植物组织培养中MS培养基的配置步骤

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方（一）母液配制与保存配制培养基时，如果每次配制都要按着杨成分表依次称量，既费时，又增加了多次称量误差。

为了提高配制培养基的工作效率，一般将常用的基本培养基配制成10～200倍，甚至1000倍的浓缩贮备液，即母液。

母液贮存于冰箱中，使用时，将它们按一定的比例进行稀释混合，可多次使用，并在配制较多数量的培养基时，降低工作强度，也提高试验的精度。

基本培养基的母液有四种：大量元素（浓缩20倍），微量元素（浓缩100倍），铁盐（浓缩200倍），除蔗糖之外的有机物质（浓缩100倍）1大量元素配制大量元素母液时要分别称量，分别溶解，在定容时按表1中的序号依次加入容量瓶中，以防出现沉淀。

倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保存。

2微量元素母液在配制微量元素母液时，也应分别称量和分别溶解，定溶时不分先后次序，可随意加入溶量瓶中定容（表2），一般不会出现沉淀现象。

倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保有存。

3铁盐母液由于铁盐无机化合物不易被植物吸收利用，只有基螯合物才能被植物吸收利用，因此需要单独配成螯合物母液表3）。

配制方法：称取5.56g硫酸亚铁和7.46g乙二胺乙酸二钠，分别用450ml的去离子水溶解，分别适当加热不停搅拌，分别溶解后将硫酸亚铁溶液缓缓加入到乙二胺四乙酸二钠溶液中，将两种溶液混合在一起，最后用去离子水定溶于1000mL，倒入棕色贮液瓶中，贴好标签和做好记录后放入冰箱内保存。

先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。

4有机物母液按表4中的量分别称取各种有机物，分别溶解后，用蒸馏水或去离子水定容于1000mL，放入细口瓶配成1 mg/ml 。

各100 ml。

6-苄基腺嘌呤（6-BA）用0.5 N的HCl加热溶解。

萘乙酸（NAA）用少量无水乙醇溶解，再加蒸馏水。

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方（一）母液配制与保存配制培养基时，如果每次配制都要按着杨成分表依次称量，既费时，又增加了多次称量误差。

为了提高配制培养基的工作效率，一般将常用的基本培养基配制成10～200倍，甚至1000倍的浓缩贮备液，即母液。

母液贮存于冰箱中，使用时，将它们按一定的比例进行稀释混合，可多次使用，并在配制较多数量的培养基时，降低工作强度，也提高试验的精度。

基本培养基的母液有四种：大量元素（浓缩20倍），微量元素（浓缩100倍），铁盐（浓缩200倍），除蔗糖之外的有机物质（浓缩100倍）1大量元素配制大量元素母液时要分别称量，分别溶解，在定容时按表1中的序号依次加入容量瓶中，以防出现沉淀。

倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保存。

2微量元素母液在配制微量元素母液时，也应分别称量和分别溶解，定溶时不分先后次序，可随意加入溶量瓶中定容（表2），一般不会出现沉淀现象。

倒入磨口试剂瓶中，贴好标签和做好记录后，可常温保存或放入冰箱内保有存。

3铁盐母液由于铁盐无机化合物不易被植物吸收利用，只有基螯合物才能被植物吸收利用，因此需要单独配成螯合物母液表3）。

配制方法：称取5.56g硫酸亚铁和7.46g乙二胺乙酸二钠，分别用450ml的去离子水溶解，分别适当加热不停搅拌，分别溶解后将硫酸亚铁溶液缓缓加入到乙二胺四乙酸二钠溶液中，将两种溶液混合在一起，最后用去离子水定溶于1000mL，倒入棕色贮液瓶中，贴好标签和做好记录后放入冰箱内保存。

先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。

4有机物母液按表4中的量分别称取各种有机物，分别溶解后，用蒸馏水或去离子水定容于1000mL，放入细口瓶配成1 mg/ml 。

各100 ml。

6-苄基腺嘌呤（6-BA）用0.5 N的HCl加热溶解。

萘乙酸（NAA）用少量无水乙醇溶解，再加蒸馏水。

组织培养实验MS培养基及配制注意事项

一、MS培养基母液的配制注意：1．除CaCl2·2H2O单独配制外，大量元素按照使用时高10倍的数值称取，将各种化合物称量后，分别用少量水在不同的容器内充分溶解，然后在500ml烧杯中按顺序加入各溶液，加适量蒸馏水，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

