BHK细胞培养小结
细胞培养毕业实习报告总结
毕业实习报告总结：细胞培养首先，我要感谢我的导师和实验室的同事们，他们在我的实习期间给予了我无私的帮助和指导。
通过这次实习，我对细胞培养这一领域有了更深入的了解，也积累了宝贵的实践经验。
细胞培养是生物医学和生物技术领域中重要的实验技术，它通过模拟细胞在体内的生长环境，使细胞在体外继续生长和繁殖。
在实习期间，我学习了细胞培养的基本原理和操作技术，包括细胞的复苏、传代、胰蛋白酶消化、细胞计数、铺板等步骤。
我也了解了细胞培养中常用的仪器设备，如二氧化碳培养箱、显微镜、细胞计数仪等。
在实习过程中，我不仅掌握了细胞培养的基本技能，还参与了一些具体的实验项目。
我参与了一项关于细胞凋亡的研究，通过细胞培养技术，我成功地培养了所需细胞，并进行了凋亡实验。
通过观察细胞形态的变化和流式细胞术的分析，我得出了实验结果，并协助导师进行了数据分析和论文撰写。
这个过程中，我不仅学习了实验设计和数据分析的方法，还提高了自己的实验操作能力。
在实习期间，我也遇到了一些挑战和困难。
例如，细胞培养过程中细胞的生长速度较慢，有时需要耐心等待。
另外，细胞的复苏和传代过程中，也有一些技巧需要掌握。
通过请教导师和同事，我逐渐克服了这些困难，并取得了较好的实验结果。
通过这次实习，我不仅学到了专业知识和技能，还锻炼了自己的团队合作和沟通能力。
在实验室中，我与同事们共同合作，互相学习和帮助。
我们也定期进行实验室会议，分享实验进展和心得体会，这让我感受到了团队合作的重要性。
总之，这次细胞培养实习是一次非常宝贵的学习经历。
我不仅掌握了细胞培养的基本技能，还参与了一些具体的实验项目，并取得了较好的研究成果。
同时，我也学会了团队合作和沟通的能力。
我相信这次实习对我未来的学术研究和职业发展将产生积极的影响。
细胞分子生物学实验训练小结
细胞分子生物学实验训练小结本次细胞分子生物学实验训练的目标是加深对细胞和分子生物学的理解，并提高实验技能。
以下是我对此次实验训练的总结：实验1：细胞培养和细胞计数在本实验中，我们研究了细胞培养的基本技术和细胞计数的方法。
通过观察细胞的生长情况和计数细胞的数量，我们能够评估细胞的健康状态和增殖能力。
同时，我们也了解了如何使用显微镜观察细胞的形态特征，并掌握了准确计数细胞的技巧。
实验2：DNA提取和PCR扩增本实验旨在了解DNA提取的步骤和PCR扩增的原理。
通过提取细胞中的DNA，并使用PCR技术扩增目标基因片段，我们能够获取足够数量的DNA样本进行后续分析。
在这个过程中，我们学会了如何使用蛋白酶K和酒精沉淀法提取DNA，以及设置PCR反应体系和调节PCR条件进行DNA扩增。
实验3：凝胶电泳与基因分析在这个实验中，我们研究了凝胶电泳的原理和应用，以及DNA分析的方法。
通过将PCR扩增后的DNA样本加载到琼脂糖凝胶上，我们可以根据DNA片段的大小进行分离和分析。
我们学会了准备琼脂糖凝胶和加载DNA样本，并通过电泳分离和可视化DNA条带来判断PCR扩增是否成功。
实验4：细胞转染和荧光显微镜观察本实验的目标是研究细胞转染的原理和应用，以及荧光显微镜的使用。
通过将外源基因导入细胞中，并观察转染细胞的荧光信号，我们可以研究基因在细胞中的表达及功能。
在这个实验中，我们掌握了细胞转染技术，学会了荧光染料的使用和荧光显微镜的操作。
结论通过本次细胞分子生物学实验训练，我们不仅加深了对细胞和分子生物学的理解，还提高了实验技能。
我们学会了细胞培养和计数、DNA提取和PCR扩增、凝胶电泳与基因分析、以及细胞转染和荧光显微镜观察等技术。
这些技能将为我们今后的研究工作和研究提供坚实的基础。
希望通过不断积累实验经验，我们能够不断提升自己在细胞分子生物学领域的能力，为科学研究做出更大的贡献。
*以上为细胞分子生物学实验训练小结。
*。
细胞培养实验总结总结
细胞培养实验总结引言细胞培养是现代生物学研究中常用的实验技术之一，它可以模拟体内环境，为研究细胞的生理生化过程提供便利。
本文对进行的细胞培养实验进行总结，包括实验目的、实验步骤、实验结果及讨论等内容。
实验目的本次实验的主要目的是通过细胞培养技术培养和观察细胞生长情况，了解细胞培养过程中的操作步骤和注意事项。
同时，通过添加不同培养基成分，探究对细胞生长和分化的影响。
实验步骤1.准备实验器材和培养基：将所需的培养基放置在无菌工作台上，同时清洗好所有需要使用的培养器皿和器械，保持无菌状态。
2.细胞传代：将上一代培养的细胞用无菌吸管吸取，移至新的培养器皿中，加入新鲜准备好的培养基。
细胞传代的目的是保持细胞的生长状态和纯度。
3.细胞观察：将培养器皿放置在显微镜下，使用适当倍率进行观察。
检查细胞的生长状况和细胞数量是否符合预期。
4.添加培养基成分：根据实验设计，可以在相应的培养器皿中加入不同的培养基成分，例如细胞分化因子、抗生素等。
目的是观察添加不同成分后细胞的生长和分化变化。
5.细胞采集：当细胞达到一定的生长密度时，可以进行细胞采集。
用无菌吸管吸出细胞悬液，将其置于离心管中，并进行离心处理，获取细胞沉淀。
