采用插入运送培养基送检。

6、混有正常菌群的标本如咳痰、尿液、伤口拭子,不可置肉汤培养基内送检。

7、盛标本容器须经灭菌处理,但不得使用消毒剂。

8、送检标本应注明来源和检验目的,使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境。

二、常见感染标本采集与送检方法(一)、血液及骨髓1、通常采血部位为肘静脉。

疑似细菌性心内膜炎时,以肘动脉或股动脉采血为宜,切忌在静滴抗菌药物的静脉处采取血标本。

2、采血部位的局部皮肤应严格消毒。

将采集的血液注入血培养基前,应列换针头或过火消毒针头。

3、每次采血量成人5-10ml,婴幼儿1-2ml,培养基与血液之比以10∶1为宜,以稀释血液中的抗生素、抗体等杀菌物质。

4、怀疑菌血症庆尽早采血,体温上升阶段采血可提高阳性率,但要防止因等待而延误时机。

对已用抗菌药物而不能停药者,可在下次用药前采血。

5、对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人,在病灶或者髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓1 ml 作增菌培养。

(二)、尿液1、中段尿:女性采样前应先用肥皂水或0.1%高锰酸钾溶液冲洗外阴部及阴部及尿道口;男性翻转包皮冲洗,用0.1%新洁尔灭消毒尿道口,灭菌纱布擦干后,收集标本。

2、导尿管导尿采样可减少污染。

对留置导尿者,可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁,用联空针筒的细针斜穿管壁抽吸尿液;或拔去闭式引流的集尿袋,弃去导尿管前段尿液,留无污染的膀胱内尿液数毫升送检。

不可从集尿袋的下端管口留取标本。

3、尿厌氧菌培养,或婴幼儿中段尿采集困难,或培养结果与病情不符时,可经耻骨上皮肤穿刺采集无污染的膀胱内尿液。

(完整版)微生物标本采集及保存要求

(完整版)微生物标本采集及保存要求

微生物标本采集及保存要求一、总则:用于培养的标本在收集时应注意严格无菌操作和及时送检,检测后标本应妥善保存。

二、临床标本的采集(一)下呼吸道分泌物(痰液)令患者早上起床后用清水濑口,不要刷牙,立即从下部呼吸道咳出第一口痰,吐在无菌塑料痰盒中,及时送检。

(二)、尿液(中段尿)护理人员协助采取中段尿约3ml入无菌试管中,及时送检。

(三)、粪便:取有粘液、脓血部分的粪便置玻璃大便专用管中,如为稀水便,可直接收集于玻璃管中,及时送检。

(四)、眼、耳、鼻、喉拭子:将棉拭子沾取少许无菌生理盐水(如沾取的太多,可在无菌生理盐水瓶壁上挤去多余的水份),然后采取可疑部位的分泌物,倒悬于无菌试管内,及时送检。

(五)、脓液:用沾有生理盐水的棉拭子沾取脓液,要尽量多取一些,然后将棉拭置于无菌试管中,及时送检。

(六)、:1、凡怀疑菌血症和败血病的患者,采血培养时,应尽量在未使用抗菌素前采血,如已使用抗菌素,应尽量选择抗菌素在体内浓度最低时采血,应在病人第二次使用抗菌素之前采集血培养标本。

当然在病人发热或寒颤时采集也可。

2、成人每次采血5—10ml,小儿采血2—3ml;3、严格消毒病人采血部位和血培养瓶口,抽一定量血液后,无菌注入血培养瓶内,轻轻摇匀,4、从抽血到接种入瓶,动作要快,防止血液凝固,同时要及时送检。

(七)、穿刺液:胸腹水、心包液、关节腔液、鞘膜积液:严格无菌抽取后,注入含肝素抗凝的无菌试管中,轻轻颠倒试管10余次,使肝素与穿刺液混匀达到抗凝的目的,或直接无菌注入血培养瓶内及时送检。

