【公开课课件】选修三1.3基因工程的应用

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科学家通过基因工程的方法培育抗虫棉时,
需从苏云金芽孢杆菌中提取出抗虫基因,“放
入”棉花的细胞中与棉花结合起来并发挥作用, 请完成下列有关问题:
(1)从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用 的工具是_限__制_酶___,此工具主要存在于微__生__物__ 中,其特点是_一__种__限_制__酶__只__能__识_别__一__种__特__定_的__ 核__苷__酸_序__列__,__并__在_特__定__的__切__点__切_割_____。
美国医学家安德森
谢德尔,1999
体外基因治疗:从病人体内获取某种细胞进行培 养,然后,在体外完成基因转移,再筛选成功转 移的细胞扩大培养,最后重新输入患者体内。
体内基因 治疗:用 基因工程 的方法, 直接向人 体组织细 胞中转移 基因的治 疗方法。
例4、基因治疗是指( A ) A、把健康的外源基因导入有基因缺陷的细胞中,达 到治疗目的 B、对有缺陷的细胞进行修复,从而使其恢复正常, 达到治疗的目的 C、运用人工诱变的方法,使有基因缺陷的细胞发生 基因突变,从而恢复正常 D、运用基因工程技术,把有缺陷的基因切除,达到 治疗疾病的目的
导入_受__精_卵__细胞
显微注 射技术
送回母体发育成新个体
新个体泌乳期乳汁中产药
例1、继哺乳动物乳腺发生器研发成功后,膀胱生物发生器的
研究也取得了一定进展。最近,科学家培养出一种转基因小
鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中。 请回答:
(1)将人的生长激素基因导入小鼠受体细胞,常用方法是
__显__微__注__射___。 (2)进行基因转移时,通常要将外源基因转入_受__精__卵__中,
原因是 受精卵具有全能性,可使外源基因在相应组织细胞表达。
(3)通常采用 DNA分子杂交 技术检测外源基因是否插入
了小鼠的基因组
(4)在研制膀胱生物反应器时,应使外源基因在小鼠的
膀胱上皮 细胞中特异表达。
(2)苏云金芽孢杆菌中一个DNA分子上有许
多基因,获得抗虫基因常用的方法是”鸟枪法”。 具体做法是:用_限_制__酶__将苏云金芽孢杆菌的 _D_N_A__切成许多片段,然后将这些片段分别 _与_运__载__体__结__合_,再通过_运__载__体___导入不同的受 体细胞中,让它们在各个不同的受体细胞中大量 _复__制__,从中找出含有目的基因的细胞,再用一 定的方法把_带__有__目_的__基__因__的__D_N_A__片_段__分离出来。
目的基因
从何来
Bt毒蛋白基因
苏云金芽孢杆菌
病毒外壳基因和病毒复制酶基因
几丁质酶基因和抗毒素合成基因
调节细胞渗透压的基因
抗冻蛋白基因

抗除草剂基因
富含赖氨酸的蛋白质编码基因
控制番茄果实成熟的基因
植物花青素代谢有关的基因
一.抗虫转基因植物
优点 — 避免化学杀虫剂的污染
Bt毒蛋白基因 害虫将Bt毒蛋白 水解成 有毒多肽
第三步,将目的基因导入受体细胞,对猪来说,应导入其 受精卵细胞最有效。 在这项技术中,必须使用的两种工具酶是限制酶 和 DNA连接酶。
三、基因工程药物异军突起
1.第一种基因工程药物是什 么?
2.基因工程的药物都有什么?
3.描述我国基因工程制药的 的过去现在和未来
第一种基因工程药物 — 重组人胰岛素
问题 难保鲜
解决 控制番茄成熟的基因
(延迟番茄成熟)
富含胡萝卜素的“金大米”。
富含赖氨酸的转基因玉米
不会引起过敏的转基因大豆
四.利用转基因改良植物的品质
观赏花卉
问题 颜色单调,变色困难 解决 花青素有关调节基因
转基因龙胆花
转基因蓝猪耳
Bt毒蛋白基因

