15：15-15：35 陈长兰-微波法虫草素提取

从表9 可以看出，当超声波功率为600W处理时， 随着处理时间的延长，虫草素的提取率逐步增长，若 继续延长处理时间虫草素的提取率有小幅回落。其中 提取时间为30min时虫草素提取效果最好。
六.超声波法提取虫草素单因素实验
4.不同微波功率的提取效果
表10 不同处理功率的提取效果数据表 Table 10 Extraction ratio of different ultrasonic power
四.微波法提取虫草素单因素实验
3.不同提取时间的提取效果
表5 不同处理时间的提取效果数据表 Table 5 Extraction ratio of different extraction time
提取时间(min) 1 2 3 4 5 虫草素得率(mg/g) 1.303 1.486 1.668 1.497 1.324
四.微波法提取虫草素单因素实验
采取方式：首先确定提取液适宜pH，其次提 取溶剂，其次提取时间、其次功率。
1. 不同提取液pH值的提取效果
pH=5.0 、pH=6.0的酸性浸提液和pH=9.0、 pH=8.0碱性提取液明显提高虫草素的浸出率。
四.微波法提取虫草素单因素实验
2.不同提取溶剂的提取效果
液滤纸过滤，上清液过0.2nm微孔滤膜， 滤液静置一夜，10000r/min离心5min， 经过超声清洗后进高效液相色谱柱检测 虫草素提取率。
三.虫草素的高效液相色谱测定
1.6.1 虫草素标准液的配制 准确称取虫草素标准品0.0050g，超纯水
溶解定容至10.0ml，配制成500mg/ml的标准储 备液。再将其稀释成10、20、30、50、70、 100µg/ml虫草素标准液，待测定。 回归方程为： y=-58391.8720930233+58011.3151162791.x , 相关系数 r＝0.9997 1.6.2 虫草素的HPLC 测定 色谱条件：色谱柱Waters Nova-pak C18 4.6mm ×250mm，5μm；流动相为超纯水-乙腈； 流速1.00ml/min；柱温为35℃；检测波长 260nm；进样20µl。梯度洗脱。
从表5 可以看出，用500w微波处理时，随着处理时间的延长，虫草素 的提取率逐步增长，若继续延长处理时间虫草素的提取率有小幅回落。 其中微波炉功率为500W，提取3.0min时虫草素提取效果最好。
四.微波法提取虫草素单因素实验
4.不同微波功率的提取效果
power
2.1.4 不同功率的提取效果 表6 不同处理功率的提取效果数据表 Table 6 Extraction ratio of different microwave
提取液
水 乙醇 水:乙醇=1:1 水:乙醇=1:3 水:乙醇=3:1
虫草素得率(mg/g) 1.214 1.119 1.207 1.231
1.201
从表8 可以看出，乙醇作为提取溶剂的提取效率反而 比纯净水要低，水和乙醇比例为1:3时提取效果最好。超声 波破碎法中水和乙醇比例为1:3的混合溶剂提取效果最佳， 此点与微波法相似。
桑育黎，代 颖，李慧娇，陈长兰（通讯作者）
所从事研究方向
一.分子生物学方面: 1.动物硒蛋白的细胞定位和分子功能研究. 主要在研课题有:国家自然基金课题(30671176) , 果蝇硒蛋白G-rich的细胞定位和分子功能研究 2.食药用真菌的富硒和有效成分研究. 主要在研课题有:辽宁省教育厅重点实验室项目
表4 不同提取溶溶剂的提取效果数据表 Table 4 Extraction ratio of different solvents
提取液
水
乙醇 水:乙醇=1:1 水:乙醇=1:3 水:乙醇=3:1
虫草素得率(mg/g)1.357 1.242
1.279
1.447
1.207
从表4 可知，当以微波辅助提取时，当提取溶剂为乙 醇时虫草素的提取得率明显的比提取溶剂为纯净水时要低。 在水与乙醇以不同比例混合为提取溶剂的实验中，水和乙 醇比例为1:3时提取效果最好。
但其组合A2B2C2D3 未包括在参加试验的9个组合为 此， 加做一个该组合处理， 测得虫草素含量为 1.731mg/g，证明该组合确实优于组合2和4。
六.超声波法提取虫草素单因素实验
1. 不同提取液pH值的提取效果
表7 不同提取液pH值的提取效果数据表 Table 7 Extraction ratio of different solvent pH
为富硒可促进虫草多糖和虫草素等活性成分增加
的机理研究提供一定的理论依据。
本论文侧重于对从蛹虫草中提取虫草素条件 的研究.