6.分析实验结果：对培养的细胞进行计数、生长速率分析等统计，观察实验结果是否符合预期。
实验结果根据实验步骤和操作要求，我们成功地进行了细胞培养实验，并获得了一系列实验结果。
首先，观察到细胞在培养基中显示出良好的生长状态。
细胞数量逐渐增多，呈现典型的细胞周期。
观察到细胞的形态变化，细胞逐渐变大，细胞贴壁生长良好。
这说明培养基的成分和培养条件对细胞的生长具有重要影响。
其次，实验中添加了不同的培养基成分，包括细胞分化因子和抗生素。
观察到加入细胞分化因子后，部分细胞呈现出明显的分化现象，形成不同的细胞类型。
而加入抗生素后，观察到细胞数量减少，并且呈现出不同程度的细胞死亡。
这说明细胞分化和细胞存活受到培养基成分的影响。
新型微载体培养系统中BHK-21细胞的生长特性研究
［ １ ３ ］ Ｈａ ｒ ｅ ｎ ｄ ｒ ａ Ｇ Ｇ，Ｊ ａ ｙ ａ ｓ ｅ ｋ ａ ｒ ａ Ｒ Ｗ ，Ｄｉ ｓ ｓ ａ ｎ ａ ｙ ａ ｋ ｅ Ｖ Ｈ．Ｈａ ｐ ｌ ｏ —
ｔ ｙ ｐ ｅ ｓ ｏ ｆ ｈｅ ｐ ａ ｒ ｉ ｎ — － ｂ ｉ ｎ ｄ ｉ ｎ ｇ ｅ ｐ ｉ ｄ ｅ ｒ ｍａ ｌ — － ｇ ｒ ｏ ｗｔ ｈ — － ｆ ａ ｃ ｔ ｏ ｒ － ｌ ｉ ｋ ｅ ｇ ｒ ｏ ｗｔ ｈ
ｔ ｅ ｒ ｎ ａ ｔ ｉ ｖ ｅ ｓ ｐ ｌ ｉ ｃ ｅ ｄ ｆ ｏ ｒ ｍｓ ［ Ｊ ］ ．Ｅ ＭＢ Ｏ Ｊ ， １ ９ ９ ５ ，１ ４ （ ２ ） ： ３ ４ １ — ３ ５ ０ ． ［ １ ５ ］ 许发美 ， 邢 海 燕 ，田 征 ，等 ．ＡＭＬ ｌ ａ在 小 鼠 造 血 细 胞 增 殖
养， 为以 Ｂ ＨＫ一 ２ １细胞 为生产 基质 的病毒 疫苗 生产提供 了一 条 简便 快捷 的途径 。
关键 词 ： 生物反 应 器； 微 载体 ； Ｂ ＨＫ 一 ２ １细胞
中 图分 类 号 ： Ｑ８ １ ３ ． １ １ 文献标识码 ： Ａ 文章 编 号 ： １ ０ ０ ７ — ５ ０ ３ ８ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ — ０ ０ ３ ２ — ０ ５
型， 分发酵 式 培养 和 微 载体 式 培 养 。动 物 细胞 以贴 壁 细胞 为主 ， 因此 微 载体 培 养 式生 物 反 应 器 在病 毒 疫 苗制备 应用更 为广 泛 。微 载体 培养 式生 物反 应器 又分搅拌 式和 固定床 式生物 反应器 ， Ｂ ｅ ｌ ｌ Ｃ ｅ ｌ ｌ 是 美 国
目前 我 国兽 医 生物 制 品 生产 过程 中 ， 细 胞 培 养 设 备相对 比较 落后 ， 大多是 在转 瓶 内旋转 贴 壁培 养 ，
BHK-21传代细胞培养
BHK-21传代细胞培养BHK是仓鼠肾细胞[原理]细胞在培养瓶壁上长成致密单层后，已基本上饱和，为使细胞能继续生长，同时也将细胞数量扩大，就必须进行传代（再培养）。
传代培养也是一种将细胞种保存下去的方法。
同时也是利用培养细胞进行各种实验的必经过程。
[材料和试剂]1、细胞：贴壁BHK-21细胞株2、试剂：0.25％胰蛋白酶、配制好的DMEM培养液、小牛血清、双抗溶液、7.5%碳酸氢钠3、仪器和器材：倒置显微镜，培养箱、培养瓶、胶塞、量筒、注射器、针头、酒精灯、污物缸等[操作步骤]1、应需要计算好培养液的总用量，按10%的比例加入血清，按1%的比例加入双抗。
用7.5%的碳酸氢钠调PH至7.0~7.2左右。
2、将长满细胞的培养瓶中原来的培养液弃去。
3、加入0.25％胰酶溶液，使瓶底细胞都浸入溶液中为宜。
4、瓶口塞好胶塞，平放在实验台上。
约2~3分钟会看到贴壁细胞层出现细针孔空隙，赶紧将胰酶弃去，加入少量培养液终止消化。
5、用注射器将贴壁的细胞反复吹打，使其均匀分散成悬液，再加入足量的培养液，分成两到三瓶。
塞好胶塞，置37℃温箱中继续培养。
细胞培养常用溶液的配制一、青、链霉素溶液青霉素钠盐(80万IU／瓶) 5瓶链霉素(100万IU／瓶) 4瓶将两者溶于400ml0.9％的无菌生理盐水，分装小瓶，-20℃保存。
双抗在培养基中的终浓度为100IU/ml为宜。
二、7.5%碳酸氢钠溶液的配制称取碳酸氢钠7.5g，加入超纯水使总体积为100ml。
高压灭菌，分装于小瓶中，4℃贮存。
三、1%酚红溶液的配制首先配制1mol/L的NaOH溶液。
称取NaOH4.0g，加入100ml超纯水，使NaOH 完全溶解，在室温或4℃贮存（最好现用现配）。
配制好NaOH溶液后，再称取1.0 g 酚红置研钵中，加1mol/L的NaOH（不多于7.0ml），研磨使酚红完全溶解，加超纯水至100ml，高压消毒，在室温或4℃贮存。
四、0.25%胰蛋白酶溶液的配制氯化钠8.0g氯化钾0.2g柠檬酸钠(Na3C6H5O7•5H2O) 1.12g磷酸二氢钠(NaH2PO4•2H2O) 0.056g碳酸氢钠 1.0g葡萄糖 1.0g胰蛋白酶（1：250） 2.5g超纯水加至1000ml放4℃冰箱过夜，待胰蛋白酶充分溶解后，用0.2um微孔滤膜过滤除菌，分装于小瓶中，-20℃保存。
