弧菌科(Vibrionaceae)细菌类群中基因组最小的细菌

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弧菌属

四、防治原则

及时发现，隔离，治疗病人做好疫情报告切断传播途径：改善社区环境，加强水源管理疫苗预防接种治疗关键：及时补充液体和电解质，预防大量失水导致的低血容量性休克和酸中毒。
二副溶血性弧菌
一、生物学性状
嗜盐（halophilic）：在培养基中以含3.5％的NaCl最为适宜。
不耐热，不耐酸。
有单鞭毛，运动活泼，无芽孢。
二、致病性与免疫性
致病物质：耐热直接溶血素和耐热相关溶血素所致疾病：食物中毒传播方式：经烹饪不当的海产品或盐腌制品传播因食物容器或砧板生熟不分污染本菌临床表现：潜伏期 5 ～ 72 小时，可从自限性腹泻至中度霍乱样病症。
三、微生物学检查法标本：采患者粪便、肛拭或剩余食物。
霍乱弧菌对热、干燥、日光、化学消毒剂和酸均很敏感。霍乱弧菌古典生物型对外环境抵抗力较弱，E1-Tor生物型抵抗力较强。

二、致病性与免疫性
（一）致病物质
1.鞭毛、菌毛
鞭毛运动 --- 穿过肠粘膜粘液层，接近肠壁上皮细胞。菌毛---定居于小肠上皮细胞。
2.霍乱肠毒素
导致严重的腹泻与呕吐。
（二）所致疾病
四、防治原则
治疗可用抗生素。
小结
弧菌都是有鞭毛的格兰阴性菌，成弧状或杆状。通常经消化道传播，引起腹泻、呕吐等症状。主要有霍乱弧菌和副溶血性弧菌。

霍乱弧菌与副溶血性弧菌比较
细菌名称霍乱弧菌培养要求致病要点
嗜碱引起霍乱（剧烈（pH8.8~9.0）腹泻、米泔样便）
副溶血性弧菌
弧菌属
弧菌属（Vibrio）
是一大群菌体短小，弯曲成弧形的革兰阴性菌广泛分布于自然界，以水中最多与人类感染常见有霍乱弧菌、副溶血性弧菌

哈维弧菌对水产动物的致病性及其噬菌体防控研究进展

哈维弧菌对水产动物的致病性及其噬菌体防控研究进展张美霞;耿慧君;王丽丽;李晓宇;徐永平【摘要】Vibrio harveyi is a marine pathogen that can infect a variety of aquatic animals,including crustaceans,shellfish,and fish,causing acute septicemia,exophthalmos,and chronic skin ulcers.The traditional treatment for these diseases is using antibiotics.However,the emergence of drug-resistant strains and antibiotics residues in aquatic animals have been serious threats to the health of their consumers.Thus,the European Union and other countries have banned the use of antibiotics in aquaculture for Vibrio harveyi disease.Therefore,it is urgent to seek new eco-friendly antimicrobial agents.Phage therapy has received widely attention for its unique advantages in the control of bacterial diseases.In this paper,we summarized the epidemiology,pathogenesis,and phage control of Vibrio harveyi,to provide theoretical and technical basis for the biocontrol of Vibrio harveyi infections in aquatic animals by phages.%哈维弧菌是一种海洋致病菌,可感染甲壳类、贝类和鱼类等多种水产动物,引发患病动物急性败血症、突眼和慢性皮肤溃疡等.一直以来多采用抗生素控制该病,然而耐药菌株的出现和抗生素在养殖动物体内的残留,已经严重威胁到消费者健康,欧盟等国家已经禁止使用抗生素预防水产养殖动物哈维弧菌病,因而亟待寻求新的生态友好型抗菌剂.噬菌体因其在治疗细菌性疾病方面的独特优势而受到广泛关注.本文拟就哈维弧菌的流行病学、致病机制、抗生素治疗存在的问题及其噬菌体治疗研究进展进行概述,以期为噬菌体防控水产养殖动物哈维弧菌病提供理论和技术依据.【期刊名称】《中国抗生素杂志》【年(卷),期】2017(042)009【总页数】9页(P717-723,前插1-前插2)【关键词】哈维弧菌;水产动物;致病机制;噬菌体治疗【作者】张美霞;耿慧君;王丽丽;李晓宇;徐永平【作者单位】大连理工大学生命科学与技术学院,大连116024;大连理工大学生命科学与技术学院,大连116024;大连理工大学生命科学与技术学院,大连116024;大连理工大学生命科学与技术学院,大连116024;动物性食品安全保障技术教育部工程研究中心,大连116600;大连理工大学生命科学与技术学院,大连116024;动物性食品安全保障技术教育部工程研究中心,大连116600【正文语种】中文【中图分类】Q939.48;R978.1Abstract Vibrio harveyi is a marine pathogen that can infect a variety of aquatic animals, including crustaceans,shellfish, and fish, causing acute septicemia, exophthalmos, and chronic skin ulcers. The traditional treatment for these diseases is using antibiotics. However, the emergence of drug-resistant strains and antibiotics residues in aquatic animals have been serious threats to the health of their consumers. Thus, the European Union and other countries have banned the use of antibiotics in aquaculture for Vibrio harveyi disease. Therefore, it is urgent to seek new eco-friendly antimicrobial agents. Phage therapy has received widelyattention for its unique advantages in the control of bacterial diseases. In this paper, we summarized the epidemiology, pathogenesis, and phage control of Vibrio harveyi, to provide theoretical and technical basis for the biocontrol of Vibrio harveyi infections in aquatic animals by phages.Key words Vibrio harveyi; Aquatic animals; Pathogenesis; Phage therapy 水产养殖动物弧菌病是一种流行范围广、危害非常严重的传染性疾病。