(八)、胆汁:由专科医生以无菌方法取引流液10ml注入无菌试管。

(九)、脑脊液:以无菌方法取脑脊液3-5ml,置无菌试管内,常温保存送检,如只做培养可直接无菌注入血培养瓶内,及时送检。

(十)、生殖器官标本:阴道、子宫颈及前列腺等分泌物应由医师采集,收集于无菌试管内送检。

如疑为淋病奈瑟菌感染,做培养检查时,采集的标本应床旁接种并及时放入孵箱培养。

微生物标本采集方法及注意事项

微生物标本采集方法及注意事项

微生物标本采集方法及注意事项一、粪便标本采集和处理(1)采集方法1.自然排便法:取新鲜粪便的黏液、脓血、或絮状物等有意义成分,2~3g 或 1~2 m1,盛无菌容器内或置于保存液或增茵液内送检;若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(PH8.6)。

2. 直肠拭子法:难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法,将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润,然后插入肛门约 4~5cm(幼儿 2~3cm),轻轻在直肠内旋转。

擦取直肠表面粘液后取出,盛于无菌试管中或保存液中送检。

(2) 注意事项1.尽可能在抗生素使用之前采集标本。

2.所挑取的粪便不应接触其他部位(如便盆),粪便样本中不应混入尿液及其他异物,采集过程应尽量无菌操作。

3.不应用厕纸收集粪便。

4.对同一病人在同一天不宜重复送检。

5.宜在感染急性期(通常是5d-7d内)采集标本。

6.下列腹泻患者应连续3d送检标本--社区获得性腹泻(入院前或72h内出现症状)--医院腹泻(入院72h后出现症状),且至少有下列情况之一:大于65岁并伴有内科疾病、HIV感染、粒缺(中性粒细胞--怀疑肠道感染的`非腹泻性表现。

7.肠炎和发热病人建议做血培养。

8.伤寒沙门菌感染时骨髓培养高出血培养。

9新鲜粪便标本应在采集后尽快送检,不应超过2h。

(3)标本拒收干燥的拭子、含钡粪便、黄软成形便、干便、明显污染的粪便、一日内重复送检的标本,应设法与临床医师联系,可要求重新留取标本,并做好记录,在没有与医师沟通之前标本不应丢弃,仍按实验室标本保存原则存放。

二、尿液标本采集和处理(1)采集方法1. 中段尿采集法:清晨起床后用肥皂水清洗尿道口和外阴部,再用清水冲洗尿道口周围,然后排尿弃去前段尿液,收集中段尿 5~10ml盛于带盖的无菌容器内立即送检,采集后于0.5h内进行接种。

2. 耻骨上膀胱穿刺法:评估膀胱内细菌感染的“金标准”。

培养结果与临床病情矛盾时可采用此法,一般较少应用。

3. 导尿法:采用无菌技术用注射器经导尿管抽取尿液,导取 10~15ml 尿液,置无菌容器中送检,尿液标本不能通过收集袋引流管口流出的方式采集。

微生物标本的采集方法与运送

微生物标本的采集方法与运送
临床微生物检验标本的采集
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微生物让人类步步为营
我们应该追求: “准确的病原学诊断” “针对性病原学治疗”
正确的微生物标本采集和运送,是准确的病原学 诊断的前提!
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基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查(早期采集)
2.在抗菌药物使用前采集标本(早期采集)
3.采样时严格执行无菌操作(无菌采集) 4.标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂(无菌采集) 5.送检标本应注明来源和检验目的 6.采样后立即送检 7.做好防护(生物安全)
所以要最先采集血培养标本。 污染率的指标是 < 3% (100份标本里只能有不到3个标本出现污染。)

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———关于皮肤及培养瓶 消毒
“消毒的重点是足够量的消毒剂。”
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皮肤消毒程序
1.皮肤消毒程序 严格执行以下三步法: (1) 70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒以上。 (2) 1%~2%碘酊作用60秒或10 %碘伏60~90秒, 从穿刺点 向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。 (3) 70%酒精脱碘:对碘过敏的患者,用70%酒精消毒60秒 ,待酒精挥发干燥后采血。

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——— 关于采血量
“每瓶采集多少血液无特殊要求。”
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采血量(ml)与检出率的关系
100 90 80 70 60
% Relative Yield
50 40 30 20 10 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
ml
Overall 血培养物每增加一毫升,真性菌血症 成年人微生物的检出率增加3%



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微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项

