C6 大鼠脑胶质瘤细胞
冷冻治疗抑制大鼠C6脑胶质瘤增殖的实验研究
第ｌ 鲞第 ０期
・
１６ ・ ３
所 有体 液 及 大 多 数 组 织 中 。研 究 发 现 ， Ｇ Ｅ Ｆ通 过 与其 受 体 ＥＦ Ｇ Ｒ结 合 ， 进 组 织 、 胞 Ｄ Ａ、 Ｎ 促 细 Ｎ Ｒ Ａ及 蛋 白质 合 成 ， 且 并 调 节 细胞 的增 殖 、 移 以及 分 化 等 活 动 ， 且 对 肿 瘤 的 生 长 迁 并
［ ］ Ｕ ｌｎＭ， ｊｒｎ Ａ ａ ｎＣ， ｔ １ ｕ ａ ｒｔｉ ａｌ ｒ ２ ｈ Ｂ５ｌ ｇＥ， ｇｔ ｅ ．Ａ ｈ ｍ ｎｐｏ ｎ ｔｓｆ ｒ ｉ ｏ ａ ｅ ａ ｏ
ｎ ｒ ｌ ｎ ａｃｒｉ ｕｓｂｓｄｏ ｎｉ ｄ ｒ ｅｍｃ Ｊ ．Ｍｏ ｏｍａ ａｄｃｎ ｅ ｔｓｅ ａｅ ｎａｔ ｏ ｙｐｏ ｏ ｉ ｓ ｂ ｔ ｓ［ ］ ｌ
有 待进 一 步 研 究 。
ｄｈｒｔｎｅｔ ｅ［ ］ ｎ Ｍｏ Ｍ ｄ ２０ １ （ ）３ ９—３２ ｕ ａ ｉｔ ｉ Ｊ ．Ｉｔ ｌ ｅ ， ０３， １ ３ ：４ ｓｎ ｊ ５． ［ ］ Ｓｏ Ｍ， ｏｅ Ａ ｇｌｓ ｅ ａ． ｆ ｃｏ ｎｃｏ ｚ ｇｅｔ ｏ ９ ｃｔＳ Ｒ ｇｒ Ｃ， ｎｅ ｔ Ｅｆ ｔｆ ｅｒｔｉ ｅ － ｔ ｓ ｕ Ｐ， １ ｅ ｉｎ ｎ ｒ ｃｌｉｏ ｒ ａｙｅｉｅ ￣ ｇｏ ｔ ｆ ｔ ｅｅｓ Ｊ ．Ａ ｉ ｏｉｓ ｎ ｕ ｎｒ ｐｄ ｒ ｔ ｉ ｍ ｒｗｈ ａ ｏ ｌ ｌ［ ］ ｍ ＪＤｓ ｃｒ ｖ
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全反式维甲酸治疗大鼠C6脑胶质瘤的实验研究
全反式维甲酸治疗大鼠C6脑胶质瘤的实验研究
维甲酸是一种非常重要的维生素，它对人体健康有着非常大的作用。
最近的一项实验研究表明，维甲酸对治疗大鼠C6脑胶
质瘤也有一定的疗效。
下面就来详细介绍一下这项实验研究的内容。
实验研究中，采用了30只大鼠来进行实验。
将它们分成三组，分别是对照组、低剂量组和高剂量组。
对照组只是进行普通的饲养，低剂量组和高剂量组分别在饮用水中添加不同剂量的维甲酸。
实验过程中，通过多种检测手段，如光学显微镜、免疫组织化学等，来观察大鼠C6脑胶质瘤的生长情况以及对于维甲酸的
敏感性。
结果表明，与对照组相比，低剂量组和高剂量组的
C6脑胶质瘤生长速率均有明显下降，其中高剂量组表现得最
为明显，瘤体的生长速度甚至停止了。
通过免疫组织化学检测的结果显示，高剂量组的细胞凋亡率明显高于低剂量组和对照组，这也表明了细胞对于维甲酸的敏感性。
综合上述实验结果，可以得出结论，维甲酸对于C6脑胶质瘤
的治疗有一定的疗效，但需要使用较高剂量才能达到比较显著的治疗效果。
这项实验研究为进一步探究维甲酸对于脑胶质瘤治疗的疗效提供了一定的参考依据，并为治疗该类疾病提供了新的思路和研究方向。
人参皂苷诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞的分化
人参皂苷诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞的分化
廖义林;张建平;孙新明
【期刊名称】《解剖学杂志》
【年(卷),期】2010(033)002
【摘要】目的:观察人参皂苷对胶质瘤细胞的诱导分化作用,探讨人参皂苷抗胶质瘤作用机制.方法:采用MTT、软琼脂克隆形成率、形态学与神经胶质纤维酸性蛋白(GFAP)免疫荧光等方法鉴定分化程度.结果:10μg/ml人参皂苷即可明显诱导大鼠C6胶质瘤细胞株的细胞分化,表现为增殖抑制,克隆形成能力丧失,细胞突起增长,GFAP表达量升高.结论:一定剂量的人参皂苷可以诱导大鼠脑胶质瘤细胞分化达到抗肿瘤的效果.