bhk细胞培养小结
BHK 细胞培养小结报告人：1、细胞培养（1）培养基： DMEM 培养基+10%无支原体新生牛血清 +100U/ml 青/链霉素（2）细胞传代：细胞长满瓶壁 90%-95% 时，将上清倒掉，用 D-Hanks 液洗 2-3 遍细胞，加 1ml0.25% 胰酶 37℃温箱消化 3-5 分钟后，加入 3ml 培养基将细胞吹下来，转移至 15ml 离心管， 1000 转离心 5 分钟，倒掉上清，加入 3ml 新鲜培养基重悬细胞，将细胞吹打均匀后按 1：2 或 1：3 的比例接种于新的培养瓶中，加入 5ml 新鲜培养基，放入培养箱培养。
2、细胞冻存及复苏（1）细胞冻存液： 90%无支原体新生牛血清 +10%DMSO（2）细胞冻存方法：细胞长满瓶壁90% 后，细胞消化离心，弃上清，加入配制好的冻存培养液（含10%DMSO），重悬细胞，或者用细胞计数板计数细胞浓度，将细胞浓度调至 106 个/m l，将细胞转移至冻存管，每管1ml，用棉花包住冻存管放入-80℃冰箱，2 天后将冻存管放入液氮冻存。
（3）细胞复苏：先准备一支15ml 离心管，加入 5-8ml 新鲜培养基，再从液氮取出细胞后立刻放入37-40 ℃水浴，在 1min 内融化，然后将细胞转移至装有培养基的离心管，1000 转离心 5 分钟，倒掉上清，加入 2m l 新鲜培养基重悬，再转移到 1 个新的培养瓶中，加入 4ml 新鲜培养基放入培养箱培养， 1 天后细胞贴壁，换液。
3、注意事项（1）如果细胞生长太慢可选用含20% 无支原体血清的DMEM 培养基培养，可加快细胞生长；（2）细胞传代时必须先离心后再重悬，如果不离心直接吹打后传代细胞不能吹打成单个细胞悬液，传代细胞成堆生长，影响细胞状态；（3）细胞传代时不能传得太稀，如果传代时细胞浓度太低的细胞生长速度会很慢，而且细胞容易成堆生长；（4）胰酶在使用前最好预热到 37 度。
由于胰酶平时保存在 4 度，反复预热对胰酶的活性不好，可以将胰酶进行分装，尽可能避免胰酶反复冷却加热；（5）BHK 还是比较好消化的， 2-3min 应该足够了，消化时间太长对细胞不利。
细胞培养实验员工作总结
细胞培养实验员工作总结作为一名细胞培养实验员，我深知这项工作的重要性和复杂性。
在过去的一段时间里，我积累了丰富的经验，也遇到了不少挑战。
在这篇文章中，我将分享我的工作总结，希望能够对同行们有所帮助。
首先，作为细胞培养实验员，我们的工作主要是负责细胞培养和细胞实验。
这包括细胞的分离、培养、传代、冻存等工作。
在这个过程中，我们需要严格控制实验条件，确保细胞的生长环境和培养条件符合要求。
同时，我们还需要进行细胞实验，包括细胞凋亡、增殖、迁移等实验，以评估细胞的生理功能和药物反应等。
在工作中，我发现最重要的是细心和耐心。
细胞培养是一个细致而繁琐的过程，需要耐心和细心的操作。
任何一个细节的疏忽都可能导致实验失败。
因此，我在工作中始终保持高度的注意力和细致的操作，以确保实验的准确性和可靠性。
另外，团队合作也是非常重要的。
在实验室工作中，我们需要和同事们密切合作，共同完成实验任务。
在这个过程中，我学会了与他人良好沟通，团结协作，共同解决实验中的问题。
团队合作不仅提高了工作效率，也促进了团队的凝聚力和成员之间的友好关系。
此外，不断学习和提高自身的专业能力也是非常重要的。
细胞培养是一个不断发展和变化的领域，新的技术和方法层出不穷。
作为一名细胞培养实验员，我始终保持学习的态度，不断学习新的知识和技术，提高自己的专业能力。
总的来说，作为一名细胞培养实验员，我深知这项工作的重要性和挑战性。
在工作中，我始终保持细心和耐心，与同事们团结合作，不断学习和提高自身的专业能力。
我相信，在未来的工作中，我将继续努力，不断提高自己的细胞培养技术，为科学研究和医学发展贡献自己的力量。
微载体培养BHK-21细胞生产狂犬病毒Flury株的研究
现代畜牧兽医2018年第9期刘艳霞：微载体培养BHK-21细胞生产狂犬病毒Flury株的研究狂犬病（Rabies）是由狂犬病毒感染引起的一种致死性、人兽共患的传染病，表现为急性、进行性、几乎不可逆转的脑脊髓炎，临床表现恐水、怕风、兴奋、咽肌痉挛、流涎、进行性瘫痪等症状，最后因呼吸、循环衰竭而死亡[1]。
犬狂犬病在80多个国家和地区广泛分布，主要是发展中国家。
99%以上的人狂犬病病例的病毒都来自于犬[2]。
通过大幅度提高犬的免疫覆盖率，在控制了犬狂犬病流行的同时也使人狂犬病的发病率显著降低[3-4]。
狂犬病弱毒活疫苗的安全性一直令人担忧[5]，2017年7月1日，农业部发布第2514号公告，停止生产使用狂犬病活疫苗（包括多联活疫苗）。
目前国内市场上兽用狂犬病灭活疫苗毒株主要为FluryLEP株、Flury株、PV206株、CVS-11株、CNT-1株、SAD株、dG株、PV/BHK-21株，其中绝大多数采用传统的转瓶培养工艺进行生产。
