我院梅毒血清学检测结果解释
梅毒检测技术与质量考评
梅毒检测技术及质量考评沈阳市CDC 刘娜2014.6.4目录一、梅毒的概述二、梅毒的实验室检测技术三、梅毒血清学质量考评总结一、梅毒的概述1、定义梅毒(Syphilis)是梅毒螺旋体(Treponema pallidum,TP)(即苍白螺旋体的苍白亚种)感染人体所引起的一种系统性、慢性、经典的性传播疾病,可引起人体多系统、多脏器的损害,产生多种多样的临床表现,导致组织破坏、功能失常,甚至危及生命。
是世界卫生组织所列的世界上50种常见传染病之一。
是我国卫生部规定的8种重点防治的性病之一。
《中华人民共和国传染病防治法》规定的乙类传染病。
人间传染的病原微生物名录:危害程度第三类,样本在生物安全二级实验室中检测。
2、生物学特性2.1 形态细长,5-15×0.1-0.2um ,形似细密的弹簧,螺旋弯曲规则整齐,平均8~14个,两端尖直,折光性强,一般染料不易着色,姬姆萨染色则可染成桃红色。
2.2 培养梅毒螺旋体是厌氧、寄生性微生物,在体内可长期生存繁殖,一般不能人工培养。
1981年Fieldsteel等采用棉尾兔单层上皮细胞在微氧(1.5%氧)条件下培养,经9-12天孵育后,螺旋体数比接种数平均增加49倍,对兔仍保持毒力。
2、生物学特性2.3 生存条件干燥、肥皂水及一般消毒剂如1:1000苯酚、新洁尔灭、稀酒精均可于短时间将其杀死温度的影响:41-42℃时可生活1-2小时,在48℃仅半小时即失去感染力,100℃立即死亡。
对寒冷抵抗力大,在0℃时,可生活48小时,在低温(-78℃)保存数年,仍可保持其形态、活动及毒性在血液中4℃经3日可死亡,故在血库冰箱冷藏3日以上的血液就无传染性在封存的生理盐水稀释的组织液中可生活10小时左右在潮湿的器具或湿毛巾中,亦可生存数小时在干燥环境中可见迅速死亡2、生物学特性2.4 宿主梅毒螺旋体只感染人类人是梅毒的唯一传染源2.5 抗原分为三类:密螺旋体抗原即梅毒螺旋体表面特异性抗原:刺激机体产生特异的凝集抗体及密螺旋体制动抗体或溶解抗体,后者加补体可溶解螺旋体螺旋体内类属抗原:可产生补体结合抗体,与非病原性螺旋体有交叉反应非螺旋体抗原即磷脂类抗原:当螺旋体侵入组织后,组织中的磷脂可粘附在螺旋体上,形成复合抗原,此种复合抗原可刺激机体产生抗磷脂的自身免疫抗体,称为反应素,可与牛心肌或其他正常动物心肌提取的类脂质抗原起沉淀反应(康氏试验)或补体结合反应(华氏试验)3、传播途径3.1性接触主要传播途径,占95%以上。
TPPA、TP—AbELISA、TRUST三种方法检测血清梅毒结果分析
TPPA、TP—AbELISA、TRUST三种方法检测血清梅毒结果分析目的分析TPPA、TP-Ab(ELISA)、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果。
方法采用梅毒螺旋体明胶凝集试验(TPPA)、酶联免疫吸附试验(TP-Ab)、甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)来对比检测150例临床确诊的梅毒阳性血清标本和70例正常血清标本。
结果TP-Ab、TPPA检测方面的灵敏性、特异性显著高于TRUST检测方法,P<0.05。
结论TPPA具有较高的特异性,可以将其作为梅毒确证实验;TP-Ab(ELISA)法的灵敏度、特异性与TPPA法比较接近,是现阶段对梅毒抗体进行检测的首选方法;TRUST法的特异性较差,可以将其当成TP-Ab(ELISA)法的补充。
标签:TPPA;TP-Ab(ELISA);TRUST;检测;血清梅毒梅毒作为慢性全身性性传播疾病,主要是因为梅毒螺旋体感染导致的,梅毒的病程较长,临床表现复杂,表现为多样性,会对患者的全身各个器官造成损害;疾病早期主要对黏膜和皮肤造成侵犯,疾病后期则会对中枢神经系统、心血管系统等器官造成侵犯。
现阶段因为人们滥用抗生素药物,导致部分梅毒患者表现为隐性感染,缺乏临床表现,因此在临床诊断中容易出现误诊和漏诊的情况[1]。
世界卫生组织认为,全球输血不安全是导致没有有效筛选传染性因子的主要原因。
所以采用高灵敏度、强特异性的筛选方式,对安全输血非常重要。
本研究主要分析了TPPA、TP-Ab(ELISA)、TRUST三种方法检测血清梅毒的结果,现将情况做如下分析。
1 资料与方法1.1一般资料1.1.1标本选择选择2014年1月~2016年1月经我院临床确诊的梅毒感染输血患者输血前的标本150例,并选择同期非梅毒感染输血患者的血清标本70例,对血清进行分离后再进行检测。
1.1.2试剂和方法TPPA试剂盒选择富士瑞必欧株式会社所提供的;TP-Ab 试剂盒则是由珠海丽珠试剂有限公司提供;TRUST试剂盒则是由上海荣盛生物技术有限公司所提供;选择SUNRISE酶标仪、新康医疗器械有限公司提供的XK-96型梅毒旋转振荡器和HydroFLex洗板机。
关于梅毒的实验室检测
关于梅毒的实验室检测成都商报在2007年5月9日第5版中有这样一篇文章—“是梅毒,是没‘毒’女大学生考警蹊跷被刷”。
讲的是小梅在淮南市第一人民医院进行考警体检中被误诊(或是错诊)为梅毒的事。