【总页数】4页(P207-210)
【作者】廖义林;张建平;孙新明
【作者单位】井冈山大学医学院,吉安343000;井冈山大学医学院,吉安343000;井冈山大学医学院,吉安343000
【正文语种】中文
【相关文献】
1.全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响 [J], 付锐;徐航;涂汉军;罗杰;张力
2.全反式维甲酸诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究 [J], 綦斌;谭岩;罗毅男;付双林;毕春华;田宇
3.苦参碱对脑胶质瘤C6细胞系的诱导分化 [J], 章翔;程光;费舟;刘卫平;王占祥;王
西玲;梁景文
4.替莫唑胺诱导大鼠脑胶质瘤C6细胞caspase非依赖的程序性死亡 [J], 刘丽华;张明
5.全反式维甲酸诱导分化大鼠C6脑胶质瘤的实验研究 [J], 付锐;王伦长;涂汉军;李新建;黄宽明;何跃;黄敏;徐航
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替莫唑胺诱导大鼠脑胶质瘤C6细胞caspase非依赖的程序性死亡
替莫唑胺诱导大鼠脑胶质瘤C6细胞caspase非依赖的程序性死亡刘丽华;张明【摘要】Objective To investigate programmed cell death induced by temozolomide in rat glioma C6 cell line. Methods Rat glioma C6 cell line was treated by temozolomide at different concentrations and for different time lengths. MTT assay was used to evaluate the cell inhibition rate to determine the optimal exposure time and concentration. After the exposure to 400μg/ml temozolomide for 24 h, the cells were observed for programmed cell death using HE staining, Hochest and Tunnel assay, Western blotting, and immunohistochemistry. Results MTT, HE staining, and Hochest and Tunnel assay all showed temozolomide-induced apoptosis in rat glioma C6 cell line. Western blotting and immunohistochemistry revealed up-regulation of Bax and down-regulation of Bcl-2 expression in the exposed cells, where the expressions of caspases 3, 8, 9, and 12 remained unchanged. Conclusion Temozolomide induces apoptosis in rat glioma C6 cell line through a caspase-independent pathway.%目的：观察替莫唑胺对大鼠脑胶质瘤C6细胞程序性死亡的诱导效应，并探讨可能的分子机制。
c6造模
【摘要】目的：建立可重复性大鼠脑胶质瘤模型。
方法：雄性SD大鼠30只，体重15 0～250克，分为脑胶质瘤组（20只）和对照组（10只）。
于前囟前1mm、矢状缝右旁开3 mm处用牙钻钻一骨孔，用静脉注射套管针立体定向注射10ul含有约106个C6细胞的混悬液于鼠脑右侧尾状核内，建立鼠脑胶质瘤模型。
对照组手术过程同上，但只注射10ul细胞培养基。
两组大鼠于术后第16、25天分别作MRI测量胶质瘤大小、位置。
术后第25天处死大鼠，立刻取脑，制作病理切片，观察组织形态学变化。
脑胶质瘤组的石蜡切片经免疫组织化学染色检测S-100蛋白。
结果：脑胶质瘤组，20只大鼠经MRI平扫、增强扫描和形态学检查证实均有单灶肿块，且肿瘤部位、大小、形态基本一致，无脑外转移和颅外扩散，经免疫组织化学染色检测S-100蛋白均为阳性。
对照组均无瘤体。
结论：用静脉注射套管针定向植入C6细胞到大鼠右侧尾状核，能产生可复制的单灶肿块，且无脑外转移和颅外扩散。
0. 5T MRI平扫和增强扫描能动态观察大鼠脑胶质瘤的生长情况。
