RFectPM原代细胞小核酸转染试剂说明书
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所干扰基因本身及分析方法。可设置不同的孵育时间进行实验以确定最佳孵育时间。
转染实验优化: 为了提高转染效率，最好对转染条件进行优化，特别是首次使用。例如：24 孔培养板，调整 siRNA 与 RFectPM 试剂的用量。 siRNA 用量在 0.6-30 pmol (final concentration 1- 50 nM)之间调整，RFectPM 试剂用量在 1.0 - 3.0μl 之间调整。 转染实验要点 转染过程不可添加抗生素，否则会导致细胞死亡； 首次实验 siRNA 的用量可稍大（一般 10 nM） ，后续实验根据实验结果修改。
◎转染细胞范围广，绝大多数原代细胞和悬浮细胞都能获得比较理想的 转染结果
储存条件：-20℃
应用 ◎siRNA 转染 ◎antisense RNA 转染 ◎200bp 内的小分子 DNA 转染
产品介绍
RFectPM 原代细胞小核酸转染试剂是我公司美国研发团队在 RFect 细胞株小核酸转染试剂的基础上加以改进研发成功的专门用于原代细胞和 悬浮细胞小核酸转染的试剂。RFectPM 可用来转染 siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以内的小分子 RNA 和 DNA，可转染绝大多数 原代细胞和悬浮细胞。目前，无论国外还是国内，原代细胞、悬浮细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的原代细 胞、悬浮细胞核酸转染试剂。RFectPM 能够高效转染绝大多数原代细胞和悬浮细胞，获得比较理想的基因敲除效果。甚至对一些活体寄生虫 幼虫，RFectPM 也能获得较为理想的转染结果。对于大多数原代细胞，RFectPM 的细胞转染阳性率都在 80%以上，而转染细胞死亡率不到 10%。 RFectPM 的使用也极其简便，先将 sRNA 与 RFectPM 室温混合，再将 siRNA-RFectPM 混合物直接加入含培养基的细胞，血清对转染效果没有影 响，不必刻意添加或更换培养液。有关 RFectPM 原代细胞小核酸转染试剂的材料合成和试剂配制我们已申请了国际专利，并通过 PCT 覆盖国 际上多个国家和地区。
RFectPM Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels
Culture vessel
Surface area/well (cm2)
Vol. of growth medium (µl)
Vol. of dilution medium (µl)
操作步骤：本说明书适用于 24 孔培养板的转染实验，其他规格的培养板的用量参照下面表格，表格给出的是每孔的用量与体积。 A. 细胞接种：转染前一天接种细胞，每孔 500 μl 培养基（不可加抗生素），使细胞在转染时密度在 30-50% 。 B. siRNA-RFectPM 混合物准备： 1. 6pmol siRNA 用 50μl 无血清培养基稀释。 2. 2μl RFectPM 用 50μl 无血清培养基稀释。轻轻混匀，室温孵育 5min。注意：确保在 25 min 内执行第三步操作，不要过于延迟。 3. 孵育 5min 后，将 siRNA 稀释液与 RFectPM 稀释液混合（总体积 100μl）。轻轻混匀，室温孵育 20 min。 C. 将混合物加到培养的细胞内（完全培养基培养）： 1. 将 100μl 混合物加入培养孔内，培养孔内含有 0.5ml 培养的细胞。轻轻晃动培养板，混匀。 2. 37°C 培养 18-72h，检测基因抑制效果。如果需要，细胞培养 4-6h 时可以更换培养基，但不是必须。孵育时间的长短，取决于细胞类型、
质量控制 本产品经严格的质量检验证明，无生物污染 注意： 本产品仅用于科研实验
常州百代生物科技有限公司 地址：常州市东方东路 51 号新东方物流园 电话: 0519-88050392
传真: 0519-83382790
siRNA Amount (pmol)
RFectPM (µl)
96-well
0.3
100
2 x 10
1.2
0.4
48-well
0.8
250
2 x 25
3
1
ห้องสมุดไป่ตู้
24-well
2
500
2 x 50
6
2
12-well
4
1000
2 x 100
12
4
6-well
10
2500
2 x 250
30
10
储存和运输 蓝冰运输，4°C 保存，长期不用于-20°C 储存，避免反复冻融 有效期 -20℃保存条件下，有效期为 1 年
RFectPM 原代细胞小核酸转染试剂
货 号：BIOG-11014: 0.5ml BIOG-11015: 1.0ml BIOG-11016: 1.5ml
产品特点
◎卓越的原代细胞转染性能：细胞转染阳性率一般在 80%以上，基因敲 除效果明显，肝细胞 Lamin A/C 基因敲除效率在 95%以上