高滴度的抗原液是疫苗生产中非常重要的一微载体培养BHK-21细胞生产狂犬病毒Flury株的研究刘艳霞（辽宁益康生物股份有限公司，辽宁辽阳111000）摘要：本文主要研究了利用生物反应器Tide-Cell微载体培养的BHK-21细胞生产狂犬病毒Flury株工艺。
总数为1×1010个BHK-21细胞接入装有500g BioNOCTMⅡ型载体的Tide-Cell培养系统，最适条件下培养120h。
当细胞培养系统中葡萄糖消耗量达到8g/（L·h）左右，细胞数达到4×1011时，按照MOI为1接入Flury株病毒。
一批至少可以收获10次（50L/次）毒价高于107.5TCID50/mL的抗原液，其中包含5次毒价为108.0TCID50/mL 的抗原液。
提高抗原液病毒含量有助于提升狂犬病灭活疫苗效价，从而降低生产成本。
关键词：微载体；BHK-21细胞；狂犬病毒；Flury株中图分类号：S852.65文献标识码：B文章编号：1672-9692(2018)09-0006-04 Production of Flury Strain of Rabies Virus by MicrocarrierCulture of BHK-21CellsLiu Yanxia(Liaoning Yikang Blological Corporation Limited,Liaoning Liaoyang111000)Abstract:In this paper,we studied the process of BHK-21cells cultured in Tide-Cell bioreac‐tor filled microcarrier manufacture rabies virus Flury strain.1×1010BHK-21cells were seeded to bioreactor cell culture system(CCS)bioreactor equipped with500g BioNOCTMⅡvector and cultured optimum parameters.Flury virus(MOI=1)were seeded with8g/L·h glucose consumption and4×1011 total cells in cell culture system after120h.Every time would have harvest50L antivirus so‐lution(TCID50>107.5/mL)and10times for each batch,including antivirus solution TCID50about108.0/mL for5times.Increase the virus content of the antivirus solution help to improve the efficacy of rabies inactivated vaccine,it contribute toreduce production cost.key words:Microcarrier;BHK-21cells;Rabies virus;Flury strain收稿日期：2018-07-27作者简介：刘艳霞（1981-09），女，黑龙江省齐齐哈尔人，本科，兽医师，主要从事兽用生物制品研发工作。
生物科学实训课程学习总结细胞培养与分子生物学实验的实践掌握
生物科学实训课程学习总结细胞培养与分子生物学实验的实践掌握在生物科学实践课程中，我学习了细胞培养与分子生物学实验的理论知识，并进行了实际操作。
通过这门课程的学习，我对细胞培养和分子生物学实验的基本原理和技术手段有了更深入的了解，同时也掌握了一些操作技巧和实验设计的方法。
下面是我对这门课程的学习总结。
一、细胞培养的学习与实践细胞培养是生物科学研究中重要的实验手段，通过对细胞的培养和观察，我们可以了解细胞的结构和功能特点。
在课程的学习中，我了解了细胞培养的基本原理，包括培养基的配制、细胞的传代和观察等。
通过实际操作，我掌握了培养箱的使用方法和无菌操作的技巧。
在细胞培养实验中，我成功培养了多种细胞系并观察了它们的生长状态。
通过细胞培养的实践，我了解了不同细胞系的特点和要求，并学会了如何选择适当的培养条件。
同时，我也注意到了细胞培养中可能出现的问题，如细胞感染、污染等，并学会了相应的解决方法。
二、分子生物学实验的学习与实践分子生物学是研究生物分子结构和功能的科学领域，它是现代生物学研究的基础和重要手段。
在课程中，我学习了基本的分子生物学实验方法，包括DNA的提取、PCR扩增、凝胶电泳等。
在实验中，我充分运用了分子生物学实验技术，成功进行了DNA提取和PCR扩增实验。
通过这些实验，我对分子生物学实验的操作流程和数据分析有了更具体的了解。
同时，我也了解到了实验中可能出现的问题，如PCR反应体系的优化、杂交实验的条件优化等，并熟悉了解决这些问题的方法。
三、学习总结与感悟通过这门课程的学习，我对生物科学实验的基本原理和技术手段有了更清晰的认识，并通过实际操作掌握了一些实验技巧和解决问题的方法。
