消毒灭菌与病原微生物实验室生物安全优秀课件
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1、干燥与低温抑菌法 盐或糖腌食物，冰箱冷冻食物
2、超声波灭菌法
每秒钟超过20,000次振动的 声波不被人耳感受，称为超 声波。利用在菌体内的空化 作用、机械裂解杀菌。尤其 是革兰阴性菌更为敏感，但 不彻底，常有残留。
二、化学消毒灭菌法
（一）高效消毒剂: 可杀灭芽孢在内的微生物
适用不耐高温，但必须进入人体内部的器械：内窥 镜、塑料外科器械
（三）手和皮肤的消毒
用肥皂和流动水经常并正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。 乙醇，碘伏
（四）黏膜的消毒
口腔粘膜可用3%的双氧水，腔道冲洗用 1/1000的高锰酸钾。
（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 50g/L的次氯酸钠、漂白粉处理小时
洗必泰
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
高锰酸钾
氧化作用 皮肤、粘膜、蔬菜、水果的消毒
第二节 消毒灭菌的运用
（一）、医疗器械物品的消毒灭菌
1、高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品 都应该灭菌。
2、中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采 用消毒即可。
利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒， 细菌繁殖体15-30分钟杀灭。蒸笼具有类似的原 理。
间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌 消毒的目的。
高压蒸气灭菌法
一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于 蒸气的压力。在103.4kPa蒸气下，温度达到 121.3℃，维持15-20分钟，可杀灭包括细菌芽 胞在内的所有微生物。
巴氏消毒法用较低温度杀灭液体中的病原菌或 特定微生物，而保持物品中所需的不耐热成分不 被破坏的消毒方法。
主要应用于乳制品的消毒。方法有两种：①加 热到61.1-62.8℃30分钟 ②71.7℃15-30秒。
煮沸法
煮沸温度为100℃，一般细菌繁殖体5分钟就 杀死了，芽胞需要1-2小时才可被杀灭。
流动蒸气消毒法
杀细菌繁殖体，真菌和大部分病毒
含碘消毒剂： 碘伏、碘酊 氧化作用，但有刺激性
醇类消毒剂 乙醇、异丙醇 脱细胞膜的脂类，并使菌体蛋白变性 70-75%乙醇作用最强
（三）低效消毒剂：
杀多数细菌繁殖体，不能杀芽孢和结核杆菌以及 一些真菌和病毒
新洁尔灭
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
消毒灭菌与病原微生物实验室 生物安全
消毒灭菌： 用物理或化学的方法来抑制和
杀灭环境中或体表的微生物，以防 止微生物污染或病原微生物传播的 方法
消毒灭菌常用术语
灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微 生物的方法。
消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中 的病原微生物的方法。
微波能杀灭各种微生物；可在1-5分钟内杀死各种 细菌。
微波长期照射可引起眼睛的晶状体混浊、睾丸损 伤和神经功能紊乱等全身性反应，因此必须关好门 后才开始操作。
（三）滤过除菌法
1.滤菌器 (filter）----直径是0.45um以下。
2.空气除菌采用生物洁净技术
层流室
超净工作台
（四）其他物理方法
3、低危器械物品 只接触未损伤皮肤，不接触黏膜和无菌组织 的物品。一般用后清洗、消毒即可。
4、快速周转的医疗器械 瞬时灭菌，高效消毒剂处理，微波灭 菌等
（二）、室内空气消毒灭菌
1.物理消毒法 ①紫外线照射最常用； ②滤过除菌：
2．化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸： ①过氧乙酸喷雾、熏蒸； ②过氧化氢喷雾； ③二氧化氯溶液喷洒； ④中草药点燃烟熏。
一、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法（干热+湿热） 1. 干热灭菌法
