新生儿溶血病(HDN)的免疫血液学实验
HDN的血清学实验室检测-4页精选文档
HDN的血清学实验室检测结果：383例新生儿溶血病患者中，直接抗人球蛋白试验阳性率为53.12%，游离抗体试验阳性率为71.54%，抗体释放试验阳性率为83.29%。
结论：释放试验敏感度最高，是判定新生儿溶血病最有力的实验室证据。
Doi：10.3969/j.issn.1671-8801.2013.08.538新生儿溶血症（hemolytic disease of the newborn，HDN）是指母婴血型不合，母体血液中针对胎儿红细胞的免疫抗体IgG通过胎盘进入胎儿循环，发生同种免疫而引起的溶血。
在人类已发现的血型系统中，以ABO 血型系统不合引起的新生儿溶血病最常见，其次为Rh血型系统。
新生儿溶血病的临床表现轻重不一，取决于抗原性的强弱、个体的免疫反应、胎儿的代偿能力和产前的干预措施等因素。
Rh溶血病临床表现较为严重，进展快，而ABO溶血病的临床表现多数较轻。
Rh溶血病一般不发生在第一胎，而ABO溶血病可发生在第一胎。
HDN的血清学检测对该疾病的临床诊断具有重要的价值。
笔者就我市近年来发生的383例HDN的血清学检测结果分析报告如下。
1 材料与方法1.1 标本来源。
2010年1月～2013年1月本市4家医院送检的临床高胆红素血症或母亲血型为Rh阴性的HDN患儿383例，标本为患儿及母亲血液。
1.2 试剂。
抗-A（B）血清（长春生物制品研究所）；抗-D、抗人球蛋白试剂（广谱）、单克隆IgG、单抗C3（上海市血液中心）；ABO标准红细胞（本站自制）。
2 结果383例新生儿溶血病患者中，直接抗人球蛋白试验阳性率为53.12%，游离抗体试验阳性率为71.54%，抗体释放试验阳性率为83.29%。
3 讨论3.1 发病原因。
由于母亲的血型与胎儿（或婴儿）的血型不合，如Rh 血型不合或ABO血型不合引起同族免疫性溶血病，Rh血型不合所致溶血常较ABO血型不合为严重。
3.1.1 Rh血型不合。
Rh血型不合引起的新生儿溶血症在中国的发病率较低。
新生儿溶血性疾病产前血型血清学检测标准操作规程
新生儿溶血性疾病产前血型血清学检测标准操作规程一、目的为规范新生儿溶血性疾病（HDN）产前血型血清学检测的技术操作，准确评估胎儿发生HDN 的危险程度，从而辅助临床正确的诊断和治疗。
二、适用范围输血科进行新生儿HDN产前血型血清学检测。
三、原理通过鉴定孕妇及其胎儿父亲的血型，推测胎儿可能的血型，进一步检测孕妇体内是否有针对胎儿红细胞血型抗原的抗体及其效价来评估胎儿发生HDN的危险程度。
四、步骤和方法1、检测孕妇ABO、RhD血型，红细胞不规则抗体及其丈夫ABO、RhD血型。
根据夫妇ABO 血型组合来推测母婴ABO血型是否相合：如果母婴血型配合则不需检测孕妇ABO血型IgG 抗体效价；如果母婴血型不配合（可能不配合）则需检测孕妇可能致敏胎儿红细胞的ABO 血型IgG抗体效价。
2、由于抗-A或者抗-B主要为IgM类，ABO血型不合极少发生胎儿HDN，故除有死胎史或者新生儿黄疸史的孕妇外，不需检测IgG抗-B及抗-A的效价。
3、如果孕妇为RhD阴性，丈夫RhD为阳性，孕妇不规则抗体阴性，建议孕妇以后每个月复检不规则抗体直至分娩。
4、如果孕妇不规则抗体为阳性，则需鉴定其特异性、Ig类型、37℃反应情况及其效价和丈夫红细胞是否表达对应的抗原，来评估抗体引起的HDN危险程度。
5、结果判定：效价>143有临床意义。
五、质量控制1、用于试验的试剂都在有效期内使用。
2、严格试验操作，设置阴、阳对照，结果符合预期才可判定试验结果。
六、注意事项1、HDN产前血型血清学检测结果只能为评估胎儿发生HDN的风险提供依据，并不能确定HDN 。
母婴ABO血型不合且孕妇IgG类ABO血型抗体效价在妊娠期持续升高或者检出了IgG类红细胞不规则抗体都是HDN的风险因素。
2、传统认为ABO血型系统IgG抗体效价高于64具有临床意义。
随着检测水平得的提高，其作为临床参考意义不大。
3、抗体效价与HDN的发生有一定的相关性，但是抗体效价的高低与HDN的严重程度并不完全一致，可能与IgG抗体亚类不同有关。
HDN实验设计
二、实验设计 （一）标本、试剂及器材 1.标本：患儿 EDTA-K2 抗凝全血 母亲 EDTA-K2 抗凝全血 父亲 EDTA-K2 抗凝全血 2.试剂： （1）直接抗人球试验：抗人球蛋白凝胶微柱卡（含有 IgG 类不完全抗体或补体致 敏红细胞 （2）抗体释放试验：乙醚、标准红细胞 3.器材:BTX-1800 全自动血液分析仪 、微柱凝胶卡专用水平离心机、专用孵育器、 离心机、微量加样枪、一次性吸头、试管及试管架、标记笔 （二）主要实验 1.常规检查 （1）血常规 2．血型鉴定 3.溶血病特异性检查【2】 （1）直接抗人球蛋白试验：凝胶具有分子筛效应和亲和效应，在微柱凝胶介质中 红细胞抗原与相应抗体结合，经低速离心，凝集的红细胞悬浮在凝胶上层，而未与抗体 结合的红细胞则沉于凝胶底部。 （2）抗体释放试验：红细胞上的抗原与血清中抗体在适合条件下发生凝集或致敏， 这种结合是可逆的。如改变某些物理条件，抗体又可从结合的细胞上放散，再以相应的 红细胞鉴定放散液内抗体的种类并测定其强度，用以判定原来红细胞上抗原的型别。Rh 血型 IgG 抗体以乙醚放散法为常用。 （三）辅助实验 超声检查 （2）胆红素测定
