鸡胚尿囊腔接种(单孔接种)SOP

鸡胚尿囊腔接种（单孔接种）操作规程

一、目的：使鸡胚尿囊腔接种规范化。

二、使用范围：适用于鸡胚尿囊腔接种工序。

三、责任者：鸡胚尿囊腔接种操作员。

四、内容：

1 准备工作

1.1 人员着装：操作人员按要求穿工作服、戴帽子、戴口罩、戴手套。

1.2 确认物品：签字笔、记录表、10日龄鸡胚、医用胶带、封孔胶、75%酒精棉、无菌棉

花、4%碘酒、毛笔、打孔器、直镊、1mL一次性无菌注射器（带针）、接种液、含冰容器、打火机、酒精灯、止血钳、危废缸、垃圾桶。

1.3 确认胚蛋全部照检画好气室标记线，气室朝上摆放，检查胚蛋外观完整无破损。

1.4 消毒：用75%酒精棉擦拭操作台面、手部，注意更换酒精棉，用过的酒精棉扔危废缸。

2 鸡胚消毒

2.1 碘酒消毒：用毛笔蘸取4%碘酒并沥干，对胚蛋气室标记处上0.2-0.3cm接种部位逐一

消毒，消毒面积为大拇指盖大小，消毒顺序从左到右、从上到下。

2.2 脱碘：用止血钳夹取75%酒精棉脱碘，脱碘顺序从左到右、从上到下；每15枚蛋胚更

换一个酒精棉，用过的酒精棉扔危废缸。

3 打孔：从不锈钢灭菌盒中取出打孔器，去掉锡箔纸，在蛋胚气室消毒处轻轻打一小孔，

注意打孔力度，防止打破，打孔顺序从左到右、从上到下。

4 接种

4.1 操作前摇匀种毒液，将种毒液放入含冰容器中；

4.2 用75%酒精棉消毒种毒瓶塞，用过的酒精棉扔危废缸；

4.3 取1mL一次性注射器，确认外包装完好后，取出注射器，注意拧紧针头与针筒连接处，

将注射器针帽取下，将接种液瓶倾斜60°，将针头插入接种液瓶塞中央部位，确保接种瓶内液体完全没过针头，抽取病毒液1.2mL，注意缓慢抽取以减少气泡产生；将注射器针头朝上直立，用手指轻弹气泡部位，待气泡上移到注射器顶端时，用75%酒精棉包住针头慢慢排尽气泡，确保病毒液保持在刻度线上，注意不要将种毒液溅到桌面或蛋胚上，用过的酒精棉扔危废缸。

4.4 沿打孔处垂直进针，注入种毒液，每胚0.1mL接种量，接种顺序从左到右、从上到下，

注意注毒时应缓慢推进，避免种毒接后溢出。（此操作否定项：每溢出一枚扣5分，超过3枚则此项操作为零分）

5 封孔：按从下到上、从右到左的顺序将封孔胶滴到打孔处。如发现产生气泡应重新封孔。

6 标记：在已标记接毒名称、批号的标签上填写接种日期、接种数量、接种人，贴在蛋盘明显处。

7 记录：按操作顺序填写记录。

8 清场：将含毒用具放入不锈钢托盘中，清洁、消毒台面，将危废缸内的垃圾放入危废垃圾桶。