其报道中对梅毒的实验室检查部份的叙述存在一定程度的误导,因此我们针对梅毒的病原体、实验室检查及检验方法等相关内容进行了组稿。
来进一步加深对梅毒实验室诊断的认识。
一、螺旋体的分类、寄生部位螺旋体的分类及传播方式二、生物学特性梅毒螺旋体即苍白密螺旋体的苍白亚种,人是其唯一宿主。
直径0.1—0.15μm,全长7--8μm。
在电镜下可见有细胞壁和细胞膜。
新鲜标本在暗视野显微镜下可观察其形态和活泼的运动方式。
梅毒螺旋体主要有两种抗原:1、密螺旋体抗原即梅毒螺旋体表面的特异抗原,与雅司、地方性梅毒、品他病等3种密螺旋体有共同抗原,可交叉反应。
2、非螺旋体抗原即磷脂类抗原,可刺激机体产生反应素,其与牛心肌的心脂质抗原发生反应,此法敏感性高,但有假阳性。
梅毒螺旋体对外界的抵抗力极弱,离体后1—2小时即死亡,对热和干燥特别敏感,在体外干燥环境下1—2小时或加1.5℃经1小即死亡。
血液中4℃放置3天可死亡,因此4℃血库存放3天以上的血液无传染梅毒的危险。
对肥皂水和常用化学消毒剂亦敏感,1%--2%石炭酸内数分钟就死亡。
梅毒的免疫属感染性免疫,有梅毒螺旋体感染时才有免疫力,一旦螺旋体被杀灭,其免疫力随之消失。
机体对梅毒螺旋体感染可产生细胞免疫和体液免疫反应,体液免疫中有两种抗体:一种是梅毒特异性抗体,主要是IgG、IgM,对螺旋体有制动作用,当有补体存在时,可将其杀死和溶解,对机体的再感染有保护作用。
另一种是抗脂质抗体的反应素,为IgG和IgM的混合物,对机体无保护作用。
三、送检标本和检验方法Ⅰ期梅毒病人取硬下疳渗出液,Ⅱ期梅毒取梅毒疹渗出液或局部淋巴抽出液。
对Ⅰ期梅毒末期以后(大约感染3—4周以后)的病人可分离血清检查有无梅毒螺旋体抗体和反应素。
梅毒血清学检测的操作规范
病期在2年内有多形性皮疹等
三期梅毒
病期在2年以上,可有皮肤黏膜损害等
隐性(潜伏)梅毒 胎传(先天)梅毒
梅毒的诊断
病史 症状 实验室检查
梅毒的实验室检查对诊断有重要意义
梅毒实验室检测技术
病原学检测 血清学检测
梅毒实验室检测的特点
临床表现
一期梅毒
二期梅毒
潜伏梅毒 三期梅毒 神经梅毒
பைடு நூலகம்果判读
RPR TRUST
TRUST凝集反应强度分级
++++:抗原颗粒呈粗大团块,凝结 +++:抗原颗粒中等团块、凝结 ++:颗粒凝结,与清亮液体呈明显反差 +:抗原颗粒凝结、均匀肉眼可见 ±:抗原颗粒细小凝结,肉眼可辨 ―:圆圈内仅见红色集中于中央一点或均匀
分散。
试验操作—定量检测
(1)稀释液准备:在圈内加入50μL生理 盐水(根据需要确定稀释度),勿将盐 水涂开。 (2)加样:吸取50μL血清与各圈中生理 盐水做系列稀释,并涂布整个圈内。 (3)余同定性试验中。
稳定4℃ ~8 ℃ 保存12个月
血清试验前处理 需灭活
不需灭活
不需灭活
反应板及结果判 玻片,肉眼或显 玻片,肉眼或显 纸卡片,肉眼
断
微镜
微镜
注释
唯一用于检查脑脊 液的试验,诊断神 经梅毒
结果容易判断
稳定4℃ ~8 ℃ 保存12个月
不需灭活 纸卡片,肉眼
结果容易判断
非梅毒螺旋体抗原血清试验
RPR/TRUST
TPPA结果判读
观察第3孔,不出现凝集为有效试验
TPPA结果判断
观察凝集反应强度:分级如下
慎重解释梅毒检验报告单
慎重解释梅毒检验报告单河南省传染病医院皮肤性病科副主任医师赵会亮小李婚后十月怀胎,即将成为人母的她沉浸在喜悦的期盼中。
但到医院产前检查中有一项化验RPR结果是阳性,医生告知小李可能感染了梅毒,可能会影响到孩子。
这可吓坏了小李,她从来没有什么不洁性行为怎么会感染梅毒呢?进一步检查证实,小李的化验属于假阳性,随后小李在医院顺利地生下一个健康的宝宝。
这件事提醒我们,梅毒以及梅毒血清学检验比较复杂,在对患者解释时应慎重。
梅毒筛查的常用指标梅毒由于临床表现多样性而被皮肤科医师称为“模拟大师”,目前诊断因暗视野或荧光显微镜等设备不太普及而主要靠血清学检测来判定。
检验方法因抗原制备方法不同分为非螺旋体抗原试验和螺旋体抗原试验,前者主要包括:VDRL、USR、RPR 等,后者主要包括:FTA-ABS、TPHA、TPPA等。
初筛试验中VDRL因操作麻烦在大多数医院没有开展,USR、RPR是在VDRL基础上经过改良后的实验方法,操作简单且可以肉眼判定结果,有同样的特异与敏感性,因而被广泛应用。
确认试验中由于TPHA、TPPA操作简单且特异性、敏感性优于FTA-ABS而被广泛开展。
一般来讲,排除假阳性原因,确认试验所作为抗-IgG螺旋体抗体,即使足够规范的治疗,结果仍可为阳性,因此不作为疗效观察、复发、再治疗的依据。
假阳性假阴性都很“常见”因技术原因所限,两类梅毒血清学试验都存在生物学假阳性以及假阴性问题。
如:系统性红斑狼疮、风湿性心脏病、关节炎、肝硬化、结肠癌、静脉吸毒、妊娠、糖尿病、风疹、丝虫病、结核病等急慢性感染性疾病均可以导致假阳性。
这类假阳性结果,通过倍比稀释后滴度都很低,一般在1:8以下,两类试验结合来看即可明确。
由于试验敏感性、前带现象(血清梅毒螺旋体抗体浓度过高而抑制抗原抗体凝集)、梅毒感染时间长短等原因可以导致试验结果的假阴性,如:RPR在一期、三期梅毒阳性率分别为85%、80%。
假阳性和假阴性结合临床资料以及复检,一般情况下可以排除。
梅毒实验室诊断与报告
.