A.制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

B.称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

二、培养基配制和灭菌一．养培养基配制程序(一).母液吸取量的计算配制培养基的升数母液吸取量= 母液体积（CC）×——————————母液浓缩倍数（二）各种母液按顺序编号排列A.大量元素；B.CaCl2.2H2O；C.微量元素；D.铁盐；E.有机物；F．生长素萘乙酸（NAA）：配制0.5mg/ml的NAA称取50mg ， NAA用少量95% 酒精溶解后加蒸馏水定容至1000ml；G..细胞分裂素、激动素（KT）配制0.5mg/ml的KT 称50mgKT 用少量1N HCL溶解后,加蒸馏水定容至100ml。

MS培养基配制

培养基的配制植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。

MS培养基的配制包括以下步骤。

培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。

这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。

现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。

大量元素(母液Ⅰ) mg／LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸400以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。

其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O 分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至5.5，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。

各种母液配完后，分别用玻璃瓶贮存，并且贴上标签，注明母液号、配制倍数、日期等，保存在冰箱的冷藏室中。

ms 培养基促进生根的方法

ms 培养基促进生根的方法
在植物组织培养中，生根是一个重要的步骤。

MS培养基是一种经典的组织培养基，也是促进生根的主要培养基之一。

以下是使用MS培养基促进生根的方法：
1. 准备MS培养基：将MS培养基粉末加入蒸馏水中，搅拌均匀，然后加热至溶解。

调整pH值至5.8，并加入植物生长素（如IBA或NAA）以促进生根。

2. 准备植物材料：收集植物茎段、叶片或愈伤组织，进行消毒处理。

3. 制备生长环境：将准备好的MS培养基倒入无菌培养瓶中，然后将植物材料插入培养基中。

4. 培养条件：将培养瓶置于适宜的光照条件下（如光照强度为50-100μmol/m2s），温度保持在适宜范围内（如20-25℃）。

5. 观察和处理：观察植物材料的生长情况，将生长健壮的组织转移到新的MS培养基中，继续培养。

以上是使用MS培养基促进生根的基本方法。

不同植物材料和生长条件可能需要调整培养基配方和培养条件。

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MS培养基的配制与灭菌 11

MS培养基的配制与灭菌一、目的要求1．熟悉组培母液吸取量的计算、琼脂、蔗糖的配制、各种母液的吸取、pH的调节培养基的分装与包装。

2．掌握高压蒸汽灭菌锅的使用方法。

二、仪器与试剂1.器材：高压灭菌锅、移液管、量筒、培养瓶（三角瓶）、烧杯、玻璃棒、标签、pH试纸、电炉、电子天平。

2.试剂：配制MS培养基的各种母液、生长调节剂、琼脂、蔗糖、自来水、浓度为0.1 mol/L和0.5mol/L NaOH以及浓度为0.1 mol/L和0.5mol/L的HCl。

三、方法步骤（一）MS固体培养基的配制1.按实验说明进行MS大量元素的称量配置成1000毫升的大量元素母液配置于试剂瓶中。

2.按培养基配方计算用量，称好凝固剂和糖的用量，取出母液，按顺序放好，准备好称量用具和溶解用具。

3.在容器内加入相当配制量1/3的水，加入琼脂溶煮，再根据计算依次加入大量元素、微量元素、铁盐、有机物、生长调节物质等，最后加入蔗糖并搅拌均匀,加水定容，搅拌均匀。

4.调整pH值，使PH为5.5～6.0。

5.尽快分装，培养基占容器的1/5--1/4为宜，尽量避免培养基沾到容器内壁或容器口，标记日期。

6.封口。

（二） MS固体培养基的灭菌——高压蒸汽灭菌（湿热灭菌法）1.洗涤：把组织培养基用的培养皿、三角瓶、试管等玻璃器皿进行彻底清洗。

自然晾干或烘箱干燥。

2.包扎：用纱布把培养皿包扎好。

3.装水：在高压灭菌锅内装入一定量的水。

4.装物品：在灭菌锅内放入含培养基的培养瓶或三角瓶，以及包扎好的玻璃器皿。

5．灭菌：于温度为121℃时，维持20分钟，即可达到灭菌的目的。

四、注意事项1．6-BA，NAA用量甚微，取用时要使用移液管，移液管越小越精确。

2．注意配制大量元素母液时防止钙盐与硫酸盐和磷酸盐产生沉淀；3．铁盐母液用棕色瓶保存。

注意pH的调节；4．灭菌时间和压力、温度的控制；5．分装要干净，灭菌时锥形瓶尽可能放正，不要使培养基流出。

6．若灭菌时间过长，会使培养基中的某些成分变性失效。

ms培养基配制方法

MS培养基的配制2005-12-22 23:49:26 阅读7485次植物组织培养中常用的一种培养基是MS培养基。

MS培养基的配制包括以下步骤。

培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的20倍或200倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。

