小鼠白介素-2(IL-2)ELISA试剂盒说明书
小鼠白介素-2(IL-2)ELISA试剂盒说明书
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小鼠白细胞介素-2(IL-2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中小鼠白细胞介素-2(IL-2)含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2(IL-2)水平。
用纯化的小鼠白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入小鼠白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的IL-2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-2呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素2(IL-2)浓度。
试剂盒组成:样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
小鼠白细胞介素2IL
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小鼠白细胞介素2(IL-2)试剂盒使用方法检测范围:96T30 ng/L -1200 ng/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2(IL-2)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2(IL-2)水平。
用纯化的小鼠白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的白细胞介素2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2(IL-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素2(IL-2)浓度。
试剂盒组成1 30倍浓缩洗涤液20ml×1瓶7 终止液6ml×1瓶2 酶标试剂6ml×1瓶8 标准品(2400ng/L)0.5ml×1瓶3 酶标包被板12孔×8条9 标准品稀释液 1.5ml×1瓶4 样品稀释液6ml×1瓶10 说明书1份5 显色剂A液6ml×1瓶11 封板膜2张6 显色剂B液6ml×1/瓶12 密封袋1个标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
1200 ng/L 5号标准品150μl的原倍标准品加入150μl标准品稀释液600 ng/L 4号标准品150μl的5号标准品加入150μl标准品稀释液300 ng/L 3号标准品150μl的4号标准品加入150μl标准品稀释液150 ng/L 2号标准品150μl的3号标准品加入150μl标准品稀释液75 ng/L 1号标准品150μl的2号标准品加入150μl标准品稀释液2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
Elabscience 未包被小鼠白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书
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(本试剂盒仅供体外研究使用,不用于临床诊断!)产品货号:E-UNEL-M0064产品规格:96T*5/96T*15Elabscience®未包被小鼠白介素1β(IL-1β)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书Uncoated Mouse IL-1β(Interleukin 1 Beta) ELISA Kit使用前请仔细阅读说明书。
如果有任何问题,请通过以下方式联系我们:销售部电话************,************技术部电话************具体保质期请见试剂盒外包装标签。
请在保质期内使用试剂盒。
联系时请提供产品批号(见试剂盒标签),以便我们更高效地为您服务。
用途该试剂盒用于体外定量检测小鼠血清、血浆样本中IL-1β浓度。
试剂盒组成及保存试剂体积以实际发货版说明书为准。
相关试剂在分装时会比标签上标明的体积稍多一些,请在使用时量取而非直接倒出。
其他所需试剂ELISA辅助组分试剂盒(Ancillary Reagent Kit,货号:E-ELIR-K001):包含完成96T*5规格ELISA实验的全套辅助试剂。
或有其他实验需求,可单独购买以下辅助试剂产品:或自行配制指标通用性辅助试剂。
(注:下列配方均为各试剂的基础组分,可根据实验需求和实验结果对配方进行优化)●包被液:1xCBS●封闭液:1xPBS,保护性蛋白●洗涤液:3%Tris●样本稀释液:1xPBS, 保护性蛋白●抗体/酶结合物稀释液:1xPBS, 保护性蛋白●终止液:5%硫酸试验所需自备物品1.酶标仪(450 nm波长滤光片)2.高精度移液器,EP管及一次性吸头:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL3.37℃恒温箱4.双蒸水或去离子水5.吸水纸6.加样槽样品收集方法(具体处理方法可参考官网:/List-detail-241.html) 1.血清:全血样品于室温放置1小时或2-8℃过夜后于2-8℃,1000×g离心20分钟,取上清即可检测。
白细胞介素(IL-2)检测及临床意义
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白细胞介素(IL-2)检测及临床意义
一、概述
白细胞介素-2 (IL-2)又称T细胞生长因子。
主要由T细胞产生。
是在淋巴细胞增殖分化过程中重要的细胞生长因子,生理作用有刺激T细胞生长、诱导细胞毒作用和对B细胞的生长及分化均有一定的促进作用等
二、检测方法
IL-2主要检测方法为生物素亲合素系统的双抗体夹心ELISA 法。
三、临床意义
1、IL-2可提高人体对病毒、细菌、真菌和原虫等感染的免疫应答,促进细胞毒性T淋巴细胞(CTL)、自然杀伤细胞(NK 细胞)、淋巴因子激活的杀伤细胞(LAK 细胞)和肿瘤浸润性淋巴细胞(TIL)增殖,并使其杀伤活性增强,进而清除体内肿瘤细胞和病毒感染细胞等。
2、IL-2 还可以增加抗体和干扰素 (IFN)等细胞因子的分泌,在机体免疫应答中具有非常重要的作用,是一种免疫增强剂,具有抗病毒、抗肿瘤和提高机体免疫功能等作用。
3、IL-2的表达异常与临床多种疾病有密切关系,尽管外周血、尿液中IL-2 水平,或激活淋巴细胞上清液中IL-2水平的异常没有疾病特异性,但是可作为相关疾病的辅助诊断、预后及疗效观察提供可靠数据。
4、IL-2升高:肿瘤、心血管病、肝病等疾病时均可使 IL-2 水平升高,在器官移植后早期排斥反应时也出现IL-2表达升高。
5、IL-2降低:在多种原发性免疫缺陷病和继发性免疫缺陷病时均可伴有 IL-2 水平降低,如 SLE、麻风和艾滋病等。
小鼠白介素1βIL-1βELISA试剂盒使用方法
![小鼠白介素1βIL-1βELISA试剂盒使用方法](https://img.taocdn.com/s3/m/a0598045783e0912a2162a94.png)
