产品无菌方法验证

产品无菌方法验证

一、概述

1、简介

无菌检查法是指检查无菌药品、医疗器械等是否无菌的一种方法。无菌检查是在洁净度百级的单向流空气区域内进行，其全过程严格遵守无菌操作，防止微生物污染。本验证方案参考《中华人民共和国药典2010版二部》附录无菌检查法和GB/T19973.2-2005/ISO 11737-2:1998 医疗器械的灭菌微生物学方法第二部分：确认灭菌过程的无菌试验。二、验证目的

通过对无菌方法的培养基适用性检查、无菌检查方法的适用性检查，并且结果符合规定，证明培养基的适用性以及无菌检验方法的适用性，以达到用适合的方法对样品进行无菌检查的目的。

三、范围

本验证方案适用于X公司医疗器械无菌检查方法。本文件规定了无菌验证的程序、方法、标准和记录。

四、验证参考文件

五、验证人员及职责

1质量部QC：负责验证计划、方案起草、按监控计划执行，做好检验工作，并进行记录，出具报告。

2质量部：质量部经理负责验证方案的审核、记录的审核和报告的审核。按文件管理要求，作好验证方案文件的控制工作。

六、验证内容

1、验证试验项目

1.1 培养基的的适用性检查。

1.2方法适用性检查

2、验证实施步骤

2.1 所用培养基

胆盐硫乙醇酸盐流体培养基

改良马丁培养基

2.2 培养基的配制

硫乙醇酸盐流体培养基：称取硫乙醇酸盐流体培养29.3g，加入蒸馏水或去离子水1L，煮沸至完全溶解，分装试管，121℃灭菌15min。

改良马丁：称取改良马丁28.5g加入蒸馏水或去离子水1L，搅拌加热至完全溶解，分装试管，121℃灭菌30min。

2.3 菌悬液配制

所用菌种：金黄色葡萄球菌CMCC(B)26003 铜绿假单胞菌CMCC(B)10104 枯草芽孢杆菌CMCC(B)63501 生孢梭菌CMCC(B)64941

白色念珠菌CMCC(F)98001 黑曲霉CMCC(F)98003 用无菌生理盐水将所用菌种稀释至30-100CFU/ml（2～8℃保存24h内使用）。

2.3 检验方法以及培养条件的选择

依据产品特点和标准推荐，优先选用直接浸泡于生长培养基（硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基）中，然后硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基分别在23～28℃和30～35℃培养14天，逐日观察，并记录结果。

2.4 培养基的适用性检查

2.4.1 培养基的无菌检查

硫乙醇酸盐流体培养基和改良马丁培养基分别取5支，培养14天，应无菌生长。2.4.2 灵敏度检查

2.4.2.1 接种

取每管装量12ml的硫乙醇酸盐流体培养基9支，分别接种小于100CFU的金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2支，另一支不接种作空白对照,培养3天；取每管装量9ml的改良马丁培养基5管，分别接种白色念珠菌、黑曲霉2支，另一支不接种作空白对照，培养5天。逐日观察结果。

2.4.2.2 结果判断

空白对照管应无菌生长，加菌的培养基管均生长良好，判该培养基的灵敏度检查符合规定。

2.5 无菌方法适用性检查

2.5.1 接种

取装量为25ml的硫乙醇酸盐流体培养基8管，分别接入小于100cfu的金黄的葡萄球

菌、大肠埃希菌、枯草芽孢杆菌、生孢梭菌各2管；取装量为25ml的改良马丁培养基4管，分别接入小于100cfu的白色念珠菌、黑曲霉各2管。其中一支加入一个单位的样品，另一支作对照，置同培养基适用性检查培养条件相同的条件培养3～5天。

2.5.2 结果判断

与对照管比较，含样品的各管试验菌均生长良好，则可以按照此检验方法和检验条件进行供试品检查。

注：方法验证试验也可以与样品的无菌检查同时进行。

3、验证记录

3.1 培养基适用性检查记录

3.2 无菌检查方法适用性检查记录

七、验证结论

验证结果符合标准规定，则本检验方法（直接浸泡法）和检验条件适合本公司产品的无菌检查。

报告人：日期：审核人：日期：