抗虫
蛋白酶抑制剂基因 淀粉酶抑制剂基因

植物凝集素基因
1、植物基因工程硕果累累 2、动物基因工程前景广阔 3、基因工程药物异军突起 4、基因治疗曙光初照
大豆、玉米、棉花、 油菜已进入大规模 商业化应用阶段
主要用于: 提高农作物抗逆能力、 改良农作物品质、 利用植物生产药物
请同学们阅读P17-19思考以下几题:
1.目前用于杀虫的转基因抗虫植物基因有哪ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ?
2.抗病转基因植物所采用的基因,使用最多的是什么?
3.造成低产、减产的常见环境因素有哪些?使烟草.番茄 的耐寒能力提高措施是什么?
4. 豆类中哪种必需氨基酸较少?大米、玉米、小麦中哪 种必需氨基酸较少?举例说明科学家如何提高氨基酸 的含量?
转基因生物与目的基因的关系
转基因生物 抗虫棉基因 抗病毒转基因小麦 抗立枯丝核菌(真菌)的烟草 抗盐碱和干旱作物 耐寒的番茄 抗除草剂的大豆 富含赖氨酸的转基因玉米 转基因延迟番茄 转基因牵牛花
一.用于提高动物生长速度
生长速度 生长激素
解决方法 成功案例
导入生长激素基因 绵羊:生长速度提高30%,体积增加50% 鲤鱼:9个月后,体重增1.5kg
二.用于改善畜产品的品质
问题 喝牛奶过敏、呕吐、腹泻
原因 对策
乳糖不消化
肠乳 糖酶
构建 表达
显微注射技术
导 入
正常牛
牛奶中乳糖含量
基因
载体 转基因牛
调节细胞渗透压的基因 抗旱、抗盐碱
基 因
鱼的抗冻蛋白基因 耐寒烟草,番茄
抗除草剂基因 抗除草剂大豆、玉米
我国科学家在实验田观察 转鱼抗冻蛋白基因的番茄
转基因抗除草剂玉米
四.利用转基因改良植物的品质
粮食 果蔬
问题 大豆、玉米、大麦、小麦
解决
①导入含必需AA多Pro的编码基因 ②改变AA合成过程中关键酶活性
转基因抗乙肝西红柿,虽然不能治愈乙肝,但一年只 吃几个抗乙肝西红柿,就完全能代替注射乙肝疫苗。 抗乙肝西红柿属于转基因食品,就是将乙肝疫苗植入 西红柿内,经过多代繁殖,使转入的基因稳定化。这 种西红柿培育历时十年,先是在实验室生长,等各种 安全因素达标后,才移至户外,进行封闭种植。
例3、1997年,科学家将动物体内
基 因
蛋白酶抑制剂基因 淀粉酶抑制剂基因
消化不良
植物凝集素基因 不吸收
抗虫害的玉米
二.抗病转基因植物
基因
抗病毒 —病毒外壳蛋白基因 —病毒的复制酶基因
抗真菌 —几丁质酶基因 —抗毒素合成基因
抗细菌 —裂解肽基因 —溶菌酶基因
抗烟草花叶病毒的转基因烟草
转黄瓜抗青枯(细菌)病基因的马铃薯
三.抗逆转基因植物
▪ 体外基因治疗
➢ 复合型免疫缺陷症
▪ 体内基因治疗
➢ 遗传性囊性纤维化病
例5、重症联合免疫系统缺陷症( SCID )患者缺乏正常的人体 免疫功能,只要稍被细菌或病毒感染,就会得病死亡。经过研究 证实, SCID病人细胞的一个常染色体上编码腺苷酸脱氨酶 (ada)的基因发生了突变。
(1)请你利用所学知识,设想一个治疗SCID病的方案。
2、去除抗原决定基因
(受精卵)
导入猪受精卵
克隆技术 导入人基因具特殊用途的猪和小鼠
培育出没有免疫排斥 反应的转基因克隆猪
例2、英国科学家已经研究用动物的器官作为器官移植的器官来 源,科学家发现猪的内脏器官与人的内脏器官大小、形态均差
不多,他们从20世纪80年代就开始研究。研究的重点是改造猪 细胞膜。
例5、应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使 用基因探针才能达到检测疾病的目的。这里的基因 探针是指( B ) A、用于检测疾病的医疗器械
B、用放射性同位素或萤光分子等标记的DNA分子
C、合成球蛋白的DNA
D、合成苯丙羟化酶的DNA片段
基因治疗
▪ 基因治疗是根本性的治疗
➢ 导入能增强人体免疫能力的基因
(1)猪细胞膜的基本结构和人的细胞膜是相同的,但其上的
糖蛋白 和人细胞膜有很多是不同的。 (2)改造猪细胞膜主要是通过 基因工程技术进行,具体操作
步骤: 第一步,获得控制目的基因(人体细胞膜上蛋白质合成的基因), 所用的方法有 从基因文库中获取、利用PCR技术扩增目的基因、。 第二步,将目的基因与 运载体 结合; 化学法直接人工合成