【关键词】C6胶质瘤动物模型MRI免疫组织化学Establishment of rat brain-glioma modelWu Guoxiang Yu Shaozu Li Chengyan（Department of Neurology, The First Affiliated Hospital of Hu Bei Medical University,Wuhan 430060, China）【Abstract】Objective：To establish a reproducible rat brain-glioma model. Metho ds：We divided 30 male SD rats,each weighing 150～250g,Separated into two groups, the experimental group(20 rats) and the control group(10 rats). In experimental group, a bone hole was made by using a diamond-tipped burr at the following coordinates: anterior 1mm from bregma and lateral 3mm relative to the midsagittal sinus, a 10ul solution containing 106C6gliomaous cells was stereotactically implanted into right caudate nuclei to establis h brain glioma model. The implanted process of control group was as same as the experi mental group, but only a 10ul cell medium was injected. MRI was performed at the 16th and 25th day after implantation.The rats were sacrificed at the 25th day after implantatio n and the brain was extracted. Morphology and microscopic structure were observed in H E stain sections and S-100 protein was found in immunohistochemistry stain sections. Res ults：In experimental group,all 20 rats have unifocal masses and S-100 protein without extracerebral metabasis and the extracranial extension. The size, the site and morphology of a ll tumors are almost the same. No mass was found in all 10 rats of the control group. C onclusion：C6gliomaous cells can be stereotactically implanted into the right caudate nucle i of the rats which may reproduce unifocal masses without extracerebral metabasis and ext racranial extension. Gadolinium-enhanced MRI scan can follow the growth of the rat brain glioma.【Key words】C6glioma Animal model MRI Immunohistochemistr y脑胶质瘤是一类危害人类健康的颅内常见肿瘤,预后差。
人参皂苷诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞的分化
ｔ ｅ ｍ ｅ ｈ ｎ ｓ ｏ ｉ ｓ ｎ ｓｄ ３ｉ ｎ ｉ ｌ ｍａ ｅ ｆｃ ．Ｍ ｅ ｈ ｄｓ ｈ ｃ ａ ｉ ｍ ｆ ｎ ｅ ｏ ｉ ｅＲｇ ｎ ａ ｔ ｉ ｇ ｇ ｏ ｆｅ ｔ ｔ ｏ ：Ｃ６ ｇ ｉｍ ａｗｅ ｅ ｄ ｖ ｄ ｄ ｉｔ ｉ ｓ ｎ ｓｄ ｒ ｕ ｎ ｌ— ｌ ｏ ｒ ｅ ｉｅ ｎ ｏ ａｇ ｎ ｅ ｏ ｉ ｅｇ ｏ ｐ ａ ｄ ａ ｐ ａ
戊巴比妥钠抗大鼠C6恶性胶质瘤细胞的作用及其机制研究的开题报告
戊巴比妥钠抗大鼠C6恶性胶质瘤细胞的作用及其机制研究
的开题报告
一、研究背景
恶性胶质瘤是一种常见的脑部肿瘤，有着高度恶性和复发率高的特点。
目前，临床治疗手段主要有手术切除、放射治疗、化疗等，但效果并不理想。
因此，寻找新的
治疗策略成为目前研究的热点之一。
戊巴比妥钠是一种抗惊厥药物，近年来研究发现其具有抗肿瘤作用。
先前的研究已经证实戊巴比妥钠对恶性胶质瘤细胞有抑制作用，但其作用机制尚不清楚。
因此，
本研究将对戊巴比妥钠抗大鼠C6恶性胶质瘤细胞的作用及其机制进行研究。
二、研究目的和内容
1、研究目的
(1) 研究戊巴比妥钠对大鼠C6恶性胶质瘤细胞的影响。
(2) 探讨戊巴比妥钠抑制大鼠C6恶性胶质瘤细胞的作用机制。
2、研究内容
(1) 采用MTT法、流式细胞术等实验方法，考察戊巴比妥钠对大鼠C6恶性胶质
瘤细胞生长、增殖、凋亡及周期分布等生物学行为的影响。
(2) 利用Western blot法探究戊巴比妥钠对大鼠C6恶性胶质瘤细胞相关蛋白表
达的影响。
三、研究意义
戊巴比妥钠作为一种安全有效的抗惊厥药，其具有的抗肿瘤作用值得进一步研究。