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一、发病机制 新生儿溶血病(HDN)是由于母婴血型不合而引起的同族血型免疫性疾病，可发生于 胎儿和新生儿早期。Rh 血型不合多数是母亲为 RhD 抗原阴性，但 RhD 抗原阳性母亲的 婴儿也可以发病。 第一胎发病率很低， 因为初次免疫反应产生 IgM 抗体需要 2 到 6 个月， 且较弱，不能通过胎盘进入胎儿体内，而胎儿红细胞进入母体多数发生在妊娠末期或临 产时，故第一胎常处于初次免疫反应的潜伏阶段。当再次妊娠发生免疫反应，只需要几 天就可以出现，主要为 IgG 能通过胎盘的抗体，并能迅速增多故往往第二胎发病。大多 数病例出生时与正常新生儿相似，并无明显的贫血水肿和肝脾肿大，在 l～2 天后逐渐
输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程
输血科新生儿溶血病血型血清学检查标准操作规程1、目的：规范血液免疫学产前检查操作，确保试验过程及结果的准确性与可靠性。
2、范围：本规程适用于实验室血液免疫学产前检查试验操作。
3、职责：经授权的血型实验室试验人员负责血液免疫学产前检查试验过程及报告的发出。
4、原理孕妇和丈夫ABO血型不合（O/A、O/B、O/AB、A/B、A/AB、B/A、B/AB）时，孕妇体内的IgG抗A（B）可能会引起新生儿溶血病的发生。
本试验通过检测孕妇血清中有无IgG性质的抗A（B）抗体及其效价（应用巯基试剂破坏IgM抗体，检测IgG抗体效价）即可预测ABO系HDN发生的可能性。
应用筛选红细胞可检测孕妇血清中是否存在不规则抗体，如果存在，应用谱细胞进行抗体鉴定，确定抗体的特异性，进一步检测非ABO系新生儿溶血病。
5、所需设备、材料或试剂：37℃恒温水浴箱、细胞洗涤离心机、抗-A抗-B血型定型试剂（单克隆抗体）、抗-D RH血型定型试剂（单克隆抗体）、凝聚胺介质试剂、抗人球蛋白试剂（抗-IgG、C3d）、（A、B、O）型标准红细胞悬液（2—5%）、商品化筛选细胞、谱细胞、2—ME试剂、12×75mm试管、塑料滴管。
6、检测环境条件：温度：18—25℃；湿度：30—70%7、标本要求7.1标本接收在接收标本时，应尽可能的了解、核对、记录患者的相关资料，包括受血者姓名、年龄、性别、临床诊断、输血史、用药史、妊娠史、标本编码等；7.2检验人员收到被检者产前检查申请按照申请单内容在试管上做标记(用记号笔在试管上标明被检者姓名、性别)，保留申请记录。
7.3按照要求进行血液采集。
将采好的血液沿试管壁注入已标识的抗凝试管中，反复颠倒混匀，放入2-8℃冰箱待用。
并填写《外来标本交接记录》及相关记录。
7.4标本的种类与数量：产前检查需送夫妇血样，血样均需抗凝（EDTA抗凝），女（母）5ml，男3ml。
7.5标本的保存与处理：完成所有试验内容后，要仔细核对实验结果，发出实验报告后，将实验所用的标本原始送检管存于2-8℃冰箱内至少7天以便进行查找和核对，之后交由单位相关部门统一处理。
新生儿溶血病免疫血液学检测进展
效价 ＞５ １ ２ ，为高度可疑 ，如 同时有既往Ｈ Ｄ Ｎ史则发病率可高达 ８ ７ ． ５ ％；建议换血治疗 】 。
２ ． １ ． ２ 对Ｒ ｈ ． Ｈ Ｄ Ｎ：即胎 儿 为Ｒ ｈ 阳性 ，母 亲 为Ｒ ｈ 阴性 的血型 不合 患 者 ，由于 Ｒ ｈ 血 型 没有 天 然 抗体 ，孕 妇抗 ． Ｒ ｈ Ｄ效价 高 低 和她 自 身 的 溶血 程 度 有 着 紧密 的关 系 。伴 随 着 其抗 一 Ｒ ｈ Ｄ的不 断增 加 ， Ｈ Ｄ Ｎ的 溶血 病 症 也 会逐 渐 加 重 。如 果 Ｒ ｈ 呈 阴性状 态 ，必 须 紧 密 观 察 孕妇 血 清 里 面抗 。 Ｒ ｈ Ｄ的浓 度 。 然后 按 照 抗体 效 价来 指导 临 床工 作 ，做 好预 防措 施 ，及 时控 制孕 妇 出现 早产 或产 后溶 血等 问 题 。 当首 次测 定 确定 Ｒ ｈ 阴性 后 ，必 须马 上进 行 。 当效 价 ＜８ 时， 应定 期检 查其 抗 体效 价 ，当孕 ２ ８ ～ ３ Ｏ 周 以后 每２ ４ 周 重复 检测 。
血 】 。 ２ 关于 Ｉ Ｉ ＤＮ免疫血液 学检 测方法