弧菌科

不耐热的H抗原

为共同抗原

耐热的O抗原

具有群特异性和型特异性，是霍乱弧菌分群和分型的基础
分型

根据O抗原的不同，现有155个血清群 O1群、O139群引起霍乱

O139血清群的抗原编码基因中出现了36kb的新基因缺少了O1群高分子量的O抗原侧链与O1群抗血清无交叉反应，但可与O22血清群和 O155血清群产生交叉反应，遗传学特征和毒力基因与O1群相似。

培养特性

TCBS琼脂平板: 0.5~2.0mm大小，蔗糖不发酵而呈蓝绿色菌落普通血平板: 不溶血或只产生α溶血从腹泻患者中分离到的菌株95%以上在我妻（wagatsuma）琼脂上产生 β溶血现象，称为神奈川现象（Kanagawa phenomenon, KP）嗜盐性选择平板: 较大，圆形，隆起，稍浑浊，半透明或不透明，无粘性

（二）生物学特性
1. 形态

革兰阴性杆菌，有鞭毛（极单毛），无荚膜，无芽胞
2. 抗原结构
耐热的菌体（O）抗原，具有群特征性，副溶血性弧菌的O抗原有13种鞭毛抗原，不耐热，无型特异性

3．培养特性

营养要求不高在无盐培养基上不能生长，最适合生长的氯化钠浓度为3.5%，超过8%不能生长最适pH为7.7~8.0，但pH9.5时仍能生长，最适生长温度为30~37℃ 在碱性胨水中经6~9h增菌可形成菌膜
用于霍乱弧菌的鉴别试验

霍乱红试验霍乱弧菌有色氨酸酶和硝酸盐还原能力。霍乱弧菌和其他弧菌均有此种反应粘丝试验（String Test）弧菌属细菌除副溶血性弧菌部分菌株外，均有此反应 O/129敏感试验 O/129 （2，4－Diamino－6，7－Diisopropylpteridine，2，4二氨基－6，7－二异丙基喋啶） 10μg及150μg纸片周围出现任何大小的抑菌环均为敏感。 O1群和非O1群霍乱弧菌均敏感。但已有对O/129耐药的菌株出现。用此试验作鉴定时，需特别谨慎。需结合其他试验结果如耐盐生长试验等综合考虑