本研究将探讨戊巴比妥钠抑制大鼠C6恶性胶质瘤细胞的作用机制，为研究肿瘤治疗新策略提供新的思路和方法，对于提高对恶性胶质瘤的治疗效果将有着积极的意义。
C6大鼠脑胶质瘤动物模型建立及病理观察
・７３ ・
・
博士论坛 ・
Ｃ ６大 鼠脑 胶 质 瘤 动物 模 型建 立 及 病 理 观察
张荣 段 美关的大鼠 ｃ ６ 脑胶质瘤模型， 为研究脑胶质瘤的发病机制
和防治方法提供操作平 台。方法 采用立体定 向技 术 ， 将 体外培养 的大 鼠 ｃ ６胶质瘤 细胞浓缩 悬置 ， 大 鼠接种 ｃ ６胶质瘤细胞 ２ ． ５×１ ０ 个・ ２ ５ Ｌ 接种 于 ｓ Ｄ大 鼠的右侧尾壳核 区 ， 种植后连续观察大 鼠的生存状态 ， 并分别于 ７ 、 １ ４ 、 ２ １ ｄ处死大 鼠， 立刻取脑 ， 制作病理切 片 ， ＨＥ染色 ， 光镜下观察 。结果
Ｇ ｕ ａ ｎ ｇ ｄ ｏ ｎ ｇ ５ １ ０ ４ ０ ５ ）
【 Ａ ｂ ｓ ｔ ｒ ａ ｃ ｔ 】 Ｏ ｂ ｊ ｅ ｃ ｔ ｉ ｖ ｅ Ｔ ｏ ｅ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｔ ｈ ｅ ｓ ｉ ｍ ｐ ｌ ｅ ， ｆ ｅ ａ ｓ ｉ ｂ ｌ ｅ ， ｒ ｅ ｌ ｉ ａ ｂ ｌ ｅ ａ ｎ ｄ ｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｅ Ｃ ６ ｃ ｅ ｒ ｅ ｂ ｒ ａ ｌ ｇ ｌ ｉ ｏ ｍ ａ ｍ ｏ ｄ －
后， ７ ｄ 左 右生存状态 良好 ， １ ４ ｄ左右 出现较 为明显的颅 内高压 症状 ， ２ １ ｄ左右时 多数 处于濒危 状态 。
大体 标本检查 ， １ ８只大 鼠中除 ３只意外死亡外 ， 其余成瘤率 １ ０ ０ ％， 瘤体随着 鼠龄 的延 长 ， 中线结构 明 显移 位 ， 占位 效应 愈来愈明显 。Ｈ Ｅ染色可 明显 观察 到大 鼠脑组织胶 质瘤 的形成 。结论
Ａｎ ｉ ｍａ ｌ Ｍｏ ｄｅ ｌ Ｅｓ ｔ ａ ｂ ｌ ｉ ｓ ｈ ｍｅ ｎｔ ａ ｎｄ Ｐａ ｔ ｈｏ ｌ ｏ ｇ ｉ ｃ ａ ｌ Ｏｂ ｓ ｅ ｒ ｖ ａ ｔ ｉ ｏ ｎ ｏ ｆ Ｃ６ Ｃｅ ｒ ｅ ｂ ｒ ａ ｌ Ｇｌ ｉ ｏ ｍａ ｉ ｎ Ｒａ Ｉ ｓ
大鼠脑胶质瘤荧光素酶动物模型建模细胞株C6-Luc的构建
大鼠脑胶质瘤荧光素酶动物模型建模细胞株C6-Luc的构建黄伟;吕明;李保卫;王玉丽;邵荣光;高钟镐【摘要】Objective To construct the rat glioma cell line C6-Luc to stably express the firefly luciferase.Methods The optimal concentration of hygromycin for screening C6 rat glioma cells was determined by concentration gradient method.The eukaryotic plasmid pGL4.50 expressing luciferase was transfected into C6 cells by using FuGENE* HD transfection reagent, followed by screening the polyclonal cell lines with hygromycin, subsequently screening the monoclonal cell line by limited dilution.The positive monoclonal cell lines were identified with reporter gene assay, thereafter the expression stability of luciferase was investigated in the positive cell lines.The bioluminescence detection in vitro in the positive monoclonal cell line was performed to determine the minimum detection amount of cells,and the correlation between bioluminescence intensity and ce11 amount was analyzed by linear regression analysis.The positive monoclonal cells were implanted into the brain of Wistar rats, and the tumor growth in rats brain was detected in vivo using the bioluminescence imaging detection system.Results The optimal concentration of hygromycin used in screening C6 cells was 250 μg/mL The eukaryotic plasmids pGL4.50 was successfully transfected into C6 cells, and 12 monoclonal cell lines were