这样每次使用时，取其总量的1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液。

现将制备培养基母液所需的各类物质的量列出，供配制时使用。

大量元素(母液Ⅰ) mg／LNH4NO3 33 000KNO3 38 000CaCl2·2H2O 8 800MgSO4·7H2O 7 400KH2PO4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3 1 240MnSO4·4H2O 4 460ZnSO4·7H2O 1 720Na2MoO4·2H2O 50CuSO4·5H2O 5CoCl2·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇(维生素B6) 100盐酸硫胺素(维生素B1) 100甘氨酸400以上各种营养成分的用量，除了母液Ⅰ为20倍浓缩液外，其余的均为200倍浓缩液。

上述几种母液都要单独配成1 L的贮备液。

其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法是：每种母液中的几种成分称量完毕后，分别用少量的蒸馏水彻底溶解，然后再将它们混溶，最后定容到1 L。

母液Ⅲ的配制方法是：将称好的FeSO4·7H2O和Na2-EDTA·2H2O分别放到450 mL蒸馏水中，边加热边不断搅拌使它们溶解，然后将两种溶液混合，并将pH调至55，最后定容到1 L，保存在棕色玻璃瓶中。

植物组织培养MS培养基配方

植物组织培养MS培养基配方MS培养基主要包括两部分：无机盐和有机物。

无机盐部分的配方如下：1.氮源：氮源通常由硝酸铵（NH4NO3）、硝酸钾（KNO3）和硫酸铵（（NH4）2SO4）组成。

氮源的浓度通常为20-30mM。

2.磷酸盐：磷酸盐通常由二氢二钠磷酸盐（NaH2PO4）组成，浓度为10mM。

3.钠盐：MS培养基中含有钠盐，通常由硝酸钠（NaNO3）和硝酸钾（KNO3）组成。

钙盐的浓度为2.0mM，钾盐的浓度为1.0mM。

4.钠盐：MS培养基中含有钠盐，通常由硝酸钠（NaNO3）和硝酸钾（KNO3）组成。

钙盐的浓度为2.0mM，钾盐的浓度为1.0mM。

5.硫酸镁：硫酸镁（MgSO4）的浓度为1.0mM。

6.磷酸铵铁：磷酸铵铁（FeSO4·(NH4)2SO4）的浓度为27.8μM。

7.各种微量元素：包括锌、铜、锰、硼、钼、钴和镍等微量元素。

这些微量元素的浓度通常在微摩尔（μM）级别。

有机物部分的配方如下：1.蔗糖：蔗糖是植物培养基中最常用的碳源，浓度通常为30g/L。

2. 维生素：通常使用的维生素有二硝基地巴泼甲素（2,4-D）和吲哚-3-乙酸（IAA）。

它们的浓度通常在0.1-2.0 mg/L之间。

3. 激素：常用的激素包括植物生长素（BA）和乙烯利（2,4-D）。

它们的浓度通常在1.0-10.0 mg/L之间。

4.混合物：还可以加入一些有机物混合物，如胆固醇、烟酸和核酸酸等。

值得注意的是，这只是MS培养基的一个基本配方，根据具体的研究目的和植物种类的不同，还可以对该配方进行一些调整和优化。

总结起来，MS培养基是一种常用的植物组织培养基，主要用于植物生长和增殖。

其配方包括无机盐和有机物两部分，无机盐包括氮源、磷酸盐、钙盐、镁盐、磷酸铵铁和微量元素等；有机物包括蔗糖、维生素和激素等。

通过适当调整这些配方的浓度和比例，可以实现不同植物的生长和增殖需求。

ms培养基的制作流程

ms培养基的制作流程一、准备实验器材和试剂制作MS培养基需要准备以下实验器材和试剂：1. 称量仪：用于准确称量试剂。

2. 称量纸：用于放置待称量的试剂。

3. 密封袋：用于保存称量好的试剂。

4. 移液器和移液管：用于准确分配试剂。

5. 移液枪：用于混合试剂。

6. 培养瓶：用于保存制作好的培养基。

7. MS培养基盐基组分：包括氮源、磷源、钾源、微量元素、维生素和植物激素等。

二、制作MS培养基1. 称量盐基组分：根据所需的培养基体积，按照MS培养基的配方比例，准确称量盐基组分。

将盐基组分分别称量到称量纸上，并放入密封袋中保存。

2. 配制MS盐基溶液：依次取出密封袋中的盐基组分，使用移液器分别加入适量的去离子水中，并充分溶解。

注意，每次加入盐基组分后，应充分搅拌溶解后再加入下一个盐基组分，以确保完全溶解。

3. 调整pH值：使用pH计测量溶液的pH值，如果pH值不在所需范围内（通常为5.7-5.8），可以使用盐酸（HCl）或氢氧化钠（NaOH）调节pH值。