1
性病病例报告的核心要素
报告病种与病例定义(诊断标准) 报告卡 报告程序与工作流程
.
2
性病病例报告标准
报病标准:必须同时符合以下2条:
1. 符合国家诊断标准
2. 首次诊断:即第一次诊断。本次发病或 检出前,从未被诊断过,从未报告过。 包括2种情况:
--新发病病例
--新发现病例:以前没有发现过
婴儿来源于母亲的抗体,一般在3个月RPR 滴度开始下降,6个月成为阴性。如果6个月 后仍然阳性,应进一步检查
如果出生后18个月,TPPA检测为阳性,可 诊断为胎传梅毒
.
17
关于胎传梅毒的诊断
IgM抗体不能通过胎盘
胎儿在宫内感染梅毒螺旋体抗体后,在胚胎晚 期(6-9个月)能合成IgM抗体
新生儿或婴儿检出19S- IgM抗体是诊断先天梅 毒证据
确诊,也不应删除,应保留在网络上
.
10
一期梅毒病例的诊断标准
疑似病例
--非婚性行为史、性 伴梅毒史
--临床表现:硬下疳 --非特异性抗体检测
(RPR或TRUST等)阳 性 --无条件做特异性抗 体检测(TPPA等)
确诊病例
--非婚性行为史、性伴 梅毒史
--临床表现:硬下疳 --非特异性抗体检测(
IgG阴转:可终生阳性 反应素阴转:其次
二期梅毒治疗后9个月: 27.3%阴转 早期潜伏梅毒治疗后2年:38.4%
.
35
梅毒血清学试验的临床意义
光法)
脑脊液检查: VDRL/ RPR,TPPA
.
25
非梅毒螺旋体抗原血清试验(1)
检测反应素:即检测非特异性抗 体
反应素:TP破坏人体组织后产生 心磷酯,机体针对心磷酯产生抗 体,此即反应素。
梅毒血清学检测的操作规范
TPPA操作步骤
试剂准备:恢复室温 加稀释液:每份样本做4孔,加标本稀释液 加至微量反应板孔内,第1孔100μL,第2~4 孔各25μL 样本稀释:取血清25μL加至第1孔,混匀后 取25μL至第2孔,混匀后取25μL至第3孔,混 匀后取25μL至第4孔,混匀后弃去25μL 加对照液:第3孔加未致敏颗粒25μL,第4孔 加致敏 颗粒25μL 混合:将反应板置振荡器振荡30秒 反应:孵育2h观察结果
TPPA结果判读
观察第3孔,不出现凝集为有效试验
TPPA结果判断
观察凝集反应强度:分级如下
4+~3+:颗粒光滑覆盖整个孔底,有时边缘有折叠
2+:颗粒光滑集聚覆盖孔底,周围有一颗粒环
1+: 颗粒光滑集聚覆盖孔底,周围有一明显颗粒环
±:颗粒模糊覆盖,边缘有明显的小环
一:颗粒紧密沉积孔底中央或形成一小点
50.0
-
50.0
抗原悬液(ul) 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7 16.7
非梅毒螺旋体抗原检测意义
早期梅毒硬下疳出现1~2周后,血清学可 呈阳性 梅毒患者经治疗后血清滴度可下降并转 阴性,故可作为疗效观察、判愈、复发 或再感染的指征 为什么要做定量检测?