溶藻弧菌dtd基因的克隆及原核表达条件优化

溶藻弧菌dtd基因的克隆及原核表达条件优化陈立明;庞欢瑛;简纪常;吴灶和【摘要】根据NCBI数据库中已发表的溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)全基因组序列合成一对特异性引物,应用聚合酶链式反应(PCR技术)扩增溶藻弧菌HY9001菌株dtd基因,将其定向克隆到原核表达载体pET-32a构建重组表达质粒pET-DTD,并对其进行诱导温度、诱导时间、诱导IPTG浓度等条件的优化,最后探究其纯化时最佳咪唑洗脱浓度.结果表明:DTD蛋白成功表达,且其以包涵体的形式存在,在诱导温度37C、IPTG浓度0.1 mmol/L条件下诱导5h表达量最高,纯化最佳咪唑洗脱浓度为150 mmol/L.【期刊名称】《广东海洋大学学报》【年(卷),期】2014(034)003【总页数】6页(P52-57)【关键词】溶藻弧菌;dtd;基因克隆;原核表达;条件优化【作者】陈立明;庞欢瑛;简纪常;吴灶和【作者单位】广东海洋大学水产学院,广东湛江524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东湛江524088;广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室,广东湛江524088;广东海洋大学水产学院,广东湛江524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东湛江524088;广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室,广东湛江524088;广东海洋大学水产学院,广东湛江524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东湛江524088;广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室,广东湛江524088;广东省水产经济动物病原生物学及流行病学重点实验室,广东湛江524088;广东省教育厅水产经济动物病害控制重点实验室,广东湛江524088;仲恺农业工程学院,广东广州510225【正文语种】中文【中图分类】S941溶藻弧菌(Vibrio alginolyticus)属于弧菌科(Vibrionaceae)，弧菌属(Vibrio)，又名藻朊酸弧菌、解藻酸弧菌、解藻朊酸内克氏菌[1]，是一种嗜盐嗜温、兼性厌氧的海生革兰氏阴性短杆细菌。

斑马鱼嗜水气单胞菌的鉴定和人工感染组织病理学研究

斑马鱼嗜水气单胞菌的鉴定和人工感染组织病理学研究林金杏;杨迟;冯丽萍;胡建华【摘要】从患病斑马鱼体内分离致病菌株并进行鉴定，观察人工感染分离菌株后组织病理学变化。

通过对分离菌株 ZF4形态特征、生理生化特性、保守基因和系统发育树建立等综合分析进行鉴定。

结果显示，ZF4为β溶血的革兰氏阴性短杆菌，吲哚试验为阳性，发酵葡萄糖、蔗糖等糖类，AHA_0438、ASP、gyrB 和16S rRNA 等基因均为阳性，基于 gyrB、16S rRNA 基因系统发育分析结果显示ZF4为嗜水气单胞菌。

人工感染后斑马鱼临床症状明显，发生肝脏组织变性、肠道内膜脱落、脾脏充血、胰腺间质纤维组织增生等组织病理学变化。

斑马鱼体内分离的 ZF4鉴定为致病性嗜水气单胞菌，且斑马鱼对该菌敏感，因此斑马鱼可作为研究嗜水气单胞菌的动物模型。

%The aims of this paper are to isolate and identify pathogenic strain from diseased zebrafish,and to observe the histopathological changes of artificial infected zebrafish. The isolated strain ZF4 was identified by comprehensive analysis of its morphology, physiological and biochemical characteristics,conserved gene and phylogenetic tree. The results showed that the ZF4 was gram negative bacillus,positive in indole test,fermented glucose,sucrose sugars,etc. The gene AHA_0438,ASP,gyrB and 16S rRNA of ZF4 were all positive. Based on gyrB and 16S rRNA gene sequence,clustering analysis result showed that ZF4 was Aeromonas hydrophila. The infected zebrafish presented obvious clinical symptoms,and histopathological changes were observed,such as the liver tissue degeneration,intestinal lining shedding,hyperemia of the spleen,pancreas fibrous tissue hyperplasia.,etc. In conclusion,the ZF4isolated from the diseased zebrafish was identified as pathogenicity A. hydrophila. Meanwhile,due to its susceptibility,zebrafish could be used as the animal model to study the A. hydrophila.【期刊名称】《生物技术通报》【年(卷),期】2016(032)009【总页数】7页(P239-245)【关键词】斑马鱼;嗜水气单胞菌;鉴定;人工感染;组织病理【作者】林金杏;杨迟;冯丽萍;胡建华【作者单位】上海实验动物研究中心，上海 201203;上海实验动物研究中心，上海 201203; 东华大学化学化工与生物工程学院，上海 201620;上海实验动物研究中心，上海 201203;上海实验动物研究中心，上海 201203【正文语种】中文嗜水气单胞菌（Aeromonas hydrophila，Ah）属于弧菌科（Vibrionaceae）气单胞菌属（Aeromonas），广泛分布于自然界的各种水体及土壤中［1，2］。