◎极低的细胞毒性：转染细胞死亡率不到 10%，大大降低了因细胞毒性 对实验结果的影响
转染实验优化: 为了提高转染效率，最好对转染条件进行优化，特别是首次使用。例如：24 孔培养板，调整 siRNA 与 RFectPM 试剂的用量。 siRNA 用量在 0.6-30 pmol (final concentration 1- 50 nM)之间调整，RFectPM 试剂用量在 1.0 - 3.0μl 之间调整。 转染实验要点 转染过程不可添加抗生素，否则会导致细胞死亡； 首次实验 siRNA 的用量可稍大（一般 10 nM） ，后续实验根据实验结果修改。
◎转染细胞范围广，绝大多数原代细胞和悬浮细胞都能获得比较理想的 转染结果
储存条件：-20℃
应用 ◎siRNA 转染 ◎antisense RNA 转染 ◎200bp 内的小分子 DNA 转染
产品介绍
RFectPM 原代细胞小核酸转染试剂是我公司美国研发团队在 RFect 细胞株小核酸转染试剂的基础上加以改进研发成功的专门用于原代细胞和 悬浮细胞小核酸转染的试剂。RFectPM 可用来转染 siRNA、antisense RNA、microRNA 等 200bp 以内的小分子 RNA 和 DNA，可转染绝大多数 原代细胞和悬浮细胞。目前，无论国外还是国内，原代细胞、悬浮细胞的核酸转染都是个热点难题，市场还缺乏真正有效的商品化的原代细 胞、悬浮细胞核酸转染试剂。RFectPM 能够高效转染绝大多数原代细胞和悬浮细胞，获得比较理想的基因敲除效果。甚至对一些活体寄生虫 幼虫，RFectPM 也能获得较为理想的转染结果。对于大多数原代细胞，RFectPM 的细胞转染阳性率都在 80%以上，而转染细胞死亡率不到 10%。 RFectPM 的使用也极其简便，先将 sRNA 与 RFectPM 室温混合，再将 siRNA-RFectPM 混合物直接加入含培养基的细胞，血清对转染效果没有影 响，不必刻意添加或更换培养液。有关 RFectPM 原代细胞小核酸转染试剂的材料合成和试剂配制我们已申请了国际专利，并通过 PCT 覆盖国 际上多个国家和地区。
RFectPM Transfection Reagent Formats for Various Cell Culture Vessels
Culture vessel
Surface area/well (cm2)
Vol. of growth medium (µl)
Vol. of dilution medium (µl)
操作步骤：本说明书适用于 24 孔培养板的转染实验，其他规格的培养板的用量参照下面表格，表格给出的是每孔的用量与体积。 A. 细胞接种：转染前一天接种细胞，每孔 500 μl 培养基（不可加抗生素），使细胞在转染时密度在 30-50% 。 B. siRNA-RFectPM 混合物准备： 1. 6pmol siRNA 用 50μl 无血清培养基稀释。 2. 2μl RFectPM 用 50μl 无血清培养基稀释。轻轻混匀，室温孵育 5min。注意：确保在 25 min 内执行第三步操作，不要过于延迟。 3. 孵育 5min 后，将 siRNA 稀释液与 RFectPM 稀释液混合（总体积 100μl）。轻轻混匀，室温孵育 20 min。 C. 将混合物加到培养的细胞内（完全培养基培养）： 1. 将 100μl 混合物加入培养孔内，培养孔内含有 0.5ml 培养的细胞。轻轻晃动培养板，混匀。 2. 37°C 培养 18-72h，检测基因抑制效果。如果需要，细胞培养 4-6h 时可以更换培养基，但不是必须。孵育时间的长短，取决于细胞类型、
质量控制 本产品经严格的质量检验证明，无生物污染 注意： 本产品仅用于科研实验
常州百代生物科技有限公司 地址：常州市东方东路 51 号新东方物流园 电话: 0519-88050392
传真: 0519-83382790
siRNA Amount (pmol)
RFectPM (µl)
96-well
0.3
100
2 x 10
1.2
0.4
48-well
0.8
250
2 x 25
3
1
ห้องสมุดไป่ตู้
24-well
2
500
2 x 50
6
2
12-well
4
1000
2 x 100
12
4
6-well
10
2500
2 x 250
30
10
储存和运输 蓝冰运输，4°C 保存，长期不用于-20°C 储存，避免反复冻融 有效期 -20℃保存条件下，有效期为 1 年
RFectPM 原代细胞小核酸转染试剂
货 号：BIOG-11014: 0.5ml BIOG-11015: 1.0ml BIOG-11016: 1.5ml
产品特点
◎卓越的原代细胞转染性能：细胞转染阳性率一般在 80%以上，基因敲 除效果明显，肝细胞 Lamin A/C 基因敲除效率在 95%以上
◎极低的细胞毒性：转染细胞死亡率不到 10%，大大降低了因细胞毒性 对实验结果的影响