小鼠白介素1β (IL-1β)ELISA试剂盒使用方法检测范围:96T2.5ng/L-80ng/L使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中白介素1β (IL-1β)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白介素1β (IL-1β)水平。
用纯化的小鼠白介素1β (IL-1β)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白介素1β (IL-1β),再与HRP标记的白介素1β (IL-1β)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白介素1β (IL-1β)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白介素1β (IL-1β)浓度。
标本要求1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒使用说明书
![小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/4ff34b41fc4ffe473368abf2.png)
小鼠前列腺素E2(PGE2)ELISA试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中小鼠前列腺素E2(PGE2)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠前列腺素E2(PGE2)水平。
用纯化的小鼠前列腺素E2(PGE2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入前列腺素E2(PGE2),再与HRP标记的前列腺素E2(PGE2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的前列腺素E2(PGE2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠前列腺素E2(PGE2)浓度。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA分析检测试剂盒使用说明书
![人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA分析检测试剂盒使用说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/dd2b34e27c1cfad6195fa7dd.png)
人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)ELISA分析检测试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中转化生长因子(MIP-2)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)水平。
用纯化的转化生长因子(MIP-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入转化生长因子(MIP-2),再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的转化生长因子(MIP-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人巨噬细胞炎性蛋白2(MIP-2)浓度。
试剂盒内容及其配制:试剂盒成份96孔配置48孔配置96/48人份酶标板1块板(96T)半块板(48T)塑料膜板盖1块半块标准品:100ng/ml 1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)空白对照1瓶(1.0ml)1瓶(0.5ml)标准品稀释缓冲液1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)生物素标记的抗OT抗体1瓶(8.0ml)1瓶(4.0ml)亲和链酶素-HRP 1瓶(12ml)1瓶(5ml)洗涤缓冲液1瓶(20ml)1瓶(10ml)底物A 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)底物B 1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)终止液1瓶(6.0ml)1瓶(3.0ml)试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×48 1×96 2-8℃保存标准品:45μmol/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液 3 ml×1瓶 6 ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存自备材料:1. 蒸馏水。
ELISA 检测试剂盒 说明书
![ELISA 检测试剂盒 说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/abb832c0c0c708a1284ac850ad02de80d4d806a4.png)
本试剂盒只能用于科学研究,不得用于医学诊断小鼠小鼠((MouseMouse))肿瘤坏死因子可溶性受体肿瘤坏死因子可溶性受体ⅠⅠ(TNFsR-TNFsR-ⅠⅠ)ELISA检测试剂盒使用说明书检测原理试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。
往预先包被肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)抗体的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。
用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的肿瘤坏死因子可溶性受体Ⅰ(TNFsR-Ⅰ)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
样品收集、处理及保存方法1.血清:使用不含热原和内毒素的试管,操作过程中避免任何细胞刺激,收集血液后,3000转离心10分钟将血清和红细胞迅速小心地分离。
2.血浆:EDTA、柠檬酸盐或肝素抗凝。
3000转离心30分钟取上清。
3.细胞上清液:3000转离心10分钟去除颗粒和聚合物。
4.组织匀浆:将组织加入适量生理盐水捣碎。
3000转离心10分钟取上清。
5.保存:如果样本收集后不及时检测,请按一次用量分装,冻存于-20℃,避免反复冻融,在室温下解冻并确保样品均匀地充分解冻。
自备物品1.酶标仪(450nm)2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL3.37℃恒温箱操作注意事项1.试剂盒保存在2-8℃,使用前室温平衡20分钟。
从冰箱取出的浓缩洗涤液会有结晶,这属于正常现象,水浴加热使结晶完全溶解后再使用。