4. 加入糖和琼脂糖：根据实验需要，可以在溶液中加入糖（如蔗糖或葡萄糖）和琼脂糖。

糖提供能量和碳源，琼脂糖用于凝固培养基。

5. 补充植物激素和其他添加剂：根据实验需要，可以在溶液中添加适量的植物激素（如激素BA、IAA等）和其他必要的添加剂（如抗生素、抗氧化剂等）。

6. 调整体积和混合：根据实验需要，使用移液器向溶液中加入适量的去离子水，调整溶液的体积。

然后使用移液枪或移液器充分混合溶液，确保各组分均匀分布。

7. 灭菌：将制备好的MS培养基倒入培养瓶中，盖紧盖子。

然后使用高压灭菌锅或自动培养基灭菌器进行灭菌处理。

灭菌条件通常为121℃，压力为15 psi，持续20-30分钟。

8. 储存：灭菌后的MS培养基可以在常温下储存，避免阳光直射。

根据需要，可以在每个培养瓶上标记培养基配制日期、成分和有效期等信息。

以上就是制作MS培养基的具体流程。

制作过程中需要注意实验室卫生和操作规范，确保培养基的质量和可靠性。

MS培养基的配制

一、MS培养基的配制1. 培养基母液的配制和保存MS培养基含有近30种营养成分，为了避免每次配制培养基都要对这几十种成分进行称量，可将培养基中的各种成分，按原量的10倍或100倍分别称量，配成浓缩液，这种浓缩液叫做培养基母液。

2. 按配方表配制MS培养基母液：大量元素50×，微量元素配100×，铁盐、有机成分配制成100×，母液贮存于4℃的冰箱中。

激素配成浓度为0.1mg/mL.3. 配制各种母液是，成分顺序加入，上一成分溶解后再加下一成分。

钙液和铁盐都单独配制。

生长素配制时，先用微量1MNaOH溶解，再以蒸馏水定容；细胞分裂素配制时，先用微量0.1MHCl溶解，再以蒸馏水定容。

二、MS母液配制取作表序号药品名称MS量(mg/L）扩大倍数母液量(g)定容取作量(mg/L)甲液NH4NO3KNO3MgSO4.7H20KH2PO41650190037017050×41.2547.59.254.25500ml 20钙液无水CaCl2440 100×11 500ml 20乙液MnSO4.4H2O或MnSO4. H2OZnSO4.7H2OH3BO3KI22.316.98.66.20.83100× 1.120.850.430.310.0415500ml 10铁盐Na2.EDTA.2H2OFeSO4.7H2037.227.8100× 1.861.39500ml 10有机成分盐酸吡哆醇(VB6)烟酸甘氨酸0.50.52100×0.0050.0050.02100ml 10丙液ⅠNa2MoO4.2H2O.2H2OCuSO4.5H2OCoCl2.6H2O0.250.0250.025100×0.01250.001250.00125500ml 10丙液Ⅱ肌醇100 100× 2 200ml 10丙液Ⅲ盐酸硫胺素(VB1) 0.4 50×0.02 100ml 2附注琼脂5.5-6.5g/L 蔗糖30g/LpH5.8-6.2备注：1钙液的母液量由于易沉淀所以取11g2丙液Ⅰ由于取的量太少所以先去12.5mg,溶于10mL水，再取1mL溶液稀释三、注意事项1、药品的质量问题：为了避免杂质及有害物质对组织培养的影响，必须注意药品质量，国内药品采用国际上通用标准，分为：一级，即保证试剂、优质纯试剂Guaranteed Reagent, GR级；二级，即分析纯试剂，Analytical Reagent, AR级；三级，即化学纯试剂，Chemical Pure, CP级；四级，即实验试剂，Laboratory Reagent, LR级。

配制ms培养基实验报告

配制ms培养基实验报告配制MS培养基实验报告引言：培养基是生物学实验中必不可少的一种工具，它提供了细胞生长所需的营养物质和环境条件。

在植物细胞培养中，MS培养基是最常用的一种基础培养基，它由Murashige和Skoog于1962年首次提出，并被广泛应用于植物组织培养和植物生理研究中。

本实验旨在通过配制MS培养基，深入了解其成分及配制方法。

一、材料与方法：1. 材料：- 水溶性盐类：硝酸钙、硝酸钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硼酸、锰酸钾、锌硫酸、硫酸铜、钼酸铵- 无机盐类：硝酸铵、磷酸二氢钾、硝酸钠、硫酸钾、硫酸铵- 有机物：肌酸、葡萄糖、维生素B5、天门冬氨酸、吲哚乙酸- 植物激素：植物生长素、植物生长素酸、植物生长素酯、植物生长素酸钠- pH调节剂：氢氧化钠、盐酸- 琼脂：用于凝固培养基2. 方法：1) 将硝酸钙、硝酸钾、硫酸镁、硫酸亚铁、硼酸、锰酸钾、锌硫酸、硫酸铜、钼酸铵分别称取适量，溶解于蒸馏水中，得到无机盐溶液A。