〖医学〗弧菌属

EI Tor 生物型比古典生物型的抵抗力强。
➢致病因素
致病性和免疫性
1.黏附作用鞭毛、普通菌毛定居因子(colonization factors)。霍乱弧菌最重要的一个定居因子称为毒素协同调节菌毛 ( toxin co-regulated pilus,TCP)。
弧菌属(Vibrio)
病原生物学教研室
弧菌科（Vibrionaceae）：为呈短小弧形或直线型，菌体一端有鞭毛，运动活泼，需氧或呈兼性厌氧，产生氧化酶，但不形成芽胞的一类革兰阴性杆菌。
弧菌属(Vibrio)：霍乱弧菌，副溶血性弧菌。气单胞菌属（Aeromonas）：邻单胞菌属（Pleisionomas）：
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1、病毒性肝炎：由病毒造成的肝炎按照其病毒系列不同分为甲、乙、丙、丁、戊和庚共六种类型病毒性肝炎。能引起肝脏细胞肿胀，是世界上流传广泛，危害很大的传染病之一。
1908年，才发现病毒也是肝炎的致病因素之一。1947年，将原来的传染性肝炎（i nfectious hepatitis）称为甲型肝炎（Hepatitis A, HA）；血清性肝炎（serum hepatitis）称为乙型肝炎（Hepatitis B, HB）。1965年人类首次检测到乙型肝炎的表面抗原。
我国经济和科学技术日益发展，学术文化领域百家争鸣，（df高血压 958心脏病983u6糖尿病87fr ）特别是思想家的革新精神，为中医学理论的创新和突破性进展，提供了有利的文化背景。宋代陈无择著《三因极一病证方论》一书，（45传染病q566丙肝964jo乙肝 28jgsx甲肝gh）提出三因学说；并产生了最具盛名四大学派，刘完素倡导火热论；张从正力倡“ 攻邪论 ”；李杲提出 “内伤脾胃，百病由生”的理论；朱震亨创造性地阐明了相火的演变规律。

弧菌科

五、防治原则
1. 控制传染源 2. 切断传播途径：改善社区环境，加强水源管理，
3. 提高易感者免疫力
疫苗预防接种
4.治疗霍乱的关键
及时补充液体和电解质
副溶血性弧菌（V. parahemolyticus）
生物学特性
嗜盐（halophilic），3.5%NaCl生长最好
在含0%NaCl和 10%NaCl的培养基中不生长。
弧菌属
目前弧菌属共有36个种，分为四大类： O-1群霍乱弧菌，O-139群霍乱弧菌，非 O-1群霍乱弧菌，其他弧菌。多为非致病菌，但有部份为强致病菌，如霍乱弧菌。
霍乱弧菌
是烈性传染病霍乱的病原菌。分O-1群霍乱弧菌，O-139群霍乱弧菌和非O-1群霍乱弧菌 O-1群和O-139群霍乱弧菌的致病性强于非O-1群霍乱弧菌。 O-1群霍乱弧菌又分为古典生物型 (classical biotype)和埃尔伯生物型(El Tor biotype)。
弧菌科及检验
华中科技大学同济医学院检验系吉曾
弧菌科(Vibrionaceae)是一群氧化酶阳性，具有端极鞭毛，菌体短小、直或微弯的革兰阴性杆菌。分为弧菌属、气单胞菌属、邻单胞菌属和发光杆菌属等四个菌属。
弧菌科的特征
1. 菌体细小，弯曲成弧形或直的革兰阴性杆菌； 2. 能发酵葡萄糖； 3. 多数菌株生长都需要盐； 4. 大多数氧化酶都为阳性； 5. 具有一端单一鞭毛。
气单胞菌的检验
生物学特性： 1.革兰阴性直杆菌，多数有动力； 2.营养要求不高，不嗜盐； 3.氧化酶阳性；
邻单胞菌属
本属只有一个菌种，类志贺邻单胞菌； 1.可引起肠胃炎，常因食生水或海产品而引起； 2.革兰阴性直杆菌，氧化酶阳性； 3.营养要求不高； 4.与志贺菌有交叉血清学反应。