obtained by anti-hygromycin screening.A positive clone with the highest activity of luciferase, designated as C6-Luc, was successfully identified by using luciferase reporter gene assay, whichshowed a stable activity of expressing luciferase after 3 continuous passages of cultivation.The bioluminescence detection in vitro showed that the minimum detection amount of C6-Luc cells was 78.A good linear correlation existed between bioluminescence intensity and the amount of C6-Luc cells, with an equation of y=81.348x-2143.1 and correlation coefficient(r) of 0.997.The in vivo bioluminescence imaging detection showed tumorigenesis could be detected after implantation of C6-Luc cells into the brain of Wistar rats.The intensity of bioluminescence increased gradually with volume augmentation of the tumor in rats'brains.Conclusion The glioma cell line C6-Luc of rats expressing stably the firefly luciferase has been successfully constructed.%目的构建稳定表达萤火虫荧光素酶的大鼠脑胶质瘤细胞株C6-Luc.方法通过浓度梯度法测定C6大鼠脑胶质瘤细胞的潮霉素最佳筛选浓度.使用FuGENE HD转染试剂将表达荧光素酶的真核质粒pGL4.50转染至C6细胞,应用潮霉素筛选多克隆细胞株,进一步采用有限稀释法筛选单克隆细胞株.采用报告基因分析对单克隆细胞株进行阳性鉴定,并考察荧光素酶在阳性克隆中表达的稳定性.对阳性克隆进行体外生物发光检测,确定最小细胞检测量,并采用线性回归分析生物发光强度与细胞数量的相关性.将阳性克隆细胞种植于Wistar大鼠脑部,应用生物发光成像检测系统对肿瘤细胞在脑部的生长进行体内监测.结果 C6细胞的潮霉素最佳筛选浓度为250μg/ml.质粒pGL4.50成功转染至C6细胞,通过潮霉素抗性筛选得到12个单克隆细胞株.通过荧光素酶报告基因分析,成功鉴定了荧光素酶表达活性最高的阳性克隆,命名为C6-Luc,连续培养3代后C6-Luc细胞表达荧光素酶的活性无显著差异.体外生物发光检测结果显示C6-Luc细胞的最小检测数量为78个,细胞发光强度(y)与细胞数量(x)呈良好的线性关系,回归方程为y=81.348x-2143.1,相关系数r=0.997.体内生物发光检测结果显示,Wistar大鼠脑部种植C6-Luc细胞后,随肿瘤体积增大,大鼠脑部的发光强度逐渐增强.结论成功构建了稳定表达荧光素酶的大鼠脑胶质瘤细胞株C6-Luc.【期刊名称】《解放军医学杂志》【年(卷),期】2011(036)001【总页数】4页(P35-38)【关键词】荧光素酶类,萤火虫;生物发光成像;神经胶质瘤;模型,动物【作者】黄伟;吕明;李保卫;王玉丽;邵荣光;高钟镐【作者单位】100050,北京,中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所;133000,吉林,延吉,延边大学药学院;100050,北京,中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所;100850,北京,军事医学科学院毒物药物研究所;100050,北京,中国医学科学院&北京协和医学院医药生物技术研究所;100050,北京,中国医学科学院&北京协和医学院药物研究所【正文语种】中文【中图分类】R739.41脑胶质瘤是一种常见的颅内恶性肿瘤，平均生存期仅51周，为了研究胶质瘤的发病机制和生物学特性，研制有效的抗脑胶质瘤药物和靶向制剂，必须建立稳定可靠的脑胶质瘤药理动物模型。
C6胶质瘤荷瘤大鼠刀照射后胶质瘤细胞死亡方式实验研究
Ａ ｓ ａｔＯｂｅｔ ｅ Ｔ ｂｅｖ ｔ ｅｈ ｍ ｆ ｐｐ ｉａｄｎｃ ｓ ｄｃｄｂ ａ ｎ ｎｅｔ ａｎｎ ｏ ｒ ｂｍ ｏ— ｂｔ ｃ： ｊｃｖ ｏ ｓｒ ｅｍ ｃｉ ｓ ｏｔ ｓ ｎ ｅｒ ｉｉ ｕｅ ｙ ｒ ａｋｉ ｅｕｅｔ ｆａ ｇｏ ａ ｄ ｒ ｉ ｏ ｅｈ ｓ ｏａ ｏ ｓ ｏｓｎ ｇｍ ｆｒ ｔ ｍ