滴度常与病情活动相关,滴度改变4倍具有 临床意义
梅毒血清试验假阳性因素:
技术性
标本的污染 溶血 操作失误 患者有其他疾病,使梅毒血清试验出现阳性 生理机能发生变化:少数孕妇也可发生生物 学假阳性
梅毒报告单,你会看吗
梅毒报告单,你会看吗刘水桂病人手术、输血前,医生一般会给病人开梅毒检测,但检测结果出来,对于非皮肤科医生看这梅毒结果报告单,也有点纳闷了,这报告单上TPPA阳性,但RPR阴性,病人是否感染梅毒了?带着以上的问题,我们回顾下梅毒的有关知识。
梅毒是由苍白密螺旋体苍白亚种(又名梅毒螺旋体)感染人体所引起的一种慢性、系统性性传播疾病,可引起人体多系统多器官损害,产生多种临床表现,导致组织破坏,功能失常,甚至危及生命。
梅毒血清学检查是诊断梅毒的重要依据,对梅毒早期诊断,发现传染源及控制梅毒传播具有重要意义。
因此,全面的认识和了解梅毒抗体检测对指导临床诊断和疗效观察具有重要意义。
当人体感染梅毒螺旋体后4-10周,血清中可产生一定数量的抗类脂质抗原的非特异性抗体和抗梅毒螺旋体抗原的特异性抗体。
根据检测所用抗原不同,可以分为二类检测方法:表1 梅毒检测实验方法分类上述的实验方法中,医院一般只检测非梅毒螺旋体血清学实验(VDRL、RPR、TRUST三种方法中一种),梅毒螺旋体血清学试验(TPPA、TPHA、FTA-ABS、ELISA、CLIA、RT六种方法中一种),大多数医院常见的检查方法为RPR和TPPA。
下面介绍一下两种实验方法的实验原理。
梅毒非特异性抗体试验原理梅毒螺旋体一旦感染人体,人体迅速对被损害的宿主细胞以及梅毒螺旋体细胞表面所释放的类脂物质作出免疫应答,在3周-4周产生抗类脂抗原的抗体(亦称为反应素),这些抗体主要是IgG和IgM型混合抗体。
非梅毒螺旋体试验是使用心磷脂、卵磷脂及胆固醇作为抗原的絮状凝集试验。
反应素与卵磷脂遇水形成胶体溶液,胆固醇遇水形成结晶。
当抗原与抗体(反应素)混合发生反应时,后者即粘附胶体微粒的周围,形成疏水性薄膜。
由于摇动、碰撞,使颗粒与颗粒互相粘附而形成肉眼可见的颗粒凝集和沉淀,即为阳性反应。
RPR试验是VDRL试验的一种改良方法。
该法是在抗原中加入活性炭颗粒作为指示物,加入了氯化胆碱,因此血清不需灭活。
梅毒
主要组成成份
1.TP酶标板 2.TP阳性对照 3.TP阴性对照 4.TP酶标试剂 5浓缩洗涤液 6.显色剂A液 7.显色剂B液 8终止液 9自封袋 10封板膜
部位组织液、淋巴穿刺液及脑脊髓液等标本 的梅毒螺旋体核酸采用PCR进行检测
病原体检查方法
即梅毒螺旋体检查,采用暗视野显微镜 检查或直接免疫荧光试验(direct fluorescent antibody test,DFA), 在显微镜下观察梅毒螺旋体的特征性形 态和运动方式。该方法是诊断早期现症 最直接的方法,但由于受到患者用药、 检测仪器状态和检测人员技能等条件的 制约,本方法实际检出率并不高。未检 测到梅毒螺旋体,并不能排除患梅毒的 可能性。本方法费时费力,也不适用于
梅毒螺旋体的生物学特性
标本的采集与处理
所有标本都应当被视为具
有传染性,医务人员应戴 手套谨慎操作
梅毒标本采集
梅毒的实验室诊断主要有病原体检测和血清
学检测方法,各期梅毒的检测方法及部位见 下表。
临床表现 一期梅毒 二期梅毒
取材部位 溃疡、淋巴结、血液 皮损、淋巴结、血液
检查方法 暗视野检查、血清学检查 暗视野检查、血清学检查
标本接收的标准
核对样品与送检单,检查样品管有无破损和
溢漏。如发现溢漏应立即将尚存留的样品移 出,对样品管和盛器消毒并做记录。 检查样品的状况,记录有无严重溶血、微生 物污染、脂血以及黄疸等情况。如果样品污 染或者认为样品不能被接受,应将样品安全 废弃。并将样品情况立即通知送检科室。 对不合要求的标本,可以拒绝接受。
末 梢 全
血
消毒局部皮肤(成人和1岁以上儿童可选择手
指或耳垂,1岁以下儿童采用足跟部)。一次 性采血针刺破皮肤,用无菌棉签擦掉第一滴 血。收集滴出的血液,立即用于检测。
梅毒螺旋体感染测定结果的报告与解释
梅毒螺旋体感染测定结果的报告与解释1梅毒螺旋体感染的检测方法1.1概述由于梅毒螺旋体侵入机体可产生非特异的反应素和抗密螺旋体抗体等两种抗体,因而免疫测定方法可根据所使用的抗原分为非密螺旋体抗原血清学试验和密螺旋体抗原血清学试验两大类,前者以心磷脂为抗原检测血清中抗心磷脂抗体,也就是所谓的反应素;后者则是以密螺旋体或其成分为抗原检测血清中特异的抗密螺旋体抗体。
1.2非密螺旋体抗原血清学试验非密螺旋体抗原血清学试验基本原理就是采用从牛心中提取的心磷脂作为抗原,梅毒螺旋体在破坏机体组织的过程中,体内释放一种心磷脂抗原,这种抗原可刺激机体产生相应的抗体即反应素,其与牛心中提取的心磷脂在体外可产生免疫结合反应。
此类试验主要包括VD RL(venereal disease research laboratory test)、RPR(rapid plasma regain circle card test)和甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)等。
非密螺旋体抗原血清学试验操作简便快速,但是由于其所用的抗原是类脂质抗原,而不是密螺旋体抗原,因此特异性较差,可在多种疾病中出现假阳性的结果,例如麻风、结核、红斑狼疮、类风湿关节炎、猩红热等,据报道上述实验在没有梅毒感染史的正常人群中阳性率达0.1%。