微生物检验标本的正确采集及注意事项微生物检验标本的采集直接影响微生物培养与鉴定结果,准确的结果可为临床诊疗提供指导,有助于科学用药、控制感染,进而延缓细菌耐药、监测医院感染、减少抗菌药物滥用,而正确采集微生物检验标本是最为关键、重要的一步。

为此,本文总结了微生物检验标本的正确采集方法和注意事项,下面让我们一起来了解一下。

一、采集血液标本应用75%酒精清洁局部皮肤,待皮肤干燥后应用1%--2%碘酊或者1%碘伏消毒穿刺点及周围皮肤,消毒范围至少需要3厘米,再次使用75%酒精脱碘后采集血液;对于碘过敏的患者,则采用75%酒精消毒30秒,自然干燥后再用75%酒精消毒60秒的消毒策略。

消毒后不可用手直接触摸穿刺部位,穿刺抽吸8--10毫升成人血液(婴幼儿及儿童患者采血量则不能超过总血量的1%),注入血培养瓶中并立刻颠倒混匀,以防血液凝固,但不可剧烈震动,以防标本溶血。

值得注意的是,血液标本作培养时需格外小心,皮肤表面含有较多微生物,消毒不规范则会污染血液,故应在采血前由内至外认真消毒;血液注入培养基之前不可更换针头,以防感染;采血前应用抗菌药物且无法停药者应在下次用药前采血,注意,不可在静脉穿刺处采集血液标本,除怀疑导管相关感染外亦不可经由静脉导管或动脉插管内抽血;采血量并不是越多越好,采血量太多,则会稀释培养液,营养成分不够;怀疑为菌血症的患者应尽早采血,避免延误最佳时机;怀疑为布鲁式病以及细菌性心内膜炎患者应选择肘动脉、股动脉穿刺采集血液,除发热期以外,均应多次采血,建议24小时内采集3--4次,且要增加采血量,以10毫升左右为宜。

二、采集痰液标本于清晨起床后使用凉白开多次漱口,去除口腔内的杂菌,并用力咳嗽,以咳出肺部深处的脓痰,吐入清洁、干燥的容器中送检。

如果患者痰液量比较少,可以应用25毫升45摄氏度3%--10%氯化钠溶液行雾化吸入,如果是患儿,则需要轻轻按压其胸骨上方的气管,在其咳痰后使用无菌棉棒采集痰液标本。

微生物标本采集指南

微生物标本采集指南
转运拭子
鼻咽
用无菌拭子经鼻轻轻插入鼻咽后部,慢慢旋转拭子5秒,吸收分泌物

用压舌板压舌,用无菌拭子从咽后、扁桃体和发炎区采样
喉拭子培养不能用于会厌发炎的病人
眼结膜
分别用(无菌盐水预湿)拭子绕每一个结膜取标本
采集完即接种培养基
直接接种BAP和巧克力平板
立即送检
常温
阴性:3天
阳性:随时报告危急期,最终报告及时发出。
亚急性心内膜炎:从不同部位采3套,间隔≥15min,如24h内为阴性,需再采3套。
注意事项同脑脊液
骨髓
注意彻底消毒,因许多微生物,尤其葡萄球菌通常存在皮肤表面或近表层处,易造成污染。
血培养专用瓶≥1ml

注意事项同脑脊液
脑脊液
注意彻底消毒,因许多微生物,尤其葡萄球菌通常存在皮肤表面或近表层处,易造成污染。
血培养专用瓶(血液:肉汤=1:5~10为宜)
成人:5~10ml/瓶
婴儿:
1~2 ml/瓶
≤2h
常温
禁止冷藏
阴性:5天
阳性:随时报告危急期,最终报告及时发出。
建议从不同部位采2~3套(一套为1瓶需氧瓶+1瓶厌氧瓶或2瓶需氧瓶)
急性脓毒血症:10min内从不同部位采2~3套;
急性心内膜炎:1~2h内从不同部位采3套;
最小量
痰、下呼吸道标本、肺泡灌洗液、支气管刷、气管抽吸物
用温开水清洗或漱口去除口腔表面细菌
指导病人从肺深部咳出痰液,采集到无菌容器内
无菌容器
>1ml
≤2h
常温
阴性:2天
阳性:及时发出。
1∕d
对于不能产生标本的病人,应该抽吸获得标本
最好的标本应≤10个鳞状细胞∕LPF,WBC≥25个/ LPF