Ｈ ＤＮ 是 通 过 母体 再 由胎 盘 出血 的方 式 传 送 给胎 儿 的抗 体 ， 最 终 引发 的 。 当然 ，母体 胎 盘对 抗体 是 带有 一定 的选 择 性 的 。只 有 一 种 抗体 能顺 利 通 过胎 盘 的 免疫 球 蛋 白 ，那 就是 Ｉ ｇ Ｇ 类抗体。
并且Ｉ ｇ Ｇ 类 抗 体 通过 胎 盘 是一 个 主 动转 运 的过 程 ，当母 胎 或母 婴
当抗体滴度 ＞１ ６ 以上或抗体效价有２ 个滴度差异时 ，认为有显著 性改变。可以通过羊水穿刺来检测其胆红素以及胎儿的成熟度。 也可以在Ｂ 超 的帮助下 ，通过脐血来检测是否贫血以及溶血的具
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程1、目的为规范输血科HDN血型血清实验诊断的技术操作，确保检测结果准确，明确HDN诊断及其原因，依据《输血实验室管理程序》4.1.9条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科对HDN进行血型血清学实验诊断及其实验操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理4.1试验方法：微柱凝胶卡式法4.2原理：本微量定型系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。
当抗原抗体反应，抗人球试验时，血细胞发生凝集。
离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应，未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部，呈阴性反应。
5、样本采集和处理取患儿不抗凝血1-2ml及EDTA-K2抗凝血3～4ml,24小时内送检。
将不抗凝血离心分离出血清备用。
6、试剂：5.1 0.9%的生理盐水；5.2戴安娜合血卡；5.3血清抗A（市售）、抗B（市售）、抗A+B（健康O型人血清）、抗D标准血清；5.4 5%A、B及0型试剂红细胞盐水悬液；5.5长春博迅公司的血型定型试剂卡；7、仪器：1)XTL-4.7细胞洗涤离心机；2)DiaMed-ID Incubator 37 SⅠ温育器；3)DiaMed-ID Centrifuge 12 SⅡ7.5操作程序：7.5.1婴儿及母亲ABO血型鉴定是检查第一步，以便考虑以后进一步检查程序。
7.5.2如母子ABO不合（母O子A、B，母A子B、AB，母B子A、AB）则按下列步骤进行患儿血液三项试验：⑴直接抗人球蛋白试验（DAT）（微柱凝胶卡式法）1)取患儿不抗凝血离心后，用0.9%的生理盐水配成0.8%的红细胞悬液。
2)在戴安娜LISS/Coombs卡上标明患儿的姓名或编号，撕开卡上的铝箔，加入配好的患儿红细胞悬液50μl。
3)将卡放入戴安娜离心机离心10分钟后判读结果。
新生儿溶血病血型血清学检验操作规程
新生儿溶血病血型血清学检验操作规程 SXYJ-GZ-02191目的辅助临床诊断母婴血型不合导致的新生儿溶血病。
2适用范围母婴血型不合新生儿黄疸者或产妇产前检出免疫性血型抗体且伴有母婴血型不合者。
3职责检测者负责依据此程序进行HDN产前血型血清学检验操作。
4材料与设备抗-A、抗-B血清、反定型试剂红细胞、血型物质或二硫苏糖醇（DTT）；实验室常规应用的耗材备品准备充分、仪器设备运行状态正常。
5操作方法5.1检查父亲、母亲及新生儿标本血型5.1.1ABO血型鉴定（方法参见SXYJ-GZ-0202）；5.1.2RhD抗原鉴定（方法参见SXYJ-GZ-0205）。
5.2新生儿标本的三项试验5.2.1直接抗人球蛋白试验：（方法参见SXYJ-GZ-0210）。
ABO新生儿溶血病时，直接Coomb’T的结果只起参考作用；ABO以外的新生儿溶血病标本的直抗结果，对临床诊断起决定作用。
5.2.2游离IgG抗体测定：（方法参见SXYJ-GZ-0211）。
测定新生儿血清中是否存在游离的IgG抗体。
用A型、B型红细胞检测可发现，A型新生儿血清中可有少量抗A和较多抗B；B型新生儿血清中可有少量抗B和较多的抗A，抗体筛选红细胞用来筛选ABO以外的IgG抗体，结果阳性时需要用谱细胞鉴定其特异性。
5.2.3放散试验：（方法参见SXYJ-GZ-0209）。
采用热放散方法，放散液中抗体鉴定用间接Coomb’T法（方法参见SXYJ-GZ-0211）。
患儿红细胞上放散出抗A、抗B或放散出ABO以外抗体，都是阳性指征。
5.3母亲标本的检查方法参见SXYJ-GZ-02186结果判定6.1根据凝集强度(方法参见SXYJ-GZ-0202:5.2.1.6)对结果进行判读6.2ABO HDN6.3其它血型系统HDN7报告发放根据检测结果形成报告，报告发放至检验申请送检人。
8注意事项8.1如果新生儿标本检测游离抗体阳性，直抗应该阳性，放散试验也应该是阳性，故在直抗阳性、游离抗体阳性时，放散试验可省去不做。