传统提取 提取部位 —细胞、组织、血液等

胰岛素、 提取量 — 少

干扰素
缺点 — 材料少、提取难、成本高


提取部位 — “工程菌”
药 改进 —“工程菌”提取量 — 多 (大肠杆菌、酵母菌)
优点 — 高效、高质量、低成本
菌优点: 繁殖快、多为单细胞、遗传物质相对较少
重组质粒
基因工程药物异军突起
▪基因治疗的概念: 将正常基因导入病人体内,使 该基因的表达产物发挥功效, 从而达到治疗疾病的目的
免疫系统发挥正常作用的必须 物质
腺苷酸脱氨酶
腺苷酸脱氨酶基因
1990年,美国医学家安德森对一例患腺苷脱氨酶(ADA)缺乏 症的4岁女孩谢德尔进行基因治疗。该女孩由于先天缺乏ADA基 因,自身不能生产ADA,先天免疫功能不全,只能生活在无菌的 隔离帐里。他们将含有这个女孩自己的白血球的溶液输入她左 臂的一条静脉血管中,这种白血球都已经过改造,有缺陷的基 因已经被健康的基因所替代。在以后的10个月内她又接受了7次 这样的治疗,同时也接受特定抗体的治疗。经治疗后,免疫功 能日趋健全,能够走出隔离帐,过上了正常人的生活。
解决 花青素有关调节基因
“动物基因工程前景广阔”思考题:
1.如何利用动物基因工程技术提高动物的生长速率?
2.怎样能在其他营养成分不受影响的情况下,降低乳 糖的含量?
3.目前科学家已在山羊等动物乳腺生物反应器中表达 了抗凝血酶.血清白蛋白.生长激素和a-抗胰蛋白酶, 科学家是怎样获得转基因动物的?
动物基 因工程
减少, 其他营养成分不
受影响
三.用转基因动物生产药物
设想:让牛奶中产出生长素、抗凝血 蛋白、血清白蛋白、α-抗胰蛋白酶等
乳腺生物反应器
产量高、质量好、成本低、易提取
(把哺乳动物变成成“批量生产药物的工厂)
+ 对 药用蛋
策 白基因
乳腺蛋白基
因启动子
(只在乳腺中且
在泌乳期表达)
构建基因表达载体
乳汁中含有人生长激 素的转基因牛(阿根廷)
(5)为使外源基因在后代长期保持,可将转基因小鼠细胞的
细胞核 转入 去核的卵 细胞中构成重组细胞,使其发育 成与供体具有相同性状的个体。该技术称为核移植(或克隆)。
四.用转基因动物作器官移植的供体
器官移植问题— 1、供体器官少2、排斥反应强
用猪的器官做供体
1、抑制抗原决定基因 表达的调控因子
抑制抗原决 定基因表达
在酶的作用下合成双链DNA,从而 获得了所需要的目的基因。
(3)图中②代表的是_限__制__性__核__酸__内___切__酶 酶,在它的作用下将质粒切出_黏__性____
末端。
(4)图中③代表重组DNA,含
___胰__岛__素__基__因____基因。
(5)图中④表示的过程是
_重__组__D__N_A__导__入__受__体__细__胞_。为使此过
程顺利进行,一般需将大肠杆菌用
___氯___化__钙______处理,以增大其细胞 壁的_____通__透__性_____。 (6)图中⑤表示_目___的__基__因______随
大肠杆菌的繁殖而进行增殖,此基因在 大肠杆菌内表达的标志是
__大__肠__杆___菌__能__产__生__人__的__胰__岛__素___。
的能够合成胰岛素的基因与大肠杆
菌的DNA分子重组,并且在大肠杆 菌中表达成功。如右图,请据图回
答问题。
(1)此图表示的是采取人___工_合成目的 基因的方法获取_胰___岛_素__(__目__的__)_
的过程。
(2)图中①DNA是以_胰__岛__素__m__R__N_A 为模板,_逆__转__录__形成单链DNA,
(3)进行基因工程操作一般要经过的四个步 骤是:_目__的__基__因_的__获__取__;基__因__表_达__载__体__的__构_建__; _将_目__的__基__因__导__入_受__体__细__胞_;目__的__基_因__的__检__测__与__鉴_定。
1.3 基因工程的应用
§1.3基因工程的应用
第一步:发现人体正常ada基因克隆后用来替换反转录病毒的原 有基因,构建重组载体;
第二步:从SCID病人体内分离出免疫系统有缺陷的T淋巴细胞
第三步:将这些T淋巴细胞与携带了正常ada基因的反转录酶病毒混合在一起,让
病毒感染T淋巴细胞,使正常的ada基因扩增并插入到T细胞的基因中;

第四步:在实验室中通过细胞培养并确认转入的基因成功表达后,用注射器将成
植 性 抗病 抗病毒 —病毒外壳蛋白/复制酶基因

抗真菌 —几丁质酶/抗毒素合成基因基因

抗逆

工 程
粮食
问题 大豆、玉米、大麦、小麦
解决
①导入含必须AA多Pro的编码基因 ②改变AA合成过程中关键酶活性
改善 品质
果蔬
问题 难保鲜
解决 控制番茄成熟的基因 (延迟番茄成熟)
观赏花卉 问题 颜色单调,变色困难
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