微生物检验标本的正确采集方法及注意事项

微生物检验标本的正确采集方法及注意事项

56医药健闻微生物检验标本的正确采集方法及注意事项刘洋 (河南京城皮肤中医院,河南郑州 450000)常见的微生物检验标本包括以下几种类型:血、骨髓、静脉导管标本,痰及下呼吸道标本,尿液标本,大便标本,生殖道系统标本,眼、耳、鼻、咽拭子标本。

血、骨髓、静脉导管标本正确采集方法:(1)先用75%酒精对静脉穿刺部位擦拭消毒30 s 以上,用一根碘棉签从穿刺点向外1.5~2 cm 的直径范围内再次消毒60 s 。

(2)使用75%酒精对血培养瓶和橡皮塞子消毒60 s 。

在血液注入血培养瓶前,先用无菌纱布或者棉签将橡皮塞子表面的残余酒精清除干净。

(3)在穿刺前或穿刺期间,佩戴乳胶手套将静脉进行固定,防止滑动,但是不可接触穿刺点;使用注射器无菌穿刺取血后,可直接注入血培养瓶中;在血标本进入到培养瓶后,轻轻颠倒混匀并立即送检,以免血液凝固。

(4)成人的采血量是8~10 ml ,儿童的采血量是1~3 ml ,骨髓采血量是1~2 ml 。

注意事项:(1)静脉采血的部位通常为肘静脉,不建议从动脉采血。

患者疑是细菌性心内膜炎时,可以选择肘动脉或者股动脉采血,勿要在静脉滴注抗菌药物时进行采血。

(2)使用注射器无菌穿刺取血后勿换针头,直接注入血培养瓶。

如果需要进行第二次穿刺,需要更换针头。

(3)多次采血时,应在不同部位的血管穿刺,以排除皮肤菌丛污染的可能。

除非无法从静脉穿刺处取血,否则不能从静脉植入管内取血。

(4)若是从静脉植入管内取血,应该同时自外周静脉采集血液进行培养,以协助判读血培养阳性结果,同时在申请单上注明标本类型。

(5)采血前,应该将患者信息、采血时间、部位、采血量写在标签上,并贴在培养瓶上。

(6)有血的培养瓶若不能立即送检,可放室温保存,切不可放入冰箱。

痰及下呼吸道标本正确采集方法:(1)能够自行取痰的患者,在清晨起床后未进食前,先用漱口水漱口,去除口腔细菌,再用清水漱口,深呼吸后用力咳出气管深处的痰液,放置于无菌集痰器中并盖好瓶盖;无法咳痰或者不合作的患者,需要帮助其采取卧位,由上而下叩击背部,并戴好无菌手套,将无菌集痰器分别连接吸引器和无菌吸痰器,按吸痰法将痰吸入无菌集痰器内,并盖好瓶盖,收集好后立即送检。

微生物检验标本的采集步骤有哪些

微生物检验标本的采集步骤有哪些

微生物检验标本的采集步骤有哪些1、微生物检验思路及原则保证标本可靠;确保检验质量;熟练掌握机体正常菌群;高效准确的提供信息;对微生物学实施分析(包括定量、定性以及定位分析);依据病情情况,和临床进行联系。

2、微生物检查样本收集的原则在收集样本时应该运用无菌技术,最大程度的降低污染的情况;收集真正感染的病灶地方的样本,应该确保标本不受到邻近区域微生物的感染;用无菌卫生材料进行收集,放到贴有患者标签,且密实性强、坚固的容器中,将其放到合适的储存环境中;在患者感染的急性期、伤口局部治疗前,或是使用抗生素前收集好样本,成人需要厌氧瓶以及氧瓶进行培养,提升阳性检出率,防止产生漏检的问题;样本中不能加防腐剂,避免其影响病原菌分离;在送检申请单上需要认真、细致的填写相关临床资料,便于实验室科学的选用培养基以及培养环境;样本采集后应该立马送去检验,不能拖延时间,如果采集后在温室中两个小时还没有送至实验室,就会失去检验价值;只有合格的标本才能进入实验室并进行处理,如果标本不符合要求,应该退回并阐述原因,及时和临床联系;厌氧菌样本的采集应该隔绝空气,如果混入空气就会影响到检验结果的准确性。