新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程
HDN产前免疫血液学试验检测标准
⒊ 第二次检测时可以使用第一次的 冻存标本做平行对照，有助于排除 实验技术和试剂红细胞的干扰。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 三、标本要求
❖ ⒈ 第一次检查：采集夫妇双方EDTA抗 凝血各3-5毫升。
❖ ⒉ 复查检查：采集夫妇双方EDTA抗凝 血3-5毫升。
全国首届HDN实验室工作者研讨会内容 ❖⒈ 大会交流 ❖ 专家讲座：HDN临床和实验室研究的
国内外进展 ❖⒉ 研讨：
（1）研讨内容： ① 样本采集 ② 实验项目及操作 ③ 结果判定或解释
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（2）研讨要达到目的：“三化” ❖ ① 实验方法的规范化 ❖ ② 临床导向科学化 ❖ ③ 不同实验室的结果互相可比化
❖ ⒊ 如果无配偶的血液标本，则无法检 测孕妇是否有针对其配偶特有的、低 频率抗原所产生的免疫性抗体。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
❖ 四、检查项目
❖⒈ 夫妇ABO、Rh(D)血型鉴定。
❖⒉ 孕妇/孕前妇女血液中IgG抗A（B）抗 体效价检测：
❖ 孕妇/孕前妇女是O型，若配偶是A型或B 型，检测孕妇/孕前妇女相应的IgG抗A （B）抗体效价；若配偶是AB型，分别检 测孕妇/孕前妇女IgG抗A（B）抗体效价。
不合应在出生后尽早为好。
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HDN产后免疫血液学试验检测标准
❖⒉ 采样部位：静脉血、脐血标本均可。
❖ 注：因为母婴ABO血型不合的新生儿脐 带血大约有20﹪血清学常规三项试验 为阳性，但临床上并无新生儿溶血症 状，血清胆红素也未见升高【摘自王 羽主编，全国临床检验操作规程（第3 版）268页】。若条件允许，产后血液 学试验推荐使用静脉血。
新生儿溶血病设计
新生儿溶血病(HDN)实验室检查一、父母及新生儿血型鉴定目的：研究父母、新生儿血型与新生儿溶血病的关系原理：用已知的IgM类特异抗体与受检红细胞在室温条件下、盐水介质中反应，根据红细胞是否出现凝集来测定受检者细胞膜上有无与血型抗体相对应的抗原，从而判断和鉴定受检者的血型。
器材：小试管、记号笔、试管架、离心机、玻片、显微镜试剂：标准抗A、抗B血清、单克隆IgM型RhD抗血清（商品试剂）生理盐水标本：抗凝静脉血或末梢血实验步骤：制备受检者5%红细胞生理盐水悬液：抗凝血离心或红细胞自然沉降后取管底下层的红细胞大约10滴于小试管中，加入生理盐水2ml，充分混匀红细胞与生理盐水。
2500r/min离心3min后弃上清液，重复洗涤3次。
自管底吸取1滴压积红细胞加入19滴生理盐水混匀，此即为5%的红细胞生理盐水悬液。
1、玻片法（1）取洁净的玻片1块，用记号笔画出小格，标明A、B、D（2）在玻片已标记的区域内滴加抗A、抗B血清、RhD抗血清各1滴（3）在滴加抗血清的小格中分别加入受检者5%红细胞生理盐水各1滴；不断轻轻转动玻片，使抗血清与红细胞充分混匀，持续约1~5min（4）观察并判断结果肉眼观察有无凝集或溶血反应，再用低倍镜观察，判断阴性、阳性和阳性强度。
2、试管法（1）取小试管3支，分别标记A、B、D（2）分别滴加抗A、抗B血清、RhD抗血清于相应标记的试管中（3）分别滴加受检者5%红细胞生理盐水悬液1滴于试管中，混匀（4）以1000r/min离心1min（5）观察并判断结果取出试管，先观察上层清液有无溶血现象，再将试管轻轻摇动使沉于管底的红细胞浮起，肉眼观察有无凝集及凝集强度。
注意事项：1、器材：所用器材必须干燥洁净、防止溶血；为避免交叉污染，试管、尖滴管均一次性使用。
2、试剂：分型血清质量性能应符合合格实际要求。
3、标本：受检红细胞标本新鲜，无细菌污染。
4、标准抗血清从冰箱取出待其平衡致室温后在使用，用毕后应尽快放回冰箱保存，减少细菌污染。
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程
新生儿溶血病HDN血型血清学检查标准操作规程1、目的为规范输血科HDN血型血清实验诊断的技术操作，确保检测结果准确，明确HDN诊断及其原因，依据《输血实验室管理程序》4.1.9条款的要求制定本规程。
2、适用范围本文件适用于本院输血科对HDN进行血型血清学实验诊断及其实验操作技术的规范化管理。
3、职责：输血科技术人员负责本实验的技术操作。
4、试验方法及原理4.1试验方法：微柱凝胶卡式法4.2原理：本微量定型系统凝胶测试法基于生物化学凝胶过滤技术和离心技术及免疫化学抗原抗体特异反应。