在实验过程中，我不仅提高了自己的动手实验能力，还培养了观察和分析问题的能力。
这门课程的学习让我更深入地了解了生物科学领域的一些基础实验技术，为日后的学习和科研打下了坚实的基础。
总之，通过对细胞培养和分子生物学实验的学习，我不仅掌握了相关的理论知识，还培养了实际操作的能力。
细胞培养员工作总结范文
细胞培养员工作总结范文
细胞培养员工作总结。
作为一名细胞培养员，我深知这项工作的重要性和挑战。
在过去的一年里，我
不断学习和成长，积累了丰富的经验，也遇到了许多困难和挑战。
在这篇文章中，我将总结一下自己在细胞培养工作中的经验和体会。
首先，作为一名细胞培养员，我需要具备扎实的细胞生物学知识和技能。
我不
仅要了解细胞的生长和分裂规律，还要熟悉细胞培养的操作流程和注意事项。
在工作中，我时刻保持对细胞状态的关注，及时调整培养条件，确保细胞的健康生长。
其次，细胞培养工作需要高度的耐心和细心。
在培养细胞的过程中，我经常需
要进行细致的操作，比如更换培养基、观察细胞形态等。
这些工作需要我时刻保持专注，不能有丝毫马虎。
同时，我也需要有耐心，因为细胞培养是一个需要长时间的过程，不能急于求成。
另外，细胞培养工作还需要具备良好的团队合作能力。
在实验室中，我经常需
要与其他同事合作，共同完成实验任务。
我们需要相互配合，互相帮助，确保实验的顺利进行。
同时，我也要和上级领导保持良好的沟通，及时汇报工作进展和遇到的问题。
总的来说，细胞培养员是一项需要综合能力的工作，需要具备扎实的专业知识、耐心细心的工作态度，以及良好的团队合作能力。
在今后的工作中，我将继续努力学习，不断提升自己的细胞培养技能，为科研工作做出更大的贡献。
浅谈建立生产用BHK-21种细胞库的措施
为劣药。
② 粉针剂。主要是青霉素 、 链霉素等抗生素药品。 正常的粉
书。标签或说 明书上必须有注册 商标 、 兽药名称 、 规格 、 企业名 重 、 潮解或液化以及变色的 ， 说明药品已变质。 称 、 品批号和批准文号 、 产 主要成份 、 含量 、 作用 、 用途 、 用法 、 用
Ｉ ‘ ．止 Ｉ ‘ Ｌ 』 Ｌ ５ Ｉ Ｉ Ｌ Ｌ ＬＩ ‘ ｊＩ － Ｌ Ｌ 舢 ． Ｌ． 吐 ＳＩ ｓ Ｓ ．
ａ澄明度检查。水针剂除特殊 品种有规定外应均匀 、 明。 ． 澄
（ 查兽药名称。兽药名称包括法定名称（ ４ ） 国家标准、 专业标 准、 地方标准中收载的兽药名称） 和商品名， 兽药法定名称不得作
为商标注册。兽药产品标签、 说明书、 外包装必须印制兽药产品 若 出现浑浊 、 沉淀、 絮状物或其它可见异物等 ， 明药品已变质 。 说
库不仅能避免这种影响， 而且不会使前期传代工作白废。 生产中 液氮。迅速溶化可防止损害细胞， 故复苏时， 对取出的冷冻管须
种细胞应每隔 ５ ７ — 代进行冻存一次。
２４保持相对稳定的培养条件 ．
立即放入 ３ ℃水浴速溶， ７ 轻摇冷冻管使其在 １ ２ ｉ大部分融 ～ ｎ ｍ
化， 需残留一小块冰块。
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围 技一 禽 学 轱占
秀殖户如何瑰场ｉｇ 假 兽药 Ｐｌ ，
细胞培养大总结范文
细胞培养大总结范文细胞培养是一种在体外条件下培育和繁殖细胞的技术，它已成为生物学、医学和药物研发的重要工具。
通过细胞培养，研究人员可以对细胞的生理活动、生长和分化等过程进行研究。
在本文中，我们将对细胞培养的步骤、技术和应用进行总结。
细胞培养的步骤主要包括：细胞准备、培养液制备、细胞种植、培养和观察。
首先，研究人员从动物或植物组织中获得细胞样本，并通过离心等方法将细胞分离出来。
然后，培养基是细胞培养中必不可少的组成部分，它提供了细胞所需的营养物质和环境因子。
接下来，将细胞种植在预先准备好的培养皿或培养瓶中，在适当的温度和湿度条件下进行培养。
在培养的过程中，需要定期更换培养基，以保持细胞的正常生长和代谢。
最后，通过显微镜或其他方法对细胞进行观察和分析。
细胞培养中使用的培养基通常包括营养基、生长因子、抗生素和血清。
营养基是培养基中提供能量和物质的主要成分，常见的营养基有DMEM、RPMI-1640和MEM等。
生长因子是指能促进细胞增殖和分化的蛋白质，例如表皮生长因子（EGF）和基本纤维生长因子（bFGF）。
抗生素的添加有助于防止细菌和真菌的污染。
血清是一种重要的培养基补充物，其中含有细胞黏附蛋白、生长因子和其他生物活性物质。
细胞培养的技术包括原代培养、细胞系培养和细胞凋亡检测。
原代培养是从组织中直接分离的细胞进行的短期培养，通常使用酶消化的方法分离细胞，并将其种植在培养皿中。
细胞系培养是指长期培养和传代的细胞，如HEK293和HeLa细胞系。
细胞系培养可以提供大量的细胞用于实验和研究。
细胞凋亡是一种程序性细胞死亡，通过检测DNA片段化和细胞膜外翻等指标可以判断细胞是否发生凋亡。
细胞培养在多个领域中得到了广泛的应用。
在基础研究中，细胞培养可以用于探索细胞生理学、分子生物学和免疫学等领域。