3、血液培养标本采集采血指征。

针对危重感染患者,应该在抗菌药物治疗前进行血培养。

相应的指征包括:发热或低温;白细胞增多;寒战;血液病患者产生血小板和粒细胞减少等情况;C反应蛋白升高和呼吸变快。

如果出现一种或是多种体征,就要进行血液培养。

新生儿怀疑菌血症,需要做脑脊液及尿液培养。

皮肤消毒步骤:(1)用浓度为70%的酒精擦拭静脉穿刺部位,保持半分钟以上。

(2)使用浓度为1%至2%的碘酊作用半分钟,或者是用浓度为10%的碘伏作用1分钟,从穿刺点向外划拳消毒,消毒区域直径需超过3厘米。

(3)用浓度为70%对酒精脱碘,如果病患对碘过敏,应该用酒精消毒1分钟,等到酒精挥发干之后再采血。

培养瓶消毒。

用浓度为70%的酒精擦拭橡皮塞,时间为1分钟;使用无菌纱布或者是棉签,将橡皮塞子表面剩下的酒精除去。

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物表监测结果范围

1、Ⅰ类、Ⅱ类环境:≤5cfu/cm2
2、Ⅲ类、Ⅳ类环境:≤10cfu/cm2


☂ GB15982-2012 《医院消毒卫生标准》
4.1.1
三、手消毒效果监测


1、采样时间:在接触病人和从事
医疗活动前进行采样或消毒后立即 采样 2、采样面积及方法(棉拭方法) 被检人五指并拢,用含相应中和 剂无菌洗脱液(5ml)的棉拭子在双 手指
☂消毒液监测标准范围

1、使用中灭菌剂:无菌生长
2、使用中皮肤黏膜消毒液:≤10cfu/ml


3、其他使用中消毒液:≤100cfu/ml
六、紫外线强调监测方法

1、日常记录:使用后进行消毒时间累积,使用超过
1000小时的应加强监测或更换建立紫外线消毒使用登记本 ,每周用75%酒精擦拭灯管并记录
使下呼吸道感染病原诊断成为难题
◎ 细菌(包括防线菌与奴卡菌,厌氧菌与分枝杆菌) ◎ 真菌(包括肺孢子菌) ◎ 病毒 ◎ 支原体、衣原体与立克次体 ◎ 原虫 ◎ 寄生虫

☂痰标本采集——自然咳痰标本 患者清晨起床后,用清水或冷开水反复漱口去除
过量的口腔细菌,有假牙者应取下假牙 先轻咳,咳出口腔中的痰液弃去,再用力深咳, 从气管咳出呼吸道深部的痰,直接吐入清洁、无 菌的容器中 无痰可用3%---5%NaCI 5ml雾吸约5min导痰 也可用物理疗法。体位引流等法取痰
☂操作注意事项:从静脉采血,不建议从动脉采血 用注射器无菌穿刺取血后,勿换针头(如果行第二次 穿刺,应换针头)直接注入消毒后的血培养瓶 血抽到培养瓶后,轻轻颠倒混匀以防血液凝固,立即 送检,切勿冷藏! ④多次采血应在不同部位的血管穿刺以排除皮肤菌丛污 染的可能。除非无法作静脉穿刺取血,否则不应从留置 导管内取血。 ⑤抽血前应将标签贴于血培养瓶颈上,标签内容包括病 人基本信息、采血时间、采血部位。注意不要把标签贴 在培养瓶条形码上,否则仪器无法识别。
如因怀疑CRBSI移除皮下埋置式静脉输液港,港内容物及导 管尖端作定量培养。
☂血培养常见错误