当抗原抗体反应，抗人球试验时，血细胞发生凝集。
离心时凝集块不能通过凝胶间隙而留在凝胶上层，呈阳性反应，未凝集细胞离心时可通过凝胶间隙而沉积在凝胶管底部，呈阴性反应。
5、样本采集和处理取患儿不抗凝血1-2ml及EDTA-K2抗凝血3〜4ml,24小时内送检。
将不抗凝血离心分离出血清备用。
6、试剂：5.10.9%的生理盐水；5.2戴安娜合血卡；5.3血清抗A（市售）、抗B（市售）、抗A+B（健康O型人血清）、抗D标准血清；5.45%A、B及0型试剂红细胞盐水悬液；5.5长春博迅公司的血型定型试剂卡；7、仪器：1）XTL-4.7细胞洗涤离心机；2）DiaMed-IDIncubator37SI温育器；3）DiaMed-IDCentrifuge12SII7.5操作程序：7.5.1婴儿及母亲ABO血型鉴定是检查第一步，以便考虑以后进一步检查程序。
7.5.2如母子ABO不合（母。
子A、B,母A子B、AB,母B子A、AB）则按下列步骤进行患儿血液三项试验：⑴直接抗人球蛋白试验（DAT）（微柱凝胶卡式法）1）取患儿不抗凝血离心后，用0.9%的生理盐水配成0.8%的红细胞悬液。
2）在戴安娜LISS/Coombs卡上标明患儿的姓名或编号，撕开卡上的铝箔，加入配好的患儿红细胞悬液50口1。
3）将卡放入戴安娜离心机离心10分钟后判读结果。
4）结果观察：5）阳性：红细胞凝集，在凝胶柱中或表面形成红线。
新生儿溶血病ABO血型免疫性抗体检测分析
新生儿溶血病ABO血型免疫性抗体检测分析目的探讨分析新生儿溶血病(Hemolytic Disease of the Newborn, HDN)ABO 血型免疫性抗体检测的价值。
方法选取我院2011年1月~2013年12月期间收治的200例新生儿高胆红素血症患儿，采用抗人球蛋白法和微柱凝胶法对患儿实施血型血清学检测，对于母婴ABO血型系统不合的HDN患儿的血液标本进行新生儿溶血三项检验：直接Coomb实验、游离抗体测定、抗体释放实验，检测免疫性抗体IgG的特异性。
结果200例新生儿高胆红素血症患儿中，母婴ABO 血型系统不合的HDN发生率为56﹪（112/200）。
母婴ABO血型系统不合的HDN 患儿中，48.21﹪（54/112）的患儿为IgG抗A导致，51.79﹪（58/112）的患儿为IgG抗B导致。
其中直接Coomb实验的阳性率为36.61﹪（41/112），游离抗体测定的阳性率为79.46﹪（89/112），抗体释放实验的阳性率为100﹪（112/112）。
结论新生儿溶血病ABO血型免疫性抗体检测的价值较大，能够快速有效的诊断，因此及时采取有效的治疗，对防治HDN具有重要意义。
标签：新生儿溶血病；ABO血型；免疫性抗体检测新生儿溶血病(Hemolytic Disease of the Newborn, HDN)作为一种同族血型的免疫疾病，是因母体血型与胎儿血型不合而引起的。
临床主要依靠血型血清学的免疫性抗体检测来对HDN进行诊断。
本文旨在探讨HDNABO血型免疫性抗体IgG检测对临床诊断的意义。
1 资料与方法1.1一般资料选取我院2011年1月~2013年12月间收治的200例新生儿高胆红素血症患儿，其中男性患儿102例，女性患儿98例。
年龄10h~6d，平均年龄为(3.5±0.5)d。
ABO血型A型患儿101例，B型患儿99例。
患儿母亲均为O 型，患儿母亲、患儿RhD血型均为阳性。
新生儿溶血病患者的免疫血液学检测结果研究
新生儿溶血病患者的免疫血液学检测结果研究【摘要】目的探讨不同群体新生儿溶血病(HDN)患者中ABOHDN患者的检出率。
方法采用免疫血液学的有关试验，鉴定HDN患者的ABO血型，定性检测HDN患者红细胞上结合的及血液中游离的病理性IgG抗A(B)。
结果本组HDN患者中，ABO HDN 患者的总体检出率为79.29%,按性别分类,男性及女性患者中ABO HDN患者的检出率分别为78.48%、79.89%,按ABO血型分类,A型及B型患者中ABO HDN患者的检出率分别为79.42%、80.73%。
结论不同群体的HDN患者中ABO HDN患者的检出率均较高，都大于78%。
