浓缩血小板的研究进展
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解放军总医院第一附属医院 烧伤整形三科暨创面修复中心
赵帆 郝岱峰
内容
血小板简介及其功能 浓缩血小板及其应用人群的选择 浓缩血小板的制备方法及分类 浓缩血小板的激活及使用方法 浓缩血小板在创面修复中的作用 目前研究中存在的问题
血小板简介及功能
Platelet ultrastructure. [1] 血小板是血细胞中的一种，它是从骨髓 巨核细胞的细胞质脱落的的具有生物活 性的小块胞质，体积小，无细胞核，呈
牛凝血酶、人凝血酶、钙剂、凝血酶受体激活肽（TRAP）、 胶原、类凝血酶-巴曲酶、反复冻融、壳聚糖、纳秒脉冲电 场（nsPEF） ； 激活剂的浓度的选择 激活剂和浓缩血小板的比例 ① 影响细胞因子的释放时间 ② 影响细胞因子的释放量
15
Activat or
Representativ
e voltage and
浓缩血小板类型
PRP PRGF
PRP
. Classical manual platelet-rich
10
PRGF
PPGF: plasma poor in growth factors
PRGF: plasma rich Commonly dinesgcrroiwbethd 11
PRF
Choukroun’s
Non-activated In vitro three-dimensional tis
Activated versus Nonactivated
Schematic depiction of
the effect of
20
在创面修复中的作用
Growth Factor
Cytokines/Chemok
细胞因子在创面修复中的作用
This is true for bacteria like MSSA,
Group A Streptococcus, and
23
目前存在的问题
• 缺乏统一的浓缩血小板的制备标准
• 临床应用时能否激活仍存在争议，若激活 ，激活剂种类、浓度及其与浓缩血小板的 比例如何确定
• 无法确定有临床疗效的浓缩血小板中最适 的血小板的浓度
JP2000®
GLO PRP®
KYOCERA® Selphyl®
MyCells®
商业分离系统
Blood Vol(ml)
9-18 60 9
20-120 9-72 30-60 40 30-60
50
50
Centrifugation(No .of Spins) 1 1 1 2 1 2 2 1
2
2
PRP Vol (ml)
1
4-5×
Activator(+/-)
CaCl2 Trombin
None Trombin
CaCl2 CaCl2 None CaCl2 Trombin Bovine
Batroxobin
Activator:P Leukocytes(
RP
+/-)
1:10
-
1:10
+
1:10
-
1:10
+
1:10
-
1:10
+
[3]. Dohan Ehrenfest DM, Rasmusson L Albrektsson T. Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF). Trends Biotechnol 2009 27(3): 158-167
[6]. Everts PA, Knape JT, Weibrich G et al. Platelet-rich plasma and platelet gel: a review. J Extra Corpor Technol 2006 38(2): 174-187
[7]. Li H Li B. PRP as a new approach to prevent infection: preparation and in vitro antimicrobial properties of PRP, <http:// www. ncbi. nlm .nih.gov/pubmed/23609458> (2013).
current
tracing for
pulse electric
பைடு நூலகம்
field
condition 纳秒脉冲电场（Nanosecond Pulse Electric Field，
nsPEF）
used
to16
Non-activated Diabetic mouse full-thicknes1s7w
Non-activated Effects of platelet treatment1o8n
浓缩血小板
浓缩血小板（Platelets Concentrate）根据其临床用途可分为两类： 第一类：体内，是外科常用的成分输血制品，浓缩血小板一般用于血小板 减少，失血症状明显而又需手术者。
第二类：体外，常用于局部软组织和骨组织的修复，主要是应用血小板内 还有丰富的细胞因子，它们在参与创面的修复过程中发挥重要的作用。目 前文献中常见的有四种浓缩血小板类型，也可称为Platelet-Rich Preparation
参考文献
[1]. Yeaman MR. The role of platelets in antimicrobial host defense. Clin Infect Dis 1997 25(5): 951-968; quiz 969970
[2]. Dhurat R Sukesh M. Principles and Methods of Preparation of Platelet-Rich Plasma: A Review and Author's Perspective. J Cutan Aesthet Surg 2014 7(4): 189-197
The End
Thanks For Your Attention
[5]. Frelinger Iii AL, Torres AS, Caiafa A et al. Platelet-rich plasma stimulated by pulse electric fields: Platelet activation, procoagulant markers, growth factor release and cell proliferation. Platelets 20151-8
4-9 10 3 3-20 4-32 6 4 4-10 5 4-6
Platelet Concentration
1-1.5× 9.3× 2-3× 4-6× 2-3× 3-9× 1-18× 9×
1.6×
NS
55-110
1
NS
3-6×
20
2
1
5-9×
8.5
2
20
2
8
1
10
1
0.6
5-6×
2
7-8×
2
0.5×
1:10
+/-
1:10
NS
1:10
NS
1:10
+
Thrombin
1:10
NS