目录
一.蛹虫草与虫草素简介
二.虫草素提取方法的研究现状 三.微波法与超声破碎法简介 四.微波法提取虫草素的单因素实验 五.微波法提取虫草素的正交试验 六.超声破碎法提取虫草素的单因素实验 七.超声破碎法提取虫草素的正交试验 八. 微波提取法和超声波提取法的比较
(2009S046)；蛹虫草液体培养提高菌丝体及培 养液中虫草素含量配套技术研究.
1 硒的作用
硒是哺乳动物自身不可缺少的一种微量
元素，硒具有多重生物学功能，人和动物的 多种疾病被证实与硒缺乏密切相关，硒和维 生素E都是抗氧化剂，二者相辅相成，硒参与 甲状腺激素代谢、抗氧化系统使机体发挥正 常免疫功能。缺硒会引起如衰老组织硬化、 肝坏死、发生克山病，大骨节病、精神萎靡 不振，精子活力下降，易患感冒生长迟缓等 [10] (近年来又发现缺硒与许多常见的慢性病 有关，如引发心肌病、心肌衰竭疾病、癌症、 HIV 感染等[11] 。
提取液pH值
5
67
89
虫草素得率(mg/g) 1.117 0.714 0.479 1.423 1.401
pH=5.0 、pH=6.0的酸性浸提液和pH=9.0、 pH=8.0碱性提取液明显提高虫草素的浸出率。
六.超声波法提取虫草素单因素实验
2.不同提取液的提取效果
表8 不同提取溶液的提取效果数据表 Table 8 Extraction ratio of different solvents
五.微波法提取虫草素正交实验
从表11极差R分析结果可知：微波法R值由大到小依 次为微波功率，提取溶液的pH值，提取溶剂和提取时间。
从正交分析表直观分析可以看出，各因子单因素的 不同水平中， 分别以A2(pH7.0) 、B2(水：乙醇=1：Baidu Nhomakorabea3) 、C3 (500w)、D3(3min)水平的极差最大，为最优水 平，
微波法与超声破碎法提取蛹虫草菌丝体 中虫草素的比较研究
Comparison of the Extration of Cordycepin from Cordyceps militaris by Ultrasonic and Microwave method
辽宁大学生命科学院
黄子琪，贲松彬 辽宁大学药学院
虫草素是一种具有抑制 细胞分裂作用和抗生素作用 的生物活性物质，具有抗肿 瘤、抑菌、抗疟原虫、抑制 病毒、防治心脑血管疾病、 增强免疫等功能。由于虫草 素为具有重要药用价值的生 物活性物质，近年来对于它 的研究受到广泛重视。 :
二.虫草素提取方法的研究现状
虫草素溶于水、热乙醇、甲醇，所 以一般采用水、乙醇或甲醇等作为溶剂 提取虫草素。
微波功率
300W
虫草素得率(mg/g) 1.570
500W 2.431
1000W 2.031
从表6 中可以看出，在微波提取中，功率为500W时 虫草素的提取得率较另两个功率下的虫草素含量提取 得率明显要高。可见提取时间为3.0min，微波功率为 500W提取效果最佳。
五.微波法提取虫草素正交实验
表11 微波法提取虫草素正交试验设计及结果分析 Table 11 Analysis of orthonogal design for microwave extraction
表12 超声破碎法提取虫草素正交试验设计及结果分析 Table 12 Analysis of orthonogal design for ultrasonic extrac
超声功率（W）
200 400 600 800 1 000
虫草素得率(mg/g) 1.102 1.119 1.123 1.323 1.207
从表10 中可以看出，800W时超声破碎法提取虫草素 含量测定值最大。从表10 中可以看出，800W时超声破 碎法提取虫草素含量测定值最大。