2) 将硝酸铵、磷酸二氢钾、硝酸钠、硫酸钾、硫酸铵分别称取适量，溶解于蒸馏水中，得到无机盐溶液B。

3) 将肌酸、葡萄糖、维生素B5、天门冬氨酸、吲哚乙酸分别称取适量，溶解于蒸馏水中，得到有机物溶液。

4) 将植物生长素、植物生长素酸、植物生长素酯、植物生长素酸钠分别称取适量，溶解于蒸馏水中，得到植物激素溶液。

5) 将无机盐溶液A、无机盐溶液B、有机物溶液、植物激素溶液按一定比例混合，加入适量的琼脂，调节pH值至适宜范围。

6) 高压灭菌培养基，使其达到无菌状态。

二、结果与讨论：通过以上步骤，我们成功配制出了MS培养基。

MS培养基的配方中包含了多种无机盐类、有机物和植物激素，这些成分为细胞生长提供了必要的营养物质和信号物质，保证了细胞的正常生长和分化。

其中，无机盐类的添加对于细胞的生长起到了重要的作用。

硝酸钙、硝酸钾等提供了细胞所需的氮源和钾源，硫酸镁和硫酸亚铁则提供了细胞所需的镁和铁等微量元素。

MS培养基配制方法-new

MS 培养基一、大量元素母液1：大量A母液2：大量B母液3：Fe盐注：配制顺序如下1。

称取3。

73 g Na2—EDTA•2H2O溶解于200 ml去离子水中,并置于70℃预热(A）；2. 称取2.78 g FeSO4•7H2O溶解于200 ml去离子水中（B）;3. 将B缓慢倒入A中混合，边倒边搅动,置于70 ℃水浴锅中螯合2 h；4. 冷却后定容至1 L。

二、微量元素母液4：微量三、有机物质母液5：有机（不含肌醇）℃注:配固体培养基可在调pH后加适量Agar或Phytagel；肌醇也可加入有机母液。

四、抗生素和激素母液试剂名称配制方法母液浓度Amp（氨苄青霉素) 双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Km(卡那霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌50 mg/ ml Str（链霉素）双蒸水溶解,定容，过滤灭菌50 mg/ ml Cb（羧苄青霉素）双蒸水溶解，定容，过滤灭菌250 mg/ ml 6-BA (6-苄基嘌呤) 1M NaOH或盐酸溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml NAA（萘乙酸) 1M NaOH溶解，双蒸水定容，高压灭菌 1 mg/ ml IAA 95% 乙醇溶解,双蒸水定容，过滤灭菌 1 mg/ ml五、乙酰丁香酮(Acetone—syringone，AS）称取196。

2 mg AS用10 ml DMSO溶解，母液浓度100 mM，-20℃避光保存,工作浓度100 ～200 μM六、MS溶液的混合5种母液分别依次加入到800 ml蒸馏水中,混匀后加入肌醇、蔗糖和能高压灭菌的激素（6-BA和NAA）,定溶至1000 ml，用1M NaOH调pH至5.8。

最后加Phytagel （Sigma)4.4g或Agar 10g。

灭菌完后，在培养基凝固前加入AS或抗生素及不能高压灭菌的激素(IAA）.。

MS培养基的配置

MS培养基的配置一、母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。

优点：（1）保证各物质成分的准确性；（2）便于配置时快速移取；（3）便于低温保藏。

1、MS大量元素母液（50X）称10升量溶解在200 ml蒸馏水中。

配1升培养基取20 ml。

注：CaCl2·2H2O单独配置2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

注：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0．25 mg的量。

3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

注：配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。

混合时，先取一种置容量瓶（烧杯）中，然后将另一种成分逐加逐剧烈震荡，至产生深黄色溶液，最后定容，保存在棕色试剂瓶中。

4、MS有机物母液（200X）称10升量溶解在50ml蒸馏水中。

配1升培养基母液5ml。

二、MS固体培养基的配制1、将配制好的MS培养基母液从冰箱中取出，按顺序排列，并逐一检查是否沉淀或变色，避免使用已失效的母液。

2、取少量的蒸馏水（约为配制培养基量的2/3）加入烧杯中。

注意：配500ml培养基用1000ml烧杯。

3、按母液顺序和规定量，用量筒、移液管或微量移液器取母液，依次放入烧杯中。

每1000ml培养基，需要：MS大量元素母液 20mlMS微量元素母液 10mlMS铁盐母液 10mlMS有机物母液 5ml4、通过计算，用微量移液器取所需的各种生长调节剂母液。