CaCl2 and
1:10
+
Thrombin
CaCl2 and
1:10
+
Thrombin
CaCl2
1:10
+
CaCl2
1:10
+
CaCl2 and
1:10
+
手工分离 Flow chart
浓缩血小板分类
L-PRP
P-PRP
platelet-rich fibrin
12
Structural Differences Schematic illustration of the matrix 13
浓缩血小板的激活
Activated versus Nonactivated
Activated
浓缩血小板的激活方式应该考虑以下三个方面： 血小板激活剂的种类
4
应用人群的选择
明确有传染病的患者，如乙肝、梅毒、艾
滋等；
肿瘤患者；
服用血小板抑制剂的或血小板功能存在障
碍的患者；如口服阿司匹
林、
制备
• 临床上常用的浓缩血小板主要通过两种方法制 备
① 商业的血小板分离系统 ② 手工分离 制备过程中的影响因素众多，主要包括以下几
方面： ① 患者之间的个体差异 ② 血液的采集：无菌原则、抗凝剂的选择（ACD-
Platelet Derived
ine
IL-6
Growth Factor, PDGF-
IL-8
AB/BB
PF-4
Transforming Growth
MIP-1α
Factor-beta, TGF-
RANTES
β1/2
21
生长因子在创面修复中的作用
Schem atic illustrat ion of the role of GFs during
[4]. Scherer SS, Tobalem M, Vigato E et al. Nonactivated versus thrombin-activated platelets on wound healing and fibroblast-to-myofibroblast differentiation in vivo and in vitro. Plast Reconstr Surg 2012 129(1): 46e-54e
A/CPD）、抗凝剂和血液的比例（1:10） ③ 离心次数： 单次离心和二次离心
Commercial System
Cascade ® GPS Ⅲ ACP® Smart PRP2® PRGF® Magellan® Angel® Genesis CS® Sequire® Platelex® Symphony ⅡPCS®
赵帆 郝岱峰
内容
血小板简介及其功能 浓缩血小板及其应用人群的选择 浓缩血小板的制备方法及分类 浓缩血小板的激活及使用方法 浓缩血小板在创面修复中的作用 目前研究中存在的问题
血小板简介及功能
Platelet ultrastructure. [1] 血小板是血细胞中的一种，它是从骨髓 巨核细胞的细胞质脱落的的具有生物活 性的小块胞质，体积小，无细胞核，呈
牛凝血酶、人凝血酶、钙剂、凝血酶受体激活肽（TRAP）、 胶原、类凝血酶-巴曲酶、反复冻融、壳聚糖、纳秒脉冲电 场（nsPEF） ； 激活剂的浓度的选择 激活剂和浓缩血小板的比例 ① 影响细胞因子的释放时间 ② 影响细胞因子的释放量
15
Activat or
Representativ
e voltage and
浓缩血小板类型
PRP PRGF
PRP
. Classical manual platelet-rich
10
PRGF
PPGF: plasma poor in growth factors
PRGF: plasma rich Commonly dinesgcrroiwbethd 11
PRF
Choukroun’s
Non-activated In vitro three-dimensional tis
Activated versus Nonactivated
Schematic depiction of
the effect of
20
在创面修复中的作用
Growth Factor
Cytokines/Chemok
细胞因子在创面修复中的作用
This is true for bacteria like MSSA,
Group A Streptococcus, and
23
目前存在的问题
• 缺乏统一的浓缩血小板的制备标准
• 临床应用时能否激活仍存在争议，若激活 ，激活剂种类、浓度及其与浓缩血小板的 比例如何确定
• 无法确定有临床疗效的浓缩血小板中最适 的血小板的浓度
JP2000®
GLO PRP®
KYOCERA® Selphyl®
MyCells®
商业分离系统
Blood Vol(ml)
9-18 60 9
20-120 9-72 30-60 40 30-60
50
50
Centrifugation(No .of Spins) 1 1 1 2 1 2 2 1
2
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PRP Vol (ml)
1
4-5×
Activator(+/-)
CaCl2 Trombin
None Trombin
CaCl2 CaCl2 None CaCl2 Trombin Bovine
Batroxobin
Activator:P Leukocytes(
RP
+/-)
1:10
-
1:10
+
1:10
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1:10
+
1:10
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1:10
+
[3]. Dohan Ehrenfest DM, Rasmusson L Albrektsson T. Classification of platelet concentrates: from pure platelet-rich plasma (P-PRP) to leucocyte- and platelet-rich fibrin (L-PRF). Trends Biotechnol 2009 27(3): 158-167
[6]. Everts PA, Knape JT, Weibrich G et al. Platelet-rich plasma and platelet gel: a review. J Extra Corpor Technol 2006 38(2): 174-187
[7]. Li H Li B. PRP as a new approach to prevent infection: preparation and in vitro antimicrobial properties of PRP, <http:// www. ncbi. nlm .nih.gov/pubmed/23609458> (2013).