第二十五章弧菌属和气单胞菌属

4．生化反应
❖ 氧化酶阳性 ❖ 发酵蔗糖，动力阳性 ❖ 赖氨酸、鸟氨酸脱羧酶阳性，精氨酸双水解酶阴性 ❖ 可以在无盐培养基上生长
在含有高于6%氯化钠的培养基上不能生长
特征羊红细胞溶血鸡红细胞凝集 V-P 试验多粘菌素B敏感试验 Ⅳ组噬菌体裂解 Ⅴ组噬菌体裂解
古典生物型 — — — + + —
❖ 兼性厌氧，发酵葡萄糖，许多菌株生长需要2%~3%氯化钠
❖ 大多数菌株氧化酶阳性 ❖ 具有一端单一鞭毛、运动迅速
❖ 弧菌科细菌广泛分布于自然界，以水中最为多见。其中有一些种对人类致病。
第一节弧菌属
❖ 弧菌属（Vibrio）共有36个种。其中有12个种与人类感染有关，最重要的为霍乱弧菌引起霍乱副溶血弧菌引起食物中毒
特别谨慎，需结合其他试验结果如耐盐生长试验等综合考虑。
（4）耐盐试验
（5）鸡红细胞凝集试验
El Tor生物型阳性，古典生物型阴性
1.形态
新从患者标本中分离出的细菌革兰染色阴性，弧形或逗点状
在患者“米泔水”样便中，可呈头尾相接的“鱼群”样排列
菌体一端有单鞭毛，长为菌体 3～5 倍，“蝌蚪状”。悬滴观察时呈“穿梭”样运动
有普通菌毛和性菌毛 O139群有荚膜
2. 培养特性
❖ 营养要求不高，在普通琼脂上生长良好
❖ 多数能在血平板或普通琼脂平板上生长，在血平板上可呈现α、β或不溶血菌落。
❖ 在肠道选择性培养基上如含乳糖或肌醇的麦康凯平板，许多致病性弧菌可以生长，形成糖类不发酵
的菌落
一、霍乱弧菌
（ Vibrio cholerae）
霍乱的病原菌。肠道传染病，发病急、传播快、死亡率高。
（一）生物学特性