5、加入蔗糖（30g/L），溶解。

6、定容：用容量瓶。

7、调pH值：用0.1 N 和0.5N 的NaOH，一般pH=5.8。

注意：①经高温高压灭菌后，培养基的pH值会下降0.2—0.8，故调整后的pH值应高于目标pH值0.5个单位。

MS培养基配制流程

MS培养基配制流程母液1母液2 氯化钙母液3先分别溶解（每个试剂溶于120ml水，需微波炉加热）再混合定容（棕色瓶）注意：1) Na2MoO4·2H2O可按10倍量（62.5 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml（即含6.25 mg的量），加入到母液4中; 2) CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按100倍量（62.5 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取1ml，（即含0．625 mg 的量），加入到母液中。

母液6肌醇四、MS溶液的混合：配制MS培养基时，每1000ml培养基取：分别依次加入到800ml蒸馏水中，20g蔗糖定溶至1000ml，用5N NaOH调PH到5.8。

用500ml的锥形瓶分装（琼脂粉为0.8%，即每个锥形瓶内加2.4g琼脂粉，然后装入300ml MS溶液）。

附：NaOH、HCl溶液的配置：另配100ml 5N NaOH，4N HCl用于调节PH值。

（20g NaOH 定容至100ml的蒸馏水中。

34.48ml HCl定容至100ml的蒸馏水中。

MS培养基广泛用于植物组织培养。

除基本的化学药品配制要领外，MS培养基的配制还有一定的特殊要求，笔者试将其总结为“ 五点注意”，描述如下。

1 母液配制必须严格分类配制高浓度的母液是植物组织培养的基本功。

配制母液的目的，除了多次取用、节省实验准备的时间外，还有抑制杂菌生长的作用。

高浓度的母液能够有效地抑制细菌与霉菌的生长，加上低温环境( 4℃) ，能够大大增加培养基的存放时间( 一年左右) 。

一般而言，培养基中的各个成分可以按照表1的分类方式配成母液。

母液分类的依据，是要避免MS培养基中某些成分发生沉淀反应。

例如，如果将全部的大量元素混合在一起配制，则KH2PO4和CaCl2易产生Ca3( PO4)2沉淀，而CaC12和 MgSO4将生成CaSO4沉淀。

除上述成分外，还必须加上蔗糖、琼脂以及激素，才构成用于组织培养的MS培养基。

MS培养基的配置

MS培养基的配置一、母液的配制母液是欲配制培养基的浓缩液，一般配成比所需浓度高10—100倍。

优点：（1）保证各物质成分的准确性；（2）便于配置时快速移取；（3）便于低温保藏。

1、MS大量元素母液（50X）称10升量溶解在200 ml蒸馏水中。

配1升培养基取20 ml。

化学药品1升量10升量①NH4NO31650 mg/L 16．5g②KNO31900 mg/L 19．0g③CaCl2·2H2O440 mg/L 4．4g④MgSO4·7H2O370 mg/L 3．7g⑤KH2PO4170 mg/L 1．7g注：CaCl2·2H2O单独配置2、MS微量元素母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

化学药品1升量10升量①MnSO4·4H2O（MnSO4·H2O）22．3 mg/L（21．4 mg/L）223mg②ZnSO4·7H2O8．6 mg/L 86mg③CoCl2·6H2O0．025mg/L 0．25mg④CuSO4·5H2O0．025 mg/L 0．25mg⑤Na2MoO4·2H2O0．25 mg/L 2．5mg⑥KI 0．83 mg/L 8．3 mg⑦H3BO36．2 mg/L 62 mg注：CoCl2·6H2O和CuSO4·5H2O可按10倍量（0．25 mgX10=2．5 mg）或100倍量（25 mg）称取后，定容于100ml水中，每次取10ml或1ml，即含0．25 mg的量。

3、MS铁盐母液（100X）称10升量溶解在100ml蒸馏水中。

配1升培养基母液10ml。

化学药品1升量10升量Na2·EDTA37．3 mg/L 373 mgFeSO4·7H2O27．8 mg/L 278 mg注：配制时，两种成分分别溶解在少量蒸馏水中，其中EDTA盐较难完全溶解，可适当加热。

