植物组织培养中MS培养基的配置步骤
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项目:配置培养基
配方:1.MS
2.MS+6-BA0.5
3.MS+6-BA1
材料用具:一定数量的玻璃瓶,烧杯,移液管,量筒,烧杯,玻璃棒,电饭锅,高压灭菌锅,洗耳球,MS母液,6-BA0.5mg/L 植物生长调节物质母液,PH试纸,蔗糖,琼脂粉,标签等
添加物:蔗糖30g/L
琼脂粉7.5g/L——8g/L(注:美国琼脂量4.5g/L——5g/L)
PH值=5.6——5.8,可适当调高0.3左右。一般在出锅前进行调适。
基本步骤:1,根据所需配置的培养基量,用移液管从装有MS 母液的容器里吸取所需的母液量以及所需的6-BA0.5mg/L植物生长调节物质母液。注:不同的母液需要用不同的移液管吸取,切忌混用,以免母液被污染不纯
2,将吸取的母液依次注入量筒,注入蒸馏水定容
3,将电饭锅的电源插上,将溶液倒入,打开开关加温,并在适当的温度时分别加入蔗糖与琼脂,并用玻璃棒不断搅拌,使其均匀溶解。注:加入琼脂时,必须注意温度的掌握,不可过高。
4,在桌上将玻璃瓶按一定序列排好,将煮好的培养基
均匀倒入,并且盖好瓶盖,贴上标签,写上培养基的名称。
5,将培养基放入高压灭菌锅后,拧紧,并加适量的水。打开开关工作后,先让温度上升至120℃,保持20分钟左右,温度开始下降,整体灭菌需要一段较长时间(一般为2个小时左右)。
6,一段时间后,取出培养基,将那些瓶盖没盖好,已经感染的培养基处理掉。
7,做好一切后,打扫卫生,保持整体环境干净整洁。