【关键词】免疫血液学; ABO新生儿溶血病; 检出率Study on detection results of immunohematology of patients with haemolytic disease of the newborn【Abstract】Objectives To investigate the detection rate of patients with ABO haemolytic disease of the newborn (ABO HDN) in different groups of patients with haemolytic disease of the newborn (HDN) .Methods Using the related test of immunohematology，ABO blood type were determined in patients with HDN, anti-A (B) of pathological IgG binding to erythrocyte and free in blood were determined qualitatively in patients with HDN.Results In this groups of patients with HDN,total detection rate of patients with ABO HDN was79.29%, according to gender, detection rate of patients with ABO HDN in male and female patients were 78.48% and 79.89% respectively, according to ABO blood type, detection rate of patients with ABO HDN in blood type A and blood type B patients were 79.42% and 80.73% respectively. Conclusion All of the detection rate of patients with ABO HDN in different groups of patients with HDN were relatively high, and were more than 78%.【Key words】immunohematology;ABO haemolytic disease of the newborn; detection rate新生儿出生后出现溶血性黄疸症状，这类疾病称为新生儿溶血病(haemolytic disease of the newborn,HDN),按引起HDN的原因分类，可将HDN分为若干类型,其中最常见的类型为母婴ABO血型不合,由IgG抗A(B)所引起的ABO HDN[1,2]。
新生儿溶血病HDN的免疫血液学实验
不是要求提升灵敏度,
新生儿溶血病HDN的免疫血液学实验
第31页
8. 关于 HDN 文章花团锦绣, 实际并不代表国内HDN 临床检测水平:
新生儿溶血病HDN的免疫血液学实验
第32页
新生儿血小板降低症
母婴血小板抗原(HPA)不合,发病机制和HDN相同,产 前/后静脉Ig疗效好
新生儿溶血病HDN的免疫血液学实验
第14页
⑤中和血清100ul, 加夫红细胞悬液50ul: 作聚凝胺 假如有凝集, 妻中和血清倍比稀释, 加夫红细胞悬液, 作聚凝胺或AHG试验,测IgG ABO 抗体效价
新生儿溶血病HDN的免疫血液学实验
第15页
(四) 注意: 1.夫未来检验, 或夫为AB型, 怎么办? 2. 可用试管法, 也可用 HDN 卡 试验
2.三项试验(直抗,游离,放散)均可用 卡 操做,
新生儿溶血病HDN的免疫血液学实验
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(三)三项试验: 试管法结果分析
1、HDN：直抗+
88.5%
游离+
84.2%
放散+
64.7%
三项全阳性 35.3%
2、直抗假阴性/假阳性（华通氏胶污染）
3、儿如为A型
(1)游离
OC（+）：
BC（+）：
AC(+)
因为错失良机, 现在: 不但 垂体已萎缩, 已丧失治疗席汉 氏综合征机会, 必须终生天天吃药; 而且, 子宫萎缩,终生不 育
新生儿溶血病HDN的免疫血液学实验
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二、HDN 定义
“新生儿溶血”与“新生儿溶血病” 新生儿溶血: 综合征，地贫，G6PD↓，遗传性球形
新生儿溶血病(HDN)免疫血液学试验标准检测流程PPT演示课件
分析标准不统一。
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（三）医疗纠纷的潜在隐患
⒈ 全国已有许多案例。
⒉ 为产前免疫性抗体效价高者开药，如果 分娩后,新生儿为O型，或Rh阴性，怎么 办？
⒊ 新生儿生理性黄疸与HDN不易区别时， 如果两个实验室三项试验结果不一致， 怎么办？
⒋ 各实验室HDN结果无可比性，存在潜在 的医疗纠纷隐患。
三、标本要求
⒈ 第一次检查：采集夫妇双方EDTA抗 凝血各3-5毫升。
⒉ 复查检查：采集夫妇双方EDTA抗凝 血3-5毫升。