MS培养基的配制,灭菌等注意事项

一、MS培养基母液注意：1．大量元素按照使用时高10倍的数值称取，分别将各种化合物称量后，除CaCl2·2H2O单独配制外，其余化合物混合在500ml 烧杯中加适量蒸馏水溶解，用玻璃棒搅拌促溶，倒入1000ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度，置小口瓶中保存，贴上标签注明化合物名称（或编号），浓缩倍数，配制日期和配制者姓名，CaCl2·2H2O配制同上置于另一小口瓶中。

2．微量元素母液的配制按要求浓缩100倍的数值称取，分别将各种化合物称量除铁盐（FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O）作为一组单独配制外，其余化合物可混合置于烧杯内加少量蒸馏水溶解后，定容在1000ml容量瓶中，置小口瓶中保存，贴上标签。

3．铁盐配制将FeSO4·7H2O和Na2-EDTA.2H2O分别溶于450ml蒸馏水中，加热，（很重要）不断搅拌，溶解后，两液混合，调PH至5.5加水定容至1000ml，置于小口瓶中，贴上标签。

4．有机物母液配制，按母液要求浓缩50倍，除蔗糖按3%单独临时称量外，其余分别称量后，溶解，定容在500ml容量瓶中，置于小口瓶中保存，贴上标签。

5．母液最好在2~4℃的冰箱中贮存，特别是有机类物质，贮存时间不宜过长，无机盐母液最好在一个月内用完，如发现有霉菌和沉淀产生，就不能再使用。

1．制备母液和营养培养基时，所用蒸馏水或无离子水必须符合标准要求，化学药品必须是高纯度的（分析纯）。

2．称量药物采用高灵敏度的天平，每种药品专用一药匙。

．生长调节剂母液配制：为了操作方便，节约时间，生长调节剂也可如同配制母液一样，先配成原液，这样配制培养基时只要稍加计算，按需要量取即可。

不同药品在配制时若不溶于水，可用少量不同的溶剂先溶解，萘乙酸（NAA），吲哚乙酸（IAA）,赤霉素（GA3），2，4-D等生长素和玉米素（ZT）可先用少量95%酒精溶解，然后加水，如溶解不完全再加热。

ms基本培养基母液的配制方法

ms基本培养基母液的配制方法一、准备所需材料1. 酸性植物激素溶液：包括吲哚乙酸（IAA）、纯度较高的激素（如6-苄基腺嘌呤，BA）等。

2. 碱性植物激素溶液：如生长素（GA3）等。

3. 无机盐溶液：包括硝酸铵、硝酸钾、磷酸二氢钾、硫酸镁、硫酸钾、硼酸、锌硫酸、硼酸等。

4. 维生素溶液：如次黄嘌呤核苷酸（NAA）等。

5. 蔗糖溶液：用于提供能量和碳源。

6. 琼脂：用于凝固培养基。

二、配制步骤1. 称取适量的无机盐溶液成分，按照MS基本培养基的配方比例将各种盐溶解在蒸馏水中，常用的浓度为1/2或1/4的MS培养基。

2. 将酸性植物激素溶液和碱性植物激素溶液分别加入到溶液中，注意控制激素的浓度。

3. 加入维生素溶液，按照配方比例加入到溶液中。

4. 加入适量的蔗糖溶液，用来提供能量和碳源。

5. 最后将琼脂加入到溶液中，搅拌均匀。

6. 调节溶液的pH值，通常为5.8左右。

7. 用蒸馏水补充溶液至总体积，并充分搅拌均匀。

8. 将配制好的培养基溶液进行高温高压灭菌处理，一般条件下为121摄氏度，压力为0.1MPa，持续20分钟。

三、注意事项1. 在配制过程中，要保持实验室卫生，使用无菌操作。

2. 使用高质量的试剂和蒸馏水，避免杂质的干扰。

3. 激素的浓度要根据实验需要进行调整。

4. 配制过程中要注意酸碱度的调节，尽量控制在5.8左右。

5. 琼脂的加入要充分搅拌均匀，避免结块。

6. 灭菌处理要按照规定的条件进行，确保培养基的无菌性。

通过以上步骤，我们可以成功地配制出MS基本培养基的母液。

这种培养基在植物组织培养、植物细胞和胚胎发生研究中起着重要的作用。

根据实验的需要，可以在母液的基础上进一步调整培养基的成分和浓度，以满足不同植物材料的培养要求。

希望以上内容对您有所帮助。

植物组织培养基配制

培养基的配‎制植物组织培‎养中常用的‎一种培养基‎是MS培养‎基。

MS培养基‎的配制包括‎以下步骤。

培养基母液‎的配制和保‎存MS培养基‎含有近30‎种营养成分‎，为了避免每‎次配制培养‎基都要对这‎几十种成分‎进行称量，可将培养基‎中的各种成‎分，按原量的2‎0倍或20‎0倍分别称‎量，配成浓缩液‎，这种浓缩液‎叫做培养基‎母液。

