药典法制川乌的成品质量与炮制过程控制的关系(2)

Abstract: Objective: To explore the key factors affecting the finished product quality of Aconiti Radix and analyse
the relationship with process control. Methods: Processing Aconiti Radix by pharmacopoeia method. The processes of soaking without dry heart and heating without white heart and a little hemp tongue tastes were strictly controlled. Six kinds of alkaloids of mesaconitine, hypaconitine, aconitine, benzoyl mesaconine, benzoyl aconine, benzoyl hypaconine in different processed products were detected by HPLC. The relation between the finished product quality and process control was analysed by SPSS 17.0 software. Results: When the diester alkaloids contents of raw Aconiti Radix was low, the monoester alkaloids contents of Aconiti Radix was lower than the pharmacopoeia limit. Boiling resulted in the loss of alkaloids, lead to the monoester alkaloids contents of aconiti Aconiti Radix cannot reach requirements of the pharmacopoeia, while steaming can reduce the loss. Conclusion: Finished product quality after processing of Aconiti Radix with a batch of materials by the same heating mode is stable. Steaming can better keep effective components when processing with pharmacopoeia method.
表2 生川乌、制川乌工时、生物碱含量（n=2）
浸泡至内无干加热至内无白 双酯型生
炮制品名 心所需时间 心所需时间 物碱总量
（h）
（h）
（%）
单酯型生 物碱总量
（%）
浸泡至内无干加热至内无白 双酯型生
炮制品名 心所需时间 心所需时间 物碱总量
（h）
（h）
（%）
生川乌1-1
-
-
0.0811
0.0557
QIN Yu-xin, TAN Peng, GUO Wei, FEI Shu-lin, CHEN Jiong, WU Yue-jiao, ZHAO Ling-ling, LI Fei
( Beijing University of Chinese Medicine, Beijing 100029, China )
表1 流动相梯度洗脱条件
时间（min）
流动相A（%）
流动相B（%)
0-48
15-26
85-74
48-49
26-35
74-65
49-58
35
65
58-65
35-15
65-85
过，取续滤液即得。 5. 样品含量测定 分别精密吸取对照品溶液和供试品溶
液各10µL ，注 入 液 相 色谱 仪，测定，计 算供 试 品溶 液中乌 头 碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱 和苯甲酰新乌头原碱的含量。
生物碱，通过炮制可使川乌中毒性较大的双酯型生物就降低为 毒性较小的单酯型生物碱[2-3]。原药材的质量差异、加工炮制方 法不当、炮制过程不规范等均会导致成品饮片质量不合格[4-7]。
材料 1. 药物 川乌药材，购于四川江油中坝附子科技发展有 限公司，分别购于2012年12月、2013年9月。经北京中国食品药
• 25பைடு நூலகம்9 •
品检定研究院张继主任药师鉴定为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaeli Debx.的干燥母根。
2. 仪器与试剂 2 .1 仪器 Waters液相色谱仪（1525色谱泵、紫外检测 器）；Agilent Extend-C18色谱柱（4.6mm×250mm，5μm）； Sartorius BS210S（Max 210g，d=0.1mg）天平；SB25-12DTDN超 声波清洗机（宁波新芝生物科技股份有限公司）；RE旋转蒸发 仪（上海亚荣生化仪器厂）；DHG-9070A电热恒温鼓风干燥箱 （常州诺基仪器有限公司）。 2.2 试剂 乌头碱、次乌头碱、新乌头碱、苯甲酰乌头原 碱、苯甲酰 次乌 头原 碱 和 苯甲酰 新乌 头原 碱 对照品（供含 量 测定用，批号分别为110720-201111、110799-201106、110798201106、111794-201102、111796-201002、111795-201002）；乙 腈和四氢呋喃为色谱纯（美国Fisher公司）；纯净水（杭州娃哈 哈集团有限公司）。 方法 1. 炮制品的制备 生川乌：取原药材，除去杂质，即得，备 用。制 川乌：取 生 川乌，用 水 浸泡 至内无 干心，取 出加 水煮 沸 4-6h或蒸6-8h，至取大个及实心者切开内无白心，口尝微有麻 舌感时，取出，晾至六成干，切片，干燥，得制川乌。按上述方法 得生川乌4批，制川乌8批，每批次平行操作2次。记录浸泡时间 和加热时间。 2. 色谱条件 Agilent Extend-C18色谱柱（4.6mm×250mm， 5μm）；以乙腈-四氢呋喃（25∶15）为流动相A，以0.1mol/L醋酸 铵溶液（每1 000毫升加冰醋酸0.5mL）为流动相B，按下表的规 定进行梯度洗脱，检测波长为235nm。见表1。
川乌为毛茛科植物乌头Aconitum carmichaelii Debx.的干燥
故制川乌在临床应用中仍有大量中毒现象发生[8-11]，因此有必
母根。6月下旬至8月上旬采挖，除去子根、须根及泥沙，晒干。
要就川乌炮制过程的关键工序对制品质量的影响进行研究。本
其性味辛、苦、热，有大毒，归心、肝、脾经，具有祛风除湿、温
文采用药典法炮制川乌，严格按照药典对炮制过程的质量要求
经止痛功效，用于风寒湿痹、关节疼痛、心腹冷痛寒疝作痛及 麻醉止痛[1]。
制备制川乌。检测6种生物碱的含量，分析炮制过程控制与成品 质量的关系，探讨传统炮制经验在过程控制中的意义，为制川
川乌是大毒之品，通常需炮制后使用。其主要化学成分为
乌的饮片质量稳定、可控提供科学依据。