创伤弧菌生物安全等级

创伤弧菌生物安全等级创伤弧菌（Vibrio vulnificus）是一种常见的水生细菌，属于弧菌科（Vibrionaceae）下的一种细菌。

它是一种革兰阴性菌，具有弧形或弯曲的形态。

创伤弧菌广泛存在于海洋和淡水环境中，尤其是温暖的海洋水域。

它主要寄生在一些水生生物体内，如贝类、鱼类和甲壳类动物等。

创伤弧菌是一种高度致病性的细菌，可以引起人类和动物的感染。

人类感染创伤弧菌通常是通过摄入受污染的海鲜或接触受污染的水体而引起的。

感染通常发生在夏季和早秋季节，因为在这个时候水温较高，创伤弧菌的数量也会增加。

创伤弧菌感染可以引起多种疾病，包括创伤性软组织感染、败血症和坏死性肠炎等。

创伤性软组织感染是最常见的感染类型，通常发生在皮肤损伤或溃疡暴露于受污染的水体中的情况下。

这种感染可以导致严重的皮肤炎症和组织坏死，甚至可能导致肢体坏死或死亡。

创伤弧菌感染对于某些人群来说尤其危险，如免疫力低下的人、老年人和慢性疾病患者等。

这些人群往往对感染更为敏感，并且可能出现更严重的症状和并发症。

为了防止创伤弧菌感染的发生，我们应该采取一些预防措施。

首先，我们应该避免食用生或未充分煮熟的海鲜，特别是贝类和鱼类。

其次，我们应该避免接触受污染的水体，尤其是有开放性伤口或溃疡的人应特别注意。

此外，我们还应该保持良好的个人卫生习惯，如勤洗手、保持清洁环境等。

对于已经感染创伤弧菌的人来说，早期诊断和治疗非常重要。

如果出现发热、皮肤红肿、溃疡等症状，应及时就医并告知医生可能接触到创伤弧菌。

医生可能会进行相关检查，如血液培养和组织培养等，以确认感染并选择合适的治疗方法。

总之，创伤弧菌是一种具有高度致病性的细菌，可以引起人类和动物的感染。

为了预防感染的发生，我们应该注意食用海鲜的安全性，并避免接触受污染的水体。

对于已经感染的人来说，早期诊断和治疗非常重要。

通过加强宣传教育和个人卫生习惯的培养，我们可以有效预防创伤弧菌感染的发生，并保障人民健康安全。

弧菌属

简介
简介
弧菌属（Vibrio）为弧菌科的1属。本属细菌种类多，分布广泛，尤其是水中最为常见。
特征
特征
形状短小，约0.5×(1～5)微米，因弯曲如弧而得名。分散排列，偶尔互相连接成S状或螺旋状。革兰氏染色阴性，菌体一端有单鞭毛，运动活泼。无芽胞，无荚膜。需氧或兼性厌氧，分解葡萄糖，产酸不产气，氧化酶阳性，赖氨酸脱羧酶阳性，精氨酸水解酶阴性，嗜碱，耐盐，不耐酸。DNA中的G+C克分子含量为40～50%。
古典生物型和埃尔托型属于O:1血清群,这两型都能引起人类较严重的病害，并易酿成流行。在自然情况下，人类是霍乱弧菌的唯一易感者。主要通过污染的水源或食物，经口传染。霍乱弧菌到达小肠后，在碱性肠液内迅速繁殖，并产生大量强烈的霍乱肠毒素，作用于小肠粘膜细胞，引起肠液过度分泌，病人上吐下泻，排出大量米泔样排泄物、造成严重脱水、肌肉痉挛、周围循环衰竭等症状。病后可获得一定的免疫力。预防方法是做好粪便和污水的处理以及饮水和食品的卫生工作，加强进出口的检疫，严格隔离患者，对易感人群进行霍乱菌苗预防接种。预防霍乱的人工自动免疫制剂有待进一步研制提高。治疗时可补充液体和电解质，使用四环素等抗生素。
举例
霍乱弧菌
副溶血性弧菌
霍乱弧菌
霍乱的病原菌。从病人新分离出的病菌形态比较典型，菌体大小为(0.4～0.6)×(1.5～3)微米。人工培养一段时间可变成杆状。对热和消毒剂耐力不大，对氯敏感，55℃仅能生存15分钟，干燥后易死亡，对酸抵抗力特低。耐碱,常采用pH8.4碱性蛋白胨水或碱性平板作为选择培养基。DNA中的G+C克分子含量为45～49%。
弧菌属
为弧菌科的1属
01 简介
03 致病性 05 举例
目录

医学微生物学第11章弧菌属(Vibrio)PPT

本章复习要点
➢ 概念：O139群霍乱弧菌(查资料)
➢ 简答题 1．为何霍乱病人出现剧烈米泔水样腹泻？
2. 某地区发现首例疑似霍乱患者，结合你的专业谈谈应需开展哪些工作？
➢ 拓展题为何霍乱和ETEC引起的婴儿腹泻都表现为水样腹泻？
为何细菌性痢疾和EIEC引起的较大儿童腹泻都表现为粘液脓血性腹泻？
第11章弧菌属(Vibrio)
一群菌体短小，弯曲成弧形的G-菌
1883年，Koc1群和O139群 ➢ 食物中毒——副溶血弧菌河弧菌、拟态弧菌、弗尼斯弧菌、霍利斯弧菌
第一节霍乱弧菌 (V.cholerae)
-------- 霍乱
烈性肠道传染病国际检疫传染病我国法定甲类传染病俗称“二号病”
预
习
第十三章厌氧性细菌
古典生物型【S讲述】 + -
ElTor生物型 + + R + +
一、生物学性状
1.形态染色〔初步诊断价值〕革兰染色阴性
呈逗点状或弧状有单根鞭毛，运动活泼
悬滴观察鱼群穿梭样流星状
有菌毛荚膜〔O139群) 无芽胞
2、培养特性
➢ 耐碱不耐酸 ➢ 碱性蛋白胨水(pH8.8～
9.2) ➢ TCBS培养基〔黄色菌落〕
革兰染色、悬滴法观察 ➢ 分离培养(确诊)
增菌(碱性蛋白胨水)、分离（TCBS）快速诊断：免疫荧光、PCR等
首例病例要及时诊断，封锁疫区，上报疫情
四、防治原则
➢ 一般性预防：加强水源和粪便管理 ➢ 特异性预防：口服减毒疫苗，二价联合疫苗 ➢ 治疗：及时补充液体和电解质
抗生素的使用减少外毒素产生
➢ 1992年10月印度和孟加拉相继发生一种新型霍乱暴发和较大流行，这型霍乱随后由亚洲传播，至2003年，WHO报告45个国家111575例病例——O139群引起新现病原体（emerging pathogen）

