毒理学实验设计

毒理学实验设计

——镉对肾脏的急性损害作用

设计者：余擎3100304094

李敏3100304091 一、实验背景及依据：

镉是环境中广泛存在的有毒重金属元素之一，镉污染及危害已经是一个全球性的环境医学问题。

在日本，人中毒事件主要是由于镉引起的，如一种“itai-itai”病的中毒，即是由镉中毒引起的。研究发现在镉污染地区的人们的骨头、肝、肾中都富集有大量的镉，尤其是肾在长期的职业性接触中会受到严重的损害。

肾脏是急性镉暴露的重要靶器官，会引起在临床上表现为管状功能紊乱的氨基酸尿、蛋白尿和糖尿病，以及肾肿胀、肾小管有管型和上皮细胞脱落、肾小球毛细血管从坏死。

目前，对镉致急性肾损害的机制上不明确，但根据有关资料报道：镉可损害肾小管而干扰肾对蛋白质的排出和再吸收等作用，并影响近端肾小管功能，出现糖尿病，使尿钙和尿酸增加。

二、实验目的和意义：

目的：了解镉的急性损害作用，镉对肾脏毒性的蓄积作用

意义：通过了解镉的急性作用，掌握镉的危害，同时积极预防镉的污染。掌握随机分组方法，以及实验数据的统计。

三、实验内容与方法：

1、实验动物：健康昆明小白鼠30只，雌雄各半，体重18~25g,，由实验中心提供。

2、主要试剂：氯化镉（CdCl2)

3、分组与染毒：30只小鼠按体重随机分组为5组，每组6只，CdCl2染毒剂量分别为0mg/kg、1.5mg/kg、3.5mg/kg、5.5mg/kg、7.5mg/kg，对照组注射生理盐水。灌胃1次。第2天处死动物。

（注：查相关资料得：实验动物为小白鼠，CdCl2经口染毒的LD50为150mg/kg,参照LD50值得的1/20~1/100设置四组剂量组，剂量间距为2。）

四、样本采集与处理：

1.使用代谢笼收集小鼠尿液

2.小鼠处死后，立即取肾脏，准确称取1份0.2g肾组织,置于消化液中消化，用于测定肾脏消化液中的镉浓度。

3.另取一份肾组织，制作肾脏病理切片。用于观察肾组织有无变化。

五、观察指标：

1.小鼠尿中镉的含量，使用石墨炉原子吸收光谱法直接测定尿中镉含量

2.小鼠肾脏消化液中镉的含量，使用原子吸收分光光度计直接测量

3．肾脏组织病理切片观察肾组织形态

六、数据统计处理方法：

1.记录每组尿液及肾组织中的镉含量。

CdCl2（mg）0 1.5 3.5 5.5 7.5

尿镉（mg）

肾组织镉

（mg）

2.绘制标准曲线。

3. 记录电镜下肾组织形态。

七、预期实验结果：

1.根据标准曲线观察到随着实验氯化镉剂量的增加，尿中镉和肾组织中镉的含量增加。

2.镉对肾脏产生急性损害，电镜下可观察到近曲小管上皮细胞溶酶体增多，增大，线粒体肿胀变形。