研究人员可以通过调节培养条件和添加适当的生长因子来模拟体内环境，研究细胞的生长、分化和转化等过程。
在药物研发中，细胞培养可以用于药物筛选和毒理学研究。
悬浮培养型bhk-21细胞生长特性 及成瘤性研究
２１ 细 胞 系 易 悬 浮 培 养 １４ １５ ,其 适 宜 大 规 模 培 养 １６ ．但 细 胞
成瘤性是限制细胞生产应用的主要因素之一 ．
细胞的成瘤性是指将完整的活细胞注入裸鼠、仓鼠或新生小鼠中能形成进行性肿瘤的过程 ．作为疫
苗生产的细胞基质,
BHKＧ
２１ 悬浮细胞成瘤性一直备受关注 ．驯化的悬浮培养型 BHKＧ
２１ 细胞、阳性细胞组(
He
l
a)和阴性细 胞 组 (
KMB１７)(
P ＞０．
０５),裸 鼠 成 瘤 体 积 增 长 率 均 高 于 其 他 三 组 (
P＜
０
０５)．结论:驯化的悬浮培养型 BHKＧ
２１ 细胞能显著提高细胞密度,其成瘤性方面还需进一步改善 ．
[关键词] 驯化后悬浮培养型 BHKＧ
２１ 细胞;贴壁培养型 BHKＧ
第 40 卷总第 116 期
2019 年 12 月
西 北 民 族 大 学 学 报
（ 自 然 科 学 版 ）
Ｊournal of Northwest Minzu University （Natural Science）
Vol.40,No.4
Dec ，2019
悬浮培养型 BHKＧ
２１ 细胞生长
[中图分类号]Q８１３．
１ [文献标识码] A [文章编号]１００９
Ｇ
２１０２(
２０１９)
０４
Ｇ
００５３
Ｇ
０７
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幼年叙利亚仓鼠肾细胞(
Baby Hams
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BHKＧ
２１)由 Ma
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BHK-21细胞生物反应器悬浮培养参数研究
动物细胞培养在生物技术和生物医药研究中已得到了广泛的应用。
近几十年来，随着生物工程和组织工程学的发展，相应的生物反应器水平也在不断提高，现已研制出多种不同用途、型号的动物细胞生物反应器，其性能也日趋完善[1-3]，种类越来越多，规模越来越大，在国外，已放大到5000～10000L [4]。
悬浮培养技术最大优势是通过更为精确有效的工艺控制手段，在获得最大产量的同时能稳步提高产品的质量[5]。
由于动物细胞在悬浮培养过程中对培养基和培养条件要求很高，不易达到最佳生长状态，故本研究对生物反应器悬浮培养BHK-21细胞的培养条件进行了研究，以期使BHK-21细胞达到最佳生长状态，为后续规模化生产提供参考。
1材料和方法1.1实验材料BHK-21细胞，新生牛血清（四季青），DMEM（GBICO ），NaHCO 3，消泡剂。
1.2仪器设备BC-7L 生物反应器，为广州齐志生物工程设备有限公司产品。
1.3实验方法1.3.1BHK-21悬浮细胞制备取BHK-21贴壁细胞种进行复苏，待细胞长满单层并生长状态良好时，用0.25%胰酶消化，之后用移液管轻轻吹打成单个细胞悬浮液，以0.5×106个/mL 的密度接种300～1000mL 摇瓶中，于90r/min 恒温摇床培养。
连续培养5代后，进行上罐培养。
1.3.2血清含量对悬浮细胞培养的影响将摇瓶BHK-21细胞以0.5×106个/mL 的密度接种至5生物反应器中进行培养，培养过程中血清含量分别调整2%、5%、10%三个浓度进行培养，培养过程中对各浓度细胞取样计细胞数并观察细胞形态。
1.3.3培养液pH 对悬浮细胞培养的影响在保持其BHK-21细胞生物反应器悬浮培养参数研究路明华，刘俊生，刘延亭，张希娟，王忠辉，张二磊，侯艳红（北京中联康生物科技有限公司北京100085）摘要：使用国产BC-7L 生物反应器对BHK-21细胞悬浮培养参数进行了初步研究。
BHK细胞培养技术
BHK-21（幼仓鼠肾传代细胞）一、细胞复苏：1、从液氮罐取出一支装有BHK-21的细胞冻存管，用镊子立刻将冻存管置于37℃水浴箱中融解，将冻存管盖口以下面积浸入水中，不时摇动冻存管加速融化，直至管内冰块融化，约1~2min。
2、将融化后的冻存管放入超净台中。
取出一支15ml离心管，加入6ml DMEM(低糖培养液)，用1000µl移液枪移取全部冻存管内细胞液至离心管中，盖上离心管盖，轻轻上下颠倒混匀后离心（800r/min，5min）。
3、用移液枪将液面气泡吸走，倒去上清液。
4、加入2ml生长液（10% FBS(胎牛血清)，89% DMEM，1% 双抗（青霉素+链霉素）），用移液枪吹打均匀。
5、用移液枪将生长液移至25cm2细胞培养瓶中，补加4ml生长液。
6、盖上透气滤膜盖，置于37℃、CO25%培养。
备注：1、细胞复苏后5h，镜下观察细胞已贴壁，贴壁细胞密度50%~60%。