丘 ｅ Ｓ Ｆ ｐａｕ － ａ ｌ ｔ ｗ ｉ ｉｇ１ ０ １ ，ｇ —６ ｅｋ ， ｅ ｕｃ ａ ｄ ｆ ｍ Ｅ ｐ ｒ ｅ ｔ ｎｍ ｌ ｅ ｔ ， ｎ ｕ ｅ （ Ｐ ）Ｓ ｒ ｅＤ ｗｅ ｒ ｓ ｅ ｔ ８ —２ ０ ｇ ａｅ ５ ｗ ｅ ｓ ｗ ｒ ｐ ｒｈｓ ｒ ｘ ｅ ｍ ｎ ｌ ｉ ａ Ｃ ｎ ｒＡ ｈ ｉ ｑ ｙ ａ ， ｇｎ ｄ ｅ ｅ ｏ ｉ ａＡ ｅ Ｍ ｄ ａ Ｃ ｌ ｇ ． ａ Ｃ ｏ ａ ｉ ｅ ｕｃ ａ ｄｆ ｍ ｃｌ ｂｎ ｆ Ａ ． ｎ ｅ ｎＶ Ｆ Ｃ Ｒ ａ ｅｔ ｉ （ ｅｄ ｒ ｅｓｓ ｍ．ｏ ） ｅ ｉ ｌ ｏ ｅｅ Ｒ ｔ ６ ｍ ｌ ｗ ｒ ｐｒｈｓ ｏ ｅ ａｋ ｏ Ｃ Ｓ Ａ ｎ ｘ —１ ｅｇｎ Ｋｔ Ｂ ｎ ｅ ｄｙｔ ｃ ｎ ｃ ｅ ｃ ｓ ｅ ｅ ｒ ｉ Ｔ ｍ ｅ
选用 ２ ４只生后 ５ 周雌性 ｓ 鼠， 自安徽 医科大学实验 动物中心。大 鼠 ｃ —６ Ｄ大 购 ６胶质瘤细胞 购 自中科 院细胞 库。所 有大 鼠均采用立体定 向法制作脑胶质瘤 模型 ， 即人脑皮质下 ５ｎ ｌ ｌ 注入 ４｝ 体外培养和传代后 的 ｃ 细胞悬 液。随机 ｎ ｊ ｌ ６ 抽签法将大 鼠分为 ９Ｇ 照射组 、２Ｇ 照射组 和模型组 ， ｙ １ ｙ 每组 ８只。前 ２组 分别于造 模后 ２ １ｄ行照 射剂量 分别为 ９ Ｇ 、２ ｙ ｙ １Ｇ 伽玛刀治疗 ， 模型组未给予照射。治疗后 １ 周取大 鼠肿瘤与脑组织交界处组织 ， 用流式细胞仪检测肿瘤 细 采 胞坏死率及 凋亡率 ， Ｅ染色观察组织学 变化 。结果 Ｈ 纳入大鼠 ２ ４只， 模 ｍ和实验组 ２ 分别有 １ 只大 鼠在麻醉 意外 中死亡 ， 其余 ２ ２只大 鼠均进入结果分析。①肿瘤细胞坏死率及凋 亡率 ： 两剂量照 射组肿瘤细胞凋亡率 和坏死率均高 于 模型组 ， 异有统计学意义 （ 差 Ｐ＜Ｏ０ ）９Ｇ 照射组肿瘤细胞的凋亡率高于 １ ｙ ．５ ； ｙ ２Ｇ 照射组 ， 坏死率低于 １ ｙ照射组 ， ２Ｇ 差异有统计学意义 （ Ｐ＜Ｏ ０ ）。②组织学变化 ： ．１ 各组肿瘤与脑组织 均可见肿瘤生长 ， 伽玛 刀两剂量组治疗后 出现 了肿
wistar大鼠c6脑胶质瘤模型建立方法
·基础研究·Wistar 大鼠C6脑胶质瘤模型建立方法史雪敬刘丽坤李耀程DOI ：10.11655/zgywylc2020.06.008作者单位：030012太原，山西省中医药研究院肿瘤科通信作者：刘丽坤，Email ：llkun133@胶质瘤是中枢神经系统最常见的原发性脑肿瘤，其生长快、预后差，极易发生侵袭、迁移，一直是医学上治疗的难点之一［1，2］。
临床上常用手术切除，辅以放化疗的治疗手段，但患者生存率仍然极低［3］。
同时经研究表明胶质瘤是依赖血管而生的实体肿瘤，新生血管和丰富的血供为临床治疗难以攻克的难点［4］。
随着对胶质瘤研究的深入，药物研发及科研需要，对胶质瘤模型的稳定性，成瘤率及大鼠的存活率要求越来越高，C6胶质瘤细胞来源于Wistar 大鼠的额叶［5］，相较于其他胶质瘤细胞，更易成瘤，且时间相对较短，对于大鼠较短的存活时长，给了相对长的干预时间。
本研究于山西省中医药研究院构建Wistar 大鼠胶质瘤模型，并对其进行评价。
1材料和方法1.1实验材料研究时间为2019年9月C6大鼠脑胶质瘤细胞购于广州吉欧妮公司。
Wistar 大鼠30只，雄性，体质量220~250g ，购于斯贝福（北京）生物技术有限公司。
5%CO 2细胞培养箱，美国Thermo 公司；多功能倒置显微镜，美国Thermo 公司；恒温水浴箱北京医疗设备厂；脑立体定向仪，深圳市瑞沃德生命科技有限公司。
达氏修正伊氏培养基（DMEM ）高糖培养基、磷酸盐缓冲液（PBS ）缓冲溶液、0.25%胰蛋白酶，均购于Bio⁃logical Industries （BI ）；胎牛血清（FBS ），杭州四季青生物科技有限公司；骨蜡，山西省中医院骨科。
1.2实验方法1.2.1细胞悬液制备：实验用C6细胞株培养于含10%胎牛血清及加1%双抗的DMEM 培养液中，置于37℃、5%CO 2恒温培养箱内培养，经胰酶消化传代，计数，每日观察细胞的生长情况。
全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响
ｈ ａ ａ ｉ ， ｏ ｙｏ ｔ ｒｓ ｉｎ ｏ ２ ｋｐ ｒｔ ｉ ｎ ＡＰ ｐ ｔ ｉ ｅ ｌ ｖ ｔ ｆ ｗ ｃ ｔ ｍｅｅ ｅ ｅ ｅ ｌｙ ｄ ｔ ｈ ｃ ｅｌ ｙ ｌ ｔｅ ｅ ｐ ｅ ｓｏ ｆ ｐ ７ ｉ ｌ ｐ ｏｅｎ ａ ｄ ＧＦ ｒ ｅｎ ｃ ｙｌ ｏ
Ｆ ｕ， Ｕ Ｈ ｎ ，Ｕ Ｈ ｎ— ｕ ，Ｕ ｉ，Ｈ Ｎ ｉ Ｕ Ｒ ｉＸ ａｇ Ｔ ａ ｊｎ Ｌ Ｏ Ｊ Ｚ Ａ Ｇ Ｌ ｅ
Ｄｐ ｎ ｅ ｏ ｅｒｓｒｅ ，ａ ｅ ｏ ｉｌＹ ｎａ ｇＭ ｄ ａ Ｃｌｇ ， ｕｅ ｅａ ｍ ￣ ｆＮ ｕｏｕ ｒ Ｔ ｉ ｓ ｔ ，ｕ ｙｎ ｅｉ ｌ ｏｅ ｅＨ ｂｉ ｇ ｙ ｈ Ｈ ｐａ ｃ ｌ ｎ４ ２０ Ｃ ｉ ． ４ ００，ｈｎ ａ
变化 。结果： 流式细胞仪检测 显 示 治疗 组 较 对 照组 Ｇ ．期 细胞 比例增 加 （ Ｐ＜０ ０ ）， ． ５ ｓ期 细 胞 比例减少 （ ００ ） 免疫组化检测显示 ｐ７ ｉｌ 白和 Ｇ Ａ Ｐ＜ ．５ ， ２ Ｋｐ 蛋 Ｆ Ｐ蛋 白的表达增加（ ０ ０ ） Ｐ＜ ．５ 。结论 ： 反式维 甲酸可诱导 大鼠Ｃ ６脑胶质瘤分化 ， 降低肿瘤恶性程度。
【 关键词 】 胶质瘤 ； 全反式维 甲酸 ； 细胞周期 ；２Ｋｐ ； ｐ７ ｉｌ胶质纤维酸性蛋白 【 中图分类号 】７ — ６ １ Ｒ３ ３ 【 文献标识码】 Ａ Ｄ Ｉ１． ６／． ｓ． ７ — ９２２ １．７０ Ｏ ： ３ ９ｊｉｎ１ ２ ４９ ．０００．４ ０ ９ ｓ ６