※ 培养瓶放冰箱 ※ 瓶橡胶塞上小盖未打开直接穿刺 ※ 抽血后未及时混匀血液凝固
五、如何正确运送标本
1、运送培养基温度应适当 2、原则:保持细菌活力 3、血培养、脑脊液标本:应及时送检;不能及时送检的 标本应置温箱或室温中,切不能放入冰箱中保存(除病毒、 霉菌、分支杆菌培养样本置4℃) 4、痰、尿等标本:如不能及时送检可置冰箱,以抑制细 菌生长,但时间不能超过6h.
物体表面采样--斑贴法

☂斑贴法:按无菌操作方法将5cm×5cm的无菌滤纸
用灭菌生理盐水浸湿,均匀贴附与物体表面,1min取下放
入盛有25ml灭菌生理盐水试管中,充分振摇1min,作适
量稀释后,接种于普通营养琼脂平板上作菌落计数,同样 得出物品表面每平方厘米的细菌数
二、消毒物品表面的监测:



4、Ⅲ、 Ⅳ类环境、监测标准:儿科病房、母婴同室、妇产科检查室、 人流室、治疗室、换药室、消毒供应中心、血液透析中心(室)、急诊 室、化验室、各类普通病房、感染疾病科门诊及其病房,空气中的细 菌菌落总数≤4CFU/(5min· 直径9cm平皿)
G B50333-2013《医院洁净手术部建筑技术规范 》3.0.2-2
☂血培养次数和采血时间

※采血培养应该尽量在使用抗菌药物之前进行,在患者发 热期间越早越好,以发热高峰前1h内或病人寒战和发热开 始时采集为宜。在10分钟内与不同部位采集外周血2~3份
培养(有助于判断是污染还是感染,提高检出阳性率)

※注意报阳时间,阳性瓶数。

※在采取血培养后的2---5天内,不需要再重复采取血培养,
因为进行治疗后的2---5天血液中的感染细菌不会马上消失。
四、对可疑中心静脉导管相关血流感染


1、保留导管 2、外周静脉血一份,中心静脉导管血1分, 不用弃去导管起始部分的血液。 3、拔除导管: 4、2个外周静脉血、导管尖端5cm
(在进行中心静脉导管血和周围静脉血培养时应记录报阳时间)
☂血管内导管尖段标本的采集、送检程序 用75%酒精清洁导管周围皮肤 无菌操作移动导管,剪取尖端末端5cm,直 接置入无菌试管内或直接置入血平板内。 立即送检(不超过15min),防止干燥

六、各种标本储存的环境
☂标本采取后应该立即送检,如不能立即送检,储
存的环境要求:
※ 储存环境标本来源4℃冰箱----痰、尿液、粪便、活检
组织、气枪冲洗物、导尿管、心包积液、脓和伤口分泌物等
※ 室温(25℃)---血液培养、脑脊液、泌尿生殖道、
眼、耳、鼻、喉、血管导管尖、体液、厌氧菌培养标本。
美国的理念



几种下呼吸道直接采集的标本
◎ 经气管穿刺吸引 ◎经胸壁针刺吸引 ◎经支气管镜采样 支气管肺泡灌洗 经支气管镜直接吸引 ◎开胸肺活检 ◎经人工气道吸引分泌物

☂痰标本采集——吸痰
吸痰:无法咳痰或不合作者、人工气道者,戴好无 菌手套,无菌集痰器分别连接吸引器和无菌吸痰管。 按吸痰法将痰吸入无菌集痰器内,加盖送检 经支气管镜直接吸引: 注意严格无菌操作
1、采样时间:消毒处理后4小时内进行采样 2、采样面积:被采面积<100平方厘米,取全部表面; ≥100平方厘米,取100平方厘米。 3、采样方法:
用5cm*5cm的标准灭菌规格板放在被检消毒物品表面,
用含相应中和剂无菌洗脱液(5ml)的棉拭子在规格板内横竖 往返均匀涂擦各5次并随之转动采样棉拭子,剪去手接触部 位,将棉拭子投入王景洗脱液中,立即送检。 小型物体表面的结果计算用cfu/件表示。
手监测标准范围