焚烧
适用： 废弃的物品 动物尸体
焚烧炉
干烤 用干烤灭菌箱，适用于高温下不变质，不
损坏，不蒸发的物品。
171℃ 1h 160 ℃ 2h 121 ℃ 16h
烤箱
烧灼
用火焰灭菌，适用于微生物学实验室的 接种环、试管口等的灭菌
红外线辐射
高压蒸汽灭菌器
（二）辐射杀菌法
1.紫外线（265-266nm）
原理：其主要作用于DNA，使一条DNA链上相邻 的两个胸腺嘧啶共价结合成二聚体，干扰DNA的复 制与转录。
特点：紫外线的穿透力弱 适用范围：因此一般用于手术室、传染病房、细菌 实验室的空气消毒。 注意：紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用，应注 意防护。
紫外线灯管
2. 电离辐射 常用γ射线(钴-60)和β射线。
原理：
干扰代谢和DNA合成，破坏细胞膜、酶，产生 H2O2、游离羟基杀菌。
特点： 具有较高的能量与穿透力，可在常温下对
不耐热的物品灭菌，故又称“冷灭菌”。
运用： 可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等，
亦能用于食品、药品、生物制品等的消毒灭 菌。
是一种 0.77-1000微米波长的电磁波, 红外 线为热效应杀菌, 红外线加热速度快，但为表面 照射，物体受热不均。用红外线烤箱灭菌，多用 于医疗器械的灭菌。
人受红外线照射较长，会感觉眼睛疲劳及头 疼；长期照射会造成眼内损伤。因此，工 作人 员应戴防护镜。
2. 湿热灭菌法
巴氏消毒法(pasteurization):
防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细 菌生长繁殖的方法。
清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一 切污秽以减少微生物数量的过程。
无菌（asepsis）：无菌是无活菌的意思， 多是灭菌的结果。
无菌操作技术:防止细菌进入人体或其它物 品的操作技术。
第一节 消毒灭菌的方法
➢ 物理方法 ➢ 化学方法
高效消百度文库剂
原理
适用范围
含氯消毒剂 （次氯酸钠、漂白粉）
产生氯气、次氯酸 新生态氧
排泄物、物体表面、饮 用水等
过氧化物消毒剂 （过氧化氢、过氧乙酸） （二氧化氯）
醛类消毒剂 （戊二醛、甲醛）
氧化作用
物体表面、皮肤
空气净化剂
对细菌蛋白和核酸的 高效空气过滤器消毒
烷化作用
（对人有毒）
环氧乙烷
与醛类相同
（二）中效消毒剂：
3. 微波（microwave）
微波是一种波长为1- 1000mm 的电磁波， 频率较高；
一般认为其杀菌机理除热效应以外;还有电 磁共振效应。可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物 质，但不能穿透金属；
微波照射多用于食品加工。
在医院中可用于检验室用品、非金属器械、无 菌病室的食品、食具、药杯、及其它用品的消毒。
2、超声波灭菌法
每秒钟超过20,000次振动的 声波不被人耳感受，称为超 声波。利用在菌体内的空化 作用、机械裂解杀菌。尤其 是革兰阴性菌更为敏感，但 不彻底，常有残留。
二、化学消毒灭菌法
（一）高效消毒剂: 可杀灭芽孢在内的微生物
适用不耐高温，但必须进入人体内部的器械：内窥 镜、塑料外科器械
（三）手和皮肤的消毒
用肥皂和流动水经常并正确洗手 病原微生物污染时应用消毒剂消毒。 乙醇，碘伏
（四）黏膜的消毒
口腔粘膜可用3%的双氧水，腔道冲洗用 1/1000的高锰酸钾。
（五）病人排泄物与分泌物的消毒灭菌 50g/L的次氯酸钠、漂白粉处理小时
洗必泰
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
高锰酸钾
氧化作用 皮肤、粘膜、蔬菜、水果的消毒
第二节 消毒灭菌的运用
（一）、医疗器械物品的消毒灭菌
1、高危器械物品 用时需进入无菌组织的物品。所有这些物品 都应该灭菌。
2、中危器械物品 用时不进入无菌组织但接触黏膜的器械。采 用消毒即可。
利用一个大气压下100℃的水蒸气进行消毒， 细菌繁殖体15-30分钟杀灭。蒸笼具有类似的原 理。
间歇蒸气灭菌法
利用反复多次的流动蒸气间歇加热以达到灭菌 消毒的目的。
高压蒸气灭菌法
一种最有效的灭菌方法。灭菌的温度取决于 蒸气的压力。在103.4kPa蒸气下，温度达到 121.3℃，维持15-20分钟，可杀灭包括细菌芽 胞在内的所有微生物。