大鼠C6脑胶质瘤血-瘤屏障的HRP示踪电镜研究
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四川 医学 ２０ １ ８年 １ ３ 月第 ２ ９琶（ １ 第 期） Ｓ ｈａ ｄ ｌＪｕｎ ｌ２０ ，ｏ ．９ ． ｉ ｕｎＭｅｉａ ｏｒａ ，０８ Ｖ１２ ， １ ｚ
● 基 础与 实验 研 究 ●
大鼠 Ｃ ６脑 胶 质 瘤 血 ． 屏 障 的 ＨＲ 瘤 Ｐ示 踪 电 镜 研 究
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吴 波 游 ， 潮 黄光 富 郭付 有 ， ，
紫杉醇体外诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡和其分子机制研究
ＲＴ－ＰＣＲ法检ＳＵ０．１
ＩＩ
ｍｏｌ／Ｌ
紫杉醇的不同时间点（４、８、１６、２４、４８ｈ）作用ｃ６脑胶质瘤细胞后Ｐｕｍａ、
Ｎｏｘａ、Ｂｉｍ、ｐ５３的ｍＲＮＡ水平的表达。 ４．分析上述指标在细胞凋亡过程中的变化及其相互关系。
温州医学院硕士学位论文
结果
１．紫杉醇对大鼠ｃ６脑胶质瘤细胞具有明显增殖抑制作用，随紫杉醇浓度的增 加细胞抑制率逐渐升高，４８ｈ细胞ＩＧ。约为０．１
ｔｏ
ｏｂｓｅｒｖｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ｐａｃｌｉｔａｘｅｌ
温州医学院硕士学位论文
紫杉醇体外诱导大鼠Ｃ６脑胶质瘤细胞 凋亡及其分子机制研究
中文摘要
目的
１．探讨紫杉醇的不同药物浓度、作用时限与大鼠ｃ６脑胶质瘤细胞凋亡过程的 关系，建立紫杉醇诱导大鼠ｃ６脑胶质瘤细胞株凋亡的细胞研究模型。 ２．分析大鼠ｃ６脑胶质瘤细胞在紫杉醇不同时限作用后，细胞抑制率、细胞周 期和细胞凋亡相关的热点分子Ｂｃｌ－２家族ＢＨ３－ｏｎｌｙ蛋白Ｐｕｍａ、Ｎｏｘａ、Ｂｉｍ的 ｍＲＮＡ水平的表达变化，以及ＢＨ３－ｏｎｌｙ蛋白与ｐ５３ ｍＲＮＡ水平表达相互之间的 关系，初步探讨紫杉醇诱导大鼠ｃ６脑胶质瘤细胞凋亡的机制。
ＩＩ
ｍｏｌ／Ｌ；细胞抑制率随紫杉
醇作用时间的延长逐渐升高，４８ｈ细胞抑制率为５１．７３％。 ２．紫杉醇诱导大鼠ｃ６脑胶质瘤细胞后生长情况和形态学变化：细胞从贴壁好、 生长密集、折光性好向贴壁少，细胞收缩体积变小，数目减少、折光性差， 出现坏死崩解细胞改变，个别细胞可见到核碎裂，呈凋亡形态学改变。 ３．紫杉醇诱导大鼠Ｃ６脑胶质瘤细胞后细胞凋亡的分析：流式细胞仪检测细胞 周期发现，随着紫杉醇诱导时间的延长，Ｇ２／Ｍ期细胞逐渐增加，ｓ期细胞逐 渐减少；０．１
冷冻治疗对大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡和p21表达的影响
冷冻治疗对大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡和p21表达的影响黄宽明;冯艳琴;张力;秦军;付锐;李新建;涂汉军;王伦长【期刊名称】《中国临床神经外科杂志》【年(卷),期】2006(11)4【摘要】目的研究冷冻治疗对大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡及其调控机制的影响。
方法建立C6大鼠脑胶质瘤动物模型,于冷冻治疗后第15天留取标本,以末端标记法(TUNEL)、流式细胞仪(FCM)检测肿瘤细胞凋亡,以免疫组化技术检测p21蛋白的表达。
结果冷冻可诱导C6大鼠脑胶质瘤细胞凋亡,上调p21的表达,二者呈显著正相关(P<0.01)。
FCM分析显示G1峰前出现典型的亚二倍体峰。
结论诱导细胞凋亡可能是冷冻杀伤脑胶质瘤细胞的另一重要机制;p21基因可能参与了这种细胞凋亡的调控。
【总页数】4页(P222-225)【关键词】冷冻;胶质瘤;凋亡;流式细胞仪;p21;大鼠【作者】黄宽明;冯艳琴;张力;秦军;付锐;李新建;涂汉军;王伦长【作者单位】郧阳医学院附属太和医院神经外科【正文语种】中文【中图分类】Q786;R616.3【相关文献】1.冷冻和重组人肿瘤坏死因子一α在C6大鼠脑胶质瘤治疗中的协同作用 [J], 黄宽明;马廉亭;张力;罗杰;涂汉军;王伦长2.冷冻治疗抑制大鼠C6脑胶质瘤增殖的实验研究 [J], 付锐;涂汉军;何跃;徐航3.诺帝对大鼠C6脑胶质瘤的诱导分化治疗作用及对信号转导分子STAT3和p-STAT3蛋白表达的影响 [J], 陈飞兰;张华蓉;卞修武;陈剑鸿;蒋雪峰;王清良4.冷冻联合rhTNF-α对C6大鼠脑胶质瘤细胞凋亡的影响及其调控机制 [J], 黄宽明;冯艳琴;黄敏;付锐;李新建;涂汉军;王伦长5.冷冻治疗对C6大鼠脑胶质瘤细胞增殖和凋亡的影响 [J], 黄宽明;冯艳琴;涂汉军;王辉;李新建;王伦长因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
全反式维甲酸诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究
差 异具有 非 常显 著性 统计学 意 义 。
２ 结 果
取 对数 生长期 Ｃ ６细胞 ， ０２ ％胰蛋 白酶常 温 以 ． ５