此外,由于感染梅毒螺旋体后,机体血循环中心磷脂抗体的出现要晚于特异性的抗梅毒螺旋体抗体,并且三期梅毒这类抗体还有可能转阴。
基于以上原因,通常不推荐采用非密螺旋体抗原血清学试验作为梅毒的筛查试验,可用于梅毒疾病活动性的判定、疗效检测等。
1.3密螺旋体抗原血清学试验密螺旋体抗原血清学试验又称为梅毒特异性抗体检测试验。
目前较为常用的有:荧光密螺旋体抗体吸收试验(fluoresent treponemal a ntibody-absorption test, FTA-ABS)、梅毒螺旋体血球凝集试验(treponema pallidum hemagglutination assay, TPHA)、梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(treponema pallidum particle agglutination assay, TPPA)、酶联免疫吸附试验(ELISA)、化学发光免疫分析(CLIA)和蛋白印迹技术(Western blotting,WB)。
4年住院孕产妇及新生儿梅毒血清学检查结果分析
4年住院孕产妇及新生儿梅毒血清学检查结果分析发表时间:2014-08-13T08:40:36.137Z 来源:《医药前沿》2014年第15期供稿作者:潘新锋[导读] 在临床工作中,我们应加强RPR及TPPA的检测,目前大部分医院仅仅进行RPR初筛是不够的。
潘新锋(复旦大学附属中山医院青浦分院皮肤科上海 201700)【中图分类号】R759 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752(2014)15-0241-02梅毒是由梅毒螺旋体引起的一种慢性传染病,可累计全身多个系统、器官,可以通过性接触传播,也可通过胎盘经血液垂直传播。
有些梅毒患者可以很多年无症状而呈潜伏状态,所带来的危害较大,尤其是对孕产妇而言。
近年来,梅毒感染率有所增加,其中育龄妇女属于高感染人群,妊娠合并梅毒患者和新生儿发病率都有上升的趋势。
本文通过对2010年-2013年我院产科住院病人及TPPA阳性产妇的新生儿进行梅毒血清学检查分析。
现将结果报道如下:1.对象与方法1.1对象2010年-2013年我院产科住院病人及TPPA检测阳性产妇的新生儿。
1.2方法抽取静脉血2ml,经离心沉淀取血清50μl,采用快速环状卡片测试方法(RPR)进行初筛,初筛试剂购自上海江莱生物科技有限公司,对初筛阳性者再进行梅毒螺旋体血球凝集试验(TPPA)确诊,确诊试剂购自日本富士必欧株式会社,初筛、确诊试验均严格按试剂说明书进行具体操作和结果判断,所有试剂均在其有效期内使用。
2.结果2010年-2013年住院生产的6458例孕产妇进行RPR和TPPA检测,对48例TPPA阳性产妇的新生儿进行RPR、TPPA检测。
检测结果见表1。
表1 6458例孕产妇及48例新生儿RPR、TPPA检测结果3.讨论梅毒的检测分2块,即非梅毒螺旋体抗原血清试验和梅毒螺旋体特异性抗原血清试验。
非梅毒螺旋体抗原血清试验是用心磷脂做抗原,检查血清中的抗心磷脂脂抗体,属于这一类的试验的有RPR(快血清反应素)试验、VDRL试验及USR试验,可用来进行定量测定,也可用于观察疗效,判断是否复发及再感染。
梅毒血清学检验中不同方法检定的结果评价
梅毒血清学检验中不同方法检定的结果评价发表时间:2018-08-02T10:21:08.760Z 来源:《中国结合医学杂志》2018年3期作者:李艺芳[导读] 梅毒是一种常见的性传播性疾病,梅毒病是由梅毒螺旋体所导致的一类慢性、系统性传播疾病。
湖南省洪江市疾病预防控制中心检验科 418200【摘要】目的:对梅毒血清学检验中不同方法检定的结果进行评价分析。
方法:选取本中心2016年、2017年怀化市强制戒毒所哨点监测血样953人份,用梅毒螺旋体双抗原夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)进行初检,初检阳性的,再用梅毒螺旋体甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)进行复检。
对比2种检测方法的阳性率、敏感性与特异性。
结果:ELISA检测结果阳性率10.80%,特异性100%、敏感性100%;TRUST检测结果阳性率37.86%、特异度94.12%、敏感度90.70%。
检验效果对比上,ELISA检测与TRUST检测存在显著差异,P<0.05具统计学的意义。
结论:梅毒螺旋体双抗原夹心法的酶联免疫吸附试验(ELISA)检测结果相比梅毒螺旋体抗体甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)敏感性、特异性更高。
适合大批量标本检测,可作为梅毒抗体检测筛查较理想的方法。
【关键词】梅毒;血清学检验;检定结果梅毒是一种常见的性传播性疾病,梅毒病是由梅毒螺旋体所导致的一类慢性、系统性传播疾病,其传播的主要途径是性传播[1]。
梅毒一般分为后天性(获得性)和先天性两种,前者通过性接触传染,称为性病梅毒,后者从母体通过胎盘传染给胎儿,称为胎传梅毒。
获得性梅毒临床上分为三期,表现为发作、潜伏和再发作交替的现象。
梅毒患者通常会对自身及患者的伴侣造成一定程度的影响,所以,对梅毒疾病的检测及及早治疗相对更为重要[2]。
以往的梅毒检查诊断中,采取的方法操作相对复杂,并且准确度更低,因此其诊断的结果准确度相对较低[3]。