二、细胞换液（复苏后24h换液）1、取出细胞，镜下观察，细胞已长至80~90%，有部分细胞漂浮在培养液中。
2、倒去培养液，加入6ml生长液（10% FBS（胎牛血清），89% DMEM（低糖培养液），1%双抗），盖上透气滤膜盖，置于37℃、CO2 5%培养。
备注：1、一般复苏后的第一天（24h）需换液，复苏后第二天（48h）才能考虑传代，若没有传代，第三天（72h）必须传代。
2、处理过程不需用PBS（磷酸盐缓冲液）或HASS洗涤，因细胞刚复苏，不需过多处理细胞。
三、细胞传代（复苏后48h传代）1、镜下观察，细胞已长满整个细胞瓶底，有部分细胞漂浮。
2、倒去培养液，用移液枪吸取1ml PBS或HASS，沿培养瓶细胞对侧壁加入洗液，盖上盖子，轻摇瓶子让洗液洗涤整个瓶壁。
后续过程。
细胞培养实训班报告总结
一、引言细胞培养技术是现代生物学研究的重要手段之一，广泛应用于医学、生物学、药学等领域。
为了提高学生的细胞培养操作技能，培养严谨的科学态度和团队协作精神，我校组织开展了细胞培养实训班。
本次实训班历时一个月，现将实训情况总结如下。
二、实训班概述1. 实训班时间：2021年10月1日至2021年10月31日2. 实训班地点：我校生物实验室3. 实训班对象：生物科学专业本科生4. 实训班课程安排：（1）细胞培养基础知识：介绍细胞培养的基本原理、操作步骤、注意事项等。
（2）细胞培养技术：包括动物细胞培养、植物细胞培养、微生物细胞培养等。
（3）细胞培养设备操作：介绍细胞培养设备的操作方法、维护与保养。
（4）细胞培养实验：进行动物细胞、植物细胞、微生物细胞的培养实验。
（5）细胞培养成果展示与交流：学生展示自己的实验成果，互相交流学习心得。
三、实训班内容与成果1. 学习了细胞培养基础知识，掌握了细胞培养的基本原理、操作步骤和注意事项。
2. 掌握了动物细胞、植物细胞、微生物细胞的培养方法，能够独立完成细胞培养实验。
3. 学会了细胞培养设备的操作方法，了解设备的维护与保养。
4. 通过实验操作，提高了学生的动手能力、观察力和分析问题能力。
5. 在实验过程中，培养了学生的团队协作精神，学会了与他人沟通交流。
6. 成果展示与交流环节，学生展示了自己的实验成果，提高了自己的表达能力和自信心。
四、实训班收获与体会1. 通过本次实训班，我对细胞培养技术有了更深入的了解，提高了自己的操作技能。
2. 实验过程中，我学会了严谨的科学态度和细致的操作方法，为今后的科研工作打下了基础。
3. 在团队协作中，我学会了与他人沟通交流，提高了自己的团队协作能力。
4. 通过成果展示与交流，我认识到了自己的不足，明确了今后的努力方向。
5. 本次实训班让我明白了理论与实践相结合的重要性，为我今后的学习和发展提供了宝贵的经验。
五、建议与展望1. 建议学校加大对细胞培养实验室的投入，提高实验室设备水平，为学生提供更好的实验条件。
细胞培养技术总结-重要
细胞培养及检测相关技术小结一、细胞培养基配制以1000ml培养基为例。
1000ml成骨细胞培养基 = 850mlα－MEM培养液 + 150 ml 特级胎牛血清FBS (15%)(1). α－MEM powder: 10.2 g/L ~~~ 8.67 g for 850 ml(2). NaHCO3: 2.2 g/L ~~~ 1.87 g for 850 ml(3). Twice distilled water 850 ml, dissolve the powder in water(4). FBS (15%,v/v) 150 ml(5). Filter to sterilized bottle(6). Label the bottle and store in 4℃.Notes: 4,5 should be operated in the sterile working place. And if necessary, we can add some antibiotics into the medium（usually in primary cell culture）. 二、PBS（10×）NaCl: 80g/LKCl: 2g/LNa2HPO4: 14.4 g/LKH2PO4: 2.4 g/LPH=7.4, with HCl or NaOHToo much PO42-is harmful to cell, so only very little amount is necessary. Get some certain to dilute this 10 times concentration PBS when we need.三、胰蛋白酶Trypsin- EDTA 消化液(10×)This solution is used for cell released from the culture flask。
细胞培养的个人体会【优质最全版】
可重复利用物品的清洗和灭菌
1. 器皿加洗洁精浸泡数小时后，用自来水冲洗9次，
然后蒸馏水冲洗3次。
2. 烘干：洗干净后烘干。
3. 包装：用牛皮纸或布包装。
4.
