浓缩血小板的制备白膜法、富浆法

手工分离浓缩血小板(PC)的制备

Ⅰ.富含血小板血浆(PRP)法分离制备血小板法（富浆法）先将全血经轻离心，分离制备富含血小板血浆，之后将富含血小板血浆重离心，移去上层血浆，下层沉淀即为浓缩血小板。在第二次重离心制备浓缩血小板前，可将第一次轻离心获得的富含血小板血浆进行白细胞过滤处理。具体操作如下：

1.采血

2.轻离心成分分离制得红细胞、富含血小板血浆。

建议离心条件：温度：22℃±2℃，加速：9 r/min，减速：3 r/min，200ml袋离心力为478g，400ml袋离心力为850g，离心时间为8分钟。（贺利氏离心机）

轻离心,使红细胞（RBC）、白细胞（WBC）沉淀，上层血浆的大部分血小板（PLT）尚未沉淀，分离此血浆即为富含血小板血浆，约含全血中70%的PLT（根据调节离心机的离心力和时间有所不同）。

3.重离心富含血小板血浆。

第二次离心：温度：22℃±2℃，加速：9 r/min，减速：3 r/min，离心力2988g，离心时间为10分钟。浓缩血小板1个单位留浆20－25ml，2个单位留浆30－45ml。

4.挤去上层贫血小板血浆, 再回部分贫血小板血浆置血小板内, 形成血小板悬液，静置1.5-2h；8h内制备必须完毕。

5.血小板悬液振荡保存，等待检测报告,不合格剔除。

6.根据需求选择合格血小板悬液进行汇集过滤。

7.开放式6h内输完。

8.密闭式振荡保存（无菌接驳，血小板贮存袋，细菌监测）。

富浆法的特点：PRP-PC质量不稳定，WBC残留量高，输洼安全性差，反复输注常会诱发血小板输注无效。

Ⅱ.白膜(BC)法分离制备血小板法

全血首先经重离心后分离白膜层，将白膜层再经轻离心后，去除红细胞和白细胞，即得浓缩血小板。具体操作如下：

1.采血

2.成分分离并制备白膜得少白红细胞（白细胞去除率约85 %）、血浆、白膜。

建议离心条件：温度：22℃±2℃，400ml袋离心力转速2515转/2100g，离心时间为14分钟。

3.分离白膜层，约含全血中90%的PLT，室温静置至少4h，可保存24h。

目视挑选白膜，发生了凝聚及白膜太薄者予以淘汰，不用于制备浓缩血小板。

4.白膜置于血小板保存箱过夜但不振荡，同时等待病毒等检测结果

5.等待血小板需求，根据需求选择合格白膜进行汇集血小板的制备。将10-12单位（5-6袋）白膜混合，总重约500-580ml，充分混匀。

6.轻离心

离心条件：温度：22℃±2℃，400ml袋离心力转速800转/212g，

离心时间为10分钟。

注：装杯时汇集袋两侧夹硬纸板固定，使汇集袋平整。

7.分出上清液，即为汇集浓缩血小板，经血小板滤器过滤，得汇集少白细胞浓缩血小板。

8.血小板发放；细菌监测。

白膜法的特点：优点是血小板中白细胞残留量较低，输注安全性好，血小板膜表面CD62p的表达率显著降低，提高了总ATP水平和低渗性休克反应的能力。缺点是血小板含量低。