本次研究通过对梅毒患者的血清学检验分别采取不同的方法检定分析,并评价分析结果,现作报道如下文。
梅毒血清标志物实验检测的临床意义
梅毒血清标志物实验检测的临床意义目的:为临床提供梅毒血清标志物实验检测的临床意义。
方法:采用梅毒快速血集反应素环状卡片试验(RPR)和梅毒螺旋体检测胶体金凝集试验联合检测。
结果:联合检测梅毒两项血清标志物RPR和TP,有4组常见组合模式:(1)RPR(-)、TP(-);(2)RPR(-)、TP(+);(3)RPR(+)、TP(+);(4)RPR (+)、TP(-)。
结论:梅毒血清学检测方法不能在梅毒的不同病期检出抗类脂质抗体或抗TP抗体,按4种不同模式组合,进行临床意义解读。
标签:梅毒;血清标志物梅毒(syphilis)属于一种性传播疾病,病原体为苍白密螺旋体(treponencopallilum,TP)苍白亚种,又称梅毒螺旋体,其形态呈柔软纤细的螺旋状。
梅毒螺旋体属厌氧菌,在体外不易生存,煮沸、干燥、常用的消毒剂均可致其死亡,但对潮湿、寒冷环境的耐受力较强。
梅毒螺旋体是引起性传播性疾病梅毒的主要病原体,它通过人类黏膜或有破损的皮肤直接接触患者感染性病灶而发生感染,这与艾滋病的传播途径是高度一致的[1],它还可促进艾滋病的传播,可侵犯全身各器官[2],危害性大,是我国重点防治的传染病疾病之一,患梅毒孕妇可通过胎盘感染胎儿,早期可致胎儿流产,晚期感染的成活儿可患先天梅毒。
人体一旦感染梅毒螺旋体后,将引起一系列血清免疫学反应,产生两种抗体。
一类是磷脂反应素即非特异性抗体;另一种是针对梅毒螺旋体,即梅毒的特异性抗体。
由于梅毒早期的临床表现不典型,目前诊断梅毒的主要方法是利用血清学试验测抗体,RPR实验是快速血集反应素环状卡片试验,是非特异性梅毒血清学实验;TPPA实验是梅毒螺旋体检测胶体金凝集试验,是特异性梅毒血清学验,我国大中型医院实验室检测梅毒抗体最常见方法是RPR和TPPA两种联合检测,可更有效提高梅毒的阳性率,避免漏检[3]。
两种联合检测方法如下。
1 资料与方法1.1 一般资料选取笔者所在医院行RPR和TPPA两种联合检测方法检测的标本。
梅毒检测方法的临床诊断意义
梅毒检测方法的临床诊断意义目的:分析两种方法对梅毒病人诊断的敏感性和准确性。
方法:应用螺旋体明胶颗粒凝集实验(1PPA)和环状卡片反应素实验(RPR)两种方法对我院皮肤病性病门诊65例梅毒病人进行检测分析。
结果:TPPA法的阳性率为90.77%、RPR法的阳性率为56.92%。
结论:TPPA法是检测梅毒螺旋体抗体的特异性方法,在梅毒感染初期,患者未产生抗体时RPR法检出率较高,因此两种方法同时使用可提高诊断率。
标签:梅毒;检测方法;临床意义梅毒(Syphilis)是一种慢性接触性传染病。
梅毒的病原体是苍白螺旋体(Treponema pallidum),是一种对人有严重致病性的螺旋体,能侵犯任何器官,产生各种症状。
梅毒螺旋体只感染人类,故梅毒是唯一的传染源[1]。
其传染途径,后天性梅毒主要通过性交传染,少数可通过接吻传染,也偶有通过胎盘传给胎儿而致病。
得不到治疗的梅毒患者,在感染后一年内,其传染性最大,病期越长,传染性越小。
感染四年后,通过性接触一般已无传染性,但仍可胎传[2]。
本研究选用常用的RPR和TPPA2种方法同时对87例早期梅毒血清进行检测,比较梅毒检测实验方法的灵敏度和特异性。
1材料和方法1.1一般资料:本组资料根据经我院皮肤性病科自2006年7月-2009年2月收治的65例确诊患者,其中男性患者42例,占64.62%,女性患者23例。
最小年龄21d,最大年龄53岁,平均年龄为32±4.2岁。
I期梅毒29例,Ⅱ期梅毒22例,III期梅毒10,潜伏梅毒4例。
病程:最短1d,最长3个月,其中梅毒硬下疳溃破1~4d者7例,5~10d者20例,>10d者27例。
1.2试剂:TPPA试剂盒(富士瑞必株式会社日本东京);RPR试剂盒(上海荣盛生物有限工司)。
1.3方法:取患者血清,采用TPPA利用纯化的致病性梅毒螺旋体(Nmhol 株)SEBODIA抗原包被明胶颗粒和RPR两种试验方法进行对比检测分析。
2652例老年患者梅毒血清学检测结果分析
熟地 养血滋 阴 , 参 、 金 活血祛 瘀 止痛 , 丹 郁 山楂 活 血
散瘀 , 淫羊 藿温 肾阳 , 葛根生津 止 渴 , 甘草调 和诸 炙 药、 补益心气 。全方共 奏益气 活血 祛瘀之 功 , 调整 , t L
脏 及整 个机体 的气 血功 能 。现代 药理 研究 显 示 , 灵 芝 可有效 扩张冠脉 , 加冠脉 血流量 , 增 改善心 肌微循 环, 增加 心肌氧 和能 量 的供 给 ; 芪 能改 善 心 电图 、 黄
试 验 。均 严 格 按 照试 剂 盒 内说 明 书操 作 。 结果 见表 l 。
表 1 262例 老 年 患 者 T 5 P检 0 果 1 结
阳性 率 ( ) %
1 1 .2
12 .8
2. 1 1
性 。其原因为 : ①老年人 中身体素质 比较好 , 性生活观 念 比 较差者亦有 患梅毒 的可能。② 老 年人 身体 比较差 , 抵抗 力
能指标 改善 , i 行距 离延 长 , 次住 院率 、 6m n步 再 病 死率 降低 。证实 益 气 活血 方对 D F具 有 良好 的辅 H
助 治疗作用 。 [ 参考文献 ]
[ ]蔡毅 , I 何昆仑 , 范利. 舒张性心力衰竭新概况 [ ] 中华老年心脑 J.