七.超声波法提取虫草素正交实验
在已知的哺乳动物硒蛋白中大多
可以分成六大类：碘甲腺原氨酸脱氢 酶（ID）家族、谷胱甘肽过氧化物酶 （GSH-Px）家族、硫氧还蛋白还原 酶（TR）、硒蛋白P （Se-P）、硒代 磷酸合成酶（SPS）和硒蛋白W （Sew）。
在已知的哺乳动物硒蛋白中大多
可以分成六大类：碘甲腺原氨酸脱氢 酶（ID）家族、谷胱甘肽过氧化物酶 （GSH-Px）家族、硫氧还蛋白还原 酶（TR）、硒蛋白P （Se-P）、硒代 磷酸合成酶（SPS）和硒蛋白W （Sew）。
2 硒蛋白的分类、分布及功能
研究证实，硒以两种形式存在于蛋白质中， 一种是以富硒植物和富硒微生物为代表，通 过随机取代蛋白质中的硫的形式进入蛋白质， 所形成的蛋白质叫做含硒蛋白[12、13]（Secontaining protein），这一类蛋白质往往没有 确定的生理功能。
另一种是硒以一套高度特化的编码和合成 机制合成蛋白质，利用三个终止密码子之一 的UGA 作为密码子，通过以硒代半胱氨酸 （Sec）的形式进入到蛋白质中，所形成的蛋 白质叫做硒蛋白（Selenoprotein），这类硒蛋 白在生物体内具有特定的生理功能。因此有 人认为Sec被认为是生物体内的第21种氨基酸 。
一.蛹虫草与虫草素简介
冬虫夏草和蛹虫草是近年来食药用真菌中的 研究热点之一.它们都具有提高人体免疫力和 抗癌抗氧化等重要生理功能.其主要药用成分 都是虫草多糖和虫草素.
50年代即从:蛹虫草人工培养液的菌丝中分离 出虫草素(Cordycepin) ，其化学结构为3’-脱 氧腺苷(3‘-Deoxyadenosine)。
目前常用的提取方法有：浸提法、 超声法、索氏提取法和回流法和微波提 取法。传统的提取方法如浸提法、索氏 提取法和回流法存在着耗时长、被提取 成分损失大、工序多不利于下一步实验 进行、提取效果一般等缺点
三.虫草素的高效液相色谱测定
分别称取0.20g蛹虫草菌丝体干粉， 加入100ml超纯净水， 调节pH值为5、6、7、8、9， 采用微波功率为500W提取3min， 旋转蒸发仪将提取液浓缩至50ml，浓缩
实验号
1 2 3 4 5 6 7 8 9 K1 K2 K3 R
提取液pH值 提取液
5
水
5 水:乙醇=1:3
5 水:乙醇=1:1
7
水
7 水:乙醇=1:3
7 水:乙醇=1:1
9
水
9 水:乙醇=1:3
9 水:乙醇=1:1
3.752 3.480
4.092 4.204
3.177 3.337
0.915 0.867
六.超声波法提取虫草素单因素实验
3.不同提取时间的提取效果
表9 不同处理时间的提取效果数据表 Table 9 Extraction ratio of different extraction time
提取时间(min)
20 25 30 35 40
虫草素得率(mg/g) 1.117 1.211 1.347 1.225 1.119
微波功率 (W)
300w 500w 1000w 500w 1000w 300w 1000w 300w 500w 3.633 4.447 2.941 1.506
提取时间 (min)
1 2 3 3 1 2 2 3 1 3.657 3.562 3.802 0.240
虫草素得率 (mg/g)
1.167 1.648 0.937 1.600 1.291 1.201 0.713 1.265 1.199
在参会的另一篇论文
蛹虫草富硒条件优化及硒对其中主要活性 成分的影响
贲松彬，黄子琪，王 莹，侯 潇，陈长兰
发现在最优化富硒培养条件下，菌丝体中两种
主要药用活性成分：虫草多糖和虫草素，其含量
分别为226.3mg/g和2.22mg/g，是非富硒菌丝体中
的3.4倍和5.8倍，能大幅提高蛹虫草的药用价值，