2.实验中不用的板条应立即放回自封袋中,密封(低温干燥)保存。
3.浓度为0的S0号标准品即可视为阴性对照或者空白;按照说明书操作时样本已经稀释5倍,最终结果乘以5才是样本实际浓度。
4.严格按照说明书中标明的时间、加液量及顺序进行温育操作。
5.所有液体组分使用前充分摇匀。
鸡白细胞介素2IL
![鸡白细胞介素2IL](https://img.taocdn.com/s3/m/d3da7a00c281e53a5802ffac.png)
鸡白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定鸡血清,血浆及相关液体样本中白细胞介素2(IL-2)的含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中鸡白细胞介素-2(IL-2))水平。
用纯化的鸡白细胞介素-2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入鸡白细胞介素-2(IL-2),再与HRP标记的IL-2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的鸡白细胞介素-2(IL-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中鸡白细胞介素-2(IL-2)浓度。
试剂盒组成:样本处理及要求:1. 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2. 血浆:应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3. 尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4. 细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5. 组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
白细胞介素-2的研究进展
![白细胞介素-2的研究进展](https://img.taocdn.com/s3/m/acc96426aaea998fcc220e1c.png)
白细胞介素-2的研究进展细胞因子是由多种细胞分泌的小分子蛋白的总称,具有调节细胞生长、免疫应答和参与炎症反应等多种生物学功能,而白细胞介素-2(IL-2)即是其中一种。
1976年Morgan等在小鼠脾细胞上清液中首次发现有一种能促进和维持T细胞体外生长的因子,并称其为T细胞生长因子(TCGF),1979年被正式命名为IL-2.随后有关IL-2的应用研究取得了突飞猛进的发展。
1.白细胞介素-2及其受体1.1白细胞介素-2结构天然hIL-2在体内主要由活化的I型辅助淋巴细胞(THl细胞)分泌,除此之外,B细胞、NK细胞及单核-巨噬细胞亦能产生IL-2。
IL-2为分子量约为15.5kDa的糖蛋白,pI在6.6~8.2。
成熟的IL-2分子由153个氨基酸肽链N端剪掉20个氨基酸残基的信号肽后剩下的133个氨基酸残基组成,它与其它的细胞因子在序列上无同源性。
翻译后加工的过程还包括第三位Thr位点的糖基化和二硫键的形成。
蛋白链中有三个半胱氨酸残基(Cys),位于第58、105和125位。
58位和105位半胱氨酸残基结合形成二硫键,使肽链折叠,125位半胱氨酸残基游离。
研究者发现将125位游离的半胱氨酸残基突变为丝氨酸或丙氨酸时,仍具有生物活性,且不会与第58位半胱氨酸残基形成错误二硫键,增加了IL-2的稳定性,同时也消除了由第125半胱氨酸残基造成的二聚体,但是这样新型IL-2容易产生抗体,这是一大不足之处。
IL-2肽链折叠后才呈现活性,直链是无活性的,正确的二硫键对于IL-2活性的保持是必需的,但糖基化却与活性无关。
IL-2的二级结构有4个α螺旋区和一对β反平行折叠,各螺旋相互折叠使IL形成球状蛋白分子。
磁共振 (NMR)确定IL-2的四个α螺旋,分别为A、1l-29.B、53-73,C、81-97,D、116-131。
对IL-2的α螺旋结构研究结果说明α螺旋的破坏对其生物活性必定有影响。
另外,IL-2与其受体结合需要酸性基团(Asp),而较长的疏水侧链基团则妨碍这种结合,使其活性降低,甚至完全丧失。
人白细胞介素2(IL-2)说明书
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人白细胞介素2(IL-2)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围:96T40pg/ml-1200pg/ml使用目的:本试剂盒用于测定人血清、血浆及相关液体样本中白细胞介素2(IL-2)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人白细胞介素2(IL-2)水平。
用纯化的人白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的白细胞介素2(IL-2)抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的白细胞介素2(IL-2)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中人白细胞介素2(IL-2)浓度。
1.标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融2.不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。
操作步骤1.标准品的稀释:本试剂盒提供原倍标准品一支,用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。
在酶标包被板上标准品准确加样50μl,待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)
![小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)](https://img.taocdn.com/s3/m/60ce1dc79ec3d5bbfd0a74c8.png)
小鼠白介素1受体拮抗剂(IL1Ra)试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用产品编号:CSB-E10395m检测范围:0.16 ng/ml, - 10 ng/ml,最低检测限:0.04 ng/ml,特异性:本试剂盒可同时检测天然或重组的小鼠IL-1ra,且与其他相关蛋白无交叉反应。
有效期:6个月预期应用:ELISA法定量测定小鼠血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-1ra含量。
说明●试剂盒保存:-20℃(较长时间不用时);2-8℃(频繁使用时)。
●浓洗涤液低温保存会有盐析出,稀释时可在水浴中加温助溶。
●中、英文说明书可能会有不一致之处,请以英文说明书为准。
●刚开启的酶联板孔中可能会含有少许水样物质,此为正常现象,不会对实验结果造成任何影响。