巴氏消毒法用较低温度杀灭液体中的病原菌或 特定微生物，而保持物品中所需的不耐热成分不 被破坏的消毒方法。
主要应用于乳制品的消毒。方法有两种：①加 热到61.1-62.8℃30分钟 ②71.7℃15-30秒。
煮沸法
煮沸温度为100℃，一般细菌繁殖体5分钟就 杀死了，芽胞需要1-2小时才可被杀灭。
流动蒸气消毒法
杀细菌繁殖体，真菌和大部分病毒
含碘消毒剂： 碘伏、碘酊 氧化作用，但有刺激性
醇类消毒剂 乙醇、异丙醇 脱细胞膜的脂类，并使菌体蛋白变性 70-75%乙醇作用最强
（三）低效消毒剂：
杀多数细菌繁殖体，不能杀芽孢和结核杆菌以及 一些真菌和病毒
新洁尔灭
皮肤、粘膜、地面、物品表面（不与阴离子表面活性剂合用）
消毒灭菌与病原微生物实验室 生物安全
消毒灭菌： 用物理或化学的方法来抑制和
杀灭环境中或体表的微生物，以防 止微生物污染或病原微生物传播的 方法
消毒灭菌常用术语
灭菌（sterilization）：杀灭物体上所有微 生物的方法。
消毒（disinfection）：杀死物体上或环境中 的病原微生物的方法。
微波能杀灭各种微生物；可在1-5分钟内杀死各种 细菌。
微波长期照射可引起眼睛的晶状体混浊、睾丸损 伤和神经功能紊乱等全身性反应，因此必须关好门 后才开始操作。
（三）滤过除菌法
1.滤菌器 (filter）----直径是0.45um以下。
2.空气除菌采用生物洁净技术
层流室
超净工作台
（四）其他物理方法
3、低危器械物品 只接触未损伤皮肤，不接触黏膜和无菌组织 的物品。一般用后清洗、消毒即可。
4、快速周转的医疗器械 瞬时灭菌，高效消毒剂处理，微波灭 菌等
（二）、室内空气消毒灭菌
1.物理消毒法 ①紫外线照射最常用； ②滤过除菌：
2．化学消毒法 包括化学消毒剂喷雾和熏蒸： ①过氧乙酸喷雾、熏蒸； ②过氧化氢喷雾； ③二氧化氯溶液喷洒； ④中草药点燃烟熏。
一、物理消毒灭菌法
（一）热力灭菌法（干热+湿热） 1. 干热灭菌法
焚烧
适用： 废弃的物品 动物尸体
焚烧炉
干烤 用干烤灭菌箱，适用于高温下不变质，不
损坏，不蒸发的物品。
171℃ 1h 160 ℃ 2h 121 ℃ 16h
烤箱
烧灼
用火焰灭菌，适用于微生物学实验室的 接种环、试管口等的灭菌
红外线辐射
高压蒸汽灭菌器
（二）辐射杀菌法
1.紫外线（265-266nm）
原理：其主要作用于DNA，使一条DNA链上相邻 的两个胸腺嘧啶共价结合成二聚体，干扰DNA的复 制与转录。
特点：紫外线的穿透力弱 适用范围：因此一般用于手术室、传染病房、细菌 实验室的空气消毒。 注意：紫外线对人体皮肤、眼睛有损伤作用，应注 意防护。
紫外线灯管
2. 电离辐射 常用γ射线(钴-60)和β射线。
原理：
干扰代谢和DNA合成，破坏细胞膜、酶，产生 H2O2、游离羟基杀菌。
特点： 具有较高的能量与穿透力，可在常温下对
不耐热的物品灭菌，故又称“冷灭菌”。
运用： 可用于消毒不耐热的塑料注射器和导管等，
亦能用于食品、药品、生物制品等的消毒灭 菌。
是一种 0.77-1000微米波长的电磁波, 红外 线为热效应杀菌, 红外线加热速度快，但为表面 照射，物体受热不均。用红外线烤箱灭菌，多用 于医疗器械的灭菌。
人受红外线照射较长，会感觉眼睛疲劳及头 疼；长期照射会造成眼内损伤。因此，工 作人 员应戴防护镜。
2. 湿热灭菌法
巴氏消毒法(pasteurization):
防腐（antisepsis）：防止或抑制皮肤表面细 菌生长繁殖的方法。
清洁（cleaning）：是指通过除去尘埃和一 切污秽以减少微生物数量的过程。
无菌（asepsis）：无菌是无活菌的意思， 多是灭菌的结果。
无菌操作技术:防止细菌进入人体或其它物 品的操作技术。
第一节 消毒灭菌的方法
➢ 物理方法 ➢ 化学方法
高效消百度文库剂
原理
适用范围
含氯消毒剂 （次氯酸钠、漂白粉）
产生氯气、次氯酸 新生态氧
排泄物、物体表面、饮 用水等
过氧化物消毒剂 （过氧化氢、过氧乙酸） （二氧化氯）
醛类消毒剂 （戊二醛、甲醛）
氧化作用
物体表面、皮肤
空气净化剂
对细菌蛋白和核酸的 高效空气过滤器消毒
烷化作用
（对人有毒）
环氧乙烷
与醛类相同
（二）中效消毒剂：
3. 微波（microwave）
微波是一种波长为1- 1000mm 的电磁波， 频率较高；
一般认为其杀菌机理除热效应以外;还有电 磁共振效应。可穿透玻璃、塑料薄膜与陶瓷等物 质，但不能穿透金属；
微波照射多用于食品加工。
在医院中可用于检验室用品、非金属器械、无 菌病室的食品、食具、药杯、及其它用品的消毒。