消毒前贴上灭菌条，条上写明日期、物品、所有
细胞复苏与冻存的原则是“慢冻速融”。 复苏细胞时，速度要快，使之迅速通过细胞最易
受损的－5℃～0℃。 冻存细胞时，向培养基中加入保护剂二甲基亚砜
（DMSO），可使冰点降低，在缓慢的冻结条件 下，能使细胞内水分在冻结前透出细胞外，减少 细胞冰晶的形成。
复苏的标准方法
1、准备好37℃水浴烧杯。 2、将冻存于液氮中的冻存管取出，迅速放入37～40℃
优选细胞培养的个人体会
注意解冻分装前请混合均匀。
包装：用牛皮纸或布包装。
基础培养基
大多数培养基是建立在平衡盐溶液 (BSS)基础上， 添加了氨基酸、 维生素和与血清中浓度相似的营养 物质。
选择培养基很重要，不同细胞需要 适合的培养基。
常见的培养基有：DMEM、F12、 DMEM/F12、1640等。
长时不用，及时关电源。
缺点是无法模拟体内的情况，结果有局限性。
3、无菌条件下打开冻存管，取细胞悬液至离心管中，补加5mL培养液，1600 rpm低速离心5min。
普通细胞可用： 7份： 2份： 1份
（玻璃器皿第一次洗需要用，以后可以省这一步）。
加入新鲜培养液2mL，吹打成细胞悬液，以1 ：2或1 ：3的比例接种在新的培养瓶内（已预加新鲜培养基3ml) ，置37℃培养。
者。
4. 高压灭菌：包装好的器皿装入高压锅内，121 ℃， 维持30分钟。
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BHK细胞培养小结
报告人：
1、细胞培养
（1）培养基：DMEM培养基+10%无支原体新生牛血清+100U/ml青/链霉素
（2）细胞传代：细胞长满瓶壁90%-95%时，将上清倒掉，用D-Hanks液洗2-3遍细胞，加1ml0.25%胰酶37℃温箱消化3-5分钟后，加入3ml培养基将细胞吹下来，转移至15ml离心管，1000转离心5分钟，倒掉上清，加入3ml新鲜培养基重悬细胞，将细胞吹打均匀后按1：2或1：3的比例接种于新的培养瓶中，加入5ml新鲜培养基，放入培养箱培养。
2、细胞冻存及复苏
（1）细胞冻存液：90%无支原体新生牛血清+10%DMSO
（2）细胞冻存方法：细胞长满瓶壁90%后，细胞消化离心，弃上清，加入配制好的冻存培养液（含10%DMSO），重悬细胞，或者用细胞计数板计数细胞浓度，将细胞浓度调至106个/ml，将细胞转移至冻存管，每管1ml，用棉花包住冻存管放入-80℃冰箱，2天后将冻存管放入液氮冻存。
（3）细胞复苏：先准备一支15ml离心管，加入5-8ml新鲜培养基，再从液氮取出细胞后立刻放入37-40℃水浴，在1min内融化，然后将细胞转移至装有培养基的离心管，1000转离心5分钟，倒掉上清，加入2ml新鲜培养基重悬，再转移到1个新的培养瓶中，加入4ml新鲜培养基放入培养箱培养，1天后细胞贴壁，换液。
3、注意事项
（1）如果细胞生长太慢可选用含20%无支原体血清的DMEM培养基培养，可加快细胞生长；
（2）细胞传代时必须先离心后再重悬，如果不离心直接吹打后传代细胞不能吹打成单个细胞悬液，传代细胞成堆生长，影响细胞状态；
（3）细胞传代时不能传得太稀，如果传代时细胞浓度太低的细胞生长速度会很慢，而且细胞容易成堆生长；
（4）胰酶在使用前最好预热到37度。
由于胰酶平时保存在4度，反复预热对胰酶的活性不好，可以将胰酶进行分装，尽可能避免胰酶反复冷却加热；
（5）BHK还是比较好消化的，2-3min应该足够了，消化时间太长对细胞不利。
可以在显微镜下观察消化情况，必要时可以拍打培养瓶帮助细胞分散，消化结束后直接加入培养基即可，胰酶会被血清灭活；
（6）细胞冻存时要选细胞状态好的细胞冻存，否则细胞不容易复苏。