current
tracing for
pulse electric
பைடு நூலகம்
field
condition 纳秒脉冲电场（Nanosecond Pulse Electric Field，
nsPEF）
used
to16
Non-activated Diabetic mouse full-thicknes1s7w
Non-activated Effects of platelet treatment1o8n
浓缩血小板
浓缩血小板（Platelets Concentrate）根据其临床用途可分为两类： 第一类：体内，是外科常用的成分输血制品，浓缩血小板一般用于血小板 减少，失血症状明显而又需手术者。
第二类：体外，常用于局部软组织和骨组织的修复，主要是应用血小板内 还有丰富的细胞因子，它们在参与创面的修复过程中发挥重要的作用。目 前文献中常见的有四种浓缩血小板类型，也可称为Platelet-Rich Preparation
参考文献
[1]. Yeaman MR. The role of platelets in antimicrobial host defense. Clin Infect Dis 1997 25(5): 951-968; quiz 969970
[2]. Dhurat R Sukesh M. Principles and Methods of Preparation of Platelet-Rich Plasma: A Review and Author's Perspective. J Cutan Aesthet Surg 2014 7(4): 189-197
The End
Thanks For Your Attention
[5]. Frelinger Iii AL, Torres AS, Caiafa A et al. Platelet-rich plasma stimulated by pulse electric fields: Platelet activation, procoagulant markers, growth factor release and cell proliferation. Platelets 20151-8
4-9 10 3 3-20 4-32 6 4 4-10 5 4-6
Platelet Concentration
1-1.5× 9.3× 2-3× 4-6× 2-3× 3-9× 1-18× 9×
1.6×
NS
55-110
1
NS
3-6×
20
2
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5-9×
8.5
2
20
2
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0.6
5-6×
2
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1:10
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1:10
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1:10
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1:10
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手工分离 Flow chart
浓缩血小板分类
L-PRP
P-PRP
platelet-rich fibrin
12
Structural Differences Schematic illustration of the matrix 13
浓缩血小板的激活
Activated versus Nonactivated
Activated
浓缩血小板的激活方式应该考虑以下三个方面： 血小板激活剂的种类
4
应用人群的选择
明确有传染病的患者，如乙肝、梅毒、艾
滋等；
肿瘤患者；
服用血小板抑制剂的或血小板功能存在障
碍的患者；如口服阿司匹
林、
制备
• 临床上常用的浓缩血小板主要通过两种方法制 备
① 商业的血小板分离系统 ② 手工分离 制备过程中的影响因素众多，主要包括以下几
方面： ① 患者之间的个体差异 ② 血液的采集：无菌原则、抗凝剂的选择（ACD-
Platelet Derived
ine
IL-6
Growth Factor, PDGF-
IL-8
AB/BB
PF-4
Transforming Growth
MIP-1α
Factor-beta, TGF-
RANTES
β1/2
21
生长因子在创面修复中的作用
Schem atic illustrat ion of the role of GFs during
[4]. Scherer SS, Tobalem M, Vigato E et al. Nonactivated versus thrombin-activated platelets on wound healing and fibroblast-to-myofibroblast differentiation in vivo and in vitro. Plast Reconstr Surg 2012 129(1): 46e-54e
A/CPD）、抗凝剂和血液的比例（1:10） ③ 离心次数： 单次离心和二次离心
Commercial System
Cascade ® GPS Ⅲ ACP® Smart PRP2® PRGF® Magellan® Angel® Genesis CS® Sequire® Platelex® Symphony ⅡPCS®