血 管病 杂 志 ,06,( ) 4542 20 8 6 : 2 — . 4
下。
TP P A是 将 梅 毒 的 精 制 菌 体 成 分 包 被 在 人 工 载 体 明 胶 粒 子
上, 这种致敏粒子和样品中的 T P抗体产生粒子凝集反应 , 由 此可检测出血清 中T 抗体 , 可用 于测定抗 体效价。T P P 并 PA
特 异性 为 9 。 % ~ 9 8 , 感 性 达 9 % 以上 。但 是 T P 69 9 .% 敏 0 PA
梅毒血清学试验的临床价值
非梅毒螺旋体血清的 假阳性反应
妊娠的假阳性反应 这是一种生理情况下的生物学假阳性 假阳性发生率较低有报告为0.4% 滴度低
梅毒螺旋体血清试验的 生物学假阳性
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其实,世上最温暖的语言,“ 不是我爱你,而是在一起。” 所以懂得才是最美的相遇!只有彼此以诚相待,彼 此尊重,相互包容,相互懂得,才能走的更远。 • 相遇是缘,相守是爱。缘是多么的妙不可言,而懂得又是多么的难能可贵。否则就会错过一时,错过一世! • 择一人深爱,陪一人到老。一路相扶相持,一路心手相牵,一路笑对风雨。在平凡的世界,不求爱的轰轰烈烈;不求誓 言多么美丽;唯愿简单的相处,真心地付出,平淡地相守,才不负最美的人生;不负善良的自己。 • 人海茫茫,不求人人都能刻骨铭心,但求对人对己问心无愧,无怨无悔足矣。大千世界,与万千人中遇见,只是相识的 开始,只有彼此真心付出,以心交心,以情换情,相知相惜,才能相伴美好的一生,一路同行。 • 然而,生活不仅是诗和远方,更要面对现实。如果曾经的拥有,不能天长地久,那么就要学会华丽地转身,学会忘记。 忘记该忘记的人,忘记该忘记的事儿,忘记苦乐年华的悲喜交集。 • 人有悲欢离合,月有阴晴圆缺。对于离开的人,不必折磨自己脆弱的生命,虚度了美好的朝夕;不必让心灵痛苦不堪, 弄丢了快乐的自己。擦汗眼泪,告诉自己,日子还得继续,谁都不是谁的唯一,相信最美的风景一直在路上。 • 人生,就是一场修行。你路过我,我忘记你;你有情,他无意。谁都希望在正确的时间遇见对的人,然而事与愿违时, 你越渴望的东西,也许越是无情无义地弃你而去。所以美好的愿望,就会像肥皂泡一样破灭,只能在错误的时间遇到错的人。 • 岁月匆匆像一阵风,有多少故事留下感动。愿曾经的相遇,无论是锦上添花,还是追悔莫及;无论是青涩年华的懵懂赏 识,还是成长岁月无法躲避的经历……愿曾经的过往,依然如花芬芳四溢,永远无悔岁月赐予的美好相遇。 • 其实,人生之路的每一段相遇,都是一笔财富,尤其亲情、友情和爱情。在漫长的旅途上,他们都会丰富你的生命,使 你的生命更充实,更真实;丰盈你的内心,使你的内心更慈悲,更善良。所以生活的美好,缘于一颗善良的心,愿我们都能 善待自己和他人。 • 一路走来,愿相亲相爱的人,相濡以沫,同甘共苦,百年好合。愿有情有意的人,不离不弃,相惜相守,共度人生的每 一个朝夕……直到老得哪也去不了,依然是彼此手心里的宝,感恩一路有你!
梅毒螺旋体抗体明胶凝集试验测定梅毒特异性抗体室间质量评价结果分析
II全自动血凝仪。 表2 4。C保存条件下两种方法所得血浆 的凝血因子Ⅷ含量合格结果
1.2方法
(1)要求4℃保ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ的全血晚
上收集后置于4。C冰箱,要求22't12保存的 全血晚上收集后置于已预温的费森尤斯 Compoeooi铝制冷藏板上[Compoeool铝 制冷藏板放置在4。C冰箱预温至少12—
16
那么这些血浆能否也算为新鲜冰冻血 浆呢?笔者认为。这些血浆也应该算作 新鲜冰冻血浆.那么是否会有这样的血 浆呢?笔者设计了一个将全血分别放置 于4012及22℃条件下过夜保存直到次日 早上再将全血进行分离的方案,从表1 的结果可以得出22't;保存的全血次日 分离前摇匀所得血浆凝血因子Ⅷ含量 合格率87.1%(27/31)比分离前未摇匀 所得血浆凝血因子Ⅷ含量合格率40.O% (8/20)要高。同样从表2可以得出4℃
评价回执结果和我室结果比较例
本稀释液,第2—4孔每孔25乩。用微量 移液管取待测血清25乩加至第一孔
中,然后用微量加样器混匀后取25斗L 至第2孔,依次稀释至第4孔。此时第l 孔待测血清为1:5稀释.第2—4孑L分别 为l:10—1:40。用试剂盒中的专用滴 管(每滴25斗L)取未致敏的明胶颗粒1 滴加至第3孔,取致敏明胶颗粒l滴加