⒊ 如果无配偶的血液标本，则无法检 测孕妇是否有针对其配偶特有的、低 频率抗原所产生的免疫性抗体。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
四、检查项目
⒈ 夫妇ABO、Rh(D)血型鉴定。
型者。
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
二、标本采集时间 ⒈ 有不良妊娠史、输血史及HDN史的
孕前妇女和Rh阴性孕前妇女的标本采 集时间为怀孕前； ⒉ 孕妇血型为0型、配偶血型为非O型 者，标本采集时间为怀孕后；
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HDN产前免疫血液学试验检测标准
（1）第一次检测，一般可在妊娠第1216周进行，以此作为抗体基础水平。如 果检测到ABO以外抗体，或高效价的IgG 抗A（B）抗体，建议每月复查一次。
新生儿溶血病（HDN）免疫 血液学试验标准检测流程
新疆医科大学第一附属医院输血科 宋小川
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2011年10月在北京由中国医师协会 输血科医师分会举办了全国首届输 血系统新生儿溶血病标准化操作研 讨会。我国开展HDN研究30年以来， 临床已召开过数次HDN专题研讨会， 而输血科实验室工作30年来却从来 没有召开过研讨会。
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注意: 1.对临床,三项试验(直抗,游离,放散)只报告结果(阴/阳性), 但要按上面格式记录存底 2.三项试验(直抗,游离,放散)均可用 卡 操做,
(三)三项试验: 试管法结果分析 1、HDN：直抗+ 88.5% 游离+ 84.2% 放散+ 64.7% 三项全阳性 35.3% 2、直抗假阴性/假阳性（华通氏胶污染） 3、儿如为A型 (1)游离 OC（+）： BC（+）： AC(+) AC（+）,BC（+）
(四)产后患儿诊断HDN 的注意事项 1.免疫血液学实验 ,只是为临床提供参考 2. 实验室技术员, 对 HDN ,无论产前、 或产后, 只能是 “看见什么,报告什么”,
3.HDN 是血型抗体引起, 患儿体内的抗体是母亲给他的, 4.如果临床只送来可疑患儿标本, 一定要求送来母血标本
第三部份 HDN 的其它相关题
2. Rh HDN 占14.6%，常为D，其次E 第二胎发病（注意输血，人流史）， 因Rh首次免疫常6个月到峰值， 第一胎 逃逸，一胎比一胎发病早，严重
第二部份 HDN 的免疫血液学检查
一.产前检查试验 (一)对象： (二)时间： (三)实验： 1、采血： 2. 妻, 夫干管分离血清 妻,夫抗凝血分离红细胞, 洗3次, 配为5%悬液
(2)放散： OC（+）； BC（+）：！ AC（+）: AC（+）,BC（+
注意：游离（+）：表明血浆中有Ab 放散（+）：表明Ab粘上RBC， 4.儿如为B型， 同样方式分析结果.
三项试验结果综合分析 直抗 + + + + 游离 + + + + 放散 + + + + -
有Ab，致敏儿RBC
直抗假阳性? 有Ab（可能Ag弱）未粘RBC 直抗假阴性，有Ab，粘RBC，血清中残余 直抗假阴性，Ab全粘RBC 有Ab,全粘RBC 有Ab,未粘RBC,
一.HDN研究 1.产前胎儿ABO，Rh血型检定 2.夫RhD纯合子/杂合子检定 3.妻免疫性抗体 IgG亚类测定
4.胎儿ABO分泌/非分泌型产前预测 5.胎母出血状态及与HDN 发病关系研究 6.少数民族HDN研究: 7.特别要指出的是: (1)ABO HDN 预测率太低, (2)对HDN 检测方法, 或试剂的研究, 不是要求提高灵敏度,
四. 发病过程 1.胎母出血 2.免疫产生的抗体是IgG,分子量小, 可以通过胎盘 3. O型人(妻) 容易发病 4. RhD致敏血量：
5. 注意 RhD(-)女性“婚前”因人流, 可能产生抗体 “未婚”女性人流前查RhD，
五.临床特点 1. ABO HDN 占85.3% ; 夫A（49.6%）＞夫B（35.7%） 与胎次无关: ①胎儿血型O？ ②儿RBC Ag成熟？ ③分泌型 血型物质中和 ？ ④IgG亚类？
3.HDN 产前检查不属急诊 4. IgG ABO 抗体太高者,慎报!:
(五)产前检查报告格式 姓名——，胎次——，妊娠月——，采血时间——， 送检单位—— 一、血型 ABO Rh 妻 夫 二、妻血清（含/ 无）免疫性ABO抗体， （抗 -A /B）效价—— 三、妻血清抗体筛选（+/- ）; 抗（ ）效价——
二、HDN 的定义
“新生儿溶血”与“新生儿溶血病” 新生儿溶血: 综合征，地贫，G6PD↓，遗传性球形 RBC增多症… 新生儿溶血病：特指母婴血型不合所致. 意义：优生优育、妇幼保健.