时间（min）

时间（min）
图1 6种生物碱含量测定HPLC图 注：A.对照品；B.生川乌；C.蒸制川乌；D.煮制川乌。1.苯甲酰新 乌头原碱；2.苯甲酰乌头原碱；3.苯甲酰次乌头原碱；4.新乌头碱； 5.次乌头碱；6.乌头碱。
• 2550 •
中华中医药杂志(原中国医药学报)2015年7月第30卷第7期 CJTCMP , July 2015, Vol . 30, No. 7
通讯作者：李飞，北京市朝阳区望京中环南路6号北京中医药大学中药炮制中心，邮编：100102，电话：010-84738616 E-mail：lf668@sina.com
中华中医药杂志(原中国医药学报)2015年7月第30卷第7期 CJTCMP , July 2015, Vol . 30, No. 7
• 2548 •
中华中医药杂志(原中国医药学报)2015年7月第30卷第7期 CJTCMP , July 2015, Vol . 30, No. 7
·研究报告·
药典法制川乌的成品质量与炮制过程控制的关系
秦语欣，谭鹏，国伟，费淑琳，陈炯，吴月娇，赵玲玲，李飞
（北京中医药大学，北京 100029）
摘要：目的：探究影响制川乌成品质量的关键因素，分析其与炮制过程控制的关系。方法：采用药典法炮制 川乌，严格控制浸泡和加热两个炮制过程，以内无干心为指标判断浸泡程度，以内无白心、口尝微有麻舌感为指 标判断加热程度，采用高效液相色谱法，对不同炮制品的新乌头碱、次乌头碱、乌头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯 甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱6种生物碱进行检测，利用SPSS 17.0软件分析制川乌成品质量与炮制过程控制 的关系。结果：川乌生品双酯型生物碱含量较低时，制品单酯型生物碱含量均低于药典规定下限。煮法炮制导致 生物碱成分大量流失，使得煮制品单酯型生物碱成分含量达不到药典要求，蒸法炮制则可减少生物碱成分流失。 结论：同一批药材经相同加热方式炮制后得到的制川乌成品质量稳定，药典法制川乌选择蒸法可更好地保留有效 成分。
Key words: Aconiti Radix; Process; Ester-type alkaloids; Final product quality
Fund assistance: Special Scientific Research of Chinese Medicine Industry (No.201107008)


时间（min）
时间（min）

3. 对照品溶液的制备 取对照品适量，精密称定，加异丙 醇-三氯甲烷（1∶1）配制成每毫升含乌头碱0.034mg、次乌头碱 0.01mg、新乌头碱0.087mg、苯甲酰乌头原碱0.023mg、苯甲酰次 乌头原碱0.095mg、苯甲酰新乌头原碱0.125mg的溶液，备用。
关键词：川乌；炮制；酯型生物碱；成品质量 基金资助：中医药行业科研专项（No.201107008）
Relationship between final products quality and processing process control of Aconiti Radix in pharmacopoeia method
6. 统计学方法 采用SPSS 17.0软件统计分析，采用t检验、 方差分析、非参数检验等分析方法，以P<0.05为差异有统计学 意义。
结果 2010版《中华人民共和国药典》[1]（以下简称《药典》）规 定生川乌双酯型生物碱总量应为0.050%-0.17%；制川乌双酯 型生物碱总量不得过0.040%，单酯型生物碱总量应为0.070%0.15%。 通过高效液相色谱法（high performance liquid chromatography， HPLC）测定不同批次川乌生品、制品的新乌头碱、次乌头碱、乌 头碱、苯甲酰新乌头原碱、苯甲酰乌头原碱、苯甲酰次乌头原碱 6种生物碱的含量，见表2，图1。结果各批次生品的生物碱含量均 达到《药典》规定。第一批生品加热过程选用蒸法制得的制川乌 生物碱含量均达到《药典》规定，加热过程选用煮法制得的制川 乌生物碱含量则低于《药典》规定；第二批生品经炮制后制得的 制川乌单酯型生物碱含量均低于《药典》规定下限。
4. 供试品溶液的制备 取炮制品粉末（过三号筛）2g，精 密 称 定，置 具塞 锥 形瓶中，加氨试 液3 m L ，精密 加 入 异丙 醇 乙酸乙酯（1∶1）混 合 溶 液 5 0 m L ，称 定 重 量，超 声处 理（功 率 3 0 0W，频率 4 0 k H z；水温在 2 5℃以下）3 0 m in，放冷，再 称定 重 量，用异丙醇-乙酸乙酯（1∶1）混合溶液补足减失的重量，摇 匀，滤 过，精密 量取 续 滤 液 2 5 m L ，4 0℃以下 减 压回收 溶 剂至 干，残渣精密加异丙醇-三氯甲烷（1∶1）混合溶液3mL溶解，滤