溶藻弧菌gr基因缺失株构建及其生物学特性

Abstract: 【Objective】To study the effects of gr gene knockout on the biological characteristics of Vibrio alginolyticus HY9901.【Method】Homologous recombination techniques and overlap PCR were used to construct the gr gene knockout strain of V. alginolyticus HY9901 (△gr). The verification of its genetic stability was completed by reverse transcription. The growth, biofilm formation ability, antibiotics susceptibility, extracellular enzyme activities and motility of wild and △gr strains were measured.【Result】The growth of △gr was not affected, while the deletion of gr gene increased the antibiotics sensitivity of △gr to furazolidone, cefazolin and tetracycline, and significantly improved the biofilm formation ability. However, the extracellular enzyme activities and motility were less than the wild strain.【Conclusion】GR plays an important role in virulence, biofilm formation, drug sensitivity and motility of V. alginolyticus.

50种中药对温和气单胞菌体外抑菌试验

50种中药对温和气单胞菌的体外抑菌试验专业：XXXXXXXXXX 学号：XXXXXX 姓名：XXXXXXXXX指导教师：XXXXXXX摘要：用琼脂扩散法(打孔法)测定了鸡血藤等50种中药对温和气单胞菌(Aeromonas sobria)的抑制作用，并用二倍稀释法测定有较强抑菌效果的26种中药对温和气单胞菌的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC)。

结果显示∶大部分中药对温和气单胞菌有抑制作用，木瓜和玫瑰花的抑杀效果最好，其抑菌圈直径达20 mm以上，其中木瓜的MIC和MBC相同，为7.81 mg/ml，玫瑰花的MIC为 7.81 mg/ml ，MBC为15.63 mg/ ml；儿茶、白芍等5种中药有中等强度的抑菌和杀菌效果;薄荷、远志等4种中药的抑菌强度弱;而柴胡、茵陈等39种中药无抑菌作用。

关键词：温和气单胞菌；中药；免疫防治；MIC；MBC温和气单胞菌(Aeromonas sobria)，又称威隆气单胞菌(A．Veronii)，属于弧菌科（Vibrionaceae）气单胞菌属，广泛生活于海水、淡水、污水、土壤中，营腐生，能引起水生生物腹泻、败血症等疾病，是危害我国淡水养殖业的重要病原菌之一。

同时也能引起爬行类、两栖类等冷血动物的出血性败血症[1,2] 。

同时，该菌也是重要的人畜共患病的病原菌，能引发腹泻、伤口感染和败血症等症状[3] 。

传统治疗细菌性疾病的最常用药物是抗生素和合成抗菌药，但其会产生耐药性、药物残留等缺陷，同时国际上对抗生素在水产养殖中的使用也开始有所限制。

由于水产养殖中抗生素的使用缺陷及其受到的限制，探讨中药对各种致病菌的抑制作用及其机制变得越来越重要[4] 。

与抗生素相比，中药在动物体内不蓄积、无残留，而且，由于中药成分复杂，病原微生物不易对中药产生耐药性，提高了其抗菌效力[5] 。

中药是天然药物，具有毒性低、易降解、安全环保等特点，含抑菌物质，可有效抑制细菌生长[6] 甚至杀死细菌,有些中药还具有免疫增强作用，使得中药在水产养殖动物的防治抗病方面展现出越来越广阔的前景[4] 。