这样每次使‎用时，取其总量的‎1/20(50 mL)或1/200(5 mL)，加水稀释，制成培养液‎。

现将制备培‎养基母液所‎需的各类物‎质的量列出‎，供配制时使‎用。

大量元素(母液Ⅰ) mg／LNH4NO‎333 000KNO3 38 000CaCl2‎·2H2O 8 800MgSO4‎·7H2O 7 400KH2PO‎4 3 400微量元素(母液Ⅱ)KI 166H3BO3‎ 1 240MnSO4‎·4H2O 4 460ZnSO4‎·7H2O 1 720Na2Mo‎O4·2H2O 50CuSO4‎·5H2O 5CoCl2‎·6H2O 5铁盐(母液Ⅲ)FeSO4‎·7H2O 5 560Na2-EDTA·2H2O 7 460有机成分(母液Ⅳ)ⅣA肌醇20 000ⅣB烟酸100盐酸吡哆醇‎(维生素B6‎)100盐酸硫胺素‎(维生素B1‎)100甘氨酸400以上各种营‎养成分的用‎量，除了母液Ⅰ为20倍浓‎缩液外，其余的均为‎200倍浓‎缩液。

上述几种母‎液都要单独‎配成1 L的贮备液‎。

其中，母液Ⅰ、母液Ⅱ及母液Ⅳ的配制方法‎是：每种母液中‎的几种成分‎称量完毕后‎，分别用少量‎的蒸馏水彻‎底溶解，然后再将它‎们混溶，最后定容到‎1 L。

母液Ⅲ的配制方法‎是：将称好的F‎e SO4·7H2O和‎N a2-EDTA·2H2O 分‎别放到45‎0 mL蒸馏水‎中，边加热边不‎断搅拌使它‎们溶解，然后将两种‎溶液混合，并将pH调‎至5.5，最后定容到‎1 L，保存在棕色‎玻璃瓶中。

实验三、MS培养基的配制

实验三、MS培养基的配制一、目的要求使学生掌握MS培养基配制、灭菌的基本程序。

二、材料与用具配制MS培养基所需要的母液、药品、生长调节物质、天平、烧杯、量筒、蒸馏水、95%的酒精或0.1mol/L的NaOH、0.1mol/LHCL、三角瓶、培养瓶。

三、实验内容每组配制MS + 6-BA 1.0 mg/L 培养基1升四、方法步骤1. 准备工作：准备所需的母液、烧杯、量筒、移液管、玻棒、三角瓶（或其它容器）、橡皮筋、盖膜纸等物品。

2. 配制：①称取琼脂（6~10g/L）加入总量80%的水中，置小铝锅中加热，边加热边搅拌，防止糊底。

旺火煮开，再用文火加热，直至琼脂全部融化即清澈见底为度。

②称取蔗糖（30g/L），待琼脂完全溶解后加入。

③按需要量用移液管分别吸取各种母液及生长物质，在蔗糖后加入。

（大量元素母液50ml、微量元素母液1ml、铁盐母液10ml、有机物母液10ml。

④按配方移取6-BA母液）⑤定容至设定量⑥调PH值为5.8（用0.1N NaOH或0.1N HCl）3. 分装与封口配好的培养基要趁热分装，100ml的容器每瓶约装入30~40ml培养基，（占培养容器的1/4~1/3）。

分装时不要把培养基弄到管壁上，以免日后污染。

分装完成后及时用聚丙烯薄膜封口，并做好标记，写上培养基种类。

4、高压灭菌（1）打开锅盖，加水至水位线；（2）将已装好培养基的三角瓶装入锅内，然后盖上锅盖，对角旋紧螺丝（不能漏气）；（3）接通电源加热，加压前打开放气阀，放尽锅内的冷空气；（4）加压至压力达到1.1~1.4Mpa（121℃以上）保持20分钟后，停止加热；（5）切断电源使压力锅内的压力降至“0”时，打开放气阀排除剩余蒸汽，然后打开锅盖，取出培养基，放于平台上冷凝，待用。

四、作业(1) 培养基包括哪些成分?各有什么作用?(2) 简要说明MS培养基的基本组成?(3) 配制培养基时，为什么要先配母液?如何配制母液?。