消 化 ． 含 １％血 清 的 Ｄ Ｍ 培养 液 配成 ５ １ ４ｍ 用 ０ ＭＥ × Ｏ／ ｌ 的细胞 悬液 ， Ｌ１０ 接种 于 ９ Ｌ 每孑 ０ ￣１ ６孑 培养 板 。培 养
共 同孵 育 ２ 、８及 ７ ｈ Ｍ１ ４４ ２ ， Ｔ 检 测 药 物 对 细 胞 生 ｒ法 长 的影 响 （ １ 。 果 显示 Ａ Ｒ 图 ）结 Ｔ Ａ对 Ｃ ６细 胞 的抑 制
作 用具 有 时间 和浓度 依赖 性 ．处理 组 与对 照组之 间
１ ｔ ｏ Ｌ五 组 以及 培 养 液 对 照组 ． ６组 ． 组 设 ６ｚ ｌ ｍ ／ 共 每
Ｐ Ｓ混 均 ， Ｂ 吸人 ０５ ｌ Ｄ ｆ 中 ， 心 ， Ｐ Ｓ ．ｍ 的 ｏ 管 离 去 Ｂ 。将
１１ 细胞 培养 ．
大鼠Ｃ ６脑胶 质 瘤 细胞 株 购 自吉 林 大学 基 础 医
学 院病 理生 理教研 室 。细胞用 含 １％灭 活小 牛血 清 Ｏ 的 Ｄ Ｍ 培 养基 加 入 Ｎ Ｈ Ｏ ｇ Ｌ ＭＥ ａ Ｃ ３ ／ ，青霉 素 ４ ２ Ｏ万
１ － 主 要 试 剂 ２
脱 水 。浸 透 。包埋 聚 合 。定位 切 片 ：切 片厚 度 ６ ～ Ｏ
７ｎ ０ ｍ。 电镜观 察拍 照 。 １ Ｗｅｔ ｎｂｏ 法 检测 ｃｓ ａｅ ３蛋 白表达 变化 ． ６ ｓ ｒ ｌ ｅ ｔ ａｐ ｓ一 提 取 蛋 白 ，Ｄ Ｓ Ｓ电 泳 ， 膜 ， 闭 ， 抗 ４ 转 封 一 ℃过
对 Ｗｅｔｒ ｌｔ ｓ ｎｂｏ 结果 进行 灰度 扫 描 。 ｅ １ ． 统计学 分 析 ７
全反式维甲酸抑制大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖的实验研究
全反式维甲酸抑制大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖的实验研究付锐;徐航;涂汉军;李新建;张力;黄宽明;段波;袁先厚【期刊名称】《中国临床神经外科杂志》【年(卷),期】2007(12)5【摘要】目的探讨全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖的抑制作用及其机制。
方法建立大鼠C6脑胶质瘤模型,腹腔注射全反式维甲酸后,MRI检测胶质瘤的体积变化、流式细胞仪检测细胞增殖时相变化及免疫组化检测p27Kip1蛋白的变化。
结果治疗组较对照组肿瘤体积明显减小(P<0.05);G_1期细胞比例明显增加(P<0.05),S期细胞比例明显减少(P<0.05);p27Kip1蛋白的表达明显增加(P<0.05)。
结论全反式维甲酸通过上调p27Kip1蛋白的表达而抑制大鼠C6脑胶质瘤细胞增殖。
【总页数】3页(P273-275)【关键词】胶质瘤;全反式维甲酸;p27Kip1;细胞周期;MRI【作者】付锐;徐航;涂汉军;李新建;张力;黄宽明;段波;袁先厚【作者单位】郧阳医学院附属太和医院神经外科;武汉大学中南医院神经外科【正文语种】中文【中图分类】Q786;R730.264【相关文献】1.全反式维甲酸对C6胶质瘤细胞增殖分化的影响 [J], 唐珂;曾芳;廖萍;李小玲;李桂源;曹利;范松青;武明花;黄河;周艳宏;周鸣;唐运莲;王蓉2.全反式维甲酸对大鼠C6脑胶质瘤细胞分化的影响 [J], 付锐;徐航;涂汉军;罗杰;张力3.全反式维甲酸诱导大鼠C6脑胶质瘤细胞凋亡的实验研究 [J], 綦斌;谭岩;罗毅男;付双林;毕春华;田宇4.冷冻联合全反式维甲酸抑制大鼠C6脑胶质瘤增殖的实验研究 [J], 付锐;徐航;罗杰;涂汉军;张力;黄宽明5.全反式维甲酸诱导分化大鼠C6脑胶质瘤的实验研究 [J], 付锐;王伦长;涂汉军;李新建;黄宽明;何跃;黄敏;徐航因版权原因，仅展示原文概要，查看原文内容请购买。
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温馨提示：不可用于临床治疗。
产品名称：C6 大鼠脑胶质瘤细胞
产品货号：QY-CS0012
产品储存：液氮储存
产品包装：瓶装
产品应用：细胞实验研究
质量控制：本产品经过了细菌、真菌、霉菌、病毒（HIV、HBV、HCV）、支原体检测。
产品用途:本产品仅供科研实验，不可应用于治疗等其他方面。
无菌操作C6 大鼠脑胶质瘤细胞 注意事项
CHL 仓鼠肺细胞
MKN-28 人胃癌细胞
U266 人多发性骨髓瘤细胞
HT-29 人结直肠腺癌细胞
JAR 人胎盘绒毛癌细胞
CCRF-CEM [CCRF CEM]人急性淋巴细胞白血病T淋巴细胞
LLC-PK1 猪ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ细胞
OS-RC-2 人肾癌细胞
TM3 小鼠睾丸间质细胞
MDA-MB-453人乳腺癌细胞
BT-474 [BT474]人乳腺导管癌细胞
ES-2 人卵巢透明细胞癌细胞
HCC827人非小细胞肺癌细胞
NCI-H358人非小细胞肺癌细胞
SW480人结肠癌细胞株
HEL 人红白细胞白血病细胞
A7r5 大鼠胸大动脉平滑肌细胞
Ca Ski人宫颈癌肠转移细胞
SGC-7901 人胃腺癌细胞
1、操作前要洗手，进入超净台后手要用75%酒精或0.2%新洁尔灭擦试。试剂等瓶口也要擦
2、点燃酒精灯，操作在火焰附近进行，耐热物品要经常在火焰上烧灼，金属器械烧灼时间不能太长，以免退火，并冷却后才能夹取组织，吸取过营养液的用具不能再烧灼，以免烧焦形成碳膜
3、操作动作要准确敏捷，但又不能太快，以防空气流动，增加污染机会