几种抗菌药物对嗜水气单胞菌突变选择窗(MSW)范围的研究

几种抗菌药物对嗜水气单胞菌突变选择窗(MSW)范围的研究俞观泉;卢彤岩;杨雨辉【摘要】为了测定盐酸恩诺沙星、氟苯尼考和卡那霉素对5株临床分离的嗜水气单胞菌的MSW范围,本研究采用试管双倍稀释法测MIC,平板稀释法测MIC99,以超过1010 CFU接种于药物平板上的方法测MPC,确定了3种抗菌药物对5株临床分离的嗜水气单胞菌的突变选择窗范围.结果表明,卡那霉素和盐酸恩诺沙星对5株嗜水气单胞菌的MIC99相差不大,但MPC之间的差异较大:卡那霉素对4号菌株的MPC明显大于其他几种菌株,恩诺沙星对2号菌株的MPC明显小于其他菌株；氟苯尼考对2号菌株MIC99明显大于其他4种菌株,而MPC值均大于128μg/mL.因此认为,目前恩诺沙星和氟苯尼考治疗嗜水气单胞菌的给药方案虽可发挥一定的治疗效果,但容易导致嗜水气单胞菌耐药性的产生.【期刊名称】《中国兽医杂志》【年(卷),期】2012(048)012【总页数】3页(P73-75)【关键词】嗜水气单胞菌;突变选择窗;恩诺沙星;氟苯尼考;卡那霉素【作者】俞观泉;卢彤岩;杨雨辉【作者单位】海南大学农学院,海南海口570228;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070;中国水产科学研究院黑龙江水产研究所,黑龙江哈尔滨150070;海南大学农学院,海南海口570228【正文语种】中文【中图分类】S852.61传统药效理论认为，当抗菌药物浓度低于MIC时，容易被筛选出耐药菌株，从而导致细菌耐药。

因此在以往的给药方案设计中，给药间隔的设计主要是根据MIC来确定［1］。

但最近提出的突变选择窗（Mutation Selection Windows，MSW）概念改变了传统上的这一理论，突变选择窗理论认为病原菌与药物接触过程中，有一个高于MIC的浓度范围可以杀死或抑制敏感细菌，但是在感染细菌群体中少数自发突变耐药的细菌则可能存活下来，并得以繁殖。

一般将这个浓度范围称为MSW［1－4］。

维氏气单胞菌致病性与耐药性

维氏气单胞菌致病性与耐药性维氏气单胞菌隶属弧菌科(Vibrionaceae)气单胞菌属(Aeromonas)，为革兰阴性杆菌，兼性厌氧型。

气单胞菌广泛存在于各种水体生态系统中，比如淡水、沿海水域以及污水中［1］，能够经常从腹泻的人类［2］以及出血性败血症的鱼类中分离到［3］。

研究表明，嗜水气单胞菌、豚鼠气单胞菌以及维氏气单胞菌为3种主要的致病性气单胞菌，涵盖了气单胞菌中85%的临床病症来源［4］。

目前在水产动物养殖上，对于气单胞菌致病性的研究主要为嗜水气单胞菌［5］，对维氏气单胞菌的致病性及分布关注并不多。

团头鲂(MegalobramaamblycephalaYih)隶属硬骨鱼纲鲤形目鲤科鳊亚科，是我国重要的草食性经济鱼类之一，具有味美、生长快、抗病力强等特点，是江苏省南部地区的主要淡水养殖品种。

出血病是团头鲂养殖过程中危害最严重、造成经济损失最大的病害，通常认为由嗜水气单胞菌引起［6］，使用抗生素进行防治［7］。

然而，随着养殖密度的扩大、养殖水体的恶化以及抗生素的滥用，团头鲂出血病呈常发、难治的态势。

本研究在江苏省常州市武进区某团头鲂养殖塘刚刚出现出血病后，即对该塘口的不同生态位进行细菌分离、鉴定及人工感染试验，同时分析菌株的毒力基因及耐药性，以期为团头鲂出血病的发病机理及分子流行病学研究提供基础数据，为该病的防控提供一定的理论基础。

1材料与方法1．1发病塘口及菌株2010年7月11日常州武进某团头鲂池塘出现大批团头鲂死亡的情况。

塘口检查发现病鱼游动缓慢，摄食减少，肠道内食糜少或无，体表腹部、尾鳍以及鳃部有出血点，部分有大面积的皮肤溃烂。

解剖检查发现一部分病鱼肝脏发白、肿大，一部分有溶血性腹水。

采集该池塘病鱼21尾，利用选择性培养基分离细菌，分离位点包括鱼的肠道、体表黏液、鳃、腹腔、肝脏、肾脏等。

同时采集该池塘的水样、底泥，利用选择性培养基分离水体、浮游生物和底泥中的细菌。

1．2主要试剂及培养基细菌生化鉴定管、药敏纸片购自杭州天和微生物试剂有限公司，细菌基因组DNA提取试剂盒、PCR扩增试剂盒购自大连宝生物工程有限公司，RS培养基［8］、LB培养基为本课题组配制。