实验原理用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗IL-1ra抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗IL-1ra抗体、HRP标记的亲和素,经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-1ra呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板(Assay plate ):一块(96孔)。
2.标准品(Standard):2瓶(冻干品)。
3.样品稀释液(Sample Diluent):1×20ml/瓶。
4.生物素标记抗体稀释液(Biotin-antibody Diluent):1×10ml/瓶。
5.辣根过氧化物酶标记亲和素稀释液(HRP-avidin Diluent):1×10ml/瓶。
6.生物素标记抗体(Biotin-antibody):1×120μl/瓶(1:100)。
7.辣根过氧化物酶标记亲和素(HRP-avidin):1×120μl/瓶(1:100)。
8.底物溶液(TMB Substrate):1×10ml/瓶。
ELISA试剂盒说明书……IFN-γ
![ELISA试剂盒说明书……IFN-γ](https://img.taocdn.com/s3/m/4e01734677232f60ddcca185.png)
(IFN-γγ)酶联免疫分析(ELISA)小鼠γ干扰素(IFN-试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,组织及相关液体样本中γ干扰素(IFN-γ)含量。
实验原理:本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠γ干扰素(IFN-γ)水平。
用纯化的小鼠γ干扰素(IFN-γ)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入γ干扰素(IFN-γ),再与HRP标记的羊抗鼠抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的γ干扰素(IFN-γ)呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD 值),通过标准曲线计算样品中小鼠γ干扰素(IFN-γ)浓度。
试剂盒组成:试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份封板膜2片(48)2片(96)密封袋1个1个酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品:1800ng/L0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液(20ml×20倍)×1瓶(20ml×30倍)×1瓶2-8℃保存样本处理及要求:1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
il-2 用法
![il-2 用法](https://img.taocdn.com/s3/m/64db0358a200a6c30c22590102020740be1ecda6.png)
il-2 用法IL-2(白细胞介素-2)是一种由T细胞产生的细胞因子,它在调节免疫反应中起着重要作用。
IL-2的主要功能是促进和调节免疫细胞的生长、增殖和功能。
在临床医学中,IL-2主要用于治疗某些癌症和免疫系统疾病。
一、IL-2的用法1.癌症治疗:IL-2主要用于治疗某些类型的癌症,如黑色素瘤、肾细胞癌、前列腺癌等。
通常与其它药物联合使用,如干扰素、白介素-12等。
2.免疫疾病:IL-2还可用于治疗某些免疫系统疾病,如类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮等。
3.疫苗佐剂:IL-2可作为疫苗佐剂,增强疫苗的免疫效果。
二、IL-2的用量和用法1.用量:IL-2的用量因患者的病情和体重而异,一般按照体重每公斤给予0.5-1.5亿国际单位(IU),每周3-5次,连续4-6周。
2.用法:可以通过皮下注射、静脉注射或肌肉注射给药。
在治疗癌症时,通常采用静脉注射,以使药物迅速达到全身循环。
在治疗免疫疾病时,可采用皮下注射或肌肉注射。
三、IL-2的副作用1.过敏反应:IL-2可能引起过敏反应,如皮疹、荨麻疹、呼吸困难等。
2.免疫系统反应:IL-2可能引起免疫系统反应,如淋巴细胞增多、红细胞减少等。
3.神经系统反应:IL-2可能引起神经系统反应,如头痛、恶心、呕吐等。
4.心血管系统反应:IL-2可能引起心血管系统反应,如心率加快、血压升高等。
5.肝肾功能损害:IL-2可能对肝脏和肾脏产生损害,表现为转氨酶升高、肾功能不全等。
四、注意事项1.在使用IL-2前,应进行过敏试验,以确保患者对IL-2无过敏反应。
2.IL-2的使用应在医生指导下进行,遵循医嘱,切勿自行调整用量和用法。
3.在治疗期间,应定期检查患者的肝功能、肾功能、血常规等指标,以监测患者的身体状况。
4.如出现过敏反应或其他严重副作用,应立即停药,并就医处理。
5.孕妇和哺乳期妇女在使用IL-2时应谨慎,并在医生指导下使用。
总之,IL-2是一种重要的免疫调节剂,在治疗某些癌症和免疫系统疾病中具有重要作用。
小鼠B细胞淋巴瘤因子2 (Bcl-2)-ELISA试剂盒说明书
![小鼠B细胞淋巴瘤因子2 (Bcl-2)-ELISA试剂盒说明书](https://img.taocdn.com/s3/m/dee13657312b3169a451a43a.png)
小鼠B细胞淋巴瘤因子2 (Bcl-2)酶联免疫吸附测定试剂盒使用说明书产品编号:E-EL-M0175(本试剂盒仅供体外研究使用、不用于临床诊断!)声明:尊敬的客户,感谢您选用本公司的产品。
本产品选用世界著名生产厂家的原料,采用专业ELISA kit生产技术制造。
适用于体外定量检测小鼠血清、血浆、组织匀浆或细胞培养上清液中天然和重组Bcl-2浓度。
使用前请仔细阅读说明书并检查试剂组分!如有疑问,请及时联系伊莱瑞特生物科技有限公司。
*: [96T/48T](打开包装后请及时检查所有物品是否齐全完整)检测原理:本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。
用抗小鼠Bcl-2抗体包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的Bc l-2会与包被抗体结合,游离的成分被洗去。
依次加入生物素化的抗小鼠Bcl-2抗体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。
抗小鼠Bcl-2抗体与结合在包被抗体上的小鼠Bcl-2结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。
加入显色底物(TMB),TMB在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。
用酶标仪在450nm波长处测OD值,Bcl-2浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中Bc l-2的浓度。
标本收集:1.血清:全血标本于室温放置2小时或4℃过夜后于1000×g离心20分钟,取上清即可检测,收集血液的试管应为一次性的无热原,无内毒素试管。