1、外科手消毒:≤5cfu/cm2
2、卫生手消毒:≤10cfu/cm2


☂ GB15982-2012《医院消毒卫生标准》4.2
四、空气消毒效果监测
1、采样时间段:在消毒处理后,操作前进行采样 2、采样方法:按面积定数、打开、盖搭皿体边缘 3、采样高度:距地面1.5米(80-150㎝) 4、布点方法:室内面积≤30㎡,设内、中、外对角线三点; 室内面积>30㎡设4角及中央5点均距墙壁1米 5、收取方法:由外往里逐一收取,避免穿过培养皿从里往 外收取
二、尿标本的正确采集——清洁中段
尿标本


☂应保证尿液在膀胱内至少停留4h以上。最好留取早晨清 洁中段尿标本 ☂方法:患者睡前少饮水,清晨起床后先用肥皂水清洗会 阴部,女性应用手分开大阴唇,男性上翻包皮,仔细清洗, 再用清水冲洗尿道口周围;开始排尿,将前段尿排出,弃 去,不要停顿,直接将中段尿10---20ml直接排入专用的 无菌容器中,立即送检。容器内是无菌的,所以打开容器 盖后,应拿在手中,不要随意乱放。记录留取标本的时间, 保证在留取标本后1小时内送至检验科
微生物标本采集技术
临床微生物 环境微生物
感染办
张瑞芳
正确的微生物标本采集和运送,是准确的病 原学诊断的前提
基本原则
1、及时采集微生物标本作病原学检查
2、在抗菌药物使用前采集标本 3、采样时严格执行无菌操作 4、采样后立即送检 5、棉拭子标本宜用运送培养基 6、标本容器须灭菌处理,但不得使用消毒剂 7、送检标本时应注明来源和检验目的 8、混有正常菌群的标本,不可置肉汤培养


☂ Ⅰ类环境:洁净手术室Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、 Ⅳ级:
Ⅰ级 手术区≤0.2cfu/30min. ¢90皿 周边区 ≤0.4cfu/30min. ¢90皿(100级)6号手术间 Ⅱ级 手术区≤0.75cfu/30min. ¢90皿 周边区 ≤1.5cfu/30min. ¢90皿 Ⅲ级 手术区≤2cfu/30min. ¢90皿 周边区 ≤4cfu/30min. ¢90皿(10000级)5号手术间 Ⅳ级≤6cfu/30min. ¢90皿
一、物体表面采样
☂物体表面细菌总数的检测评价
▲ 被污染程度 ▲ 主要依据 ▲ 消毒效果
物体表面采样--涂抹法

☂涂抹法:将5cm×5cm的标准灭菌规格板,放在被检测物品
表面,用浸有无菌生理盐水的棉拭子在规格板内来回均匀涂抹整个方 格,并随之转动棉拭子,剪去手接触部分,将棉拭子放入盛有10ml生 理盐水的试管中,充分振摇1min,作适量稀释后,接种于普通营养琼 脂平板上进行计数,然后根据平板上菌落数得出物品表面每平方厘米 的细菌数

4、注意事项:做好自身防护尤其是眼睛; 检测卡要闭光保存。
七、高度危险性医疗器械

☂手术器械、穿刺针等:无菌生长

GB15982-2012《医院消毒卫生标准》4.3 不推荐医院常规开展灭菌物品的无菌检查
八、中度危险性医疗器械:
☂呼吸机管路、口表等:≤20 cfu/件,

不得检出致病性微生物


1970年以前,美国的医院定期对空气和环境表面(如地面、 墙壁、台面)进行培养。到了1970年,CDC和美国医院协 会(AHA)主张停止对环境的常规培养,因为医院感染发
生率与空气或环境表面中总的微生物污染水平不相关。且ห้องสมุดไป่ตู้
环境表面或空气中微生物含量的允许水平也没有有意义的 标准。1970---1975年,美国有25%的医院减少了这种常 规的环境培养工作--------一个已经持续的趋势。



五、消毒液监测

1、采样方法:用无菌注射器按无菌操作方


法:10ml培养基吸取1ml被检消毒液;5ml培养基 吸取0.5ml被检消毒液,加入培养剂中混匀。 2、消毒液标准: 使用中灭菌用消毒液:无菌生长 使用中皮肤黏膜消毒液染菌量:≤10cfu/ml 其他使用中消毒液染菌量:≤100cfu/ml
1、监测时间:每季度一次
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