三.母婴血型不合
RBC血型： 32个系统，300多种Ag 可以引起HDN 者: 常见：ABO（母O，儿非O）， Rh（母D-，儿D+）， 少见：MN，Ss，kell，Duffy，kidd，Lewis……
新生儿溶血病(HDN)的 免疫血液学实验
第一部份 要做好HDN 的免疫血液学检查 必须具备的相关知识
一.HDN 的故事 (听故事,目的是引起对HDN的重视) 辽宁台,08,12,31,9:20.PM,王钢讲故事: 十九次怀孕的女人 怀宁县,何X, 90年,23岁, 在当地医院: 分娩女婴,次日发黄,紫, 诊断不清,死亡 产后第3天下身出血,刮宫,贫血,血型B, 误输A型血880ml,浑身痛,抽槒 状告县医院, 获得1万元赔偿 以后: 反复怀孕19次,每次死胎,流产, 出现 畏寒,脱发,浑身痛,头疼 当地医院看病,诊断不清;被折腾死去活来, 倾家荡产
8. 关于 HDN 文章花团锦绣, 实际并不代表国内HDN 临床检测水平:
新生儿血小板减少症
母婴血小板抗原(HPA)不合,发病机制和HDN相同,产 前/后静脉Ig疗效好 国内空白,国外研究红火 填补国内空白
母 O（OO） RhD阴性（dd） IgG 胎 抗-A， 母 抗-D 出血 儿
父
A（AA，AO） RhD阳性（DD，Dd)
A(AO)，O D阳性(Dd)，D阴性
了解随机婚配夫妻血型不合
妻
O1 /3 A1/3 B1/3 AB1/10
夫
O1/3 A1/3 B1/3 AB1/10
随机婚配夫妻ABO 血型不合: 2/9 随机婚配夫妻Rh不合: RhD(-) 3‰, 妻如RhD(-), 遇到夫也RhD(-), 概率相当于买彩票中500万大奖 夫妻Rh几乎100%不合
3.检查项目 (1)妻、夫 : ①ABO ② RhD (2)妻血清IgG ABO Ab及效价 2ME中和 IgM ABO Ab ：
⑤中和血清100ul, 加夫红细胞悬液50ul: 作聚凝胺 如果有凝集, 妻中和血清倍比稀释, 加夫红细胞悬液, 作聚凝胺或AHG试验,测IgG ABO 抗体效价
(四) 注意: 1.夫未来检查, 或夫为AB型, 怎么办? 2. 可用试管法, 也可用 HDN 卡 试验
最后走投无路,去上海瑞金医院, 上海瑞金医院名不虚传, 门诊医生几句问诊, 就考虑新生儿 溶血病 (HDN), 几项检查就确诊了 进一步检查发现: 畏寒、脱发、浑身痛、头疼, 是产后出血导致垂体功能低 下, 即“席汉氏综合征”所致 医生解释: 如果刚开始及时诊断HDN, 及时治疗,是可以怀孕生育的; 刚患席汉氏综合征时,怀孕分娩,席汉氏综合征是可以治 愈的 由于错失良机, 现在: 不但 垂体已萎缩, 已丧失治疗席汉 氏综合征的机会, 必须终生每天吃药; 而且, 子宫萎缩,终身 不育
(六)产前检查结果分析 1.试管法有IgG ABO Ab 43.1% 2. 试管法IgG ABO Ab 效价≤64占 66.8%，≥512占5.6% ,
≤32 HDN% 2.6 64 10.4 129/256 21.3 512-1024 38.9 ＞1024 42.9
3.Rh，抗-D＞32，便可能生成严重HDN
3.与产前HDN检查有关的几个临床问题 (1)妊期抗体突然猛升、猛降 (2) ABO,Rh不合同时存在, ABO不合有”保护”作用, (3)“外祖母” 效应, Rh HDN 可第一胎发病
二.产后检查 (一)采样: (二)实验 1.ABO，Rh（D）检定 2.直抗： 3.游离抗体
4.放散试验 热放散