况下.每块冷藏板可以在3 h内将8袋全 血的温度控制在(20±2)℃并且维持大 约20 h]。三联袋的母袋面与冷藏板紧密 接触,每块冷藏板放置8袋全血。所有冷 藏板放置在治疗车上。(2)所有留存的全 血次日进行成分分离.一部分全血在分 离前充分摇匀,另外一部分全血在分离 前不摇匀。充分摇匀是指用双手水平持 3讨论 新鲜冰冻血浆是我国目前较常用的 一种血液成分。它的主要成分是含有全 部凝血因子,其中包括不稳定的V因子 和Ⅷ因子[81。另外.凝血因子Ⅷ是血友 病患者不足或缺乏的一种因子。对这种 患者的止血,凝血因子Ⅷ具有不可替代 的作用。因此研究新鲜冰冻血浆中不稳 作者单位:523930广东省东莞市中心
梅毒结果解释
梅毒结果解释梅毒血清学检测方法(1) 非梅毒螺旋体抗原血清学试验(非特异性梅毒抗体)(2) 梅毒螺旋体抗原血清学试验(特异性梅毒抗体)两类方法。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验原理梅毒螺旋体一旦感染人体,宿主可对螺旋体表面的脂质作出免疫应答,产生抗类脂抗原的抗体(非特异性抗体)。
未经治疗的病人,其血清内的非特异性抗体可长期存在。
经正规治疗后,非特异性抗体可以逐渐减少滴度至转为阴性。
方法包括:(1)快速血浆反应素环状卡片试验(RPR)(2)甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)(3)性病研究实验室试验(VDRL)等。
基本成分是心磷脂卵磷脂和胆固醇,抗原抗体结合形成复合物,凝集成网状沉淀颗粒被肉眼所见上述方法的敏感性和特异性都基本相似甲苯胺红不加热血清试验(TRUST)反应:将卡片置水平旋转仪上,转速:100±2 r/min,转幅2cm,旋转8分钟非梅毒螺旋体抗原血清试验临床意义早期梅毒(一期、二期)经正规治疗后3个月,TRUST抗体滴度可下降2个稀释度,6个月可下降4个稀释度。
一期梅毒一般约1年后可转为阴性,二期梅毒2年后可转为阴性。
存在一定的假阳性简单、快速、敏感性和特异性较好。
适用于大量人群的筛查。
治疗后血清滴度可下降并阴性定性试验可用于现症梅毒诊断。
定量试验可用于疗效观察和判愈。
非梅毒螺旋体抗原血清学试验特点假阳性反应技术性假阳性反应一般是由于操作错误引起的假阳性反应,经过重复试验即可排除。
生物学假阳性反应(一般滴度小于1:8),应采用梅毒螺旋体抗原血清学试验如TPPA等进行排除。
前带现象指非梅毒螺旋体抗原血清试验中,有时血清中存在高浓度的抗体时导致出现抗体浓度不匹配,出现弱阳性或阴性反应的结果。
初诊病人TPPA强阳性,而TRUST/RPR呈弱阳性或阴性结果,并且临床上符合梅毒症状。
将血清稀释后再进行试验,则出现阳性的结果。
有前带现象的病人在临床治疗中应注意“贾赫氏反应”。
耐血清性(血清固定)指经抗梅毒治疗后,非梅毒螺旋体抗原血清试验在一定时期内不阴转,而保持低滴度阳性(1:4以内)的反应。
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梅毒血清学检测结果解释
第一种结果:TRUST(十)、TP (一)或TPPA(一)
生物学假阳性。
假阳性结果常见于部分自身免疫性疾病患者:类风湿关节炎、系统性红斑狼疮、干燥综合征及风湿性心脏病等,还有麻风、吸毒(海洛因)成瘾者也会阳性、少数孕妇及老人也会出现阳性。
有报道急性或慢性疾病如病毒性肝炎、风疹、传染性单核细胞增多症病患者TRUST滴度可出现假阳性反应。
非梅毒病人,不报病。
第二结果:TRUST(十)、TP (十)或TPPA(十)
A,首诊病人,双阳,根据临床表现分别诊断为一期、二期、三期、隐性。
必须报病。
B、复诊病人,TRUST低滴度,考虑血清固定,不用治疗,不用报病。
TRUST高滴度(高于原滴度四倍),考虑复发,再次治疗,不用报病。
C、复诊病人,有一期或二期梅毒临床表现,结合近期有不洁性接触史,要考虑重复感染。
再次治疗,必须报病。
第三种结果:TRUST(一)、TP (十)或TPPA(十)
A、早期梅毒病人。
有硬下疳症状,有不洁性接触史,梅毒螺旋体暗视野检查阳性,梅毒可以诊断,必须报病。
B、复诊病人。
梅毒病人TP、TPPA终生阳性,不用治疗,不报病。
C、初诊病人。
无任何临床症状和体征,既往无梅毒诊疗史,仅TP、TPPA阳性,TRUST阴性者,该病例暂不报病,需要在1~3 个月后随访复查,如果TRUST转阳则要报病(如果随访病例仍然无任何症状和体征,报告为隐性梅毒确诊病例;如果出现临床表现,按临床表现特征对梅毒病例进行分期报告)。
如果仍为阴性不报病。
建议预防性、规范性治疗。
D、前带现象。
首诊病人,非梅毒螺旋体特异性试验(TRUST)中,有时血清中存在高浓度的抗体时出现的弱阳性或阴性反应结果,而临床上又像二期梅毒,此时,将血清稀释后再进行试验,出现了阳性结果,该现象称之为"前带现象"。
原因是此血清中抗体的量多于抗原,使抗原抗体量的比例不合适,抑制了阳性反应的出现。
第四种结果:TRUST(一)、TP (一)或TPPA(一)
不是梅毒病人,不报病。