PEI转染试剂的Protocol教学提纲

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P E I转染试剂的P r o t o c o l

精品资料

PEI转染Protocol

1.转染前一天(24h左右)胰酶消化细胞并计数,细胞铺板,使其在转染时汇合度为

70~90%。

2.转染前1h,将细胞培养基更换为Opti-MEM或者DMEM基础培养基(若使用Opti-

MEM,PEI转染效果更佳)。

3.用一定体积的Opti-MEM稀释质粒,小心混匀,记为A液;用相等体积的Opti-MEM稀

释PEI,小心混匀,记为B液(质粒:PEI=1:2,W/W),室温静止5min。

4.将B液缓慢加到A液中并混匀,最好使用旋涡振荡器边加边震荡。然后室温放置

20min。

5.将DNA-PEI混合液缓慢加入到细胞培养基中,轻轻混匀。

6.

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