2.血浆:抗凝剂推荐使用EDTA.Na2,标本采集后30分钟内于1000×g离心15分钟,取上清即可检测。
避免使用溶血,高血脂标本。
3.组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,以去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。
将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样本对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。
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小鼠白细胞介素-2(IL-2)酶联免疫分析(ELISA)
试剂盒使用说明书
本试剂仅供研究使用目的:本试剂盒用于测定小鼠血清,血浆及相关液体样本中小鼠白细胞介素-2(IL-2)含量。
实验原理:
本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠白细胞介素2(IL-2)水平。
用纯化的小鼠白细胞介素2(IL-2)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被单抗的微孔中依次加入小鼠白细胞介素2(IL-2),再与HRP标记的IL-2抗体结合,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,经过彻底洗涤后加底物TMB显色。
TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的IL-2呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品中小鼠白细胞介素2(IL-2)浓度。
试剂盒组成:
样本处理及要求:
1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上
清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。
2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。
3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清,保存过程中
如有沉淀形成,应再次离心。
胸腹水、脑脊液参照实行。
4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓
度达到100万/ml左右。
通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。
5.组织标本:切割标本后,称取重量。
加入一定量的PBS,PH7.4。
用液氮迅速冷冻保存备用。
标本融化后仍然保持2-8℃的温度。
加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。
离心20分钟左右(2000-3000转/分)。
仔细收集上清。
分装后一份待检测,其余冷冻备用。
操作步骤
1.标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标
准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。
(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为2400 pg/mL,1600 pg/mL ,800 pg/mL,400 pg/mL,200 pg/mL)。
2.加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样
品孔。
在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。
加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3.温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4.配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5.洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此
重复5次,拍干。
6.加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7.温育:操作同3。
8.洗涤:操作同5。
9.显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色
15分钟.
10.终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。
11.测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。
测定应在加终止
液后15分钟以内进行。
注意事项:
1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。
2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。
3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。
一次加样时间最好控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。
4.请每次测定的同时做标准曲线,最好做复孔。
如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔第一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请最后乘以总稀释倍数(×n×5)。
5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。
6.底物请避光保存。
7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准.
8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。
9.本试剂不同批号组分不得混用。
10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。
计算:Array以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标,
在坐标纸上绘出标准曲线,根据样品的OD
值由标准曲线查出相应的浓度;再乘以稀释
倍数;或用标准物的浓度与OD值计算出标
准曲线的直线回归方程式,将样品的OD值
代入方程式,计算出样品浓度,再乘以稀释
倍数,即为样品的实际浓度。
(此图仅供参考)试剂盒性能:
1.样品线性回归与预期浓度相关系数R值为0.95以上。
2.批内与批见应分别小于9%和11%
检测范围:15.6 pg/ml-1000 pg/ml
灵敏度:3.9 pg/ml
保存条件及有效期:
1.试剂盒保存:;2-8℃。
2.有效期:6个月。